ISO 11269-1:2012
(Main)Soil quality — Determination of the effects of pollutants on soil flora — Part 1: Method for the measurement of inhibition of root growth
Soil quality — Determination of the effects of pollutants on soil flora — Part 1: Method for the measurement of inhibition of root growth
ISO 11269-1:2012 describes a method for the determination of the effects of contaminated soils or contaminated samples on the root elongation of terrestrial plants. This method is applicable to soils, soil materials, compost, sludge, waste or chemical testing. It is applicable to the comparison of soils of known and unknown quality and to the measurement of effects of materials (compost, sludge, waste) or chemicals deliberately added to the soil. The method is not intended to be used as a measure of the ability of the soil to support sustained plant growth.
Qualité du sol — Détermination des effets des polluants sur la flore du sol — Partie 1: Méthode de mesurage de l'inhibition de la croissance des racines
L'ISO 11269-1:2012 décrit une méthode de détermination des effets de sols contaminés ou d'échantillons contaminés sur l'allongement des racines de végétaux terrestres. Cette méthode est applicable aux sols et matériaux assimilés ainsi qu'aux composts, boues, déchets ou substances chimiques. Elle est applicable à la comparaison de sols de qualité connue et inconnue et au mesurage des effets de matériaux (composts, boues, déchets) ou de substances chimiques délibérément ajoutés au sol. Cette méthode n'est pas destinée à être utilisée pour mesurer la capacité du sol à permettre la croissance assistée de végétaux.
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INTERNATIONAL ISO
STANDARD 11269-1
Second edition
2012-03-01
Soil quality — Determination of the
effects of pollutants on soil flora —
Part 1:
Method for the measurement of inhibition
of root growth
Qualité du sol — Détermination des effets des polluants sur la flore du
sol —
Partie 1: Méthode de mesurage de l’inhibition de la croissance des racines
Reference number
ISO 11269-1:2012(E)
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ISO 2012
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ISO 11269-1:2012(E)
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Published in Switzerland
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ISO 11269-1:2012(E)
Contents Page
Foreword .iv
Introduction . v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
5 Test plants . 3
6 Materials . 3
6.1 Test vessels . 3
6.2 Soil . 3
7 Equipment . 5
8 Reference substance . 5
9 Procedure . 5
9.1 Experimental design . 5
9.2 Preparation of pots . 6
9.3 Pregermination of the seeds . 6
9.4 Growing conditions . 6
9.5 Test duration . 6
9.6 Measurements . 7
10 Expression of results and data . 7
11 Validity criteria . 7
12 Test report . 7
Annex A (informative) Recommended method for measuring the water-holding capacity of the soil. 9
Annex B (informative) Results of tests performed on reference substances .10
Annex C (informative) Example of results obtained with boric acid using sand as the substrate . 11
Annex D (informative) Recommended methods for the incorporation of chemicals into soils .12
Annex E (informative) Recommended methods for the incorporation of compost, sludge or waste
into soils .13
Annex F (informative) Example of seedlings of winter barley collected at the end of the test after
removal from artificial soil .15
Bibliography .16
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ISO 11269-1:2012(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International
Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 11269-1 was prepared by Technical Committee ISO/TC 190, Soil quality, Subcommittee SC 4,
Biological methods.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 11269-1:1993), which has been technically revised.
ISO 11269 consists of the following parts, under the general title Soil quality — Determination of the effects of
pollutants on soil flora:
— Part 1: Method for the measurement of inhibition of root growth
— Part 2: Effects of contaminated soil on the emergence and early growth of higher plants
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ISO 11269-1:2012(E)
Introduction
Chemical analysis of soil samples or waste materials to be disposed on soil, together with ecotoxicological
testing, provides substantial evidence of the suitability of the soil for arable production, or gives information
on the potential environmental risk resulting from the disposal of wastes such as sewage sludge on farmland.
There is also a need to assess the quality of the soil after reclamation of industrial sites and colliery tips or
when capping landfill sites. As the ability of the soil to grow crops is the main criterion, a rapid-growth test has
been developed, based on seedling growth in controlled environmental conditions.
