ISO 10993-10:1995
(Main)Biological evaluation of medical devices - Part 10: Tests for irritation and sensitization
Biological evaluation of medical devices - Part 10: Tests for irritation and sensitization
Describes test methods to evaluate the potential of devices and their constituent materials to produce irritation and to produce sensitization. Also gives guidance for the preparation of materials specifically in relation to the above tests.
Évaluation biologique des dispositifs médicaux — Partie 10: Essais d'irritation et de sensibilisation
La présente partie de l'ISO 10993 décrit les méthodes d'essai a) pour évaluer le risque d'irritation que présentent les dispositifs et les matériaux qui les constituent; b) pour évaluer le risque de sensibilisation que présentent les dispositifs et les matériaux qui les constituent. Ces méthodes d'essais sont recommandées pour la plupart des catégories de dispositifs et de modes de contact donnés dans l'ISO 10993-1. Dans la liste des essais, choisir ceux qui sont en rapport avec l'utilisation finale du dispositif. Il est également indiqué des lignes directrices sur la préparation des matériaux concernant spécifiquement les essais précités. NOTE 1 L'annexe D donne des lignes directrices sur la conduite d'essais supplémentaires qui peuvent être spécifiquement requis pour l'évaluation de l'irritation orale, rectale, pénienne et vaginale.
General Information
Relations
Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL IS0
STANDARD 10993-10
First edition
1995-03-I 5
Biological evaluation of medical devices -
Part 10:
Tests for irritation and sensitization
ivaluation biologique des dispositifs mkdicaux -
Partie IO: Essais d ‘irrita tion et de sensibilisa tion
Reference number
IS0 10993-I 0:1995(E)
IS0 10993-10:1995(E)
Contents
Page
..............................................................................................
1 Scope
.....................................................................
2 Normative references
.......................................................................................
3 Definitions
....................................
4 General principles, step-wise approach
............................................................................
5 Irritation tests
.... 2
5.1 Factors to be considered in design and selection of tests
...................................................................
5.2 Skin irritation test
................................................................
5.3 Ocular irritation test
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
5.4 Intracutaneous (intradermal) reactivity test
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .*.
6 Sensitization tests
. . 10
6.1 Factors to be considered in design and selection of tests
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.2 Maximization sensitization test
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.3 Closed patch sensitization test
Annexes
.......................................
A Preparation of materials for testing
......... 17
B Method for extraction of materials for biological tests
..........................................................
C Animals and husbandry
........................................................
D Additional irritation tests
.........................................................
E Background information
............................................................................
F Bibliography
0 IS0 1995
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced
or utilized in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying and
microfilm, without permission in writing from the publisher.
International Organization for Standardization
Case Postale 56 l CH-1211 Geneve 20 l Switzerland
Printed in Switzerland
ii
0 IS0 IS0 10993-10:1995(E)
Foreword
IS0 (the International Organization for Standardization) is a worldwide
federation of national standards bodies (IS0 member bodies). The work
of preparing International Standards is normally carried out through IS0
technical committees. Each member body interested in a subject for
which a technical committee has been established has the right to be
represented on that committee. International organizations, governmental
and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. IS0
collaborates closely with the International Electrotechnical Commission
(IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
Draft International Standards adopted by the technical committees are
circulated to the member bodies for voting. Publication as an International
Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting
a vote.
International Standard IS0 10993-10 was prepared by Technical Commit-
tee lSO/TC 194, Biological evaluation of medical devices.
IS0 10993 consists of the following parts, under the general title Biological
evaluation of medical devices:
- Part 1: Guidance on selection of tests
- Part 2: Animal welfare requirements
- Part 3: Tests for genotoxicity, carcinogenicity and reproductive
toxicity
- Part 4: Selection of tests for interactions with blood
- Part 5: Tests for cytotoxicity: in vitro methods
- Part 6: Tests for local effects after implantation
- Part 7: Ethylene oxide sterilization residuals
- Part 9: Degradation of materials related to biological testing
[Technical Report]
- Part IO: Tests for irritation and sensitization
- Part 1 I: Tests for systemic toxicity
- Part 12: Sample preparation and reference materials
- Part 13: Identification and quantification of degradation products
from polymers
. . .
III
0 IS0
IS0 10993-10:1995(E)
- Part 14: /den tifica tion and quantification of degradation products
from ceramics
- Part 15: /den tification and quantification of degradation products
from coated and uncoated metals and alloys
- Part 16: General guidance on toxicokinetic study design for degra-
dation products and leachables
- Part 17: Glutaraldehyde and formaldehyde residues in industrially
sterilized medical devices
Future parts will deal with other relevant aspects of biological testing.
This part of IS0 10993 is a harmonization of numerous standards and
guidelines, including BS 5736, OECD Guidelines, U.S. Pharmacopeia and
the European Pharmacopoeia. It is intended to be the overall guidance
document for the selection and conduct of tests enabling evaluation of ir-
ritation and senitization responses relevant to material and device safety.
Annexes A, B and C form an integral part of this part of IS0 10993. An-
nexes D, E and F are for information only.
0 IS0 IS0 10993-10:1995(E)
Introduction
This part of IS0 10993 assesses possible contact hazards from device-
released chemicals that may produce skin and mucosal irritation, eye irri-
tation, and delayed contact sensitization.
Some materials that are included in these devices have been tested, and
their skin or mucosal irritation or sensitization potential has been docu-
mented. Other materials and their chemical components have not been
tested and may act differently when exposed to biological tissues. It is
incumbent upon the manufacturer to evaluate each device for its human
toxic potential prior to marketing.
Traditionally, small animal tests are performed prior to human testing to
help predict human response. More recently, in vitro tests have been
added as an alternative. Despite progress and considerable effort in this
direction, a review of findings suggests that currently no satisfactory in
vitro test has been devised to eliminate the requirement for in vivo testing.
Where appropriate, the preliminary use of in vitro methods is encouraged
as screening tests prior to animal testing. In order to reduce the number
of animals used, these standards use a step-wise approach with review
and analysis of test results at each stage.
It is incumbent upon the investigator to conduct these studies using good
scientific laboratory practices, complying with regulations related to animal
welfare. Since the number of animals is restricted, the data obtained may
be insufficient to warrant the application of statistics.
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INTERNATIONAL STANDARD 0 IS0 IS0 10993-10:1995(E)
Biological evaluation of medical devices -
Part 10:
Tests for irritation and sensitization
IS0 10993-I : 1992, Biological evaluation of medical
1 Scope
devices - Part 7: Guidance on selection of tests.
This part of IS0 10993 describes test methods:
I so 10993-I 2:--l), Biological evaluation of medical
devices
- Part 12: Sample preparation and reference
a) to evaluate the potential of devices and their con-
materials.
stituent materials to produce irritation; and
to evaluate the potential of devices and their con-
b)
stituent materials to produce sensitization.
3 Definitions
These test methods are recommended for most cat-
For the purposes of this part of IS0 10993, the defi-
egories of device and mode of body contact given in
nitions given in IS0 10993-I and the following defi-
IS0 10993-I. Of the tests listed, those appropriate to
nitions apply.
the end use of the device are to be selected. Guid-
ance is also given for the preparation of materials
3.1 (allergic contact) sensitization; delayed con-
specifically in relation to the above tests.
tact hypersensitivity: Allergic response involving
immunological systems that have been activated by
NOTE 1 Guidance on the conduct of supplementary tests
pnor exposure.
which may be required specifically for use in the oral, rectal,
penile and vaginal areas is given in annex D.
3.2 irritation: Localized inflammatory response to
single, repeated or continuous application of the test
substance, without involvement of an immunological
mechanism.
2 Normative references
3.3 oedema: Swelling due to abnormal infiltration
of fluid into the tissues.
The following standards contain provisions which,
through reference in this text, constitute provisions
3.4 erythema: Reddening of the skin or mucous
of this part of IS0 10993. At the time of publication,
membrane.
the editions indicated were valid. All standards are
subject to revision, and parties to agreements based
3.5 eschar: Scab or discoloured slough of skin.
on this part of IS0 10993 are encouraged to investi-
gate the possibility of applying the most recent edi-
tions of the standards indicated below. Members of 3.6 corrosion: Production of irreversible tissue
IEC and IS0 maintain registers of currently valid damage at the site of contact with the skin following
International Standards. the application of a test substance.
1) To be published.
Q IS0
IS0 10993=10:1995(E)
sensitizers; guidance is therefore provided only in the
3.7 ulceration: Open sore representing loss of
conduct of in viva tests in species other than humans.
superficial tissue.
It is not necessary to use positive controls in every in
38 . necrosis: Death of cells and/or tissues.
vivo test. A positive control should be run periodically
to validate the test system and demonstrate a positive
3.9 negative control: Substance that closely re-
response.
sembles the test substance in form and, when tested
in accordance with this part of IS0 10993, is neither
If assessment is not possible using the above stages,
an irritant nor a sensitizer.
consideration should be given to non-invasive testing
in humans.
3.10 positive control: Substance that, when tested
in accordance with this part of IS0 10993, gives a re-
producible irritation or sensitization response.
5 Irritation tests
3.11 solvent: Substance (chemical, vehicle, me-
dium, etc.) used to moisten, dilute, suspend, extract
51 . Factors to be considered in design and
or dissolve the test substance.
selection of tests
3.12 reagent control: Solvent used to moisten, di-
Factors affecting the results of irritation studies in-
lute, suspend, extract or dissolve the test substance,
clude
which is evaluated concurrently with the moistened,
diluted, suspended, extracted or dissolved test sub-
the patch test unit;
a)
stance.
b) the degree of occlusion;
application of the test substance;
d
4 General principles, step-wise approach
d) the application site;
This part of IS0 10993 advocates a step-wise ap-
proach which may include any or all of the following:
e) the duration of exposure; and
literature review;
a)
the techniques used in evaluating the test.
f 1
in vitro tests (if available and when validated);
b)
Additional background information is provided in an-
nex E.
in viva tests;
d
While increased flexibility will allow the investigator
non-invasive human tests/clinical trials.
d)
to enhance the sensitivity of the test to suit conditions
of use and population exposure, consistency in pro-
The first stage is a literature review and shall include
cedure contributes to comparability of test results
an evaluation of chemical and physical properties, and
with different materials and from different labora-
information on structually related chemicals and ma-
tories.
terials. If not already known, the pH and pKa of the
material (liquid, solution or extracts of materials) shall
Provisions have been included in the test procedures
be measured prior to any in vivo or in vitro testing.
for evaluation of devices and materials that will have
repeated and/or prolonged exposure. The investigator,
The second stage provides for in vitro assessments.
in consultation with the device manufacturer, should
These should always be considered in preference to
design the study to exaggerate the anticipated con-
in vivo tests and should replace these as new in vitro
tact (time and/or concentration) in the clinical situ-
methods become available and validated.
ation. While use of an exaggerated concentration or
At the third stage acute in viva studies are undertaken extract of the material is acceptable, this should be
to test for materials not already classified as severe borne in mind during interpretation of the results.
irritants or strong sensitizers by stages a) or b). Ma-
For products intended to be used extensively on
terials that do not demonstrate an acute potential may
normal and abnormal skin, no substantial risk is
be further evaluated following repeated exposure.
L
normally accepted; however, many products, in spite
of a potential to irritate, are fully acceptable because
At the present time there are no validated in vitro
of their inherent benefit.
tests (other than simple screens) to detect irritants or
0 IS0 IS0 10993-10:1995(E)
5.2.4 Test procedure
If the pH of the test material is less than or equal to
2 or equal to or greater than 11,5, the material may
5.2.4.1 Preparation of animals
be declared an irritant and no further testing is re-
quired. However, experimental evidence suggests
On the day before the test, closely clip the fur on the
that acidity and alkalinity of the test material are not
backs of the animals a sufficient distance on both
the only factors to be considered in relation to the
sides of the spine for application and observation of
capacity of a substance to produce severe injury. The
all test sites (approximately 10 cm x 15 cm). Use only
concentration of the test material, its period of con-
animals with healthy intact skin.
tact, and many other physical and chemical properties
are also important.
NOTE 2 Abrasion of the test site is not necessary, as
evidence indicates similar responses between abraded and
As dose levels in test procedures can be exaggerated,
non-abraded sites.
a positive test does not necessarily exclude the ma-
terial from use.
If repeated exposure is required, follow the pro-
cedures in 5.2.4.2, 5.2.4.3 or 5.2.4.4, repeated for a
maximum of 21 days.
5.2 Skin irritation test
5.2.4.2 Powder or liquid sample
5.2.1 Principle
Apply 0,5 g or 0,5 ml of the test material directly to
each test skin site as shown in figure 1. If the sub-
Assessment of the potential of the material under test
stance is a powder, it should be slightly moistened
to produce dermal irritation.
with water or other suitable solvent before appli-
cation.
5.2.2 Test material
Cover the application sites with a 25 mm x 25 mm
non-occlusive dressing (such as a gauze patch) and
If the test material is either a solid or a liquid, it shall
then wrap the application site with a semi-occlusive
be prepared as specified in annex A.
bandage for a minimum of 4 h. At the end of the
contact time, remove the dressings and mark the
If the test material is to be tested as an extract, it shall
positions of the sites. Remove residual test substance
be prepared as specified in annex B.
by appropriate means, such as washing with luke-
warm water or other suitable, non-irritating solvent,
and careful drying.
5.2.3 Animals and husbandry
5.2.4.3 Extracts and extractants
Healthy young adult albino rabbits of either sex from
a single strain weighing not less than 2 kg shall be
the appropriate extract(s) to the
APPlY
used.
25 mm x 25 mm four-ply gauze patches (0,5 ml per
patch), one patch on each side of the animal as shown
cared for as
The animals shall be acclimatized and
in figure 1. Apply a control patch of gauze moistened
specified in annex C.
with the extracting medium to the other side.
One animal shall initia Ily be used to evaluate the test
Cover the application sites with a semi-occlusive
material.
bandage for a minimum of 4 h. At the end of the
contact time, remove the dressings and mark the
A well-defined response in th e one animal obviates
positions of the sites. Remove residual test substance
the need for additional testing.
by appropriate means, such as washing with luke-
Unless a well-defined response is observed for solid warm water or other suitable, non-irritating solvent,
or liquid materials, a minimum of two further animals and careful drying.
shall be used. For extracts, a minimum of two further
animals per extract shall be used. 5.2.4.4 Solid sample
If the response in the test using the minimum of three Apply the samples of the test material directly to the
animals is equivocal or not clear, additional testing skin on each side of each rabbit as shown in figure 1.
shall be considered. Similarly, apply the control samples to each rabbit.
IS0 10993=10:1995(E)
Cranial
Y Clipped dorsal region
/- Test intact site
Test intact site ’
: LT
/- Control intact site1 )
Control intact site’)
Caudal
1 ) If sample preparation requires this type of control.
Figure 1 - Location of skin application sites
reversibility or irreversibility of the lesions: this need
When testing solids (which may be pulverized if con-
not exceed 14 days.
sidered necessary), the test substance shall be
moistened sufficiently with water or, where necess-
Describe and grade the skin reactions for erythema
ary, an alternative solvent, to ensure good contact
and oedema according to the classification system
with the skin. When solvents are used, the influence
given in table 1 for each application site at each time
of. the solvent on irritation of skin by the test sub-
interval and record the results for the test report.
stance shall be taken into account.
NOTE 3 Histological and non-invasive techniques may
Cover the application sites with 25 mm x 25 mm
assist in certain cases.
non-occlusive dressings (such as a gauze patch) and
then wrap the application sites with a semi-occlusive
bandage for a minimum of 4 h. At the end of the
contact time, remove the dressings and mark the
5.2.6 Evaluation of results
positions of the sites. Remove residual test substance
by appropriate means, such as washing with luke-
For acute exposure, determine the Primary Irritation
warm water or other suitable, non-irritating solvent,
Index (PII) as follows.
and careful drying.
For each animal, add together the Primary Irritation
Scores for the test material for both erythema and
oedema at each time specified and divide by the total
number of observations (six: two at each time speci-
5.2.5 Observation of animals
fied). When vehicle controls are used, calculate the
Primary Irritation Score for the vehicle controls and
For acute (single exposure) tests, record the appear-
subtract that score from the score for the test ma-
ance of each application site at 1 h, 24 h, 48 h and
terial to obtain the Primary Irritation Score.
72 h following removal of the patches. Extended ob-
servation may be necessary if there are persistent
Only use 24 h, 48 h and 72 h observations for calcu-
lesions, in order to evaluate the reversibility or
lations. Observations made prior to dosing or after
irreversibility of the lesions: this need not exceed
72 h, to monitor recovery, are not used in the deter-
14 days.
mination.
