ISO 8199:2018
(Main)Water quality — General requirements and guidance for microbiological examinations by culture
Water quality — General requirements and guidance for microbiological examinations by culture
This document specifies requirements and gives guidance for performing the manipulations common to each culture technique for the microbiological examination of water, particularly the preparation of samples, culture media, and general apparatus and glassware, unless otherwise required in the specific standard. It also describes the various techniques available for detection and enumeration by culture and the criteria for determining which technique is appropriate. This document is mainly intended for examinations for bacteria, yeasts and moulds, but some aspects are also applicable to bacteriophages, viruses and parasites. It excludes techniques not based on culturing microorganisms, such as polymerase chain reaction (PCR) methods.
Qualité de l’eau — Exigences et lignes directrices générales pour les examens microbiologiques sur milieu de culture
Le présent document établit les exigences et fournit les lignes directrices sur les manipulations communes à chaque technique de culture pour l'examen microbiologique de l'eau, en particulier la préparation des échantillons, les milieux de culture ainsi que l'appareillage général et la verrerie, sauf autre exigence dans la norme spécifique. Il décrit également les diverses techniques disponibles pour la détection et le dénombrement sur milieu de culture et les critères permettant de déterminer la technique appropriée. Le présent document concerne principalement les examens portant sur les bactéries, les levures et les moisissures, mais certains aspects peuvent aussi s'appliquer aux bactériophages, aux virus et aux parasites. Sont exclues les techniques ne reposant pas sur la culture de micro-organismes, telles que les méthodes de réaction en chaîne par polymérase (PCR).
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INTERNATIONAL ISO
STANDARD 8199
Third edition
2018-10
Water quality — General requirements
and guidance for microbiological
examinations by culture
Qualité de l’eau — Exigences et lignes directrices générales pour les
examens microbiologiques sur milieu de culture
Reference number
©
ISO 2018
© ISO 2018
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting
on the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address
below or ISO’s member body in the country of the requester.
ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: +41 22 749 01 11
Fax: +41 22 749 09 47
Email: copyright@iso.org
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2018 – All rights reserved
Contents Page
Foreword .v
Introduction .vii
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 4
5 General measurement requirements . 4
5.1 Uniformity of temperatures . 4
5.2 Incubation times . 4
5.3 Volumes and masses . 4
6 Diluents and culture media . 5
6.1 General . 5
6.2 Quality requirements of ingredients . 5
6.3 Diluents . 5
7 Sterilization and decontamination . 5
7.1 Sterilization of apparatus and glassware . 5
7.2 Sterilization of consumables . 6
7.3 Decontamination of glassware and materials after use . 6
7.4 Waste management . 6
8 Samples and sample handling . 6
8.1 Sampling . 6
8.2 Sample preparation . 7
8.2.1 Waters and other aqueous matrices . 7
8.2.2 Swabs . 7
9 Enumeration (quantitative) methods . 8
9.1 Inoculation of test portions in (or on) solid media . 8
9.1.1 General. 8
9.1.2 Pour plate technique . 8
9.1.3 Spread plate technique . 9
9.1.4 Membrane filtration technique .10
9.1.5 Incubation .12
9.1.6 Counting and confirmation from solid media .12
9.1.7 General guidance for calculation of results . .13
9.1.8 Expression of results .14
9.2 Enumeration using a liquid medium.24
9.2.1 General.24
9.2.2 Procedure .25
9.2.3 Choice of inoculation system .25
9.2.4 Incubation .26
9.2.5 Interpretation of results .26
9.2.6 Uncertainty of test results .27
9.2.7 Determination of MPN values .27
10 Detection (qualitative) methods .30
10.1 General .30
10.2 Procedure .31
10.3 Uncertainty of test results .31
11 Performance characteristics of methods .31
12 Analytical quality control .32
12.1 General .32
12.2 Internal quality control .32
12.2.1 General.32
12.2.2 Process controls .32
12.3 External quality assessment.33
Annex A (informative) Criteria for the choice of technique.35
Annex B (informative) Confidence intervals for colony count technique and choice of
method of calculation in special cases .40
Annex C (normative) Counting and calculations with two Petri dishes per dilution .44
Annex D (normative) Composition, preparation and performance testing of diluents .51
Bibliography .55
iv © ISO 2018 – All rights reserved
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO’s adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see www .iso
.org/iso/foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 147, Water quality, Subcommittee SC 4,
Microbiological methods.