Two major prerequisites of a phytotoxicity test are that it provides consistently reliable results and that it can be
used at any time of the year. It is therefore essential that seeds be grown in a controlled environment to ensure
optimal growing conditions which can be maintained for any number of tests, producing reproducible results
over a long period of time.
The test method described in this part of ISO 11269 can be used to compare soils, to monitor changes in their
activity or to determine the effect of added chemicals or materials (compost, sludge, waste).
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 11269-1:2012(E)
Soil quality — Determination of the effects of pollutants on soil
flora —
Part 1:
Method for the measurement of inhibition of root growth
1 Scope
This part of ISO 11269 describes a method for the determination of the effects of contaminated soils or
contaminated samples on the root elongation of terrestrial plants.
This method is applicable to soils, soil materials, compost, sludge, waste or chemical testing. It is applicable
to the comparison of soils of known and unknown quality and to the measurement of effects of materials
(compost, sludge, waste) or chemicals deliberately added to the soil.
The method is not intended to be used as a measure of the ability of the soil to support sustained plant growth.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced document
(including any amendments) applies.
ISO 10381-6, Soil quality — Sampling — Part 6: Guidance on the collection, handling and storage of soil under
aerobic conditions for the assessment of microbiological processes, biomass and diversity in the laboratory
ISO 10390, Soil quality — Determination of pH
ISO 10694, Soil quality — Determination of organic and total carbon after dry combustion (elementary analysis)
ISO 10930, Soil quality — Measurement of the stability of soil aggregates subjected to the action of water
ISO 11260, Soil Quality — Determination of effective cation exchange capacity and base saturation level using
barium chloride solution
ISO 11268-1, Soil quality — Effects of pollutants on earthworms — Part 1: Determination of acute toxicity to
Eisenia fetida/Eisenia andrei
ISO 11268-2, Soil quality — Effects of pollutants on earthworms — Part 2: Determination of effects on
reproduction to Eisenia fetida/Eisenia andrei
ISO 11277, Soil quality — Determination of particle size distribution in mineral soil material — Method by
sieving and sedimentation
ISO 11465, Soil quality — Determination of dry matter and water content on a mass basis — Gravimetric method
ISO/TS 20281, Water quality — Guidance on statistical interpretation of ecotoxicity data
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
contaminant
substance or agent present in the soil as a result of human activity
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ISO 11269-1:2012(E)
3.2
test mixture
mixture of test soil or test material (compost, sludge, waste or chemical) with control soil
3.3
radicle
portion of the plant embryo which develops into the primary root
3.4
hypocotyl
portion of the axis of an embryo or seedling situated between the cotyledons (seed leaves) and the radicle
3.5
reference soil
uncontaminated site-specific soil (e.g. collected in the vicinity of a contaminated site) with similar properties
(nutrient concentrations, pH, organic carbon content and texture) as the test soil
3.6
standard soil
field-collected soil or artificial soil whose main properties (e.g. pH, texture, organic matter content) are within
a known range
[1] [2] 1)
EXAMPLE Euro-soils , artificial soil , LUFA soil.
NOTE The properties of standard soils can differ from the test soil.
3.7
control soil
reference or standard soil used as a control and as a medium for preparing dilution series with test soil or test
material (e.g. compost, sludge, waste, chemical)
NOTE Both the effective concentration (EC ) and the no-observed-effect concentration (NOEC) are expressed in
x
milligrams of test substance per kilogram (dry mass) of the test substrate. Soil mixtures are given in percent based on
soil dry mass.
3.8
effective concentration
ECx
effective concentration (dilution) of the test soil or test material (e.g. compost, sludge, waste, chemical) at which
root elongation is reduced by x % compared to the control
4 Principle
This method compares the root elongation of terrestrial plants in a test soil and/or a series of dilutions with a
control soil. This method may also be used for the testing of compost, sludge, waste or chemicals by applying
various concentrations of the material under investigation to a control soil.
