Water quality — Evaluation of the aerobic biodegradability of organic compounds at low concentrations — Part 1: Shake-flask batch test with surface water or surface water/sediment suspensions

ISO 14592-1:2002 specifies a test method for evaluating the biodegradability of organic test compounds by aerobic microorganisms in surface waters by means of a shake-flask batch test with suspended biomass. It is applicable to natural surface water, free from coarse particles to simulate a pelagic environment (pelagic test) or to surface water with suspended solids or sediments added to obtain a level of 0,1 g/l to 1 g/l dry mass (suspended sediment test) to simulate a water-to-sediment interface or a water body with resuspended sediment material. ISO 14592-1:2002 is applicable to organic test compounds present in lower concentrations (normally below 100 micrograms per litre) than those of natural carbon substrates also present in the system. Under these conditions, the test compounds serve as a secondary substrate and the kinetics for biodegradation would be expected to be first order (non-growth kinetics). This test method is not recommended for use as proof of ultimate biodegradation which is better assessed using other standardized tests. It is also not applicable to studies on metabolite formation and accumulation which require higher test concentrations.

Qualité de l'eau — Évaluation de la biodégradabilité aérobie des composés organiques présents en faibles concentrations — Partie 1: Essai en lots de flacons agités avec des eaux de surface ou des suspensions eaux de surface/sédiments

L'ISO 14592-1:2002 spécifie une méthode d'essai pour l'évaluation de la biodégradabilité de composés d'essai organiques par des micro-organismes aérobies au moyen d'un essai en lots de flacons agités. Elle s'applique à des eaux de surface naturelles exemptes de particules grossières pour simuler un environnement pélagique (essai pélagique), ou à des eaux de surface avec des sédiments en suspension ajoutés pour obtenir des concentrations de 0,1 g/l à 1 g/l en masse sèche, pour simuler une pièce d'eau avec sédiments en suspension (essai avec suspension de sédiments). L'ISO 14592-1:2002 s'applique aux composés d'essai organiques présents en concentrations plus faibles (normalement inférieures à 100 microgrammes/l) que celles des substrats carbonés naturels également présents dans le système. Dans ces conditions, les composés d'essai ont la fonction de substrat secondaire, et il est attendu que la cinétique de biodégradation soit du premier ordre (cinétique sans croissance). L'utilisation de cette méthode d'essai n'est pas recommandée comme preuve de la biodégradation ultime, qui peut s'évaluer de manière plus fiable en utilisant d'autres essais normalisés. Elle n'est pas recommandée non plus pour étudier la formation et l'accumulation de métabolites, ce qui requiert des concentrations d'essai plus élevées.

Kakovost vode - Vrednotenje aerobne biorazgradljivosti organskih spojin pri nizkih koncentracijah - 1. del: Šaržni preskus s stresanjem steklenic s površinsko vodo ali suspenzijami površinske vode in usedlin

Ta del ISO 14592 določa preskusno metodo za vrednotenje biorazgradljivosti organskih preskusnih spojin z aerobnih mikroorganizmov s šaržnim preskusom s stresanjem steklenic. Velja za naravno površinsko vodo brez grobih delcev za simulacijo pelagičnega okolja (»pelagični preskus«) ali za površinsko vodo z dodanimi odloženimi usedlinami za doseganje stopnje od 0.1 g/l do 1 g/l suhe mase za simulacijo vodnega telesa z odloženo usedlino (»preskus z odloženo usedlino»). Ta del ISO 14592 velja za organske preskusne spojine, prisotne pri nižjih koncentracijah (običajno pod 100 µg/l), kot so koncentracije naravnih substratov ogljika, ki so tudi prisotni v sistemu. Pod temi pogoji preskusne spojine služijo kot substrat drugotnega pomena, za kinetiko biorazgradljivosti pa se pričakuje, da je le-ta prva na vrsti (kinetika »ne rasti«). Ta preskusna metoda se ne priporoča za uporabo pri dokazovanju končne biorazgradljivosti, ki se jo lažje določi z drugimi standardiziranimi preskusi (glej ISO/TR 15462). Prav tako ni primerna za študije tvorbe in kopičenja metabolita, ki zahtevajo višje preskusne koncentracije.

General Information

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Publication Date
18-Nov-2002
Current Stage
9093 - International Standard confirmed
Completion Date
27-Jun-2024

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ISO 14592-1:2010
English language
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ISO 14592-1:2002 - Water quality — Evaluation of the aerobic biodegradability of organic compounds at low concentrations — Part 1: Shake-flask batch test with surface water or surface water/sediment suspensions Released:13. 08. 2003
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ISO 14592-1:2002 - Water quality -- Evaluation of the aerobic biodegradability of organic compounds at low concentrations
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ISO 14592-1:2002 - Qualité de l'eau — Évaluation de la biodégradabilité aérobie des composés organiques présents en faibles concentrations — Partie 1: Essai en lots de flacons agités avec des eaux de surface ou des suspensions eaux de surface/sédiments Released:3. 03. 2003
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ISO 14592-1:2002 - Qualité de l'eau -- Évaluation de la biodégradabilité aérobie des composés organiques présents en faibles concentrations
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Standards Content (Sample)


SLOVENSKI STANDARD
01-september-2010
Kakovost vode - Vrednotenje aerobne biorazgradljivosti organskih spojin pri
nizkih koncentracijah - 1. del: Šaržni preskus s stresanjem steklenic s površinsko
vodo ali suspenzijami površinske vode in usedlin
Water quality - Evaluation of the aerobic biodegradability of organic compounds at low
concentrations - Part 1: Shake-flask batch test with surface water or surface
water/sediment suspensions
Qualité de l'eau - Évaluation de la biodégradabilité aérobie des composés organiques
présents en faibles concentrations - Partie 1: Essai en lots de flacons agités avec des
eaux de surface ou des suspensions eaux de surface/sédiments
Ta slovenski standard je istoveten z: ISO 14592-1:2002
ICS:
13.060.10 Voda iz naravnih virov Water of natural resources
13.060.70 Preiskava bioloških lastnosti Examination of biological
vode properties of water
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 14592-1
First edition
2002-11-15
Corrected version
2003-08-01
Water quality — Evaluation of the aerobic
biodegradability of organic compounds at
low concentrations —
Part 1:
Shake-flask batch test with surface water or
surface water/sediment suspensions
Qualité de l'eau — Évaluation de la biodégradabilité aérobie des composés
organiques présents en faibles concentrations —
Partie 1: Essai en lots de flacons agités avec des eaux de surface ou
des suspensions eaux de surface/sédiments

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©
ISO 2002
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that a problem relating to it is found, please inform the Central Secretariat at the address given below.

