ISO 23611-3:2019
(Main)Soil quality — Sampling of soil invertebrates — Part 3: Sampling and extraction of enchytraeids
Soil quality — Sampling of soil invertebrates — Part 3: Sampling and extraction of enchytraeids
This document specifies a method for sampling, handling and extracting enchytraeids from terrestrial field soils as a prerequisite for using these animals as bioindicators (e.g. to assess the quality of a soil as a habitat for organisms). Basic information on the ecology of enchytraeids and their use as bioindicators in the terrestrial environment is included in the Bibliography. This document applies to all terrestrial biotopes in which enchytraeids occur. The sampling design of field studies in general is given in ISO 18400-101. These details can vary according to the climatic/regional conditions of the site to be sampled and an overview on the determination of effects of pollutants on enchytraeids in field situations is given in Reference [6]. Methods for some other soil organism groups such as earthworms or arthropods are given in ISO 23611-1, ISO 23611-2, ISO 23611-4 and ISO 23611-5. This document is not applicable for very wet or flooded soils and might be difficult to use under extreme climatic or geographical conditions (e.g. in high mountains). When sampling soil invertebrates, it is highly recommendable to characterize the site (e.g. concerning soil properties, climate and land use). However, such a characterization is not covered by this document. ISO 10390, ISO 10694, ISO 11272, ISO 11274, ISO 11277, ISO 11461 and ISO 11465 are more suitable for measuring pH, particle size distribution, C/N ratio, organic carbon content and water-holding capacity.
Qualité du sol — Prélèvement des invertébrés du sol — Partie 3: Prélèvement et extraction des enchytréides
Le présent document spécifie une méthode pour le prélèvement, la manipulation et l'extraction des enchytréides du sol prélevés sur le terrain, comme prérequis à l'utilisation de ces animaux en tant que bio-indicateurs (par exemple, pour évaluer la qualité d'un sol en tant qu'habitat pour des organismes). Les informations de base concernant l'écologie des enchytréides et leur utilisation en tant que bio-indicateurs dans l'environnement terrestre sont disponibles dans la Bibliographie. Le présent document s'applique à tous les biotopes terrestres dans lesquels des enchytréides sont présents. La conception de l'échantillonnage pour les études sur le terrain est, de manière générale, décrite dans l'ISO 18400‑101. Ces détails peuvent varier en fonction des conditions climatiques/régionales du site sur lequel l'échantillon doit être prélevé et un aperçu de la détermination des effets sur site des polluants vis-à-vis des enchytréides est fourni dans la Référence [6]. Des méthodes applicables à d'autres groupes d'organismes du sol, comme les vers de terre ou les arthropodes, sont données dans les normes ISO 23611‑1, ISO 23611‑2, ISO 23611‑4 et ISO 23611‑5. Le présent document n'est pas applicable aux sols très humides ou inondés et peut s'avérer difficile à mettre en œuvre dans des conditions climatiques ou géographiques extrêmes (en haute montagne, par exemple). Lors du prélèvement d'invertébrés du sol, il est vivement recommandé de caractériser le site (par exemple, du point de vue des propriétés du sol, du climat et de l'utilisation du terrain). Cependant, cette caractérisation n'est pas traitée dans le présent document. Les normes ISO 10390, ISO 10694, ISO 11272, ISO 11274, ISO 11277, ISO 11461 et ISO 11465 sont plus appropriées pour le mesurage du pH, de la répartition granulométrique, du rapport C/N, de la teneur en carbone organique et de la capacité de rétention d'eau.
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INTERNATIONAL ISO
STANDARD 23611-3
Second edition
2019-08
Soil quality — Sampling of soil
invertebrates —
Part 3:
Sampling and extraction of
enchytraeids
Qualité du sol — Prélèvement des invertébrés du sol —
Partie 3: Prélèvement et extraction des enchytréides
Reference number
©
ISO 2019
© ISO 2019
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting
on the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address
below or ISO’s member body in the country of the requester.
ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: +41 22 749 01 11
Fax: +41 22 749 09 47
Email: copyright@iso.org
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2019 – All rights reserved
Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
5 Reagents . 2
6 Apparatus . 2
7 Procedure. 3
7.1 Soil sampling . 3
7.2 Extraction of the enchytraeids . 3
7.3 Microscopic identification . 4
7.4 Preservation of Enchytraeidae . 5
7.5 Validity of the extraction process. 5
7.6 Determination of biomass . 5
8 Data assessment. 5
9 Test report . 6
Annex A (informative) Quick extraction of enchytraeids . 7
Annex B (informative) Examples of the use of soil invertebrates in soil monitoring
programmes (including presentation of their results) . 9
Bibliography .11
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see www .iso
.org/iso/foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 190, Soil quality, Subcommittee SC 4,
Biological characterization.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 23611-3:2007), which has been technically
revised. The main changes to the previous edition are as follows:
— addition of examples of enchytraeid monitoring programmes (including presentation of their
results) as an informative annex.
A list of all parts in the ISO 23611 series can be found on the ISO website.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/members .html.
iv © ISO 2019 – All rights reserved
Introduction
This document has been developed to address a growing need for the standardization of terrestrial
zoological field methods. Such methods, mainly covering the sampling, extraction and handling of soil
invertebrates, are needed for the following purposes:
— biological classification of soils including soil quality assessment (e.g. References [4], [25], [27],
[31], [36]);
— terrestrial bioindication and long-term monitoring (e.g. References [4], [30]);
— evaluation of the effects of chemicals on soil animals (References [18], [26], [28]).
Data for these purposes are gained by standardized methods since they can form the basis for far-
reaching decisions (e.g. whether a given site should be remediated or not). In fact, the lack of such
standardized methods is one of the most important reasons why biological classification concepts in
terrestrial (i.e. soil) habitats have so far been relatively rarely used in comparison with aquatic sites.
Originally, the methods described here were developed for taxonomical and ecological studies,
investigating the role of enchytraeids in various soil ecosystems. These animals without doubt belong
[7]
to the most important soil invertebrates in temperate regions (mainly in acidic soils ). Their influence
[17][23]
on soil functions like litter decomposition and nutrient cycling is well known . Due to their often
very high numbers, and their population biomass, they are also important in many terrestrial food-
[6]
webs . Some species have unintentionally been distributed by humans in many soils of the world.
Since it is neither possible nor useful to standardize methods for all soil organisms, the most important
ones have been selected. Microbiological parameters are already covered by existing ISO standards
(e.g. ISO 14240-1, ISO 14240-2, ISO 17601, ISO/TS 29843-1 and ISO/TS 29843-2.
INTERNATIONAL STANDARD ISO 23611-3:2019(E)
Soil quality — Sampling of soil invertebrates —
Part 3:
Sampling and extraction of enchytraeids
1 Scope
This document specifies a method for sampling, handling and extracting enchytraeids from terrestrial
field soils as a prerequisite for using these animals as bioindicators (e.g. to assess the quality of a soil as
a habitat for organisms).
Basic information on the ecology of enchytraeids and their use as bioindicators in the terrestrial
environment is included in the Bibliography.
This document applies to all terrestrial biotopes in which enchytraeids occur. The sampling design of
field studies in general is given in ISO 18400-101. These details can vary according to the climatic/
regional conditions of the site to be sampled and an overview on the determination of effects of
pollutants on enchytraeids in field situations is given in Reference [6].
Methods for some other soil organism groups such as earthworms or arthropods are given in
ISO 23611-1, ISO 23611-2, ISO 23611-4 and ISO 23611-5.
This document is not applicable for very wet or flooded soils and might be difficult to use under extreme
climatic or geographical conditions (e.g. in high mountains).
When sampling soil invertebrates, it is highly recommendable to characterize the site (e.g. concerning
soil properties, climate and land use). However, such a characterization is not covered by this document.
ISO 10390, ISO 10694, ISO 11272, ISO 11274, ISO 11277, ISO 11461 and ISO 11465 are more suitable for
measuring pH, particle size distribution, C/N ratio, organic carbon content and water-holding capacity.
2 Normative references
There are no normative references in this document.
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https: //www .iso .org/obp/
— IEC Electropedia: available at http: //www .electropedia .org/
3.1
enchytraeid
small soil-inhabiting worm (a few millimetres to several centimetres in length) belonging to the family
Enchytraeidae, class Oligochaeta, superclass Clitellata, phylum Annelida
[35]
Note 1 to entry: The common name for enchytraeid is potworm .