This third edition cancels and replaces the second edition (ISO 8199:2005), which has been technically
revised. The main changes compared with the previous edition are as follows.
— Clauses have been added for terms and definitions, detection (qualitative) methods, performance
characteristics and analytical quality control (AQC).
— The clauses referencing culture media and diluent preparation and QC have been revised to align
with ISO 11133 and have been included in a new Annex D.
— The subclause on general guidance for the calculation of results for solid media techniques has
[9]
been updated to reflect the changes
...
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 8199
Third edition
2018-10
Water quality — General requirements
and guidance for microbiological
examinations by culture
Qualité de l’eau — Exigences et lignes directrices générales pour les
examens microbiologiques sur milieu de culture
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Foreword .v
Introduction .vii
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 4
5 General measurement requirements . 4
5.1 Uniformity of temperatures . 4
5.2 Incubation times . 4
5.3 Volumes and masses . 4
6 Diluents and culture media . 5
6.1 General . 5
6.2 Quality requirements of ingredients . 5
6.3 Diluents . 5
7 Sterilization and decontamination . 5
7.1 Sterilization of apparatus and glassware . 5
7.2 Sterilization of consumables . 6
7.3 Decontamination of glassware and materials after use . 6
7.4 Waste management . 6
8 Samples and sample handling . 6
8.1 Sampling . 6
8.2 Sample preparation . 7
8.2.1 Waters and other aqueous matrices . 7
8.2.2 Swabs . 7
9 Enumeration (quantitative) methods . 8
9.1 Inoculation of test portions in (or on) solid media . 8
9.1.1 General. 8
9.1.2 Pour plate technique . 8
9.1.3 Spread plate technique . 9
9.1.4 Membrane filtration technique .10
9.1.5 Incubation .12
9.1.6 Counting and confirmation from solid media .12
9.1.7 General guidance for calculation of results . .13
9.1.8 Expression of results .14
9.2 Enumeration using a liquid medium.24
9.2.1 General.24
9.2.2 Procedure .25
9.2.3 Choice of inoculation system .25
9.2.4 Incubation .26
9.2.5 Interpretation of results .26
9.2.6 Uncertainty of test results .27
9.2.7 Determination of MPN values .27
10 Detection (qualitative) methods .30
10.1 General .30
10.2 Procedure .31
10.3 Uncertainty of test results .31
11 Performance characteristics of methods .31
12 Analytical quality control .32
12.1 General .32
12.2 Internal quality control .32
12.2.1 General.32
12.2.2 Process controls .32
12.3 External quality assessment.33
Annex A (informative) Criteria for the choice of technique.35
Annex B (informative) Confidence intervals for colony count technique and choice of
method of calculation in special cases .40
Annex C (normative) Counting and calculations with two Petri dishes per dilution .44
Annex D (normative) Composition, preparation and performance testing of diluents .51
Bibliography .55
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Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO’s adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see www .iso
.org/iso/foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 147, Water quality, Subcommittee SC 4,
Microbiological methods.
This third edition cancels and replaces the second edition (ISO 8199:2005), which has been technically
revised. The main changes compared with the previous edition are as follows.
— Clauses have been added for terms and definitions, detection (qualitative) methods, performance
characteristics and analytical quality control (AQC).
— The clauses referencing culture media and diluent preparation and QC have been revised to align
with ISO 11133 and have been included in a new Annex D.