©  ISO 2002
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means, electronic
or mechanical, including photocopying and microfilm, without permission in writing from either ISO at the address below or ISO's member body
in the country of the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2002 – All rights reserved

Contents Page
Foreword . iv
Introduction. v
1 Scope. 1
2 Normative reference. 1
3 Terms, definitions and symbols . 1
4 Principle . 4
5 Reagents and media . 5
6 Apparatus. 7
7 Test environment and conditions. 7
8 Procedure. 8
9 Calculation . 11
10 Validity of the test . 13
11 Test report. 13
Annex A (informative) Guidance on the use of C-labelled compounds . 14
Bibliography. 22

Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies (ISO
member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO technical
committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and non-governmental, in
liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical
Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 3.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards adopted
by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an International
Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this part of ISO 14592 may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 14592-1 was prepared by Technical Committee ISO/TC 147, Water quality, Subcommittee SC 5, Biological
methods.
ISO 14592 consists of the following parts, under the general title Water quality — Evaluation of the aerobic
biodegradability of organic compounds at low concentrations:
 Part 1: Shake-flask batch test with surface water or surface water/sediment suspensions
 Part 2: Continuous flow river model with attached biomass
This corrected version of ISO 14592-1:2002 incorporates corrections to
 the reference given in the third item of the list in 8.2.1;
 the reference given in the penultimate line of 8.2.1;
 the reference given in the last line of the second paragraph of 8.4.1.

iv © ISO 2002 – All rights reserved

Introduction
This International Standard consists of two parts. Part 1 describes a die-away batch test for either surface water
with or without added sediment in suspension simulating either a pelagic aquatic environment or a
water-to-sediment interface. Part 2 describes a continuous flow system simulating a river with biomass attached to
stationary surfaces.
This test has been specifically designed to provide information on the biodegradation behaviour and kinetics of test
compounds present in low concentrations, i.e. sufficiently low to ensure that they simulate the biodegradation
kinetics which would be expected to occur in natural environmental systems.
Before conducting this test, it is necessary to have information on the biodegradability behaviour of the test
compound at higher concentrations (e.g. in standard biodegradation tests), and, if possible, on abiotic degradability
or elimination from water, as well as relevant physico-chemical data. This information is necessary for proper
experimental planning and interpretation of results.
When this test method is used with a single environmental sample of surface water (either with or without the
addition of sediment), a laboratory-derived first-order biodegradation rate can be estimated for one single point in
time and space. The test system may be more consistent and provide more reliable biodegradation results if it is
adapted to the test compound at a specifically maintained concentration. This may be achieved using the optional
semi-continuous procedural variant of the method.

INTERNATIONAL STANDARD ISO 14592-1:2002(E)

Water quality — Evaluation of the aerobic biodegradability
of organic compounds at low concentrations —
Part 1:
Shake-flask batch test with surface water or surface
water/sediment suspensions
WARNING AND SAFETY PRECAUTIONS — Activated sludge, sewage and effluent contain potentially
pathogenic organisms. Therefore appropriate precautions should be taken when handling them. Toxic and
dangerous test compounds and those whose properties are unknown should be handled with care.
Radiolabelled compounds, if used, should be handled respecting existing rules and legislation.
1 Scope
This part of ISO 14592 specifies a test method for evaluating the biodegradability of organic test compounds by
aerobic microorganisms by means of a shake-flask batch test. It is applicable to natural surface water, free from
coarse particles to simulate a pelagic environment (“pelagic test”) or to surface water with suspended sediments
added to obtain a level of 0,1 g/l to 1 g/l dry mass to simulate a water body with suspended sediment (“suspended
sediment test”).
This part of ISO 14592 is applicable to organic test compounds present in lower concentrations (normally below
100 µg/l) than those of natural carbon substrates also present in the system. Under these conditions, the test
compounds serve as a secondary substrate and the kinetics for biodegradation would be expected to be first order
(“non-growth” kinetics).
This test method is not recommended for use as proof of ultimate biodegradation which is better assessed using
other standardized tests (see ISO/TR 15462). It is also not well suited to studies on metabolite formation and
accumulation which require higher test concentrations.
2 Normative reference
The following normative document contains provisions which, through reference in this text, constitute provisions of
this part of ISO 14592. For dated references, subsequent amendments to, or revisions of, any of these publications
do not apply. However, parties to agreements based on this part of ISO 14592 are encouraged to investigate the
possibility of applying the most recent editions of the normative documents indicated below. For undated
references, the latest edition of the normative document referred to applies. Members of ISO and IEC maintain
registers of currently valid International Standards.
ISO/TR 15462, Water quality — Selection of tests for biodegradability
3 Terms, definitions and symbols
3.1 Terms and definitions
For the purpose of this part of ISO 14592, the following terms and definitions apply.
3.1.1
ultimate aerobic biodegradation
breakdown of a chemical compound or organic matter by microorganisms, in the presence of oxygen, to carbon
dioxide (CO ), water and mineral salts of any other elements present (mineralization) and the production of new
biomass
NOTE Total mineralization may be different from ultimate aerobic biodegradation in that total mineralization includes
secondary mineralization of biosynthesis products. The kinetics may therefore deviate from first-order kinetics in particular
towards the end of the experiment. In this part of ISO 14592, primary aerobic biodegradation is determined when using
substance specific analysis and total mineralization when using radiolabelled compounds.
3.1.2
primary biodegradation
structural change (transformation) of a chemical compound by microorganisms resulting in the loss of a specific
property of that compound
3.1.3
dissolved organic carbon
DOC
part of the organic carbon in a sample of water which cannot be removed by specified phase separation
NOTE Phase separation may be obtained, for example, by centrifugation of the sample of test water at 40 000 m/s for
15 min or by membrane-filtration using membranes with pores of 0,45 µm diameter.
3.1.4
lag phase
t
lag
time from the start of a test until significant biodegradation (about 10 % of the maximum level) can be measured
NOTE Lag phase is expressed in days (d).
3.1.5
maximum level of biodegradation
degree of biodegradation of a chemical compound or organic matter in a test above which no further
biodegradation takes place during the test
NOTE The maximum level of biodegradation is expressed as a percentage.
3.1.6
primary substrate
major carbon and energy source which is essential for growth or maintenance of microorganisms
3.1.7
secondary substrate
substrate component present at such low concentrations, that by its degradation, only insignificant amounts of
carbon and energy are supplied to the competent microorganisms, as compared to the carbon and energy supplied
by their degradation of primary substrates
3.1.8
degradation rate constant
k
rate constant for first-order or pseudo first-order kinetics which indicates the rate at which degradation processes
occur
−1
NOTE 1 The
...


