ISO 17099:2024

Radiological protection - Performance criteria for laboratories using the cytokinesis-block micronucleus (CBMN) assay in peripheral blood lymphocytes for biological dosimetry

This document gives guidance on a) confidentiality of personal information for the customer and the laboratory, b) laboratory safety requirements, c) calibration sources and calibration dose ranges useful for establishing the reference dose-response curves that contribute to the dose estimation from CBMN assay yields and the detection limit, d) performance of blood collection, culturing, harvesting, and sample preparation for CBMN assay scoring, e) scoring criteria, f) conversion of micronucleus frequency in BNCs into an estimate of absorbed dose, g) reporting of results, h) quality assurance and quality control, and i) informative annexes containing sample instructions for customers, sample questionnaire, a microscope scoring data sheet, and a sample report. This document excludes methods for automated scoring of CBMN.

Radioprotection — Critères de performance pour les laboratoires pratiquant la dosimétrie biologique par l’analyse des micronoyaux par blocage de la cytodiérèse (CBMN) dans les lymphocytes du sang périphérique

Le présent document fournit des recommandations relatives: a) à la confidentialité des informations personnelles pour le demandeur et le laboratoire; b) aux exigences de sécurité relatives aux laboratoires; c) aux sources d’étalonnage et aux gammes de doses d’étalonnage utiles pour établir les courbes dose‑effet de référence qui contribuent à l’estimation de dose à partir des résultats de l’analyse des CBMN et à la limite de détection; d) au prélèvement, à la mise en culture, au recueil des cellules cultivées et à la préparation des échantillons de sang pour le dénombrement par analyse des CBMN; e) aux résultats de dénombrement; f) à la conversion de la fréquence des micronoyaux dans les BNC en estimation de dose absorbée; g) à la présentation des résultats; h) à l’assurance qualité et au contrôle qualité; i) aux annexes informatives contenant des exemples d’instructions d’utilisation, de questionnaire, de tableau de dénombrement au microscope et de rapport. Le présent document exclut les méthodes de dénombrement automatisé des CBMN.

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 13-Jun-2024
• ICS: 13.280 - Radiation protection
• Technical Committee: ISO/TC 85/SC 2 - Radiological protection
• Drafting Committee: ISO/TC 85/SC 2 - Radiological protection
• Current Stage: 6060 - International Standard published
• Start Date: 14-Jun-2024
• Due Date: 29-Oct-2024
• Completion Date: 14-Jun-2024

Relations

• Consolidates: ISO 23256:2023 - Water quality - Detection of selected congeners of polychlorinated dibenzo-p-dioxins and polychlorinated biphenyls - Method using a flow immunosensor technique
• Effective Date: 06-Jun-2022
• Revises: ISO 17099:2014 - Radiological protection - Performance criteria for laboratories using the cytokinesis block micronucleus (CBMN) assay in peripheral blood lymphocytes for biological dosimetry
• Effective Date: 06-Jun-2022

Overview - ISO 17099:2024 (CBMN assay for biological dosimetry)

ISO 17099:2024 specifies performance criteria and practical guidance for laboratories using the cytokinesis‑block micronucleus (CBMN) assay in peripheral blood lymphocytes for biological dosimetry. The standard supports radiological protection by defining how micronucleus (MN) yields in binucleated cells (BNCs) are collected, scored, converted into absorbed dose estimates, and reported. It covers laboratory responsibilities, confidentiality, safety, calibration, sample processing, scoring criteria, dose conversion, quality assurance, and informative annexes with sample forms. The document explicitly excludes methods for automated scoring of CBMN.

Key topics and technical requirements

• Confidentiality and data security: Principles for protecting personal information of both the customer and laboratory, sample anonymity, transmission and storage of results.
• Laboratory safety: Microbiological, chemical and optical safety requirements and a safety plan for CBMN operations.
• Calibration and detection limits: Guidance on calibration sources, calibration dose ranges, background MN frequency, calibration curves and characterization of the minimum detectable dose.
• Sample processing and scoring: Requirements for blood collection, culture, harvesting, staining, microscopy and manual scoring criteria for micronuclei in BNCs; includes scoring data sheets.
• Dose estimation: Methods to convert MN frequency into absorbed dose, calculation of uncertainties, comparison with controls, and considerations for acute and non‑acute exposures.
• Accident response and triage: Procedures for scoring and reporting results in single‑case assessments and large‑scale population triage, including networked laboratory approaches.
• Quality assurance/quality control (QA/QC): Lab QA program setup, inter‑comparisons, scorer qualification checks, sample integrity checks and performance checks for instrumentation and reporting.
• Informative annexes: Sample instructions for requestors, questionnaires, microscope scoring sheets and sample single/group reports.

Applications and who should use ISO 17099

ISO 17099 is intended for:

• Clinical and reference laboratories performing biological dosimetry with the CBMN assay
• Emergency response and public health agencies planning radiological incident triage
• Nuclear industry and occupational health services conducting post‑exposure assessment
• Laboratory quality managers implementing QA/QC and reporting practices
• Regulators and accreditation bodies evaluating biodosimetry competence

Using ISO 17099 improves consistency in dose estimation, supports credible reporting in radiological incidents, and aids interoperability between biodosimetry networks.

Related standards (if applicable)

• ISO/IEC 17025 (general requirements for the competence of testing and calibration laboratories) - often used in conjunction with ISO 17099 for laboratory accreditation and quality management.

Standards Content (Sample)

International
Standard
ISO 17099
Second edition
Radiological protection —
2024-06
Performance criteria for
laboratories using the cytokinesis-
block micronucleus (CBMN) assay
in peripheral blood lymphocytes for
biological dosimetry
Radioprotection — Critères de performance pour les
laboratoires pratiquant la dosimétrie biologique par l’analyse
des micronoyaux par blocage de la cytodiérèse (CBMN) dans les
lymphocytes du sang périphérique
Reference number
© ISO 2024
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting on
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or ISO’s member body in the country of the requester.
ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: [phone]
Email: [e-mail]
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii
Contents Page
Foreword .v
Introduction .vii
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 CMBN assay methodology used in this document . 3
4.1 General .3
4.2 Requests for analysis and blood sampling .3
5 Responsibility of the requestor . 3
6 Responsibility of the service laboratory . 4
6.1 Setup and sustainment of the quality assurance program .4
6.2 Responsibility during service .4
7 Confidentiality of personal information . 5
7.1 Overview .5
7.2 Applications of the principle of confidentiality .5
7.2.1 Delegation of responsibilities within the laboratory.5
7.2.2 Requests for analysis . .6
7.2.3 Transmission of confidential information .6
7.2.4 Anonymity of samples .6
7.2.5 Reporting of results .6
7.2.6 Storage .6
7.2.7 Data security plan .6
8 Laboratory safety requirements . 6
8.1 Overview .6
8.2 Microbiological safety requirements .7
8.3 Chemical safety requirements .7
8.4 Optical safety requirements .8
8.5 Safety plan .8
9 Sample processing. 8
9.1 Culturing .8
9.2 Staining .10
9.3 Microscopy .10
9.4 Scoring of slides .10
9.4.1 General .10
9.4.2 Criteria for scoring .10
9.4.3 Scoring data sheets .11
9.5 Automated analysis .11
10 Calibration source(s), calibration curve, and minimum detectable dose.11
10.1 Calibration source(s) .11
10.2 Calibration curve .11
10.3 Background MN frequency . 12
10.4 Comparison with the background level: Characterisation of the minimum detectable
dose . 13
11 Accidental exposure involving few individuals .15
11.1 Procedure for scoring MN in BNCs . 15
11.1.1 Coding of samples and slides . 15
11.1.2 Scoring techniques .16
11.1.3 Laboratory scoring expertise .16
11.2 Criteria for converting a MN yield into an estimate of absorbed dose .16
11.2.1 Overview .16

