Soil quality — Determination of abundance and activity of soil microflora using respiration curves

1 Scope This International Standard specifies a test method for determining the activity of active aerobic, heterotrophic microbial biomass in soils. This method is applicable to the monitoring of soil quality and to the evaluation of the ecotoxic potential of soils and soil materials. It is also applicable for soils sampled along contamination gradients in the field and to soils that are contaminated experimentally in the field or in the laboratory.

Qualité du sol — Détermination de l'abondance et de l'activité de la microflore du sol à l'aide de courbes de respiration

1 Domaine d'application La présente Norme internationale spécifie une méthode d'essai pour déterminer l'activité de la biomasse microbienne hétérotrophe aérobie active dans les sols. Cette méthode s'applique à la surveillance de la qualité du sol et à l'évaluation du potentiel écotoxique des sols et des matériaux de type sol. Elle s'applique également aux sols prélevés le long de gradients de contamination sur le terrain et aux sols qui sont délibérément contaminés sur le terrain ou en laboratoire à des fins d'analyse.

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Publication Date
23-Sep-2012
Current Stage
9093 - International Standard confirmed
Completion Date
30-Mar-2023
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ISO 17155:2012 - Soil quality -- Determination of abundance and activity of soil microflora using respiration curves
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ISO 17155:2012 - Qualité du sol -- Détermination de l'abondance et de l'activité de la microflore du sol a l'aide de courbes de respiration
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Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 17155
Second edition
2012-10-01
Soil quality — Determination of
abundance and activity of soil microflora
using respiration curves
Qualité du sol — Détermination de l’abondance et de l’activité de la
microflore du sol à l’aide de courbes de respiration
Reference number
ISO 17155:2012(E)
©
ISO 2012

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ISO 17155:2012(E)
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All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means,
electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without permission in writing from either ISO at the address below or ISO’s
member body in the country of the requester.
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Published in Switzerland
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ISO 17155:2012(E)
Contents Page
Foreword .iv
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
5 Reagents . 2
6 Apparatus . 2
7 Sampling . 3
7.1 Sample quantities . 3
7.2 Sampling and storage . 3
7.3 Soil sample characteristics . 4
8 Procedure . 4
8.1 Test . 4
8.2 Toxicity testing . 4
9 Calculation . 5
9.1 Microbial parameters . 5
9.2 Interpretation of data . 6
10 Test report . 8
Annex A (informative) Results of a laboratory ring test carried out in Germany . 9
Annex B (informative) Comparison of microbial biomass determination by respiration curve
[1]
measurement (this International Standard) and substrate-induced respiration (ISO 14240-1 ) 11
Bibliography .13
© ISO 2012 – All rights reserved iii

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ISO 17155:2012(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International
Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 17155 was prepared by Technical Committee ISO/TC 190, Soil quality, Subcommittee SC 4, Biological methods.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 17155:2002), which has been technically revised.
iv © ISO 2012 – All rights reserved

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INTERNATIONAL STANDARD ISO 17155:2012(E)
Soil quality — Determination of abundance and activity of soil
microflora using respiration curves
1 Scope
This International Standard specifies a test method for determining the activity of active aerobic, heterotrophic
microbial biomass in soils. This method is applicable to the monitoring of soil quality and to the evaluation of
the ecotoxic potential of soils and soil materials. It is also applicable for soils sampled along contamination
gradients in the field and to soils that are contaminated experimentally in the field or in the laboratory.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced document
(including any amendments) applies.
ISO 10381-6, Soil quality — Sampling — Part 6: Guidance on the collection, handling and storage of soil under
aerobic conditions for the assessment of microbiological processes, biomass and diversity in the laboratory
ISO 10390, Soil quality — Determination of pH
ISO 10694, Soil quality — Determination of organic and total carbon after dry combustion (elementary analysis)
ISO 11277, Soil quality — Determination of particle size distribution in mineral soil material — Method by
sieving and sedimentation
ISO 11465, Soil quality — Determination of dry matter and water content on a mass basis — Gravimetric method
ISO 14238, Soil quality — Biological methods — Determination of nitrogen mineralization and nitrification in
soils and the influence of chemicals on these processes
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
basal respiration rate
R
B
constant mass of CO released or mass of O consumed per unit mass of soil per unit time without substrate addition
2 2
NOTE See Figure 1 for a typical basal respiration curve.
3.2
substrate-induced respiration rate
R
S
constant mass of CO released or mass of O consumed per unit mass of soil per unit time shortly after
2 2
addition of a carbon substrate
NOTE 1 See Figure 1 for a typical substrate-induced respiration curve.
NOTE 2 If glucose is used as a carbon substrate, microbial biomass can be determined from the substrate-induced
[1]
respiration rate (see ISO 14240-1 ).
© ISO 2012 – All rights reserved 1

