Wool -- Colorimetric determination of cystine plus cysteine in hydrolysates

Applicable to all-wool textiles in any form, namely loose fibre, roving, yarn or cloth. Dyes when present may interfere with the colorimetric measurement. The method is not applicable to oxidized or reduced wool. It is primarily applicable to determination of cystine and cysteine in washed wool, tops, yarns or cloths that have not been reduced or oxidized.

Laine -- Détermination colorimétrique de la cystine et de la cystéine dans les hydrolysats

General Information

Status
Published
Publication Date
30-Apr-1975
Current Stage
6060 - International Standard published
Completion Date
01-May-1975
Ref Project

Buy Standard

Standard
ISO 2913:1975 - Wool -- Colorimetric determination of cystine plus cysteine in hydrolysates
English language
4 pages
sale 15% off
Preview
sale 15% off
Preview
Standard
ISO 2913:1975 - Laine -- Détermination colorimétrique de la cystine et de la cystéine dans les hydrolysats
French language
4 pages
sale 15% off
Preview
sale 15% off
Preview
Standard
ISO 2913:1975 - Laine -- Détermination colorimétrique de la cystine et de la cystéine dans les hydrolysats
French language
4 pages
sale 15% off
Preview
sale 15% off
Preview

Standards Content (sample)

INTERNATIONAL STANDARD.

INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION l MEXHCAYHAPOAHAII OPTAHM3AUMII I-Io CTAHAAPTM3AWM *ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION

Wo01 - Colorimetric determination of cystine plus cysteine
in hydrolysates

Labe - Determination colorimetrique de Ia c ys tine et de ia c ystbine dans Jes h ydrolysa ts

First edition - 1975-05-15
Ref. No. ISO 29134975 (E)
UDC 677.31 : 677.01

: textiles, wool, Chemical analysis, determination of content, amino acids, cystine, colorimetric analysis, cysteine.

Descriptors
Price based on 4 pages
---------------------- Page: 1 ----------------------

ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation

of national Standards institutes (ISO Member Bodies). The work of developing
International Standards is carried out through ISO Technical Committees. Every
Member Body interested in a subject for which a Technical Committee has been set

up has the right to be represented on that Committee. International organizations,

governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.

Draft International Standards adopted by the Technical Committees are circulated
to the Member Bodies for approval before their acceptance as International
Standards by the ISO Council.
International Standard ISO 2913 was drawn up by Technical Committee
lSO/TC 38, Textiles, and circulated to the Member Bodies in November 1972.
lt has been approved by the Member Bodies of the following countries :
Austral ia Germany Portugal
Belgium Hungary Romania
Brazil India South Africa, Rep. of
Bulgaria Iran Sweden
Canada Israel Switzerland
Czechoslovakia Japan Thailand
Denmark Netherlands Turkey
Egypt, Arab Rep. of Norway United Kingdom
Finland Poland U.S.A.
The Member Body of the following country expressed disapproval of the document
on technical grounds :
France
0 International Organkation for Standardkation, 1975 l
Printed in Switzerland
---------------------- Page: 2 ----------------------
INTERNATIONAL STANDARD
ISO 29134975 (E)
Wool - Colorimetric determination of cystine plus cysteine
in hydrolysates
2 PRINCIPLE
0 INTRODUCTION

Cystine is the most important amino acid in wool. Its Hydrolysis of the wool in aqueous sulphuric acid. Reaction

disulphide group is very reactive and is attacked by a wide of the buffered hydrolysate with sodium disulphite and

range of reagents used in wool processing. While acid dodecatungstophosphoric acid, resulting in the

treatments affect the cystine content only slightly, alkalis, development of a blue coloration, the intensity of which is

oxidizing and reducing agents, steam and exposure to light proportional to the concentration of cystine plus cysteine

and heat Cause it to decrease. Since fibre darnage is often in the hydrolysate. Colorimetric determination of the