For repeated exposure, record the appearances of the
Add the scores for each animal and divide the total
application site at 1 h after removal of the patches and
by the number of animals. This value is the Primary
immediately prior to the next application. After the last
Irritation Index.
exposure, note the appearance of each application
site at 1 h, 24 h, 48 h and 72 h following removal of
For repeated exposure, determine the Cumulative Ir-
the patches. Extended observation may be necessary
ritation Index as follows.
if there are persistent lesions, in order to evaluate the
Table 2 - Irritation response categories in rabbit
- Classification system for skin reaction
Table 1
Mean score
Numerical Response category
Reaction
grading
0 to 0,4
Negligible
Erythema and eschar formation
Slight 0,5 to I,9
No erythema
2 to 4,9
Moderate
Very slight erythema (barely perceptible)
5 to 8
Severe
Well-defined erythema
Moderate erythema
5.2.7 Presentation of results
Severe erythema (beet-redness) to
eschar formation preventing grading of
The test report shall include
erythema
Oedema formation
a) a description of the test material(s) or device;
No oedema
b) the intended use/application of the test material(s)
Very slight oedema (barely perceptible)
or device;
Well-defined oedema (edges of area
well-defined by definite raising)
c) a detailed description of the method employed in
Moderate oedema (raised approxi-
preparing the test material or device;
mately 1 mm)
Severe oedema (raised more than d) the test animals;
1 mm and extending beyond exposure
area)
e) method of application to the test sites;
Total possible score for irritation
f) how the site readings were performed and a rec-
ord of the observations;
NOTE - Other adverse changes at the skin sites shall
g) assessment of the results.
be recorded and reported.
5.3 Ocular irritation test
For each animal, add together the Irritation Scores for
both erythema and oedema at each time specified.
Divide this total by the total number of observations
5.3.1 Principle
to obtain the Irritation Score per animal.
Assessment of the potential of the material under test
Add the Irritation Scores of each animal and divide by
to produce ocular irritation.
the total number of animals. This value is the Cumu-
lative Irritation Index.
5.3.2 Exclusion from test
The Cumulative Irritation Index is compared to the
Materials and/or final products which have demon-
categories of Cumulative Irritation Index defined in
strated definite corrosion or severe irritation in a
table2 and the appropriate Category is recorded for
dermal study shall not be further tested for eye irri-
the report.
tation. Strongly acidic or alkaline substances (pH < 2
or 3 11,5) shall not be tested owing to their predictive
NOTE 4 The categories of Cumulative Irritation Index are
based on the data relating the Primary Irritation Index (PII) corrosive properties. These products shall be con-
for chemicals in rabbits to the primary irritation response in
sidered eye irritants.
humans for a number of chemicals that have been tested
in both species.
5.3.3 Test material
For any response, determine the Maximum Irritation
If the test material is a liquid, instil 0,l ml undiluted
Response, the time of onset of the response and the
into the lower conjunctival sac of one eye.
time to maximum response.
If the test material is a solid or granular product, grind
The Primary or Cumulative Irritation Index is charac-
to a fine dust. When gently compacted, instil that
terized by number and description in table2.
amount which occupies a volume of 0,l ml and does
0 IS0
IS0 10993-10:1995(E)
ophth al
100 mg into the lower conjunc- The use of an mosco Ipe, hand slit-lamp, or
not weigh more than
other suitable de vice, i S recom mended.
tival sac of one eye.
lnstil the test material as specified in 5.3.3.
NOTE 5 Some products may not be amenable to testing
directly in the eye. Mechanical damage can result in making
Following instillation hold the eyelids together for ap-
the test useless.
proximately 1 s.
If th e test material is contained in a pump spray, expel
NOTE 6 The contralateral eye of each animal serves as
and instil 0,l ml as for liquids.
an untreated control.
If the test material is contained in an aerosol con-
If repeated exposure of the material is anticipated and
tainer, examine by either
the test material has not demonstrated a significant
response in the acute test, a repeat exposure study
a) spraying a single burst of 1 s duration at a dis-
may be conducted. The duration of the exposure
tance of 10 cm directed at the open eye; or
should bear resemblance to the length of use of the
b) expelling the aerosol into a cool container and test material/device in the clinical situation.
treating as for a liquid.
5.3.6 Observation of animals
If the test material is such that it can only be applied
as an extract, prepare extracts as described in
For animals receiving a single instillation of test ma-
annex B. lnstil a 0,l ml aliquot of the extract into the
terial, examine both eyes of each animal approxi-
lower conjunctival sac of one eye.
mately 1 h, 24 h, 48 h and 72 I after instillation.
Under conditions identical with those used above,
Extended observation may be necessary if there are
prepare reagent controls, using both the polar and the
persistent lesions in order to ( etermine the progress
non-polar solvent, in the absence of the test material.
of the lesions or their reversal; this need not exceed
21 days. Extended observation cannot be justified for
5.3.4 Animals and husbandry
animals with severe lesions.
m
H ealthy adult albin o rabbits of either s ex fro
Young
Grade and record any reactions observed in accord-
ing 2 kg to 3 kg shall be used.
a single strain weigh
ance with the scale for grading ocular lesions given in
table 3.
The animals shall be acclimatized and cared for as
specified in annex C .
For animals receiving multiple instillations of test ma-
terial, examine both eyes of each animal immediately
to evaluate the test
One an imal shall initially be
before and approximately 1 h after each instillation.
materia
If there is evidence of irritation after the last treat-
A well-defined response in the one animal obviates
ment, the observations may be extended. Extended
the need for additional testing.
observation may be necessary if there is persistent
Unless a well-defined response is observed for solid
cornea1 involvement or other ocular irritation in order
or liquid materials, a minimum of two further animals
to determine the progress of the lesions and their
shall be used. For extracts, a minimum of two further
reversibility.
animals per extract shall be used.
Grade and record any reactions observed in accord-
If the response in the test using the minimum of three
ance with the scale for grading ocular lesions given in
animals is equivocal or not clear, additional testing
table 3.
shall be considered.
Withdraw an animal immediately from the study and
humanely kill it, if at any time it shows
5.3.5 Test procedure
a) very severe ocular damage (e.g. sloughing and
No longer than 24 h before commencement of the
ulceration of conjunctival membrane, cornea1 per-
test, visually examine both eyes of each rabbit for
evidence of ocular abnormality. If either eye shows foration, blood or pus in the anterior chamber); or
any abnormality, the rabbit shall be replaced.
b) blood-stained or purulent discharge; or
When the eyes are examined, sodium fluorescein
c) significant cornea1 ulceration.
2 %I BP may be used to visualize any cornea1 damage.
0 IS0
IS0 10993-10:1995(E)
24h or maximum
Withdraw from the study any animal showing maxi- conjunctival inflammation
mum effects on the grading system in table3 - ab- khemosis grade 4 together with redness grade 3) -
sence of a light reflex (iridial response 2) or cornea1 without evidence of recovery within 48 h, and kill it
opacity (grade 4) without evidence of recovery within humanely.
Table 3 - Classification system for grading ocular lesions
Numerical
Reaction
grading
1. Cornea
Degree of opacity (most dense area used)
No opacity 0
Scattered or diffuse areas, details of iris clearly visible
I*
Easily discernible translucent areas, details of iris slightly obscured
2*
Opalescent areas, no details of iris visible, size of pupil barely discernible 3*
Opaque, iris invisible 4*
Area of cornea involved
One-quarter (or less), not zero
Greater than one-quarter, but less than half
Greater than half, but less than three-quarters
Greater than three-quarters, up to whole area
2. Iris
Normal 0
Folds above normal, congestion swelling, circumcorneal injection (any or all or combination of these), iris still
reacting to light (sluggish reaction is positive) I*
No reaction to light, haemorrhage gross destruction (any or all of these) 2*
3. Conjunctivae
Redness (refers to palpebral and bulbar conjunctiva excluding cornea and iris)
Vessels normal 0
Vessels definitely injected above normal
More diffuse, deeper crimson red, individual vessels not easily discernible
2*
Diffuse beefy red
3*
Chemosis
No swelling
Any swelling above normal (include nictitating membrane)
Obvious swelling with partial eversion of lids
2*
Swelling with lids about half-closed
3*
Swelling with lids about half-closed to completely closed
4*
Discharge
No discharge
Any amount different from normal (does not include small amounts observed in inner canthus of normal ani-
mals)
Discharge with moistening of the lids and hairs just adjacent to lids
Discharge with moistening of lids and hairs, and considerable area round the eye
* positive result
0 IS0
IS0 10993-10:1995(E)
5.3.7 Evaluation of results 5.4 lntracutaneous (intradermal) reactivity
test
Differences between the test and control eyes shall
be characterized and explained in the terms of the
5.4.1 Principle
classification system used in table 3.
5.3.7.1 Acute exposure
5.4.2 Exclusion from test
If the treated eye in more than one animal shows a
positive response (asterisked figures in table3) at any
Any material shown to be a skin, eye or mucosal tis-
of the observations, then the material is considered
sue irritant or those with a pH of < 2 or 2 1 I,5 shall
an eye irritant and further testing is not required.
not be tested.
If only one of three eyes treated shows a positive re-
5.4.3 Test material
action or the reactions are equivocal, treat further
animals.
The test materials shall be extracts and shall be pre-
pared according to the procedures specified in
When further animals have been treated, the test
annex B.
material is considered to be an eye irritant if more
than half of the eyes treated in the test group exhibit
5.4.4 Animals and husbandry
a positive reaction (asterisked figures in table3) at any
stage of the observation.
Healthy young adult albino rabbits of either sex from
a single strain weighing not less than 2 kg shall be
A severe reaction in only one animal is considered
used.
sufficient to label as an irritant.
The animals shall be acclimatized and cared for as
specified in annex
C .
5.3.7.2 Repeated exposure
A minimum of three animals shall be used initially to
evaluate the test material.
The test material is considered an eye irritant if more
than half of the animals in the test group exhibit a
If the response in the initial test is equivocal or not
positive reaction (asterisked figures in table3) at any
clear, additional testing shall be considered.
stage of the observation.
5.4.5 Test procedure
On the day before the test, closely clip the fur on the
5.3.8 Presentation of results
backs of the animals allowing a sufficient distance on
both sides of the spine for injection of the extracts.
The test report shall include
Inject intracutaneously 0,2 ml of the extract obtained
a) a description of the test material(s) or device;
with the polar solvent at five sites on one side of each
rabbit (see figure2). Use the smallest sized needle,
b) the intended use/application of the test material(s)
appropriate to the viscosity of the test material, for
or device;
the intradermal injections.
c) a detailed description of the method employed in
Similarly, inject 0,2 ml of the polar solvent control at
preparing the test material or device;
five posterior sites on the same side of each rabbit
(see figure 2).
d) the test animals;
Repeat the above procedures for the extract obtained
e) method of instillation; with the non-polar solvent and the non-polar solvent
control on the other side of each rabbit (see figure2).
how the ocular readings were performed and a
f 1
If other solvents are used, repeat the above steps for
record of the observations;
the extract obtained with the other solvents and the
solvent controls.
g) assessment of the results.
IS0 10993-10:1995(E)
Cranial
0,2 ml injections
of polar extract
I
6 # # 6
7 # # 7
0,2 ml injections
of polar solvent 4
8 # # 8
control
9 # # 9
\ 10 # #
Caudat
Figure 2 - Arrangement of injection sites
5.4.6 Observation of animals
Note the appearance of each injection site immedi-
Table 4 - Classification system for
ately after injection and at 24 h, 48 h and 72 h after
intracutaneous (intradermal) reactions
injection.
Numerical
Reaction grading
Grade the tissue reaction for erythema and oedema
according to the classification system given in table4
Erythema and eschar formation
for each injection site and at each time interval ob-
No erythema 0
served, and record the results.
Very slight erythema (barely perceptible) 1
NOTE 7 lntradermal injection of an oil frequently elicits
Well-defined erythema 2
an inflammatory response.
Moderate erythema 3
Injection of an appropriate vital dye such as Trypan
Severe erythema (beet-redness) to
blue or Evans blue, intravenously, may be undertaken
eschar formation preventing grading of
erythema 4
at the 72 h reading to assist in evaluation of the re-
sponse by delineating the area of irritation.
Oedema formation
No oedema 0
Non-invasive techniques may be used to assist in the
Very slight oedema (barely perceptible) 1
evaluation if they are available.
Well-defined oedema (edges of area
5.4.7 Evaluation of results well-defined by definite raising) 2
Moderate oedema (raised approxi-
Determine the Primary Irritation Index as follows.
mately 1 mm) 3
Severe oedema (raised more than
For each animal, add together the Primary Irritation
1 mm and extending beyond exposure
Scores for both erythema and oedema separately for
area) 4
each test extract at each time specified and divide by
the total number of observations. A similar assess-
Total possible score for irritation
ment is made of the sites injected with the reagent
control. Subtract that score for the reagent control
NOTE - Other adverse changes at the injection sites
from the score for the test material to obtain the Pri-
shall be recorded and reported.
mary Irritation Score to be used in determining the
Primary Irritation Index.
0 IS0
IS0 10993-10:1995(E)
Only use the 24 h, 48 h and 72 h observations for 6.1 Factors to be considered in design and
calculations.
selection of tests
Add the Primary Irritation Scores of each animal and
The biochemical and physical characteristics of the
divide the total by the number of animals. This value
test material may influence the choice of test. The
is the Primary Irritation Index (PII).
maximization test requires intradermal injections;
consequently if the test material cannot be injected
The Primary Irritation Index is characterized by num-
intradermally, the closed patch or alternative method
ber and description in table 5.
shall be used.
A solvent should be selected that optimizes exposure
Table 5 - Primary irritation response categories
by solubilization and penetration. The concentration
in rabbit
of test material should be the highest possible with-
Mean score (PII)l)
Response category
out affecting the ability to interpret the results. The
.
concentration of the test material at the skin surface
Negligible 0 to 0,4
is an important criterion for topical administration and
0,5 to I,9
Slight
not the total volume of test material. The latter will
Moderate 2 to 4,9
be determined by the capacity of the patch system.
5 to 8
Severe
Damage to the skin cannot be avoided when Freund’s
1) The Primary Irritation Index (PII) is determined by complete adjuvant is injected intradermally.
adding the Primary Irritation Score for each animal and
dividing the total score by the number of animals. The times of exposure for all phases of each exper-
iment need to be sufficient for experimental success.
They should be varied only to the extent that they
5.4.8 Presentation of results
achieve this end. All phases (preliminary, induction
and challenge) are critical but the scoring intervals are
The test report shall include
critical only to the extent that they demonstrate the
delayed and persistent characteristic of hypersen-
a) a description of the test material(s) or device;
sitivity. Scoring of induction sites is not generally in-
formative and is not critical for interpretation.
b) the intended use/application of the test material(s)
or device;
The actual position of patch sites on the flank of the
guinea-pig is not a critical parameter, provided all the
c) a detailed description of the method employed in
challenge sites are conducted on naive skin.
preparing the test material or device;
Comparison of test animals at challenge with the ap-
d) the test animals;
propriate controls is essential for indication of a posi-
tive test result, though the severity of lesions will aid
e) method of injection;
in the interpretation.
f) how the site readings were performed and a rec-
Borderline reactions at challenge are best clarified by
ord of the observations;
rechallenge. Histopathology is not generally of diag-
nostic value.
g) assessment of the results.
A positive test does not necessarily exclude the test
material or device from use because the doses of the
test substance in the test procedure may be exag-
6 Sensitization tests
gerated compared to actual conditions of use. A
There are several methods for determining skin sen- positive test using any of the validated procedures
sitization in guinea-pigs. The two most commonly indicates the need for additional data, either in
used methods are the maximization (Magnusson & guinea-pigs or humans, that would allow risk assess-
ment of intended human exposure. The relative sen-
Kligman) and closed patch (Buehler) methods. It is
only necessary to evaluate by one of these methods. sitizing potencies of substances can be defined in
The maximization test (6.2) is regarded as the most terms of the minimum (lowest) induction concen-
sensitive and is the preferred method, particularly tration required to induce a given level of
with regard to the evaluation of extracts. A list of sensitization.lW This entails, as a minimum, verifi-
cation with appropriate concentrations and vehicles.
alternative methods is given in annex E.
0 IS0 IS0 10993-10:1995(E)
6.2.4 Test procedure
Repeating this assay with other techniques and util-
ization of open challenges (to avoid non-specific ef-
fects of tape) are of scientific and practical value.
Provocative tests followed by ad libitum use tests
with appropriate diagnostic patch testing can effec-
6.2.4.1 Preparation
tively determine safe levels of use.