Pregerminated seeds are exposed to the test material under controlled conditions. After the growth period,
the lengths of the roots of the test plants are compared with those of the control plants. Statistically significant
differences in the root lengths of seedlings grown in any test medium compared to the controls are indicative
of an effect.
NOTE Shoot height is also a useful parameter, and this can be measured in conjunction with root length to provide
additional or corroborative data.
1) Euro-soils, artificial soil and LUFA soil are examples of suitable products available commercially. This information is
given for the convenience of users of this document and does not constitute an endorsement by ISO of these products.
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ISO 11269-1:2012(E)
5 Test plants
Winter barley (Hordeum vulgare L.), oat (Avena sativa L.) and wheat (Triticum aestivum L.) are the recommended
species. Other monocotyledonous plant species might be selected, e.g. plants with ecological or economic
significance in certain regions of the world, provided that the roots of these plants grow unhindered in sand and
in control soil under the conditions specified. Only plants that tolerate the properties of the test soils and test
conditions (besides their chemical contamination) should be selected. For example, a species sensitive to low
pH values should not be used for testing forest soils with low pH-values.
Seeds coated with insecticides and/or fungicides should not be used.
NOTE The methodology of this test can also be adapted for use with dicotyledonous species with straight roots,
which are easily measurable.
6 Materials
6.1 Test vessels
The test vessels shall be cylindrical, at least 8 cm in diameter and 11 cm in height, and shall have parallel sides
to ensure that the roots of seedlings are not restricted and do not encounter tapering side walls. The base of
the pots shall be perforated and covered with filter paper.
NOTE When filled to a height of 10 cm, the pots contain approximately 500 g of sand, 400 g of air-dried soil and 250
g of artificial soil.
6.2 Soil
6.2.1 Test soil
Some physical characteristics of the test soil can induce disturbances in root elongation such as heterogeneous
soil with big particles or clayey soil with a high water content. Therefore, the soil to be tested shall be passed
through a sieve with a 2 mm square mesh to remove coarse fragments. Furthermore, fine particles (<20 µm
according to ISO 11277) should not exceed 20 % of the dry mass.
Before the test, the soil is stored in accordance with ISO 10381-6.
For each soil, the following characteristics should be determined:
a) soil texture classification;
b) pH (KCl) in accordance with ISO 10390;
c) water content in accordance with ISO 11465;
d) water-holding capacity in accordance with Annex A;
e) cationic exchange capacity in accordance with ISO 11260;
f) organic matter content in accordance with ISO 10694.
6.2.2 Control soil
Either reference or standard soils may be used as the control soil.
When comparing the root elongation in soils of known and unknown quality, the control soil and soil under test
should be of the same textural class, and be as similar as practicable in all respects other than the presence of
the chemical or contaminant. Indeed, significant differences in soil characteristics other than the presence of
contaminant may lead to differences in root lengths and may induce false positive test results.
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ISO 11269-1:2012(E)
6.2.2.1 Reference soil
If a reference soil from an uncontaminated area near a contaminated site is available, it should be treated and
characterized like the test soil (6.2.1). If a toxic contamination or unusual soil properties cannot be ruled out, a
standard control soil should be preferred.
6.2.2.2 Standard soil
The standard soil should be uncontaminated, nutrient-poor natural or artificial soil. If a natural soil is used, its organic
matter content should not exceed 5 %. Fine particles (<20 µm according to ISO 11277) should not exceed 20 %.
Alternatively, artificial soil in accordance with ISO 11268-1 and ISO 11268-2 may be used, regardless of its
higher organic matter content. However, the organic matter content of the test and control soil should be as
close to each other as possible.
NOTE 1 Artificial soil may be used to assess the effects of compost, sludge, waste or chemicals deliberately added
to the soil.
The substrate called “artificial soil” has the following composition (Table 1).