INTERNATIONAL ISO
STANDARD 14592-1
First edition
2002-11-15
Corrected version
2003-08-01
Water quality — Evaluation of the aerobic
biodegradability of organic compounds at
low concentrations —
Part 1:
Shake-flask batch test with surface water or
surface water/sediment suspensions
Qualité de l'eau — Évaluation de la biodégradabilité aérobie des composés
organiques présents en faibles concentrations —
Partie 1: Essai en lots de flacons agités avec des eaux de surface ou
des suspensions eaux de surface/sédiments

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ii © ISO 2002 – All rights reserved

Contents Page
Foreword . iv
Introduction. v
1 Scope. 1
2 Normative reference. 1
3 Terms, definitions and symbols . 1
4 Principle . 4
5 Reagents and media . 5
6 Apparatus. 7
7 Test environment and conditions. 7
8 Procedure. 8
9 Calculation . 11
10 Validity of the test . 13
11 Test report. 13
Annex A (informative) Guidance on the use of C-labelled compounds . 14
Bibliography. 22

Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies (ISO
member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO technical
committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and non-governmental, in
liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical
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The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards adopted
by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an International
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patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 14592-1 was prepared by Technical Committee ISO/TC 147, Water quality, Subcommittee SC 5, Biological
methods.
ISO 14592 consists of the following parts, under the general title Water quality — Evaluation of the aerobic
biodegradability of organic compounds at low concentrations:
 Part 1: Shake-flask batch test with surface water or surface water/sediment suspensions
 Part 2: Continuous flow river model with attached biomass
This corrected version of ISO 14592-1:2002 incorporates corrections to
 the reference given in the third item of the list in 8.2.1;
 the reference given in the penultimate line of 8.2.1;
 the reference given in the last line of the second paragraph of 8.4.1.

iv © ISO 2002 – All rights reserved

Introduction
This International Standard consists of two parts. Part 1 describes a die-away batch test for either surface water
with or without added sediment in suspension simulating either a pelagic aquatic environment or a
water-to-sediment interface. Part 2 describes a continuous flow system simulating a river with biomass attached to
stationary surfaces.
This test has been specifically designed to provide information on the biodegradation behaviour and kinetics of test
compounds present in low concentrations, i.e. sufficiently low to ensure that they simulate the biodegradation
kinetics which would be expected to occur in natural environmental systems.
Before conducting this test, it is necessary to have information on the biodegradability behaviour of the test
compound at higher concentrations (e.g. in standard biodegradation tests), and, if possible, on abiotic degradability
or elimination from water, as well as relevant physico-chemical data. This information is necessary for proper
experimental planning and interpretation of results.
When this test method is used with a single environmental sample of surface water (either with or without the
addition of sediment), a laboratory-derived first-order biodegradation rate can be estimated for one single point in
time and space. The test system may be more consistent and provide more reliable biodegradation results if it is
adapted to the test compound at a specifically maintained concentration. This may be achieved using the optional
semi-continuous procedural variant of the method.

INTERNATIONAL STANDARD ISO 14592-1:2002(E)

Water quality — Evaluation of the aerobic biodegradability
of organic compounds at low concentrations —
Part 1:
Shake-flask batch test with surface water or surface
water/sediment suspensions
WARNING AND SAFETY PRECAUTIONS — Activated sludge, sewage and effluent contain potentially
pathogenic organisms. Therefore appropriate precautions should be taken when handling them. Toxic and
dangerous test compounds and those whose properties are unknown should be handled with care.
Radiolabelled compounds, if used, should be handled respecting existing rules and legislation.
1 Scope
This part of ISO 14592 specifies a test method for evaluating the biodegradability of organic test compounds by
aerobic microorganisms by means of a shake-flask batch test. It is applicable to natural surface water, free from
coarse particles to simulate a pelagic environment (“pelagic test”) or to surface water with suspended sediments
added to obtain a level of 0,1 g/l to 1 g/l dry mass to simulate a water body with suspended sediment (“suspended
sediment test”).
This part of ISO 14592 is applicable to organic test compounds present in lower concentrations (normally below
100 µg/l) than those of natural carbon substrates also present in the system. Under these conditions, the test
compounds serve as a secondary substrate and the kinetics for biodegradation would be expected to be first order
(“non-growth” kinetics).
This test method is not recommended for use as proof of ultimate biodegradation which is better assessed using
other standardized tests (see ISO/TR 15462). It is also not well suited to studies on metabolite formation and
accumulation which require higher test concentrations.
2 Normative reference
The following normative document contains provisions which, through reference in this text, constitute provisions of
this part of ISO 14592. For dated references, subsequent amendments to, or revisions of, any of these publications
do not apply. However, parties to agreements based on this part of ISO 14592 are encouraged to investigate the
possibility of applying the most recent editions of the normative documents indicated below. For undated
references, the latest edition of the normative document referred to applies. Members of ISO and IEC maintain
registers of currently valid International Standards.
ISO/TR 15462, Water quality — Selection of tests for biodegradability
3 Terms, definitions and symbols
3.1 Terms and definitions
For the purpose of this part of ISO 14592, the following terms and definitions apply.
3.1.1
ultimate aerobic biodegradation
breakdown of a chemical compound or organic matter by microorganisms, in the presence of oxygen, to carbon
dioxide (CO ), water and mineral salts of any other elements present (mineralization) and the production of new
biomass
NOTE Total mineralization may be different from ultimate aerobic biodegradation in that total mineralization includes
secondary mineralization of biosynthesis products. The kinetics may therefore deviate from first-order kinetics in particular
towards the end of the experiment. In this part of ISO 14592, primary aerobic biodegradation is determined when using
substance specific analysis and total mineralization when using radiolabelled compounds.
3.1.2
primary biodegradation
structural change (transformation) of a chemical compound by microorganisms resulting in the loss of a specific
property of that compound
3.1.3
dissolved organic carbon
DOC
part of the organic carbon in a sample of water which cannot be removed by specified phase separation
NOTE Phase separation may be obtained, for example, by centrifugation of the sample of test water at 40 000 m/s for
15 min or by membrane-filtration using membranes with pores of 0,45 µm diameter.
3.1.4
lag phase
t
lag
time from the start of a test until significant biodegradation (about 10 % of the maximum level) can be measured
NOTE Lag phase is expressed in days (d).
3.1.5
maximum level of biodegradation
degree of biodegradation of a chemical compound or organic matter in a test above which no further
biodegradation takes place during the test
NOTE The maximum level of biodegradation is expressed as a percentage.
3.1.6
primary substrate
major carbon and energy source which is essential for growth or maintenance of microorganisms
3.1.7
secondary substrate
substrate component present at such low concentrations, that by its degradation, only insignificant amounts of
carbon and energy are supplied to the competent microorganisms, as compared to the carbon and energy supplied
by their degradation of primary substrates
3.1.8
degradation rate constant
k
rate constant for first-order or pseudo first-order kinetics which indicates the rate at which degradation processes
occur
−1
NOTE 1 The degradation rate constant is expressed in inverse days (d ).
NOTE 2 For a batch experiment, k is estimated from the initial part of the degradation curve obtained after the end of the lag
phase. For a continuously operating test system, k can be estimated from a mass balance for the reactor using data collected
under steady-state conditions.
2 © ISO 2002 – All rights reserved