iii
11.2.2 Comparison with controls .16
11.2.3 Confidence limits on the number of MN .16
11.2.4 Calculation of absorbed dose for whole-body exposures .16
11.2.5 Calculation of uncertainty on absorbed dose .17
11.2.6 Acute and non-acute exposure cases .17
11.2.7 Testing the distribution of MN per BNC .18
11.2.8 Other exposure scenarios .18
11.3 Reporting of results .18
11.3.1 General .18
11.3.2 Content of the report (see Annex D for a standard form) .18
11.3.3 Interpretation of the results .19
12 Population triage . 19
12.1 General .19
12.2 Use of a CBMN assay network for large scale exposures .19
12.3 Procedure for scoring MN in BNCs . 20
12.4 Criteria for converting a MN yield into an estimate of absorbed dose . 20
12.5 Reporting of results . 20
13 Quality assurance and quality control .20
13.1 Overview . 20
13.2 Specific requirement . 20
13.2.1 General . 20
13.2.2 Performance checks by laboratory inter-comparisons . 20
13.2.3 Periodical performance check of scorer qualification .21
13.2.4 Performance checks of sample transport integrity .21
13.2.5 Performance checks of sample integrity by service laboratory .21
13.2.6 Performance checks for instrumentation .21
13.2.7 Performance checks of sample protocol . 22
13.2.8 Performance checks of sample scoring . 22
13.2.9 Performance checks of dose and confidence limits estimation . 22
13.2.10 Performance checks for result report generation . 22
Annex A (informative) Sample data sheet for recording MN in BNCs .23
Annex B (informative) Instructions for requestor (sample) .24
Annex C (informative) Sample questionnaire .25
Annex D (informative) Sample of report for single assessment.27
Annex E (informative) Sample group report .29
Annex F (informative) Decision threshold and detection limit .31
Bibliography .34

iv
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through
ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee
has been established has the right to be represented on that committee. International organizations,
governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely
with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are described
in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the different types
of ISO document should be noted. This document was drafted in accordance with the editorial rules of the
ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
ISO draws attention to the possibility that the implementation of this document may involve the use of (a)
patent(s). ISO takes no position concerning the evidence, validity or applicability of any claimed patent
rights in respect thereof. As of the date of publication of this document, ISO had not received notice of (a)
patent(s) which may be required to implement this document. However, implementers are cautioned that
this may not represent the latest information, which may be obtained from the patent database available at
www.iso.org/patents. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and expressions
related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the World Trade
Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see www.iso.org/iso/foreword.html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 85, Nuclear energy, nuclear technologies, and
radiological protection, Subcommittee SC 2, Radiological protection, in collaboration with the European
Committee for Standardization (CEN) Technical Committee CEN/TC 430, Nuclear energy, nuclear technologies
and radiological protection, in accordance with the Agreement on technical cooperation between ISO and
CEN (Vienna Agreement).
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 17099:2014), which has been technically
revised.
The main changes are as follows:
— minor edits to text throughout;
— reorganization of document to better harmonize with other biological dosimetry standards;
— addition of 7.2.7 on data security plan;
— additional requirements added for the report on the conditions of the exposure for the calibration curve
in 10.2;
— relaxation of the number of individuals required for each age group for establishing background
micronucleus frequency, leaving the determination up to the head of the laboratory (10.3);
— addition of details on determining the minimal resolvable dose (10.4), the absorbed dose (11.2.4) and the
uncertainty (11.2.5);
— removal of reference to coefficient of variance when determining scoring expertise, focussing on the use
of 95 % confidence intervals to determine expertise (11.1.3);
— addition of reference to other exposure scenarios (11.2.8);
— removal of Annex on automated micronuclei scoring as it was deemed outside of the scope of the standard;
— addition of a sample group report (see Annex E);

v
— addition of a detailed annex (see Annex F) for calculating the decision threshold and detection limit
along with a sample calculation and R script for performing these calculations.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www.iso.org/members.html.

vi
Introduction
The purpose of this document is to define the use of the cytokinesis-block micronucleus (CBMN) assay with
human peripheral blood lymphocytes for biological dosimetry of exposure to ionizing radiation. This assay
is intended to be applied for accidental or malevolent exposures involving
a) up to a few casualties to provide individual whole-body dose estimates, or
b) in a triage mode to populations to provide rapid, lower accuracy dose estimates for individuals that can
be improved with more accurate analysis at a later time.
The CBMN assay is an alternative cytogenetic technique, which is possibly simpler and faster to perform
[1][2]
than the dicentric assay . It is also routinely used to demonstrate exposure to genotoxic agents, other
than ionizing radiation, which is not covered in this document. Although culture of the blood samples is
slightly longer than for dicentrics, the scoring of micronuclei (MN) in binucleated lymphocytes is easier.
As was done with the dicentric assay, the CBMN assay has been adapted for the emergency triage of large-
scale multi-casualty nuclear or radiological incident. The blood volume required for a sufficient number of
scorable binucleated cells (BNCs) is similar to that required for the dicentric assay. Again, the faster counting
speed for MN compensates for the extended culture time. However, it has to be considered that factors such
as age, sex, diet and environmental mutagens can have an influence on the results particularly after low
[3][4][5]
dose exposures . In addition, the CBMN assay can be performed in an automated mode using various
cytometric technologies but these are outside the scope of this document.
This document provides a guideline on how to perform the CBMN assay for dose assessment using
documented and validated procedures. Dose assessment using the CBMN assay has relevance in medical
management, radiation-protection management, record keeping, and medical/legal requirements. This
document is divided into two parts, according to the use of CBMN assay: radiation exposure of a few
individuals or population triage in a large radiological or nuclear event.
A part of the information in this document is contained in other international guidelines and scientific
publications, primarily in the International Atomic Energy Agency’s (IAEA) technical reports series on
biological dosimetry. However, this document expands and standardizes the quality assurance and quality
control, the criteria of accreditation and the evaluation of performance. This document is generally in
[6]
conformity with ISO/IEC 17025 with particular consideration given to the specific needs of biological
dosimetry. The expression of uncertainties in dose estimations given in this document complies with
[15] [7]
ISO/IEC Guide 98-3 (former GUM) and the ISO 5725 (all parts) .