EXAMPLE Species of the genera Enchytraeus, Fridericia or Cognettia.
4 Principle
Enchytraeids at a certain site are sampled from the soil by using a split soil corer (diameter usually
3 cm to 6 cm) (6.1). After sampling, the soil samples containing the enchytraeids are transported to
the laboratory. Then the enchytraeids are extracted from soil by means of a wet extraction method.
[12][20][24]
(This approach has been well known for a long time ) After extraction, the enchytraeids
are identified alive and, if required, preserved in such a way that they can be stored in a collection
indefinitely (e.g. for taxonomical purposes).
The determination of the biomass of enchytraeids is also described in this document. The abundance
and biomass values can be recalculated to the area of the soil corer or, more rarely, volume parameters.
NOTE 1 The sampling of enchytraeids is often included in much broader monitoring programmes which try to
cover the whole soil fauna or parts of it (e.g. the mesofauna). Examples of the use of soil invertebrates are given in
Annex B. The design of such programmes is not included in this document (but see e.g. Reference [3]).
NOTE 2 Some hints for the taxonomy of enchytraeids are given in the Bibliography.
5 Reagents
5.1 Tap water (without toxic properties, e.g. due to copper contamination).
5.2 Ethanol, 70 % (volume fraction).
5.3 Bengalred, 4,5,6,7-Tetrachloro-2',4',5',7'-tetraiodofluorescein formulated as a staining agent.
5.4 Bouin’s fixative, buffered solution of formaldehyde, acetic acid and picric acid.
5.5 Paracarmin, staining agent, prepared as a mixture of carmine acid, aluminium chloride and
calcium chloride solved in ethanol.
5.6 Canada-balm, natural yellowish viscous fluid containing 13 % to 14 % (volume fraction) Canadin
acid (C H O ), 48 % to 50 % (volume fraction) α- and β-Canadinol acid (C H O ) and 5 % (volume
20 38 2 19 30 2
fraction) Canadoesen (C H O).
21 40
6 Apparatus
6.1 Split soil corer (e.g. diameter 3 cm to 6 cm; extracted core length 10 cm to 30 cm); length in total
variable (depending whether or not a handle is used) and a plastic or wooden impact-absorbing hammer.
6.2 Plastic bags (e.g. 1-l freezer bags); general store.
6.3 Temperature recorder or a minimum/maximum-thermometer.
6.4 Plastic bowls, diameter approximately 20 cm
...
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 23611-3
Second edition
2019-08
Soil quality — Sampling of soil
invertebrates —
Part 3:
Sampling and extraction of
enchytraeids
Qualité du sol — Prélèvement des invertébrés du sol —
Partie 3: Prélèvement et extraction des enchytréides
Reference number
©
ISO 2019
© ISO 2019
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting
on the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address
below or ISO’s member body in the country of the requester.
ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: +41 22 749 01 11
Fax: +41 22 749 09 47
Email: copyright@iso.org
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2019 – All rights reserved
Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
5 Reagents . 2
6 Apparatus . 2
7 Procedure. 3
7.1 Soil sampling . 3
7.2 Extraction of the enchytraeids . 3
7.3 Microscopic identification . 4
7.4 Preservation of Enchytraeidae . 5
7.5 Validity of the extraction process. 5
7.6 Determination of biomass . 5
8 Data assessment. 5
9 Test report . 6
Annex A (informative) Quick extraction of enchytraeids . 7
Annex B (informative) Examples of the use of soil invertebrates in soil monitoring
programmes (including presentation of their results) . 9
Bibliography .11
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see www .iso
.org/iso/foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 190, Soil quality, Subcommittee SC 4,
Biological characterization.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 23611-3:2007), which has been technically
revised. The main changes to the previous edition are as follows:
— addition of examples of enchytraeid monitoring programmes (including presentation of their
results) as an informative annex.