3.1.9
degradation half-life
T
1/2
characteristic of the rate of a first-order reaction and corresponds to the time interval necessary for the
concentration to decrease by a factor of two
NOTE 1 The degradation half-life is expressed in days (d).
NOTE 2 The degradation half-life and the degradation rate constant are related by the following equation:
T = ln2/k
1/2
NOTE 3 The degradation half-life T for first-order reactions should not be confused with the half-life time, T , which is
1/2 50
often used to describe the environmental behaviour of pesticides and which is simply the time to reach 50 % of total
biodegradation. The half-life time T may be derived from degradation curves without making assumptions about the kinetics.
3.2 Symbols
Symbol Description Units
1) 14
A activity of the C-radiolabelled test compound becquerels(Bq)
14 14
A inorganic C-activity ( CO evolved as a result of biodegradation) becquerels(Bq)
I 2
A total organic C-acti
...


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biodegradability of organic compounds at
low concentrations —
Part 1:
Shake-flask batch test with surface water or
surface water/sediment suspensions
Qualité de l'eau — Évaluation de la biodégradabilité aérobie des composés
organiques présents en faibles concentrations —
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des suspensions eaux de surface/sédiments

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Foreword . iv
Introduction. v
1 Scope. 1
2 Normative reference. 1
3 Terms, definitions and symbols . 1
4 Principle . 4
5 Reagents and media . 5
6 Apparatus. 7
7 Test environment and conditions. 7
8 Procedure. 8
9 Calculation . 11
10 Validity of the test . 13
11 Test report. 13
Annex A (informative) Guidance on the use of C-labelled compounds . 14
Bibliography. 22

Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies (ISO
member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO technical
committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and non-governmental, in
liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical
Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 3.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards adopted
by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an International
Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this part of ISO 14592 may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 14592-1 was prepared by Technical Committee ISO/TC 147, Water quality, Subcommittee SC 5, Biological
methods.
ISO 14592 consists of the following parts, under the general title Water quality — Evaluation of the aerobic
biodegradability of organic compounds at low concentrations:
 Part 1: Shake-flask batch test with surface water or surface water/sediment suspensions
 Part 2: Continuous flow river model with attached biomass
This corrected version of ISO 14592-1:2002 incorporates corrections to
 the reference given in the third item of the list in 8.2.1;
 the reference given in the penultimate line of 8.2.1;
 the reference given in the last line of the second paragraph of 8.4.1.

iv © ISO 2002 – All rights reserved

Introduction
This International Standard consists of two parts. Part 1 describes a die-away batch test for either surface water
with or without added sediment in suspension simulating either a pelagic aquatic environment or a
water-to-sediment interface. Part 2 describes a continuous flow system simulating a river with biomass attached to
stationary surfaces.
This test has been specifically designed to provide information on the biodegradation behaviour and kinetics of test
compounds present in low concentrations, i.e. sufficiently low to ensure that they simulate the biodegradation
kinetics which would be expected to occur in natural environmental systems.
Before conducting this test, it is necessary to have information on the biodegradability behaviour of the test
compound at higher concentrations (e.g. in standard biodegradation tests), and, if possible, on abiotic degradability
or elimination from water, as well as relevant physico-chemical data. This information is necessary for proper
experimental planning and interpretation of results.
When this test method is used with a single environmental sample of surface water (either with or without the
addition of sediment), a laboratory-derived first-order biodegradation rate can be estimated for one single point in
time and space. The test system may be more consistent and provide more reliable biodegradation results if it is
adapted to the test compound at a specifically maintained concentration. This may be achieved using the optional
semi-continuous procedural variant of the method.

INTERNATIONAL STANDARD ISO 14592-1:2002(E)