— The subclause on general guidance for the calculation of results for solid media techniques has
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been updated to reflect the changes
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NORME ISO
INTERNATIONALE 8199
Troisième édition
2018-10
Qualité de l’eau — Exigences et
lignes directrices générales pour les
examens microbiologiques sur milieu
de culture
Water quality — General requirements and guidance for
microbiological examinations by culture
Numéro de référence
©
ISO 2018
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2018
Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en œuvre, aucune partie de cette
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: +41 22 749 01 11
Fax: +41 22 749 09 47
E-mail: copyright@iso.org
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2018 – Tous droits réservés
Sommaire Page
Avant-propos .v
Introduction .vii
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 4
5 Exigences générales concernant les mesurages . 4
5.1 Uniformité des températures . 4
5.2 Durées d’incubation. 5
5.3 Volumes et masses . 5
6 Diluants et milieux de culture . 5
6.1 Généralités . 5
6.2 Exigences de qualité des ingrédients . 5
6.3 Diluants . 5
7 Stérilisation et décontamination . 6
7.1 Stérilisation d’appareillage et de verrerie . 6
7.2 Stérilisation des consommables . 6
7.3 Décontamination de la verrerie et du matériel après utilisation . 6
7.4 Gestion des déchets . 7
8 Échantillons et manipulation des échantillons . 7
8.1 Échantillonnage . 7
8.2 Préparation des échantillons . 7
8.2.1 Eaux et autres matrices aqueuses . 7
8.2.2 Écouvillons . 8
9 Méthodes de dénombrement (quantitatives) . 9
9.1 Ensemencement des prises d’essai dans (ou sur) un milieu solide . 9
9.1.1 Généralités . 9
9.1.2 Technique par incorporation . 9
9.1.3 Technique par étalement .10
9.1.4 Technique par filtration sur membrane.11
9.1.5 Incubation .13
9.1.6 Numération et confirmation sur milieux solides .14
9.1.7 Lignes directrices générales pour le calcul des résultats .15
9.1.8 Expression des résultats .16
9.2 Dénombrement utilisant un milieu liquide .26
9.2.1 Généralités .26
9.2.2 Mode opératoire .26
9.2.3 Choix d’un système d’ensemencement .27
9.2.4 Incubation .28
9.2.5 Interprétation des résultats .28
9.2.6 Incertitude des résultats d’essai.28
9.2.7 Détermination des indices NPP .29
10 Méthodes de détection (qualitatives) .32
10.1 Généralités .32
10.2 Mode opératoire .32
10.3 Incertitude des résultats d’essai .33
11 Caractéristiques de performances des méthodes .33
12 Contrôle qualité analytique.34
12.1 Généralités .34
12.2 Contrôle qualité interne .34
12.2.1 Généralités .34
12.2.2 Contrôles de procédé .34
12.3 Évaluation de qualité externe .36
Annexe A (informative) Critères de choix de la technique .37
Annexe B (informative) Intervalles de confiance pour la technique de numération
de colonies et choix de la méthode de calcul dans des cas particuliers.42
Annexe C (normative) Numération et calculs avec deux boîtes de Petri par dilution .46
Annexe D (normative) Composition, préparation et essai de performances des diluants .53
Bibliographie .57
iv © ISO 2018 – Tous droits réservés
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/directives).
L'attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion
de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir www .iso .org/avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 147, Qualité de l’eau, sous-comité
SC 4, Méthodes microbiologiques.
Cette troisième édition annule et remplace la deuxième édition (ISO 8199:2005), qui a fait l’objet d’une
révision technique. Les principales modifications par rapport à l’édition précédente sont les suivantes.
— Des articles ont été ajoutés concernant les termes et définitions, les méthodes de détection
(qualitatives), les caractéristiques de performance et le contrôle qualité analytique (AQC).