Table 1 — Constituents of the artificial soil
Percentage expressed
Constituents
on a dry-mass basis
Sphagnum peat, air-dried, finely ground
10 %
and with no visible plant remains
Kaolinite clay containing not less than 30 % kaolinite 20 %
Industrial quartz sand (dominant fine sand with more than
70 %
50 % of particle size between 0,05 mm and 0,20 mm)
Calcium carbonate (CaCO , pulverized, analytical grade) is necessary to bring the pH (KCl) of the wetted
3
substrate to 6,0 ± 0,5 (commonly between 0,3 % and 1,0 % of the mass of the dry ingredients).
NOTE 2 Taking the properties of highly non-polar (lo
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 11269-1
Deuxième édition
2012-03-01
Qualité du sol — Détermination des effets
des polluants sur la flore du sol —
Partie 1:
Méthode de mesurage de l’inhibition de la
croissance des racines
Soil quality — Determination of the effects of pollutants on soil flora —
Part 1: Method for the measurement of inhibition of root growth
Numéro de référence
ISO 11269-1:2012(F)
©
ISO 2012
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ISO 11269-1:2012(F)
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quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l’accord écrit
de l’ISO à l’adresse ci-après ou du comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
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Publié en Suisse
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ISO 11269-1:2012(F)
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction . v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 2
4 Principe . 2
5 Végétaux d’essai . 3
6 Matériels . 3
6.1 Récipients d’essai . 3
6.2 Sol . 3
7 Appareillage . 5
8 Substance de référence . 5
9 Mode opératoire . 6
9.1 Dispositif expérimental . 6
9.2 Préparation des pots . 6
9.3 Prégermination des semences . 6
9.4 Conditions de croissance . 6
9.5 Durée de l’essai . 7
9.6 Mesurages . 7
10 Expression des résultats et données . 7
11 Critères de validité . 8
12 Rapport d’essai . 8
Annexe A (informative) Méthode recommandée pour le mesurage de la capacité de rétention en eau
du sol . 9
Annexe B (informative) Résultats d’essais effectués sur les substances de référence .10
Annexe C (informative) Exemple de résultats obtenus avec l’acide borique en utilisant le sable
comme substrat . 11
Annexe D (informative) Méthodes recommandées pour incorporer une substance chimique dans
un sol .12
Annexe E (informative) Méthodes recommandées pour incorporer un compost, une boue ou un déchet
dans un sol .13
Annexe F (informative) Exemple de plants d’orge d’hiver recueillis à la fin de l’essai après leur retrait
du sol artificiel .15
Bibliographie .16
© ISO 2012 – Tous droits réservés iii
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ISO 11269-1:2012(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales,
en liaison avec l’ISO participent également aux travaux. L’ISO collabore étroitement avec la Commission
électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI, Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d’élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication
comme Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des comités membres votants.
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de droits
de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir
identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L’ISO 11269-1 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 190, Qualité du sol, sous-comité SC 4,
Méthodes biologiques.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 11269-1:1993), qui a fait l’objet d’une
révision technique.
L’ISO 11269 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Qualité du sol — Détermination
des effets des polluants sur la flore du sol:
— Partie 1: Méthode de mesurage de l’inhibition de la croissance des racines
— Partie 2: Effets des sols contaminés sur l’émergence et la croissance des végétaux supérieurs
iv © ISO 2012 – Tous droits réservés
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ISO 11269-1:2012(F)
Introduction
L’analyse chimique des échantillons de sol ou de déchets destinés à être épandus sur le sol, associée aux
essais toxicologiques, fournit des preuves tangibles de la capacité du sol à la production agricole ou des
informations sur le risque environnemental potentiel résultant du dépôt, sur les terres agricoles, de déchets
tels que les boues d’épuration. Par ailleurs, il existe un besoin d’évaluer la qualité du sol après la réhabilitation
de sites industriels ou de terrils ou le recouvrement de décharges par des terres de remblai. Comme le critère
principal est la capacité du sol à permettre la croissance végétale, un essai de croissance rapide, basé sur le
développement de plantules dans des conditions environnementales contrôlées, a été mis au point.
