ISO 20186-1:2019
(Main)Molecular in vitro diagnostic examinations — Specifications for pre-examination processes for venous whole blood — Part 1: Isolated cellular RNA
Molecular in vitro diagnostic examinations — Specifications for pre-examination processes for venous whole blood — Part 1: Isolated cellular RNA
This document gives guidelines on the handling, storage, processing and documentation of venous whole blood specimens intended for cellular RNA examination during the pre-examination phase before a molecular examination is performed. This document covers specimens collected in venous whole blood collection tubes. This document is applicable to any molecular in vitro diagnostic examination performed by medical laboratories. It is also intended to be used by laboratory customers, in vitro diagnostics developers and manufacturers, biobanks, institutions and commercial organizations performing biomedical research, and regulatory authorities. Different dedicated measures are taken for stabilizing blood cell free circulating RNA and RNA in exosomes circulating in blood. These are not described in this document. Different dedicated measures are taken for collecting, stabilizing, transporting and storing capillary blood as well as for collecting and storing blood by paper based technologies or other technologies generating dried blood. These are not described in this document. This document does not cover the isolation of specific blood cells and subsequent isolation of cellular RNA therefrom. RNA in pathogens present in blood is not covered by this document.
Analyses de diagnostic moléculaire in vitro — Spécifications relatives aux processus préanalytiques pour le sang total veineux — Partie 1: ARN cellulaire extrait
Le présent document fournit des lignes directrices pour la manipulation, le stockage, le traitement et la documentation des prélèvements de sang total veineux destinés à l'analyse de l'ARN cellulaire durant la phase préanalytique précédant la réalisation d'un essai moléculaire. Le présent document concerne les échantillons primaires prélevés dans des tubes de prélèvement de sang total veineux. Le présent document s'applique aux analyses de diagnostic moléculaire in vitro réalisées par des laboratoires de biologie médicale. Il est également destiné à être utilisé par des clients de laboratoires, des développeurs et fabricants de l'industrie du diagnostic in vitro, ainsi que par des biobanques, des institutions et des organismes commerciaux spécialisés en recherche biomédicale, de même que des autorités de réglementation. Des mesures spécifiques différentes sont prises pour stabiliser l'ARN libre circulant dans le sang et l'ARN des exosomes du sang. Ces mesures ne sont pas décrites dans le présent document. Des mesures spécifiques différentes sont prises pour prélever, stabiliser, transporter et stocker le sang capillaire, et pour prélever et stocker le sang par des technologies à base de support papier ou d'autres technologies produisant du sang séché. Ces mesures ne sont pas décrites dans le présent document. Le présent document ne traite ni de l'extraction de cellules sanguines spécifiques ni de l'extraction de l'ARN cellulaire qu'elles contiennent. L'ARN des pathogènes présents dans le sang n'est pas couvert par le présent document.
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Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 20186-1
First edition
2019-02
Molecular in vitro diagnostic
examinations — Specifications for
pre-examination processes for venous
whole blood —
Part 1:
Isolated cellular RNA
Analyses de diagnostic moléculaire in vitro — Spécifications relatives
aux processus préanalytiques pour le sang total veineux —
Partie 1: ARN cellulaire extrait
Reference number
©
ISO 2019
© ISO 2019
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting
on the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address
below or ISO’s member body in the country of the requester.
ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: +41 22 749 01 11
Fax: +41 22 749 09 47
Email: copyright@iso.org
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2019 – All rights reserved
Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 General considerations . 5
5 Outside the laboratory . 6
5.1 Specimen collection . 6
5.1.1 Information about the specimen donor/patient . 6
5.1.2 Selection of the venous whole blood collection tube by the laboratory . 6
5.1.3 Venous whole blood specimen collection from the donor/patient and
stabilization procedures . . 6
5.1.4 Information about the specimen and storage requirements at the blood
collection facility . 7
5.2 Transport requirements . 8
6 Inside the laboratory . 8
6.1 Specimen reception . 8
6.2 Storage requirements . 8
6.3 Isolation of the cellular RNA. 9
6.3.1 General. 9
6.3.2 Using blood collection tubes with RNA profile stabilizers . 9
6.3.3 Using blood collection tubes without RNA profile stabilizers .10
6.4 Quantity and quality assessment of isolated cellular RNA .10
6.5 Storage of isolated cellular RNA .11
6.5.1 General.11
6.5.2 Cellular RNA isolated with commercially available kits .11
6.5.3 Cellular RNA isolated with the laboratory's own protocols .11
Annex A (informative) Impact of pre-examination process steps on venous whole blood
cellular RNA profiles .12
Annex B (informative) Influence of blood storage temperature on blood cellular RNA profiles .16
Bibliography .19
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see www .iso
.org/iso/foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 212, Clinical laboratory testing and in
vitro diagnostic test systems.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/members .html.