associated with a decrease in cystine content, a method for
Optical density of the blue Solution and calculation of the
its determination is useful for the control and diagnosis of
sum of cystine plus cysteine.
degradation caused by certain agents.
NOTE - The following qualitative test, applicable to undyed wool
or a hydrolysate (with dyed wool the hydrolysate must be used),
The present method is based on the Folin-Shinohara
tan be used to determine if the wool to be tested contains a
method for the estimation of cystine in acid hydrolysates
significantly higher than normal amount of cysteine.
of Proteins but it should be noted that the cystine content
a) Undyed wool : lmmerse the Sample in 1 % sodium
of intact wool is not necessarily the same as that of its
pentacyanonitrosylferrate Solution until thoroughly wetted,
hydrolysate. The method is simple to carry out, requires
remove, dry between filter Papers and expose to ammonia

little special apparatus and is suitable for use in industrial fumes. A red-violet coloration indicates cysteine residues.

laboratories.
b) Hydrolysate : Transfer 2 to 3 ml of hydrolysate to a
test-tube, add 2 or 3 drops of sodium pentacyanonitrosylferrate

The method consists of reductive fission of the disulphide Solution and make alkaline with concentrated ammonia. An

immediate colour Change to red-violet indicates cysteine
bond of cystine with sodium disulphite, and colorimetric
residues.
estimation of the cysteine formed, using dodecatungsto-
phosphoric acid. Virgin wool contains a small amount
of cysteine and this is included in the cystine plus cysteine
3 REAGENTS
content.
During the analysis, use only reagents of recognized
analytical reagent grade and only distilled water or water of
equivalent purity.
3.1 Sulphuric acid, approximately 6 N Solution.
1 SCOPE AND FIELD OF APPLICATION
Add 150 ml of concentrated sulphuric acid, p 1,84 g/ml, 95
This International Standard specifies a method for the
to 98 % (mlm) Solution, to 850 ml of water.
colorimetric determination of cystine plus cysteine in wool
hydrolysates.
3.2 Acetate buffer, pH 5,6.
The method is applicable to all-wool textiles in any form,
Dissolve 300 g of sodium acetate (dihydrate), 24 ml of
namely loose fibre, sliver, roving, yarn or cloth. Dyes when
glacial acetic acid and 1 mg of copper(lI) sulphate
present may interfere with the colorimetric measurement.
(pentahydrate) in water and make up to 1 1.
The method is not applicable to oxidized or reduced wo01

because the products of these reactions may undergo side 3.3 Tungstophosphoric acid reagent.

reactions during hydrolysis, thus leading to erroneous
Dissolve 200 g of sodium tungstate (dihydrate-molybdenum
resu I ts.
free) in 400 ml of water, then add 100 ml of 85 %
phosphoric acid and boil gently under reflux for 1 h.
The method is therefore primarily applicable to the
Remove the condenser, add bromine or bromine water
determination of cystine plus cysteine in washed wool,
drop by drop until a bright yellow to brown colour
tops, yarn or cloth that have not been reduced or oxidized.
is obtained. Boil off the excess bromine (about 15 min).
Cool, filter into a 1 I measuring flask and make up to
Metal-complexing agents such as EDTA and cyanide should
volume with
water. Store the resultant clear, pale
be absent from the wool, since the reaction is topper
yellow-brown Solution in a brown glass bottle.
catalysed.
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 29134975 (E)

3.4 Sodium disulphite Solution. Remove all vegetable matter and other foreign substances

from samples of loose wool, roving, etc. Dissect samples of
Dissolve 10 g of sodium disuiphite in water, make up to
yarn or cloth before extraction into short lengths
100 ml and store in the dark. DO not use the reagent if
(approximately 1 cm) of yarn. Felted material that cannot
more than 20 days old.
be dissected into yarn must first be tut up into small pieces.
Extract the Sample with dichloromethane for 1 h in a
3.5 Cystine Standard Solution.
Soxhlet a
...

NORME INTERNATIONALE

INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION 4vlEX~YHAPOAHAR OPI-AHM3AI-0454 l-I0 CTAHAAPTM3ALW4 *ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION

Laine - Détermination calorimétrique de la cystine et
de la cystéine dans les hydrolysats

Wool - Colorime trie de termina tion of cystine plus c ys teine in h ydrolysa tes

Première édition - 1975-05-15
Réf. no : ISO 2913-1975 (F)
CDU 677.31 : 677.01

: textile, laine, analyse chimique, dosage, acide aminé, cystine, méthode calorimétrique, cystéine.