A list of all parts in the ISO 23611 series can be found on the ISO website.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/members .html.
iv © ISO 2019 – All rights reserved
Introduction
This document has been developed to address a growing need for the standardization of terrestrial
zoological field methods. Such methods, mainly covering the sampling, extraction and handling of soil
invertebrates, are needed for the following purposes:
— biological classification of soils including soil quality assessment (e.g. References [4], [25], [27],
[31], [36]);
— terrestrial bioindication and long-term monitoring (e.g. References [4], [30]);
— evaluation of the effects of chemicals on soil animals (References [18], [26], [28]).
Data for these purposes are gained by standardized methods since they can form the basis for far-
reaching decisions (e.g. whether a given site should be remediated or not). In fact, the lack of such
standardized methods is one of the most important reasons why biological classification concepts in
terrestrial (i.e. soil) habitats have so far been relatively rarely used in comparison with aquatic sites.
Originally, the methods described here were developed for taxonomical and ecological studies,
investigating the role of enchytraeids in various soil ecosystems. These animals without doubt belong
[7]
to the most important soil invertebrates in temperate regions (mainly in acidic soils ). Their influence
[17][23]
on soil functions like litter decomposition and nutrient cycling is well known . Due to their often
very high numbers, and their population biomass, they are also important in many terrestrial food-
[6]
webs . Some species have unintentionally been distributed by humans in many soils of the world.
Since it is neither possible nor useful to standardize methods for all soil organisms, the most important
ones have been selected. Microbiological parameters are already covered by existing ISO standards
(e.g. ISO 14240-1, ISO 14240-2, ISO 17601, ISO/TS 29843-1 and ISO/TS 29843-2.
INTERNATIONAL STANDARD ISO 23611-3:2019(E)
Soil quality — Sampling of soil invertebrates —
Part 3:
Sampling and extraction of enchytraeids
1 Scope
This document specifies a method for sampling, handling and extracting enchytraeids from terrestrial
field soils as a prerequisite for using these animals as bioindicators (e.g. to assess the quality of a soil as
a habitat for organisms).
Basic information on the ecology of enchytraeids and their use as bioindicators in the terrestrial
environment is included in the Bibliography.
This document applies to all terrestrial biotopes in which enchytraeids occur. The sampling design of
field studies in general is given in ISO 18400-101. These details can vary according to the climatic/
regional conditions of the site to be sampled and an overview on the determination of effects of
pollutants on enchytraeids in field situations is given in Reference [6].
Methods for some other soil organism groups such as earthworms or arthropods are given in
ISO 23611-1, ISO 23611-2, ISO 23611-4 and ISO 23611-5.
This document is not applicable for very wet or flooded soils and might be difficult to use under extreme
climatic or geographical conditions (e.g. in high mountains).
When sampling soil invertebrates, it is highly recommendable to characterize the site (e.g. concerning
soil properties, climate and land use). However, such a characterization is not covered by this document.
ISO 10390, ISO 10694, ISO 11272, ISO 11274, ISO 11277, ISO 11461 and ISO 11465 are more suitable for
measuring pH, particle size distribution, C/N ratio, organic carbon content and water-holding capacity.
2 Normative references
There are no normative references in this document.
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https: //www .iso .org/obp/
— IEC Electropedia: available at http: //www .electropedia .org/
3.1
enchytraeid
small soil-inhabiting worm (a few millimetres to several centimetres in length) belonging to the family
Enchytraeidae, class Oligochaeta, superclass Clitellata, phylum Annelida
[35]
Note 1 to entry: The common name for enchytraeid is potworm .
EXAMPLE Species of the genera Enchytraeus, Fridericia or Cognettia.
4 Principle
Enchytraeids at a certain site are sampled from the soil by using a split soil corer (diameter usually
3 cm to 6 cm) (6.1). After sampling, the soil samples containing the enchytraeids are transported to
the laboratory. Then the enchytraeids are extracted from soil by means of a wet extraction method.
[12][20][24]
(This approach has been well known for a long time ) After extraction, the enchytraeids
are identified alive and, if required, preserved in such a way that they can be stored in a collection
indefinitely (e.g. for taxonomical purposes).
The determination of the biomass of enchytraeids is also described in this document. The abundance
and biomass values can be recalculated to the area of the soil corer or, more rarely, volume parameters.
