SIST ISO 4833:1997
(Main)Microbiology -- General guidance for the enumeration of micro-organisms -- Colony count technique at 30 degrees C
Microbiology -- General guidance for the enumeration of micro-organisms -- Colony count technique at 30 degrees C
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 4833:1978). It is intended to provide general guidance for the examination of products not dealt with by existing International Standards. These guidelines may not be appropriate for some products in every detail, and for some other products it may be necessary to use different methods. Gives references, and the definition of the term micro-organisms. Specifies principle, culture media and dilution fluid, apparatus and glassware, sampling, preparation of the test sample, procedure, expression of results and test report.
Microbiologie -- Directives générales pour le dénombrement des micro-organismes -- Méthode par comptage des colonies obtenues à 30 degrés C
La présente Norme internationale donne des directives générales pour le dénombrement des micro-organismes dans les produits destinés à la consommation humaine ou à l'alimentation animale, par comptage des colonies obtenues en milieu solide après incubation en aérobiose à 30 °C1).
Mikrobiologija - Splošno navodilo za ugotavljanje števila mikroorganizmov - Tehnika štetja kolonij pri 30 °C
General Information
Relations
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Standards Content (Sample)
ISO
INTERNATIONAL
STANDARD 4833
Second edition
1991-03-01
Microbiology - General guidance for the
enumeration of micro-organisms - Colony
count technique at 30 OC
Microbiologie - Directives g&Grales pour le dhombremenf des
micro-organismes - Methode par camptage des colonies obtenues h
30 “C
Reference number
ISO 4833:lQQl(E)
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 4833:1991(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide
federation of national Standards bodies (ISO member bodies). The work
of preparing International Standards is normally carried out through 1SO
technical committees. Esch member body interested in a subject for
which a technical committee has been established has the right to be
represented on that committee. International organizations, govern-
mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the
work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical
Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
Draft International Standards adopted by the technical committees are
circulated to the member bodies for voting. Publication as an Inter-
national Standard requires approval by at least 75 % of the member
bodies casting a vote.
International Standard ISO 4833 was prepared by Technical Committee
lSO/TC 34, Agricultural food products.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO
4833:1978), of which it constitutes a technical revision.
Annex A forms an integral part of this International Standard.
6 ISO 1991
All rights reserved. No part of this publication may be reproduced or utilized in any form
or by any means, electronie or mechanical, including photocopying and microfilm, without
Permission in writing from the publisher.
International Organization for Standardlzation
Case Postale 56 l CH-121 1 Geneve 20 l Swltzerland
Printed in Swltzerland
ii
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 4833:1991(E)
Introduction
This international Standard is intended to provide generai guidance for
the examination of products not dealt with by existing international
Standards and for reference for bodies preparing microbioiogicai meth-
ods of test for application to foods or to animai feeding stuffs. Because
of the iarge variety of products within this fieid of appiication, these
guideiines may not be appropriate for some products in every detail,
and for some other products it may be necessary to use different meth-
ods. Nevertheless, it is hoped that in all cases every attempt will be
made to apply the guidelines provided as far as possibie and that devi-
ations from them will only be made if absoiuteiy necessary for technicai
reasons.
When this International Standard is next reviewed, account will be taken
of all information then avaiiabie regarding the extent to which the
guidelines have been followed and the reasons for deviation from them
in the case of particuiar products.
The harmonization of test methods cannot be immediate, and for certain
groups of products International Standards and/or national Standards
may already exist that do not comply with these guidelines. In cases
where International Standards aiready exist for the product to be tested,
they shouid be foiiowed, but it is hoped that when such Standards are
reviewed they will be changed to comply with this International Standard
so that eventuaiiy the oniy remaining departures from these guidelines
will be those necessary for weil-established technical reasons.
. . .
Ill
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This page intentionaliy ieft blank
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ISO 4833:1991 (E)
INTERNATIONAL STANDARD
General guidance for the enumeration of
Microbiology -
- Colony count technique at 30 T
micro-organisms
micro-organisms: Bacteria, yeasts and mouids
1 Scope
growing aerobicaiiy under the test conditions speci-
fied in this international Standard.