Descripteurs
Prix basé sur 4 pages
---------------------- Page: 1 ----------------------
AVANT-PROPOS
L’EGO (Organisation Internationale de Normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (Comités Membres 60). L’élaboration de
Normes Internationales est confiée aux Comités Techniques ISO. Chaque Comité
Membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du Comité Technique
correspondant. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO, participent également aux travaux.
Les Projets de Normes Internationales adoptés par les Comités Techniques sont
soumis aux Comités Membres pour approbation, avant leur acceptation comme
Normes Internationales par le Conseil de I’ISO.
La Norme Internationale ISO 2913 a été établie par le Comité Technique
lSO/TC 38, Textiles, et soumise aux Comités Membres en novembre 1972.
Elle a été approuvée par les Comités Membres des pays suivants :
Afrique du Sud, Rép. d’
Finlande Portugal
Roumanie
Allemagne Hongrie
Australie Inde Royaume-Uni
Belgique Iran Suède
Suisse
Brésil Israël
Bulgarie Japon Tchécoslovaquie
Canada Norvège Thaïlande
Danemark Pays-Bas Turquie
Égypte, Rép. arabe d’ Pologne U.S.A.
Le Comité Membre du pays suivant a désapprouvé le document pour des raisons
techniques
France
0 Organisation Internationale de Normalisation, 1975 l
Imprimé en Suisse
---------------------- Page: 2 ----------------------
KO 2913-1975 (F)
NORME INTERNATIONALE
Laine - Détermination calorimétrique de la cystine et
de la cystéine dans les hydrolysats
Les composés qui forment des complexes métalliques, tels
0 INTRODUCTION
que I’EDTA et I’anion cyanure, ne doivent pas être présents
La cystine est l’acide aminé le plus important de la laine.
dans la laine, la réaction étant catalysée par le cuivre.
Étant très réactif, son groupe disulfure est attaqué par de
nombreux agents utilisés dans le processus industriel lainier.
Tandis que les traitements acides n’affectent que très
légèrement la cystine, les agents alcalins, oxydants et
2 PRINCIPE
réducteurs, la vapeur d’eau, la lumière et la chaleur, la
détruisent plus ou moins. L’altération de la fibre étant
Hydrolyse de la laine par de l’acide sulfurique dilué.
souvent accompagnée d’une diminution de la teneur en
Réaction de I’hydrolysat tamponné avec l’acide
cystine, une méthode analytique pour sa détermination
dodécatungstophosphorique, en présence de disulfite de
s’est avérée nécessaire afin de contrôler et de diagnostiquer
sodium avec développement d’une coloration bleue dont
la dégradation provoquée par certains agents.
l’intensité est proportionnelle à la concentration en cystine
et en cystéine de I’hydrolysat. Mesurage calorimétrique de
La présente méthode est fondée sur celle de
la densité optique de la solution bleue et calcul de la somme
Folin-Shinohara pour l’estimation de la cystine dans les
wystine plus cystéinek
hydrolysats acides de protéines, mais il est à noter que la
cystine de la laine initiale n’est pas
teneur en
NITE - L’essai qualitatif suivant, applicable à la laine non teinte ou

nécessairement la même que celle de son hydrolysat acide. à un hydrolysat de laine (dans le cas d’une laine teinte, I’hydrolysat