NOTE 1 The sampling of enchytraeids is often included in much broader monitoring programmes which try to
cover the whole soil fauna or parts of it (e.g. the mesofauna). Examples of the use of soil invertebrates are given in
Annex B. The design of such programmes is not included in this document (but see e.g. Reference [3]).
NOTE 2 Some hints for the taxonomy of enchytraeids are given in the Bibliography.
5 Reagents
5.1 Tap water (without toxic properties, e.g. due to copper contamination).
5.2 Ethanol, 70 % (volume fraction).
5.3 Bengalred, 4,5,6,7-Tetrachloro-2',4',5',7'-tetraiodofluorescein formulated as a staining agent.
5.4 Bouin’s fixative, buffered solution of formaldehyde, acetic acid and picric acid.
5.5 Paracarmin, staining agent, prepared as a mixture of carmine acid, aluminium chloride and
calcium chloride solved in ethanol.
5.6 Canada-balm, natural yellowish viscous fluid containing 13 % to 14 % (volume fraction) Canadin
acid (C H O ), 48 % to 50 % (volume fraction) α- and β-Canadinol acid (C H O ) and 5 % (volume
20 38 2 19 30 2
fraction) Canadoesen (C H O).
21 40
6 Apparatus
6.1 Split soil corer (e.g. diameter 3 cm to 6 cm; extracted core length 10 cm to 30 cm); length in total
variable (depending whether or not a handle is used) and a plastic or wooden impact-absorbing hammer.
6.2 Plastic bags (e.g. 1-l freezer bags); general store.
6.3 Temperature recorder or a minimum/maximum-thermometer.
6.4 Plastic bowls, diameter approximately 20 cm
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 23611-3
Deuxième édition
2019-08
Qualité du sol — Prélèvement des
invertébrés du sol —
Partie 3:
Prélèvement et extraction des
enchytréides
Soil quality — Sampling of soil invertebrates —
Part 3: Sampling and extraction of enchytraeids
Numéro de référence
©
ISO 2019
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y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: +41 22 749 01 11
Fax: +41 22 749 09 47
E-mail: copyright@iso.org
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2019 – Tous droits réservés
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 2
5 Réactifs . 2
6 Appareillage . 2
7 Mode opératoire. 3
7.1 Échantillonnage du sol . 3
7.2 Extraction des enchytréides . 3
7.3 Identification au microscope . 5
7.4 Conservation des Enchytraeidae . 5
7.5 Validité du procédé d’extraction . 5
7.6 Détermination de la biomasse . 6
8 Analyse des données. 6
9 Rapport d’essai . 6
Annexe A (informative) Extraction rapide des enchytréides . 8
Annexe B (informative) Exemples de l’utilisation des invertébrés du sol dans le cadre de
programmes de surveillance du sol (avec présentation des résultats correspondants) .10
Bibliographie .12
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/directives).
L'attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion
de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir www .iso .org/avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 190, Qualité du sol, sous-comité SC 4,
Caractérisation biologique.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 23611-3:2007), qui a fait l’objet
d’une révision technique. Les principales modifications par rapport à l’édition précédente sont les
suivantes:
— ajout d’exemples de programmes de surveillance d’enchytréides (avec présentation des résultats
correspondants) sous forme d’annexe informative.
Une liste de toutes les parties de la série ISO 23611 se trouve sur le site web de l’ISO.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/fr/members .html.
iv © ISO 2019 – Tous droits réservés
Introduction
Le présent document a été élaboré pour répondre à un besoin croissant de normalisation de méthodes
d’analyse sur le terrain de la faune terrestre. Ces méthodes, traitant principalement du prélèvement,
de l’extraction et de la manipulation des invertébrés du sol, sont nécessaires pour les applications
suivantes:
— la classification biologique des sols, y compris l’évaluation de la qualité des sols (par exemple,
Références [4], [25], [27], [31], [36]);
— la bio-indication terrestre et la surveillance à long terme (par exemple, Références [4], [30]);
— l’évaluation des effets de substances chimiques vis-à-vis des animaux du sol (Références [18],
[26], [28]).
