ISO 16869:2008

Plastics - Assessment of the effectiveness of fungistatic compounds in plastics formulations

ISO 16869:2008 specifies a method for determining the effectiveness of fungistatic compounds in protecting susceptible ingredients like plasticizers, stabilizers, etc., in plastics formulations. The method demonstrates whether or not a plastic product is actively protected against fungal attack. The evaluation is by visual examination. The test is applicable to any articles made of plastic that are in the form of films or plates no thicker than 10 mm. In addition, porous materials such as plastic foams may be tested provided that they are in the above-mentioned form. A minimum diffusion of the fungicides that migrate out of the matrix is necessary with this procedure. In contrast to ISO 846, the test films are not sprayed with a fungal spore suspension but covered with a layer of test agar containing spores. It has been found that this leads to a better distribution of the spores as well as providing a good supply of water necessary for spore germination on plastic surfaces that are normally hydrophobic.

Plastiques — Évaluation de l'efficacité des composés fongistatiques dans les formulations de plastiques

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 13-May-2008
• ICS: 83.080.01 - Plastics in general
• Technical Committee: ISO/TC 61/SC 6 - Ageing, chemical and environmental resistance
• Drafting Committee: ISO/TC 61/SC 6/WG 7 - Basic standards
• Current Stage: 9093 - International Standard confirmed
• Start Date: 14-Jun-2021
• Completion Date: 13-Dec-2025

Relations

• Revises: ISO 16869:2001 - Plastics - Assessment of the effectiveness of fungistatic compounds in plastics formulations
• Effective Date: 15-Apr-2008

Overview

ISO 16869:2008 - Plastics: Assessment of the effectiveness of fungistatic compounds in plastics formulations specifies a laboratory method to determine whether fungistatic additives incorporated into plastics protect susceptible ingredients (plasticizers, stabilizers, etc.) against fungal attack. The test applies to plastic articles in the form of films or plates (thickness ≤ 10 mm) and certain porous forms (e.g., foams) when cut to the required shape. Evaluation is by visual examination after exposure to fungal spores applied in an agar overlay, which promotes uniform spore distribution and water availability on hydrophobic plastic surfaces.

Key Topics and Requirements

• Test principle: Specimens are overlaid with a thin layer of nutrient‑salt agar containing a mixed fungal spore suspension. Growth (or inhibition) on and around the specimen indicates absence (or presence) of effective fungistatic action; migration of fungicides into agar can produce inhibition zones.
• Specimen dimensions: Round discs punched to 1–4 cm diameter, thickness not exceeding 10 mm; at least three replicates per material.
• Organisms: Standard test fungi include Aspergillus niger, Chaetomium globosum, Paecilomyces variotii, Penicillium funiculosum and Trichoderma longibrachiatum (reference strains from national culture collections).
• Culture media & conditions: Nutrient‑salt agar (pH ~5.5) is used for overlay; malt‑extract and Chaetomium agars are specified for cultivation. Plates are incubated at 24 °C ± 1 °C. Example procedural details (sterilization methods, media recipes, centrifugation and spore preparation) are included in the standard.
• Assessment: Visual scoring of fungal growth and any zone of inhibition; the method requires sufficient diffusion/migration of fungistat to be detected.
• Safety & competence: Handling potentially hazardous microorganisms requires trained personnel and appropriate biosafety practices.

Applications and Who Uses It

• Plastics manufacturers evaluating additive performance during formulation development.
• Additive (fungistat) suppliers verifying efficacy and supporting product claims.
• Quality control and testing laboratories performing routine batch verification or comparative testing.
• R&D teams optimizing plasticizer/stabilizer packages for resistance to biodeterioration.
• Regulatory and procurement specialists assessing material fitness for use in humidity-prone or biological-exposure environments.

Practical benefits include comparative efficacy data, detection of inadequate protection in finished articles, and insight into fungistat migration behavior (via inhibition zones).

Related Standards

• ISO 846 (assessment of resistance to mould growth - different inoculation approach)
• ISO 291:2008 (conditioning atmospheres)
• IEC 60068‑2‑10 and ISO 7218 (guidance on personnel safety and microbiological practice)

Keywords: ISO 16869:2008, fungistatic compounds, plastics testing, fungal resistance, nutrient-salt agar, agar overlay, plastic films, inhibition zone, visual assessment.

Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 16869
Second edition
2008-06-01
Plastics — Assessment of the
effectiveness of fungistatic compounds
in plastics formulations
Plastiques — Évaluation de l'efficacité des composés fongistatiques
dans les formulations de plastiques

Reference number
©
ISO 2008
PDF disclaimer
This PDF file may contain embedded typefaces. In accordance with Adobe's licensing policy, this file may be printed or viewed but
shall not be edited unless the typefaces which are embedded are licensed to and installed on the computer performing the editing. In
downloading this file, parties accept therein the responsibility of not infringing Adobe's licensing policy. The ISO Central Secretariat
accepts no liability in this area.
Adobe is a trademark of Adobe Systems Incorporated.
Details of the software products used to create this PDF file can be found in the General Info relative to the file; the PDF-creation
parameters were optimized for printing. Every care has been taken to ensure that the file is suitable for use by ISO member bodies. In
the unlikely event that a problem relating to it is found, please inform the Central Secretariat at the address given below.

©  ISO 2008
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means,
electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without permission in writing from either ISO at the address below or
ISO's member body in the country of the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail [e-mail]
Web www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2008 – All rights reserved

Contents Page
Foreword. iv
Introduction . v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions. 2
4 Principle. 2
5 Apparatus and materials. 2
5.1 Apparatus . 2
5.2 Culture media and reagents . 3
5.3 Organisms and cultivation. 5
6 Test specimens . 5
6.1 Shape and dimensions. 5
6.2 Number of specimens . 5
7 Preparation of specimens. 5
7.1 Cleaning. 5
7.2 Labelling and storage. 5
8 Procedure . 6
8.1 Test temperature. 6
8.2 Filling the Petri dishes. 6
8.3 Arrangement of test specimens . 6
8.4 Inoculation of the test specimens. 6
8.4.1 Preparation of the spore suspension . 6
8.4.2 Inoculation of the nutrient-salt overlay agar. 6
8.4.3 Overlay of specimen. 6
8.4.4 Incubation. 7
8.4.5 Viability control . 7
9 Assessment of fungal growth . 7
10 Expression of results . 7
11 Precision and bias . 8
12 Test report . 8
Bibliography . 9

Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 16869 was prepared by Technical Committee ISO/TC 61, Plastics, Subcommittee SC 6, Ageing, chemical
and environmental resistance.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 16869:2001), of which it constitutes a minor
technical revision. The main changes are an increase in the maximum diameter of the test specimen to 4 cm
(see 6.1) and the introduction of centrifuging operations in the preparation of the spore suspension in 8.4.1.
iv © ISO 2008 – All rights reserved

Introduction
It is a well known phenomenon that plasticizers as well as other ingredients in plastics formulations can be
attacked by bacteria, yeasts and fungi, the latter being the most important deteriogens. Microbial attack results
in a reduction of the quality of the plastic, causing embrittlement as well as discoloration. This deterioration is
of economic importance.
The prevention of fungal attack can be achieved by the incorporation of a fungistatic compound into the
formulation. The function of this fungistat is to inhibit the growth of any fungi present on the surface of the
plastic product.
The method described in this International Standard determines the effectiveness of fungistatic compounds
incorporated into the plastic against the fungi used in the test.

INTERNATIONAL STANDARD ISO 16869:2008(E)