vii
International Standard ISO 17099:2024(en)
Radiological protection — Performance criteria for
laboratories using the cytokinesis-block micronucleus
(CBMN) assay in peripheral blood lymphocytes for biological
dosimetry
1 Scope
This document gives guidance on
a) confidentiality of personal information for the customer and the laboratory,
b) laboratory safety requirements,
c) calibration sources and calibration dose ranges useful for establishing the reference dose-response
curves that contribute to the dose estimation from CBMN assay yields and the detection limit,
d) performance of blood collection, culturing, harvesting, and sample preparation for CBMN assay scoring,
e) scoring criteria,
f) conversion of micronucleus frequency in BNCs into an estimate of absorbed dose,
g) reporting of results,
h) quality assurance and quality control, and
i) informative annexes containing sample instructions for customers, sample questionnaire, a microscope
scoring data sheet, and a sample report.
This document excludes methods for automated scoring of CBMN.
2 Normative references
There are no normative references in this document.
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
ISO and IEC maintain terminology databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: available at https:// www .electropedia .org/
3.1
background frequency
background level
spontaneous yield (or number) of MN in BNCs recorded in control samples or individuals who are not
abnormally exposed to genotoxins including ionizing radiation

3.2
binucleated cells
BNCs
cells that have completed one nuclear division after mitogen stimulation but have been blocked from
performing cytokinesis (3.6) and are the cell type in which micronuclei (3.9) are scored in the CBMN assay
Note 1 to entry: These cells are accumulated in culture using cytochalasin-B which is an inhibitor of cytokinesis.
3.3
chromosome
structure that comprises discrete packages of DNA and proteins that carries genetic information which
condense to form characteristically shaped bodies during nuclear division
3.4
confidence interval
statistical range about an estimated quantity within which the value of the quantity is expected to occur,
with a specified probability
3.5
cytochalasin-B
Cyto-B
reagent used to block cytokinesis (3.6) in dividing cells allowing once-divided cells to be identified as
binucleated cells
3.6
cytokinesis
physical process of cell division, which divides the cytoplasm of a parental cells into two daughter cells
3.7
dicentric
aberrant chromosome (3.3) bearing two centromeres derived from the joining of parts from two broken
chromosomes (3.3)
Note 1 to entry: It is generally accompanied by an acentric fragment.
3.8
linear energy transfer
LET
quotient of dE/dl, as defined by the International Commission on Radiation Units and Measurements (ICRU),
where dE is the average energy locally imparted to the medium by a charged particle of specific energy in
traversing a distance of dl
3.9
micronucleus
MN
small nucleus that arises from lagging acentric chromosome (3.3) fragments or whole chromosomes during
nuclear division and chromosome (3.3) segregation at mitosis during anaphase/telophase
Note 1 to entry: More that 90 % of the micronuclei induced by ionizing radiation arise from lagging acentric
chromosome fragments.
3.10
non-refractile
process by which materials do not have the ability to refract or scatter light
3.11
precision
dispersion of measurements with respect to a measure of location or central tendency

3.12
quality assurance
planned and systematic actions necessary to provide adequate confidence that a process, measurement, or
service has satisfied given requirements for quality
3.13
quality control
part of quality assurance (3.12) intended to verify that systems and components correspond to pre-
determined requirements
3.14
service laboratory
laboratory performing biological dosimetry measurements
4 CMBN assay methodology used in this document
4.1 General
In this document, the frequency of MN in cultured human lymphocytes blocked in cytokinesis and scored by
microscopy is used for dose estimation after suspected exposure to ionizing radiation.
Lymphocytes are cultured by a method that permits once-divided cytokinesis-block cells to be recognized
by their binucleated appearance for analysis. This requires whole blood or isolated lymphocytes to be
incubated in culture medium with a mitogen that would enable scoring of MN in first-generation BNCs. A
cytokinesis blocking agent, cytochalasin-B, is added at least 6 h, i.e. approximately 24 h after the start of the
culture, before the first mitosis commences in order to arrest dividing lymphocytes at the BNC stage after
nuclear division is completed. The duration of the cell culture and the timing of addition of the arresting
agent are optimised to ensure an adequate frequency of binucleated cells.
BNCs are recovered from the cultures by centrifugation, placing in a hypotonic salt solution and fixing in
a mixture of methanol and acetic acid. Fixed cells are placed on microscope slides and stained. In the case
of isolated lymphocytes, it is also acceptable to prepare slides by cytocentrifugation of cells onto slides,
followed by air-drying, fixation with methanol, and staining. The exact protocol for cell culture, harvesting
BNCs and staining employed by a CBMN assay laboratory should be formally documented.
Microscope slides containing stained cells are scanned to identify suitable BNCs. The frequency of MN
observed in an appropriate number of scored BNCs is converted to an estimate of radiation dose by reference
to calibration data.
4.2 Requests for analysis and blood sampling
Depending on national regulations, the request for an analysis should normally be made by a physician
representing the patient, or the analysis could be requested by another authority due to legal claims. In
all cases where it is normally possible, the blood sampling for MN analysis shall be made with the patient’s
informed consent. The laboratory head, depending on the national regulations, may be required to maintain
the record of the patient's informed consent.
It is the responsibility of the medical staff (e.g. doctor, nurse, etc.) to schedule blood draw and shipping so as
to ensure that the blood sample is received by the laboratory in the best possible conditions (see 13.2.4). The
purpose is to avoid having the blood sample sit for several hours from time of blood draw and before sample
pickup for transportation (see Clause 5 for details).
5 Responsibility of the requestor
This clause includes items that are not controlled by the service laboratory. Prior to blood sampling, an
initial conversation between the requestor and the service laboratory should occur to co-ordinate the
sample collection and shipment. Specific requirements regarding sample collection and shipment should
be explained to the requestor including the approximate delivery time for the assay result(s). A standard