Water quality — Evaluation of the aerobic biodegradability
of organic compounds at low concentrations —
Part 1:
Shake-flask batch test with surface water or surface
water/sediment suspensions
WARNING AND SAFETY PRECAUTIONS — Activated sludge, sewage and effluent contain potentially
pathogenic organisms. Therefore appropriate precautions should be taken when handling them. Toxic and
dangerous test compounds and those whose properties are unknown should be handled with care.
Radiolabelled compounds, if used, should be handled respecting existing rules and legislation.
1 Scope
This part of ISO 14592 specifies a test method for evaluating the biodegradability of organic test compounds by
aerobic microorganisms by means of a shake-flask batch test. It is applicable to natural surface water, free from
coarse particles to simulate a pelagic environment (“pelagic test”) or to surface water with suspended sediments
added to obtain a level of 0,1 g/l to 1 g/l dry mass to simulate a water body with suspended sediment (“suspended
sediment test”).
This part of ISO 14592 is applicable to organic test compounds present in lower concentrations (normally below
100 µg/l) than those of natural carbon substrates also present in the system. Under these conditions, the test
compounds serve as a secondary substrate and the kinetics for biodegradation would be expected to be first order
(“non-growth” kinetics).
This test method is not recommended for use as proof of ultimate biodegradation which is better assessed using
other standardized tests (see ISO/TR 15462). It is also not well suited to studies on metabolite formation and
accumulation which require higher test concentrations.
2 Normative reference
The following normative document contains provisions which, through reference in this text, constitute provisions of
this part of ISO 14592. For dated references, subsequent amendments to, or revisions of, any of these publications
do not apply. However, parties to agreements based on this part of ISO 14592 are encouraged to investigate the
possibility of applying the most recent editions of the normative documents indicated below. For undated
references, the latest edition of the normative document referred to applies. Members of ISO and IEC maintain
registers of currently valid International Standards.
ISO/TR 15462, Water quality — Selection of tests for biodegradability
3 Terms, definitions and symbols
3.1 Terms and definitions
For the purpose of this part of ISO 14592, the following terms and definitions apply.
3.1.1
ultimate aerobic biodegradation
breakdown of a chemical compound or organic matter by microorganisms, in the presence of oxygen, to carbon
dioxide (CO ), water and mineral salts of any other elements present (mineralization) and the production of new
biomass
NOTE Total mineralization may be different from ultimate aerobic biodegradation in that total mineralization includes
secondary mineralization of biosynthesis products. The kinetics may therefore deviate from first-order kinetics in particular
towards the end of the experiment. In this part of ISO 14592, primary aerobic biodegradation is determined when using
substance specific analysis and total mineralization when using radiolabelled compounds.
3.1.2
primary biodegradation
structural change (transformation) of a chemical compound by microorganisms resulting in the loss of a specific
property of that compound
3.1.3
dissolved organic carbon
DOC
part of the organic carbon in a sample of water which cannot be removed by specified phase separation
NOTE Phase separation may be obtained, for example, by centrifugation of the sample of test water at 40 000 m/s for
15 min or by membrane-filtration using membranes with pores of 0,45 µm diameter.
3.1.4
lag phase
t
lag
time from the start of a test until significant biodegradation (about 10 % of the maximum level) can be measured
NOTE Lag phase is expressed in days (d).
3.1.5
maximum level of biodegradation
degree of biodegradation of a chemical compound or organic matter in a test above which no further
biodegradation takes place during the test
NOTE The maximum level of biodegradation is expressed as a percentage.
3.1.6
primary substrate
major carbon and energy source which is essential for growth or maintenance of microorganisms
3.1.7
secondary substrate
substrate component present at such low concentrations, that by its degradation, only insignificant amounts of
carbon and energy are supplied to the competent microorganisms, as compared to the carbon and energy supplied
by their degradation of primary substrates
3.1.8
degradation rate constant
k
rate constant for first-order or pseudo first-order kinetics which indicates the rate at which degradation processes
occur
−1
NOTE 1 The degradation rate constant is expressed in inverse days (d ).
NOTE 2 For a batch experiment, k is estimated from the initial part of the degradation curve obtained after the end of the lag
phase. For a continuously operating test system, k can be estimated from a mass balance for the reactor using data collected
under steady-state conditions.
2 © ISO 2002 – All rights reserved

3.1.9
degradation half-life
T
1/2
characteristic of the rate of a first-order reaction and corresponds to the time interval necessary for the
concentration to decrease by a factor of two
NOTE 1 The degradation half-life is expressed in days (d).
NOTE 2 The degradation half-life and the degradation rate constant are related by the following equation:
T = ln2/k
1/2
NOTE 3 The degradation half-life T for first-order reactions should not be confused with the half-life time, T , which is
1/2 50
often used to describe the environmental behaviour of pesticides and which is simply the time to reach 50 % of total
biodegradation. The half-life time T may be derived from degradation curves without making assumptions about the kinetics.
3.2 Symbols
Symbol Description Units
1) 14
A activity of the C-radiolabelled test compound becquerels(Bq)
14 14
A inorganic C-activity ( CO evolved as a result of biodegradation) becquerels(Bq)
I 2
A total organic C-acti
...


NORME ISO
INTERNATIONALE 14592-1
Première édition
2002-11-15
Qualité de l'eau — Évaluation de la
biodégradabilité aérobie des composés
organiques présents en faibles
concentrations —
Partie 1:
Essai en lots de flacons agités avec des
eaux de surface ou des suspensions
eaux de surface/sédiments
Water quality — Evaluation of the aerobic biodegradability of organic
compounds at low concentrations —
Part 1: Shake-flask batch test with surface water or surface water
sediment suspensions
Numéro de référence
©
ISO 2002
PDF – Exonération de responsabilité
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peut être imprimé ou visualisé, mais ne doit pas être modifié à moins que l'ordinateur employé à cet effet ne bénéficie d'une licence
autorisant l'utilisation de ces polices et que celles-ci y soient installées. Lors du téléchargement de ce fichier, les parties concernées
acceptent de fait la responsabilité de ne pas enfreindre les conditions de licence d'Adobe. Le Secrétariat central de l'ISO décline toute
responsabilité en la matière.
Adobe est une marque déposée d'Adobe Systems Incorporated.
Les détails relatifs aux produits logiciels utilisés pour la création du présent fichier PDF sont disponibles dans la rubrique General Info
du fichier; les paramètres de création PDF ont été optimisés pour l'impression. Toutes les mesures ont été prises pour garantir
l'exploitation de ce fichier par les comités membres de l'ISO. Dans le cas peu probable où surviendrait un problème d'utilisation,
veuillez en informer le Secrétariat central à l'adresse donnée ci-dessous.

