Rice — Determination of amylose content — Part 2: Routine methods

ISO 6647-2:2007 specifies two simplified routine methods for the determination of the amylose mass fraction of milled rice, non-parboiled. The main difference between the two methods is in the dispersion procedure: method A specifies hot, and method B cold, dispersion. Both methods are applicable to rice with amylose mass fraction higher than 5 %.

Riz — Détermination de la teneur en amylose — Partie 2: Méthodes de routine

L'ISO 6647-2:2007 indique deux méthodes de routine simplifiées pour la détermination de la teneur (fraction massique) en amylose du riz usiné, non étuvé. La différence principale entre ces deux méthodes est la méthode de dispersion. La méthode A indique une procédure de dispersion à chaud tandis que la méthode B fonctionne à froid. Ces deux méthodes s'appliquent au riz possédant une teneur en amylose supérieure à 5 % (fraction massique).

General Information

Status
Withdrawn
Publication Date
15-Aug-2007
Withdrawal Date
15-Aug-2007
Current Stage
9599 - Withdrawal of International Standard
Completion Date
11-May-2015
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ISO 6647-2:2007 - Rice -- Determination of amylose content
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ISO 6647-2:2007 - Riz -- Détermination de la teneur en amylose
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Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 6647-2
First edition
2007-09-01

Rice — Determination of amylose
content —
Part 2:
Routine methods
Riz — Détermination de la teneur en amylose —
Partie 2: Méthodes de routine




Reference number
ISO 6647-2:2007(E)
©
ISO 2007

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ISO 6647-2:2007(E)
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Published in Switzerland

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ISO 6647-2:2007(E)
Contents Page
Foreword. iv
1 Scope .1
2 Normative references .1
3 Terms and definitions .1
4 Principle.1
5 Reagents.2
6 Apparatus .2
7 Sampling.3
8 Procedure .3
8.1 Determination of moisture .3
8.2 Preparation of test sample.3
8.3 Test portion and preparation of the test solution .3
8.4 Preparation of the blank solution.3
8.5 Preparation of the calibration graph.4
8.6 Determination.4
9 Expression of results .4
10 Precision.5
10.1 Interlaboratory test .5
10.2 Repeatability.5
10.3 Reproducibility.5
11 Test report .6
Annex A (informative) Results of an interlaboratory test.7
Bibliography .12




© ISO 2007 – All rights reserved iii

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ISO 6647-2:2007(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 6647-2 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 4, Cereals
and pulses.
This edition of ISO 6647-2, together with ISO 6647-1:2007, cancels and replaces ISO 6647:1987, which has
been technically revised.
ISO 6647 consists of the following parts, under the general title Rice — Determination of amylose content:
⎯ Part 1: Reference method
⎯ Part 2: Routine methods

iv © ISO 2007 – All rights reserved

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INTERNATIONAL STANDARD ISO 6647-2:2007(E)

