ISO 16266-2:2018

Water quality — Detection and enumeration of Pseudomonas aeruginosa — Part 2: Most probable number method

This document specifies a method for the enumeration of Pseudomonas aeruginosa in water. The method is based on the growth of target organisms in a liquid medium and calculation of the most probable number (MPN) of organisms by reference to MPN tables. This document is applicable to a range of types of water. For example, hospital waters, drinking water and non‑carbonated bottled waters intended for human consumption, groundwater, swimming pool and spa pool waters including those containing high background counts of heterotrophic bacteria. This document does not apply to carbonated bottled waters, flavoured bottle waters, cooling tower waters or marine waters, for which the method has not been validated. These waters are, therefore, outside the scope of this document. Laboratories can employ the method presented in this document for these matrices by undertaking appropriate validation of performance of this method prior to use. The test is based on a bacterial enzyme detection technology that signals the presence of P. aeruginosa through the hydrolysis of a 7‑amino‑4‑methylcoumarin aminopeptidase substrate present in a special reagent. P. aeruginosa cells rapidly grow and reproduce using the rich supply of amino acids, vitamins and other nutrients present in the reagent. Actively growing strains of P. aeruginosa have an enzyme that cleaves the 7‑amido‑coumarin aminopeptidase substrate releasing a product which fluoresces under ultraviolet (UV) light. The test described in this document provides a confirmed result within 24 h with no requirement for further confirmation of positive wells.

Qualité de l'eau — Recherche et dénombrement de Pseudomonas aeruginosa — Partie 2: Méthode du nombre le plus probable

Le présent document spécifie une méthode permettant de dénombrer Pseudomonas aeruginosa dans l'eau. Cette méthode se fonde sur la croissance d'organismes cibles dans un milieu liquide et le calcul du nombre le plus probable (NPP) d'organismes en se référant aux tables du NPP. Le présent document s'applique à différents types d'eau. Par exemple, les eaux destinées aux hôpitaux, l'eau potable et les eaux en bouteille non gazéifiées destinées à la consommation humaine, les eaux souterraines, les eaux de piscine et de spa, y compris celles contenant des nombres importants de bactéries hétérotrophes. Le présent document ne s'applique pas aux eaux en bouteille gazéifiées, aux eaux en bouteille aromatisées, aux eaux de tour de refroidissement ou à l'eau de mer, pour lesquelles cette méthode n'a pas été validée. Par conséquent, ces eaux ne relèvent pas du domaine d'application du présent document. Les laboratoires peuvent utiliser la méthode présentée dans le présent document pour ces matrices en prenant les mesures adéquates de validation des performances de cette méthode avant son utilisation. L'essai se fonde sur une technologie de recherche des enzymes bactériennes qui signale la présence de P. aeruginosa en hydrolysant un substrat de 7‑amino‑4‑méthylcoumarine aminopeptidase présent dans un réactif spécial. Les cellules de P. aeruginosa se développent et se reproduisent rapidement à l'aide de l'apport important en acides aminés, vitamines et autres nutriments présents dans le réactif. Les souches de P. aeruginosa en développement actif présentent une enzyme qui dissocie le substrat de 7‑amido‑coumarine aminopeptidase, générant un produit qui présente une fluorescence sous une lumière ultraviolette (UV). L'essai décrit dans le présent document fournit un résultat confirmé dans un délai de 24 h sans avoir besoin de confirmer les puits positifs.

