ISO 4832:1991
(Main)Microbiology — General guidance for the enumeration of coliforms — Colony count technique
Microbiology — General guidance for the enumeration of coliforms — Colony count technique
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 4832:1978). It is intended to provide general guidance for the examination of products not dealt with by existing International Standards. These guidelines may not be appropriate for some products in every detail, and for some other products it may be necessary to use different methods. Gives references, and the definition of the term coliforms. Specifies principle, culture media and dilution fluid, apparatus and glassware, sampling, preparation of the test sample, procedure, expression of results and test report.
Microbiologie — Directives générales pour le dénombrement des coliformes — Méthode par comptage des colonies
La présente Norme internationale donne des directives générales pour le dénombrement des coliformes dans les produits destinés à la consommation humaine ou à l'alimentation animale, par comptage des colonies obtenues en milieu solide, après incubation à 30 °C, 35 °C ou 37 °C, cette température faisant l'objet d'un accord entre les parties concernées. NOTE 1 La température d'incubation de 30 °C est retenue lorsque la finalité du dénombrement est technologique; la température de 35 °C ou 37 °C est retenue lorsque la finalité du dénombrement relève plutôt du domaine de la santé publique.
General Information
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Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL
STANDARD i
Second edi tion
1991-03-01
Microbiology - General guidance for the
enumeration of coliforms - Colony count
technique
Microbiofogie - Direc tives g&wSrales pour Ie denombrem ent des
coliformes - Methode par camptage des colonies
Reference number
ISO 4832: 1991 (E)
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ISO 4832:1991 (E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide
federation of national Standards bodies (ISO member bodies). The work
of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Esch member body interested in a subject for
which a technical committee has been established has the right to be
represented on that committee. International organizations, govern-
mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take patt in the
work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical
Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
Draft International Standards adopted by the technical committees are
circulated to the member bodies for voting. Publication as an Inter-
national Standard requires approval by at least 75 % of the member
bodies casting a vote.
International Standard ISO 4832 was prepared by Technical Committee
ISO/TC 34, Agricultural food products.
This second edition cancels and replaces the fit-st edition (ISO
4832:1978), of which it constitutes a technical revision.
Annex A forms an integral part of this International Standard.
0 ISO 1991
All rights reserved. No part of this publication may be reproduced or utllized in any form
or by any means, electronie or mechanical, including photocopying and microfilm, without
permisslon in writing from the publisher.
International Organization for Standardization
Case Postale 56 l CH-1211 Geneve 20 0 Switzerland
Prlnted in Switzerland
ii
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ISO 4832:1991(E)
Introduction
0.1 This International Standard is intended to provide general guid-
ante for the examination of products not dealt with by existing Inter-
national Standards and for reference for bodies preparing
microbiological methods of test for application to foods or to animal
feeding stuffs. Because of the large variety of products within this field
of application, these guidellnes may not be appropriate for some prod-
ucts in every detail, and for some other products it may be necessary
to use different methods. Nevertheless, it is hoped that in all cases every
attempt will be made to apply the guidelines provided as far as possible
and that deviations from them will only be made if absolutely necessaty
for technical reasons.
When this International Standard is next reviewed, account will be taken
of all information then avallable regarding the extent to which the
guidelines have been followed and the reasons for deviation from them
in the case of particular products.
The harmonization of test methods cannot be immediate, and for certain
groups of products International Standards and/or national Standards
may already exist that do not comply with these guidelines. In cases
where International Standards already exist for the product to be tested,
they should be followed, but it is hoped that when such Standards are
reviewed they will be changed to comply with this International Standard
so that eventually the only remaining departures from these guidelines
will be those necessary for weil-established technical reasons.
0.2 The technique described in this International Standard is more
precise than that described in ISO 4831:1990, Microbiology - General
guidance for the enumeration of coliforms - Most probable number
technique, but does not allow a microbiological examination to be car-
ried out on such a large test portion. lt is therefore the preferred method
when large numbers of collforms are present. Moreover, since the defi-
adopted in the two documents is different, the
nition of “coliforms”
micro-organisms enumerated are not necessarily the Same.
For any particular product, the method to be Chosen will be specified in
the International Standard dealing with that product.