Deux préalables majeurs d’un essai de phytotoxicité sont, d’une part, de fournir des résultats toujours fiables et,
d’autre part, de pouvoir être réalisé à tout moment de l’année. Il est donc essentiel de cultiver les semences dans
un environnement contrôlé de manière à assurer des conditions de croissance optimales susceptibles d’être
maintenues quel que soit le nombre d’essais et de donner des résultats reproductibles sur une période prolongée.
La méthode d’essai décrite dans la présente partie de l’ISO 11269 peut être utilisée pour comparer des sols,
contrôler les modifications de leur activité ou déterminer les effets de substances chimiques ou de matériaux
(composts, boues, déchets) ajoutés.
© ISO 2012 – Tous droits réservés v
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NORME INTERNATIONALE ISO 11269-1:2012(F)
Qualité du sol — Détermination des effets des polluants sur la
flore du sol —
Partie 1:
Méthode de mesurage de l’inhibition de la croissance des racines
1 Domaine d’application
La présente partie de l’ISO 11269 décrit une méthode de détermination des effets de sols contaminés ou
d’échantillons contaminés sur l’allongement des racines de végétaux terrestres.
Cette méthode est applicable aux sols et matériaux assimilés ainsi qu’aux composts, boues, déchets ou
substances chimiques. Elle est applicable à la comparaison de sols de qualité connue et inconnue et au
mesurage des effets de matériaux (composts, boues, déchets) ou de substances chimiques délibérément
ajoutés au sol.
Cette méthode n’est pas destinée à être utilisée pour mesurer la capacité du sol à permettre la croissance
assistée de végétaux.
2 Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l’application du présent document. Pour les
références datées, seule l’édition citée s’applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document de référence s’applique (y compris les éventuels amendements).
ISO 10381-6, Qualité du sol — Échantillonnage — Partie 6: Lignes directrices pour la collecte, la manipulation
et la conservation, dans des conditions aérobies, de sols destinés à l’évaluation en laboratoire des processus,
de la biomasse et de la diversité microbiens
ISO 10390, Qualité du sol — Détermination du pH
ISO 10694, Qualité du sol — Dosage du carbone organique et du carbone total après combustion sèche
(analyse élémentaire)
ISO 10930, Qualité du sol — Mesure de la stabilité d’agrégats de sols soumis à l’action de l’eau
ISO 11260, Qualité du sol — Détermination de la capacité d’échange cationique effective et du taux de
saturation en bases échangeables à l’aide d’une solution de chlorure de baryum
ISO 11268-1, Qualité du sol — Effets des polluants vis-à-vis des vers de terre — Partie 1: Détermination de la
toxicité aiguë vis-à-vis de Eisenia fetida/Eisenia andrei
ISO 11268-2, Qualité du sol — Effets des polluants vis-à-vis des vers de terre — Partie 2: Détermination des
effets sur la reproduction de Eisenia fetida/Eisenia andrei
ISO 11277, Qualité du sol — Détermination de la répartition granulométrique de la matière minérale des sols —
Méthode par tamisage et sédimentation
ISO 11465, Qualité du sol — Détermination de la teneur pondérale en matière sèche et en eau — Méthode
gravimétrique
ISO/TS 20281, Qualité de l’eau — Lignes directrices relatives à l’interprétation statistique de données
écotoxicologiques
© ISO 2012 – Tous droits réservés 1
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ISO 11269-1:2012(F)
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
3.1
contaminant
substance ou agent présent dans le sol à la suite d’une activité humaine
3.2
mélange d’essai
mélange composé de sol d’essai ou de matériau d’essai (compost, boue, déchet ou substance chimique) et
de sol témoin
3.3
radicule
partie de l’embryon végétal qui se développe en racine primaire
3.4
hypocotyle
partie de l’axe d’un embryon ou d’une plantule située entre les cotylédons (feuilles primordiales) et la radicule
3.5
sol de référence
sol non contaminé d’un site spécifique (par exemple collecté dans le voisinage d’un site contaminé) avec des
propriétés similaires (concentrations nutritives, pH, teneur en carbone organique et texture) à celles du sol d’essai
3.6
sol standard
sol prélevé sur le terrain ou sol artificiel dont les principales propriétés (par exemple pH, texture, teneur en
matières organiques) se situent dans une gamme connue
[1] [2] 1)
EXEMPLE Euro-Soils , sol artificiel , LUFA soils .