A list of all parts in the ISO 20186 series can be found on the ISO website.
iv © ISO 2019 – All rights reserved
Introduction
Molecular in vitro diagnostics has enabled significant progress in medicine. Further progress is
expected by new technologies analysing profiles of nucleic acids, proteins, and metabolites in human
tissues and body fluids. However, the profiles of these molecules can change drastically during the
pre-examination process, including the specimen collection, transport, storage, and processing.
Consequently, this makes the outcome from diagnostics or research unreliable or even impossible,
because the subsequent examination might not determine the real situation in the patient but an
artificial profile generated during the pre-examination process.
Blood cellular RNA profiles can change significantly after blood collection. Therefore, special measures
need to be taken to secure good quality blood samples for cellular RNA examination and storage.
Standardization of the entire workflow from specimen collection to the cellular RNA examination is
needed. Studies have been undertaken to determine the important influencing factors. This document
draws upon such work to codify and standardize the steps for venous whole blood cellular RNA
examination in what is referred to as the pre-examination phase.
In this document, the following verbal forms are used:
— “shall” indicates a requirement;
— “should” indicates a recommendation;
— “may” indicates a permission;
— “can” indicates a possibility or a capability.
INTERNATIONAL STANDARD ISO 20186-1:2019(E)
Molecular in vitro diagnostic examinations —
Specifications for pre-examination processes for venous
whole blood —
Part 1:
Isolated cellular RNA
1 Scope
This document gives guidelines on the handling, storage, processing and documentation of venous
whole blood specimens intended for cellular RNA examination during the pre-examination phase
before a molecular examination is performed. This document covers specimens collected in venous
whole blood collection tubes.
This document is applicable to any molecular in vitro diagnostic examination performed by medical
laboratories. It is also intended to be used by laboratory customers, in vitro diagnostics developers and
manufacturers, biobanks, institutions and commercial organizations performing biomedical research,
and regulatory authorities.
Different dedicated measures are taken for stabilizing blood cell free circulating RNA and RNA in
exosomes circulating in blood. These are not described in this document.
Different dedicated measures are taken for collecting, stabilizing, transporting and storing capillary
blood as well as for collecting and storing blood by paper based technologies or other technologies
generating dried blood. These are not described in this document.
This document does not cover the isolation of specific blood cells and subsequent isolation of cellular
RNA therefrom.
RNA in pathogens present in blood is not covered by this document.
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content
constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For
undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 15189:2012, Medical laboratories — Requirements for quality and competence
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https: //www .iso .org/obp
— IEC Electropedia: available at http: //www .electropedia .org/
3.1
ambient temperature
unregulated temperature of the surrounding air
3.2
analyte
component represented in the name of a measurable quantity
[SOURCE: ISO 17511:2003, 3.2]
3.3
backflow
flow of a liquid opposite to the usual or desired direction
3.4
blood cellular RNA
cellular RNA
RNA molecules present in blood cells
3.5
blood cellular RNA profile
amounts of different RNA molecules, that are present in blood cells and that can be measured in the
absence of any losses, inhibition and interference
3.6
blood cellular RNA profile stabilizers
compounds, solutions or mixtures that are designed to minimize changes of the blood cellular RNA
profile (3.5)
3.7
blood collection set
intravenous device specialized for venepuncture consisting of a stainless steel beveled needle and tube
(tubing) with attached plastic wings and fitting connector
Note 1 to entry: The connector attaches to an additional blood collection device, such as a blood collection tube (3.8).