instruction sheet (illustrated in Annex B) explaining the requirements should be sent to the requestor. The
requirements include:
1)
a) Blood sampling shall use Vacutainer® tubes containing lithium or sodium heparin as the anticoagulant
and the Vacutainer® tubes should either be sent or specified by the service laboratory.
b) Blood shall be collected (ideally about 5 ml), labelled accurately and unambiguously, maintained at
room temperature (around 20 °C), and sent to the service laboratory as soon as possible.
c) Precautions shall be taken to ensure the integrity of the container to prevent leakage during shipment.
Blood samples shall be kept at ambient temperature during shipment, i.e. 11° C to 30 °C. A temperature
recording device shall be included to ensure that the temperature during shipment is controlled.
Packaging and labelling shall conform to national and international regulations. If air transportation
is involved, a physical dosimeter shall be included to monitor whether the sample was irradiated in
transit.
d) A questionnaire (see Annex C) provided by the service laboratory shall be completed and returned prior
to the start of blood culturing.
e) The laboratory shall be alerted of biologically contaminated and/or infectious samples so that extra
precautions can be taken when handling the sample.
6 Responsibility of the service laboratory
6.1 Setup and sustainment of the quality assurance program
The service laboratory shall establish and maintain a quality assurance (QA) program (see Clause 13), which
covers all aspects of the service. The laboratory’s QA program shall address the following issues:
a) It shall include periodic internal checks of equipment operations, reagent suitability, and various
performance checks, i.e. intra-laboratory comparison exercises, operator qualifications, sample
protocol, scoring, dose estimations, report generation, etc.
b) It shall include periodic external checks of the laboratory’s operations. The external audits shall include
a review of the service laboratory’s documentation of equipment operations, reagent suitability, and
various performance checks, i.e. inter-comparison exercises, operator qualifications, sample transport
integrity, etc.
6.2 Responsibility during service
The service laboratory shall provide necessary guidance, procedures, and timely reporting to provide
dose assessment by the CBMN assay with a request for service. The service activities shall address the
following issues:
a) The service laboratory shall have documentation, reviewed and endorsed by a qualified expert,
i.e. service laboratory radiobiologist or equivalent, including the following:
1) an instruction sheet to be sent to the customer describing shipping procedures (see Annex B);
2) a questionnaire that shall elicit patient consent and all available information regarding the patient
and the exposure scenario (see Annex C);
3) step by step procedures for processing the blood sample from receipt of the sample to reporting of
the dose;
b) The service laboratory is not responsible for sample transport; however, they should provide advice
regarding sample transfer. If required, a kit for the collection of at least 5 ml whole blood in tubes
containing lithium or sodium heparin as the anticoagulant shall be sent to the requestor with the
V is an example of a suitable product available commercially. This information is given for the convenience of users of this document and does
1)  acutainer
not constitute an endorsement by ISO of this product Equivalent products may be used if they can be shown to lead to the same results.
.
appropriately labelled and addressed packaging material for the return of the sample to the service
laboratory. The packaging shall conform to national and/or international regulations for the transit of
potentially infectious pathological specimens (see 13.2.4).
c) After receipt of the blood sample, the following steps shall be performed:
1) document the receipt of the blood sample (date, time, recipient);
2) check for conformity of the sample (blood volume, integrity of the tubes);
3) mark the blood sample with a unique code;
4) store samples at room temperature and document the place of storage until the setting up of
cultures;
5) set up cultures in parallel as soon as possible and document date, time, and operator;
6) document all the reagents used for culturing with appropriate lot numbers and expiry dates;
7) document the addition of reagents and the end of the culture (date, time, operator);
8) document the short- and long-term storage of the sample until slide making;
9) document the slide codes, number of slides, and location of storage;
10) document the results from scoring;
11) store the slides and case documents in an appropriate place for possible medico-legal re-evaluation
of the case;
d) The service laboratory shall interpret the results and prepare reports (see Annex D).
e) The service laboratory shall sustain a dialogue with and provide results to the requestor.
7 Confidentiality of personal information
7.1 Overview
Biological dosimetry investigations made by a service laboratory shall be undertaken in accordance
with national regulations regarding confidentiality. This would normally include the maintenance of
confidentiality of all of the patient's information including identity, medical data, etc. In addition, the
commercial confidentiality of the patient's employer and any other organizations involved in a radiological
or nuclear accident/incident should be observed.
This requirement extends to
a) written, electronic, or verbal communications between the laboratory and the person/organization
requesting the analysis and receiving the report, and
b) the secure protection of confidential information held within the organization where the service
laboratory is located.
7.2 Applications of the principle of confidentiality
7.2.1 Delegation of responsibilities within the laboratory
The head of the laboratory may authorize a limited number of laboratory staff to deal with documents
related to the analysis. Persons with this authority shall have signed a commitment to confidentiality
regarding their duties within the laboratory.

The laboratory head shall maintain the signed confidentiality agreements and ensure the security and
safety of all confidential documents.
7.2.2 Requests for analysis
Depending on national regulations, the request for an analysis should normally be made by a physician
representing the patient, or the analysis could be requested by another authority due to legal claims. In
all cases, the blood sampling for CBMN analysis shall be made with the patient’s informed consent. The
laboratory head, depending on the national regulations, may be required to maintain the record of the
patient's informed consent.
7.2.3 Transmission of confidential information
Whatever the chosen means of communication, confidentiality shall be ensured during the exchange of
information and reports between the service laboratory and the requestor of the analysis.
The laboratory head shall define all processes for information transmission and assurance of confidentiality.
7.2.4 Anonymity of samples
The laboratory head shall have established protocols for maintaining the anonymity of samples. To avoid
the identification of the patient while guaranteeing the traceability of the analysis, the blood samples should
be coded upon arrival in the service laboratory. The coding should be performed in an unambiguous way
according to a standard procedure. The same code is to be used for all the stages of analysis. The code is
assigned by an authorized person, as defined in 7.2. Decoding, interpretation of results, and compiling the
report are also to be performed by an authorized person.
7.2.5 Reporting of results
The final report containing the results and their interpretation (when needed) is communicated to the
requestor of the analysis. Depending on national regulations, further copy may, with appropriate approval,
be passed to other responsible persons.
7.2.6 Storage
The laboratory shall store the cultured cell pellet and slides to facilitate review/analysis by an external
expert or another laboratory in the event of any dispute regarding the analysis.
The laboratory head shall define how fixed cells, slides, data and results are stored. Retention periods
are defined by the laboratory head according to national regulations/policies for possible medico-legal
re-evaluation of the case. All laboratory records relating to a case, which could permit the patient and/or
employer to be identified, shall be stored in a place only accessible to the authorized persons. Final disposal
of records shall be conducted by secure means such as shredding.
7.2.7 Data security plan
A data security plan should be established with written procedures for safeguarding data that contains
personal identifiable information. This should include provisions for the storage of written and electronic
data, results and reports in a secure location accessible only to authorized persons. A plan for secure
disposal of data should also be included.
8 Laboratory safety requirements
8.1 Overview
Staff shall conform to their national legislation and institutional regulations regarding safety in the
laboratories. There are some particular features concerning safety in service laboratories that are worth
highlighting. These include microbiological, chemical, and optical considerations.

8.2 Microbiological safety requirements
Handling human blood poses some risk of blood borne parasites and infections being transmitted to
laboratory staff. Specimens shall be unpacked and manipulated in a class 2 microbiological safety cabinet
to minimizing culture failure due to microbial contamination. Suitable disinfectants shall be available to
deal with spills. All biological waste and used disposable plastic ware shall be sterilised, for example by
autoclaving or incineration, before final disposal.
The legal and ethical position regarding pathogen testing of blood samples upon receipt differs between
countries, and researchers should follow their national requirements. It should be noted that when blood
samples are accepted from abroad, depending on the country of origin, airlines might require the sender to
provide a certificate confirming that the samples have been tested and are pathogen negative.
8.3 Chemical safety requirements
Certain chemicals and pharmaceuticals are routinely used in the procedures covered in this document.
When present in cultures or used in staining procedures they are mostly used in small volumes and in
dilutions that generally present no health hazard. They are however prepared and stored in concentrated
stock solutions. The main reagents of concern and their internationally agreed upon hazard statements
(H-Statements) according to the Globally Harmonized System of Classification and Labelling of Chemicals
(GHS) are listed in Table 1. Note that commercially available products can vary depending on the physical
form/quantity/composition. Always check the hazard and precautionary statements on safety data sheets
available from suppliers for your own reagents.
Table 1 — List of reagents and corresponding hazard statement
Reagent Hazard statement
Acridine orange H302, H312, H319, H335, H340
Benzylpenicillin H317 H334
Cytochalasin B H300, H310, H330, H361
Glacial acetic acid H226, H314
Giemsa stain H225, H301, H311, H331, H370
Heparin H315, H319, H334
Methanol H225, H301, H311, H331, H370
Paraformaldehyde H228, H302, H315, H317, H318, H332, H334

TTabablele 1 1 ((ccoonnttiinnueuedd))
Reagent Hazard statement
Phytohaemagglutinin H302, H317, H332
Streptomycin sulfate H302, H317, H332, H334, H361
Key
H225: highly flamm
...