For products to be used extensively on normal and
Clip the fur on all treatment sites, the day prior to
abnormal skin, no substantial risk is acceptable.
treatment.
However, many ingredients, in spite of sensitizing
potential, are fully acceptable in products at reason-
For intradermal injections, inject 0,l ml per site.
able concentrations because of their inherent benefit.
For all topical applications, saturate a patch of filter
paper of the appropriate dimensions with the test
material and apply the patch to the clipped skin sur-
6.2 Maximization sensitization test
face under an occlusive dressing wound around the
torso of the animal.
6.2.1 Principle
6.2.4.2 Preliminary tests
Assessment of the potential of the material under test
to produce skin sensitization in the guinea-pig.
NOTE 9 The preliminary tests are intended to determine
the concentrations of the test materials to be used in the
main test in 6.2.4.3.
6.2.2 Test material
Consideration shall be given to the pretreatment of
If the test material is either a solid or a liquid it shall
all animals by injection with Freund’s complete adju-
be prepared as specified in annex A.
vant.
If the test material is to be tested as an extract, it shall
be prepared as specified in annex B.
Inject a range of concentrations of the test material
or extract (in the selected solvent) intradermally into
at least two animals.
6.2.3 Animals and husbandry
Select for the intradermal induction phase in the main
test the highest concentration that does not cause
Healthy young adult albino guinea-pigs of either sex
extensive destruction of the skin and does not other-
from a single outbred strain, weighing 300 g to
wise adversely affect the animals.
500 g at the start of the test shall be used. If female
animals are used they shall be nulliparous and not
Topically apply a range of concentrations of the test
pregnant.
material or extract to the flanks of at least three addi-
tional animals. Remove the occlusive dressings and
The animals shall be acclimatized and cared for as
patches after 24 h, and assess the application sites
specified in annex C.
for erythema and oedema using the grading given in
table 6.
For testing powders or liquids, a minimum of ten ani-
mals shall be treated with the test material and a
Select
minimum of five animals acts as a control group. Ad-
ditional animals shall be used for the preliminary test.
a) if possible, for the topical induction phase in the
main test, the highest concentration that causes
For testing extracts, a minimum of ten animals shall
slight erythema but does not otherwise adversely
be treated with each extract and a minimum of five
affect the animals;
animals acts as a control for each solvent. Additional
animals shall be used for the preliminary test.
b) for the topical challenge phase in the main test,
the highest concentration that produces no ery-
NOTE 8 It may be necessary to double the number of
confirm weak thema.
animals in order to sensitizersP41, C351
0 IS0
IS0 10993-10:1995(E)
a) A 50: 50 (V/V) mixture of Freund’s complete
adjuvant mixed with the chosen solvent. Water
Table 6 - Classification system for skin
for injection or physiological saline (BP, USP or
reactions
equivalent) for water-soluble substances. For
Numerical
non-aqueous soluble substances, examples of
Reaction
grading
solvents are given in annex B, B.2.10.
Erythema and eschar formation
b) The test material or extract at the concentration
No erythema
selected in the preliminary tests: inject the control
Slight erythema animals with the solvent alone.
Well-defined erythema
c) The test material or extract at the concentration
Moderate erythema
used in b), emulsified in a 50: 50 (V/V) mixture
Severe erythema to slight eschar for-
of Freund’s complete adjuvant and the solvent;
mation
inject the control animals with the solvent mixed/
Oedema formation
emulsified with adjuvant.
No oedema
Slight oedema
Well-defined oedema
6.2.4.3.2 Topical induction phase
Moderate oedema
Severe oedema
NOTES
Seven days after completion of the intradermal in-
1 Other adverse changes at the skin sites shall be re-
duction phase, administer the test material or extract
corded and reported.
by topical application to the intrascapular region of
each animal, using 20 mm x 40 mm filter paper, so
2 For the purposes of standardization, the grading sys-
as to cover
...
Iso
NORME
10993-10
INTERNATIONALE
Première édition
1995-03-I 5
Évaluation biologique des dispositifs
médicaux -
Partie 10:
Essais d’irritation et de sensibilisation
Biological evaluation of medical devices -
Part 10: Tests for irritation and sensitization
Numéro de réfbence
ISO 10993-I 0: 1995(F)
ISO 1099340:1995(F)
Sommaire
Page
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1
1 Domaine d’application
..,.............................................................. 1
2 Références normatives
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1
3 Définitions
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2
4 Principes généraux, approche par étapes
5 Essais d’irritation . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
5.1 Facteurs a prendre en consideration lors de la conception et
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2
du choix des essais
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3
5.2 Essai d’irritation de la peau
5.3 Essai d’irritation oculaire . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8
5.4 Essai de réactivité intracutanée (intradermique)
6 Essais de sensibilisation . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10
6.1 Facteurs à prendre en considération lors de la conception et du
choix des essais . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11
6.2 Essai de maximisation de sensibilisation
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 13
6.3 Essai de sensibilisation avec système occlusif
Annexes
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16
A Préparation des matériaux pour les essais
B Méthode d’extraction des matériaux pour les essais biologiques 17
Les animaux et leur élevage . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19
C
Essais d’irritation supplémentaires . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20
D
.................................................................. 28
E Informations générales
.................................................................................. 31
F Bibliographie
0 ISO 1995
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publi-
cation ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun
procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans
.
l’accord Rcrit de l’editeur.
Organisation internationale de normalisation
Case postale 56 l CH-l 211 Geneve 20 0 Suisse
Imprimé en Suisse
ii
0 ISO ISO 10993=10:1995(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de
I’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de I’ISO. Chaque comité membre intéressé par une
étude a le droit de faire partie du comité technique créé a cet effet. Les
organisations internationales, gouvernementales et non gouverne-
mentales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux. L’ISO
collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale
(CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques
sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication comme
Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale ISO 10993-10 a été élaborée par le comité
technique lSO/TC 194, Évaluation biologique des dispositifs médicaux.
L’ISO 10993 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre
général Évaluation biologique des dispositifs médicaux:
- Partie 1: Lignes directrices pour le choix des essais
- Partie 2: Exigences concernant la protection des animaux
- Partie 3: Essais concernant la génotoxicité, la cancérogénicité et la
toxicité sur la reproduction
- Partie 4: Choix des essais concernant les interactions avec le sang
- Partie 5: Essais de cyto toxicité: méthodes in vitro
- Partie 6: Essais concernant les effets locaux après implantation
- Partie 7: Résidus de stérilisation à I ‘oxyde d’é thyène
- Partie 9: Dégradation des matériaux relative aux essais biologiques
[Rapport technique]
- Partie 10: Essais d’irritation et de sensibilisation
- Partie II: Essais de toxicité systémique
- Partie 72: Préparation des échantillons et matériaux de référence
-
Partie 13: Identification et quan tification de produits de dégradation
de polymères
- Partie 14: Identification et quan tification de produits de dégradation
de céramiques
- Partie 7 5: Identification et quan tification de produits de dégradation
de métaux et alliages revêtus et non revêtus
. . .
III
- Partie 76: Lignes directrices générales concernant la conception de
l’étude toxicocinétique des produits de dégradation et des sub-
stances relargables
- Partie 17: Résidus de glutaraldéhyde et de formaldéhyde dans des
dispositifs médicaux stérilisés industriellement
Les prochaines parties traiteront des autres aspects relatifs aux essais
biologiques.
La présente partie de I’ISO 10993 est le résultat de l’harmonisation de
nombreuses normes et lignes directrices, y compris de la norme
britannique BS 5736, des lignes directrices de I’OCDE, de la Pharmacopée
des États-Unis et de la Pharmacopée européenne. Elle vise à constituer le
document global de référence pour la sélection et la conduite des essais
permettant d’évaluer les réactions d’irritation et de sensibilisation au
matériau et la sécurité du dispositif.
Les annexes A, B et C font partie intégrante de la présente partie de
I’ISO 10993. Les annexes D, E et F sont données uniquement à titre
d’information.
0 ISO ISO 10993-10:1995(F)
Introduction
La présente partie de I’ISO 10993 évalue les risques éventuels dus au
contact des produits chimiques libérés par des dispositifs et pouvant
provoquer une irritation de la peau et des muqueuses, une irritation des
yeux et une sensibilisation retardée par contact.
Certains matériaux contenus dans ces dispositifs ont fait l’objet d’essais,
et le risque d’irritation ou de sensibilisation de la peau ou des muqueuses
qu’ils présentent a été documenté. D’autres matériaux ainsi que leurs
constituants chimiques n’ont pas fait l’objet d’essais et peuvent agir
différemment lorsque des tissus biologiques y sont exposés. II appartient
au fabricant d’évaluer le potentiel de toxicité humaine de chaque dispositif
avant de le commercialiser.
Traditionnellement, des essais limités sur les petits animaux sont
effectués avant les essais sur l’homme, afin de faciliter la prévision de la
réaction humaine. Plus récemment, des essais in vitro ont été introduits
comme une alternative. Malgré les progrès réalisés et les efforts
considérables déployés dans ce sens, l’examen des résultats suggére que
la panoplie ne comporte à ce jour aucun essai in vitro suffisamment
satisfaisant pour éliminer la prescription d’essais in vivo. Lorsque c’est
possible, l’emploi préliminaire de méthodes in vitro est encouragé comme
essais de sélection préalables aux essais sur les animaux. Afin de réduire
le nombre des animaux employés, les présentes normes utilisent une
approche par étapes, avec examen et analyse des résultats des essais à
chaque étape.
II incombe au chercheur de conduire ces études en employant de bonnes
pratiques de laboratoire, conformes à la réglementation relative au bien-
être des animaux. Étant donné que le nombre des animaux est limité, les
informations obtenues peuvent ne pas être suffisantes pour justifier
l’application des méthodes statistiques.
Page blanche
NORME INTERNATIONALE o ISO
ISO 10993=10:1995(F)
Évaluation biologique des dispositifs médicaux -
Partie 10:
Essais d’irritation et de sensibilisation
après. Les membres de la CEI et de I’ISO possèdent
1 Domaine d’application
le registre des Normes internationales en vigueur à un
moment donné.
La présente partie de NS0 10993 décrit les méthodes
d’essai
ISO 10993-I : 1992, Évaluation biologique des dispo-
sitifs médita ux - Partie 1: Lignes directrices pour le
a) pour évaluer le risque d’irritation que présentent
choix des essais.
les dispositifs et les matériaux qui les constituent;
b) pour évaluer le risque de sensibilisation que pré-
ISO 10993-I 2: --l) Évaluation biologique des dispo-
sentent les dispositifs et les matériaux qui les
sitifs médicaux l Partie 12: Préparation des échan-
constituent. tillons et matériaux de référence.
Ces méthodes d’essais sont recommandées pour la
3 Définitions
plupart des catégories de dispositifs et de modes de
contact donnés dans I’ISO 10993-I. Dans la liste des
Pour les besoins de la présente partie de I’ISO 10993,
essais, choisir ceux qui sont en rapport avec I’utili-
les définitions données dans I’ISO 10993-I ainsi que
sation finale du dispositif. II est également indiqué des
les définitions suivantes s’appliquent.
lignes directrices sur la préparation des matériaux
concernant spécifiquement les essais précités.
3.1 sensibilisation (allergique par contact);
NOTE 1 L’annexe D donne des lignes directrices sur la
hypersensibilité retardée par contact: Réaction
conduite d’essais supplémentaires qui peuvent être spécifi-
allergique faisant intervenir des systèmes immuno-
quement requis pour l’évaluation de l’irritation orale,
logiques qui ont été activés par une exposition
rectale, pénienne et vaginale.
préalable.
3.2 irritation: Réaction inflammatoire localisée à
une application unique ou à l’application répétée ou
2 Références normatives
continue de la substance soumise à l’essai, sans mise
en cause d’un mécanisme immunologique.
Les normes suivantes contiennent des dispositions
qui, par suite de la référence qui en est faite,
3.3 aedème: Gonflement dû à l’infiltration anormale
constituent des dispositions valables pour la présente
d’un fluide dans la peau.
partie de I’ISO 10993. Au moment de la publication,
les éditions indiquées étaient en vigueur. Toute norme
3.4 érythème: Rougissement de la peau ou d’une
est sujette à révision, et les parties prenantes des
membrane muqueuse.
accords fondés sur la présente partie de I’ISO 10993
sont invitées à rechercher la possibilité d’appliquer les
3.5 escarre: Croûte ou lividité de la peau.
éditions les plus récentes des normes indiquées ci-
1) À publier.
3.6 corrosion: Détérioration irréversible des tissus Dans la troisième étape, des études sur la toxicité
au point de contact avec la peau, par suite de aiguë sont entreprises in vivo pour étudier des maté-
riaux qui n’ont pas déjà été classées comme des
l’application d’une substance à l’essai.
irritants sévères ou des sensibilisateurs puissants au
cours des étapes a) ou b). Les matériaux qui ne
ouverte représentant une perte
3.7 ulcération: Plaie
présentent pas de risque de toxicité aiguë peuvent
des tissus superficiels.
faire l’objet d’une évaluation plus approfondie avec
exposition répétée.
38 . nécrose: Mort de cellules et/ou de tissus.
II n’existe actuellement aucune méthode d’essai in
3.9 témoin négatif: Substance qui ressemble étroi-
vitro approuvée (en dehors des balayages simples)
tement par sa forme à la substance étudiée et qui,
pour détecter les irritants ou les sensibilisateurs; par
soumise à l’essai conformément à la présente partie
conséquent, les lignes directrices sont fournies pour
de I’ISO 10993, ne se révèle ni irritante, ni sensibi-
la conduite d’essais in vivo sur des espèces autres
lisatrice.
que l’espèce humaine.
3.10 témoin positif: Substance qui, soumise à
II n’est pas nécessaire d’utiliser des témoins positifs
l’essai conformément à la présente partie de
pour chaque essai in vivo. Un témoin positif doit être
I’ISO 10993, donne une réaction d’irritation ou de
employé périodiquement pour valider le système
sensibilisation reproductible.
d’essai et démontrer une réaction positive.
3.11 solvant: Substance (produit chimique, exci-
Si une évaluation n’est pas possible par les étapes ci-
pient, milieu, etc.) utilisée pour humidifier, diluer,
dessus, il convient d’envisager des essais non invasifs
mettre en suspension, extraire ou dissoudre la subs-
sur l’homme.
tance soumise à l’essai.
3.12 substance témoin: Solvant utilisé pour humi-
difier, diluer, mettre en suspension, extraire ou dis-
5 Essais d’irritation
soudre la substance étudiée et qui est soumis aux
essais en même temps que la substance étudiée
5.1 Facteurs à prendre en considération lors de
humidifiée, diluée, mise en suspension, extraite ou
la conception et du choix des essais
dissoute.
Les facteurs affectant les résultats des études d’irrita-
tion comportent
4 Principes généraux, approche par étapes
a) la compresse d’essai;
La présente partie de I’ISO 10993 préconise une
approche qui peut être composée des étapes
b) le degré d’occlusion;
suivantes:
c) l’application de la substance soumise à l’essai;
a) étude de la littérature;
d) la zone d’application;
b) essais in vitro (s’il en existe et s’ils ont été
e) la durée de l’exposition;
approuvés);
f) les techniques employées pour évaluer l’essai.
essais in vivo;
c)
essais non invas ifs sur I’hom me/essais cliniques.
dl Des informations complémentaires d’ordre général
figurent dans l’annexe E.
La première étape est une étude de la littérature et
elle doit comporter une évaluation des caractéris-
Tandis qu’une souplesse accrue permet au chercheur
tiques chimiques et physiques ainsi qu’une informa-
d’améliorer la sensibilité de l’essai pour simuler les
tion sur les produits chimiques et les matériaux
conditions d’utilisation et d’exposition de la popu-
structurellement associés. S’ils ne sont pas déjà
lation, l’homogénéité des modes opératoires contri-
connus, le pH et le pKa du matériau (liquide, solution
bue a la comparabilité des résultats des essais avec
ou extraits du matériau) doivent être mesurés avant
des matériaux différents provenant de laboratoires
tout essai in vivo ou in vitro.
différents.