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ISO 17155:2012(E)
3.3
respiratory activation quotient
Q
R
basal respiration rate divided by substrate-induced respiration rate
R
B
Q = (1)
R
R
S
3.4
specific growth rate
µ
exponent representing respiration rate per unit of time during the exponential phase of growth
NOTE See Equation (3).
3.5
time to the peak maximum
t
peakmax
time from addition of substrate to the maximum respiration rate
NOTE 1 See Figure 1.
NOTE 2 The time to the peak maximum also reflects the viability of the growing organisms.
3.6
cumulative CO evolution or O consumption
2 2
C
R
total area bounded by the line of the soil respiration rate curve to the time axis from time of the addition of
substrate to the time of peak maximum (t )
peakmax
NOTE See Figure 1.
3.7
soil material
material composed of excavated soil, dredged materials, manufactured soils, treated soils or fill materials
4 Principle
The CO production or O consumption (respiration rate) from unamended soils as well as the decomposition of
2 2
an easily degraded substrate (glucose + ammonium + phosphate) is monitored regularly (e.g. every hour). From
the CO production or O consumption data, the different microbial parameters (basal respiration, substrate-
2 2
induced respiration, respiratory activation quotient, t , C ) can be calculated.
peakmax R
5 Reagents
5.1 Glucose, C H O .
6 12 6
5.2 Potassium dihydrogenphosphate, KH PO .
2 4
5.3 Diammonium sulfate, (NH ) SO .
4 2 4
5.4 Substrate, consisting of a mixture of 80 g of glucose (5.1), 13 g of diammonium sulfate (5.3), and 2 g of
KH PO (5.2), which is thoroughly ground and mixed in a mortar.
2 4
6 Apparatus
Ordinary laboratory equipment and 6.1.
2 © ISO 2012 – All rights reserved

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ISO 17155:2012(E)
6.1 Respirometer for continuous measurement of CO evolution or O consumption, maintained at a
2 2
[2]
constant temperature (preferably 20 °C). Suitable examples of equipment are given in ISO 16072.
Key
X t h time
−1 −1
R
Y µg g h CO or O respiration rates
dm 2 2
C cumulative CO evolution or O consumption
R 2 2
dp/dt rate of product formation after substrate addition
K
respiration rate of K-strategist at the time of substrate addition
r respiration rate of r-strategist at the time of substrate addition
t time to the peak maximum
peakmax
µ
specific growth rate
1 R substrate-induced respiration R = K + r (at t = 0)
S S
2 R basal respiration
B
3 substrate addition
Figure 1 — Soil respiration rate before and after addition of an easily degraded substrate
7 Sampling
7.1 Sample quantities
Choose the size of the soil samples taking into account the apparatus (6.1) used, the organic matter content of
the samples (7.3) and the soil needed for sample characterization (7.3). It is recommended that at least three
replicates per sample be measured.
7.2 Sampling and storage
The recommendations in ISO 10381-6 for collection, handling and storage of soil samples shall be followed.
© ISO 2012 – All rights reserved 3