Norme
internationale
ISO 17099
Deuxième édition
Radioprotection — Critères de
2024-06
performance pour les laboratoires
pratiquant la dosimétrie biologique
par l’analyse des micronoyaux par
blocage de la cytodiérèse (CBMN)
dans les lymphocytes du sang
périphérique
Radiological protection — Performance criteria for laboratories
using the cytokinesis-block micronucleus (CBMN) assay in
peripheral blood lymphocytes for biological dosimetry
Numéro de référence
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Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
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E-mail: [e-mail]
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
ii
Sommaire Page
Avant-propos .v
Introduction .vii
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Méthodologie d’analyse des CBMN utilisée dans le présent document . 3
4.1 Généralités .3
4.2 Demandes d’analyse et prélèvement de sang .3
5 Responsabilité du demandeur . 4
6 Responsabilité du laboratoire . 4
6.1 Mise en place et maintenance du programme d’assurance qualité .4
6.2 Responsabilité pendant le service .5
7 Confidentialité des informations personnelles . 6
7.1 Vue d’ensemble .6
7.2 Applications du principe de confidentialité .6
7.2.1 Délégation de responsabilités au sein du laboratoire .6
7.2.2 Demandes d’analyses.6
7.2.3 Transmission d’informations confidentielles .6
7.2.4 Anonymat des échantillons.6
7.2.5 Présentation des résultats .6
7.2.6 Stockage .7
7.2.7 Plan de sécurité des données .7
8 Exigences de sécurité relatives aux laboratoires . 7
8.1 Vue d’ensemble .7
8.2 Exigences de sécurité microbiologique .7
8.3 Exigences de sécurité relatives aux produits chimiques .7
8.4 Exigences de sécurité relatives à l’optique .8
8.5 Plan de sécurité . .8
9 Traitement des échantillons . 9
9.1 Culture .9
9.2 Coloration .10
9.3 Microscopie . .10
9.4 Dénombrement des lames .10
9.4.1 Généralités .10
9.4.2 Critères de dénombrement .11
9.4.3 Tableaux de dénombrement .11
9.5 Analyse automatisée .11
10 Sources d’étalonnage, courbe de calibration et dose minimum détectable .11
10.1 Sources d’étalonnage .11
10.2 Courbe de calibration . 12
10.3 Fréquence de base des MN . 13
10.4 Comparaison avec le taux de base: caractérisation de la dose minimale détectable .14
11 Exposition accidentelle d’un petit nombre d’individus .16
11.1 Procédure de dénombrement des MN dans les BNC .16
11.1.1 Codage des échantillons et des lames .16
11.1.2 Techniques de dénombrement .17
11.1.3 Compétence du laboratoire pour le dénombrement .17
11.2 Critères pour convertir un taux de MN en une estimation de dose absorbée .17
11.2.1 Vue d’ensemble .17
11.2.2 Comparaison avec les valeurs témoins .17

iii
11.2.3 Limites de l’intervalle de confiance pour le nombre de MN .17
11.2.4 Calcul de la dose absorbée pour des expositions du corps entier .18
11.2.5 Calcul de l’incertitude sur la dose absorbée .18
11.2.6 Cas d’exposition aiguë et non aiguë .19
11.2.7 Analyse de la répartition des MN par BNC .19
11.2.8 Autres scénarios d’exposition .19
11.3 Présentation des résultats .19
11.3.1 Généralités .19
11.3.2 Contenu du rapport (voir Annexe D pour un format normal) . 20
11.3.3 Interprétation des résultats . 20
12 Tri de population .21
12.1 Généralités .21
12.2 Utilisation d’un réseau employant l’analyse des CBMN pour les expositions de grande
ampleur .21
12.3 Procédure de dénombrement des MN dans les BNC .21
12.4 Critères pour convertir un taux de MN en une estimation de dose absorbée .21
12.5 Présentation des résultats .21
13 Assurance qualité et contrôle qualité .21
13.1 Vue d’ensemble .21
13.2 Exigence spécifique . 22
13.2.1 Généralités . 22
13.2.2 Contrôles de performance par des comparaisons interlaboratoires . 22
13.2.3 Contrôle périodique de performance de la qualification de l’opérateur . 22
13.2.4 Contrôle de performance du transport des prélèvements . 23
13.2.5 Contrôle de performance de l’intégrité des prélèvements par le laboratoire de
service . 23
13.2.6 Contrôle de performance de l’appareillage . 23
13.2.7 Contrôle de performance des protocoles expérimentaux . 23
13.2.8 Contrôle qualité de la performance du dénombrement. 23
13.2.9 Contrôle de performance de l’estimation de la dose et de l’intervalle de confiance .24
13.2.10 Contrôle de performance relatif au rapport d’expertise.24
Annexe A (informative) Tableau type pour le dénombrement des MN dans les BNC .25
Annexe B (informative) Instructions pour le demandeur (exemple) .26
Annexe C (informative) Exemple de questionnaire .28
Annexe D (informative) Exemple de rapport portant sur une évaluation individuelle .30
Annexe E (informative) Rapport d’estimation de dose pour plusieurs échantillons .32
Annexe F (informative) Seuil de décision et limite de détection .34
Bibliographie .37

iv
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux
de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire
partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document
a été rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2
(voir www.iso.org/directives).
L’ISO attire l’attention sur le fait que la mise en application du présent document peut entraîner l’utilisation
d’un ou de plusieurs brevets. L’ISO ne prend pas position quant à la preuve, à la validité et à l’applicabilité de
tout droit de propriété revendiqué à cet égard. À la date de publication du présent document, l’ISO n'avait pas
reçu notification qu’un ou plusieurs brevets pouvaient être nécessaires à sa mise en application. Toutefois,
il y a lieu d’avertir les responsables de la mise en application du présent document que des informations
plus récentes sont susceptibles de figurer dans la base de données de brevets, disponible à l'adresse
www.iso.org/brevets. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir identifié tout ou partie de
tels droits de propriété.
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données pour
information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion de
l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles techniques au
commerce (OTC), voir www.iso.org/avant-propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 85, Énergie nucléaire, technologies
nucléaires, et radioprotection, sous-comité SC 2, Radioprotection en collaboration avec le comité technique
CEN/TC 430, Énergie nucléaire, technologies nucléaires et radioprotection du Comité européen de
normalisation (CEN), conformément à l’Accord de coopération technique entre l’ISO et le CEN (Accord de
Vienne).
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 17099:2014), qui a fait l’objet
d’une révision technique.
Les principales modifications sont les suivantes:
— modifications mineures dans l’ensemble du texte;
— réorganisation du document pour une meilleure harmonisation avec les autres normes de dosimétrie
biologique;
— ajout de 7.2.7 concernant le plan de sécurité des données;
— ajout d’exigences supplémentaires concernant le rapport sur les conditions d’exposition pour la courbe
de calibration de 10.2;
— assouplissement du nombre d’individus exigé pour chaque groupe d’âge afin d’établir la fréquence
de base des micronoyaux, en laissant au chef de laboratoire le soin de le déterminer (10.3);
— ajout de détails relatifs à la détermination de la dose minimale détectable (10.4), de la dose absorbée
(11.2.4) et de l’incertitude (11.2.5);

v
— suppression de la référence au coefficient de variance lors de la détermination de la compétence pour le
dénombrement, l’accent étant mis sur l’utilisation d’intervalles de confiance à 95 % pour déterminer la
compétence (11.1.3);
— ajout d’une référence à d’autres scénarios d’exposition (11.2.8);
— suppression de l’annexe traitant du dénombrement automatisé des micronoyaux, car elle a été considérée
comme ne relevant pas du domaine d’application de la norme;
— ajout d’un rapport d’estimation de dose pour plusieurs échantillons (voir Annexe E);
— ajout d’une annexe détaillée (voir Annexe F) pour le calcul du seuil de décision et de la limite de détection,
avec un exemple de calcul et un script R pour effectuer ces calculs.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes se
trouve à l’adresse www.iso.org/fr/members.html.