3.8
blood collection tube
tube used for blood collection, usually in a vacuum which forces blood from the vein through the needle
into the tube
3.9
closed system
non-modifiable system provided by the vendor including all necessary components for the examination
(i.e. hardware, software, procedures and reagents)
3.10
deoxyribonucleic acid
DNA
polymer of deoxyribonucleotides occurring in a double-stranded (dsDNA) or single-stranded
(ssDNA) form
[SOURCE: ISO 22174:2005, 3.1.2]
3.11
deoxyribonuclease
DNase
enzyme that catalyzes the degradation of DNA into smaller components
2 © ISO 2019 – All rights reserved
3.12
examination
analytical test
set of operations having the object of determining the value or characteristics of a property
[SOURCE: ISO 15189:2012, 3.7, modified — Term and definition are used here without the original
notes; an additional term was added.]
Note 1 to entry: Processes that start with the isolated analyte (3.2) and include all kin
...
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 20186-1
First edition
2019-02
Molecular in vitro diagnostic
examinations — Specifications for
pre-examination processes for venous
whole blood —
Part 1:
Isolated cellular RNA
Analyses de diagnostic moléculaire in vitro — Spécifications relatives
aux processus préanalytiques pour le sang total veineux —
Partie 1: ARN cellulaire extrait
Reference number
©
ISO 2019
© ISO 2019
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting
on the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address
below or ISO’s member body in the country of the requester.
ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: +41 22 749 01 11
Fax: +41 22 749 09 47
Email: copyright@iso.org
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2019 – All rights reserved
Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 General considerations . 5
5 Outside the laboratory . 6
5.1 Specimen collection . 6
5.1.1 Information about the specimen donor/patient . 6
5.1.2 Selection of the venous whole blood collection tube by the laboratory . 6
5.1.3 Venous whole blood specimen collection from the donor/patient and
stabilization procedures . . 6
5.1.4 Information about the specimen and storage requirements at the blood
collection facility . 7
5.2 Transport requirements . 8
6 Inside the laboratory . 8
6.1 Specimen reception . 8
6.2 Storage requirements . 8
6.3 Isolation of the cellular RNA. 9
6.3.1 General. 9
6.3.2 Using blood collection tubes with RNA profile stabilizers . 9
6.3.3 Using blood collection tubes without RNA profile stabilizers .10
6.4 Quantity and quality assessment of isolated cellular RNA .10
6.5 Storage of isolated cellular RNA .11
6.5.1 General.11
6.5.2 Cellular RNA isolated with commercially available kits .11
6.5.3 Cellular RNA isolated with the laboratory's own protocols .11
Annex A (informative) Impact of pre-examination process steps on venous whole blood
cellular RNA profiles .12
Annex B (informative) Influence of blood storage temperature on blood cellular RNA profiles .16
Bibliography .19
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see www .iso
.org/iso/foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 212, Clinical laboratory testing and in
vitro diagnostic test systems.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/members .html.
A list of all parts in the ISO 20186 series can be found on the ISO website.
iv © ISO 2019 – All rights reserved
Introduction
Molecular in vitro diagnostics has enabled significant progress in medicine. Further progress is
expected by new technologies analysing profiles of nucleic acids, proteins, and metabolites in human
tissues and body fluids. However, the profiles of these molecules can change drastically during the
pre-examination process, including the specimen collection, transport, storage, and processing.
Consequently, this makes the outcome from diagnostics or research unreliable or even impossible,
because the subsequent examination might not determine the real situation in the patient but an
artificial profile generated during the pre-examination process.
Blood cellular RNA profiles can change significantly after blood collection. Therefore, special measures
need to be taken to secure good quality blood samples for cellular RNA examination and storage.
Standardization of the entire workflow from specimen collection to the cellular RNA examination is
needed. Studies have been undertaken to determine the important influencing factors. This document
draws upon such work to codify and standardize the steps for venous whole blood cellular RNA
examination in what is referred to as the pre-examination phase.
In this document, the following verbal forms are used:
— “shall” indicates a requirement;
— “should” indicates a recommendation;
— “may” indicates a permission;
— “can” indicates a possibility or a capability.