Plastics — Assessment of the effectiveness of fungistatic
compounds in plastics formulations
WARNING — Handling and manipulation of microorganisms that are potentially hazardous requires a
high degree of technical competence and may be subject to current national legislation and
regulations. Only personnel trained in microbiological techniques should carry out such tests. Codes
of practice for disinfection, sterilization and personal hygiene must be strictly observed.
It is recommended that workers consult IEC 60068-2-10:2005, Annex A “Danger to personnel”, and
ISO 7218, Microbiology of food and animal feeding stuffs — General requirements and guidance for
microbiological examinations.
1 Scope
This International Standard specifies a method for determining the effectiveness of fungistatic compounds in
protecting susceptible ingredients like plasticizers, stabilizers, etc., in plastics formulations. The method
demonstrates whether or not a plastic product is actively protected against fungal attack.
The evaluation is by visual examination.
The test is applicable to any articles made of plastic that are in the form of films or plates no thicker than
10 mm. In addition, porous materials such as plastic foams may be tested provided that they are in the above-
mentioned form.
A minimum diffusion of the fungicides that migrate out of the matrix is necessary with this procedure.
In contrast to ISO 846, the test films are not sprayed with a fungal spore suspension but covered with a layer
of test agar containing spores. It has been found that this leads to a better distribution of the spores as well as
providing a good supply of water necessary for spore germination on plastic surfaces that are normally
hydrophobic.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced
document (including any amendments) applies.
ISO 291:2008, Plastics — Standard atmospheres for conditioning and testing
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
plastic susceptible to fungal attack
plastic material that contains in its formulation one or more nutrients that support fungal growth
3.2
fungistat
compound that prevents fungal growth on a material that is normally susceptible to fungal attack
4 Principle
Test specimens are exposed to a suspension of mixed fungal spores. The spores are applied to the surface of
the test specimen in a thin layer of an agar medium without an added carbon source. In this way, uniform
distribution of the spores is achieved as well as an optimum supply of water.
The absence of fungistatic agents in the plastic material will lead to germination of the fungal spores and initial
growth. When the ingredients in the material are susceptible to fungal attack and no active fungistat is
included in the formulation, further growth and sporulation will occur over and around the test specimen.
The presence of an active fungistat in the material will lead to suppression of spore germination and initial
growth in the area over and around the test specimen. Fungistatic agents can migrate into the agar around the
test specimen, thereby suppressing germination and appearing to give an increased zone of inhibition.
Although not relevant to the interpretation of the test results, the inhibition zone can be an indication of the
behaviour of the fungistat under test.
5 Apparatus and materials
5.1 Apparatus
Sterilize all glassware and all parts of the rest of the apparatus that will come into contact with the culture
media and/or reagents (except those which are supplied sterile) by one of the following methods:
method A: autoclave (see 5.1.2) at 121 °C for a minimum of 15 min;
method B: use a dry-heat sterilizer (see 5.1.2) at 180 °C for at least 30 min, at 170 °C for at
...

МЕЖДУНАРОДНЫЙ ISO
СТАНДАРТ 16869
Второе издание
2008-06-01
Пластмассы. Оценка эффективности
фунгистатических соединений в
составе пластмасс
Plastics – Assessment of the effectiveness of fungistatic compounds in
plastics formulations
Ответственность за подготовку русской версии несёт GOST R
(Российская Федерация) в соответствии со статьёй 18.1 Устава ISO
Ссылочный номер
©
ISO 2008
Отказ от ответственности при работе в PDF
Настоящий файл PDF может содержать интегрированные шрифты. В соответствии с условиями лицензирования, принятыми
фирмой Adobe, этот файл можно распечатать или смотреть на экране, но его нельзя изменить, пока не будет получена
лицензия на интегрированные шрифты и они не будут установлены на компьютере, на котором ведется редактирование. В
случае загрузки настоящего файла заинтересованные стороны принимают на себя ответственность за соблюдение
лицензионных условий фирмы Adobe. Центральный секретариат ISO не несет никакой ответственности в этом отношении.
Adobe - торговый знак фирмы Adobe Systems Incorporated.
Подробности, относящиеся к программным продуктам, использованные для создания настоящего файла PDF, можно найти в
рубрике General Info файла; параметры создания PDF были оптимизированы для печати. Были приняты во внимание все
меры предосторожности с тем, чтобы обеспечить пригодность настоящего файла для использования комитетами-членами
ISO. В редких случаях возникновения проблемы, связанной со сказанным выше, просьба проинформировать Центральный
секретариат по адресу, приведенному ниже.