vi
Introduction
L’objectif du présent document est de définir la dosimétrie biologique par l’utilisation de l’analyse des
micronoyaux par blocage de la cytodiérèse (CBMN) dans les lymphocytes du sang périphérique humain qui
ont été exposés à des rayonnements ionisants. Cette analyse est destinée à être appliquée en cas d’exposition
accidentelle ou malveillante impliquant:
a) un nombre de personnes réduit afin de fournir des estimations de doses reçues par le corps entier d’un
individu; ou
b) dans une situation de tri d’urgence afin de fournir rapidement des estimations de doses moins précises
pour les individus d’une population qui peuvent être améliorées par une analyse plus précise à un
moment ultérieur.
L’analyse des CBMN est une autre technique cytogénétique qui est éventuellement plus simple et plus rapide
[1][2]
à mettre en œuvre que le dénombrement des dicentriques . Elle est également couramment employée
pour démontrer l’exposition aux agents génotoxiques autres que les rayonnements ionisants, qui ne sont pas
couverts par le présent document. Bien que la période de culture des échantillons de sang soit légèrement
plus longue que pour les dicentriques, le dénombrement des micronoyaux (MN) dans les lymphocytes
binucléés est plus aisé.
Comme pour le dénombrement des dicentriques, l’analyse des CBMN a été adaptée pour le tri en urgence en
cas d’incident nucléaire ou radiologique impliquant de très nombreuses personnes. Le volume de sang exigé
pour disposer d’un nombre suffisant de cellules binucléées (BNC) dénombrables est similaire à celui exigé
pour le dénombrement des dicentriques. Là aussi, la rapidité de comptage des MN compense l’allongement de
la période de culture. Toutefois, il faut tenir compte du fait que des facteurs tels que l’âge, le sexe, le régime
alimentaire et les mutagènes environnementaux peuvent avoir une influence sur les résultats, en particulier
[3][4][5]
après une exposition à de faibles doses . En outre, l’analyse des CBMN peut être réalisée de manière
automatisée à l’aide de diverses technologies cytométriques, mais celles-ci sortent du domaine d’application
du présent document.
Le présent document fournit des lignes directrices pour l’estimation dosimétrique en utilisant des procédures
d’analyse des CBMN documentées et validées. L’estimation dosimétrique à l’aide de l’analyse CBMN est
pertinente pour la prise en charge médicale, la radioprotection, le suivi dosimétrique et les exigences
médico-légales. Le présent document est scindé en deux parties, selon l’utilisation de l’analyse des CBMN:
exposition aux rayonnements d’un petit nombre d’individus ou tri d’une population en cas d’événement
radiologique de grande ampleur.
Une partie de l’information contenue dans le présent document est incluse dans d’autres lignes directrices et
publications scientifiques internationales et principalement dans la série de rapports techniques de l’Agence
internationale de l’énergie atomique (AIEA) sur la dosimétrie biologique. Cependant, le présent document
développe et normalise l’assurance qualité et le contrôle qualité, les critères d’accréditation et l’évaluation
[6]
des performances. De manière générale, le présent document se conforme à l’ISO/IEC 17025 en portant
une attention particulière aux besoins spécifiques de la dosimétrie biologique. L’expression des incertitudes
[15]
dans les estimations de dose indiquées dans le présent document est en accord avec le Guide ISO/IEC 98-3
[7]
(anciennement GUM) et toutes les parties de l’ISO 5725 .

vii
Norme internationale ISO 17099:2024(fr)
Radioprotection — Critères de performance pour les
laboratoires pratiquant la dosimétrie biologique par l’analyse
des micronoyaux par blocage de la cytodiérèse (CBMN) dans
les lymphocytes du sang périphérique
1 Domaine d’application
Le présent document fournit des recommandations relatives:
a) à la confidentialité des informations personnelles pour le demandeur et le laboratoire;
b) aux exigences de sécurité relatives aux laboratoires;
c) aux sources d’étalonnage et aux gammes de doses d’étalonnage utiles pour établir les courbes dose-effet
de référence qui contribuent à l’estimation de dose à partir des résultats de l’analyse des CBMN et à la
limite de détection;
d) au prélèvement, à la mise en culture, au recueil des cellules cultivées et à la préparation des échantillons
de sang pour le dénombrement par analyse des CBMN;
e) aux résultats de dénombrement;
f) à la conversion de la fréquence des micronoyaux dans les BNC en estimation de dose absorbée;
g) à la présentation des résultats;
h) à l’assurance qualité et au contrôle qualité;
i) aux annexes informatives contenant des exemples d’instructions d’utilisation, de questionnaire,
de tableau de dénombrement au microscope et de rapport.
Le présent document exclut les méthodes de dénombrement automatisé des CBMN.
2 Références normatives
Le présent document ne contient aucune référence normative.
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en normalisation,
consultables aux adresses suivantes:
ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https:// www .iso .org/ obp
IEC Electropedia: disponible à l’adresse https:// www .electropedia .org/
3.1
fréquence de base
taux de base
fréquence spontanée (ou nombre) de MN dans les BNC dénombrées sur des échantillons ou des individus
témoins qui ne sont pas anormalement exposés à des génotoxines, notamment à des radiations ionisantes

