ISO 6888:1983
(Main)Microbiology — General guidance for enumeration of Staphylococcus aureus — Colony count technique
Microbiology — General guidance for enumeration of Staphylococcus aureus — Colony count technique
Microbiologie — Directives générales pour le dénombrement de Staphylococcus aureus — Méthode par comptage des colonies
General Information
Relations
Buy Standard
Standards Content (Sample)
International Standard
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATIONWE~YHAPOJU4AR OPrAHM3AWlR IlO CTAH~PTH3ALWl~RGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Microbiology - General guidance for enumeration of
Colony count technique
Staphylococcus aureus -
- tIMthode par camptage des colonies
Microbiologie - Directives g&&ales pour Ie dknombrement de Staphylococcus aureus
First edition - 1983-05-15
UDC 663.1 Ref. No. ISO 68884983 (EI
Descriptors : agricultural products, food products, tests, microbiological analysis, determination, staphylococcus.
Price based on 7 pages
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Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of
national Standards bodies (ISO member bodies). The work of developing International
Standards is carried out through ISO technical committees. Every member body
interested in a subject for which a technical committee has been authorized has the
right to be represented on that committee. International organizations, governmental
and non-governmental, in liaison with ISO, also take patt in the work.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to
the member bodies for approval before their acceptance as International Standards by
the ISO Council.
International Standard ISO 6888 was developed by Technical Committee ISO/TC 34,
Agricultural food products, and was circulated to the member bodies in November
1981.
lt has been approved by the member bodies of the following countries:
Australia India Sri Lanka
Brazil Israel Tanzania
Canada Italy Thailand
Chile Mexico Turkey
Czechoslovakia Netherlands United Kingdom
Egypt, Arab Rep. of New Zealand USA
Ethiopia
Poland USSR
France Romania Venezuela
Y ugoslavia
Germany, F. R. South Africa, Rep. of
Hungary Spain
The member body of the following country expressed disapproval of the document on
technical grounds :
Portugal
0 International Organkation for Standardkation, 1983 0
Printed in Switzerland
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ISO 68884983 (E)
INTERNATIONAL STANDARD
General guidance for enumeration of
Microbiology -
Colony count technique
Staph yfococcus aureus -
0 Introduction 0.3 For statistical reasons, the lowest limit for the number of
colonies counted per dish has been set at 15, but, for practical
purposes, a count of lower numbers of Staphylococcus aureus
0.1 This International Standard is intended to provide general
guidance for the examination of products not dealt with by ex- is often required. The confidence limits of such determinations
(estimated counts) are given in the annex.
isting International Standards and for the consideration of
bodies preparing reference microbiological methods of test for
application to food products or to animal feeding stuffs. In view
of the large variety of products within this field of application,
1 Scope and field of application
these guidelines may not be appropriate for some products in
every detail, and for some other products it may be necessary
This International Standard gives general guidance for the
to use different methods. Nevertheless, it is hoped that, in all
enumeration of Staphylococcus aureus in products intended
cases, every attempt will be made to apply these guidelines as
for human consumption or feeding of animals.
far as possible and that deviations from them will only be made
if absolutely necessary for technical reasons.
2 Reference
When this International Standard is next reviewed, account will
be taken of all information then available regarding the extent
ISO 6887, Microbiology - General guidance for the prep-
to which the guidelines have been followed and the reasons
ara tion of dilu tions for microbiological examina tion.
which necessitated deviation from them in the case of particu-
lar products.
3 Definition
The harmonization of test methods cannot be immediate, and,
for certain groups of products, International Standards and/or
For the purpose of this International Standard, the following
national Standards, that do not comply with these guidelines,
definition applies.
may already exist. In cases where International Standards
already exist for the product to be tested, they should be
Staphylococcus aureus: Micro-organisms which form typical
followed, but it is hoped that, when they are reviewed, they will
and/or atypical colonies on the surface of a selective culture
be aligned with this International Standard so that, eventually,
medium and which show a strongly positive coagulase
the only remaining departures from these guidelines will be
reaction.
those necessary for well established technical reasons.