This international Standard gives generai guideiines
for the enumeration of micro-organisms present in
products intended for human consumption or feed-
4 Prlnciple
ing of animais, by counting the colonies growing in
a solid medium after aerobic incubation at 30 OC.l)
4.1 Preparation of two poured piates, using a
specified cuiture medium, and using a specified
quantity of the test Sample if the initial product is
2 Normative references
liquid, or using a specified quantity of an initial sus-
Pension in the case of other products.
The foilowing Standards contain provisions which,
through reference in this text, constitute provisions Preparation of other pairs of poured plates, under
of this International Standard. At the time of publi- the Same conditions, using decimal diiutions of the
cation, the editions indicated were vaiid. All stan- test Sample or of the initial Suspension.
dards are subject to revision, and Parties to
agreements based on this International Standard
4.2 Aerobic incubation of the piates at 30 OC for
are encouraged to investigate the possibiiity of ap-
72 h.
plying the most recent editions of the Standards in-
dicated beiow. Members of IEC and ISO maintain
4.3 Caicuiation of the number of micro-organisms
registers of currently valid international Standards.
per miiiiiitre or per gram of Sample from the number
of colonies obtained in selected plates (see 10.1).
ISO 6887:1983, Microbiology - General guidance for
the prepara tion of dilutions for microbiological
5 Culture media and dilution fluid
examina Hon.
ISO 7218:1985, Microbiology - General guidance for 5.1 General
microbiological examinations.
For current laboratory practice, see ISO 7218.
3 Definition
5.2 Dilution fluid
See ISO 6887 and the specific international Standard
For the purposes of this international Standard, the
dealing with the product under examination.
following definition applies.
1) A temperature of 30 *C is that most free(uently used for the enumeration of total flora and this temperature has been
if for particular reasons another temperature is used, it should be indi-
adopted by ISO/TC 34 Subcommittee 9. However,
cated in the test report.
1
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 4833:1991 (E)
5.3 Plate count medium If not, before beginning the microbiological
examination, in Order to avoid any delay when
Composition pouring the medium, completely melt the me-
dium in a boiling water-bath, then cool it in the
tryptone
590 g
water-bath (6.5) set at 45 OC.
dehydrated yeast extract
2s g
6 Apparatus and glassware
anhydrous glucose
190 g
NOTE 1 acceptable alterna-
Disposable apparatus is an
agar 12 g to 18 g*)
tive to reusable glassware if it h as sui table specifications.
water 1000 ml
Usual microbiological laboratory equipment and, in
particular, the following.
Prepara tion
6.1 Apparatus for dry sterilization (oven) or wet
Dissolve the components or the dehydrated
sterilization (autoclave).
complete medium in the water, by heating if
necessary. Adjust the pH, if necessary, so that
See ISO 7218.
after sterilization it is 7,0 at 25 OC.
6.2 Incubator, capable of operating at 30 “C -t- 1 “C.
Dispense the medium into test tubes (6.8), in -
quantities of 15 ml per tube, or into flasks or
bottles (6.8) of capacity not greater than 500 ml,
6.3 Petri dishes, made of glass or plastic, of diam-
in quantities of approximately half the volume of
eter 90 mm to 100 mm.
the Container.
6.4 Total dellvery pipettes, having a nominal ca-
Sterilize in an autoclave set at 121 OC for 15 min.
pacity of 1 ml.
If the medium is to be used immediately, cool it
in the watet=bath (6.5) set at 45 OC before use.
6.5 Water-bath, or similar apparatus, capable of
operating at 45 OC + 0,5 OC.
-
If not, before beginning the microbiological
examination, in Order to avoid any delay when
6.6 Colony countlng equipment, consisting of
...
SLOVENSKI STANDARD
SIST ISO 4833:1997
01-december-1997
Mikrobiologija - Splošno navodilo za ugotavljanje števila mikroorganizmov -
Tehnika štetja kolonij pri 30 °C
Microbiology -- General guidance for the enumeration of micro-organisms -- Colony
count technique at 30 degrees C
Microbiologie -- Directives générales pour le dénombrement des micro-organismes --
Méthode par comptage des colonies obtenues à 30 degrés C
Ta slovenski standard je istoveten z: ISO 4833:1991
ICS:
07.100.30 Mikrobiologija živil Food microbiology
SIST ISO 4833:1997 en
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.