Étant donné qu’elles peuvent être à la base de décisions importantes (par exemple, s’il convient
d’entreprendre ou non la dépollution d’un site particulier), les données relatives à ces applications sont
obtenues à l’aide de méthodes normalisées. En fait, l’absence de méthodes normalisées de ce type est
l’une des principales raisons pour lesquelles les concepts de classification biologique ont été utilisés
relativement rarement, jusqu’à présent, dans des habitats terrestres (c’est-à-dire le sol) par rapport aux
sites aquatiques.
À l’origine, les méthodes décrites dans le présent document ont été développées pour des études
taxonomiques ou écologiques, visant à élucider le rôle des enchytréides dans différents écosystèmes
terrestres. Ces animaux font indubitablement partie des invertébrés du sol les plus importants dans
[7]
les régions tempérées (principalement dans les sols acides ). Leur incidence sur les fonctions du sol,
[17][23]
comme la décomposition de la litière et le cycle des éléments nutritifs, est bien connue . En raison
de leur nombre souvent très élevé et de la biomasse de leur population, ils jouent également un rôle
[6]
majeur dans de nombreux réseaux trophiques terrestres . Certaines espèces ont été involontairement
disséminées par l’homme dans les sols du monde entier.
Étant donné qu’il n’est ni possible, ni utile de normaliser des méthodes pour tous les organismes du
sol, seuls les plus importants ont été sélectionnés. Les paramètres microbiologiques sont déjà traités
par des normes ISO existantes (par exemple, l’ISO 14240-1, l’ISO 14240-2, l’ISO 17601, l’ISO/TS 29843-1
et l’ISO/TS 29843-2).
NORME INTERNATIONALE ISO 23611-3:2019(F)
Qualité du sol — Prélèvement des invertébrés du sol —
Partie 3:
Prélèvement et extraction des enchytréides
1 Domaine d’application
Le présent document spécifie une méthode pour le prélèvement, la manipulation et l’extraction des
enchytréides du sol prélevés sur le terrain, comme prérequis à l’utilisation de ces animaux en tant que
bio-indicateurs (par exemple, pour évaluer la qualité d’un sol en tant qu’habitat pour des organismes).
Les informations de base concernant l’écologie des enchytréides et leur utilisation en tant que bio-
indicateurs dans l’environnement terrestre sont disponibles dans la Bibliographie.
Le présent document s’applique à tous les biotopes terrestres dans lesquels des enchytréides sont
présents. La conception de l’échantillonnage pour les études sur le terrain est, de manière générale,
décrite dans l’ISO 18400-101. Ces détails peuvent varier en fonction des conditions climatiques/
régionales du site sur lequel l’échantillon doit être prélevé et un aperçu de la détermination des effets
sur site des polluants vis-à-vis des enchytréides est fourni dans la Référence [6].
Des méthodes applicables à d’autres groupes d’organismes du sol, comme les vers de terre ou les
arthropodes, sont données dans les normes ISO 23611-1, ISO 23611-2, ISO 23611-4 et ISO 23611-5.
Le présent document n’est pas applicable aux sols très humides ou inondés et peut s’avérer difficile à
mettre en œuvre dans des conditions climatiques ou géographiques extrêmes (en haute montagne, par
exemple).
Lors du prélèvement d’invertébrés du sol, il est vivement recommandé de caractériser le site (par
exemple, du point de vue des propriétés du sol, du climat et de l’utilisation du terrain). Cependant,
cette caractérisation n’est pas traitée dans le présent document. Les normes ISO 10390, ISO 10694,
ISO 11272, ISO 11274, ISO 11277, ISO 11461 et ISO 11465 sont plus appropriées pour le mesurage du pH,
de la répartition granulométrique, du rapport C/N, de la teneur en carbone organique et de la capacité
de rétention d’eau.
2 Références normatives
Le présent document ne contient aucune référence normative.
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en
normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https: //www .iso .org/obp/
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse http: //www .electropedia .org/
3.1
enchytréide
petit ver vivant dans le sol (de quelques millimètres à plusieurs centimètres de longueur) appartenant à
la famille des Enchytraeidae, ordre des Oligochaeta, classe Clitellata, phylum Annelida
[35]
Note 1 à l'article: Le nom commun des enchytréides est «potworm» en anglais .