0.3 For the purposes of a practicable test method, the definition of
“coliforms” given in clause 3 and used as the basis for the procedure
is not necessarily identical with corresponding definitions given in other
published texts. The method described in this International Standard
will, on average, detect only about 90 O/o of strains of the micro-
organisms referred to in other publications as “(presumptive)
coliforms” (e.g. certain stralns of Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella).
(See Edwards, P.R. and Ewing, H.W. Identification of Enterobacteriaceae,
3rd edition, Burgess Publlshing Company, Minneapolis, Minnesota,
USA, 1972.)
. . .
Ill
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This page intentionally ieft blank
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--~
INTERNATIONAL STANDARD ISO 4832:1991 (E)
- General guidance for the enumeration of
Microbiology
coliforms - Colony count technique
coliforms: Bacteria which, at the specified tempera-
1 Scope
ture (I.e. 30 OC, 35 OC or 37 OC, as agreed) form
characteristic colonies in crystal violet neutral red
This International Standard gives general guidelines
bile lactose agar under the test conditions specified
for the enumeration of coliforms present in products
in this International Standard.
intended for human consumption or feeding of ani-
mals, by means of the technique of counting colon-
ies on a solid medium, after incubation at 30 OC,
4 Prlnciple
35 OC or 37 OC, this temperature forming the subject
of agreement between the Parties concerned.
4.1 Preparation of two poured plates, using a solid
NOTE 1 The incubation temperature of 30 OC is used selective culture medium, and using a specified
when the aim of the enumeration is technological; the
quantity of the test Sample if the initial product is
temperature of 35 OC or 37 OC is used when the aim of the
liquid, or using a specified quantity of an initial sus-
enumeration is more in the field of public health.
Pension in the case of other products.
Preparation of other pairs of poured plates, under
2 Normative references
the Same conditions, using decimal dilutions of the
test Sample or of the initial Suspension.
The following Standards contain provisions which,
through reference in this text, constitute provisions
of this International Standard. At the time of publi-
4.2 Incubation of the plates at 30 OC, 35 OC or 37 OC
cation, the editions indicated were valid. All stan-
(as agreed) for 24 h.
dards are subject to revision, and Parties to
agreements based on this International Standard
4.3 Calculation of the number of coliforms per
are encouraged to investigate the possibility of ap-
millilitre or per gram of Sample from the number of
plying the most recent editions of the Standards in-
characteristic colonies obtained in the plates Chosen
dicated below. Members of IEC and ISO maintain
(see 10.1).
registers of currently valid International Standards.
ISO 6887:1983, Microbiology - General guidance for
5 Culture medium and dilution fluid
the preparation of dilutions for microbiological ex-
amina tion.
5.1 General
ISO 7218:1985, Microbiology - General guidance for
For current laboratory practice, see ISO 7218.
microbiological examinations.
5.2 Dllutlon fluid
3 Definition
See ISO 6887 and the specific International Standard
For the purposes of this International Standard, the
dealing with the product under examination.
following definition applies.
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ISO 4832:1991(E)
6.3 Petri dfshes, made of glass or plastic, of diam-
5.3 Solid selective medium: crystal violet
eter 90 mm to 100 mm.
neutral red bile lactose (VRBL) agar
Composition 6.4 Total delivery pipettes, having a nominal ca-
pacity of 1 ml.
peptone
7g
6.5 Water-bath, or similar apparatus, capable of
yeast extract
3g
operating at 45 OC + 0,5 OC.
-
lactose 10 g
6.6 Colony counting equipment, consisting of an il-
sodium chloride
5g
luminated base and a mechanical or electronie
digital counter.
bile salts
1s g
6.7 pH meter, accurate to + 0,l pH unit at 25 OC.
neutral red 0903 g -
crystal violet 0,002 g
7 Sampllng
agar 12 g to 18 g ’)
Sampling shall have been carried out in accordance
water 1000 ml
with the specific International Standard appropriate
to the product concerned. If there is no specific In-
Preparation
ternational Standard, it is recommended that the
Parties concerned come to an agreement on this
Procee d as follows in Order to conserve the se-
subject.
lective power and s pecificity of the medium.
8 Preparatlon of the test Sample
Thoroughly mix the components or
...
ISO
NORME
4832
INTERNATIONALE
Deuxième édition
1991-03-01
Directives générales pour le
Microbiologie -
dénombrement des coliformes - Méthode par
comptage des colonies
Microbiology - General guidance for the enumeration of coliforms -
Colony Count technique
Numéro de référence
ISO 4832:1991(F)
---
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ISO 4832:1991 (F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération’
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres
de I’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque comité membre inté-
ressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique crée
à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO participent également aux tra-
vaux. L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique
internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotech-
nique.