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SIST ISO 4833:1997
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SIST ISO 4833:1997
ISO
INTERNATIONAL
STANDARD 4833
Second edition
1991-03-01
Microbiology - General guidance for the
enumeration of micro-organisms - Colony
count technique at 30 OC
Microbiologie - Directives g&Grales pour le dhombremenf des
micro-organismes - Methode par camptage des colonies obtenues h
30 “C
Reference number
ISO 4833:lQQl(E)
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SIST ISO 4833:1997
ISO 4833:1991(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide
federation of national Standards bodies (ISO member bodies). The work
of preparing International Standards is normally carried out through 1SO
technical committees. Esch member body interested in a subject for
which a technical committee has been established has the right to be
represented on that committee. International organizations, govern-
mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the
work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical
Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
Draft International Standards adopted by the technical committees are
circulated to the member bodies for voting. Publication as an Inter-
national Standard requires approval by at least 75 % of the member
bodies casting a vote.
International Standard ISO 4833 was prepared by Technical Committee
lSO/TC 34, Agricultural food products.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO
4833:1978), of which it constitutes a technical revision.
Annex A forms an integral part of this International Standard.
6 ISO 1991
All rights reserved. No part of this publication may be reproduced or utilized in any form
or by any means, electronie or mechanical, including photocopying and microfilm, without
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ISO 4833:1991(E)
Introduction
This international Standard is intended to provide generai guidance for
the examination of products not dealt with by existing international
Standards and for reference for bodies preparing microbioiogicai meth-
ods of test for application to foods or to animai feeding stuffs. Because
of the iarge variety of products within this fieid of appiication, these
guideiines may not be appropriate for some products in every detail,
and for some other products it may be necessary to use different meth-
ods. Nevertheless, it is hoped that in all cases every attempt will be
made to apply the guidelines provided as far as possibie and that devi-
ations from them will only be made if absoiuteiy necessary for technicai
reasons.
When this International Standard is next reviewed, account will be taken
of all information then avaiiabie regarding the extent to which the
guidelines have been followed and the reasons for deviation from them
in the case of particuiar products.
The harmonization of test methods cannot be immediate, and for certain
groups of products International Standards and/or national Standards
may already exist that do not comply with these guidelines. In cases
where International Standards aiready exist for the product to be tested,
they shouid be foiiowed, but it is hoped that when such Standards are
reviewed they will be changed to comply with this International Standard
so that eventuaiiy the oniy remaining departures from these guidelines
will be those necessary for weil-established technical reasons.
. . .
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SIST ISO 4833:1997
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SIST ISO 4833:1997
ISO 4833:1991 (E)
INTERNATIONAL STANDARD
General guidance for the enumeration of
Microbiology -
- Colony count technique at 30 T
micro-organisms
micro-organisms: Bacteria, yeasts and mouids
1 Scope
growing aerobicaiiy under the test conditions speci-
fied in this international Standard.
This international Standard gives generai guideiines
for the enumeration of micro-organisms present in
products intended for human consumption or feed-
4 Prlnciple
ing of animais, by counting the colonies growing in
a solid medium after aerobic incubation at 30 OC.l)
4.1 Preparation of two poured piates, using a
specified cuiture medium, and using a specified
quantity of the test Sample if the initial product is
2 Normative references
liquid, or using a specified quantity of an initial sus-
Pension in the case of other products.
The foilowing Standards contain provisions which,
through reference in this text, constitute provisions Preparation of other pairs of poured plates, under
of this International Standard. At the time of publi- the Same conditions, using decimal diiutions of the
cation, the editions indicated were vaiid. All stan- test Sample or of the initial Suspension.
dards are subject to revision, and Parties to
agreements based on this International Standard
4.2 Aerobic incubation of the piates at 30 OC for
are encouraged to investigate the possibiiity of ap-
72 h.
plying the most recent editions of the Standards in-
dicated beiow. Members of IEC and ISO maintain
4.3 Caicuiation of the number of micro-organisms
registers of currently valid international Standards.
per miiiiiitre or per gram of Sample from the number
of colonies obtained in selected plates (see 10.1).
ISO 6887:1983, Microbiology - General guidance for
the prepara tion of dilutions for microbiological
5 Culture media and dilution fluid
examina Hon.
ISO 7218:1985, Microbiology - General guidance for 5.1 General
microbiological examinations.