EXEMPLE Espèces des genres Enchytraeus, Fridericia ou Cognettia.
4 Principe
Sur un site donné, les enchytréides sont prélevés dans le sol au moyen d’un carottier fendu pour
prélèvement de sol (d’un diamètre généralement compris entre 3 cm et 6 cm) (6.1). Après le prélèvement,
les échantillons de sol contenant les enchytréides sont transportés au laboratoire. Ensuite, les
enchytréides sont extraits du sol par une méthode d’extraction humide. (Cette approche est connue
[12][20][24]
de longue date .) Après l’extraction, les enchytréides sont identifiés vivants et, si nécessaire,
conservés de manière à pouvoir être stockés indéfiniment dans une collection (par exemple, à des fins
taxonomiques).
La détermination de la biomasse des enchytréides est également décrite dans le présent document. Les
valeurs d’abondance et de biomasse peuvent être recalc
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 23611-3
Deuxième édition
2019-08
Qualité du sol — Prélèvement des
invertébrés du sol —
Partie 3:
Prélèvement et extraction des
enchytréides
Soil quality — Sampling of soil invertebrates —
Part 3: Sampling and extraction of enchytraeids
Numéro de référence
©
ISO 2019
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2019
Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en œuvre, aucune partie de cette
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
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E-mail: copyright@iso.org
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
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Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 2
5 Réactifs . 2
6 Appareillage . 2
7 Mode opératoire. 3
7.1 Échantillonnage du sol . 3
7.2 Extraction des enchytréides . 3
7.3 Identification au microscope . 5
7.4 Conservation des Enchytraeidae . 5
7.5 Validité du procédé d’extraction . 5
7.6 Détermination de la biomasse . 6
8 Analyse des données. 6
9 Rapport d’essai . 6
Annexe A (informative) Extraction rapide des enchytréides . 8
Annexe B (informative) Exemples de l’utilisation des invertébrés du sol dans le cadre de
programmes de surveillance du sol (avec présentation des résultats correspondants) .10
Bibliographie .12
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/directives).
L'attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion
de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir www .iso .org/avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 190, Qualité du sol, sous-comité SC 4,
Caractérisation biologique.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 23611-3:2007), qui a fait l’objet
d’une révision technique. Les principales modifications par rapport à l’édition précédente sont les
suivantes:
— ajout d’exemples de programmes de surveillance d’enchytréides (avec présentation des résultats
correspondants) sous forme d’annexe informative.
Une liste de toutes les parties de la série ISO 23611 se trouve sur le site web de l’ISO.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/fr/members .html.
iv © ISO 2019 – Tous droits réservés
Introduction
Le présent document a été élaboré pour répondre à un besoin croissant de normalisation de méthodes
d’analyse sur le terrain de la faune terrestre. Ces méthodes, traitant principalement du prélèvement,
de l’extraction et de la manipulation des invertébrés du sol, sont nécessaires pour les applications
suivantes:
— la classification biologique des sols, y compris l’évaluation de la qualité des sols (par exemple,
Références [4], [25], [27], [31], [36]);
— la bio-indication terrestre et la surveillance à long terme (par exemple, Références [4], [30]);
— l’évaluation des effets de substances chimiques vis-à-vis des animaux du sol (Références [18],
[26], [28]).
Étant donné qu’elles peuvent être à la base de décisions importantes (par exemple, s’il convient
d’entreprendre ou non la dépollution d’un site particulier), les données relatives à ces applications sont
obtenues à l’aide de méthodes normalisées. En fait, l’absence de méthodes normalisées de ce type est
l’une des principales raisons pour lesquelles les concepts de classification biologique ont été utilisés
relativement rarement, jusqu’à présent, dans des habitats terrestres (c’est-à-dire le sol) par rapport aux
sites aquatiques.
À l’origine, les méthodes décrites dans le présent document ont été développées pour des études
taxonomiques ou écologiques, visant à élucider le rôle des enchytréides dans différents écosystèmes
terrestres. Ces animaux font indubitablement partie des invertébrés du sol les plus importants dans
[7]
les régions tempérées (principalement dans les sols acides ). Leur incidence sur les fonctions du sol,
[17][23]
comme la décomposition de la litière et le cycle des éléments nutritifs, est bien connue . En raison
de leur nombre souvent très élevé et de la biomasse de leur population, ils jouent également un rôle
[6]
majeur dans de nombreux réseaux trophiques terrestres . Certaines espèces ont été involontairement
disséminées par l’homme dans les sols du monde entier.