La seconde étape prévoit des essais in vitro. Ces
Des dispositions ont été incluses dans les modes
derniers doivent toujours être envisagés de préfé-
opératoires d’essai pour l’évaluation des dispositifs et
rence aux essais in vivo qu’ils doivent remplacer,
des matériaux dont l’exposition est répétée et/ou
chaque fois que de nouvelles méthodes in vitro
prolongée. II convient que le chercheur, en consul-
apparaissent et sont approuvées.
tation avec le fabricant du dispositif, conçoive l’étude
0 ISO ISO 10993=10:1995(F)
de manière à exagérer le contact (temps et/ou Pour les matériaux solides ou liquides, sauf si une
concentration) prévu en situation clinique. Bien que réaction bien définie a été observée, au moins deux
l’utilisation d’une concentration ou d’un extrait exa- animaux supplémentaires doivent être utilisés. Pour
géré de matériau soit acceptable, il convient d’en tenir les extraits, au moins deux animaux supplémentaires
compte lors de l’interprétation des résultats. par extrait doivent être utilisés.
Pour les produits destinés à être utilisés en grandes
Si, lors de l’essai avec au moins trois animaux, la
quantités sur peau normale ou anormale, aucun risque
réaction est douteuse ou équivoque, des essais
sérieux n’est généralement accepté; cependant, mal-
complémentaires doivent être envisagés.
gré leur tendance à irriter, un grand nombre de
produits sont tout à fait acceptables en raison des
5.2.4 Mode opératoire
avantages qui leur sont inhérents.
Si le pH du matériau soumis à l’essai est inférieur ou 5.2.4.1 Préparation des animaux
égal à 2 ou supérieur ou égal à 11,5, le matériau en
La veille de l’essai, tondre avec soin la fourrure sur le
question peut être déclaré irritant et des essais
dos des animaux sur une distance suffisante des deux
complémentaires sont superflus. Cependant, les
côtés de l’épine dorsale pour permettre l’application
résultats des expériences suggèrent que l’acidité et
et l’observation de toutes les zones d’essai (environ
I’alcalinité du matériau soumis à l’essai ne sont pas
10 cm x 15 cm). N’utiliser que des animaux dont la
les seuls facteurs à prendre en considération pour
peau est intacte et saine.
juger de la capacité d’une substance à affecter grave-
ment la santé. La concentration du matériau soumis à
NOTE 2 L’abrasion de la zone d’essai n’est pas nécessaire
l’essai, la durée du contact et de nombreuses autres
car l’expérience montre que les réactions sur les zones
caractéristiques physiques et chimiques sont égale-
abrasées et sur les zones non abrasées sont identiques.
ment importantes.
Si une exposition répétée est requise, suivre le mode
Étant donné que les concentrations des doses des
opératoire de 52.42, 5.2.4.3 ou 5.2.4.4, répétée sur
modes opératoires d’essai peuvent être exagérées,
un maximum de 21 jours.
un essai positif n’exclut pas nécessairement I’utilisa-
tion du matériau en question.
5.2.4.2 Échantillon en poudre ou liquide
5.2 Essai d‘irritation de la peau
Appliquer 0,5 g ou 0,5 ml du matériau soumis à l’essai
directement sur chaque zone d’essai de la peau selon
5.2.1 Principe les indications de la figure 1. Si la substance est une
poudre, elle doit être légèrement humidifiée avec de
Évaluation du risque d’irritation dermique que pré- l’eau ou un autre solvant approprié avant l’application.
sente le matériau soumis à l’essai.
Couvrir les zones d’application d’un pansement non
occlusif (par exemple une compresse de gaze) de
5.2.2 Matériau soumis à l’essai
25 mm x 25 mm, puis envelopper la zone d’applica-
tion d’un bandage semi-occlusif qui doit être maintenu
Si le matériau soumis à l’essai est un solide ou un
pendant un minimum de 4 h. À la fin de cette période
liquide, il doit être préparé conformément à
de contact, enlever les pansements et repérer la
l’annexe A.
position des zones. Éliminer les résidus de la subs-
tance étudiée par les moyens appropriés, tels que
Si le matériau doit être soumis à l’essai sous forme
lavage à l’eau tiède ou avec tout autre solvant appro-
d’extrait, il doit être préparé conformément à
prié non irritant, et sécher soigneusement.
l’annexe B.
5.2.4.3 Extraits et agents d‘extraction
5.2.3 Les animaux et leur élevage
Appliquer l’extrait ou les extraits appropriés sur les
Des lapins albinos, adultes, sains et jeunes, des deux
compresses de gaze quatre plis de 25 mm x 25 mm
sexes et de même race pesant au minimum 2 kg
(O,5 ml par compresse), une compresse de gaze étant
doivent être utilisés.
appliquée sur chaque côté de l’animal selon les
indications de la figure 1. Appliquer une compresse de
Les animaux doivent être acclimatés et soignés
gaze témoin humidifié avec le milieu d’extraction sur
conformément à l’annexe C.
l’autre côté.
Au départ, un animal doit être utilisé pour évaluer le
matériau soumis à l’essai.
Envelopper la zone d’application d’un bandage semi-
occlusif qui doit être maintenu pendant un minimum
Une réaction bien définie chez un animal évite la
de 4 h. A la fin de cette période de contact, enlever
nécessité de poursuivre les essais.
les pansements et repérer la position des zones.
Éliminer les résidus de la substance soumise à l’essai pendant un minimum de 4 h. À la fin de cette période
par les moyens appropriés, tels que lavage à l’eau de contact, enlever les pansements et repérer la
tiède ou avec tout autre solvant approprié non irritant, position des zones. Éliminer les résidus de la subs-
et sécher soigneusement. tance soumise à l’essai par les moyens appropriés,
tels que lavage à l’eau tiède ou avec tout autre solvant
approprié non irritant, et sécher soigneusement.
5.2.4.4 Échantillon solide
5.2.5 Observation des animaux
Appliquer les échantillons du matériau soumis à
l’essai directement sur la peau des côtés de chaque
Pour les études de toxicité aiguë (une seule exposi-
lapin selon les indications de la figure 1. De la même
tion), noter l’aspect de chaque zone d’application à
manière, appliquer les échantillons témoins sur cha-
1 h, 24 h, 48 h et 72 h après avoir enlevé les
que lapin.
compresses. La période d’observation peut être pro-
longée en cas de lésions persistantes, afin de déter-
Lorsqu’on fait un essai avec des solides (qui peuvent
miner s’il s’agit de lésions réversibles ou irréversibles,
être pulvérisés si on le juge nécessaire), la substance
mais ne doit pas dépasser 14 jours.
soumise à l’essai doit être suffisamment humidifiée
avec de l’eau ou, suivant le cas, avec un autre solvant,
pour assurer un bon contact avec la peau. En cas Pour l’exposition répétée, noter l’aspect de la zone
d’utilisation de solvants, l’influence du solvant sur d’application 1 h après avoir enlevé les compresses et
l’irritation de la peau par la substance soumise à immédiatement avant l’application suivante. Après la
l’essai doit être prise en considération. dernière exposition, noter l’aspect de chaque zone
d’application 1 h, 24 h, 48 h et 72 h après avoir enlevé
les compresses. La période d’observation peut être
Couvrir les zones d’application de pansements non
prolongée en cas de lésions persistantes, afin de
occlusifs de 25 mm x 25 mm (par exemple une com-
déterminer s’il s’agit de lésions réversibles ou irréver-
presse de gaze) puis envelopper la zone d’application
sibles, mais ne doit pas dépasser 14 jours.
d’un bandage semi-occlusif qui doit être maintenu
Region dorsale tondue
Zone intacte d’essai
Zone intacte d’essai
/- Zone intacte temoin l)
Zone intacte témoin
+El rr
1) Si la préparation de l’echantillon Mcessite ce type de temoin
- Position des zones d’application sur la peau
Figure 1
0 ISO
veiller la guérison ne sont pas utilisées pour cette
Décrire et classer les réactions d’érythème et
détermination.
d’œdème de la peau selon le système de classifi-
cation donné dans le tableau 1 pour chaque zone
d’application et à chaque intervalle de temps et Faire la somme des résultats obtenus pour chacun
enregistrer les résultats pour le procès-verbal d’essai. des animaux et diviser le total par le nombre des
animaux. Cette valeur est l’indice d’irritation primaire.
NOTE 3 Dans certains cas, on peut recourir a des tech-
niques histologiques non invasives.
Pour l’exposition répétée, déterminer l’indice d’irrita-
tion cumulé en procédant de la manière suivante.
- Système de classification des réactions
Tableau 1
de la peau
Pour chaque animal, faire la somme des résultats
d’irritation (pour à la fois érythème et oedème), à la fin
Classification
Réaction
de chaque période prescrite. Diviser le total obtenu
numérique
par le nombre total des observations pour obtenir le
Formation d’érythème et d’escarre
résultat d’irritation par animal.
Pas d’érythème
Faire la somme des résultats d’irritation de chacun
Très léger érythème (à peine per-
des animaux et diviser par le nombre total des
ceptible)
animaux. La valeur obtenue est l’indice d’irritation
Érythème bien défini
cumulé.
Érythème modéré
Érythème grave (couleur rouge bet-
L’indice d’irritation cumulé est alors comparé aux
terave) à formation d’escarre empê-
catégories d’indices d’irritation cumulés définies dans
chant la dégradation de l’érythème
le tableau 2 et la catégorie appropriée est enregistrée
Formation d’oedème
pour le rapport.
Pas d’oedème
NOTE 4 Les catégories d’indices d’irritation cumulés ont
CEdème très léger (à peine percep-
pour base les informations associant l’indice d’irritation
tible)
primaire (IIP) pour les produits chimiques chez les lapins à
Edème bien défini (bords de la zone
la réaction d’irritation primaire chez l’homme pour un
bien délimités par un gonflement
certain nombre de produits chimiques qui ont été essayés
net)
sur les deux espèces.
Edème modéré (gonflement d’envi-
ron 1 mm)
Pour toute réaction, déterminer la réaction d’irritation
Edème grave (gonflement de plus
maximale, le délai d’apparition de la réaction et le délai
de 1 mm se prolongeant au-delà de
de réaction maximale.
la zone d’exposition)
L’indice d’irritation primaire ou l’indice d’irritation
Résultat total possible pour l’irritation 8
cumulé sont caractérisés par l’un des nombres et par
NOTE - Toute autre modification préjudiciable sur les zones de
l’une des descriptions du tableau 2.
peau concernées doit être enregistrée et consignée dans le
rapport.
Tableau 2 - Catégories de réactions d’irritation chez
le lapin
5.2.6 Évaluation des résultats
Résultat moyen
Catégorie de la réaction
En cas d’exposition aiguë, déterminer l’indice d’irrita-
Négligeable 0 à 0,4
tion primaire (IIP) en procédant de la manière sui-
vante.
Légère 0,5 à 1,9
Modérée 2 à 4,9
Pour chaque animal, faire la somme des résultats
d’irritation primaire obtenus avec le matériau étudié
5à8
Grave
pour les réactions d’oedème et d’érythème à la fin de
chaque période prescrite et diviser le résultat par le
nombre total des observations (six; deux à la fin de
5.2.7 Présentation des résultats
chaque période prescrite). Si des excipients témoins
sont utilisés, calculer le résultat d’irritation primaire
Le rapport d’essai doit comporter
pour l’excipient témoin et soustraire ce résultat du
résultat du matériau soumis à essai pour obtenir le
a) une description du (ou des) matériau(x) ou du
résultat d’irritation primaire.
dispositif soumis à essai;
b) l’utilisation ou l’application auxquelles sont desti-
N’utiliser pour les calculs que les observations faites
nés le (ou les) matériau(x) ou le dispositif soumis à
au bout de 24 h, 48 h et 72 h. Les observations faites
l’essai;
avant l’administration ou au-delà de 72 h pour sur-
0 ISO
ISO 1099340:1995(F)
Si le matériau soumis à l’essai est tel qu’il ne puisse
c) une description détaillée de la méthode utilisée
être appliqué que sous forme d’extrait, préparer les
pour préparer le matériau ou le dispositif soumis à
extraits selon les indications de l’annexe B. Instiller un
essai;
aliquote de 0,l ml de l’extrait dans le sac conjonctival
les animaux de l’essai;
dl
inférieur d’un œil.
la méthode d’application sur les zones d’essai;
e)
Préparer les substances témoins dans des conditions
identiques à celles décrites ci-dessus, en utilisant et le
f) la manière dont l’examen visuel des zones concer-
solvant polaire, et le solvant non polaire, en l’absence
nées a été effectué et un enregistrement des
de matériau soumis à l’essai.
observations;
g) l’évaluation des résultats.
5.3.4 Les animaux et leur élevage
Utiliser des lapins albinos, adultes jeunes et sains, des
5.3 Essai d’irritation oculaire
deux sexes et de même race, pesant entre 2 kg et
.
3 kg
5.3.1 Principe
Les animaux doivent être acclimatés et soignés
Évaluation du risque d’irritation oculaire que présen te
conformément aux modes opératoires prescrits dans
le matériau so umis à l’essai.
l’annexe C.
5.3.2 Matériaux exclus de l’essai
r un animal pour évaluer le matériau
Au départ, utilise
soumis à l’essai.
Les matériaux et/ou produits finaux dont une étude
dermique a démontre des propriétés corrosives
Une réaction bien définie chez un animal ne nécessite
nettes ou un pouvoir d’irritation grave n’ont pas à faire
pas la poursuite des essais.
l’objet d’essais complémentaires d’irritation oculaire.
Les substances fortement acides ou alcalines (pH G 2
Pour les matériaux solides ou liquides, sauf s’il a été
ou pH 2 11,5) ne doivent pas être soumises à ces
observé une réaction bien définie, prévoir au mini-
essais car leurs propriétés corrosives sont prévisibles.
mum deux animaux supplémentaires. Pour les
Ces produits doivent être considérés comme irritants
extraits, prévoir au minimum deux animaux supplé-
pour les yeux.
mentaires par extrait.
5.3.3 Matériau soumis à l’essai
Si, lors de l’essai avec au moins trois animaux, la
réaction est douteuse ou équivoque des essais
Si le matériau soumis à l’essai est un liquide, instiller
complémentaires doivent être envisagés.
0,l ml de cette substance non diluée dans le sac
conjonctival inférieur d’un œil.
5.3.5 Mode opératoire
Si le matériau soumis à l’essai est un produit solide ou
granulaire, le réduire en une fine poussière. Après un
Au plus tard 24 h avant le début de l’essai, examiner
tassement modéré, instiller cette quantité, dont le
visuellement les deux yeux de chaque lapin pour
volume et le poids sont respectivement 0,l ml et
déceler toute anomalie oculaire éventuelle. Si l’un des
moins de 100 mg, dans le sac conjonctival inférieur
yeux présente une anomalie quelconque, choisir un
d’un œil.
autre lapin.
NOTE 5 Certains produits ne peuvent pas être soumis à
Lors de l’examen des yeux, il est possible d’utiliser de
des essais directement dans l’oeil. Une dégradation
la fluorescéine sodique à 2 % BP pour visualiser une
mécanique peut rendre l’essai inutile.
éventuelle dégradation de la cornée. II est recom-
mandé d’utiliser un ophtalmoscope, une lampe à
Si le matériau soumis à l’essai se trouve dans un
fente manuelle ou tout autre dispositif approprié.
pulvérisateur, il doit être expulsé et on doit en admi-
nistrer 0,l ml comme pour les liquides.
Instiller le matériau soumis à l’essai selon les
indications de 5.3.3.
.
SI le matériau soumis à l’essai se trouve dans une
bo mbe aérosol, il peut être examiné
Maintenir les paupières closes pendant 1 s environ
après l’instillation.
a) soit par une seule pulvérisation d’une durée de 1 s
NOTE 6 L’œil controlatéral de chaque animal sert de
à une distance de 10 cm dirigée vers I’œil ouvert;
témoin non traité.
b) soit par expulsion du produit aérosol dans un
Si une exposition répétée au matériau est prévue et si
récipient frais pour procéder comme pour les
le matériau soumis à l’essai n’a pas démontré lors de
liquides.
0 ISO
5.3.7 Évaluation des résultats
l’essai de toxicité aiguë une réaction significative, une
étude par exposition répétée peut être réalisée. II
convient que la durée de l’exposition soit du même Les différences entre I’œil qui a subi l’essai et l’oeil
ordre que la durée d’utilisation du matériau ou du témoin doivent être caractérisées et expliquées dans
dispositif en situation clinique. les termes du système de classification utilisé dans le
tableau 3.
5.3.6 Observation des animaux
5.3.7.1 Exposition aiguë
Pour des animaux qui reçoivent une seule instillation
du matériau soumis a l’essai, examiner les deux yeux
d’un animal présente une
Si l’oeil traité chez plus
de chaque animal environ 1 h, 24 h, 48 h et 72 h après
réaction positive (chiffres repérés par un astérisque
l’instillation.
dans le tableau 3) à l’un quelconque des moments
d’observation, le matériau est alors considéré comme
II peut être nécessaire de prolonger l’observation en
irritant pour les yeux et il n’est pas nécessaire de
cas de lésions persistantes pour déterminer I’aggra-
poursuivre les essais.
vation des lésions ou leur recul; il n’y a généralement
pas lieu de dépasser 21 jours. Une prolongation de
Si un seul des trois yeux traités présente une réaction
l’observation n’est pas justifiable pour les animaux
positive ou si les réactions sont équivoques, d’autres
atteints de lésions graves.
animaux doivent être traités.
