EN 17547:2021

Animal feeding stuffs: Methods of sampling and analysis - Determination of vitamin A, E and D content - Method using solid phase extraction (SPE) clean-up and high-performance liquid chromatography (HPLC)

This document specifies a method for the determination of the content of the total vitamin A (retinol), vitamin E (α-tocopherol) and vitamin D3 (cholecalciferol) in animal feed using solid phase extraction (SPE) clean-up and high-performance liquid chromatography (HPLC).
NOTE   The procedure also enables determination of vitamin D2 but with the use of another internal standard. The method is fully validated only for vitamin D3.
The method has been successfully tested in collaborative trial for complete feed for broilers, pigs, and turkey, for premixture for broilers and piglets, for complementary feed for cows and mineral feed within the following ranges:
•   vitamin A: 4 365 IU/kg - 4 118 352 IU/kg;
•   vitamin E: 22 mg/kg - 13 800 mg/kg;
•   vitamin D3: 1 668 IU/kg - 1 638 150 IU/kg.
The limits of quantification were not determined within the validation study. Quantification limits of 1 100 IU for vitamin A/kg (using UV-detection), 4 mg for vitamin E/kg (using UV-detection), 2 mg for vitamin E/kg (using fluorescence detection) and 2 000 IU for vitamin D/kg (using UV-detection) should be normally achieved. Lower limits are possible provided they are validated by the user.

Futtermittel - Probenahme- und Untersuchungsverfahren - Bestimmung des Gehalts an Vitamin A, E und D - Verfahren mittels Reinigung durch Festphasenextraktion und Hochleistungs-Flüssigchromatographie

Dieses Dokument legt ein Verfahren zur Bestimmung des Gesamtgehalts an Vitamin A (Retinol), Vitamin E (α Tocopherol) und Vitamin D3 (Cholecalciferol) in Futtermitteln mittels Reinigung durch Festphasenextraktion (SPE; en: solid phase extraction) und Hochleistungs-Flüssigchromatographie (HPLC; en: high performance liquid chromatography) fest.
ANMERKUNG Das Verfahren ermöglicht auch die Bestimmung von Vitamin D2, jedoch unter Verwendung eines anderen internen Standards. Das Verfahren ist nur für Vitamin D3 vollständig validiert.
Das Verfahren wurde in einem Ringversuch für Alleinfuttermittel für Hähnchen, Schweine und Puten, für Vormischungen für Hähnchen und für Ferkel, für Ergänzungsfuttermittel für Kühe sowie für mineralische Futtermittel innerhalb folgender Bereiche erfolgreich geprüft:
- Vitamin A: 4 365 IE/kg – 4 118 352 IE/kg;
- Vitamin E: 22 mg/kg – 13 800 mg/kg
- Vitamin D3: 1 668 IE/kg – 1 638 150 IE/kg.
Die Bestimmungsgrenzen wurden nicht im Rahmen der Validierungsstudie bestimmt. Üblicherweise sollten Bestimmungsgrenzen von 1 100 IE für Vitamin A/kg (mittels UV Detektion), 4 mg für Vitamin E/kg (mittels UV Detektion), 2 mg für Vitamin E/kg (mittels Fluoreszenzdetektion) und 2 000 IE für Vitamin D/kg (mittels UV Detektion) erreicht werden. Niedrigere Grenzen sind möglich, sofern sie vom Anwender validiert werden.

Aliments des animaux - Méthodes d'échantillonnage et d'analyse - Détermination de la teneur en vitamines A, E et D - Méthode utilisant la purification par extraction en phase solide (SPE) et la chromatographie liquide à haute performance (CLHP)

Le présent document spécifie une méthode de détermination de la teneur totale en vitamine A (rétinol), vitamine E (α-tocophérol) et vitamine D3 (cholécalciférol) dans les aliments pour animaux à l’aide d’une purification par extraction en phase solide (SPE) et d’une chromatographie liquide à haute performance (CLHP).
NOTE   Le mode opératoire permet également de déterminer la teneur en vitamine D2 mais en utilisant un autre étalon interne. La méthode est intégralement validée pour la vitamine D3 uniquement.
La méthode a été soumise à essai avec succès lors d’un essai interlaboratoires effectué sur un aliment complet pour poulets, porcs et dindes, sur un prémélange pour poulets et porcelets, sur un aliment complémentaire pour vaches ainsi que sur un aliment minéral dans les gammes suivantes :
•   vitamine A : 4 365 UI/kg - 4 118 352 UI/kg ;
•   vitamine E : 22 mg/kg - 13 800 mg/kg ;
•   vitamine D3 : 1 668 UI/kg - 1 638 150 UI/kg.
Les limites de quantification n’ont pas été déterminées lors de l’étude de validation. Il convient normalement d’atteindre des limites de quantification de 1 100 UI/kg pour la vitamine A (par détection UV), 4 mg/kg pour la vitamine E (par détection UV), 2 mg/kg pour la vitamine E (par détection fluorimétrique) et 2 000 UI/kg pour la vitamine D (par détection UV). Des limites inférieures sont envisageables, à condition qu’elles soient validées par l’utilisateur.