0.2 For the purpose of this International Standard, the con-
4 Principle
firmation of Staphylococcus aureus is based on a strongly
positive coagulase reaction, but it is recognized that some
4.1 Inoculation of the surface of a solid selective culture
strains of Staphylococcus aureus give weakly positive
medium, using duplicate plates, with a specified quantity of the
coagulase reactions. These latter strains may be confused with
test Sample if the product is liquid, or with a specified quantity
other bacteria but they may be distinguished from such other
of the initial Suspension in the case of other products.
bacteria by the use of additional tests not included in the Inter-
national Standard, such as the production of thermonuclease,
of acid from mannitol, the production of haemolysin and sen- Inoculation, under the same conditions, using decimal dilutions
sitivity to lysostaphin 1). of the test Sample or of the initial Suspension.
1) See Devriese et al(1978) Staphylococcus hyicus (Sompolinsky 1953) comb. Nov. and Staphylococcus hyicus ssp. chromogens ssp. Nov. Wer-
national Journal of Systematic Bacteriology 28, pp. 482-490.
Bat teriological Analytical Manual, 5t h ed. 1978.
US Food and Drug Administration p. XI-4 + 5.
1
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ISO 6888-1983 (El
Add, if necessary, the 27,5 ml of the sulphamezathine
4.2 Incubation of the plates at 35 OC or 37 OC for 24 to 48 h.
(sulphadimidine, INN) Solution (5.3.2.2).
4.3 Calculation of the number of Staphylococcus aureus per
Adjust the pH so that after sterilization it is 7,2 at 25 OC.
millilitre, or per gram, of Sample from the number of typical
Transfer the medium in quantities of 90 ml to flasks or
and/or atypical colonies obtained on plates at dilution levels
bottles of capacity not more than 300 ml.
Chosen so as to give a significant result, and confirmed by the
coagulase test. Sterilize the medium for 15 min at 121 OC.
The medium may be stored for 1 month between 0 and
+5 OC.
5 Diluent and culture media
5.32 Solutions
5.1 Basic materials
5.3.2.1 Tellurite soiution
In Order to improve the reproducibility of the results, it is
recommended that, for the preparation of the diluent and
culture media, dehydrated basic components or complete Composition
dehydrated media and, for the egg yolk emulsion, a commer-
potassium tellurite3)
cially available preparation, be used. The manufacturer ’s in- Jr0 g
structions shall be rigorously followed. (dipotassium trioxotellurate)
water 100 ml
Chemical products shall be of recognized analytical quality.
Prepara tion
The water used shall be distilled or deionized water, and shall
be free from substances that might inhibit growth of Dissolve the potassium tellurite in the water with minimal
Staphylococcus aureus under the test conditions. heating.
Sterilize by filtration.
lf the diluent and the culture media are not used immediately,
The Solution may be stored for several months between 0
they shall be kept in the dark at a temperature between 0 and
and +5 OC.
+ 5 OC, in conditions that prevent any Change in their compo-
sition.
5.3.2.2 Sulphamezathine (sulphadimidine, INN) Solution
5.2 Diluent (only if the presence of Proteus is suspected)
.
See ISO 6887 and the specific Standard dealing with the prod-
Composition
uct to be examined.
sulphamezathine
02 9
sodium hydroxide Solution,
5.3 Agar mediuml)
c(NaOH) = 0,l mol/1 10 ml
water, to a final volume of 100 ml
5.3.1 Base medium
Bepara tion
Composition
Dissolve the sulphamezathine in the sodium hydroxide
tryptone
no 9
Solution.
yeast extract
lt0 g
Make up to a final volume of 100 ml with the water.
meat extract
50 g
glycine
12,o g
lithium chloride
50 g
5.3.2.3 Sodium pyruvate Solution
agar 12 to 20,o g2)
water 1 000 ml
Composition
and, if necessary:
sulphamezathine Solution (5.3.2.2) 27,5 ml sodium pyruvate
20,o g
100 ml
water
Bepara tion
Prepara tion
Dissolve the components or the complete agar base in the
water by boiling. Dissolve the sodium pyruvate in part of, the water.
1) The agar medium is that of Baird-Parker, J. Appl. BacterioL 25 (1962) 12, with the addition of sulphamezathine [sec Smith and Baird-Parker, ibid.
27 (1964) 781 if the presence of Proteus is suspected.
2) According to the manufacturer ’s instructions.
3) It is recommended to ensure beforehand that the potassium tellurite available is suitable for this test.
2
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ISO 68884983 (EI
sodium chloride
Make up to the final volume. 5,O g
disodium hydrogenorthophosphate
Sterilize by filtration.
(Na2HP04)
2,5 g
The Solution may be stored for not more than one month
water 1000 ml
between 0 and +5 OC.