seul doit être utilisé), peut être employé pour se rendre compte si la
La méthode est d’utilisation simple, demande peu
laine à essayer a une teneur en cystéine significativement supérieure
d’appareillage spécial et convient bien pour un emploi dans
à la normale.
des laboratoires industriels.
a) Laine (non teinte) : Immerger l’échantillon dans une solution
à 1 % de pentacyanonitrosylferrate de sodium jusqu’à mouillage
La méthode consiste à réduire la liaison disulfure de la
complet, le retirer, le sécher entre des feuilles de papier filtre, et
cystine par du disulfite de sodium et à estimer par
l’exposer à des vapeurs d’ammoniac. Une coloration rouge-violet
calorimétrie la cystéine formée au moyen d’acide
indique la présence de cystéine.
La laine vierge contient une
dodécatungstophosphorique.
b) Hydrolysat : Ajouter, à 2 OU 3 ml d’hydrolysat placé
faible quantité de cystéine, laquelle est incluse dans la
dans un tube à essais, 2 ou 3 gouttes d’une solution de
teneur «cystine plus cystéinek
pentacyanonitrosylferrate de sodium, et rendre la solution
alcaline l’ammoniaque concentrée. L’apparition
par de
immédiate d’une coloration rouge-violet indique la présence de
cystéi ne.
1 OBJET ET DOl’.!lAINE D’APPLICATION
La présente Norme Internationale spécifie une méthode de
3 RÉACTIFS
détermination calorimétrique de la cystine et de la cystéine
dans les hydrolysats de laine.
Au cours de l’analyse, n’utiliser que des réactifs de qualité
analytique reconnue, et que de l’eau distillée ou de l’eau de
La méthode est applicable à la laine, sous toutes ses formes,
pureté équivalente.
c’est-à-dire laine en bourre, ruban, mèche, fil ou étoffe.
Lorsqu’il s’agit de matière teinte, les colorants peuvent
interférer dans le mesurage calorimétrique. La méthode
3.1 Acide sulfurique, solution 6 N environ.
n’est pas applicable à la laine oxydée ou à la laine réduite,
car les nouvelles fonctions engendrées dans ces laines
Ajouter 150 ml d’acide sulfurique concentré, p 1,84 g/ml,
peuvent produire des réactions secondaires lors de
solution à 95 à 98 % (mlm), à 850 ml d’eau.
l’hydrolyse, et conduire ainsi à des résultats erronés.
C’est la raison pour laquelle la présente méthode est
3.2 Tampon acétate, solution à pH 5,6.
principalement applicable à la détermination de la somme
Dissoudre 300 g d’acétate de sodium (dihydraté), 24 ml
«cystine plus cystéine» dans les hydrolysats de laine lavée,
cristallisable et 1 mg de sulfate de
d’acide acétique
de ruban peigné, de mèche peignée, de fil ou d’étoffe qui
cuivre(ll) (pentahydraté) dans de l’eau, et diluer à 1 1.
n’ont pas subi de traitement d’oxydation ou de réduction.
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 2913-1975 (F)

3.3 Réactif acide tungstophosphorique 4.9 Spectrophotomètre, ou photomètre à filtres muni d’un

filtre d’absorption maximale à 720 nm ou plus. (N’importe
Dissoudre 200 g de tungstate de sodium (dihydraté et
quel appareil convient, à condition que la densité optique,
exempt de molybdène) dans 400 ml d’eau, puis ajouter
dans l‘intervalle 0 à 0,7, puisse être lue à O,Ol, et estimée à
100 ml d’acide phosphorique à 85 % et faire bouillir
la décimale la plus proche.)
modérément, sous réfrigérant à reflux, durant 1 h. Enlever
le réfrigérant, ajouter du brome ou de l’eau de brome,
goutte à goutte, jusqu’à ce qu’une coloration jaune à brun
5 ÉCHANTILLONNAGE ET PRÉPARATION DES
soit obtenue. Éliminer l’excès de brome par ébullition
PRISES D’ESSAI
(15 min environ). Refroidir, filtrer dans une fiole jaugée de
Prélever un échantillon représentatif de l’ensemble, et
1 1, et compléter au volume par de l’eau. Conserver le filtrat
suffisant pour fournir les prises d’essai suivantes :
jaune-brun dans un flacon en verre brun.
- deux prises d’essai, chacune de masse 1 g environ,
pour la détermination de la masse déshydratée;
3.4 Disulfite de sodium, solution.
- deux prises d’e
...