Les projets de Normes internationales adoptes par les comites techni-
ques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication
comme Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins
des comites membres votants.
La Norme internationale ISO 4832 a été élaborée par le comité techni-
que ISO/TC 34, Produits agricoles alimentaires.
Cette deuxième édition annule et remplace la Premiere édition (ISO
4832:1978), dont elle constitue une révision technique.
L’annexe A fait partie intégrante de la présente Norme internationale.
Q BO 1991
Droits de reproduction réservés. Aucune partie de cette publication ne peut être repro-
duite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou
mécanique, y compris la photocopie et les microfllms, sans l’accord écrit de l’éditeur.
Organisation internationale de normalisation
Case Postale 56 l CH-121 3 Genève 20 l Suisse
Imprimé en Suisse
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ISO 4832:1991 (F)
Introduction
0.1 La présente Norme Internationale se propose de fournir des di-
rectives générales pour l’examen de produits non concernés par les
Normes internationales existant actuellement, et pour l’étude par les
organismes eiaborant des méthodes d’essais microbiologiques destines
à être appliquées à des produits alimentaires ou à des aliments pour
animaux. En raison de la grande diversité des produits entrant dans ce
domaine d’application, il est possible que ces directives, dans tous leurs
détails, ne conviennent pas exactement à certains produits et que, pour
certains autres produits, il puisse être nécessaire d’employer des mé-
thodes différentes. Neanmolns, ii est à espérer que, dans tous les cas,
tous les efforts seront faits pour appliquer, chaque fois qu’il sera possi-
ble, les directives données, et qu’on n’aura recours à des dérogations
que si cela est absolument nécessaire pour des raisons techniques.
Lorsque la présente Norme internationale sera réexaminée, il sera tenu
compte de tous les renseignements disponibles à ce moment-là, à sa-
voir dans quelle mesure les directives auront été suivies et les raisons
pour lesquelles il aura été nécessaire d’y déroger dans le cas de pro-
duits particuliers.
L’harmonisation des méthodes d’essai ne peut pas être immédiate et,
pour certains groupes de produits, des Normes internationale et/ou des
normes nationales existent peut-être. Dans le cas ou des Normes inter-
nationale existent déjà pour le produit à contrôler, elles devront être
appliquées, mais il serait souhaitable que lorsqu’elles viendront en ré-
vision, elles soient alignées sur la présente Norme internationale, si
bien que finalement les seules divergences restantes seront celles qui
sont nécessaires pour des raisons techniques bien établies.
0.2 La technique décrite ci-aprés est plus précise que celle décrite
dans ISO 4831:1990, Microbiologie - Directives générales pour le dé-
nombrement des coliformes - Technique du nombre le plus probable,
mais elle ne permet pas d’effectuer un examen microbiologique sur une
prise d’essai aussi importante. Elle sera donc choisie de préférence
lorsque les coliformes sont en grand nombre. D’autre part, la définition
des (coiiformew étant différente, on ne dénombre pas nécessairement
les mêmes micro-organismes par ces deux méthodes.
Pour les produits particuliers, le choix de la technique sera précisé dans
les Normes internationale traitant des produits à examiner.
0.3 Pour les besoins d’une méthode d’essai efficace, la définition des
~coliformes~~, données dans l’article 3 et servant de base au procédé,
n’est pas nécessairement identique aux définitions correspondantes
données dans d’autres textes publiés. Ainsi, la méthode décrite dans la
présente Norme internationale ne détectera qu’environ 90 % des sou-
ches de micro-organismes désignés, dans d’autres publications, sous
le nom de (coliformes (présumés),, (par exemple, certaines souches de
. . .
111
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ISO 4832:1991 (F)
Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella)). (Voir Edwards, P.R. et Ewing,
H.W. Identification of Enterobacteriaceae, 3e édition, Burgess Pubiishing
Company, Minneapolis, Minnesota, USA, 1972.)