Classer et enregistrer toutes les réactions observées
en fonction de l’échelle de classement des lésions Lorsque d’autres animaux ont été traités, le matériau
soumis à l’essai est considéré comme irritant pour les
oculaires donnée dans le tableau 3.
yeux si plus de la moitié des yeux traités dans le
Pour des animaux qui reçoivent des instillations
groupe d’essai présentent une réaction positive
multiples du matériau soumis à l’essai, examiner les
(chiffres repérés par un astérisque dans le tableau 3) à
deux yeux de chaque animal immediatement avant et
l’un quelconque des stades de l’observation.
environ 1 h après chaque instillation.
Une réaction grave chez un seul animal est consi-
Dans le cas de signes évidents d’irritation à la suite du
dérée comme suffisante pour qualifier le matériau
dernier traitement, les observations peuvent être pro-
d’irritant pour les yeux.
longées. II peut être nécessaire de prolonger I’obser-
vation si la cornée demeure affectée ou en cas de
5.3.7.2 Exposition répétée
persistance d’une autre irritation oculaire afin de
déterminer l’évolution des lésions et leur réversibilité.
Le matériau soumis à l’essai est considéré comme
Classer et enregistrer les réactions observées confor-
irritant pour les yeux si plus de la moitié des animaux
mément à l’échelle de classement des lésions
du groupe soumis à l’essai présentent une réaction
oculaires donnée dans le tableau 3.
positive (chiffres repérés par un astérisque dans le
tableau 3) à l’un quelconque des stades de I’obser-
Éliminer immédiatement de l’étude et tuer avec
vation.
humanité tout animal qui, à n’importe quel moment,
manifeste
5.3.8 Présentation des résultats
a) des lésions oculaires graves (par exemple écoule-
Le rapport d’essai doit comporter
ment et ulcération de la membrane conjonctivale,
perforation de la cornée, présence de sang ou de
a) une description du (ou des) matériau(x) soumis à
pus dans la chambre antérieure); ou
l’essai;
des taches de sang ou un écoulement purulent;
b)
b) l’utilisation et/ou l’application auxquelles sont des-
ou
tinés le (ou les) matériaux ou le dispositif soumis à
l’essai;
une ulcération significative de la cornée.
cl
c) une description détaillée de la méthode employée
Éliminer de l’étude tout animal qui présente les effets
pour préparer le matériau soumis à l’essai;
maximaux d’après le système de classification du
les animaux de l’essai;
dl
absence de réflexion de la lumière
tableau 3 -
(réaction de l’iris de niveau 2) ou opacité de la cornée
la méthode d’instillation;
e)
(de niveau 4) - sans signe de récupération dans les
24 h ou inflammation conjonctivale maximale (ché-
f) la manière dont les examens visuels ont été
mosis de niveau 4 et rougeur de niveau 3) - sans
effectués et un enregistrement des observations;
signe de récupération dans les 48 h, et tuer l’animal
non cruellement. g) l’évaluation des résultats.
- Système de classification des lésions oculaires
Tableau 3
Classement
Réaction
numérique
1. Cornée
Degré d’opacité (utiliser la zone la plus dense)
Absence d’opacité 0
Zones parsemées ou diffuses, détails de l’iris nettement visibles 1*
Zones translucides aisément discernables, détails de l’iris legèrement obscurcis 2*
Zones opalescentes, pas de détails de l’iris visibles, taille de la pupille a peine discernable 3*
4*
Opaque, iris invisible
Surface de la cornée concernée
Un quart (ou moins), mais plus de zéro 0
Plus d’un quart, mais moins de la moitié 1
Plus de la moitié, mais moins des trois quarts
Plus des trois quarts, jusqu’à la totalité de la surface 3
2. Iris
Normal 0
Épaisseurs supérieures à la normale, gonflement par congestion, injection circumcornéenne (l’un des
symptômes ou tous ou une combinaison de plusieurs d’entre eux), l’iris réagit encore à la lumière (une
réaction lente est positive) 1*
Pas de réaction à la lumière, hémorragie, destruction importante (un ou plusieurs de ces symptômes) 2*
3. Conjonctive
Rougeur (concerne la conjonctive palpébrale et la conjonctive bulbaire à l’exclusion de la cornée et de l’iris)
Vaisseaux normaux 0
Vaisseaux nettement plus injectés que normal 1
Rouge plus diffus, d’un pourpre plus fonce, les différents vaisseaux ne sont pas facilement discernables 2*
Rouge sang diffus 3*
Chémosis
Absence de gonflement 0
Tout gonflement au-dessus de la normale (y compris membrane nictitante) 1
Gonflement évident avec éversion partielle des paupières 2*
Gonflement avec paupières presque à demi fermées 3*
Gonflement avec paupières entre a demi fermées à complètement fermées 4*
Écoulement
Pas d’écoulement 0
Tout écoulement différent de la normale (ne pas tenir compte des petites quantités observées au canthus
interne des animaux normaux) 1
Ecoulement avec humidification des paupières et des poils voisins des paupières 2
Écoulement avec humidification des paupières et des poils ainsi que d’une importante surface tout autour de
l’oeil 3
* Résultat positif
5.4.3 Matériau soumis à l’essai
5.4 Essai de réactivité intracutanée
(intradermique)
Les matériaux soumis à l’essai doivent être des
extraits et préparés conformément à l’annexe B.
5.4.1 Principe
Les animaux et leur élevage
5.4.4
Évaluation du risque d’irritation que présente le
matériau soumis à essai après injection d’extraits par Utiliser des lapins albinos, adultes jeunes et sains, des
voie intradermique. deux sexes et de même race, pesant au minimum
.
2 kg
5.4.2 Matériaux exclus des essais
Les animaux doivent être acclimatés et soignés
conformément à l’annexe C.
Ne pas soumettre aux essais un matériau qui s’est
avéré irritant pour la peau, l’oeil ou les muqueuses ou
II convient d’utiliser au départ un minimum de trois
tout matériau dont le pH est G 2 ou 3 11,5.
animaux pour évaluer le matériau soumis à l’essai.
0 ISO ISO 10993-10:1995(F)
Classer la réaction des tissus du point de vue de
Si la réaction est équivoque ou douteuse lors de
l’érythème et de l’oedème selon le système de
l’essai initial, des essais complémentaires doivent être
classification donné dans le tableau 4 pour chaque
envisagés.
zone d’injection et à chaque intervalle de temps
observé, et enregistrer les résultats.
5.4.5 Mode opératoire
intradermique d’une huile suscite
La veille de l’essai, tondre avec soin la fourrure sur le NOTE 7 L’injection
fréquemment une réaction inflammatoire.
dos des animaux sur une distance suffisante des deux
côtés de l’épine dorsale pour permettre l’injection des
extraits. L’injection par voie intraveineuse d’un colorant vital
approprié comme le bleu de Trypan ou le bleu d’Evans
Injecter par voie intracutanée 0,2 ml de l’extrait
peut être effectuée au moment de l’examen des 72 h
obtenu avec le solvant polaire en cinq points sur un
pour aider à évaluer la réaction en délimitant la zone
seul côté de chaque lapin (voir figure 2). Utiliser pour
irritée.
les injections intradermiques une aiguille aussi fine
que possible, appropriée à la viscosité du matériau
Des techniques non invasives, si elles sont dispo-
soumis à l’essai.
nibles, peuvent être utilisées pour faciliter l’évaluation.
injecter 0,2 ml du solvant
De la même manière,
polaire en cinq points du même côté de chaque lapin
5.4.7 Évaluation des résultats
mais en arrière des premières injections (voir figure 2).
Déterminer l’indice d’irritation primaire en procédant
Répéter les modes opératoires ci-dessus pour l’extrait
de la manière suivante.
obtenu avec le solvant non polaire le solvant témoin
non polaire sur l’autre côté de chaque lapin (voir
Pour chaque animal, faire la somme des résultats
figure 2).
d’irritation primaire obtenus séparément pour les
réactions d’oedème et d’érythème pour chaque extrait
En cas d’utilisation d’autres solvants, répéter les
soumis à l’essai à la fin de chaque période d’obser-
étapes ci-dessus pour l’extrait obtenu avec les autres
vation et diviser cette somme par le nombre total des
solvants et les témoins des solvants.
observations. Une évaluation similaire doit être faite
sur les zones où la substance témoin a été injectée.
5.4.6 Observation des animaux
Soustraire le résultat de la substance témoin du
résultat du matériau soumis à l’essai pour obtenir le
Noter l’aspect de chaque zone d’injection immé-
résultat d’irritation primaire qui sera utilisé lors de la
diatement après l’injection puis 24 h, 48 h et 72 h
détermination de l’indice d’irritation primaire.
après l’injection.
T@te
1 # # 1
2 # # 2
Injections de 0,2 ml
Inje ctions de 02 ml
4 . de l'extrait
3 # # 3
del 'extra .it polaire
non polaire
4 # # 4
5 # # 5
6 # # 6
7 # #7
Injections de 0,2 ml
Injections de 02 ml
du solvanttemoin
du solvanttemoin 4
8 # # 8
non polaire
polaire
9 # #9
10 # # 10
Queue
Disposition des zones d’injection
Figure 2 -
0 ISO
- Système de classification pour les 5.4.8 Présentation des résultats
Tableau 4
réactions intracutanées (intradermiques)
Le rapport d’essai doit comporter
Classification
a) une description du (ou des) matériau(x) ou du
Réaction
numérique
dispositif soumis à l’essai;
Formation d’érythème et d’escarre
b) l’utilisation et/ou l’application auxquelles sont
Pas d’érythème
destinés le (ou les) matériau(x) ou dispositif
Très léger érythème (à peine per-
soumis à l’essai;
ceptible)
Érythème bien défini
c) une description détaillée de la méthode employée
Érytheme modéré 3 pour préparer le matériau ou le dispositif soumis à
l’essai;
Érythème grave (couleur rouge bet-
terave) à formation d’escarre empê-
d) les animaux de l’essai;
chant la dégradation de l’érythème
Formation d’oedème
e) la méthode d’injection;
Pas d’oedème 0
f) la manière dont l’examen visuel des zones concer-
Oedème très léger (à peine per-
nées a été effectué et un enregistrement des
ceptible)
observations;
Oedème bien défini (bords de la zone
bien délimités par un gonflement
g) l’évaluation des résultats.
net)
CEdème modéré (gonflement d’envi-
ron 1 mm) 3
Oedème grave (gonflement de plus
6 Essais de sensibilisation
de 1 mm se prolongeant au-delà de
la zone d’exposition)
II existe plusieurs méthodes qui permettent de
Résultat total possible pour l’irritation 8 déterminer la sensibilisation de la peau chez le cochon
d’Inde. Les deux méthodes les plus couramment
NOTE - Toute autre modification préjudiciable sur les zones de
utilisées sont la méthode de maximisation
peau concernées doit être enregistrée et consignée dans le
(Magnusson et Kligman) et la méthode avec système
procès-verbal d’essai.
occlusif (Buehler). Une seule de ces deux méthodes
suffit pour l’évaluation. L’essai de maximisation (6.2)
qui est considéré comme le plus précis est la
N’utiliser pour les calculs que les observations faites méthode utilisée de préférence, particulièrement pour
au bout de 24 h, 48 h et 72 h. l’évaluation des extraits. L’annexe E donne une liste
d’autres méthodes qui peuvent être utilisées.
Faire la somme des résultats d’irritation primaire
obtenus pour chacun des animaux et diviser le total
par le nombre des animaux. Cette valeur correspond à
6.1 Facteurs à prendre en considération lors de
l’indice d’irritation primaire (1 IP).
la conception et du choix des essais
L’indice d’irritation primaire est caractérisé par l’un
Les caractéristiques biochimiques et physiques du
des nombres et par l’une des descriptions donnés
matériau soumis à l’essai peuvent influencer le choix
dans le tableau 5.
de l’essai. L’essai de maxi
...
Iso
NORME
10993-10
INTERNATIONALE
Première édition
1995-03-I 5
Évaluation biologique des dispositifs
médicaux -
Partie 10:
Essais d’irritation et de sensibilisation
Biological evaluation of medical devices -
Part 10: Tests for irritation and sensitization
Numéro de réfbence
ISO 10993-I 0: 1995(F)
ISO 1099340:1995(F)
Sommaire
Page
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1
1 Domaine d’application
..,.............................................................. 1
2 Références normatives
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1
3 Définitions
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2
4 Principes généraux, approche par étapes
5 Essais d’irritation . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
5.1 Facteurs a prendre en consideration lors de la conception et
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2
du choix des essais
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3
5.2 Essai d’irritation de la peau
5.3 Essai d’irritation oculaire . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8
5.4 Essai de réactivité intracutanée (intradermique)
6 Essais de sensibilisation . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10
6.1 Facteurs à prendre en considération lors de la conception et du
choix des essais . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11
6.2 Essai de maximisation de sensibilisation
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 13
6.3 Essai de sensibilisation avec système occlusif
Annexes
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16
A Préparation des matériaux pour les essais
B Méthode d’extraction des matériaux pour les essais biologiques 17
Les animaux et leur élevage . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19
C
Essais d’irritation supplémentaires . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20
D
.................................................................. 28
E Informations générales
.................................................................................. 31
F Bibliographie
0 ISO 1995
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publi-
cation ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun
procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans
.
l’accord Rcrit de l’editeur.
Organisation internationale de normalisation
Case postale 56 l CH-l 211 Geneve 20 0 Suisse
Imprimé en Suisse
ii
0 ISO ISO 10993=10:1995(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de
I’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de I’ISO. Chaque comité membre intéressé par une
étude a le droit de faire partie du comité technique créé a cet effet. Les
organisations internationales, gouvernementales et non gouverne-
mentales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux. L’ISO
collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale
(CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques
sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication comme
Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale ISO 10993-10 a été élaborée par le comité
technique lSO/TC 194, Évaluation biologique des dispositifs médicaux.
L’ISO 10993 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre
général Évaluation biologique des dispositifs médicaux:
- Partie 1: Lignes directrices pour le choix des essais
- Partie 2: Exigences concernant la protection des animaux
- Partie 3: Essais concernant la génotoxicité, la cancérogénicité et la
toxicité sur la reproduction
- Partie 4: Choix des essais concernant les interactions avec le sang
- Partie 5: Essais de cyto toxicité: méthodes in vitro
- Partie 6: Essais concernant les effets locaux après implantation
- Partie 7: Résidus de stérilisation à I ‘oxyde d’é thyène
- Partie 9: Dégradation des matériaux relative aux essais biologiques
[Rapport technique]
- Partie 10: Essais d’irritation et de sensibilisation
- Partie II: Essais de toxicité systémique
- Partie 72: Préparation des échantillons et matériaux de référence
-
Partie 13: Identification et quan tification de produits de dégradation
de polymères
- Partie 14: Identification et quan tification de produits de dégradation
de céramiques
- Partie 7 5: Identification et quan tification de produits de dégradation
de métaux et alliages revêtus et non revêtus
. . .
III
- Partie 76: Lignes directrices générales concernant la conception de
l’étude toxicocinétique des produits de dégradation et des sub-
stances relargables
- Partie 17: Résidus de glutaraldéhyde et de formaldéhyde dans des
dispositifs médicaux stérilisés industriellement
Les prochaines parties traiteront des autres aspects relatifs aux essais
biologiques.
La présente partie de I’ISO 10993 est le résultat de l’harmonisation de
nombreuses normes et lignes directrices, y compris de la norme
britannique BS 5736, des lignes directrices de I’OCDE, de la Pharmacopée
des États-Unis et de la Pharmacopée européenne. Elle vise à constituer le
document global de référence pour la sélection et la conduite des essais
permettant d’évaluer les réactions d’irritation et de sensibilisation au
matériau et la sécurité du dispositif.
Les annexes A, B et C font partie intégrante de la présente partie de
I’ISO 10993. Les annexes D, E et F sont données uniquement à titre
d’information.
0 ISO ISO 10993-10:1995(F)
Introduction
La présente partie de I’ISO 10993 évalue les risques éventuels dus au
contact des produits chimiques libérés par des dispositifs et pouvant
provoquer une irritation de la peau et des muqueuses, une irritation des
yeux et une sensibilisation retardée par contact.