For current laboratory practice, see ISO 7218.
3 Definition
5.2 Dilution fluid
See ISO 6887 and the specific international Standard
For the purposes of this international Standard, the
dealing with the product under examination.
following definition applies.
1) A temperature of 30 *C is that most free(uently used for the enumeration of total flora and this temperature has been
if for particular reasons another temperature is used, it should be indi-
adopted by ISO/TC 34 Subcommittee 9. However,
cated in the test report.
1
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SIST ISO 4833:1997
ISO 4833:1991 (E)
5.3 Plate count medium If not, before beginning the microbiological
examination, in Order to avoid any delay when
Composition pouring the medium, completely melt the me-
dium in a boiling water-bath, then cool it in the
tryptone
590 g
water-bath (6.5) set at 45 OC.
dehydrated yeast extract
2s g
6 Apparatus and glassware
anhydrous glucose
190 g
NOTE 1 acceptable alterna-
Disposable apparatus is an
agar 12 g to 18 g*)
tive to reusable glassware if it h as sui table specifications.
water 1000 ml
Usual microbiological laboratory equipment and, in
particular, the following.
Prepara tion
6.1 Apparatus for dry sterilization (oven) or wet
Dissolve the components or the dehydrated
sterilization (autoclave).
complete medium in the water, by heating if
necessary. Adjust the pH, if necessary, so that
See ISO 7218.
after sterilization it is 7,0 at 25 OC.
6.2 Incubator, capable of operating at 30 “C -t- 1 “C.
Dispense the medium into test tubes (6.8), in -
quantities of 15 ml
...
Iso
NORME
INTERNATIONALE 4833
Deuxième édition
1991-03-01
Microbiologie - Directives générales pour le
dénombrement des micro-organismes -
Méthode par comptage des colonies obtenues à
30 OC
Microbiology - General guidance for the enumeration of
micro-organisms - Colony Count technique at 30 OC
Numéro de référence
ISO 4833:1991(F)
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 4833:1991 (F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération’
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres
de I’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque comite membre inté-
ressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique créé
à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO participent également aux tra-
vaux. L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique
internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotech-
nique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comites techni-
ques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication
comme Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins
des comités membres votants.
La Norme internationale ISO 4833 a été élaborée par le comité techni-
que ISO/TC 34, Produits agricoles alimentaires.
Cette deuxiéme édition annule et remplace la premier-e édition (ISO
4833:1978), dont elle constitue une révision technique.
L’annexe A fait partie intégrante de la présente Norme internationale.
8 ISO 1991
Droits de reproduction réservés. Aucune partie de cette publication ne peut être repro-
duite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou
mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l’accord écrit de l’éditeur.
Organisation internationale de normalisation
Case Postale 56 l CH-121 1 Genève 20 l Suisse
Imprimé en Suisse
ii
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 4833:1991 (F)
Introduction
La présente Norme internationale se propose de fournir des directives
générales pour l’examen de produits non concernes par les Normes
internationales existant actuellement, et pour l’étude par les organis-
mes élaborant des méthodes d’essais microbiologiques destinées à
être appliquées a des produits alimentaires ou à des aliments pour
animaux. En raison de la grande diversité des produits entrant dans ce
domaine d’application, il est possible que ces directives, dans tous leurs
détails, ne conviennent pas exactement à certains produits et que, pour
certains autres produits, il puisse être nécessaire d’employer des mé-
thodes différentes. Néanmoins, il est à espérer que, dans tous les cas,
tous les efforts seront faits pour appliquer, chaque fois qu’il sera possi-
ble, les directives données, et qu’on n’aura recours à des dérogations
que si cela est absolument nécessaire pour des raisons techniques.
Lorsque la présente Norme internationale sera reexaminée, il sera tenu
compte de tous les renseignements disponibles à ce moment-là, à sa-
voir dans quelle mesure les directives auront éte suivies et les raisons
pour lesquelles il aura et6 necessaire d’y déroger dans le cas de pro-
duits particuliers.
L’harmonisation des méthodes d’essai ne peut pas être immédiate et,
pour certains groupes de produits, des Normes internationales existent
déja pour le produit à contrôler, elles devront être appliquées, mais il
serait souhaitable que, lorsqu’elles viendront en révision, elles soient
alignées sur la présente Norme internationale, si bien que finalement
les seules divergences restantes seront celles qui sont nécessaires
pour des raisons techniques bien établies.