INTERNATIONAL STANDARD ISO 20186-1:2019(E)
Molecular in vitro diagnostic examinations —
Specifications for pre-examination processes for venous
whole blood —
Part 1:
Isolated cellular RNA
1 Scope
This document gives guidelines on the handling, storage, processing and documentation of venous
whole blood specimens intended for cellular RNA examination during the pre-examination phase
before a molecular examination is performed. This document covers specimens collected in venous
whole blood collection tubes.
This document is applicable to any molecular in vitro diagnostic examination performed by medical
laboratories. It is also intended to be used by laboratory customers, in vitro diagnostics developers and
manufacturers, biobanks, institutions and commercial organizations performing biomedical research,
and regulatory authorities.
Different dedicated measures are taken for stabilizing blood cell free circulating RNA and RNA in
exosomes circulating in blood. These are not described in this document.
Different dedicated measures are taken for collecting, stabilizing, transporting and storing capillary
blood as well as for collecting and storing blood by paper based technologies or other technologies
generating dried blood. These are not described in this document.
This document does not cover the isolation of specific blood cells and subsequent isolation of cellular
RNA therefrom.
RNA in pathogens present in blood is not covered by this document.
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content
constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For
undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 15189:2012, Medical laboratories — Requirements for quality and competence
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https: //www .iso .org/obp
— IEC Electropedia: available at http: //www .electropedia .org/
3.1
ambient temperature
unregulated temperature of the surrounding air
3.2
analyte
component represented in the name of a measurable quantity
[SOURCE: ISO 17511:2003, 3.2]
3.3
backflow
flow of a liquid opposite to the usual or desired direction
3.4
blood cellular RNA
cellular RNA
RNA molecules present in blood cells
3.5
blood cellular RNA profile
amounts of different RNA molecules, that are present in blood cells and that can be measured in the
absence of any losses, inhibition and interference
3.6
blood cellular RNA profile stabilizers
compounds, solutions or mixtures that are designed to minimize changes of the blood cellular RNA
profile (3.5)
3.7
blood collection set
intravenous device specialized for venepuncture consisting of a stainless steel beveled needle and tube
(tubing) with attached plastic wings and fitting connector
Note 1 to entry: The connector attaches to an additional blood collection device, such as a blood collection tube (3.8).
3.8
blood collection tube
tube used for blood collection, usually in a vacuum which forces blood from the vein through the needle
into the tube
3.9
closed system
non-modifiable system provided by the vendor including all necessary components for the examination
(i.e. hardware, software, procedures and reagents)
3.10
deoxyribonucleic acid
DNA
polymer of deoxyribonucleotides occurring in a double-stranded (dsDNA) or single-stranded
(ssDNA) form
[SOURCE: ISO 22174:2005, 3.1.2]
3.11
deoxyribonuclease
DNase
enzyme that catalyzes the degradation of DNA into smaller components
2 © ISO 2019 – All rights reserved
3.12
examination
analytical test
set of operations having the object of determining the value or characteristics of a property
[SOURCE: ISO 15189:2012, 3.7, modified — Term and definition are used here without the original
notes; an additional term was added.]