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ISO 4832:1991 (F)
NORME INTERNATIONALE
Microbiologie - Directives
générales pour le dénombrement
des coliformes - Méthode
colonies
par comptage des
coliformes: Bactéries qui à la température spécifiée
1 Domaine d’application
(c’est-à-dire 30 OC, 35 OC ou 37 OC, selon accord),
forment des colonies caractéristiques dans la
La présente Norme internationale donne des direc-
gélose lactosée biliée au cristal violet et au rouge
tives générales pour le dénombrement des coli-
neutre, lorsque l’essai est effectué selon la méthode
dans les produits destinés à la
formes
spécifiée dans la présente Norme internationale.
consommation humaine ou à l’alimentation animale,
par comptage des colonies obtenues en milieu so-
lide, après incubation à 30 OC, 35 OC ou 37 OC, cette
4 Principe
température faisant l’objet d’un accord entre les
parties concernées.
4.1 Ensemencement en profondeur d’un milieu
NOTE 1 La température d’incubation de 30 OC est rete-
sélectif solide, coulé dans deux boîtes de Petri, avec
nue lorsque la finalité du dénombrement est technolo-
une quantité déterminée de l’échantillon pour essai
gique; la température de 35 OC ou 37 OC est retenue
si le produit à examiner est liquide, ou avec une
lorsque la finalité du dénombrement relève plut6t du do-
quantité déterminée de suspension mére dans le
maine de la santé publique.
cas d’autres produits.
2 Références normatives Dans les mêmes conditions, ensemencement des
dilutions décimales obtenues à partir de I’échan-
Les normes suivantes contiennent des dispositions
tiilon pour essai ou de la suspension mère.
qui, par suite de la référence qui en est faite,
constituent des dispositions valables pour la pré-
4.2 Incubation des boîtes à 30 OC, 35 OC ou 37 OC
sente Norme internationale. Au moment de la pu-
(selon accord) pendant 24 h.
blication, les éditions indiquées étaient en vigueur.
Toute norme est sujette à révision et les parties
prenantes des accords fondés sur la présente
4.3 Calcul du nombre de coliformes par millilitre
Norme internationale sont invitées à rechercher la
ou par gramme d’échantillon, à partir du nombre de
possibilité d’appliquer les éditions les plus récentes
colonies caractéristiques obtenues dans les boîtes
des normes indiquées ci-après. Les membres de la
de Petri retenues (voir 10.1).
CEI et de I’ISO possèdent le registre des Normes
internationales en vigueur à un moment donné.
5 Mllleux de culture et diluant
ISO 6887:1983, Microbiologie - Directives générales
pour la préparation des dilutions en vue de l’examen
5.1 Généralltés
microbiologique.
Pour les pratiques courantes de laboratoire, voir
ISO 7218: 1985, Microbiologie - Directives générales
I’ISO 7218.
pour les examens microbiologiques.
5.2 Diluant
3 Définition
Voir I’ISO 6887 et la Norme internationale spécifique
Pour les besoins de la présente Norme internatio-
traitant du produit à examiner.
nale, la définition suivante s’applique.
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 4832:1991(F)
ou
6.2 Étuve, réglable à 30 OC + 1 OC, 35 OC + 1 OC
5.3 Milieu sélectif solide: gélose lactosée - -
37 “C + 1 “C.
biliée au cristal violet et au rouge neutre -
(VRBL)
6.3 Boîtes de Petri, en verre ou en plastique, de
90 mm a 100 mm de diamètre.
Composition
peptone u
6.4 Pipettes & koulement total, de 1 ml de capacité
nominale.
extrait de levure
3g
lactose
10 $3 6.5 Bain d’eau, ou équipement similaire, régiable
à 45 OC + 0,5 OC.
-
chlorure de sodium
5g
6.6 Appareil de comptage de colonies, comportant
sels biliaires
195 g
un systéme d’8clairage et un compteur numérique
rouge neutre mécanique ou Blectronique.
oso3 g
cristal violet
02 g
pH-mètre, précis à + 0,l pH à 25 OC.
6.7
-
12 à 18 g’)
agar-agar
7 Échantlllonnage
1OOOml
L’échantillonnage doit avoir &té effectué conformé-
Préparation
ment à la Norme internationale spécifique du pro-
duit concernk S’il n’existe pas de Norme
Opérer comme suit pour conserver au milieu son
internationale spécifique, il est recommandé que les
pouvoir sélectif et sa sgécificité.
par
...