. . .
III
---------------------- Page: 3 ----------------------
Page blanche
---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 4833:1991 (F)
NORME INTERNATIONALE
Microbiologie - Directives générales pour le dénombrement
Méthode par comptage des colonies
des micro-organismes -
obtenues à 30 OC
micro-organismes: Bactéries, levures et moisissu-
1 Domaine d’application
res se développant en aérobiose, lorsque l’essai est
effectué selon la méthode spécifiée dans la présente
La présente Norme internationale donne des direc-
Norme internationale.
tives générales pour le dénombrement des micro-
organismes dans les produits destinés à la
consommation humaine ou à l’alimentation animale,
4 Principe
par comptage des colonies obtenues en milieu so-
lide après incubation en aérobiose a 30 OC’).
4.1 Ensemencement en profondeur d’un milieu de
culture défini, coulé dans deux boîtes de Petri, avec
une quantité déterminée de l’échantillon pour essai
si le produit à examiner est liquide, ou avec une
2 Références normatives
quantité déterminée de suspension mère dans le
cas d’autres produits.
Les normes suivantes contiennent des dispositions
qui, par suite de la réfkrence qui en est faite,
Dans les mêmes conditions, ensemencement des
constituent des dispositions valables pour la pré-
dilutions décimales obtenues à partir de I’échan-
sente Norme internationale. Au moment de la pu-
tillon pour essai ou de la suspension mére.
blication, les éditions indiquées étaient en vigueur.
Toute norme est sujette à révision et les parties
4.2 Incubation des boîtes à 30 OC, en aérobiose,
prenantes des accords fondés sur la présente
pendant 72 h.
Norme internatibnale sont invitées à rechercher la
possibilité d’appliquer les éditions les plus récentes
4.3 A partir du nombre de colonies obtenues dans
des normes indiquées ci-après. Les membres de la
les boîtes de Petri retenues (voir lO.l), calcul du
CEI et de I’ISO possèdent le registre des Normes
nombre de micro-organismes par millilitre ou par
internationales en vigueur à un moment donné.
gramme d’échantillon.
ISO 6887:1983, Microbiologie - Directives générales
pour /a préparation des dilutions en vue de /‘examen
5 Milieux de culture et diluant
microbiologique.
5.1 Généralités
ISO 7218:1985, Microbiologie - Directives générales
pour les examens microbiologiques.
Pour les pratiques courantes de laboratoire, voir
I’ISO 7218.
3 Définition 5.2 Diluant
Voir I’ISO 6887 et la Norme internationale spécifique
Pour les besoins de la présente Norme internatio-
traitant du produit à examiner.
nale, la définition suivante s’applique.
1) La température de 30 T est celle la plus couramment utilisée pour le dénombrement de la flore totale; aussi seule cette
si pour des raisons particulières une autre
température a été retenue par le Sous-Comité 9 de I’ISO/TC 34. Néanmoins,
température était utilisée, il conviendrait de l’indiquer dans le rapport d’essai.
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 4833:1991 (F)
5.3 Gélose pour dénombrement Stériliser à l’autoclave réglé à 121 OC pendant
15 min. Si le milieu est utilisé extemporanément,
le refroidir au bain d’eau (6.5) réglé à 45 OC avant
Composition
l’emploi.
tryptone
50 g
Dans le cas contraire, avant de commencer
extrait de levure déshydraté
295 g
l’examen microbiologique, et afin d’éviter toute
attente au moment de couler la gélose blanche,
glucose anhydre
190 g
faire fondre complétement le milieu au bain
d’eau bouillante, puis refroidir au bain d’eau
agar-agar 12 g à 18 g*)
(6.5) réglé à 45 OC.
ml
eau 1000
6 Appareillage et verrerie
Préparation
NOTE 1 Le mat&iel à usage unique est acceptable au
Dissoudre les composants ou le milieu complet
meme titre que la verrerie réutilisable, si ses spécifica-
déshydraté dans l’eau, en chauffant si néces-
tions sont similaires.
saire. Ajuster le pH, si nécessaire, de sorte
qu’après stérilisation, il soit de 7,0 à 25 OC.