Kakovost vode - Ugotavljanje prisotnosti in števila Pseudomonas aeruginosa - 2. del: Metoda najverjetnejšega števila

Ta dokument določa metodo za ugotavljanje števila Pseudomonas aeruginosa v vodi. Metoda temelji na rasti ciljnih organizmov v tekočem mediju in izračunu najverjetnejšega števila (MPN) organizmov v skladu s preglednicami MPN.
Ta dokument se uporablja za različne vrste vod, na primer vodo v bolnišnicah, pitno vodo in ustekleničeno vodo brez dodanega ogljikovega dioksida, ki je namenjena za pitje, podtalnico, vodo v bazenih in toplicah, vključno s tistimi, ki vsebujejo veliko število heterotrofnih bakterij v ozadju. Ta dokument se ne uporablja za ustekleničeno vodo z dodanim ogljikovim dioksidom, ustekleničeno vodo z okusom, vodo v hladilnem stolpu ali morsko vodo, za katere metoda ni bila potrjena. Slednje zato ne spadajo na področje uporabe tega dokumenta. Laboratoriji lahko metodo, predstavljeno v tem dokumentu, uporabijo za te matrice, če pred uporabo ustrezno potrdijo njeno učinkovitost. Preskus temelji na tehnologiji zaznavanja bakterijskih encimov, ki signalizira prisotnost P. aeruginosa s hidrolizo substrata 7-amino-4-metilkumarin aminopeptidaze, ki je prisoten v posebnem reagentu. Celice P. aeruginosa hitro rastejo in se razmnožujejo z uporabo bogate zaloge aminokislin, vitaminov in drugih hranilnih snovi, ki so prisotne v reagentu. Aktivno rastoči sevi P. aeruginosa imajo encim, ki cepi substrat 7-amido-kumarinske aminopeptidaze, pri čemer se sprosti produkt, ki fluorescira pod ultravijolično (UV) svetlobo. Preskus, opisan v tem dokumentu, poda potrjen rezultat v 24 urah brez potrebe po nadaljnjem potrjevanju pozitivnih izvorov.

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 18-Jul-2018
• ICS: 13.060.70 - Examination of biological properties of water
• Technical Committee: ISO/TC 147/SC 4 - Microbiological methods
• Drafting Committee: ISO/TC 147/SC 4 - Microbiological methods
• Current Stage: 9093 - International Standard confirmed
• Completion Date: 04-Jan-2024
• Ref Project: SIST ISO 16266-2:2019 - Water quality - Detection and enumeration of Pseudomonas aeruginosa - Part 2: Most probable number method

Standards Content (Sample)

SLOVENSKI STANDARD
SIST ISO 16266-2:2019
01-maj-2019
Kakovost vode - Ugotavljanje prisotnosti in števila Pseudomonas aeruginosa - 2.
del: Metoda najverjetnejšega števila
Water quality - Detection and enumeration of Pseudomonas aeruginosa - Part 2: Most
probable number method
Qualité de l'eau - Recherche et dénombrement de Pseudomonas aeruginosa - Partie 2:
Méthode du nombre le plus probable
Ta slovenski standard je istoveten z: ISO 16266-2:2018
ICS:
13.060.70 Preiskava bioloških lastnosti Examination of biological
vode properties of water
SIST ISO 16266-2:2019 en
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

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SIST ISO 16266-2:2019

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SIST ISO 16266-2:2019
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 16266-2
First edition
2018-07
Water quality — Detection and
enumeration of Pseudomonas
aeruginosa —
Part 2:
Most probable number method
Qualité de l'eau — Recherche et dénombrement de Pseudomonas
aeruginosa —
Partie 2: Méthode du nombre le plus probable
Reference number
ISO 16266-2:2018(E)
©
ISO 2018

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SIST ISO 16266-2:2019
ISO 16266-2:2018(E)

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below or ISO’s member body in the country of the requester.
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Published in Switzerland
ii © ISO 2018 – All rights reserved

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SIST ISO 16266-2:2019
ISO 16266-2:2018(E)
Contents Page
Foreword . v
Introduction . vi
1  Scope . 1
2  Normative references . 1
3  Terms and definitions . 2
4  Principle . 2
5  Apparatus and gla sswa r e . 2
6  Culture media, diluents and reagents . 3
6.1  Basic materials . 3
6.2  Diluent . 3
6.3  Antifoam B . 3
7  Sampling . 4
8  Procedure . 4
8.1  Transport and storage of the samples . 4
8.2  Preparation of the sample and inoculation of media . 4
8.2.1  Preparation of 100 ml samples . 4
8.2.2  Preparation of 250 ml samples . 4
8.3  Incubation and differentiation .
...