Rice — Determination of amylose content —
Part 2:
Routine methods
1 Scope
This part of ISO 6647 specifies two simplified routine methods for the determination of the amylose mass
fraction of milled rice, non-parboiled. The main difference between the two methods is the dispersion
procedure: method A specifies hot, and method B cold, dispersion.
Both methods are applicable to rice with an amylose mass fraction higher than 5 %.
NOTE These methods describe simplified procedures for the preparation of samples, which are frequently used in
routine laboratories. The methods use the same reagents as the reference method (see ISO 6647-1), but omit the
defatting step. Rice samples of which the amylose mass fraction has been determined by the reference method are used
as standards.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced
document (including any amendments) applies.
ISO 712, Cereals and cereal products — Determination of moisture content — Routine reference method
ISO 6647-1, Rice — Determination of amylose content — Part 1: Reference method
ISO 7301, Rice — Specification
ISO 8466-1, Water quality — Calibration and evaluation of analytical methods and estimation of performance
characteristics — Part 1: Statistical evaluation of the linear calibration function
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the terms and definitions given in ISO 6647-1 and ISO 7301 apply.
4 Principle
Rice is ground to a very fine flour to break up the endosperm structure in order to aid complete dispersion and
gelatinization. A test portion is dispersed in a sodium hydroxide solution, to an aliquot portion of which is
added an iodine solution. The absorbance, at 720 nm, of the colour complex formed is then determined using
a spectrophotometer.
Measurement wavelengths of 620 nm or 680 nm can also be used.
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ISO 6647-2:2007(E)
The amylose mass fraction of the sample is then read from a calibration graph, which is prepared by using
rice samples of known amylose mass fraction, determined using the reference method specified in
ISO 6647-1.
Standard rice samples are used to circumvent the interference from fat on the colour reaction, without
defatting the samples and standards. Both samples and standard samples should be well milled to minimize
the lipid interference.
5 Reagents
Use only reagents of recognized analytical grade, unless otherwise specified, and distilled or demineralized
water or water of equivalent purity.
5.1 Ethanol, a volume fraction of 95 %.
5.2 Sodium hydroxide
5.2.1 1 mol/l solution, for method A.
5.2.2 2 mol/l solution, for method B.
5.3 Sodium hydroxide
5.3.1 0,09 mol/l solution, for method A.
5.3.2 0,18 mol/l solution, for method B.
5.4 Acetic acid, 1 mol/l solution.
5.5 lodine solution
Weigh (6.8), to the nearest 5 mg, 2,000 g of potassium iodide in a weighing bottle fitted with a stopper. Add
sufficient water to form a saturated solution. Add 0,200 g of iodine, weighed to the nearest 1 mg. When all the
iodine has dissolved, transfer the solution quantitatively to a 100 ml volumetric flask (6.4), make up to volume
with water and mix.
Prepare a fresh solution on each day of use and protect it from light.
6 Apparatus
The usual laboratory apparatus and, in particular, the following.
6.1 Grinder, capable of reducing uncooked milled rice to a fine flour which will pass through a 150 µm to
180 µm (100 mesh to 80 mesh) sieve. A cyclone mill with 0,5 mm screen is recommended.
6.2 Sieve, size 150 µm to 180 µm (100 mesh to 80 mesh).
6.3 Spectrophotometer, with matching cells, usually of pathlength 1 cm, capable of measuring
absorbance at 720 nm (or 620 nm or 680 nm).
6.4 Volumetric flasks, 100 ml.
6.5 Boiling water bath, for method A only.
6.6 Magnetic stirrer, capable of stirring at 950 r/min to 1 000 r/min, for method B only.
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ISO 6647-2:2007(E)
6.7 Conical flasks, 100 ml.
6.8 Analytical balance, capable of weighing to the nearest 0,000 1 g.
6.9 Pipettes, of capacity 1 ml, 2 ml, 5 ml and 10 ml.
7 Sampling
A representative sample should have been sent to the laboratory. It should not have been damaged or
changed during transport or storage.
Sampling is not part of the method specified in this part of ISO 6647. A recommended sampling method is
[3]
given in ISO 13690 .
8 Procedure
8.1 Determination of moisture
On a separate portion of the laboratory sample and the standard samples, carry out a moisture determination
in accordance with ISO 712.
8.2 Preparation of test sample
In the grinder (6.1) grind at least 10 g of milled rice which will pass through the sieve (6.2).
8.3 Test portion and preparation of the test solution
8.3.1 Weigh (6.8) 100 mg ± 0,5 mg of the test sample (8.2) into a 100 ml conical flask (6.7). To this test
portion carefully add 1 ml of ethanol (5.1) using a pipette, washing down any of the test portion adhering to the
side of the flask. Shake slightly in order to wet the entire sample.
8.3.2 Method A
Pipette (6.9) 9,0 ml of sodium hydroxide solution (5.2.1) into the conical flask and mix. Then heat the mixture
on a boiling water bath (6.5) for 10 min to disperse the starch. Allow to cool to room temperature and transfer
quantitatively to a 100 ml volumetric flask (6.4). Make up to volume with water and mix vigorously.
8.3.3 Method B
Pipette (6.9) 9,0 ml of sodium hydroxide solution (5.2.2) into the conical flask and mix. Stir the mixture using a
magnetic stirrer (6.6) for 10 min to obtain the dispersion. Remove the stirrer and transfer quantitatively to a
100 ml volumetric flask (6.4). Make up to volume with water and mix vigorously.
It is recommended to swirl the liquid in the volumetric flask before adding the water and after making up to
volume.
8.4 Preparation of the blank solution
Prepare a blank solution using the same procedure and the same quantities of all the reagents as in the
determination, but using 5,0 ml of sodium hydroxide solution (5.3.1 for method A and 5.3.2 for method B)
instead of the test solution.
© ISO 2007 – All rights reserved 3

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ISO 6647-2:2007(E)
8.5 Preparation of the calibration graph
8.5.1 Preparation of the set of calibration solutions
Select at least four rice samples with a distributi
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 6647-2
Première édition
2007-09-01

Riz — Détermination de la teneur en
amylose —
Partie 2:
Méthodes de routine
Rice — Determination of amylose content —
Part 2: Routine methods