Matériel courant de laboratoire de microbiologie, et
notamment:
Répartir le milieu dans des tubes à essais (6.8),
à raison de 15 ml par tube, ou dans des fioles
6.1 Appareils pour la stérilisation en chaleur séche
(6.8) dont la capacité ne dépasse pas 500 ml, à
(four) ou en chaleur humide (autoclave).
raison d’environ la moitié du volume de la fiole.
Voir I’ISO 7218.
Stériliser à l’autoclave réglé à 121 OC pendant
15 min. Si le milieu est utilisé extemporanément,
6.2 Étuve, réglable à 30 OC + 1 OC.
-
le refroidir au bain d’eau (6.5) réglé à 45 OC avant
emploi.
6.3 Boîtes de Petri, en verre ou en plastique, de
Dans le cas contraire, avant
...
Iso
NORME
INTERNATIONALE 4833
Deuxième édition
1991-03-01
Microbiologie - Directives générales pour le
dénombrement des micro-organismes -
Méthode par comptage des colonies obtenues à
30 OC
Microbiology - General guidance for the enumeration of
micro-organisms - Colony Count technique at 30 OC
Numéro de référence
ISO 4833:1991(F)
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 4833:1991 (F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération’
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres
de I’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque comite membre inté-
ressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique créé
à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO participent également aux tra-
vaux. L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique
internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotech-
nique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comites techni-
ques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication
comme Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins
des comités membres votants.
La Norme internationale ISO 4833 a été élaborée par le comité techni-
que ISO/TC 34, Produits agricoles alimentaires.
Cette deuxiéme édition annule et remplace la premier-e édition (ISO
4833:1978), dont elle constitue une révision technique.
L’annexe A fait partie intégrante de la présente Norme internationale.
8 ISO 1991
Droits de reproduction réservés. Aucune partie de cette publication ne peut être repro-
duite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou
mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l’accord écrit de l’éditeur.
Organisation internationale de normalisation
Case Postale 56 l CH-121 1 Genève 20 l Suisse
Imprimé en Suisse
ii
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ISO 4833:1991 (F)
Introduction
La présente Norme internationale se propose de fournir des directives
générales pour l’examen de produits non concernes par les Normes
internationales existant actuellement, et pour l’étude par les organis-
mes élaborant des méthodes d’essais microbiologiques destinées à
être appliquées a des produits alimentaires ou à des aliments pour
animaux. En raison de la grande diversité des produits entrant dans ce
domaine d’application, il est possible que ces directives, dans tous leurs
détails, ne conviennent pas exactement à certains produits et que, pour
certains autres produits, il puisse être nécessaire d’employer des mé-
thodes différentes. Néanmoins, il est à espérer que, dans tous les cas,
tous les efforts seront faits pour appliquer, chaque fois qu’il sera possi-
ble, les directives données, et qu’on n’aura recours à des dérogations
que si cela est absolument nécessaire pour des raisons techniques.
Lorsque la présente Norme internationale sera reexaminée, il sera tenu
compte de tous les renseignements disponibles à ce moment-là, à sa-
voir dans quelle mesure les directives auront éte suivies et les raisons
pour lesquelles il aura et6 necessaire d’y déroger dans le cas de pro-
duits particuliers.
L’harmonisation des méthodes d’essai ne peut pas être immédiate et,
pour certains groupes de produits, des Normes internationales existent
déja pour le produit à contrôler, elles devront être appliquées, mais il
serait souhaitable que, lorsqu’elles viendront en révision, elles soient
alignées sur la présente Norme internationale, si bien que finalement
les seules divergences restantes seront celles qui sont nécessaires
pour des raisons techniques bien établies.
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III
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ISO 4833:1991 (F)
NORME INTERNATIONALE
Microbiologie - Directives générales pour le dénombrement
Méthode par comptage des colonies
des micro-organismes -
obtenues à 30 OC
micro-organismes: Bactéries, levures et moisissu-
1 Domaine d’application
res se développant en aérobiose, lorsque l’essai est
effectué selon la méthode spécifiée dans la présente
La présente Norme internationale donne des direc-
Norme internationale.
tives générales pour le dénombrement des micro-
organismes dans les produits destinés à la
consommation humaine ou à l’alimentation animale,
4 Principe
par comptage des colonies obtenues en milieu so-
lide après incubation en aérobiose a 30 OC’).