©  ISO 2002
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée sous
quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l'accord écrit
de l'ISO à l'adresse ci-après ou du comité membre de l'ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
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Web www.iso.org
Version française parue en 2003
Publié en Suisse
ii © ISO 2002 — Tous droits réservés

Sommaire Page
Avant-propos. iv
Introduction . v
1 Domaine d'application. 1
2 Référence normative. 1
3 Termes, définitions et symboles . 2
4 Principe . 5
5 Réactifs et milieux. 5
6 Appareillage. 7
7 Environnement et conditions d'essai . 8
8 Mode opératoire . 9
9 Calculs. 12
10 Validité de l'essai . 14
11 Rapport d'essai . 14
Annexe A (informative) Guide sur l'utilisation de composés marqués au C. 16
Bibliographie . 24

Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 3.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres
pour vote. Leur publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments de la présente partie de l'ISO 14592 peuvent faire
l'objet de droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour
responsable de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
La Norme internationale ISO 14592-1 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 147, Qualité de l'eau,
sous-comité SC 5, Méthodes biologiques.
L'ISO 14592 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Qualité de l'eau — Évaluation
de la biodégradabilité aérobie des composés organiques présents en faibles concentrations:
— Partie 1: Essai en lots de flacons agités avec des eaux de surface ou des suspensions eaux de
surface/sédiments
— Partie 2: Modèle de cours d'eau à courant continu avec biomasse associée
L'annexe A est donnée uniquement à titre d'information.
iv © ISO 2002 — Tous droits réservés

Introduction
La présente Norme internationale comprend deux parties. La Partie 1 décrit un essai de disparition par lots
avec des eaux de surface avec ou sans suspension de sédiments ajoutés, simulant soit un environnement
aquatique pélagique, soit une interface eau/sédiment. La Partie 2 décrit un système à courant continu
simulant un cours d'eau avec une biomasse associée à des surfaces stationnaires.
L'essai a été spécifiquement mis au point pour fournir des informations sur le comportement de
biodégradation et les cinétiques de dégradation de composés d'essai présents en faibles concentrations,
c'est-à-dire suffisamment basses pour assurer qu'elles simulent des cinétiques de biodégradation que l'on
rencontrerait dans des systèmes environnementaux naturels.
Avant de procéder à cet essai, il est nécessaire de disposer d'informations sur le comportement de
biodégradabilité du composé d'essai à des concentrations plus élevées (par exemple dans le cadre d'essais
normalisés de biodégradation) ainsi que, si possible, d'informations sur sa dégradabilité abiotique ou sur son
élimination dans l'eau, et des données physico-chimiques correspondantes. Ces informations sont
nécessaires afin de planifier l'expérience et d'interpréter les résultats convenablement.
Lorsque cette méthode d'essai est utilisée avec un échantillon unique d'eau de surface (avec ou sans
sédiment ajouté), elle peut fournir une estimation de laboratoire d'une vitesse de dégradation de premier ordre
pour un point spatio-temporel unique. Le système d'essai peut être plus cohérent et fournir des résultats de
biodégradation plus fiables s'il est adapté au composé d'essai maintenu à une concentration spécifique. Ceci
peut être obtenu en utilisant une variante facultative en semi-continu du mode opératoire de la présente
méthode.
NORME INTERNATIONALE ISO 14592-1:2002(F)

Qualité de l'eau — Évaluation de la biodégradabilité aérobie des
composés organiques présents en faibles concentrations —
Partie 1:
Essai en lots de flacons agités avec des eaux de surface
ou des suspensions eaux de surface/sédiments
AVERTISSEMENT ET PRÉCAUTIONS DE SÉCURITÉ — Les boues activées, les eaux usées et les
effluents contiennent des organismes potentiellement pathogènes. C'est pourquoi il convient de
prendre les mesures de précaution appropriées lors de leur manipulation. Il est recommandé de faire
preuve de prudence lors de la manipulation de composés d'essai toxiques et dangereux et de ceux
dont les propriétés sont inconnues. Il convient de respecter les règles et réglementations en vigueur
en cas de manipulation de composés radio-marqués.
1 Domaine d'application
La présente partie de l'ISO 14592 spécifie une méthode d'essai pour l'évaluation de la biodégradabilité de
composés d'essai organiques par des micro-organismes aérobies au moyen d'un essai en lots de flacons
agités. Elle s'applique à des eaux de surface naturelles exemptes de particules grossières pour simuler un
environnement pélagique («essai pélagique»), ou à des eaux de surface avec des sédiments en suspension
ajoutés pour obtenir des concentrations de 0,1 g/l à 1 g/l en masse sèche, pour simuler une pièce d'eau avec
sédiments en suspension («essai avec suspension de sédiments»).
La présente partie de l'ISO 14592 s'applique aux composés d'essai organiques présents en concentrations
plus faibles (normalement inférieures à 100 µg/l) que celles des substrats carbonés naturels également
présents dans le système. Dans ces conditions, les composés d'essai ont la fonction de substrat secondaire,
et il est attendu que la cinétique de biodégradation soit du premier ordre (cinétique «sans croissance»).
L'utilisation de cette méthode d'essai n'est pas recommandée comme preuve de la biodégradation ultime, qui
peut s'évaluer de manière plus fiable en utilisant d'autres essais normalisés (voir l'ISO/TR 15462). Elle n'est
pas recommandée non plus pour étudier la formation et l'accumulation de métabolites, ce qui requiert des
concentrations d'essai plus élevées.
2 Référence normative
Le document normatif suivant contient des dispositions qui, par suite de la référence qui y est faite,
constituent des dispositions valables pour la présente partie de l'ISO 14592. Pour les références datées, les
amendements ultérieurs ou les révisions de ces publications ne s'appliquent pas. Toutefois, les parties
prenantes aux accords fondés sur la présente partie de l'ISO 14592 sont invitées à rechercher la possibilité
d'appliquer l'édition la plus récente du document normatif indiqué ci-après. Pour les références non datées, la
dernière édition du document normatif en référence s'applique. Les membres de l'ISO et de la CEI possèdent
le registre des Normes internationales en vigueur.
ISO/TR 15462 , Qualité de l'eau — Sélection d'essais de biodégradabilité
3 Termes, définitions et symboles
3.1 Termes et définitions
Pour les besoins de la présente partie de l'ISO 14592, les termes et définitions suivants s'appliquent.
3.1.1
biodégradation aérobie ultime
décomposition d'un composé chimique ou d'une matière organique par des micro-organismes, en présence
d'oxygène, en dioxyde de carbone (CO ), eau et sels minéraux des autres éléments éventuellement présents
(minéralisation), et production d'une nouvelle biomasse
NOTE La minéralisation totale peut être différente de la biodégradation aérobie ultime car la minéralisation totale
inclut la minéralisation secondaire des produits de biosynthèse. En conséquence, la cinétique peut dévier de la cinétique
du premier ordre, en particulier vers la fin de l'essai. Dans la présente partie de l'ISO 14592, la biodégradation aérobie
primaire est déterminée lorsqu'une analyse spécifique de la substance est utilisée, et la minéralisation totale est
déterminée lorsque des composés radio-marqués sont utilisés.
3.1.2
biodégradation primaire
modification structurelle (transformation) d'un composé chimique par des micro-organismes résultant en la
perte d'une propriété spécifique de ce composé
3.1.3
carbone organique dissous
COD
partie du carbone organique présent dans un échantillon d'eau qui ne peut être éliminée par une séparation
spécifiée des phases
NOTE La séparation des phases peut être obtenue, par exemple, par centrifugation de l'échantillon d'eau à
40 000 m/s pendant 15 min ou par filtration sur membrane dont le diamètre des pores est de 0,45 µm.
3.1.4
phase de latence
t
latence
période entre le début d'un essai et le moment où une dégradation significative (environ 10 % du niveau
maximum de dégradation) peut être mesurée
NOTE La phase de latence est exprimée en jours (j).
3.1.5
niveau maximal de biodégradation
taux maximal de biodégradation d'un composé chimique ou d'une matière organique au cours d'un essai au-
delà duquel aucune biodégradation ne survient plus pendant l'essai
NOTE Le niveau maximal de biodégradation est exprimé en pourcentage.
3.1.6
substrat primaire
source majeure de carbone et d'énergie essentielle à la croissance ou au maintien des micro-organismes
3.1.7
substrat secondaire
élément de substrat présent à des concentrations si faibles que, par sa dégradation, seules des quantités
insignifiantes de carbone et d'énergie sont fournies aux micro-organismes, par comparaison avec le carbone
et l'énergie fournis par la dégradation des substrats primaires
2 © ISO 2002 — Tous droits réservés