Numéro de référence
ISO 6647-2:2007(F)
©
ISO 2007

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ISO 6647-2:2007(F)
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Le présent fichier PDF peut contenir des polices de caractères intégrées. Conformément aux conditions de licence d'Adobe, ce fichier
peut être imprimé ou visualisé, mais ne doit pas être modifié à moins que l'ordinateur employé à cet effet ne bénéficie d'une licence
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Publié en Suisse

ii © ISO 2007 – Tous droits réservés

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ISO 6647-2:2007(F)
Sommaire Page
Avant-propos. iv
1 Domaine d'application.1
2 Références normatives .1
3 Termes et définitions.1
4 Principe.1
5 Réactifs .2
6 Appareillage .2
7 Échantillonnage .3
8 Mode opératoire.3
8.1 Détermination de la teneur en eau.3
8.2 Préparation de l'échantillon pour essai.3
8.3 Prise d'essai et préparation de la solution d'essai .3
8.4 Préparation de la solution témoin.4
8.5 Préparation du graphique d'étalonnage.4
8.6 Détermination.4
9 Expression des résultats .5
10 Fidélité .5
10.1 Essai interlaboratoires .5
10.2 Répétabilité.5
10.3 Reproductibilité.5
11 Rapport d'essai .6
Annexe A (informative) Résultats d'un essai interlaboratoires.7
Bibliographie .12
© ISO 2007 – Tous droits réservés iii

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ISO 6647-2:2007(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 6647-2 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 4,
Céréales et légumineuses.
La présente édition de l'ISO 6647-2, ainsi que l'ISO 6647-1, annule et remplace l'ISO 6647:1987, qui a fait
l'objet d'une révision technique.
L'ISO 6647 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Riz — Détermination de la teneur
en amylose:
⎯ Partie 1: Méthode de référence
⎯ Partie 2: Méthodes de routine

iv © ISO 2007 – Tous droits réservés

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NORME INTERNATIONALE ISO 6647-2:2007(F)

Riz — Détermination de la teneur en amylose —
Partie 2:
Méthodes de routine
1 Domaine d'application
La présente partie de l'ISO 6647 indique deux méthodes de routine simplifiées pour la détermination de la
teneur (fraction massique) en amylose du riz usiné, non étuvé. La différence principale entre ces deux
méthodes est la méthode de dispersion. La méthode A indique une procédure de dispersion à chaud tandis
que la méthode B fonctionne à froid.
Ces deux méthodes s'appliquent au riz possédant une teneur en amylose supérieure à 5 % (fraction
massique).
NOTE Ces méthodes décrivent des procédures simplifiées pour la préparation d'échantillons, fréquemment utilisées
dans les laboratoires de routine. Ces méthodes utilisent les mêmes réactifs que la méthode de référence
(voir l'ISO 6647-1), mais omettent l'étape de dégraissage. Les échantillons de riz dont la teneur (fraction massique) en
amylose a été déterminée par la méthode de référence sont utilisés comme étalons.
2 Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l'application du présent document. Pour les
références datées, seule l'édition citée s'applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document de référence (y compris les éventuels amendements) s'applique.
ISO 712, Céréales et produits céréaliers — Détermination de la teneur en eau — Méthode de référence
pratique
ISO 6647-1, Riz — Détermination de la teneur en amylose — Partie 1: Méthode de référence
ISO 7301, Riz — Spécifications
ISO 8466-1, Qualité de l'eau — Étalonnage et évaluation des méthodes d'analyse et estimation des
caractères de performance — Partie 1: Évaluation statistique de la fonction linéaire d'étalonnage
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions de l'ISO 6647-1 et de l'ISO 7301 s'appliquent.
4 Principe
Broyage du riz en une farine très fine pour rompre la structure de l'endosperme afin de faciliter la dispersion
complète et la gélatinisation. Dispersion d'une prise d'essai dans une solution d'hydroxyde de sodium, puis
ajout d'une solution iodée à une portion aliquote. Détermination spectrométrique de l'absorbance, à 720 nm,
du complexe coloré formé.
© ISO 2007 – Tous droits réservés 1