NORME INTERNATIONALE

INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION 4vlEX~YHAPOAHAR OPI-AHM3AI-0454 l-I0 CTAHAAPTM3ALW4 *ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION

Laine - Détermination calorimétrique de la cystine et
de la cystéine dans les hydrolysats

Wool - Colorime trie de termina tion of cystine plus c ys teine in h ydrolysa tes

Première édition - 1975-05-15
Réf. no : ISO 2913-1975 (F)
CDU 677.31 : 677.01

: textile, laine, analyse chimique, dosage, acide aminé, cystine, méthode calorimétrique, cystéine

Descripteurs
Prix basé sur 4 pages
---------------------- Page: 1 ----------------------
AVANT-PROPOS
L’ISO (Organisation Internationale de Normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (Comités Membres 60). L’élaboration de
Normes Internationales est confiée aux Comités Techniques ISO. Chaque Comité
Membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du Comité Technique
correspondant. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO, participent également aux travaux.
Les Projets de Normes Internationales adoptés par les Comités Techniques sont
soumis aux Comités Membres pour approbation, avant leur acceptation comme
Normes Internationales par le Conseil de I’ISO.
La Norme Internationale ISO 2913 a été établie par le Comité Technique
ISO/TC 38, Textjles, et soumise aux Comités Membres en novembre 1972.
Elle a été approuvée par les Comités Membres des pays suivants :
Afrique du Sud, Rép. d’ Finlande Portugal
Allemagne Hongrie Roumanie
Australie Inde Royaume-Uni
Belgique Iran Suède
Brésil Israël Suisse
Bulgarie Japon Tchécoslovaquie
Canada Norvège Thaïlande
Danemark Pays-Bas Turquie
Égypte, Rép. arabe d’ Pologne U.S.A.
Le Comité Membre du pays suivant a désapprouvé le document pour des raisons
techniques :
France
0 Organisation Internationale de Normalisation, 1975 l
Imprimé en Suisse
---------------------- Page: 2 ----------------------
KO 2913-1975 (F)
NORME INTERNATIONALE
Laine - Détermination calorimétrique de la cystine et
de la cystéine dans les hydrolysats
Les composés qui forment des complexes métalliques, tels
0 INTRODUCTION
que I’EDTA et I’anion cyanure, ne doivent pas être présents
La cystine est l’acide aminé le plus important de la laine.
dans la laine, la réaction étant catalysée par le cuivre.
Étant très réactif, son groupe disulfure est attaqué par de
nombreux agents utilisés dans le processus industriel lainier.
Tandis que les traitements acides n’affectent que très
légèrement la cystine, les agents alcalins, oxydants et
2 PRINCIPE
réducteurs, la vapeur d’eau, la lumière et la chaleur, la
détruisent plus ou moins. L’altération de la fibre étant
Hydrolyse de la laine par de l’acide sulfurique dilué.
souvent accompagnée d’une diminution de la teneur en
Réaction de I’hydrolysat tamponné avec l’acide
cystine, une méthode analytique pour sa détermination
dodécatungstophosphorique, en présence de disulfite de
s’est avérée nécessaire afin de contrôler et de diagnostiquer
sodium avec développement d’une coloration bleue dont
la dégradation provoquée par certains agents.
l’intensité est proportionnelle à la concentration en cystine
et en cystéine de I’hydrolysat. Mesurage calorimétrique de
La présente méthode est fondée sur celle de
la densité optique de la solution bleue et calcul de la somme
Folin-Shinohara pour l’estimation de la cystine dans les
wystine plus cystéinek
hydrolysats acides de protéines, mais il est à noter que la
cystine de la laine initiale n’est pas
teneur en
NITE - L’essai qualitatif suivant, applicable à la laine non teinte ou

nécessairement la même que celle de son hydrolysat acide. à un hydrolysat de laine (dans le cas d’une laine teinte, I’hydrolysat