Krma: metode vzorčenja in analize - Določevanje vitaminov A, E in D - Metoda z ekstrakcijo na trdno fazo (SPE) in tekočinsko kromatografijo visoke ločljivosti (HPLC)

Ta evropski standard določa metodo za določevanje vsebnosti vitamina A (retinol), vitamina E (alfa tokoferol) in vitamina D (D2 ergokalciferol ali D3 holekalciferol) v krmi z ekstrakcijo na trdno fazo (SPE) in tekočinsko kromatografijo visoke ločljivosti (HPLC).
Mejne vrednosti kvantifikacije so: XXXX IU vitamina A/kg (z detekcijo UV), XX IU vitamina A/kg (s fluorescenčno detekcijo), XX mg vitamina E/kg (z detekcijo UV), XX mg vitamina E/kg (s
fluorescenčno detekcijo), XX IU vitamina D/kg (z detekcijo UV) in XX IU vitamina D/kg (s fluorescenčno detekcijo).

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 09-Nov-2021
• Withdrawal Date: 30-May-2022
• ICS: 65.120 - Animal feeding stuffs
• Technical Committee: CEN/TC 327 - Animal feeding stuffs - Methods of sampling and analysis
• Drafting Committee: CEN/TC 327/WG 3 - Feed additives and drugs
• Current Stage: 6060 - Definitive text made available (DAV) - Publishing
• Start Date: 10-Nov-2021
• Due Date: 07-Jan-2021
• Completion Date: 10-Nov-2021
• Directive: 882/2004 - Regulation (EC) No 882/2004 of the European Parliament and of the Council of 29 April 2004 onofficial controls performed to ensure the verification of compliance with feed and food law, animal health and animal welfare rules
• Mandate: M/523 - Mandate for standardisation addressed to CEN for methods of analysis in the field of animal nutrition - Part III
• Ref Project: SIST EN 17547:2022 - Animal feeding stuffs: Methods of sampling and analysis - Determination of vitamin A, E and D content - Method using solid phase extraction (SPE) clean-up and high-performance liquid chromatography (HPLC)

Standards Content (Sample)

SLOVENSKI STANDARD
SIST EN 17547:2022
01-januar-2022
Krma: metode vzorčenja in analize - Določevanje vitaminov A, E in D - Metoda z
ekstrakcijo na trdno fazo (SPE) in tekočinsko kromatografijo visoke ločljivosti
(HPLC)
Animal feeding stuffs: Methods of sampling and analysis - Determination of vitamin A, E
and D content - Method using solid phase extraction (SPE) clean-up and high-
performance liquid chromatography (HPLC)
Futtermittel - Probenahme- und Untersuchungsverfahren - Bestimmung des Gehalts an
Vitamin A, E und D - Verfahren mittels Reinigung durch Festphasenextraktion und
Hochleistungs-Flüssigchromatographie
Aliments des animaux - Méthodes d'échantillonnage et d'analyse - Détermination de la
teneur en vitamines A, E et D - Méthode utilisant la purification par extraction en phase
solide (SPE) et la chromatographie liquide à haute performance (CLHP)
Ta slovenski standard je istoveten z: EN 17547:2021
ICS:
65.120 Krmila Animal feeding stuffs
SIST EN 17547:2022 en,fr,de
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

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SIST EN 17547:2022

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SIST EN 17547:2022


EN 17547
EUROPEAN STANDARD

NORME EUROPÉENNE

November 2021
EUROPÄISCHE NORM
ICS 65.120
English Version

Animal feeding stuffs: Methods of sampling and analysis -
Determination of vitamin A, E and D content - Method
using solid phase extraction (SPE) clean-up and high-
performance liquid chromatography (HPLC)
Aliments des animaux - Méthodes d'échantillonnage et Futtermittel - Probenahme- und
d'analyse - Détermination de la teneur en vitamines A, Untersuchungsverfahren - Bestimmung des Gehalts an
E et D - Méthode utilisant la purification par extraction Vitamin A, E und D - Verfahren mittels Reinigung durch
en phase solide (SPE) et la chromatographie liquide à Festphasenextraktion und Hochleistungs-
haute performance (CLHP) Flüssigchromatographie
This European Standard was approved by CEN on 27 September 2021.

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SIST EN 17547:2022
EN 17547:2021 (E)
Contents Page
European foreword . 3
Introduction . 4
1 Scope . 5
2 Normative references . 5
3 Terms and definitions . 5
4 Principle . 6
5 Reagents and materials . 8
6 Apparatus . 9
7 Sampling .
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