3.1.8
constante de vitesse de dégradation
k
constante de vitesse pour cinétique de premier ordre ou de pseudo-premier ordre, qui indique la vitesse à
laquelle se produisent les processus de dégradation
−1
NOTE 1 La constante de vitesse de dégradation est exprimée en inverse de jours (j ).
NOT
...


NORME ISO
INTERNATIONALE 14592-1
Première édition
2002-11-15
Qualité de l'eau — Évaluation de la
biodégradabilité aérobie des composés
organiques présents en faibles
concentrations —
Partie 1:
Essai en lots de flacons agités avec des
eaux de surface ou des suspensions
eaux de surface/sédiments
Water quality — Evaluation of the aerobic biodegradability of organic
compounds at low concentrations —
Part 1: Shake-flask batch test with surface water or surface water
sediment suspensions
Numéro de référence
©
ISO 2002
PDF – Exonération de responsabilité
Le présent fichier PDF peut contenir des polices de caractères intégrées. Conformément aux conditions de licence d'Adobe, ce fichier
peut être imprimé ou visualisé, mais ne doit pas être modifié à moins que l'ordinateur employé à cet effet ne bénéficie d'une licence
autorisant l'utilisation de ces polices et que celles-ci y soient installées. Lors du téléchargement de ce fichier, les parties concernées
acceptent de fait la responsabilité de ne pas enfreindre les conditions de licence d'Adobe. Le Secrétariat central de l'ISO décline toute
responsabilité en la matière.
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du fichier; les paramètres de création PDF ont été optimisés pour l'impression. Toutes les mesures ont été prises pour garantir
l'exploitation de ce fichier par les comités membres de l'ISO. Dans le cas peu probable où surviendrait un problème d'utilisation,
veuillez en informer le Secrétariat central à l'adresse donnée ci-dessous.

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Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée sous
quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l'accord écrit
de l'ISO à l'adresse ci-après ou du comité membre de l'ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
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Version française parue en 2003
Publié en Suisse
ii © ISO 2002 — Tous droits réservés

Sommaire Page
Avant-propos. iv
Introduction . v
1 Domaine d'application. 1
2 Référence normative. 1
3 Termes, définitions et symboles . 2
4 Principe . 5
5 Réactifs et milieux. 5
6 Appareillage. 7
7 Environnement et conditions d'essai . 8
8 Mode opératoire . 9
9 Calculs. 12
10 Validité de l'essai . 14
11 Rapport d'essai . 14
Annexe A (informative) Guide sur l'utilisation de composés marqués au C. 16
Bibliographie . 24

Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 3.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres
pour vote. Leur publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments de la présente partie de l'ISO 14592 peuvent faire
l'objet de droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour
responsable de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
La Norme internationale ISO 14592-1 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 147, Qualité de l'eau,
sous-comité SC 5, Méthodes biologiques.
L'ISO 14592 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Qualité de l'eau — Évaluation
de la biodégradabilité aérobie des composés organiques présents en faibles concentrations:
— Partie 1: Essai en lots de flacons agités avec des eaux de surface ou des suspensions eaux de
surface/sédiments
— Partie 2: Modèle de cours d'eau à courant continu avec biomasse associée
L'annexe A est donnée uniquement à titre d'information.
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Introduction
La présente Norme internationale comprend deux parties. La Partie 1 décrit un essai de disparition par lots
avec des eaux de surface avec ou sans suspension de sédiments ajoutés, simulant soit un environnement
aquatique pélagique, soit une interface eau/sédiment. La Partie 2 décrit un système à courant continu
simulant un cours d'eau avec une biomasse associée à des surfaces stationnaires.
L'essai a été spécifiquement mis au point pour fournir des informations sur le comportement de
biodégradation et les cinétiques de dégradation de composés d'essai présents en faibles concentrations,
c'est-à-dire suffisamment basses pour assurer qu'elles simulent des cinétiques de biodégradation que l'on
rencontrerait dans des systèmes environnementaux naturels.
Avant de procéder à cet essai, il est nécessaire de disposer d'informations sur le comportement de
biodégradabilité du composé d'essai à des concentrations plus élevées (par exemple dans le cadre d'essais
normalisés de biodégradation) ainsi que, si possible, d'informations sur sa dégradabilité abiotique ou sur son
élimination dans l'eau, et des données physico-chimiques correspondantes. Ces informations sont
nécessaires afin de planifier l'expérience et d'interpréter les résultats convenablement.
Lorsque cette méthode d'essai est utilisée avec un échantillon unique d'eau de surface (avec ou sans
sédiment ajouté), elle peut fournir une estimation de laboratoire d'une vitesse de dégradation de premier ordre
pour un point spatio-temporel unique. Le système d'essai peut être plus cohérent et fournir des résultats de
biodégradation plus fiables s'il est adapté au composé d'essai maintenu à une concentration spécifique. Ceci
peut être obtenu en utilisant une variante facultative en semi-continu du mode opératoire de la présente
méthode.
NORME INTERNATIONALE ISO 14592-1:2002(F)