Bepara tion
5.3.2.4 Egg-yolk emulsion (concentration approximately
Dissolve the components or the complete medium in the
20 % 1))
water by boiling.
Adjust the pH so that after sterilization it is 7,4 at 25 OC.
Preparation (if a commercial preparation is not available)
Transfer the culture medium to tubes or bottles in quantities
Using fresh hens’ eggs, separate the yolks from the whites.
of 10 ml.
Mix the yolks thoroughly with four times their volume of
Sterilize the medium for 20 min at 121 OC.
water.
The medium may be stored for several months between 0
Heat the mixture in the water bath (6.91, controlled at
and +5 OC.
45 + 0,5 OC, for 2 h and leave for 18 to 24 h at 0 to ‘+5 OC
to allow a precipitate to form.
5.5 Rabbit plasma2)
Decant the supernatant liquid and sterilize it by filtration,
unless the emulsion has been separated aseptically.
Use commercially available dehydrated rabbit Plasma and
rehydrate it according to the manufacturer ’s instructions. Add
The emulsion may be stored at 0 to +5 OC for not longer
EDTA3) Solution to give 0,l % EDTA in the rehydrated Plasma.
than 72 h.
If dehydrated rabbit Plasma is not available, dilute fresh sterile
5.3.3 Complete medium
rabbit Plasma 1 + 3 with sterile water.
Composition Before use, test each batch of Plasma with weakly and strongly
coagulase positive strains of Staphylococcus aureus and
base medium (5.3.1) 90 ml
strains of coagulase negative staphylococci.
potassium tellurite Solution (5.3.2.1)
1,0 ml
sodium pyruvate Solution (5.3.2.3)
5,0 ml
6 Apparatus and glassware
egg-yolk emulsion (5.3.2.4) 5,0 ml
NOTE - Disposable apparatus is an acceptable alternative to reusable
Prepara tion
glassware if it has suitable specifications.
Melt the base medium, then cool it to approximately 50 OC
Usual microbiological laboratory equipment and in particular
by means of the water bath (6.10).
Add the other liquids, mixing well after each addition.
6.1 Apparatus for dry sterilization (oven) or wet
sterilization (autoclave) (autoclave operating either separate-
5.3.4 Preparation of agar plates
ly or as part of an apparatus for preparing and distributing
medial.
Place 15 to 20 ml of the complete medium (5.3.31, cooled to ap-
Apparatus that will come into contact with the diluent, culture
proximately 45 OC, in sterile Petri dishes and allow to solidify.
media, and the Sample, except for apparatus that is supplied
The plates may be stored, Prior to drying, at 0 to + 5 OC for up sterile (in particular plastics apparatus), shall be sterilized by
one of the following methods
to 24 h.
a) by being kept at 170 to 175 OC for not less than 1 h in an
Dry the plates, preferably with the lids off and the agar surface
oven; or
downwards, in an oven or incubator (6.31, controlled at
50 + 1 OC, for 30 min.
b) by being kept at 121 + 1 OC for not less than 20 min in
an autoclave.
5.4 Brain-heart infusion broth
6.2 Incubator, capable of being controlled at 35 + 1 OC or
Composition
at 37 + 1 OC.
peptone
lO,O g
dehydrated calf
...
Norme internationale 6888
INTERNATIONAL ORGANiZATlON FOR STANDARDIZATlON*MEmPYHAPOIIHAR OPTAHbl3AUMR Il0 CTAHAAPTH3AUHM.ORGANlSATlON INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Microbiologie - Directives générales pour le
*
dénombrement de Staphyhoccus aureus - Méthode par
comptage des colonies
Microbiology - General guidance for enumeration of Staphylococcus aureus - Colony count technique
Première édition - 1983-05-15
CDU 663.1 Réf. no : IS0 6888-1983 (FI
5
Descripteurs : produit agricole, produit alimentaire, essai, analyse rnicrobiologique, détermination, staphylocoque.
8
Prix basé sur 7 pages
s
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Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d'organismes nationaux de normalisation (comités membres de I'ISO). L'élaboration
des Normes internationales est confiée aux comités techniques de I'ISO. Chaque
comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique
correspondant. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouverne-
mentales, en liaison avec I'ISO, participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I'ISO.
La Norme internationale IS0 6888 a été élaborée par le comité technique iSO/TC 34,
Produits agricoles alimentaires, et a été soumise aux comités membres en novembre
1981.