Certains matériaux contenus dans ces dispositifs ont fait l’objet d’essais,
et le risque d’irritation ou de sensibilisation de la peau ou des muqueuses
qu’ils présentent a été documenté. D’autres matériaux ainsi que leurs
constituants chimiques n’ont pas fait l’objet d’essais et peuvent agir
différemment lorsque des tissus biologiques y sont exposés. II appartient
au fabricant d’évaluer le potentiel de toxicité humaine de chaque dispositif
avant de le commercialiser.
Traditionnellement, des essais limités sur les petits animaux sont
effectués avant les essais sur l’homme, afin de faciliter la prévision de la
réaction humaine. Plus récemment, des essais in vitro ont été introduits
comme une alternative. Malgré les progrès réalisés et les efforts
considérables déployés dans ce sens, l’examen des résultats suggére que
la panoplie ne comporte à ce jour aucun essai in vitro suffisamment
satisfaisant pour éliminer la prescription d’essais in vivo. Lorsque c’est
possible, l’emploi préliminaire de méthodes in vitro est encouragé comme
essais de sélection préalables aux essais sur les animaux. Afin de réduire
le nombre des animaux employés, les présentes normes utilisent une
approche par étapes, avec examen et analyse des résultats des essais à
chaque étape.
II incombe au chercheur de conduire ces études en employant de bonnes
pratiques de laboratoire, conformes à la réglementation relative au bien-
être des animaux. Étant donné que le nombre des animaux est limité, les
informations obtenues peuvent ne pas être suffisantes pour justifier
l’application des méthodes statistiques.
Page blanche
NORME INTERNATIONALE o ISO
ISO 10993=10:1995(F)
Évaluation biologique des dispositifs médicaux -
Partie 10:
Essais d’irritation et de sensibilisation
après. Les membres de la CEI et de I’ISO possèdent
1 Domaine d’application
le registre des Normes internationales en vigueur à un
moment donné.
La présente partie de NS0 10993 décrit les méthodes
d’essai
ISO 10993-I : 1992, Évaluation biologique des dispo-
sitifs médita ux - Partie 1: Lignes directrices pour le
a) pour évaluer le risque d’irritation que présentent
choix des essais.
les dispositifs et les matériaux qui les constituent;
b) pour évaluer le risque de sensibilisation que pré-
ISO 10993-I 2: --l) Évaluation biologique des dispo-
sentent les dispositifs et les matériaux qui les
sitifs médicaux l Partie 12: Préparation des échan-
constituent. tillons et matériaux de référence.
Ces méthodes d’essais sont recommandées pour la
3 Définitions
plupart des catégories de dispositifs et de modes de
contact donnés dans I’ISO 10993-I. Dans la liste des
Pour les besoins de la présente partie de I’ISO 10993,
essais, choisir ceux qui sont en rapport avec I’utili-
les définitions données dans I’ISO 10993-I ainsi que
sation finale du dispositif. II est également indiqué des
les définitions suivantes s’appliquent.
lignes directrices sur la préparation des matériaux
concernant spécifiquement les essais précités.
3.1 sensibilisation (allergique par contact);
NOTE 1 L’annexe D donne des lignes directrices sur la
hypersensibilité retardée par contact: Réaction
conduite d’essais supplémentaires qui peuvent être spécifi-
allergique faisant intervenir des systèmes immuno-
quement requis pour l’évaluation de l’irritation orale,
logiques qui ont été activés par une exposition
rectale, pénienne et vaginale.
préalable.
3.2 irritation: Réaction inflammatoire localisée à
une application unique ou à l’application répétée ou
2 Références normatives
continue de la substance soumise à l’essai, sans mise
en cause d’un mécanisme immunologique.
Les normes suivantes contiennent des dispositions
qui, par suite de la référence qui en est faite,
3.3 aedème: Gonflement dû à l’infiltration anormale
constituent des dispositions valables pour la présente
d’un fluide dans la peau.
partie de I’ISO 10993. Au moment de la publication,
les éditions indiquées étaient en vigueur. Toute norme
3.4 érythème: Rougissement de la peau ou d’une
est sujette à révision, et les parties prenantes des
membrane muqueuse.
accords fondés sur la présente partie de I’ISO 10993
sont invitées à rechercher la possibilité d’appliquer les
3.5 escarre: Croûte ou lividité de la peau.
éditions les plus récentes des normes indiquées ci-
1) À publier.
3.6 corrosion: Détérioration irréversible des tissus Dans la troisième étape, des études sur la toxicité
au point de contact avec la peau, par suite de aiguë sont entreprises in vivo pour étudier des maté-
riaux qui n’ont pas déjà été classées comme des
l’application d’une substance à l’essai.
irritants sévères ou des sensibilisateurs puissants au
cours des étapes a) ou b). Les matériaux qui ne
ouverte représentant une perte
3.7 ulcération: Plaie
présentent pas de risque de toxicité aiguë peuvent
des tissus superficiels.
faire l’objet d’une évaluation plus approfondie avec
exposition répétée.
38 . nécrose: Mort de cellules et/ou de tissus.
II n’existe actuellement aucune méthode d’essai in
3.9 témoin négatif: Substance qui ressemble étroi-
vitro approuvée (en dehors des balayages simples)
tement par sa forme à la substance étudiée et qui,
pour détecter les irritants ou les sensibilisateurs; par
soumise à l’essai conformément à la présente partie
conséquent, les lignes directrices sont fournies pour
de I’ISO 10993, ne se révèle ni irritante, ni sensibi-
la conduite d’essais in vivo sur des espèces autres
lisatrice.
que l’espèce humaine.
3.10 témoin positif: Substance qui, soumise à
II n’est pas nécessaire d’utiliser des témoins positifs
l’essai conformément à la présente partie de
pour chaque essai in vivo. Un témoin positif doit être
I’ISO 10993, donne une réaction d’irritation ou de
employé périodiquement pour valider le système
sensibilisation reproductible.
d’essai et démontrer une réaction positive.
3.11 solvant: Substance (produit chimique, exci-
Si une évaluation n’est pas possible par les étapes ci-
pient, milieu, etc.) utilisée pour humidifier, diluer,
dessus, il convient d’envisager des essais non invasifs
mettre en suspension, extraire ou dissoudre la subs-
sur l’homme.
tance soumise à l’essai.
3.12 substance témoin: Solvant utilisé pour humi-
difier, diluer, mettre en suspension, extraire ou dis-
5 Essais d’irritation
soudre la substance étudiée et qui est soumis aux
essais en même temps que la substance étudiée
5.1 Facteurs à prendre en considération lors de
humidifiée, diluée, mise en suspension, extraite ou
la conception et du choix des essais
dissoute.
Les facteurs affectant les résultats des études d’irrita-
tion comportent
4 Principes généraux, approche par étapes
a) la compresse d’essai;
La présente partie de I’ISO 10993 préconise une
approche qui peut être composée des étapes
b) le degré d’occlusion;
suivantes:
c) l’application de la substance soumise à l’essai;
a) étude de la littérature;
d) la zone d’application;
b) essais in vitro (s’il en existe et s’ils ont été
e) la durée de l’exposition;
approuvés);
f) les techniques employées pour évaluer l’essai.
essais in vivo;
c)
essais non invas ifs sur I’hom me/essais cliniques.
dl Des informations complémentaires d’ordre général
figurent dans l’annexe E.
La première étape est une étude de la littérature et
elle doit comporter une évaluation des caractéris-
Tandis qu’une souplesse accrue permet au chercheur
tiques chimiques et physiques ainsi qu’une informa-
d’améliorer la sensibilité de l’essai pour simuler les
tion sur les produits chimiques et les matériaux
conditions d’utilisation et d’exposition de la popu-
structurellement associés. S’ils ne sont pas déjà
lation, l’homogénéité des modes opératoires contri-
connus, le pH et le pKa du matériau (liquide, solution
bue a la comparabilité des résultats des essais avec
ou extraits du matériau) doivent être mesurés avant
des matériaux différents provenant de laboratoires
tout essai in vivo ou in vitro.
différents.
La seconde étape prévoit des essais in vitro. Ces
Des dispositions ont été incluses dans les modes
derniers doivent toujours être envisagés de préfé-
opératoires d’essai pour l’évaluation des dispositifs et
rence aux essais in vivo qu’ils doivent remplacer,
des matériaux dont l’exposition est répétée et/ou
chaque fois que de nouvelles méthodes in vitro
prolongée. II convient que le chercheur, en consul-
apparaissent et sont approuvées.
tation avec le fabricant du dispositif, conçoive l’étude
0 ISO ISO 10993=10:1995(F)
de manière à exagérer le contact (temps et/ou Pour les matériaux solides ou liquides, sauf si une
concentration) prévu en situation clinique. Bien que réaction bien définie a été observée, au moins deux
l’utilisation d’une concentration ou d’un extrait exa- animaux supplémentaires doivent être utilisés. Pour
géré de matériau soit acceptable, il convient d’en tenir les extraits, au moins deux animaux supplémentaires
compte lors de l’interprétation des résultats. par extrait doivent être utilisés.
Pour les produits destinés à être utilisés en grandes
Si, lors de l’essai avec au moins trois animaux, la
quantités sur peau normale ou anormale, aucun risque
réaction est douteuse ou équivoque, des essais
sérieux n’est généralement accepté; cependant, mal-
complémentaires doivent être envisagés.
gré leur tendance à irriter, un grand nombre de
produits sont tout à fait acceptables en raison des
5.2.4 Mode opératoire
avantages qui leur sont inhérents.
Si le pH du matériau soumis à l’essai est inférieur ou 5.2.4.1 Préparation des animaux
égal à 2 ou supérieur ou égal à 11,5, le matériau en
La veille de l’essai, tondre avec soin la fourrure sur le
question peut être déclaré irritant et des essais
dos des animaux sur une distance suffisante des deux
complémentaires sont superflus. Cependant, les
côtés de l’épine dorsale pour permettre l’application
résultats des expériences suggèrent que l’acidité et
et l’observation de toutes les zones d’essai (environ
I’alcalinité du matériau soumis à l’essai ne sont pas
10 cm x 15 cm). N’utiliser que des animaux dont la
les seuls facteurs à prendre en considération pour
peau est intacte et saine.
juger de la capacité d’une substance à affecter grave-
ment la santé. La concentration du matériau soumis à
NOTE 2 L’abrasion de la zone d’essai n’est pas nécessaire
l’essai, la durée du contact et de nombreuses autres
car l’expérience montre que les réactions sur les zones
caractéristiques physiques et chimiques sont égale-
abrasées et sur les zones non abrasées sont identiques.
ment importantes.
Si une exposition répétée est requise, suivre le mode
Étant donné que les concentrations des doses des
opératoire de 52.42, 5.2.4.3 ou 5.2.4.4, répétée sur
modes opératoires d’essai peuvent être exagérées,
un maximum de 21 jours.
un essai positif n’exclut pas nécessairement I’utilisa-
tion du matériau en question.
5.2.4.2 Échantillon en poudre ou liquide
5.2 Essai d‘irritation de la peau
Appliquer 0,5 g ou 0,5 ml du matériau soumis à l’essai
directement sur chaque zone d’essai de la peau selon
5.2.1 Principe les indications de la figure 1. Si la substance est une
poudre, elle doit être légèrement humidifiée avec de
Évaluation du risque d’irritation dermique que pré- l’eau ou un autre solvant approprié avant l’application.
sente le matériau soumis à l’essai.
Couvrir les zones d’application d’un pansement non
occlusif (par exemple une compresse de gaze) de
5.2.2 Matériau soumis à l’essai
25 mm x 25 mm, puis envelopper la zone d’applica-
tion d’un bandage semi-occlusif qui doit être maintenu
Si le matériau soumis à l’essai est un solide ou un
pendant un minimum de 4 h. À la fin de cette période
liquide, il doit être préparé conformément à
de contact, enlever les pansements et repérer la
l’annexe A.
position des zones. Éliminer les résidus de la subs-
tance étudiée par les moyens appropriés, tels que
Si le matériau doit être soumis à l’essai sous forme
lavage à l’eau tiède ou avec tout autre solvant appro-
d’extrait, il doit être préparé conformément à
prié non irritant, et sécher soigneusement.
l’annexe B.
5.2.4.3 Extraits et agents d‘extraction
5.2.3 Les animaux et leur élevage
Appliquer l’extrait ou les extraits appropriés sur les
Des lapins albinos, adultes, sains et jeunes, des deux
compresses de gaze quatre plis de 25 mm x 25 mm
sexes et de même race pesant au minimum 2 kg
(O,5 ml par compresse), une compresse de gaze étant
doivent être utilisés.
appliquée sur chaque côté de l’animal selon les
indications de la figure 1. Appliquer une compresse de
Les animaux doivent être acclimatés et soignés
gaze témoin humidifié avec le milieu d’extraction sur
conformément à l’annexe C.
l’autre côté.
Au départ, un animal doit être utilisé pour évaluer le
matériau soumis à l’essai.
Envelopper la zone d’application d’un bandage semi-
occlusif qui doit être maintenu pendant un minimum
Une réaction bien définie chez un animal évite la
de 4 h. A la fin de cette période de contact, enlever
nécessité de poursuivre les essais.
les pansements et repérer la position des zones.
Éliminer les résidus de la substance soumise à l’essai pendant un minimum de 4 h. À la fin de cette période
par les moyens appropriés, tels que lavage à l’eau de contact, enlever les pansements et repérer la
tiède ou avec tout autre solvant approprié non irritant, position des zones. Éliminer les résidus de la subs-
et sécher soigneusement. tance soumise à l’essai par les moyens appropriés,
tels que lavage à l’eau tiède ou avec tout autre solvant
approprié non irritant, et sécher soigneusement.
5.2.4.4 Échantillon solide
5.2.5 Observation des animaux
Appliquer les échantillons du matériau soumis à
l’essai directement sur la peau des côtés de chaque
Pour les études de toxicité aiguë (une seule exposi-
lapin selon les indications de la figure 1. De la même
tion), noter l’aspect de chaque zone d’application à
manière, appliquer les échantillons témoins sur cha-
1 h, 24 h, 48 h et 72 h après avoir enlevé les
que lapin.
compresses. La période d’observation peut être pro-
longée en cas de lésions persistantes, afin de déter-
Lorsqu’on fait un essai avec des solides (qui peuvent
miner s’il s’agit de lésions réversibles ou irréversibles,
être pulvérisés si on le juge nécessaire), la substance
mais ne doit pas dépasser 14 jours.
soumise à l’essai doit être suffisamment humidifiée
avec de l’eau ou, suivant le cas, avec un autre solvant,
pour assurer un bon contact avec la peau. En cas Pour l’exposition répétée, noter l’aspect de la zone
d’utilisation de solvants, l’influence du solvant sur d’application 1 h après avoir enlevé les compresses et
l’irritation de la peau par la substance soumise à immédiatement avant l’application suivante. Après la
l’essai doit être prise en considération. dernière exposition, noter l’aspect de chaque zone
d’application 1 h, 24 h, 48 h et 72 h après avoir enlevé
les compresses. La période d’observation peut être
Couvrir les zones d’application de pansements non
prolongée en cas de lésions persistantes, afin de
occlusifs de 25 mm x 25 mm (par exemple une com-
déterminer s’il s’agit de lésions réversibles ou irréver-
presse de gaze) puis envelopper la zone d’application
sibles, mais ne doit pas dépasser 14 jours.
d’un bandage semi-occlusif qui doit être maintenu
Region dorsale tondue
Zone intacte d’essai
Zone intacte d’essai
/- Zone intacte temoin l)
Zone intacte témoin
+El rr
1) Si la préparation de l’echantillon Mcessite ce type de temoin
- Position des zones d’application sur la peau
Figure 1
0 ISO
veiller la guérison ne sont pas utilisées pour cette
Décrire et classer les réactions d’érythème et
détermination.
d’œdème de la peau selon le système de classifi-
cation donné dans le tableau 1 pour chaque zone
d’application et à chaque intervalle de temps et Faire la somme des résultats obtenus pour chacun
enregistrer les résultats pour le procès-verbal d’essai. des animaux et diviser le total par le nombre des
animaux. Cette valeur est l’indice d’irritation primaire.
NOTE 3 Dans certains cas, on peut recourir a des tech-
niques histologiques non invasives.
Pour l’exposition répétée, déterminer l’indice d’irrita-
tion cumulé en procédant de la manière suivante.
- Système de classification des réactions
Tableau 1
de la peau
Pour chaque animal, faire la somme des résultats
d’irritation (pour à la fois érythème et oedème), à la fin
Classification
Réaction
de chaque période prescrite. Diviser le total obtenu
numérique
par le nombre total des observations pour obtenir le
Formation d’érythème et d’escarre
résultat d’irritation par animal.