3.2
cellules binucléées
BNC
cellules ayant effectué une division nucléaire après une stimulation mitogénique, mais dont la cytodiérèse
(3.6) a été bloquée, et qui constituent le type de cellule dans lequel les micronoyaux (3.9) sont dénombrés
dans l’analyse des CBMN
Note 1 à l'article: Ces cellules sont regroupées dans un milieu de culture contenant de la cytochalasine B qui est
un inhibiteur de la cytodiérèse.
3.3
chromosome
structure, constituée de pelotes d’ADN et de protéines porteuses de l’information génétique, qui se condense
pendant la division nucléaire pour former des éléments de forme caractéristique
3.4
intervalle de confiance
intervalle statistique autour d’une quantité estimée à l’intérieur de laquelle la valeur de la quantité
est attendue avec une certaine probabilité spécifiée
3.5
cytochalasine B
cytoB
réactif utilisé pour bloquer la cytodiérèse (3.6) pendant la division cellulaire et permettant d’identifier
les cellules ayant effectué une seule division comme des cellules binucléées
3.6
cytodiérèse
processus physique de division cellulaire, qui divise le cytoplasme d’une cellule mère en deux cellules filles
3.7
dicentrique
chromosome (3.3) aberrant portant deux centromères résultant de la jonction de morceaux de
deux chromosomes (3.3) cassés
Note 1 à l'article: Il est en général accompagné d’un fragment acentrique.
3.8
transfert linéique d’énergie
TLE
quotient dE/dl, défini par la Commission internationale des unités et mesures radiologiques (ICRU) comme
l’énergie moyenne (dE) localement déposée dans le milieu par une particule chargée, par unité de longueur
de la trajectoire parcourue (dl)
3.9
micronoyau
MN
petit noyau formé au cours de la division nucléaire et de la ségrégation des chromosomes (3.3) lors de
l’anaphase/télophase de la mitose, à partir de chromosomes entiers ou de fragments de chromosomes (3.3)
acentriques retardataires
Note 1 à l'article: Plus de 90 % des micronoyaux radio-induits résultent de fragments de chromosomes acentriques
retardataires.
3.10
non réfringent
processus par lequel les matériaux n’ont pas la capacité de réfracter ou de diffuser la lumière
3.11
fidélité
dispersion des mesures par rapport à une valeur moyenne ou une tendance centrale

3.12
assurance qualité
actions planifiées et systématiques nécessaires pour attester qu’un processus, une mesure ou un service a
satisfait aux exigences de qualité définies
3.13
contrôle qualité
partie de l’assurance de la qualité (3.12) qui a pour objectif de vérifier que les systèmes et les principes
correspondent aux exigences prédéfinies
3.14
laboratoire de service
laboratoire pratiquant des expertises par dosimétrie biologique
4 Méthodologie d’analyse des CBMN utilisée dans le présent document
4.1 Généralités
Dans le présent document, la fréquence des MN dans des cultures de lymphocytes humains dont la
cytodiérèse a été bloquée, dénombrés par microscopie, est utilisée pour l’estimation de dose après une
exposition suspectée à des rayonnements ionisants.
Les lymphocytes sont mis en culture par une méthode qui permet d’identifier, par leur aspect binucléé, les
cellules dont la cytodiérèse a été bloquée et qui ont effectué une seule division cellulaire. Cette méthode
exige du sang total ou des lymphocytes isolés, incubés dans un milieu de culture contenant un mitogène
permettant le dénombrement des MN dans les BNC de première génération. Un agent de blocage de la
cytodiérèse, la cytochalasine B, est ajouté au moins 6 h avant le début de la première mitose, c’est-à-dire
environ 24 h après le début de la culture, afin de bloquer la division des lymphocytes lors de la phase des
BNC, après la fin de la division nucléaire. La durée de la culture et la période d’incubation de l’agent bloquant
sont optimisées pour assurer une fréquence adaptée de cellules binucléées.
Les BNC sont recueillies par centrifugation, placées dans une solution hypotonique et fixées dans un mélange
de méthanol et d’acide acétique. Les cellules fixées sont étalées sur des lames de microscope et colorées. Dans
le cas des lymphocytes isolés, il est également acceptable d’effectuer une cytocentrifugation des cellules sur
lames, suivie d’un séchage à l’air, d’une fixation au méthanol et d’une coloration. Il convient que le laboratoire
d’analyse des CBMN produise une documentation détaillant le protocole suivi pour la culture des cellules, le
recueil des BNC et leur coloration.
Les lames de microscope portant les cellules colorées sont scrutées afin d’identifier les BNC adéquates. La
fréquence des MN dénombrés dans un nombre approprié de BNC est convertie en une estimation de dose de
rayonnement par référence à des données de calibration.
4.2 Demandes d’analyse et prélèvement de sang
Selon la réglementation nationale, il convient que la demande d’analyse soit normalement formulée par un
médecin représentant le patient ou elle pourrait également être demandée par une autre autorité dans un
cadre légal. Dans tous les cas où cela s’avère possible, le prélèvement de sang pour l’analyse des MN doit
être effectué avec le consentement éclairé du patient. Le responsable du laboratoire, en fonction de la
réglementation nationale, peut être tenu de garder une trace du consentement éclairé du patient.
L’équipe médicale (par exemple médecin, infirmière, etc.) est tenue de programmer le prélèvement de sang
et l’expédition de manière à garantir que le laboratoire reçoive l’échantillon sanguin dans les meilleures
conditions possible (voir 13.2.4). Le but est d’éviter d’avoir à laisser l’échantillon de sang au repos pendant
plusieurs heures après le prélèvement et avant la prise en charge de l’échantillon pour le transport (voir
Article 5 pour plus de détails).

5 Responsabilité du demandeur
Cet article inclut des points qui ne sont pas contrôlés par le laboratoire de service. Avant le prélèvement
de sang, il convient que le demandeur et le laboratoire de service aient une première discussion pour
coordonner le prélèvement et l’expédition des échantillons. Il convient d’expliquer au demandeur les
exigences spécifiques concernant le prélèvement et l’expédition des échantillons et de lui communiquer
le délai approximatif de livraison du ou des résultats d’analyse. Il convient de transmettre au demandeur
une fiche d’instructions normale (représentée à l’Annexe B) expliquant les exigences. Les exigences sont les
suivantes:
1)
a) le sang doit être prélevé à l’aide de tubes de type Vacutainer® contenant de l’héparine de lithium ou de
sodium comme anticoagulant et il convient que les tubes de type Vacutainer® soient fournis ou spécifiés
par le laboratoire de service;
b) le sang doit être prélevé (idéalement 5 ml environ), étiqueté de façon fiable et sans ambiguïté, conservé
à température ambiante (environ 20 °C) et envoyé au laboratoire de service dès que possible;
c) des précautions doivent être prises pour assurer l’intégrité du conteneur de transport afin d’éviter
tout déversement pendant l’expédition. Les échantillons de sang doivent être conservés à température
ambiante pendant l’expédition, c’est-à-dire de 11 °C à 30 °C. Un enregistreur de la température doit être
inclus pour s’assurer que la température est contrôlée au cours de l’expédition. L’emballage et l’étiquetage
doivent être conformes aux réglementations nationales et internationales. En cas de transport aérien,
un dosimètre physique doit être inclus pour vérifier si l’échantillon a été irradié pendant le transit;
d) le questionnaire (voir Annexe C) remis par le laboratoire de service doit être rempli et retourné avant le
début de la culture de sang;
e) le laboratoire de service doit être alerté en cas de contamination biologique des échantillons et/
ou d’échantillons infectieux, de sorte qu’il puisse prendre des précautions supplémentaires lors de
la manipulation des échantillons.
6 Responsabilité du laboratoire
6.1 Mise en place et maintenance du programme d’assurance qualité
Le laboratoire de service doit établir et tenir à jour un programme d’assurance qualité (voir Article 13) qui
couvre tous les aspects du service. Le programme AQ du laboratoire doit porter sur les points suivants:
a) il doit inclure des contrôles internes périodiques du fonctionnement de l’équipement, de l’adéquation
des réactifs, et différents contrôles de performance, c’est-à-dire des exercices de comparaison
intralaboratoire, des qualifications du manipulateur, le protocole expérimental, le dénombrement, les
estimations de dose, la génération de rapports, etc.;
b) il doit inclure des contrôles externes périodiques du fonctionnement du laboratoire. Les audits externes
doivent inclure une revue de la documentation du laboratoire de service décrivant le fonctionnement
de l’équipement, de l’adéquation des réactifs et des différents contrôles de performance, c’est-à-dire
exercices de comparaisons interlaboratoires, qualifications du manipulateur, intégrité lors du transport
des prélèvements, etc.
Cette information est donnée à l'intention des utilisateurs du
1)  Vacutainer est un exemple de produit disponible dans le commerce.
présent document et ne signifie nullement que l'ISO approuve ou recommande l'emploi exclusif du produit ainsi désigné. Des produits équivalents peuvent être
utilisés s'il est démontré qu'ils aboutissent aux mêmes résultats.