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ISO 17155:2012(E)
7.3 Soil sample characteristics
Soil samples generating soil respiration curves can be obtained from mineral, organic, polluted, and unpolluted
soils. Determine the following characteristics for each soil sample:
— particle size distribution in accordance with ISO 11277;
— water content in accordance with ISO 11465;
— water-holding capacity in accordance with Annex A of ISO 14238:2012;
— pH in accordance with ISO 10390;
— organic matter content in accordance with ISO 10694.
8 Procedure
8.1 Test
Pre-incubate moist soil samples (preferably 40 % to 60 % of maximum water holding capacity or 0,01 MPa to
0,03 MPa suction pressure) at 20 °C for 3 d to 4 d before the beginning of the measurement. Measure the basal
respiration of the sub-samples first. Measure the respiration rates until constant rates are obtained.
After measuring the basal respiration, add 10 mg of the substrate (5.4) per gram soil (dry mass) and mix
homogeneously with a spatula into the soil samples. If the organic matter content is >5 %, add 0,2 g of the
substrate per gram humus (see References [4][5]).
8.2 Toxicity testing
In principle, testing the influence of chemicals should also be possible with the method. Up to the time of
publication, there is only scarce experience available in the literature.
To determine the influence of chemicals on the abundance and activity of soil microorganisms, a soil with low
content of organic carbon (mass fraction between 0,5 % and 1,5 %). Particles of size <20 µm should not exceed
20 % mass fraction in order to provide a high degree of bioavailablity.
The effect of chemicals on the soil microbial activity can be determined as follows. Using a range-finding test,
determine the concentration range in which chemicals would be likely to have an effect on this activity. Test a
single, microbiologically active soil at five concentrations in a logarithmic series, including a blank control, in
triplicate (e.g. 0, 1, 3,2, 10, 32, and 100 times the lowest concentration). Use the test procedure specified in 8.1.
Using this simple test design, dose–response relationships can be established
Before the start of the test, the test chemical may be added to the soil in one of the following ways:
— in aqueous solution (depending on the solubility in water);
— in an organic solution using a water-miscible solvent (depending on the solubility in the solvent);
— mixed with a solid, e.g. coated on quartz sand (prior to mixing with the soil).
If the test chemical is added in the form of an organic solution, keep the amount of the solvent to the minimum
(<1 %) necessary for the application of the compound. Furthermore, take into account the possible toxicity (e.g.
by including a further control for testing the toxicity of the solvent) and biodegradability of the solvent used.
NOTE Long-term effects of chemicals can be detected by using different incubation times (weeks or months). A
comparison of C (see 3.6) of the unamended control and the chemical-treated soil samples has been shown to be very
R
sensitive to chemical influences.
4 © ISO 2012 – All rights reserved

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ISO 17155:2012(E)
9 Calculation
9.1 Microbial parameters
9.1.1 Basal respiration
Calculate the basal respiration, R , as the average of the hourly respiration rates during a stable period.
B
9.1.2 Substrate-induced respiration
Calculate the substrate-induced respiration, R , as the average of the values shortly after the substrate
S
addition when the respiration is fairly constant. A minimum of three hourly measurements should be used to
calculate the average.
Alternatively, R can be calculated according to Equation (2):
S
Rr=+K (2)
S
where
R is the substrate-induced respiration;
S
r is the respiration rate of r-strategist;
K is the respiration rate of K-strategist immediately after substrate addition.
As proposed in Reference [14] (see Figure 1), the respiration of the non-growing microorganisms, K, and the
growing microorganisms, r, is derived by curve fitting using Equation (3):
dp
= rtexp μ + K (3)
()
dt
where
dp
is the rate of product formation after substrate addition;
dt
p is the accumulated amount of CO evolved or O consumed in a dry mass of soil, in micrograms per
2 2
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 17155
Deuxième édition
2012-10-01
Qualité du sol — Détermination de
l’abondance et de l’activité de la microflore
du sol à l’aide de courbes de respiration
Soil quality — Determination of abundance and activity of soil microflora
using respiration curves
Numéro de référence
ISO 17155:2012(F)
©
ISO 2012

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ISO 17155:2012(F)
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2012
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quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l’accord écrit
de l’ISO à l’adresse ci-après ou du comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
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Publié en Suisse
ii © ISO 2012 – Tous droits réservés