— Les articles faisant référence à la préparation et au Contrôle Qualité (QC) des milieux de culture et
des diluants ont été révisés à des fins d’harmonisation avec l’ISO 11133 et ont été inclus dans une
nouvelle Annexe
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 8199
Troisième édition
2018-10
Qualité de l’eau — Exigences et
lignes directrices générales pour les
examens microbiologiques sur milieu
de culture
Water quality — General requirements and guidance for
microbiological examinations by culture
Numéro de référence
©
ISO 2018
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Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en œuvre, aucune partie de cette
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y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
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Tél.: +41 22 749 01 11
Fax: +41 22 749 09 47
E-mail: copyright@iso.org
Web: www.iso.org
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Avant-propos .v
Introduction .vii
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 4
5 Exigences générales concernant les mesurages . 4
5.1 Uniformité des températures . 4
5.2 Durées d’incubation. 5
5.3 Volumes et masses . 5
6 Diluants et milieux de culture . 5
6.1 Généralités . 5
6.2 Exigences de qualité des ingrédients . 5
6.3 Diluants . 5
7 Stérilisation et décontamination . 6
7.1 Stérilisation d’appareillage et de verrerie . 6
7.2 Stérilisation des consommables . 6
7.3 Décontamination de la verrerie et du matériel après utilisation . 6
7.4 Gestion des déchets . 7
8 Échantillons et manipulation des échantillons . 7
8.1 Échantillonnage . 7
8.2 Préparation des échantillons . 7
8.2.1 Eaux et autres matrices aqueuses . 7
8.2.2 Écouvillons . 8
9 Méthodes de dénombrement (quantitatives) . 9
9.1 Ensemencement des prises d’essai dans (ou sur) un milieu solide . 9
9.1.1 Généralités . 9
9.1.2 Technique par incorporation . 9
9.1.3 Technique par étalement .10
9.1.4 Technique par filtration sur membrane.11
9.1.5 Incubation .13
9.1.6 Numération et confirmation sur milieux solides .14
9.1.7 Lignes directrices générales pour le calcul des résultats .15
9.1.8 Expression des résultats .16
9.2 Dénombrement utilisant un milieu liquide .26
9.2.1 Généralités .26
9.2.2 Mode opératoire .26
9.2.3 Choix d’un système d’ensemencement .27
9.2.4 Incubation .28
9.2.5 Interprétation des résultats .28
9.2.6 Incertitude des résultats d’essai.28
9.2.7 Détermination des indices NPP .29
10 Méthodes de détection (qualitatives) .32
10.1 Généralités .32
10.2 Mode opératoire .32
10.3 Incertitude des résultats d’essai .33
11 Caractéristiques de performances des méthodes .33
12 Contrôle qualité analytique.34
12.1 Généralités .34
12.2 Contrôle qualité interne .34
12.2.1 Généralités .34
12.2.2 Contrôles de procédé .34
12.3 Évaluation de qualité externe .36
Annexe A (informative) Critères de choix de la technique .37
Annexe B (informative) Intervalles de confiance pour la technique de numération
de colonies et choix de la méthode de calcul dans des cas particuliers.42
Annexe C (normative) Numération et calculs avec deux boîtes de Petri par dilution .46
Annexe D (normative) Composition, préparation et essai de performances des diluants .53
Bibliographie .57
iv © ISO 2018 – Tous droits réservés
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/directives).
L'attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion
de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir www .iso .org/avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 147, Qualité de l’eau, sous-comité
SC 4, Méthodes microbiologiques.
Cette troisième édition annule et remplace la deuxième édition (ISO 8199:2005), qui a fait l’objet d’une
révision technique. Les principales modifications par rapport à l’édition précédente sont les suivantes.
— Des articles ont été ajoutés concernant les termes et définitions, les méthodes de détection
(qualitatives), les caractéristiques de performance et le contrôle qualité analytique (AQC).
— Les articles faisant référence à la préparation et au Contrôle Qualité (QC) des milieux de culture et
des diluants ont été révisés à des fins d’harmonisation avec l’ISO 11133 et ont été inclus dans une
nouvelle Annexe
...
Questions, Comments and Discussion
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