6.2 Responsabilité pendant le service
Le laboratoire de service doit établir les recommandations, les procédures et la présentation en temps
opportun des résultats nécessaires pour fournir une estimation dosimétrique par l’analyse des CBMN
en réponse à une demande de service. Les activités de service doivent porter sur les points suivants:
a) le laboratoire de service doit avoir une documentation, revue et signée par un expert qualifié, c’est-à-dire
un radiobiologiste du laboratoire de service ou équivalent, qui comporte les informations suivantes:
1) une fiche d’instructions à envoyer au demandeur, décrivant les procédures d’expédition
(voir Annexe B);
2) un questionnaire qui doit permettre de recueillir le consentement du patient et toutes les
informations disponibles concernant le patient et le scénario d’exposition (voir Annexe C);
3) les procédures étape par étape pour le traitement de l’échantillon de sang de sa réception jusqu’à la
fourniture de la dose;
b) le laboratoire de service n’est pas responsable du transport des échantillons, mais il convient toutefois
qu’il donne des conseils concernant le transfert des échantillons. Si cela est exigé, un kit permettant
le prélèvement d’au moins 5 ml de sang total dans des tubes contenant de l’héparine de lithium ou de
sodium comme anticoagulant doit être envoyé au demandeur, avec un emballage correctement étiqueté
et adressé pour le retour de l’échantillon au laboratoire de service. L’emballage doit être conforme
aux réglementations nationales et/ou internationales pour le transfert d’échantillons biologiques
potentiellement infectieux (voir 13.2.4);
c) dès sa réception, le traitement de l’échantillon de sang doit comporter les étapes suivantes:
1) documenter la réception de l’échantillon de sang (date, heure, nom de la personne qui réceptionne
le colis);
2) vérifier la conformité de l’échantillon (volume de sang, intégrité des tubes);
3) apposer un code unique sur l’échantillon de sang;
4) conserver les échantillons à température ambiante et enregistrer le lieu de conservation jusqu’à la
mise en culture;
5) faire des cultures en double dès que possible et enregistrer la date, l’heure et le nom du manipulateur;
6) consigner tous les réactifs utilisés pour la culture, en indiquant les numéros de lots correspondants
et les dates de péremption;
7) décrire l’ajout des réactifs et la fin de la culture (date, heure et nom du manipulateur);
8) décrire la conservation à court et long termes de l’échantillon jusqu’à la préparation des lames;
9) enregistrer les codes des lames, le nombre de lames et le lieu de conservation;
10) enregistrer les résultats de dénombrement obtenus;
11) conserver les lames et les documents concernant l’analyse dans un endroit adapté pour une possible
nouvelle évaluation médico-légale du cas;
d) le laboratoire de service doit interpréter les résultats et préparer des rapports (voir Annexe D);
e) le laboratoire de service doit entretenir un dialogue avec le demandeur et communiquer les résultats au
demandeur.
7 Confidentialité des informations personnelles
7.1 Vue d’ensemble
Les investigations par la méthode de dosimétrie biologique pratiquées par un laboratoire de service doivent
être effectuées conformément aux réglementations nationales concernant la confidentialité. Cette exigence
inclurait normalement la confidentialité de toutes les informations sur le patient, notamment son identité,
ses données médicales, etc. De plus, il convient de maintenir la confidentialité commerciale de l’employeur du
patient et de toutes les autres organisations impliquées dans un accident/incident radiologique ou nucléaire.
Cette exigence s’étend:
a) aux communications écrites, électroniques ou orales entre le laboratoire et la personne/l’organisation
demandant l’analyse et recevant le rapport; et
b) à la protection des informations confidentielles détenues au sein de l’organisation à laquelle appartient
le laboratoire de service.
7.2 Applications du principe de confidentialité
7.2.1 Délégation de responsabilités au sein du laboratoire
Le responsable du laboratoire peut autoriser un nombre limité de membres du laboratoire à manipuler
des documents en relation avec l’analyse. Les personnes ayant cette autorisation doivent avoir signé
un engagement de confidentialité concernant leurs activités au sein du laboratoire.
Le responsable du laboratoire doit conserver les engagements de confidentialité signés et assurer la sécurité
de tous les documents confidentiels.
7.2.2 Demandes d’analyses
Selon la réglementation nationale, il convient que la demande d’analyse soit normalement formulée par un
médecin représentant le patient ou elle pourrait également être demandée par une autre autorité dans un
cadre légal. Dans tous les cas, le prélèvement de sang pour l’analyse des CBMN doit être effectué avec le
consentement éclairé du patient. Le responsable du laboratoire, en fonction de la réglementation nationale,
peut être tenu de garder une trace du consentement éclairé du patient.
7.2.3 Transmission d’informations confidentielles
Quel que soit le moyen de communication choisi, la confidentialité doit être assurée pendant l’échange
d’informations et dans les rapports entre le laboratoire de service et le demandeur de l’analyse.
Le responsable du laboratoire doit définir tous les moyens pour transmettre les informations en garantissant
leur confidentialité.
7.2.4 Anonymat des échantillons
Le responsable du laboratoire doit avoir établi des protocoles pour préserver l’anonymat des échantillons.
Pour éviter l’identification du patient tout en garantissant la traçabilité de l’analyse, il convient de coder les
échantillons de sang dès leur arrivée dans le laboratoire de service. Il convient que le codage soit effectué de
façon à éviter toute ambiguïté selon une procédure normale. Le même code à utiliser pour toutes les étapes
d’analyse. Le code est attribué par une personne autorisée, définie en 7.2. Le décodage, l’interprétation des
résultats et la rédaction du rapport sont également à effectuer par une personne autorisée.
7.2.5 Présentation des résultats
Le rapport final contenant les résultats et leur interprétation (si nécessaire) est communiqué au demandeur
de l’analyse. Selon la réglementation nationale, une copie peut, avec l’accord approprié, être transmise à
d’autres personnes responsables.

7.2.6 Stockage
Le laboratoire doit conserver les lames et les culots de cellules cultivées afin de faciliter l’examen/analyse
par un expert externe ou un autre laboratoire en cas de litige concernant l’analyse.
Le responsable du laboratoire doit définir la méthode de fixation des cellules et des lames, ainsi que
la manière dont les données et les résultats seront stockés. La durée de conservation est définie par
le responsable du laboratoire selon la réglementation/les politiques nationales pour une possible nouvelle
évaluation médico-légale du cas. Tous les enregistrements du laboratoire en relation avec une expertise
qui pourraient permettre l’identification du pat
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