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ISO 17155:2012(F)
Sommaire Page
Avant-propos .iv
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 2
5 Réactifs . 2
6 Appareillage . 3
7 Échantillonnage . 3
7.1 Quantités d’échantillons . 3
7.2 Échantillonnage et conservation . 4
7.3 Caractéristiques des échantillons de sol . 4
8 Mode opératoire . 4
8.1 Essai . 4
8.2 Essais de toxicité . 4
9 Calcul . 5
9.1 Paramètres microbiens . 5
9.2 Interprétation des données . 6
10 Rapport d’essai . 8
Annexe A (informative) Résultats d’un essai interlaboratoires réalisé en Allemagne .10
Annexe B (informative) Comparaison de la détermination de la biomasse microbienne sur la base des
mesurages de courbes de respiration (la présente Norme internationale) et de la respiration
[1]
induite par le substrat (ISO 14240-1 ) .12
Bibliographie .14
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ISO 17155:2012(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales,
en liaison avec l’ISO participent également aux travaux. L’ISO collabore étroitement avec la Commission
électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI, Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d’élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication
comme Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des comités membres votants.
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de droits
de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir
identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L’ISO 17155 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 190, Qualité du sol, sous-comité SC 4,
Méthodes biologiques.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 17155:2002), qui a fait l’objet d’une
révision technique.
iv © ISO 2012 – Tous droits réservés

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NORME INTERNATIONALE ISO 17155:2012(F)
Qualité du sol — Détermination de l’abondance et de l’activité
de la microflore du sol à l’aide de courbes de respiration
1 Domaine d’application
La présente Norme internationale spécifie une méthode d’essai pour déterminer l’activité de la biomasse
microbienne hétérotrophe aérobie active dans les sols. Cette méthode s’applique à la surveillance de la qualité
du sol et à l’évaluation du potentiel écotoxique des sols et des matériaux de type sol. Elle s’applique également
aux sols prélevés le long de gradients de contamination sur le terrain et aux sols qui sont délibérément
contaminés sur le terrain ou en laboratoire à des fins d’analyse.
2 Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l’application du présent document. Pour les
références datées, seule l’édition citée s’applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document de référence s’applique (y compris les éventuels amendements).
ISO 10381-6, Qualité du sol — Échantillonnage — Partie 6: Lignes directrices pour la collecte, la manipulation
et la conservation, dans des conditions aérobies, de sols destinés à l’évaluation en laboratoire des processus,
de la biomasse et de la diversité microbiens
ISO 10390, Qualité du sol — Détermination du pH
ISO 10694, Qualité du sol — Dosage du carbone organique et du carbone total après combustion sèche
(analyse élémentaire)
ISO 11277, Qualité du sol — Détermination de la répartition granulométrique de la matière minérale des sols —
Méthode par tamisage et sédimentation
ISO 11465, Qualité du sol — Détermination de la teneur pondérale en matière sèche et en eau — Méthode
gravimétrique
ISO 14238, Qualité du sol — Méthodes biologiques — Détermination de la minéralisation de l’azote et de la
nitrification dans les sols, et de l’influence des produits chimiques sur ces processus
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
3.1
taux de respiration basale
R
B
masse constante de CO produite ou masse d’O consommée par unité de masse de sol par unité de temps
2 2
sans ajout de substrat
NOTE Voir Figure 1 pour une courbe type de respiration basale.
3.2
taux de respiration induite par le substrat
R
S
masse constante de CO produite ou masse d’O consommée par unité de masse de sol par unité de temps
2 2
peu après l’ajout d’un substrat carboné
NOTE 1 Voir Figure 1 pour une courbe type de respiration induite par le substrat.
© ISO 2012 – Tous droits réservés 1