Étant donné qu’il n’est ni possible, ni utile de normaliser des méthodes pour tous les organismes du
sol, seuls les plus importants ont été sélectionnés. Les paramètres microbiologiques sont déjà traités
par des normes ISO existantes (par exemple, l’ISO 14240-1, l’ISO 14240-2, l’ISO 17601, l’ISO/TS 29843-1
et l’ISO/TS 29843-2).
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Qualité du sol — Prélèvement des invertébrés du sol —
Partie 3:
Prélèvement et extraction des enchytréides
1 Domaine d’application
Le présent document spécifie une méthode pour le prélèvement, la manipulation et l’extraction des
enchytréides du sol prélevés sur le terrain, comme prérequis à l’utilisation de ces animaux en tant que
bio-indicateurs (par exemple, pour évaluer la qualité d’un sol en tant qu’habitat pour des organismes).
Les informations de base concernant l’écologie des enchytréides et leur utilisation en tant que bio-
indicateurs dans l’environnement terrestre sont disponibles dans la Bibliographie.
Le présent document s’applique à tous les biotopes terrestres dans lesquels des enchytréides sont
présents. La conception de l’échantillonnage pour les études sur le terrain est, de manière générale,
décrite dans l’ISO 18400-101. Ces détails peuvent varier en fonction des conditions climatiques/
régionales du site sur lequel l’échantillon doit être prélevé et un aperçu de la détermination des effets
sur site des polluants vis-à-vis des enchytréides est fourni dans la Référence [6].
Des méthodes applicables à d’autres groupes d’organismes du sol, comme les vers de terre ou les
arthropodes, sont données dans les normes ISO 23611-1, ISO 23611-2, ISO 23611-4 et ISO 23611-5.
Le présent document n’est pas applicable aux sols très humides ou inondés et peut s’avérer difficile à
mettre en œuvre dans des conditions climatiques ou géographiques extrêmes (en haute montagne, par
exemple).
Lors du prélèvement d’invertébrés du sol, il est vivement recommandé de caractériser le site (par
exemple, du point de vue des propriétés du sol, du climat et de l’utilisation du terrain). Cependant,
cette caractérisation n’est pas traitée dans le présent document. Les normes ISO 10390, ISO 10694,
ISO 11272, ISO 11274, ISO 11277, ISO 11461 et ISO 11465 sont plus appropriées pour le mesurage du pH,
de la répartition granulométrique, du rapport C/N, de la teneur en carbone organique et de la capacité
de rétention d’eau.
2 Références normatives
Le présent document ne contient aucune référence normative.
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en
normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https: //www .iso .org/obp/
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse http: //www .electropedia .org/
3.1
enchytréide
petit ver vivant dans le sol (de quelques millimètres à plusieurs centimètres de longueur) appartenant à
la famille des Enchytraeidae, ordre des Oligochaeta, classe Clitellata, phylum Annelida
[35]
Note 1 à l'article: Le nom commun des enchytréides est «potworm» en anglais .
EXEMPLE Espèces des genres Enchytraeus, Fridericia ou Cognettia.
4 Principe
Sur un site donné, les enchytréides sont prélevés dans le sol au moyen d’un carottier fendu pour
prélèvement de sol (d’un diamètre généralement compris entre 3 cm et 6 cm) (6.1). Après le prélèvement,
les échantillons de sol contenant les enchytréides sont transportés au laboratoire. Ensuite, les
enchytréides sont extraits du sol par une méthode d’extraction humide. (Cette approche est connue
[12][20][24]
de longue date .) Après l’extraction, les enchytréides sont identifiés vivants et, si nécessaire,
conservés de manière à pouvoir être stockés indéfiniment dans une collection (par exemple, à des fins
taxonomiques).
La détermination de la biomasse des enchytréides est également décrite dans le présent document. Les
valeurs d’abondance et de biomasse peuvent être recalc
...
Questions, Comments and Discussion
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