Note 1 to entry: Processes that start with the isolated analyte (3.2) and include all kin
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 20186-1
Première édition
2019-02
Analyses de diagnostic moléculaire in
vitro — Spécifications relatives aux
processus préanalytiques pour le sang
total veineux —
Partie 1:
ARN cellulaire extrait
Molecular in vitro diagnostic examinations — Specifications for pre-
examination processes for venous whole blood —
Part 1: Isolated cellular RNA
Numéro de référence
©
ISO 2019
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© ISO 2019
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publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: +41 22 749 01 11
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E-mail: copyright@iso.org
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2019 – Tous droits réservés
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Considérations générales . 5
5 Hors du laboratoire . 6
5.1 Recueil des prélèvements . 6
5.1.1 Informations relatives au donneur/patient . 6
5.1.2 Choix du tube de prélèvement de sang total veineux par le laboratoire . 6
5.1.3 Protocoles de prélèvement de sang total veineux primaire du donneur/
patient et méthodes de stabilisation . 7
5.1.4 Informations sur les échantillons primaires et exigences de stockage dans
le centre de prélèvement . 7
5.2 Exigences de transport . 8
6 Dans le laboratoire . 9
6.1 Informations relatives à la réception des prélèvements . 9
6.2 Exigences relatives au stockage . 9
6.3 Extraction de l’ARN cellulaire .10
6.3.1 Généralités .10
6.3.2 Utilisation de tubes de prélèvement sanguin contenant des stabilisateurs
de profil d’ARN .10
6.3.3 Utilisation de tubes de prélèvement sanguin sans stabilisateurs de profil
d’ARN .10
6.4 Évaluation quantitative et qualitative de l’ARN cellulaire extrait .11
6.5 Stockage de l’ARN cellulaire extrait .11
6.5.1 Généralités .11
6.5.2 ARN cellulaire extrait à l’aide de kits disponibles dans le commerce .12
6.5.3 ARN cellulaire extrait selon les propres protocoles du laboratoire .12
Annexe A (informative) Impact des étapes du processus préanalytique sur les profils de
l’ARN cellulaire du sang total veineux .13
Annexe B (informative) Influence de la température de stockage du sang sur les profils
d’ARN cellulaire sanguin .18
Bibliographie .20
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/directives).
L’attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www .iso .org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion
de l’ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: www .iso .org/iso/fr/avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 212, Laboratoires d’analyses de
biologie médicale et systèmes de diagnostic in vitro.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/fr/members .html.
Une liste de toutes les parties de la série ISO 20186 se trouve sur le site web de l’ISO.
iv © ISO 2019 – Tous droits réservés
Introduction
Le diagnostic moléculaire in vitro a permis de faire considérablement progresser la médecine. D’autres
avancées sont attendues avec les nouvelles technologies d’analyse des profils des acides nucléiques, des
protéines et des métabolites dans les tissus humains et les fluides corporels. Toutefois, les profils de
ces molécules peuvent changer radicalement au cours des processus préanalytiques, notamment lors
du prélèvement des échantillons primaires, du transport, du stockage et du traitement. Le résultat du
diagnostic ou de la recherche est donc peu fiable, voire impossible à obtenir, car l’analyse subséquente
pourrait ne pas déterminer l’état réel du patient, mais un profil artificiel généré pendant les processus
préanalytiques.
Les profils d’ARN cellulaire sanguin peuvent varier de manière significative après le prélèvement
sanguin. Par conséquent, il est nécessaire de prendre des mesures spécifiques pour assurer la bonne
qualité des échantillons de sang en vue de l’analyse de l’ARN cellulaire et de son stockage.
Une normalisation de l’ensemble du processus, allant du prélèvement des échantillons primaires jusqu’à
l’analyse de l’ARN cellulaire, est nécessaire. Des études ont été réalisées afin de définir les facteurs
ayant un impact important. Le présent document se fonde sur ces travaux pour codifier et normaliser
les étapes des processus dits de la phase préanalytique pour l’ARN cellulaire du sang total veineux.
Dans le présent document, les formes verbales suivantes sont utilisées:
— «doit» indique une exigence;
— «il convient de/que» indique une recommandation;
— «peut/il est admis/permis» indique une autorisation;
— «peut/il est possible» indique une possibilité ou une capacité.
NORME INTERNATIONALE ISO 20186-1:2019(F)
Analyses de diagnostic moléculaire in vitro —
Spécifications relatives aux processus préanalytiques pour
le sang total veineux —
Partie 1:
ARN cellulaire extrait
1 Domaine d’application
Le présent document fournit des lignes directrices pour la manipulation, le stockage, le traitement et la
documentation des prélèvements de sang total veineux destinés à l’analyse de l’ARN cellulaire durant la
phase préanalytique précédant la réalisation d’un essai moléculaire. Le présent document concerne les
échantillons primaires prélevés dans des tubes de prélèvement de sang total veineux.
Le présent document s’applique aux analyses de diagnostic moléculaire in vitro réalisées par des
laboratoires de biologie médicale. Il est également destiné à être utilisé par des clients de laboratoires,
des développeurs et fabricants de l’industrie du diagnostic in vitro, ainsi que par des biobanques, des
institutions et des organismes commerciaux spécialisés en recherche biomédicale, de même que des
autorités de réglementation.