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ISO 17155:2012(F)
NOTE 2 Si le substrat carboné utilisé est le glucose, la biomasse microbienne peut être déterminée à partir du taux de
[1]
respiration induite par le substrat (voir l’ISO 14240-1 ).
3.3
quotient d’activation respiratoire
Q
R
taux de respiration basale divisé par le taux de respiration induite par le substrat
R
B
Q = (1)
R
R
S
3.4
taux de croissance spécifique
µ
exposant représentant le taux de respiration par unité de temps pendant la phase de croissance exponentielle
NOTE Voir Équation (3).
3.5
temps jusqu’au pic maximal
t
picmax
temps entre l’ajout du substrat et le taux de respiration maximal
NOTE 1 Voir Figure 1.
NOTE 2 Le temps jusqu’au pic maximal reflète également la viabilité des organismes en croissance.
3.6
dégagement de CO ou consommation d’O cumulé(e)
2 2
C
R
zone totale délimitée par la courbe du taux de respiration du sol et l’axe du temps entre le temps d’ajout du
substrat et le temps jusqu’au pic maximal (t )
picmax
NOTE Voir Figure 1.
3.7
matériau de type sol
matériau constitué par de la terre excavée, des matériaux de dragage, des matériaux artificiels, des sols traités
et des matériaux de remblayage
4 Principe
La production de CO ou la consommation d’O (taux de respiration) de sols non amendés, ainsi que la
2 2
décomposition d’un substrat facilement dégradable (glucose + ammonium + phosphate), est surveillée de
façon régulière (par exemple toutes les heures). Les différents paramètres microbiens (respiration basale,
respiration induite par le substrat, quotient d’activation respiratoire, t , C ) peuvent être calculés à partir
picmax R
des données de production de CO ou de consommation d’O .
2 2
5 Réactifs
5.1 Glucose, C H O .
6 12 6
5.2 Dihydrogénophosphate de potassium, KH PO .
2 4
5.3 Sulfate de diammonium, (NH ) SO .
4 2 4
5.4 Substrat, constitué d’un mélange de 80 g de glucose (5.1), 13 g de sulfate de diammonium (5.3) et 2 g
de KH PO (5.2) soigneusement broyés et mélangés dans un mortier.
2 4
2 © ISO 2012 – Tous droits réservés

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ISO 17155:2012(F)
6 Appareillage
Matériel courant de laboratoire et 6.1.
6.1 Respiromètre pour le mesurage en continu du dégagement de CO ou de la consommation d’O ,
2 2
maintenu à une température constante (de préférence 20 °C). Des exemples de matériel approprié sont donnés
[2]
dans l’ISO 16072 .
Légende
X temps, t, en h
−1 −1
Y taux de respiration de CO ou d’O , R, en µg g h
2 2 ms
C dégagement de CO ou consommation d’O cumulé(e)
R 2 2
dp/dt vitesse de formation des produits après l’ajout du substrat
K taux de respiration des organismes développant une stratégie K au moment de l’ajout du substrat
r
taux de respiration des organismes développant une stratégie r au moment de l’ajout du substrat
t temps jusqu’au pic maximal
picmax
µ taux de croissance spécifique
1 respiration induite par le substrat, R = K + r (à t = 0)
S
2 respiration basale, R
B
3 ajout de substrat
Figure 1 — Taux de respiration du sol avant et après l’ajout d’un substrat facilement dégradable
7 Échantillonnage
7.1 Quantités d’échantillons
Choisir la taille des échantillons de sol en fonction de l’appareillage (6.1) utilisé, de la teneur en matière organique
des échantillons (7.3) et du sol nécessaire à la caractérisation des échantillons (7.3). Il est recommandé de
mesurer au moins trois réplicats par échantillon.
© ISO 2012 – Tous droits réservés 3