ISO
NORME
4832
INTERNATIONALE
Deuxième édition
1991-03-01
Directives générales pour le
Microbiologie -
dénombrement des coliformes - Méthode par
comptage des colonies
Microbiology - General guidance for the enumeration of coliforms -
Colony Count technique
Numéro de référence
ISO 4832:1991(F)
---
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ISO 4832:1991 (F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération’
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres
de I’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque comité membre inté-
ressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique crée
à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO participent également aux tra-
vaux. L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique
internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotech-
nique.
Les projets de Normes internationales adoptes par les comites techni-
ques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication
comme Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins
des comites membres votants.
La Norme internationale ISO 4832 a été élaborée par le comité techni-
que ISO/TC 34, Produits agricoles alimentaires.
Cette deuxième édition annule et remplace la Premiere édition (ISO
4832:1978), dont elle constitue une révision technique.
L’annexe A fait partie intégrante de la présente Norme internationale.
Q BO 1991
Droits de reproduction réservés. Aucune partie de cette publication ne peut être repro-
duite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou
mécanique, y compris la photocopie et les microfllms, sans l’accord écrit de l’éditeur.
Organisation internationale de normalisation
Case Postale 56 l CH-121 3 Genève 20 l Suisse
Imprimé en Suisse
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ISO 4832:1991 (F)
Introduction
0.1 La présente Norme Internationale se propose de fournir des di-
rectives générales pour l’examen de produits non concernés par les
Normes internationales existant actuellement, et pour l’étude par les
organismes eiaborant des méthodes d’essais microbiologiques destines
à être appliquées à des produits alimentaires ou à des aliments pour
animaux. En raison de la grande diversité des produits entrant dans ce
domaine d’application, il est possible que ces directives, dans tous leurs
détails, ne conviennent pas exactement à certains produits et que, pour
certains autres produits, il puisse être nécessaire d’employer des mé-
thodes différentes. Neanmolns, ii est à espérer que, dans tous les cas,
tous les efforts seront faits pour appliquer, chaque fois qu’il sera possi-
ble, les directives données, et qu’on n’aura recours à des dérogations
que si cela est absolument nécessaire pour des raisons techniques.
Lorsque la présente Norme internationale sera réexaminée, il sera tenu
compte de tous les renseignements disponibles à ce moment-là, à sa-
voir dans quelle mesure les directives auront été suivies et les raisons
pour lesquelles il aura été nécessaire d’y déroger dans le cas de pro-
duits particuliers.
L’harmonisation des méthodes d’essai ne peut pas être immédiate et,
pour certains groupes de produits, des Normes internationale et/ou des
normes nationales existent peut-être. Dans le cas ou des Normes inter-
nationale existent déjà pour le produit à contrôler, elles devront être
appliquées, mais il serait souhaitable que lorsqu’elles viendront en ré-
vision, elles soient alignées sur la présente Norme internationale, si
bien que finalement les seules divergences restantes seront celles qui
sont nécessaires pour des raisons techniques bien établies.
0.2 La technique décrite ci-aprés est plus précise que celle décrite
dans ISO 4831:1990, Microbiologie - Directives générales pour le dé-
nombrement des coliformes - Technique du nombre le plus probable,
mais elle ne permet pas d’effectuer un examen microbiologique sur une
prise d’essai aussi importante. Elle sera donc choisie de préférence
lorsque les coliformes sont en grand nombre. D’autre part, la définition
des (coiiformew étant différente, on ne dénombre pas nécessairement
les mêmes micro-organismes par ces deux méthodes.
Pour les produits particuliers, le choix de la technique sera précisé dans
les Normes internationale traitant des produits à examiner.
0.3 Pour les besoins d’une méthode d’essai efficace, la définition des
~coliformes~~, données dans l’article 3 et servant de base au procédé,
n’est pas nécessairement identique aux définitions correspondantes
données dans d’autres textes publiés. Ainsi, la méthode décrite dans la
présente Norme internationale ne détectera qu’environ 90 % des sou-
ches de micro-organismes désignés, dans d’autres publications, sous
le nom de (coliformes (présumés),, (par exemple, certaines souches de
. . .
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ISO 4832:1991 (F)
Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella)). (Voir Edwards, P.R. et Ewing,
H.W. Identification of Enterobacteriaceae, 3e édition, Burgess Pubiishing
Company, Minneapolis, Minnesota, USA, 1972.)