Les comités membres des pays suivants l'ont approuvée :
Afrique du Sud, Rép. d' Hongrie Sri Lanka
Allemagne, R.F.
Inde Tanzanie
Australie Israël Tchécoslovaquie
Brésil Italie Thaïlande
Canada Mexique Turquie
Chili Nouvelle-Zélande
URSS
Égypte, Rép. arabe d' Pays-Bas USA
Pologne Vénézuéla
Espagne
Éthiopie Roumanie Yougoslavie
France Royaume-Uni
Le comité membre du pays suivant l'a désapprouvée pour des raisons techniques:
Portugal
0 Organisation internationale de normalisation, 1983 O
Imprimé en Suisse
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IS0 6888-1983 (FI
NORME INTERNATIONALE
Microbiologie - Directives générales pour le
dénombrement de Staphylococcus aureus - Méthode par
comptage des colonies
O Introduction taires non inclus dans la présente Norme internationale, tels la
production de thermonucléase, d'acide à partir de mannitol,
0.1 La présente Norme internationale se propose de fournir d'hémolysine et la sensibilité à la lysostaphinel).
des directives générales pour l'examen microbiologique de pro-
duits non concernés par les Normes internationales existant
0.3 Pour des raisons statistiques, il est admis que la limite du
actuellement et pour être étudiées par les organismes élaborant
nombre de colonies le plus bas à compter par boîte est de 15,
des méthodes d'essai microbiologiques de référence destinées
mais il est souvent demandé, pour des besoins pratiques, de
à être appliquées à des produits alimentaires ou à des aliments
procéder à un comptage sur des nombres encore inférieurs de
pour animaux. En raison de la grande diversité des produits
Staphylococcus aureus. Les limites de confiance de telles
entrant dans ce domaine d'application, il est possible que ces
déterminations (estimation des petits nombres) sont données
directives, dans tous leurs détails, ne conviennent pas exacte-
en annexe.
ment à certains produits et que, pour certains autres produits, il
puisse être nécessaire d'employer des méthodes différentes.
Néanmoins, il est à espérer que, dans tous les cas, tous les
1 Objet et domaine d'application
efforts seront faits pour appliquer chaque fois qu'il sera possi-
ble les directives données et qu'on n'aura recours à des déroga-
La présente Norme internationale donne des directives généra-
tions que si cela est absolument nécessaire pour des raisons
les pour le dénombrement de Staphylococcus aureus dans les
techniques.
produits destinés à la consommation humaine ou à I'alimenta-
tion animale.
Lorsque la présente Norme internationale sera réexaminée, il
sera tenu compte de tous les renseignements disponibles à ce
moment-là, à savoir dans quelle mesure les directives auront
2 Référence
été suivies et les raisons pour lesquelles il aura été nécessaire
d'y déroger dans le cas de produits particuliers.
IS0 6887, Microbiologie - Directives générales pour la prépa-
ration des dilutions en vue de l'examen microbiologique.
L'harmonisation des méthodes d'essai ne peut pas être immé-
diate et, pour certains groupes de produits, des Normes inter-
nationales et/ou des normes nationales existent peut-être déjà,
3 Définition
qui ne concordent pas avec ces directives. Dans le cas où des
0
Normes internationales existent déjà pour le produit à contrô-
Dans le cadre de la présente Norme internationale, la définition
ler, elles devront être appliquées, mais il serait souhaitable que,
suivante est applicable.
lorsqu'elles viendront en révision, elles soient modifiées de
façon à se conformer à la présente Norme internationale si bien
Staphylococcus aureus: Micro-organismes formant des colo-
que, finalement, les seules divergences restantes seront celles
nies caractéristiques et/ou non caractéristiques à la surface
qui auront été nécessaires pour des raisons techniques bien
d'un milieu de culture sélectif et donnant une réaction forte-
établies.
ment positive à la coagulase.
0.2 Pour les besoins de la présente Norme internationale, la
4 Principe
confirmation de Staphylococcus aureus repose sur une réac-
tion fortement positive à la coagulase, mais il est reconnu que
certaines souches de Staphylococcus aureus donnent une
4.1 Ensemencement en surface d'un milieu sélectif solide,
réaction faiblement positive à la coagulase. Ces dernières sou-
coulé dans deux séries de boîtes, avec une quantité déterminée
ches peuvent donc être confondues avec d'autres bactéries; il
de l'échantillon pour essai si le produit concerné est liquide, ou
est possible d'en faire la distinction par des essais complémen-
de la suspension mère dans le cas d'autres produits.