Qualité de l'eau — Évaluation de la biodégradabilité aérobie des
composés organiques présents en faibles concentrations —
Partie 1:
Essai en lots de flacons agités avec des eaux de surface
ou des suspensions eaux de surface/sédiments
AVERTISSEMENT ET PRÉCAUTIONS DE SÉCURITÉ — Les boues activées, les eaux usées et les
effluents contiennent des organismes potentiellement pathogènes. C'est pourquoi il convient de
prendre les mesures de précaution appropriées lors de leur manipulation. Il est recommandé de faire
preuve de prudence lors de la manipulation de composés d'essai toxiques et dangereux et de ceux
dont les propriétés sont inconnues. Il convient de respecter les règles et réglementations en vigueur
en cas de manipulation de composés radio-marqués.
1 Domaine d'application
La présente partie de l'ISO 14592 spécifie une méthode d'essai pour l'évaluation de la biodégradabilité de
composés d'essai organiques par des micro-organismes aérobies au moyen d'un essai en lots de flacons
agités. Elle s'applique à des eaux de surface naturelles exemptes de particules grossières pour simuler un
environnement pélagique («essai pélagique»), ou à des eaux de surface avec des sédiments en suspension
ajoutés pour obtenir des concentrations de 0,1 g/l à 1 g/l en masse sèche, pour simuler une pièce d'eau avec
sédiments en suspension («essai avec suspension de sédiments»).
La présente partie de l'ISO 14592 s'applique aux composés d'essai organiques présents en concentrations
plus faibles (normalement inférieures à 100 µg/l) que celles des substrats carbonés naturels également
présents dans le système. Dans ces conditions, les composés d'essai ont la fonction de substrat secondaire,
et il est attendu que la cinétique de biodégradation soit du premier ordre (cinétique «sans croissance»).
L'utilisation de cette méthode d'essai n'est pas recommandée comme preuve de la biodégradation ultime, qui
peut s'évaluer de manière plus fiable en utilisant d'autres essais normalisés (voir l'ISO/TR 15462). Elle n'est
pas recommandée non plus pour étudier la formation et l'accumulation de métabolites, ce qui requiert des
concentrations d'essai plus élevées.
2 Référence normative
Le document normatif suivant contient des dispositions qui, par suite de la référence qui y est faite,
constituent des dispositions valables pour la présente partie de l'ISO 14592. Pour les références datées, les
amendements ultérieurs ou les révisions de ces publications ne s'appliquent pas. Toutefois, les parties
prenantes aux accords fondés sur la présente partie de l'ISO 14592 sont invitées à rechercher la possibilité
d'appliquer l'édition la plus récente du document normatif indiqué ci-après. Pour les références non datées, la
dernière édition du document normatif en référence s'applique. Les membres de l'ISO et de la CEI possèdent
le registre des Normes internationales en vigueur.
ISO/TR 15462 , Qualité de l'eau — Sélection d'essais de biodégradabilité
3 Termes, définitions et symboles
3.1 Termes et définitions
Pour les besoins de la présente partie de l'ISO 14592, les termes et définitions suivants s'appliquent.
3.1.1
biodégradation aérobie ultime
décomposition d'un composé chimique ou d'une matière organique par des micro-organismes, en présence
d'oxygène, en dioxyde de carbone (CO ), eau et sels minéraux des autres éléments éventuellement présents
(minéralisation), et production d'une nouvelle biomasse
NOTE La minéralisation totale peut être différente de la biodégradation aérobie ultime car la minéralisation totale
inclut la minéralisation secondaire des produits de biosynthèse. En conséquence, la cinétique peut dévier de la cinétique
du premier ordre, en particulier vers la fin de l'essai. Dans la présente partie de l'ISO 14592, la biodégradation aérobie
primaire est déterminée lorsqu'une analyse spécifique de la substance est utilisée, et la minéralisation totale est
déterminée lorsque des composés radio-marqués sont utilisés.
3.1.2
biodégradation primaire
modification structurelle (transformation) d'un composé chimique par des micro-organismes résultant en la
perte d'une propriété spécifique de ce composé
3.1.3
carbone organique dissous
COD
partie du carbone organique présent dans un échantillon d'eau qui ne peut être éliminée par une séparation
spécifiée des phases
NOTE La séparation des phases peut être obtenue, par exemple, par centrifugation de l'échantillon d'eau à
40 000 m/s pendant 15 min ou par filtration sur membrane dont le diamètre des pores est de 0,45 µm.
3.1.4
phase de latence
t
latence
période entre le début d'un essai et le moment où une dégradation significative (environ 10 % du niveau
maximum de dégradation) peut être mesurée
NOTE La phase de latence est exprimée en jours (j).
3.1.5
niveau maximal de biodégradation
taux maximal de biodégradation d'un composé chimique ou d'une matière organique au cours d'un essai au-
delà duquel aucune biodégradation ne survient plus pendant l'essai
NOTE Le niveau maximal de biodégradation est exprimé en pourcentage.
3.1.6
substrat primaire
source majeure de carbone et d'énergie essentielle à la croissance ou au maintien des micro-organismes
3.1.7
substrat secondaire
élément de substrat présent à des concentrations si faibles que, par sa dégradation, seules des quantités
insignifiantes de carbone et d'énergie sont fournies aux micro-organismes, par comparaison avec le carbone
et l'énergie fournis par la dégradation des substrats primaires
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3.1.8
constante de vitesse de dégradation
k
constante de vitesse pour cinétique de premier ordre ou de pseudo-premier ordre, qui indique la vitesse à
laquelle se produisent les processus de dégradation
−1
NOTE 1 La constante de vitesse de dégradation est exprimée en inverse de jours (j ).
NOT
...

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