Des mesures spécifiques différentes sont prises pour stabiliser l’ARN libre circulant dans le sang et
l’ARN des exosomes du sang. Ces mesures ne sont pas décrites dans le présent document.
Des mesures spécifiques différentes sont prises pour prélever, stabiliser, transporter et stocker le sang
capillaire, et pour prélever et stocker le sang par des technologies à base de support papier ou d’autres
technologies produisant du sang séché. Ces mesures ne sont pas décrites dans le présent document.
Le présent document ne traite ni de l’extraction de cellules sanguines spécifiques ni de l’extraction de
l’ARN cellulaire qu’elles contiennent.
L’ARN des pathogènes présents dans le sang n’est pas couvert par le présent document.
2 Références normatives
Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur
contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique.
Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s'applique (y compris les
éventuels amendements).
ISO 15189:2012, Laboratoires de biologie médicale — Exigences concernant la qualité et la compétence
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en
normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https: //www .iso .org/obp;
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse http: //www .electropedia .org/.
3.1
température ambiante
température non régulée de l’air environnant
3.2
analyte
composant indiqué dans le nom d’une grandeur mesurable
[SOURCE: ISO 17511:2003, 3.2]
3.3
reflux
écoulement d’un liquide dans la direction opposée à la direction d’écoulement habituelle ou souhaitée
3.4
ARN cellulaire sanguin
ARN cellulaire
molécules d’ARN présentes dans les cellules sanguines
3.5
profil d’ARN cellulaire sanguin
quantité
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 20186-1
Première édition
2019-02
Analyses de diagnostic moléculaire in
vitro — Spécifications relatives aux
processus préanalytiques pour le sang
total veineux —
Partie 1:
ARN cellulaire extrait
Molecular in vitro diagnostic examinations — Specifications for pre-
examination processes for venous whole blood —
Part 1: Isolated cellular RNA
Numéro de référence
©
ISO 2019
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publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
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E-mail: copyright@iso.org
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2019 – Tous droits réservés
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Considérations générales . 5
5 Hors du laboratoire . 6
5.1 Recueil des prélèvements . 6
5.1.1 Informations relatives au donneur/patient . 6
5.1.2 Choix du tube de prélèvement de sang total veineux par le laboratoire . 6
5.1.3 Protocoles de prélèvement de sang total veineux primaire du donneur/
patient et méthodes de stabilisation . 7
5.1.4 Informations sur les échantillons primaires et exigences de stockage dans
le centre de prélèvement . 7
5.2 Exigences de transport . 8
6 Dans le laboratoire . 9
6.1 Informations relatives à la réception des prélèvements . 9
6.2 Exigences relatives au stockage . 9
6.3 Extraction de l’ARN cellulaire .10
6.3.1 Généralités .10
6.3.2 Utilisation de tubes de prélèvement sanguin contenant des stabilisateurs
de profil d’ARN .10
6.3.3 Utilisation de tubes de prélèvement sanguin sans stabilisateurs de profil
d’ARN .10
6.4 Évaluation quantitative et qualitative de l’ARN cellulaire extrait .11
6.5 Stockage de l’ARN cellulaire extrait .11
6.5.1 Généralités .11
6.5.2 ARN cellulaire extrait à l’aide de kits disponibles dans le commerce .12
6.5.3 ARN cellulaire extrait selon les propres protocoles du laboratoire .12
Annexe A (informative) Impact des étapes du processus préanalytique sur les profils de
l’ARN cellulaire du sang total veineux .13
Annexe B (informative) Influence de la température de stockage du sang sur les profils
d’ARN cellulaire sanguin .18
Bibliographie .20
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/directives).
L’attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www .iso .org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion
de l’ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: www .iso .org/iso/fr/avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 212, Laboratoires d’analyses de
biologie médicale et systèmes de diagnostic in vitro.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/fr/members .html.