1) Voir Devriese et alii (1978) Staphylococcus hyicus (Sompolinsky 1953) comb. Nov. and Staphylococcus hyicus ssp. chromogènes ssp. Nov. Inter-
national Journal of Systematic Bacteriology 28, pp. 482-490.
Bacteriological Analytical Manual 5th ed. 1978.
US Food and Drug Administration p. XI-4 + 5.
1
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IS0 6888-1983 (FI
Préparation
Dans les mêmes conditions, ensemencement des dilutions
décimales obtenues à partir de l'échantillon pour essai ou de la
Dissoudre les composants ou le milieu gélosé complet dans
suspension mère.
l'eau, en portant à ébullition.
à 35 OC ou à 37 OC durant Si nécessaire, ajouter les 27,5 ml de la solution de sulfamé-
4.2 Incubation de ces boîtes
24 à 48 h. zathine (sulfadimidine, INN) (5.3.2.2).
Ajuster le pH de sorte qu'après stérilisation, il soit de 7,2
4.3 Calcul du nombre de Staphylococcus aureus par millilitre à 25 OC.
ou par gramme d'échantillon, à partir du nombre de colonies
Répartir le milieu, par quantités de 90 ml, dans des flacons
caratéristiques etlou non caractéristiques obtenues dans des
de 300 ml de capacité maximale.
boîtes choisies aux niveaux de dilution donnant un résultat
significatif, et confirmées par l'essai de la coagulase. Stériliser le milieu à 121 OC durant 15 min.
Le milieu peut être conservé 1 mois entre O et +5 OC.
5 Diluant et milieux de culture
5.3.2 Solutions
5.1 Composants de base
5.3.2.1 Solution de tellurite
Pour améliorer la reproductibilité des résultats, il est recom-
mandé d'utiliser, pour la préparation du diluant et des milieux Composition
de culture, des composants de base déshydratés ou des milieux
complets déshydratés et, pour l'émulsion du jaune d'œuf, une tellurite de potassium3)
1,o g
préparation commerciale. Les instructions du fabricant doivent (trioxotellurate dipotassique)
être suivies scrupuleusement. 100 ml
eau
Les produits chimiques utilisés doivent être de qualité analyti-
Préparation
que reconnue.
Dissoudre le tellurite de potassium dans l'eau, en chauffant
L'eau utilisée doit être de l'eau distillée ou déminéralisée,
le moins possible.
exempte de substances susceptibles d'inhiber la croissance de
Stériliser par filtration.
Staphylococcus aureus dans les conditions de l'essai.
La solution peut être conservée plusieurs mois entre O et
Si le diluant et les milieux de culture ne sont pas utilisés extem-
+5 oc.
poranément, ils doivent être conservés à l'obscurité entre O et
+ 5 OC, dans des conditions évitant toute modification de leur
5.3.2.2 Solution de sulfamézathine (sulfadimidine, INN)
composition.
(seulement dans le cas où l'on suspecte la présence de Proteus)
5.2 Diluant
Composition
Voir I'ISO 6887 et la norme spécifique du produit à examiner.
sulfamézathine 02 9
solution d'hydroxyde de sodium,
c(Na0H) = 0,l mol/l 10 ml
5.3 Milieu gélosél)
eau, quantité suffisante pour 100 ml
5.3.1 Milieu de base
Préparation
Composition
Dissoudre la sulfamézathine dans la solution d'hydroxyde
de sodium.
tryptone
Compléter à 100 ml avec de l'eau.
extrait de levure
extrait de viande
glycine
5.3.2.3 Solution de pyruvate de sodium
chlorure de lithium
agar-agar
Composition
eau
et, si nécessaire:
pyruvate de sodium 20,o 9
eau 100 ml
solution de sulfamézathine (5.3.2.2) 27,5 ml
Le milieu gélosé est celui de Baird-Parker, J. Appl. Bacteriol. 25 (1962) 12, avec addition de sulfamézathine [voir Smith et Baird-Parker, ibid. 27
1)
(19641 781 dans le cas où l'on suspecte la présence de Proteus.
Selon les instructions du fabricant.
2)
3) II est recommandé de s'assurer au préalable que le tellurite de potassium dont on dispose convient pour cet essai.
2
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IS0 6888-1983 (F)
5.4 Bouillon cœur-cervelle
Préparation
Composition
Dissoudre le pyruvate de sodium dans une partie de l'eau.