4.1 Ensemencement en profondeur d’un milieu de
culture défini, coulé dans deux boîtes de Petri, avec
une quantité déterminée de l’échantillon pour essai
si le produit à examiner est liquide, ou avec une
2 Références normatives
quantité déterminée de suspension mère dans le
cas d’autres produits.
Les normes suivantes contiennent des dispositions
qui, par suite de la réfkrence qui en est faite,
Dans les mêmes conditions, ensemencement des
constituent des dispositions valables pour la pré-
dilutions décimales obtenues à partir de I’échan-
sente Norme internationale. Au moment de la pu-
tillon pour essai ou de la suspension mére.
blication, les éditions indiquées étaient en vigueur.
Toute norme est sujette à révision et les parties
4.2 Incubation des boîtes à 30 OC, en aérobiose,
prenantes des accords fondés sur la présente
pendant 72 h.
Norme internatibnale sont invitées à rechercher la
possibilité d’appliquer les éditions les plus récentes
4.3 A partir du nombre de colonies obtenues dans
des normes indiquées ci-après. Les membres de la
les boîtes de Petri retenues (voir lO.l), calcul du
CEI et de I’ISO possèdent le registre des Normes
nombre de micro-organismes par millilitre ou par
internationales en vigueur à un moment donné.
gramme d’échantillon.
ISO 6887:1983, Microbiologie - Directives générales
pour /a préparation des dilutions en vue de /‘examen
5 Milieux de culture et diluant
microbiologique.
5.1 Généralités
ISO 7218:1985, Microbiologie - Directives générales
pour les examens microbiologiques.
Pour les pratiques courantes de laboratoire, voir
I’ISO 7218.
3 Définition 5.2 Diluant
Voir I’ISO 6887 et la Norme internationale spécifique
Pour les besoins de la présente Norme internatio-
traitant du produit à examiner.
nale, la définition suivante s’applique.
1) La température de 30 T est celle la plus couramment utilisée pour le dénombrement de la flore totale; aussi seule cette
si pour des raisons particulières une autre
température a été retenue par le Sous-Comité 9 de I’ISO/TC 34. Néanmoins,
température était utilisée, il conviendrait de l’indiquer dans le rapport d’essai.
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ISO 4833:1991 (F)
5.3 Gélose pour dénombrement Stériliser à l’autoclave réglé à 121 OC pendant
15 min. Si le milieu est utilisé extemporanément,
le refroidir au bain d’eau (6.5) réglé à 45 OC avant
Composition
l’emploi.
tryptone
50 g
Dans le cas contraire, avant de commencer
extrait de levure déshydraté
295 g
l’examen microbiologique, et afin d’éviter toute
attente au moment de couler la gélose blanche,
glucose anhydre
190 g
faire fondre complétement le milieu au bain
d’eau bouillante, puis refroidir au bain d’eau
agar-agar 12 g à 18 g*)
(6.5) réglé à 45 OC.
ml
eau 1000
6 Appareillage et verrerie
Préparation
NOTE 1 Le mat&iel à usage unique est acceptable au
Dissoudre les composants ou le milieu complet
meme titre que la verrerie réutilisable, si ses spécifica-
déshydraté dans l’eau, en chauffant si néces-
tions sont similaires.
saire. Ajuster le pH, si nécessaire, de sorte
qu’après stérilisation, il soit de 7,0 à 25 OC.
Matériel courant de laboratoire de microbiologie, et
notamment:
Répartir le milieu dans des tubes à essais (6.8),
à raison de 15 ml par tube, ou dans des fioles
6.1 Appareils pour la stérilisation en chaleur séche
(6.8) dont la capacité ne dépasse pas 500 ml, à
(four) ou en chaleur humide (autoclave).
raison d’environ la moitié du volume de la fiole.
Voir I’ISO 7218.
Stériliser à l’autoclave réglé à 121 OC pendant
15 min. Si le milieu est utilisé extemporanément,
6.2 Étuve, réglable à 30 OC + 1 OC.
-
le refroidir au bain d’eau (6.5) réglé à 45 OC avant
emploi.
6.3 Boîtes de Petri, en verre ou en plastique, de
Dans le cas contraire, avant
...
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