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ISO 6647-2:2007(F)
Les longueurs d'onde de mesure 620 nm ou 680 nm peuvent également être utilisées.
Lecture de la teneur (fraction massique) en amylose de l'échantillon à partir d'un graphique d'étalonnage,
construit en utilisant des échantillons de riz possédant des teneurs en amylose connues et déterminé en
utilisant la méthode de référence spécifiée dans l'ISO 6647-1.
Les échantillons de riz normalisés sont utilisés pour éliminer l'interférence des matières grasses sur la
réaction colorée, sans dégraisser les échantillons et les étalons. Il convient que les échantillons, ainsi que les
étalons, soient bien usinés afin de minimiser l'interférence des lipides.
5 Réactifs
N'utiliser que des réactifs de qualité analytique reconnue, sauf mention contraire, ainsi que de l'eau distillée
ou déminéralisée, ou une eau de pureté équivalente.
5.1 Éthanol, à 95 % (fraction volumique).
5.2 Hydroxyde de sodium
5.2.1 Solution à 1 mol/l, pour la méthode A.
5.2.2 Solution à 2 mol/l, pour la méthode B.
5.3 Hydroxyde de sodium
5.3.1 Solution à 0,09 mol/l, pour la méthode A.
5.3.2 Solution à 0,18 mol/l, pour la méthode B.
5.4 Acide acétique, solution à 1 mol/l.
5.5 Solution iodée
Peser (6.8), à 5 mg près, 2,000 g d'iodure de potassium dans un flacon à tare équipé d'un bouchon. Ajouter
suffisamment d'eau pour que se forme une solution saturée. Ajouter 0,200 g d'iode, à 1 mg près. Transférer la
solution quantitativement dans une fiole jaugée de 100 ml (6.4) lorsque l'iode se sera dissoute, puis compléter
au trait avec de l'eau et mélanger.
Préparer une solution fraîche pour chaque jour d'utilisation, et la conserver à l'abri de la lumière.
6 Appareillage
Appareillage de laboratoire habituel et, en particulier, les éléments suivants.
6.1 Broyeur, capable de réduire le riz usiné non cuit en farine fine qui passera à travers un tamis de
150 µm à 180 µm (100 mesh à 80 mesh). L'utilisation d'un filtre cyclone avec un tamis de 0,5 mm est
recommandée.
6.2 Tamis, taille 150 µm à 180 µm (100 mesh à 80 mesh).
6.3 Spectrophotomètre, avec cellules correspondantes, généralement d'une longueur de trajectoire
d'1 cm, capable de mesurer une absorbance à 720 nm (ou 620 nm ou 680 nm).
6.4 Fioles jaugées, 100 ml.
6.5 Bain-marie, seulement pour la méthode A.
2 © ISO 2007 – Tous droits réservés

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ISO 6647-2:2007(F)
6.6 Agitateur magnétique, capable d'agiter de 950 r/min à 1 000 r/min, seulement pour la méthode B.
6.7 Fioles coniques, 100 ml.
6.8 Balance analytique, capable de peser à 0,000 1 g près.
6.9 Pipettes, capacité de 1 ml, 2 ml, 5 ml et 10 ml.
7 Échantillonnage
Il est important que le laboratoire reçoive un échantillon réellement représentatif, n'ayant subi aucune
détérioration ni aucune modification lors du transport ou du stockage.
L'échantillonnage ne fait pas partie de la méthode spécifiée dans la présente partie de l'ISO 6647. Une
[3]
méthode d'échantillonnage recommandée est présentée dans l'ISO 13690 .
8 Mode opératoire
8.1 Détermination de la teneur en eau
Une détermination de la teneur en eau doit être réalisée sur différentes portions de l'échantillon de laboratoire
et des étalons, conformément à l'ISO 712.
8.2 Préparation de l'échantillon pour essai
Dans le broyeur (6.1), broyer au moins 10 g de riz usiné qui passera à travers le tamis (6.2).
8.3 Prise d'essai et préparation de la solution d'essai
8.3.1 Peser (6.8) 100 mg ± 0,5 mg de l'échantillon pour essai (8.2) dans une fiole conique de 100 ml (6.7).
À cette prise d'essai, ajouter précautionneusement 1 ml d'éthanol (5.1) à l'aide d'une pipette, en rinçant la
prise d'essai qui adhérerait aux parois de la fiole. Secouer doucement afin d'humidifier l'ensemble de
l'échantillon.
8.3.2 Méthode A
Ajouter à l'aide d'une pipette (6.9) 9,0 ml de solution d'hydroxyde de sodium (5.2.1) dans une fiole conique et
mélanger. Puis faire chauffer le mélange au bain-marie (6.5) pendant 10 min en vue de disperser l'amidon.
Laisser refroidir à température ambiante et transvaser quantitativement dans une fiole jaugée de 100 ml (6.4).
Compléter au volume avec de d'eau et mélanger vigoureusement.
8.3.3 Méthode B
Ajouter à l'aide d'une pipette (6.9) 9,0 ml de solution d'hydroxyde de sodium (5.2.2) dans une fiole conique et
mélanger. Agiter le mélange à l'aide d'un agitateur magnétique (6.6) pendant 10 min afin d'obtenir la
dispersion. Retirer l'agitateur et transvaser quantitativement dans une fiole jaugée de 100 ml (6.4). Compléter
au volume avec de d'eau et mélanger vigoureusement.
Il est recommandé d'agiter le liquide dans la fiole jaugée avant d'ajouter de l'eau ainsi qu'après avoir complété
au trait.
© ISO 2007 – Tous droits réservés 3

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ISO 6647-2:2007(F)
8.4 Préparation de la solution témoin
Préparer une solution témoin en suivant la même procédure et en respectant les mêmes quantités pour tous
les réactifs conformément à la détermination, mais en utilisant 5,0 ml de solution d'hydroxyde de sodium
(5.3.1 pour la méthode A et 5.3.2 pour la méthode B) au lieu de la solution d'essai.
8.5 Préparation du graphique d'étalonna
...

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