ДОКУМЕНТ ЗАЩИЩЕН АВТОРСКИМ ПРАВОМ

©  ISO 2008
Все права сохраняются. Если не указано иное, никакую часть настоящей публикации нельзя копировать или использовать в
какой-либо форме или каким-либо электронным или механическим способом, включая фотокопии и микрофильмы, без
предварительного письменного согласия ISO, которое должно быть получено после запроса о разрешении, направленного по
адресу, приведенному ниже, или в комитет-член ISO в стране запрашивающей стороны.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail [e-mail]
Web www.iso.org
Опубликовано в Швейцарии
ii © ISO 2008 – Все права сохраняются

Содержание Страница
Предисловие .iv
Введение .v
1  Область применения .1
2  Нормативные ссылки .1
3  Термины и определения .1
4  Сущность метода.2
5  Аппаратура и материалы.2
5.1  Аппаратура.2
5.2  Питательная среда и реактивы .3
5.3  Организмы и выращивание .5
6  испытуемые образцы.5
6.1  Форма и размеры .5
6.2  Число образцов для испытания.5
7  Подготовка образцов для испытания .6
7.1  Очистка .6
7.2  Этикетирование и хранение .6
8  Проведение испытания.6
8.1  Температура испытания.6
8.2  Наполнение чашек Петри .6
8.3  Расположение испытуемых образцов .6
8.4  Посев на испытуемые образцы.6
8.4.1  Приготовление суспензии спор.6
8.4.2  Посев слоя питательно-солевого агара .7
8.4.3  Нанесение на образец.7
8.4.4  Инкубация .7
8.4.5  Контроль жизнеспособности .7
9  Оценка роста грибков .7
10  Обработка результатов.8
11  Прецизионность и систематическая погрешность .8
12  Протокол испытания.8
Библиография.9

Предисловие
Международная организация по стандартизации (ISO) является всемирной федерацией национальных
организаций по стандартизации (комитетов-членов ISO). Разработка международных стандартов
обычно осуществляется техническими комитетами ISO. Каждый комитет-член, заинтересованный в
деятельности, для которой был создан технический комитет, имеет право быть представленным в этом
комитете. Международные правительственные и неправительственные организации, имеющие связи с
ISO, также принимают участие в работах. ISO работает в тесном сотрудничестве с Международной
электротехнической комиссией (IEC) по всем вопросам стандартизации в области электротехники.
Международные стандарты разрабатываются в соответствии с правилами, установленными в
Директивах ISO/IEC, Часть 2.
Основная задача технических комитетов состоит в подготовке международных стандартов. Проекты
международных стандартов, одобренные техническими комитетами, рассылаются комитетам-членам
на голосование. Их опубликование в качестве международных стандартов требует одобрения, по
меньшей мере, 75 % комитетов-членов, принимающих участие в голосовании.
Следует иметь в виду, что некоторые элементы этого документа могут быть объектом патентных прав.
ISO не должен нести ответственность за идентификацию какого-либо одного или всех патентных прав.
ISO 16869 был подготовлен Техническим комитетом ISO/TC 61, Пластмассы, Подкомитетом SC 6,
Старение, стойкость к воздействию химических веществ и окружающих условий.
Настоящее второе издание отменяет и заменяет первое издание (ISO 16869:2001), которое прошло
технический пересмотр. В число главных изменений входит увеличение максимального диаметра
испытуемого образца до 4 см (см. 6.1) и введение операций центрифугирования при приготовлении
суспензии спор в 8.4.1.
iv © ISO 2008 – Все права сохраняются

Введение
Хорошо известно явление воздействия на пластификаторы, а также другие ингредиенты, входящие в
состав пластмасс бактерий, дрожжей и плесеней, последние из которых являются наиболее
разрушительными. Воздействие микроорганизмов приводит к ухудшению качества пластмассы, ее
охрупчиванию, а также обесцвечиванию. Это имеет экономическое значение.
Предотвращение воздействия плесени можно осуществить путем включения в состав пластмассы
фунгистатического вещества. Функция такого фунгицида заключается в ингибировании роста плесени ,
присутствующей на поверхности пластмассового продукта.
Метод, описанный в данном международном стандарте, определяет эффективность фунгистатических
соединений, включенных в состав пластмассы, против плесени, используемой в испытании.