Pas d’érythème
Faire la somme des résultats d’irritation de chacun
Très léger érythème (à peine per-
des animaux et diviser par le nombre total des
ceptible)
animaux. La valeur obtenue est l’indice d’irritation
Érythème bien défini
cumulé.
Érythème modéré
Érythème grave (couleur rouge bet-
L’indice d’irritation cumulé est alors comparé aux
terave) à formation d’escarre empê-
catégories d’indices d’irritation cumulés définies dans
chant la dégradation de l’érythème
le tableau 2 et la catégorie appropriée est enregistrée
Formation d’oedème
pour le rapport.
Pas d’oedème
NOTE 4 Les catégories d’indices d’irritation cumulés ont
CEdème très léger (à peine percep-
pour base les informations associant l’indice d’irritation
tible)
primaire (IIP) pour les produits chimiques chez les lapins à
Edème bien défini (bords de la zone
la réaction d’irritation primaire chez l’homme pour un
bien délimités par un gonflement
certain nombre de produits chimiques qui ont été essayés
net)
sur les deux espèces.
Edème modéré (gonflement d’envi-
ron 1 mm)
Pour toute réaction, déterminer la réaction d’irritation
Edème grave (gonflement de plus
maximale, le délai d’apparition de la réaction et le délai
de 1 mm se prolongeant au-delà de
de réaction maximale.
la zone d’exposition)
L’indice d’irritation primaire ou l’indice d’irritation
Résultat total possible pour l’irritation 8
cumulé sont caractérisés par l’un des nombres et par
NOTE - Toute autre modification préjudiciable sur les zones de
l’une des descriptions du tableau 2.
peau concernées doit être enregistrée et consignée dans le
rapport.
Tableau 2 - Catégories de réactions d’irritation chez
le lapin
5.2.6 Évaluation des résultats
Résultat moyen
Catégorie de la réaction
En cas d’exposition aiguë, déterminer l’indice d’irrita-
Négligeable 0 à 0,4
tion primaire (IIP) en procédant de la manière sui-
vante.
Légère 0,5 à 1,9
Modérée 2 à 4,9
Pour chaque animal, faire la somme des résultats
d’irritation primaire obtenus avec le matériau étudié
5à8
Grave
pour les réactions d’oedème et d’érythème à la fin de
chaque période prescrite et diviser le résultat par le
nombre total des observations (six; deux à la fin de
5.2.7 Présentation des résultats
chaque période prescrite). Si des excipients témoins
sont utilisés, calculer le résultat d’irritation primaire
Le rapport d’essai doit comporter
pour l’excipient témoin et soustraire ce résultat du
résultat du matériau soumis à essai pour obtenir le
a) une description du (ou des) matériau(x) ou du
résultat d’irritation primaire.
dispositif soumis à essai;
b) l’utilisation ou l’application auxquelles sont desti-
N’utiliser pour les calculs que les observations faites
nés le (ou les) matériau(x) ou le dispositif soumis à
au bout de 24 h, 48 h et 72 h. Les observations faites
l’essai;
avant l’administration ou au-delà de 72 h pour sur-
0 ISO
ISO 1099340:1995(F)
Si le matériau soumis à l’essai est tel qu’il ne puisse
c) une description détaillée de la méthode utilisée
être appliqué que sous forme d’extrait, préparer les
pour préparer le matériau ou le dispositif soumis à
extraits selon les indications de l’annexe B. Instiller un
essai;
aliquote de 0,l ml de l’extrait dans le sac conjonctival
les animaux de l’essai;
dl
inférieur d’un œil.
la méthode d’application sur les zones d’essai;
e)
Préparer les substances témoins dans des conditions
identiques à celles décrites ci-dessus, en utilisant et le
f) la manière dont l’examen visuel des zones concer-
solvant polaire, et le solvant non polaire, en l’absence
nées a été effectué et un enregistrement des
de matériau soumis à l’essai.
observations;
g) l’évaluation des résultats.
5.3.4 Les animaux et leur élevage
Utiliser des lapins albinos, adultes jeunes et sains, des
5.3 Essai d’irritation oculaire
deux sexes et de même race, pesant entre 2 kg et
.
3 kg
5.3.1 Principe
Les animaux doivent être acclimatés et soignés
Évaluation du risque d’irritation oculaire que présen te
conformément aux modes opératoires prescrits dans
le matériau so umis à l’essai.
l’annexe C.
5.3.2 Matériaux exclus de l’essai
r un animal pour évaluer le matériau
Au départ, utilise
soumis à l’essai.
Les matériaux et/ou produits finaux dont une étude
dermique a démontre des propriétés corrosives
Une réaction bien définie chez un animal ne nécessite
nettes ou un pouvoir d’irritation grave n’ont pas à faire
pas la poursuite des essais.
l’objet d’essais complémentaires d’irritation oculaire.
Les substances fortement acides ou alcalines (pH G 2
Pour les matériaux solides ou liquides, sauf s’il a été
ou pH 2 11,5) ne doivent pas être soumises à ces
observé une réaction bien définie, prévoir au mini-
essais car leurs propriétés corrosives sont prévisibles.
mum deux animaux supplémentaires. Pour les
Ces produits doivent être considérés comme irritants
extraits, prévoir au minimum deux animaux supplé-
pour les yeux.
mentaires par extrait.
5.3.3 Matériau soumis à l’essai
Si, lors de l’essai avec au moins trois animaux, la
réaction est douteuse ou équivoque des essais
Si le matériau soumis à l’essai est un liquide, instiller
complémentaires doivent être envisagés.
0,l ml de cette substance non diluée dans le sac
conjonctival inférieur d’un œil.
5.3.5 Mode opératoire
Si le matériau soumis à l’essai est un produit solide ou
granulaire, le réduire en une fine poussière. Après un
Au plus tard 24 h avant le début de l’essai, examiner
tassement modéré, instiller cette quantité, dont le
visuellement les deux yeux de chaque lapin pour
volume et le poids sont respectivement 0,l ml et
déceler toute anomalie oculaire éventuelle. Si l’un des
moins de 100 mg, dans le sac conjonctival inférieur
yeux présente une anomalie quelconque, choisir un
d’un œil.
autre lapin.
NOTE 5 Certains produits ne peuvent pas être soumis à
Lors de l’examen des yeux, il est possible d’utiliser de
des essais directement dans l’oeil. Une dégradation
la fluorescéine sodique à 2 % BP pour visualiser une
mécanique peut rendre l’essai inutile.
éventuelle dégradation de la cornée. II est recom-
mandé d’utiliser un ophtalmoscope, une lampe à
Si le matériau soumis à l’essai se trouve dans un
fente manuelle ou tout autre dispositif approprié.
pulvérisateur, il doit être expulsé et on doit en admi-
nistrer 0,l ml comme pour les liquides.
Instiller le matériau soumis à l’essai selon les
indications de 5.3.3.
.
SI le matériau soumis à l’essai se trouve dans une
bo mbe aérosol, il peut être examiné
Maintenir les paupières closes pendant 1 s environ
après l’instillation.
a) soit par une seule pulvérisation d’une durée de 1 s
NOTE 6 L’œil controlatéral de chaque animal sert de
à une distance de 10 cm dirigée vers I’œil ouvert;
témoin non traité.
b) soit par expulsion du produit aérosol dans un
Si une exposition répétée au matériau est prévue et si
récipient frais pour procéder comme pour les
le matériau soumis à l’essai n’a pas démontré lors de
liquides.
0 ISO
5.3.7 Évaluation des résultats
l’essai de toxicité aiguë une réaction significative, une
étude par exposition répétée peut être réalisée. II
convient que la durée de l’exposition soit du même Les différences entre I’œil qui a subi l’essai et l’oeil
ordre que la durée d’utilisation du matériau ou du témoin doivent être caractérisées et expliquées dans
dispositif en situation clinique. les termes du système de classification utilisé dans le
tableau 3.
5.3.6 Observation des animaux
5.3.7.1 Exposition aiguë
Pour des animaux qui reçoivent une seule instillation
du matériau soumis a l’essai, examiner les deux yeux
d’un animal présente une
Si l’oeil traité chez plus
de chaque animal environ 1 h, 24 h, 48 h et 72 h après
réaction positive (chiffres repérés par un astérisque
l’instillation.
dans le tableau 3) à l’un quelconque des moments
d’observation, le matériau est alors considéré comme
II peut être nécessaire de prolonger l’observation en
irritant pour les yeux et il n’est pas nécessaire de
cas de lésions persistantes pour déterminer I’aggra-
poursuivre les essais.
vation des lésions ou leur recul; il n’y a généralement
pas lieu de dépasser 21 jours. Une prolongation de
Si un seul des trois yeux traités présente une réaction
l’observation n’est pas justifiable pour les animaux
positive ou si les réactions sont équivoques, d’autres
atteints de lésions graves.
animaux doivent être traités.
Classer et enregistrer toutes les réactions observées
en fonction de l’échelle de classement des lésions Lorsque d’autres animaux ont été traités, le matériau
soumis à l’essai est considéré comme irritant pour les
oculaires donnée dans le tableau 3.
yeux si plus de la moitié des yeux traités dans le
Pour des animaux qui reçoivent des instillations
groupe d’essai présentent une réaction positive
multiples du matériau soumis à l’essai, examiner les
(chiffres repérés par un astérisque dans le tableau 3) à
deux yeux de chaque animal immediatement avant et
l’un quelconque des stades de l’observation.
environ 1 h après chaque instillation.
Une réaction grave chez un seul animal est consi-
Dans le cas de signes évidents d’irritation à la suite du
dérée comme suffisante pour qualifier le matériau
dernier traitement, les observations peuvent être pro-
d’irritant pour les yeux.
longées. II peut être nécessaire de prolonger I’obser-
vation si la cornée demeure affectée ou en cas de
5.3.7.2 Exposition répétée
persistance d’une autre irritation oculaire afin de
déterminer l’évolution des lésions et leur réversibilité.
Le matériau soumis à l’essai est considéré comme
Classer et enregistrer les réactions observées confor-
irritant pour les yeux si plus de la moitié des animaux
mément à l’échelle de classement des lésions
du groupe soumis à l’essai présentent une réaction
oculaires donnée dans le tableau 3.
positive (chiffres repérés par un astérisque dans le
tableau 3) à l’un quelconque des stades de I’obser-
Éliminer immédiatement de l’étude et tuer avec
vation.
humanité tout animal qui, à n’importe quel moment,
manifeste
5.3.8 Présentation des résultats
a) des lésions oculaires graves (par exemple écoule-
Le rapport d’essai doit comporter
ment et ulcération de la membrane conjonctivale,
perforation de la cornée, présence de sang ou de
a) une description du (ou des) matériau(x) soumis à
pus dans la chambre antérieure); ou
l’essai;
des taches de sang ou un écoulement purulent;
b)
b) l’utilisation et/ou l’application auxquelles sont des-
ou
tinés le (ou les) matériaux ou le dispositif soumis à
l’essai;
une ulcération significative de la cornée.
cl
c) une description détaillée de la méthode employée
Éliminer de l’étude tout animal qui présente les effets
pour préparer le matériau soumis à l’essai;
maximaux d’après le système de classification du
les animaux de l’essai;
dl
absence de réflexion de la lumière
tableau 3 -
(réaction de l’iris de niveau 2) ou opacité de la cornée
la méthode d’instillation;
e)
(de niveau 4) - sans signe de récupération dans les
24 h ou inflammation conjonctivale maximale (ché-
f) la manière dont les examens visuels ont été
mosis de niveau 4 et rougeur de niveau 3) - sans
effectués et un enregistrement des observations;
signe de récupération dans les 48 h, et tuer l’animal
non cruellement. g) l’évaluation des résultats.
- Système de classification des lésions oculaires
Tableau 3
Classement
Réaction
numérique
1. Cornée
Degré d’opacité (utiliser la zone la plus dense)
Absence d’opacité 0
Zones parsemées ou diffuses, détails de l’iris nettement visibles 1*
Zones translucides aisément discernables, détails de l’iris legèrement obscurcis 2*
Zones opalescentes, pas de détails de l’iris visibles, taille de la pupille a peine discernable 3*
4*
Opaque, iris invisible
Surface de la cornée concernée
Un quart (ou moins), mais plus de zéro 0
Plus d’un quart, mais moins de la moitié 1
Plus de la moitié, mais moins des trois quarts
Plus des trois quarts, jusqu’à la totalité de la surface 3
2. Iris
Normal 0
Épaisseurs supérieures à la normale, gonflement par congestion, injection circumcornéenne (l’un des
symptômes ou tous ou une combinaison de plusieurs d’entre eux), l’iris réagit encore à la lumière (une
réaction lente est positive) 1*
Pas de réaction à la lumière, hémorragie, destruction importante (un ou plusieurs de ces symptômes) 2*
3. Conjonctive
Rougeur (concerne la conjonctive palpébrale et la conjonctive bulbaire à l’exclusion de la cornée et de l’iris)
Vaisseaux normaux 0
Vaisseaux nettement plus injectés que normal 1
Rouge plus diffus, d’un pourpre plus fonce, les différents vaisseaux ne sont pas facilement discernables 2*
Rouge sang diffus 3*
Chémosis
Absence de gonflement 0
Tout gonflement au-dessus de la normale (y compris membrane nictitante) 1
Gonflement évident avec éversion partielle des paupières 2*
Gonflement avec paupières presque à demi fermées 3*
Gonflement avec paupières entre a demi fermées à complètement fermées 4*
Écoulement
Pas d’écoulement 0
Tout écoulement différent de la normale (ne pas tenir compte des petites quantités observées au canthus
interne des animaux normaux) 1
Ecoulement avec humidification des paupières et des poils voisins des paupières 2
Écoulement avec humidification des paupières et des poils ainsi que d’une importante surface tout autour de
l’oeil 3
* Résultat positif
5.4.3 Matériau soumis à l’essai
5.4 Essai de réactivité intracutanée
(intradermique)
Les matériaux soumis à l’essai doivent être des
extraits et préparés conformément à l’annexe B.
5.4.1 Principe
Les animaux et leur élevage
5.4.4
Évaluation du risque d’irritation que présente le
matériau soumis à essai après injection d’extraits par Utiliser des lapins albinos, adultes jeunes et sains, des
voie intradermique. deux sexes et de même race, pesant au minimum
.
2 kg
5.4.2 Matériaux exclus des essais
Les animaux doivent être acclimatés et soignés
conformément à l’annexe C.
Ne pas soumettre aux essais un matériau qui s’est
avéré irritant pour la peau, l’oeil ou les muqueuses ou
II convient d’utiliser au départ un minimum de trois
tout matériau dont le pH est G 2 ou 3 11,5.
animaux pour évaluer le matériau soumis à l’essai.
0 ISO ISO 10993-10:1995(F)
Classer la réaction des tissus du point de vue de
Si la réaction est équivoque ou douteuse lors de
l’érythème et de l’oedème selon le système de
l’essai initial, des essais complémentaires doivent être
classification donné dans le tableau 4 pour chaque
envisagés.
zone d’injection et à chaque intervalle de temps
observé, et enregistrer les résultats.
5.4.5 Mode opératoire
intradermique d’une huile suscite
La veille de l’essai, tondre avec soin la fourrure sur le NOTE 7 L’injection
fréquemment une réaction inflammatoire.
dos des animaux sur une distance suffisante des deux
côtés de l’épine dorsale pour permettre l’injection des
extraits. L’injection par voie intraveineuse d’un colorant vital
approprié comme le bleu de Trypan ou le bleu d’Evans
Injecter par voie intracutanée 0,2 ml de l’extrait
peut être effectuée au moment de l’examen des 72 h
obtenu avec le solvant polaire en cinq points sur un
pour aider à évaluer la réaction en délimitant la zone
seul côté de chaque lapin (voir figure 2). Utiliser pour
irritée.
les injections intradermiques une aiguille aussi fine
que possible, appropriée à la viscosité du matériau
Des techniques non invasives, si elles sont dispo-
soumis à l’essai.
nibles, peuvent être utilisées pour faciliter l’évaluation.
injecter 0,2 ml du solvant
De la même manière,
polaire en cinq points du même côté de chaque lapin
5.4.7 Évaluation des résultats
mais en arrière des premières injections (voir figure 2).