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ISO 4832:1991 (F)
NORME INTERNATIONALE
Microbiologie - Directives
générales pour le dénombrement
des coliformes - Méthode
colonies
par comptage des
coliformes: Bactéries qui à la température spécifiée
1 Domaine d’application
(c’est-à-dire 30 OC, 35 OC ou 37 OC, selon accord),
forment des colonies caractéristiques dans la
La présente Norme internationale donne des direc-
gélose lactosée biliée au cristal violet et au rouge
tives générales pour le dénombrement des coli-
neutre, lorsque l’essai est effectué selon la méthode
dans les produits destinés à la
formes
spécifiée dans la présente Norme internationale.
consommation humaine ou à l’alimentation animale,
par comptage des colonies obtenues en milieu so-
lide, après incubation à 30 OC, 35 OC ou 37 OC, cette
4 Principe
température faisant l’objet d’un accord entre les
parties concernées.
4.1 Ensemencement en profondeur d’un milieu
NOTE 1 La température d’incubation de 30 OC est rete-
sélectif solide, coulé dans deux boîtes de Petri, avec
nue lorsque la finalité du dénombrement est technolo-
une quantité déterminée de l’échantillon pour essai
gique; la température de 35 OC ou 37 OC est retenue
si le produit à examiner est liquide, ou avec une
lorsque la finalité du dénombrement relève plut6t du do-
quantité déterminée de suspension mére dans le
maine de la santé publique.
cas d’autres produits.
2 Références normatives Dans les mêmes conditions, ensemencement des
dilutions décimales obtenues à partir de I’échan-
Les normes suivantes contiennent des dispositions
tiilon pour essai ou de la suspension mère.
qui, par suite de la référence qui en est faite,
constituent des dispositions valables pour la pré-
4.2 Incubation des boîtes à 30 OC, 35 OC ou 37 OC
sente Norme internationale. Au moment de la pu-
(selon accord) pendant 24 h.
blication, les éditions indiquées étaient en vigueur.
Toute norme est sujette à révision et les parties
prenantes des accords fondés sur la présente
4.3 Calcul du nombre de coliformes par millilitre
Norme internationale sont invitées à rechercher la
ou par gramme d’échantillon, à partir du nombre de
possibilité d’appliquer les éditions les plus récentes
colonies caractéristiques obtenues dans les boîtes
des normes indiquées ci-après. Les membres de la
de Petri retenues (voir 10.1).
CEI et de I’ISO possèdent le registre des Normes
internationales en vigueur à un moment donné.
5 Mllleux de culture et diluant
ISO 6887:1983, Microbiologie - Directives générales
pour la préparation des dilutions en vue de l’examen
5.1 Généralltés
microbiologique.
Pour les pratiques courantes de laboratoire, voir
ISO 7218: 1985, Microbiologie - Directives générales
I’ISO 7218.
pour les examens microbiologiques.
5.2 Diluant
3 Définition
Voir I’ISO 6887 et la Norme internationale spécifique
Pour les besoins de la présente Norme internatio-
traitant du produit à examiner.
nale, la définition suivante s’applique.
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ISO 4832:1991(F)
ou
6.2 Étuve, réglable à 30 OC + 1 OC, 35 OC + 1 OC
5.3 Milieu sélectif solide: gélose lactosée - -
37 “C + 1 “C.
biliée au cristal violet et au rouge neutre -
(VRBL)
6.3 Boîtes de Petri, en verre ou en plastique, de
90 mm a 100 mm de diamètre.
Composition
peptone u
6.4 Pipettes & koulement total, de 1 ml de capacité
nominale.
extrait de levure
3g
lactose
10 $3 6.5 Bain d’eau, ou équipement similaire, régiable
à 45 OC + 0,5 OC.
-
chlorure de sodium
5g
6.6 Appareil de comptage de colonies, comportant
sels biliaires
195 g
un systéme d’8clairage et un compteur numérique
rouge neutre mécanique ou Blectronique.
oso3 g
cristal violet
02 g
pH-mètre, précis à + 0,l pH à 25 OC.
6.7
-
12 à 18 g’)
agar-agar
7 Échantlllonnage
1OOOml
L’échantillonnage doit avoir &té effectué conformé-
Préparation
ment à la Norme internationale spécifique du pro-
duit concernk S’il n’existe pas de Norme
Opérer comme suit pour conserver au milieu son
internationale spécifique, il est recommandé que les
pouvoir sélectif et sa sgécificité.
par
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Questions, Comments and Discussion
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