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ISO 17155:2012(F)
7.2 Échantillonnage et conservation
Les recommandations de l’ISO 10381-6 relatives à la collecte, à la manipulation et à la conservation des
échantillons de sol doivent être respectées.
7.3 Caractéristiques des échantillons de sol
Les échantillons de sol générant des courbes de respiration peuvent être obtenus à partir de sols minéraux,
de sols organiques, de sols pollués et de sols non pollués. Pour chaque échantillon de sol, déterminer les
caractéristiques suivantes:
— la répartition granulométrique, conformément à l’ISO 11277;
— la teneur en eau, conformément à l’ISO 11465;
— la capacité de rétention d’eau, conformément à l’ISO 14238:2012, Annexe A;
— le pH, conformément à l’ISO 10390;
— la teneur en matière organique, conformément à l’ISO 10694.
8 Mode opératoire
8.1 Essai
Trois à quatre jours avant de commencer les mesurages, pré-incuber les échantillons de sol humides (de
préférence 40 % à 60 % de la capacité de rétention d’eau maximale ou une pression de succion comprise entre
0,01 MPa et 0,03 Mpa) à 20 °C. Mesurer la respiration basale des sous-échantillons en premier. Mesurer les
taux de respiration jusqu’à obtention de taux constants.
Après avoir mesuré la respiration basale, ajouter 10 mg du substrat (5.4) par gramme de sol (masse sèche)
dans les échantillons de sol et homogénéiser en mélangeant à l’aide d’une spatule. Si la teneur en matière
organique est > 5 %, ajouter 0,2 g du substrat par gramme de matière organique (voir Références [4] et [5]).
8.2 Essais de toxicité
En principe, il convient de pouvoir aussi appliquer la méthode pour déterminer l’influence des produits
chimiques. Jusqu’à la date de publication, très peu de documents ont été publiés sur ce type d’essais.
Pour déterminer l’effet des substances chimiques sur l’abondance et l’activité des micro-organismes du sol,
utiliser un sol avec une faible teneur en carbone organique (fraction massique comprise entre 0,5 % et 1,5 %).
Il convient que les particules de taille < 20 µm n’excèdent pas 20 % (fraction massique) afin de fournir un haut
degré de biodisponibilité.
L’effet des substances chimiques sur l’activité microbienne du sol peut être déterminé comme suit. Effectuer
un essai préliminaire pour déterminer le domaine de concentration dans lequel les substances chimiques sont
susceptibles d’avoir un effet sur l’activité en question. Effectuer un essai sur un seul sol microbiologiquement
actif avec une progression logarithmique de cinq concentrations, y compris un témoin à blanc, en triple (par
exemple 0, 1, 3,2, 10, 32 et 100 fois la concentration la plus faible). Utiliser le mode opératoire d’essai spécifié
en 8.1. Les relations dose-réponse peuvent être établies en utilisant ce protocole d’essai simple.
Avant le début de l’essai, la substance chimique d’essai peut être ajoutée au sol sous l’une des formes suivantes:
— en solution aqueuse (en fonction de la solubilité dans l’eau);
— en solution organique en utilisant un solvant miscible dans l’eau (en fonction de la solubilité dans le solvant);
— mélangée à un solide, par exemple enrobant du sable de quartz (avant de mélanger avec le sol).
4 © ISO 2012 – Tous droits réservés

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ISO 17155:2012(F)
Si la substance chimique d’essai est ajoutée sous forme de solution organique, maintenir la quantité de solvant
au minimum (< 1 %) nécessaire à l’application du composé. Prendre en compte également l’éventuelle toxicité
(par exemple en incluant un échantillon témoin supplémentaire pour soumettre à essai la toxicité du solvant) et
la biodégradabilité du solvant utilisé.
NOTE Les effets à long terme des substances chimiques peuvent être détectés en utilisant différents temps
d’incubation (semaines ou mois). Une comparaison des C (voir 3.6) de l’échantillon témoin non amendé et des échantillons
R
de sol traités chimiquement a révélé une très grande sensibilité aux influences chimiques.
9 Calcul
9.1 Paramètres microbiens
9.1.1 Respiration basale
Calculer la respiration basale, R , comme la moyenne des taux de respiration horaires pendant une période stable.
B
9.1.2 Respiration induite par le substrat
Calculer la respiration induite par le substrat, R , comme la moyenne des valeurs peu après l’ajout du substrat
S
lorsque la respiration est relativement constante. Il convient d’effectuer au moins trois mesurages par heure
pour calculer la moyenne.
En variante, R peut être calculé en utilisant l’Équation (2):
S
Rr=+K (2)
S

R est la respiration induite par le substrat;
S
r est le taux de respiration des organismes développant une stratégie r;
K est le taux de respiration des organismes développant une stratégie K immédiatement après l’ajout
du substrat.
Comme cela est proposé dans la Référence [14] (voir Figure 1), la respiration des micro-organismes en non-
croissance, K, et des micro-organismes en croissance, r, est dérivée d’un ajustement de courbe à l’aide de
l’Équation (3):
dp
= rtexp μ + K (3)
()
dt

dp
est la vitesse de formation des produits après l’ajout du substrat;
dt
p
est la quantité accumulée de CO dégag
...

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