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 16266-2
First edition
2018-07
Water quality — Detection and
enumeration of Pseudomonas
aeruginosa —
Part 2:
Most probable number method
Qualité de l'eau — Recherche et dénombrement de Pseudomonas
aeruginosa —
Partie 2: Méthode du nombre le plus probable
Reference number
ISO 16266-2:2018(E)
©
ISO 2018

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Contents Page
Foreword . v
Introduction . vi
1  Scope . 1
2  Normative references . 1
3  Terms and definitions . 2
4  Principle . 2
5  Apparatus and gla sswa r e . 2
6  Culture media, diluents and reagents . 3
6.1  Basic materials . 3
6.2  Diluent . 3
6.3  Antifoam B . 3
7  Sampling . 4
8  Procedure . 4
8.1  Transport and storage of the samples . 4
8.2  Preparation of the sample and inoculation of media . 4
8.2.1  Preparation of 100 ml samples . 4
8.2.2  Preparation of 250 ml samples . 4
8.3  Incubation and differentiation . 4
8.4  Examination of results . 5
9  Expression of results . 5
10  Quality assurance . 5
11  Test report . 5
Annex A (informative) Further microbiological information about Pseudomonas
aeruginosa .
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 16266-2
Première édition
2018-07
Qualité de l'eau — Recherche et
dénombrement de Pseudomonas
aeruginosa —
Partie 2:
Méthode du nombre le plus probable
Water quality — Detection and enumeration of Pseudomonas
aeruginosa —
Part 2: Most probable number method
Numéro de référence
ISO 16266-2:2018(F)
© ISO 2018

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ISO 16266-2:2018(F)
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
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Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en œuvre, aucune partie de cette
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
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CH-1214 Vernier, Genève
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Web: www.iso.org
Publié en Suisse
ii
  © ISO 2018 – Tous droits réservés

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ISO 16266-2:2018(F)
Sommaire Page
Avant-propos.iv
Introduction . v
1 Domaine d'application . 1
2 Références normatives . 2
3 Termes et définitions . 2
4 Principe . 3
5 Appareillage et verrerie . 3
6 Milieux de culture, diluants et réactifs . 4
6.1 Substances de base . 4
6.2 Diluant . 4
6.3 Antimousse B . 4
7 Échantillonnage . 4
8 Mode opératoire . 4
8.1 Transport et conservation des échantillons . 4
8.2 Préparation de l'échantillon et ensemencement des milieux . 5
8.2.1 Préparation des échantillons de 100 ml . 5
8.2.2 Préparation des échantillons de 250 ml . 5
8.3 Incubation et différenciation . 5
8.4 Examen des résultats . 6
9 Expression des résultats . 6
10 Assurance qualité . 6
11 Rapport d'essai . 7
Annexe A (informative) Informations microbiologiques complémentaires sur Pseudomonas
aeruginosa . 8
Annexe B (normative) Scelleuse Quanti-Tray et calcul des résultats .
...

ISO/TC 147/SC 4
Date : 2018-07
ISO 16266-2:2018 (F)
ISO/TC 147/SC 4
Secrétariat : DIN
Qualité de l'eau — Recherche et dénombrement de Pseudomonas
aeruginosa — Partie 2 : Méthode du nombre le plus probable
Water quality — Detection and enumeration of Pseudomonas aeruginosa — Part 2: Most probable
number method

ICS : 13.060.70

Type du document:  Norme internationale
Sous-type du document:
Stade du document:  (60) Publication
Langue du document:  F

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Type du document:  Norme internationale
Sous-type du document:
Stade du document:  (60) Publication
Langue du document:  F