Compléter au volume final.
peptone 10,o g
Stériliser par filtration.
extrait déshydraté de cervelle de veau 125 g
extrait déshydraté de cœur de bœuf 5,O g
La solution peut être conservée un mois au maximum entre
glucose 2,o 9
O et +5 OC.
chlorure de sodium 5,O g
hydrogéno-orthophosphate disodique
5.3.2.4 Émulsion de jaune d'œuf (à une concentration
(Na2HP04) 23 g
eau loo0 ml
d'environ 20 % "1
Préparation (à défaut de préparation commerciale) Préparation
Utiliser des œufs frais de poule et séparer les jaunes des Dissoudre les composants ou le milieu complet dans l'eau,
en portant à ébullition.
blancs.
Bien mélanger les jaunes avec quatre fois leur volume d'eau. Ajuster le pH de sorte qu'après stérilisation, il soit de 7,4
à 25 OC.
(6.9) réglé à
Chauffer le mélange dans le bain d'eau
45 f0,5 OC durant 2 h et entreposer entre O et +5 OC Répartir le milieu de culture, par quantités de 10 ml, dans
0
durant 18 à 24 h pour laisser se former un précipité. des tubes.
Laisser décanter et stériliser le liquide surnageant par filtra- Stériliser le milieu à 121 OC durant 20 min.
tion, sauf si l'émulsion a été séparée aseptiquement.
O et
Le milieu peut être conservé plusieurs mois entre
L'émulsion peut être conservée 72 h au maximum entre O et +5 oc.
+5 OC.
5.5 Plasma de lapin2)
5.3.3 Milieu complet
Utiliser un plasma déshydraté de lapin, disponible dans le com-
Composition
merce, et le réhydrater en se conformant aux instructions du
fabricant. Ajouter une solution d'EDTA31 de manière à avoir
milieu de base (5.3.1) 90 ml 0,l % d'EDTA dans le plasma réhydraté.
solution de tellurite de potassium (5.3.2.1) 1,0 ml
solution de pyruvate de sodium (5.3.2.3) 5,O ml
Si l'on ne peut se procurer du plasma de lapin déshydraté,
émulsion de jaune d'œuf (5.3.2.4) 5,O ml
diluer un plasma de lapin frais et stérile à 1 + 3 avec de l'eau
stérile.
Préparation
Avant utilisation, contrôler chaque lot de plasma avec des sou-
Faire fondre le milieu de base, puis le refroidir à environ
ches de Staphylococcus aureus faiblement et fortement positi-
50 OC au moyen du bain d'eau (6.10).
ves ainsi qu'avec des souches de staphylocoques coagulase
@ négative.
Ajouter les autres liquides, en mélangeant soigneusement
après chaque addition.
6 Appareillage et verrerie
5.3.4 Préparation des boîtes de milieu gélosé
NOTE - Le matériel à usage unique est acceptable au même titre que
Couler 15 à 20 ml du milieu complet (5.3.31, refroidi à environ
la verrerie réutilisable, si ses spécifications sont convenables.
45 OC, dans des boîtes de Petri stériles et laisser se solidifier.
Matériel courant de laboratoire de microbiologie, et notam-
Les boîtes peuvent être conservées, avant séchage, 24 h au
ment:
O et + 5 OC.
maximum entre
6.1 Appareil pour la stérilisation en chaleur sèche (four)
Sécher les boîtes, de préférence couvercle enlevé et surface de
ou en chaleur humide (autoclave) (autoclave autonome ou
la gélose tournée vers le bas, dans une étuve ou un incubateur
(6.3) réglé à 50 I 1 OC, durant 30 min. faisant partie d'un appareillage, pour préparer et répartir les
milieux).
1) Selon les instructions du fabricant.
2) Le plasma oxalaté ou heparinisé ne demande pas d'EDTA (Voir Baird-Parker, A.C. The Staphylococci, 1972, p. 11, ed. Cohen, J.O. Wiley-
lnterscience and Sons. Inc. New York, London).
3) Acide éthylène-diamine tétraacétique.
3
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IS0 6888-1983 (FI
9 Mode opératoire
Le matériel destiné à entrer en contact avec le diluant, les
milieux de culture et l'échantillon, sauf s'il est livré stérile (parti-
NOTE - Dans le cas où les échantillons sont fortement contaminés, il
culièrement le matériel en plastique), doi
...
Questions, Comments and Discussion
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