Déterminer l’indice d’irritation primaire en procédant
Répéter les modes opératoires ci-dessus pour l’extrait
de la manière suivante.
obtenu avec le solvant non polaire le solvant témoin
non polaire sur l’autre côté de chaque lapin (voir
Pour chaque animal, faire la somme des résultats
figure 2).
d’irritation primaire obtenus séparément pour les
réactions d’oedème et d’érythème pour chaque extrait
En cas d’utilisation d’autres solvants, répéter les
soumis à l’essai à la fin de chaque période d’obser-
étapes ci-dessus pour l’extrait obtenu avec les autres
vation et diviser cette somme par le nombre total des
solvants et les témoins des solvants.
observations. Une évaluation similaire doit être faite
sur les zones où la substance témoin a été injectée.
5.4.6 Observation des animaux
Soustraire le résultat de la substance témoin du
résultat du matériau soumis à l’essai pour obtenir le
Noter l’aspect de chaque zone d’injection immé-
résultat d’irritation primaire qui sera utilisé lors de la
diatement après l’injection puis 24 h, 48 h et 72 h
détermination de l’indice d’irritation primaire.
après l’injection.
T@te
1 # # 1
2 # # 2
Injections de 0,2 ml
Inje ctions de 02 ml
4 . de l'extrait
3 # # 3
del 'extra .it polaire
non polaire
4 # # 4
5 # # 5
6 # # 6
7 # #7
Injections de 0,2 ml
Injections de 02 ml
du solvanttemoin
du solvanttemoin 4
8 # # 8
non polaire
polaire
9 # #9
10 # # 10
Queue
Disposition des zones d’injection
Figure 2 -
0 ISO
- Système de classification pour les 5.4.8 Présentation des résultats
Tableau 4
réactions intracutanées (intradermiques)
Le rapport d’essai doit comporter
Classification
a) une description du (ou des) matériau(x) ou du
Réaction
numérique
dispositif soumis à l’essai;
Formation d’érythème et d’escarre
b) l’utilisation et/ou l’application auxquelles sont
Pas d’érythème
destinés le (ou les) matériau(x) ou dispositif
Très léger érythème (à peine per-
soumis à l’essai;
ceptible)
Érythème bien défini
c) une description détaillée de la méthode employée
Érytheme modéré 3 pour préparer le matériau ou le dispositif soumis à
l’essai;
Érythème grave (couleur rouge bet-
terave) à formation d’escarre empê-
d) les animaux de l’essai;
chant la dégradation de l’érythème
Formation d’oedème
e) la méthode d’injection;
Pas d’oedème 0
f) la manière dont l’examen visuel des zones concer-
Oedème très léger (à peine per-
nées a été effectué et un enregistrement des
ceptible)
observations;
Oedème bien défini (bords de la zone
bien délimités par un gonflement
g) l’évaluation des résultats.
net)
CEdème modéré (gonflement d’envi-
ron 1 mm) 3
Oedème grave (gonflement de plus
6 Essais de sensibilisation
de 1 mm se prolongeant au-delà de
la zone d’exposition)
II existe plusieurs méthodes qui permettent de
Résultat total possible pour l’irritation 8 déterminer la sensibilisation de la peau chez le cochon
d’Inde. Les deux méthodes les plus couramment
NOTE - Toute autre modification préjudiciable sur les zones de
utilisées sont la méthode de maximisation
peau concernées doit être enregistrée et consignée dans le
(Magnusson et Kligman) et la méthode avec système
procès-verbal d’essai.
occlusif (Buehler). Une seule de ces deux méthodes
suffit pour l’évaluation. L’essai de maximisation (6.2)
qui est considéré comme le plus précis est la
N’utiliser pour les calculs que les observations faites méthode utilisée de préférence, particulièrement pour
au bout de 24 h, 48 h et 72 h. l’évaluation des extraits. L’annexe E donne une liste
d’autres méthodes qui peuvent être utilisées.
Faire la somme des résultats d’irritation primaire
obtenus pour chacun des animaux et diviser le total
par le nombre des animaux. Cette valeur correspond à
6.1 Facteurs à prendre en considération lors de
l’indice d’irritation primaire (1 IP).
la conception et du choix des essais
L’indice d’irritation primaire est caractérisé par l’un
Les caractéristiques biochimiques et physiques du
des nombres et par l’une des descriptions donnés
matériau soumis à l’essai peuvent influencer le choix
dans le tableau 5.
de l’essai. L’essai de maxi
...
Frequently Asked Questions
ISO 10993-10:1995 is a standard published by the International Organization for Standardization (ISO). Its full title is "Biological evaluation of medical devices - Part 10: Tests for irritation and sensitization". This standard covers: Describes test methods to evaluate the potential of devices and their constituent materials to produce irritation and to produce sensitization. Also gives guidance for the preparation of materials specifically in relation to the above tests.
Describes test methods to evaluate the potential of devices and their constituent materials to produce irritation and to produce sensitization. Also gives guidance for the preparation of materials specifically in relation to the above tests.
ISO 10993-10:1995 is classified under the following ICS (International Classification for Standards) categories: 11.100 - Laboratory medicine. The ICS classification helps identify the subject area and facilitates finding related standards.
ISO 10993-10:1995 has the following relationships with other standards: It is inter standard links to ISO 14620-1:2002, ISO 10993-10:2002. Understanding these relationships helps ensure you are using the most current and applicable version of the standard.
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ISO 10993-10:1995는 의료기기의 생물학적 평가에 대한 표준으로, 자극 및 민감화 테스트에 관한 지침을 제공합니다. 이 표준의 주요 범위는 의료기기와 그것의 구성 재료가 유발할 수 있는 자극과 민감성을 평가하기 위한 테스트 방법을 설명하는 것입니다. 이 문서는 특히 이러한 테스트와 관련하여 재료 준비에 대한 지침도 제공하므로, 실험 환경에서의 일관성을 유지하는 데 중요한 역할을 합니다. ISO 10993-10의 강점 중 하나는 다양한 테스트 방법론을 체계적으로 정리하여 연구자와 개발자들이 쉽게 접근하고 이해할 수 있도록 한다는 점입니다. 이로 인해 의료기기 개발 시 자극 및 민감성 평가에 대한 신뢰성을 높일 수 있습니다. 또한, 이 표준은 국제적으로 인정받고 있어, 다양한 국가에서 의료기기의 시장 진입을 위한 필수적인 조건을 충족하는 데 기여합니다. 이 표준의 중요성은 의료기기와 관련된 제품의 안전성을 확보하는 데 있습니다. 자극 및 민감성 테스트를 통해 소비자와 환자의 건강을 보호할 수 있으며, 이러한 과정은 의료기기 산업의 품질 향상에도 기여합니다. ISO 10993-10:1995는 의료기기의 생물학적 평가에 있어 필수적인 기준을 제공함으로써, 제조업체들이 보다 안전하고 효율적인 제품을 시장에 공급할 수 있도록 돕습니다.
ISO 10993-10:1995は、医療機器の生物学的評価に関する重要な標準であり、特にデバイスやその構成材料が引き起こす可能性のある刺激や感作性を評価するための試験方法を詳述しています。この標準は、医療機器の安全性を確保するための科学的根拠を提供し、ステークホルダーが医療機器の使用に伴うリスクを最小限に抑える手助けをします。 この標準の強みは、刺激及び感作性の試験を行う際の具体的な方法論を提供している点です。また、試験に必要な材料の準備に関する指針も明示されており、研究者や企業が標準化された手法を容易に実施できるよう設計されています。このように、ISO 10993-10:1995は、医療機器の製造および評価に関わるすべての関係者にとって、信頼性の高い資源となっています。 さらに、この標準は、国際的な基準に適合しているため、異なる地域での製品承認プロセスをスムーズに進めるための基盤を提供します。また、ISO 10993-10:1995に従うことで、企業は規制当局からの信頼を得やすくなるため、商業的にも有利に働く可能性があります。 以上のように、ISO 10993-10:1995は、医療機器の生物学的評価における刺激および感作性に関して、体系的かつ詳細な指標を提供し続けており、その関連性は今後も高いといえるでしょう。
ISO 10993-10:1995 provides a comprehensive framework for the biological evaluation of medical devices, specifically focusing on tests for irritation and sensitization. The standard outlines essential test methods aimed at assessing the potential of medical devices and their constituent materials to induce irritation or sensitization in biological tissues. Its guidance on preparing materials for these evaluations ensures that manufacturers can adequately assess biocompatibility, which is critical for device safety. One of the significant strengths of ISO 10993-10:1995 is its systematic approach to identifying and quantifying biological responses to medical devices. The document emphasizes reproducibility and reliability in test methodologies, which is essential for regulatory compliance and fostering trust in medical products. Furthermore, its relevance extends beyond just irritation and sensitization; the standard serves as a pivotal reference point for stakeholders, including manufacturers, regulatory bodies, and researchers in the biomedical field. The standard also addresses various factors that could influence test outcomes, promoting a thorough understanding of biological interactions. By delineating specific procedures and considerations, ISO 10993-10:1995 aids in standardizing practices across the industry, facilitating consistency in the evaluation of medical devices. Ultimately, this standard plays a crucial role in safeguarding patient health, enhancing the overall quality of medical care by ensuring that devices are thoroughly evaluated for their biological impacts before reaching the market.
La norme ISO 10993-10:1995 est une référence essentielle dans l'évaluation biologique des dispositifs médicaux, se concentrant sur les tests d'irritation et de sensibilisation. Cette norme établit des méthodes d'essai claires pour évaluer le potentiel des dispositifs et de leurs matériaux constitutifs à provoquer des irritations cutanées et des sensibilisations. L'un des principaux points forts de cette norme est son approche systématique et bien définie des méthodes de test. Elle fournit des protocoles rigoureux qui garantissent la fiabilité et la reproductibilité des résultats. En outre, la norme inclut des orientations précises sur la préparation des matériaux, ce qui est crucial pour assurer que les tests soient réalisés dans des conditions optimales, minimisant ainsi les variables susceptibles d'affecter l'issue des analyses. La pertinence de l'ISO 10993-10:1995 est indiscutable dans le domaine des dispositifs médicaux. À une époque où la sécurité des patients est primordiale, ce standard permet aux fabricants de s'assurer que leurs produits ne provoqueront pas de réactions indésirables lors de leur utilisation. En favorisant des pratiques de test rigoureuses, la norme contribue également à harmoniser les processus d'évaluation à l'échelle internationale, facilitant ainsi l'acceptation des dispositifs médicaux sur différents marchés. En résumé, la norme ISO 10993-10:1995 joue un rôle crucial dans l'assurance qualité des dispositifs médicaux, grâce à ses méthodes de test éprouvées et à ses recommandations spécifiques qui améliorent la sécurité et la performance des matériaux utilisés dans ces dispositifs.
Die ISO 10993-10:1995 ist ein entscheidendes Dokument für die biologische Bewertung von Medizinprodukten, insbesondere im Hinblick auf Tests zu Irritation und Sensibilisierung. Der Standard bietet eine umfassende Beschreibung von Testmethoden zur Bewertung des Potenzials von Medizinprodukten und deren Bestandteilen, um Haut- und Schleimhautirritationen sowie allergische Sensibilisierungen hervorzurufen. Ein wesentlicher Schwerpunkt der ISO 10993-10:1995 liegt in der systematischen Erfassung und Bewertung biologischer Reaktionen auf Testergebnisse. Die Dokumentation bietet klare Richtlinien für die Vorbereitung von Materialien, die in den Tests verwendet werden, und stellt sicher, dass diese in einer Weise behandelt werden, die konsistente und reproduzierbare Ergebnisse liefert. Dies ist von großer Bedeutung, um die Sicherheit und Wirksamkeit von Medizinprodukten zu gewährleisten. Die Stärken des Standards sind vielfältig. Zum einen unterstützt die ISO 10993-10:1995 Hersteller bei der Einhaltung internationaler Vorschriften und Richtlinien für die Sicherheit von Medizinprodukten, was für den Marktzugang unerlässlich ist. Zum anderen tragen die empfohlenen Testmethoden zur Verringerung von Risiken für Patienten und Anwender bei, indem sie potenzielle negative Reaktionen frühzeitig identifizieren. Die Relevanz der ISO 10993-10:1995 in der heutigen Medizintechnik kann nicht hoch genug eingeschätzt werden. Angesichts der zunehmenden Komplexität und Diversität von Medizinprodukten ist der Standard ein unverzichtbares Instrument für Entwickler, Qualitätsmanager und Zulassungsbehörden. Er fördert nicht nur die Sicherheit der Produkte, sondern stärkt auch das Vertrauen der Verbraucher in therapeutische Lösungen und Innovationen. Insgesamt ist die ISO 10993-10:1995 ein grundlegender Bestandteil der biologischen Bewertung von Medizinprodukten, der durch seine detaillierten Testmethoden und klare Richtlinien für die Materialvorbereitung hilft, die höchsten Standards in der Patientensicherheit und Produktqualität zu erreichen.
ISO 10993-10:1995는 의료기기의 생물학적 평가에 대한 표준으로, 특히 자극 및 감작 테스트를 다루고 있습니다. 이 표준의 주된 목적은 의료기기와 그 구성 재료가 유발할 수 있는 자극성 및 감작성을 평가하는 시험 방법을 명확히 하는 것입니다. 이 표준의 핵심 강점은 의료기기에서 발생할 수 있는 생물학적 반응에 대한 체계적인 접근 방식을 제공한다는 점입니다. 테스트 방법에 대한 명확한 지침을 제공함으로써, 의료기기의 안전성을 확보하고 사용자에게 미칠 수 있는 잠재적 위험을 최소화하도록 돕습니다. ISO 10993-10:1995는 실험실 환경에서 재현 가능한 방법으로 의료기기의 안전성을 검증할 수 있도록 지원합니다. 또한, 이 문서는 자극 및 감작성 시험과 관련하여 재료 준비에 대한 지침도 포함되어 있어, 개발자들이 보다 일관되고 신뢰할 수 있는 결과를 얻을 수 있도록 하는 데 기여합니다. 결과적으로 이 표준은 의료기기 개발 단계에서 필수적으로 고려해야 할 요소들을 포괄하고 있으며, 품질 관리 및 규제 준수 측면에서도 높은 중요성을 지닙니다. ISO 10993-10:1995는 의료기기의 생물학적 평가에서 매우 중요한 기준으로 자리잡고 있으며, 전세계적으로 적용되는 의료기기 및 재료의 설계 및 시험 과정에서 필수적인 지침으로 활용됩니다. 이로 인해 의료 분야의 안전성과 효과성을 높이는 데 기여하고 있는 것은 분명합니다.
ISO 10993-10:1995 is a critical standard that outlines the necessary test methods for evaluating the potential of medical devices and their constituent materials to cause irritation and sensitization. The scope of this standard is particularly relevant as it addresses a key aspect of the biological evaluation of medical devices, focusing on the safety and biocompatibility of products intended for human use. One of the strengths of ISO 10993-10:1995 is its comprehensive guidance on the preparation of materials prior to testing. This ensures that manufacturers can adequately assess the biological responses that might arise from the use of their devices. By providing a standardized approach, the document helps to harmonize testing practices across different regions, thus facilitating international trade and regulatory acceptance. Moreover, the relevance of this standard cannot be overstated, especially in an era where patient safety is paramount. The standard's emphasis on irritation and sensitization testing addresses critical safety concerns that could arise from direct or indirect contact with medical devices. Adhering to ISO 10993-10:1995 provides manufacturers with a framework to mitigate potential risks associated with their products, thereby supporting the development of safer medical technologies. In summary, ISO 10993-10:1995 serves as an essential reference for professionals in the medical device industry, providing robust methodologies for the assessment of irritation and sensitization risks. Its strengths lie in its detailed guidance and relevance to contemporary health and safety standards, ensuring that medical devices are rigorously evaluated before reaching the market.
ISO 10993-10:1995は、医療機器の生物学的評価に関する重要な標準であり、特に刺激性および感作性のテスト方法を詳述しています。この標準の範囲は、医療機器とその構成材料が引き起こす可能性のある刺激や感作を評価するためのテスト方法を提供する点にあります。また、これらのテストに関連する材料の準備方法に関するガイダンスも含まれています。 この標準の強みは、医療機器の安全性と生物学的な適合性を評価する際に、科学的かつ体系的なアプローチを採用していることです。ISO 10993-10:1995に基づくテストは、製品開発の初期段階から使用でき、リスク評価の一環として医療機器の品質管理を強化します。これにより、企業は市場における製品の競争力を向上させることができます。 さらに、ISO 10993-10:1995は、国際的な基準であるため、異なる国や地域での規制要件を満たすのにも役立ち、グローバルな市場展開を目指す企業にとって非常に関連性があります。この標準は、医療機器製造業界において、患者の安全を最優先にした製品開発を促進する役割を果たしています。
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