Une liste de toutes les parties de la série ISO 20186 se trouve sur le site web de l’ISO.
iv © ISO 2019 – Tous droits réservés
Introduction
Le diagnostic moléculaire in vitro a permis de faire considérablement progresser la médecine. D’autres
avancées sont attendues avec les nouvelles technologies d’analyse des profils des acides nucléiques, des
protéines et des métabolites dans les tissus humains et les fluides corporels. Toutefois, les profils de
ces molécules peuvent changer radicalement au cours des processus préanalytiques, notamment lors
du prélèvement des échantillons primaires, du transport, du stockage et du traitement. Le résultat du
diagnostic ou de la recherche est donc peu fiable, voire impossible à obtenir, car l’analyse subséquente
pourrait ne pas déterminer l’état réel du patient, mais un profil artificiel généré pendant les processus
préanalytiques.
Les profils d’ARN cellulaire sanguin peuvent varier de manière significative après le prélèvement
sanguin. Par conséquent, il est nécessaire de prendre des mesures spécifiques pour assurer la bonne
qualité des échantillons de sang en vue de l’analyse de l’ARN cellulaire et de son stockage.
Une normalisation de l’ensemble du processus, allant du prélèvement des échantillons primaires jusqu’à
l’analyse de l’ARN cellulaire, est nécessaire. Des études ont été réalisées afin de définir les facteurs
ayant un impact important. Le présent document se fonde sur ces travaux pour codifier et normaliser
les étapes des processus dits de la phase préanalytique pour l’ARN cellulaire du sang total veineux.
Dans le présent document, les formes verbales suivantes sont utilisées:
— «doit» indique une exigence;
— «il convient de/que» indique une recommandation;
— «peut/il est admis/permis» indique une autorisation;
— «peut/il est possible» indique une possibilité ou une capacité.
NORME INTERNATIONALE ISO 20186-1:2019(F)
Analyses de diagnostic moléculaire in vitro —
Spécifications relatives aux processus préanalytiques pour
le sang total veineux —
Partie 1:
ARN cellulaire extrait
1 Domaine d’application
Le présent document fournit des lignes directrices pour la manipulation, le stockage, le traitement et la
documentation des prélèvements de sang total veineux destinés à l’analyse de l’ARN cellulaire durant la
phase préanalytique précédant la réalisation d’un essai moléculaire. Le présent document concerne les
échantillons primaires prélevés dans des tubes de prélèvement de sang total veineux.
Le présent document s’applique aux analyses de diagnostic moléculaire in vitro réalisées par des
laboratoires de biologie médicale. Il est également destiné à être utilisé par des clients de laboratoires,
des développeurs et fabricants de l’industrie du diagnostic in vitro, ainsi que par des biobanques, des
institutions et des organismes commerciaux spécialisés en recherche biomédicale, de même que des
autorités de réglementation.
Des mesures spécifiques différentes sont prises pour stabiliser l’ARN libre circulant dans le sang et
l’ARN des exosomes du sang. Ces mesures ne sont pas décrites dans le présent document.
Des mesures spécifiques différentes sont prises pour prélever, stabiliser, transporter et stocker le sang
capillaire, et pour prélever et stocker le sang par des technologies à base de support papier ou d’autres
technologies produisant du sang séché. Ces mesures ne sont pas décrites dans le présent document.
Le présent document ne traite ni de l’extraction de cellules sanguines spécifiques ni de l’extraction de
l’ARN cellulaire qu’elles contiennent.
L’ARN des pathogènes présents dans le sang n’est pas couvert par le présent document.
2 Références normatives
Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur
contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique.
Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s'applique (y compris les
éventuels amendements).
ISO 15189:2012, Laboratoires de biologie médicale — Exigences concernant la qualité et la compétence
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en
normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https: //www .iso .org/obp;
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse http: //www .electropedia .org/.
3.1
température ambiante
température non régulée de l’air environnant
3.2
analyte
composant indiqué dans le nom d’une grandeur mesurable
[SOURCE: ISO 17511:2003, 3.2]
3.3
reflux
écoulement d’un liquide dans la direction opposée à la direction d’écoulement habituelle ou souhaitée
3.4
ARN cellulaire sanguin
ARN cellulaire
molécules d’ARN présentes dans les cellules sanguines
3.5
profil d’ARN cellulaire sanguin
quantité
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.