NOTE Les propriétés du sol standard peuvent différer de celles du sol d’essai.
3.7
sol témoin
sol de référence ou sol standard utilisé comme contrôle et comme milieu pour préparer les séries de dilution
avec le sol d’essai ou le matériau d’essai (par exemple compost, boue, déchet, substance chimique)
NOTE La concentration effective (CE ) et la concentration sans effet observé (CSEO) sont toutes deux exprimées
x
en milligrammes de substance d’essai par kilogramme (de masse sèche) de substrat d’essai. Les mélanges de sol sont
exprimés en pourcentage de masse sèche.
3.8
concentration effective
CE
x
concentration effective (dilution) du sol d’essai ou du matériau d’essai (par exemple compost, boue, déchet,
substance chimique), à laquelle l’allongement des racines est réduit de x % par rapport à celui obtenu avec le témoin
4 Principe
La présente méthode permet de comparer l’allongement des racines de végétaux terrestres observé dans
un sol d’essai et/ou une gamme de dilutions avec celui observé dans un sol témoin. Cette méthode peut
également être utilisée pour soumettre à essai des composts, boues, déchets ou substances chimiques en
appliquant à un sol témoin différentes concentrations du matériau soumis à essai.
1) Les Euro-Soils, le sol artificiel et les LUFA soils sont des exemples de produits appropriés disponibles sur le marché.
Cette information est donnée à l’intention des utilisateurs du présent document et ne signifie nullement que l’ISO approuve
ou recommande l’emploi exclusif des produits ainsi désignés.
2 © ISO 2012 – Tous droits réservés
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ISO 11269-1:2012(F)
Des semences prégermées sont exposées au matériau d’essai dans des conditions contrôlées. Après la
période de croissance, la longueur des racines des végétaux d’essai est comparée à la longueur des racines
des végétaux témoins. Les différences statistiquement significatives entre la longueur des racines de plantules
cultivées dans un milieu d’essai, quel qu’il soit, et celle des témoins sont indicatives d’un effet.
NOTE La hauteur des pousses est également un paramètre utile et peut être mesurée en relation avec la longueur
des racines pour fournir des données supplémentaires ou corroboratives.
5 Végétaux d’essai
L’orge d’hiver (Hordeum vulgare L.), l’avoine cultivée (Avena sativa L.) et le blé tendre (Triticum aestivum L.)
sont les espèces recommandées. Il est possible de choisir d’autres espèces de plantes monocotylédones, par
exemple des végétaux ayant une importance écologique ou économique dans certaines régions du monde,
à condition que les racines de ces végétaux poussent librement dans le sable et dans le sol témoin dans les
conditions spécifiées. Il convient de sélectionner uniquement des végétaux qui tolèrent les propriétés des
sols d’essai et les conditions d’essai (contamination chimique mise à part). Par exemple, il convient de ne pas
utiliser une espèce sensible aux faibles pH pour tester des sols forestiers acides.
Il convient de ne pas utiliser de semences traitées aux insecticides et/ou fongicides.
NOTE La méthodologie du présent essai peut être adaptée pour une utilisation avec des espèces dicotylédones
dotées de racines droites, facilement mesurables.
6 Matériels
6.1 Récipients d’essai
Les récipients d’essai doivent être cylindriques et mesurer au moins 8 cm de diamètre et 11 cm de hauteur,
et leurs parois doivent être parallèles de sorte que les racines des plantules ne soient pas entravées et ne
rencontrent pas des parois latérales biseautées. La base des pots doit être perforée et recouverte de papier filtre.