МЕЖДУНАРОДНЫЙ СТАНДАРТ ISO 16869:2008(R)

Пластмассы. Оценка эффективности фунгистатических
соединений в составе пластмасс
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ — Работа с потенциально опасными микроорганизмами требует высокой
степени компетенции и может являться предметом действующего национального
законодательства и регламентов. Такие испытания должен выполнять только персонал,
имеющий опыт работы с микробиологическими методами. Правила дезинфекции, стерилизации
и личной гигиены должны строго соблюдаться.
Персоналу рекомендуется обратить внимание на международные стандарты
IEC 60068-2-10:2005, Приложение A “Опасность для персонала”, и ISO 7218, Микробиология
продуктов питания и кормов для животных. Общие требования и правила
микробиологических исследований.
1 Область применения
Настоящий международный стандарт устанавливает метод определения эффективности
фунгистатических соединений при защите чувствительных ингредиентов, например, пластификаторов,
стабилизаторов и т.д. в составе пластмассы. Метод демонстрирует, хорошо или плохо защищен
пластмассовый продукт от воздействия плесени.
Оценку выполняют посредством визуального обследования.
Данное испытание применимо к любому изделию из пластмассы в форме пленки или листов не толще
10 мм. Кроме того, пористые материалы, такие как пенопласты, можно испытывать, при условии, что
они исполнены в указанной выше форме.
Минимальная диффузия фунгицидов, которые мигрируют из матрицы, необходимо для данного метода.
А противоположность ISO 846, испытуемые пленки не опрыскивают взвесью спор плесени, а
покрывают слоем испытательного агара, содержащего споры. Обнаружено, что это ведет к лучшему
распределению спор, а также обеспечивает хорошей подачей влаги, необходимой для прорастания
спор на поверхности пластмассы, которая обычно является гидрофобной.
2 Нормативные ссылки
Следующие справочные документы необходимы для применения данного документа. Для жестких
ссылок используется только указанное издание. Для плавающих ссылок используется самое
последнее издание основного документа (включая все изменения).
ISO 291:2008, Пластмассы. Стандартные атмосферы для кондиционирования и испытания
3 Термины и определения
Применительно к данному документу используются следующие термины и определения.
3.1
пластмассы, чувствительные к воздействию плесени
plastic susceptible to fungal attack
пластмассовый материал, который содержит в своем составе одно или несколько питательных
веществ/. поддерживающих рост плесени
3.2
фунгицид
fungistat
соединение, которое предотвращает рост плесени на материале, обычно чувствительном к
воздействию плесени
4 Сущность метода
Испытуемые образцы подвергают воздействию суспензии смешанных спор плесени. Споры наносят на
поверхность испытуемого образца тонким слоем на агаризованной среде без добавления источника
углерода. Таким образом достигается равномерно распределение спор, а также оптимальный подвод
влаги.
Отсутствие фунгистатических веществ в пластмассовом материале приводит к прорастанию спор
плесени и начальному росту. Если ингредиенты в материале чувствительны к воздействию плесени и
в состав его не входит активного фунгицида происходит дальнейший рост и спорообразование по
всему испытуемому образцу.
Присутствие активного фунгицида в материале приводит к подавлению прорастания спор и
начального роста плесени по всему испытуемому образцу. Фунгистатические вещества могут
мигрировать в агар по испытуемому образцу, подавляя при этом прорастание и формируя
увеличивающуюся зону ингибирования.
Хотя это и не относится к интерпретации результатов, зона ингибирования может являться
показателем поведения анализируемого фунгицида.
5 Аппаратура и материалы
5.1 Аппаратура
Стерилизуют всю стеклянную посуду и части остального оборудования, которые будут соприкасаться с
питательной средой и/или реактивами (за исключением тех, которые поставляются стерильными)
одним из следующих методов:
Метод A: в автоклаве (см. 5.1.2) при температуре 121 °C в течение не менее 15 мин;
метод B: используют стерилизатор сухим жаром (см. 5.1.2) при температуре 180 °C в течение не
менее 30 мин, при температуре 170 °C в течение не менее 1 ч, или при температуре 160 °C в
течение не менее 2 ч;
метод C: используют систему фильтрования через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.
5.1.1 Инкубатор (термостат), поддерживаемый при температуре 24 °C ± 1 °C.
5.1.2 Оборудование для стерилизации:
5.1.2.1 Для стерилизации влажн
...