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ISO 16266-2:2018(F)
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Fax : + 41 22 749 09 47
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Publié en Suisse
© ISO 2018 — Tous droits réservés
iv

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ISO 16266-2:2018(F)
Sommaire Page
Avant-propos . vi
Introduction . vii
1 Domaine d'application . 1
2 Références normatives . 2
3 Termes et définitions . 2
4 Principe . 3
5 Appareillage et verrerie . 3
6 Milieux de culture, diluants et réactifs . 4
6.1 Substances de base . 4
6.2 Diluant . 4
6.3 Antimousse B . 4
7 Échantillonnage . 4
8 Mode opératoire . 4
8.1 Transport et conservation des échantillons . 4
8.2 Préparation de l'échantillon et ensemencement des milieux . 5
8.2.1 Préparation des échantillons de 100 ml . 5
8.2.2 Préparation des échantillons de 250 ml . 5
8.3 Incubation et différenciation . 5
8.4 Examen des résultats . 6
9 Expression des résultats . 6
10 Assurance qualité . 6
11 Rapport d'essai .
...

SLOVENSKI STANDARD
kSIST ISO/FDIS 16266-2:2018
01-junij-2018
Kakovost vode - Ugotavljanje prisotnosti in števila Pseudomonas aeruginosa - 2.
del: Metoda najverjetnejšega števila
Water quality - Detection and enumeration of Pseudomonas aeruginosa - Part 2: Most
probable number method
Qualité de l'eau - Recherche et dénombrement de Pseudomonas aeruginosa - Partie 2:
Méthode du nombre le plus probable
Ta slovenski standard je istoveten z: ISO/FDIS 16266-2
ICS:
13.060.70 Preiskava bioloških lastnosti Examination of biological
vode properties of water
kSIST ISO/FDIS 16266-2:2018 en
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

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kSIST ISO/FDIS 16266-2:2018

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kSIST ISO/FDIS 16266-2:2018
FINAL
INTERNATIONAL ISO/FDIS
DRAFT
STANDARD 16266-2
ISO/TC 147/SC 4
Water quality — Detection and
Secretariat: DIN
enumeration of Pseudomonas
Voting begins on:
2018-04-05 aeruginosa —
Voting terminates on:
Part 2:
2018-05-31
Most probable number method
Qualité de l'eau — Recherche et dénombrement de
Pseudomonas aeruginosa —
Partie 2: Méthode du nombre le plus probable
RECIPIENTS OF THIS DRAFT ARE INVITED TO
SUBMIT, WITH THEIR COMMENTS, NOTIFICATION
OF ANY RELEVANT PATENT RIGHTS OF WHICH
THEY ARE AWARE AND TO PROVIDE SUPPOR TING
DOCUMENTATION.
IN ADDITION TO THEIR EVALUATION AS
Reference number
BEING ACCEPTABLE FOR INDUSTRIAL, TECHNO-
ISO/FDIS 16266-2:2018(E)
LOGICAL, COMMERCIAL AND USER PURPOSES,
DRAFT INTERNATIONAL STANDARDS MAY ON
OCCASION HAVE TO BE CONSIDERED IN THE
LIGHT OF THEIR POTENTIAL TO BECOME STAN-
DARDS TO WHICH REFERENCE MAY BE MADE IN
©
NATIONAL REGULATIONS. ISO 2018

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kSIST ISO/FDIS 16266-2:2018
ISO/FDIS 16266-2:2018(E)

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kSIST ISO/FDIS 16266-2:2018
ISO/FDIS 16266-2:2018(E)
Contents Page
Foreword . v
Introduction . vi
1  Scope . 1
2  Normative references . 1
3  Terms and definitions . 2
4  Principle . 2
5  Apparatus and gla sswa r e . 2
6  Culture media, diluents and reagents . 3
6.1  Basic materials . 3
6.2  Diluent . 3
6.3  Antifoam B . 3
7  Sampling . 3
8  Procedure . 4
8.1  Transport and storage of the samples .
...