NOTE Lorsqu’ils sont remplis jusqu’à une hauteur de 10 cm, les pots contiennent environ 500 g de sable, 400 g de
sol séché à l’air et 250 g de sol artificiel.
6.2 Sol
6.2.1 Sol d’essai
Certaines caractéristiques physiques du sol d’essai peuvent perturber l’allongement des racines, par exemple
si le sol est hétérogène avec de grosses particules ou argileux avec un taux d’humidité élevé. Par conséquent,
le sol soumis à essai doit être tamisé avec un tamis à ouverture de maille carrée de 2 mm pour éliminer les
fragments grossiers. Il convient en outre que les particules fines (< 20 µm conformément à l’ISO 11277) ne
représentent pas plus de 20 % de la masse sèche.
Avant l’essai, le sol est conservé conformément à l’ISO 10381-6.
Pour chaque sol, il convient de déterminer les caractéristiques suivantes:
a) la classification de la texture du sol;
b) le pH (KCl) conformément à l’ISO 10390;
c) le taux d’humidité conformément à l’ISO 11465;
d) la capacité de rétention en eau conformément à l’Annexe A;
e) la capacité d’échange cationique conformément à l’ISO 11260;
f) la teneur en matière organique conformément à l’ISO 10694.
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ISO 11269-1:2012(F)
6.2.2 Sol témoin
Le sol témoin peut être soit un sol de référence, soit un sol standard.
Lorsque l’essai vise à comparer l’allongement des racines dans des sols de qualité connue et inconnue, il convient
que le sol témoin et le sol soumis à essai soient de même classe de texture et qu’ils soient aussi semblables
que possible pour tous les aspects autres que la présence de la substance chimique ou du contaminant étudié.
En effet, des différences substantielles au niveau des caractéristiques des sols autres que la présence du
contaminant peuvent entraîner des différences de longueur de racines et induire des faux positifs.
6.2.2.1 Sol de référence
Si un sol de référence provenant de zones non contaminées proches d’un site contaminé est disponible, il
convient de le traiter et de le caractériser de la même manière que le sol d’essai (6.2.1). S’il n’est pas possible
d’exclure une contamination toxique ou des propriétés pédologiques inhabituelles, il convient de lui préférer un
sol témoin standard.
6.2.2.2 Sol standard
Il convient que le sol standard soit un sol naturel non contaminé, à faible teneur en éléments nutritifs, ou un
sol artificiel. Si un sol naturel est utilisé, il convient que sa teneur en matière organique ne dépasse pas 5 %. Il
convient que les particules fines (< 20 µm conformément à l’ISO 11277) ne dépassent pas 20 %.
Une autre solution consiste à utiliser un sol artificiel conformément à l’ISO 11268-1 et l’ISO 11268-2, même si
sa teneur en matière organique est plus élevée. Il convient toutefois que les teneurs en matière organique du
sol d’essai et du sol témoin soient aussi proches que possible.
NOTE 1 Un sol artificiel peut être utilisé pour évaluer les effets de composts, boues, déchets ou substances chimiques
délibérément ajoutés au sol.
Le substrat appelé «sol artificiel» a la composition suivante (Tableau 1).
Tableau 1 — Composition du sol artificiel
Expression en pourcentage de
Constituants
masse sèche
Tourbe de sphaignes, séchée à l’air, finement broyée et exempte de résidus
10 %
végétaux visibles
Argile kaolinite contenant au minimum 30 % de kaolinite 20 %
Sable de quartz industriel (sable fin dominant contenant plus de 50 % de
70 %
grains de taille comprise entre 0,05 mm et 0,20 mm)
Du carbonate de calcium (CaCO , pulvérisé, de qualité analytique) est nécessaire pour amener le pH (KCl) du
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substrat humidifié à 6,0 ± 0,5 (généralement entre 0,3 % et 1,0 % de la masse des ingrédients secs).
NOTE 2 Compte tenu des propriétés des substances fort
...
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