seul doit être utilisé), peut être employé pour se rendre compte si la
La méthode est d’utilisation simple, demande peu
laine à essayer a une teneur en cystéine significativement supérieure
d’appareillage spécial et convient bien pour un emploi dans
à la normale.
des laboratoires industriels.
a) Laine (non teinte) : Immerger l’échantillon dans une solution
à 1 % de pentacyanonitrosylferrate de sodium jusqu’à mouillage
La méthode consiste à réduire la liaison disulfure de la
complet, le retirer, le sécher entre des feuilles de papier filtre, et
cystine par du disulfite de sodium et à estimer par
l’exposer à des vapeurs d’ammoniac. Une coloration rouge-violet
calorimétrie la cystéine formée au moyen d’acide
indique la présence de cystéine.
La laine vierge contient une
dodécatungstophosphorique.
b) Hydrolysat : Ajouter, à 2 OU 3 ml d’hydrolysat placé
faible quantité de cystéine, laquelle est incluse dans la
dans un tube à essais, 2 ou 3 gouttes d’une solution de
teneur «cystine plus cystéinek
pentacyanonitrosylferrate de sodium, et rendre la solution
alcaline l’ammoniaque concentrée. L’apparition
par de
immédiate d’une coloration rouge-violet indique la présence de
cystéi ne.
1 OBJET ET DOl’.!lAINE D’APPLICATION
La présente Norme Internationale spécifie une méthode de
3 RÉACTIFS
détermination calorimétrique de la cystine et de la cystéine
dans les hydrolysats de laine.
Au cours de l’analyse, n’utiliser que des réactifs de qualité
analytique reconnue, et que de l’eau distillée ou de l’eau de
La méthode est applicable à la laine, sous toutes ses formes,
pureté équivalente.
c’est-à-dire laine en bourre, ruban, mèche, fil ou étoffe.
Lorsqu’il s’agit de matière teinte, les colorants peuvent
interférer dans le mesurage calorimétrique. La méthode
3.1 Acide sulfurique, solution 6 N environ.
n’est pas applicable à la laine oxydée ou à la laine réduite,
car les nouvelles fonctions engendrées dans ces laines
Ajouter 150 ml d’acide sulfurique concentré, p 1,84 g/ml,
peuvent produire des réactions secondaires lors de
solution à 95 à 98 % (mlm), à 850 ml d’eau.
l’hydrolyse, et conduire ainsi à des résultats erronés.
C’est la raison pour laquelle la présente méthode est
3.2 Tampon acétate, solution à pH 5,6.
principalement applicable à la détermination de la somme
Dissoudre 300 g d’acétate de sodium (dihydraté), 24 ml
«cystine plus cystéine» dans les hydrolysats de laine lavée,
d’acide acétique cristallisable et 1 mg de sulfate de
de ruban peigné, de mèche peignée, de fil ou d’étoffe qui
cuivre(ll) (pentahydraté) dans de l’eau, et diluer à 1 1.
n’ont pas subi de traitement d’oxydation ou de réduction.
---------------------- Page: 3 ----------------------
KO 2913-1975 (F)
3.3 Réactif acide tungstophosphorique
4.9 Spectrophotomètre, ou photomètre à filtres muni d’un
filtre d’absorption maximale à 720 nm ou plus. (N’importe
Dissoudre 200 g de tungstate de sodium (dihydraté et
quel appareil convient, à condition que la densité optique,
exempt de molybdène) dans 400 ml d’eau, puis ajouter
dans l’intervalle 0 à 0,7, puisse être lue à O,Ol, et estimée à
100 ml d’acide phosphorique à 85 % et faire bouillir
la décimale la plus proche.)
modérément, sous réfrigérant à reflux, durant 1 h. Enlever
le réfrigérant, ajouter du brome ou de l’eau de brome,
goutte à goutte, jusqu’à ce qu’une coloration jaune à brun
5 ÉCHANTILLONNAGE ET PRÉPARATION DES
soit obtenue. Éliminer l’excès de brome par ébullition
PRISES D’ESSAI
(15 min environ). Refroidir, filtrer dans une fiole jaugée de
Prélever un échantillon représentatif de l’ensemble, et
1 1, et compléter au volume par de l’eau. Conserver le filtrat
suffisant pour fournir les prises d’essai suivantes :
jaune-brun dans un flacon en verre brun.
- deux prises d’essai, chacune de masse 1 g environ,
pour la détermination de la masse déshydratée;
3.4 Disulfite de sodium, solution
- deux prises d’essai, chac
...

Questions, Comments and Discussion

Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.