ISO 22717:2006
(Main)Cosmetics — Microbiology — Detection of Pseudomonas aeruginosa
Cosmetics — Microbiology — Detection of Pseudomonas aeruginosa
ISO 22717:2006 gives general guidelines for the detection and identification of the specified micro-organism Pseudomonas aeruginosa in cosmetic products. Micro-organisms considered as specified in this ISO 22717:2006 might differ from country to country according to national practices or regulations. In order to ensure product quality and safety for consumers, it is advisable to perform an appropriate microbiological risk analysis to determine the types of cosmetic product to which this ISO 22717:2006 is applicable. Products considered to present a low microbiological risk include those with low water activity, hydro-alcoholic products, extreme pH values, etc. The method described in ISO 22717:2006 is based on the detection of Pseudomonas aeruginosa in a non-selective liquid medium (enrichment broth), followed by isolation on a selective agar medium. Other methods may be appropriate, depending on the level of detection required. Because of the large variety of cosmetic products within this field of application, this method may not be appropriate in every detail for some products (e.g. certain water immiscible products). Other International Standards (ISO 18415) may be appropriate. Other methods (e.g. automated) may be substituted for the tests presented here provided that their equivalence has been demonstrated or the method has been otherwise validated.
Cosmétiques — Microbiologie — Recherche de Pseudomonas aeruginosa
L'ISO 22717:2007 donne des lignes directrices générales pour la recherche et l'identification du microorganisme spécifié Pseudomonas aeruginosa dans les produits cosmétiques. Les microorganismes considérés comme spécifiés dans la présente Norme internationale peuvent différer d'un pays à un autre, suivant les pratiques ou les réglementations nationales. Pour garantir la qualité du produit et la sécurité des consommateurs, il est recommandé d'effectuer une analyse appropriée du risque microbiologique afin de déterminer les types de produit cosmétique qui relèvent de l'ISO 22717:2007. Les produits dont on considère qu'ils présentent un faible risque microbiologique comprennent ceux ayant une faible activité de l'eau, les produits hydroalcooliques, ceux ayant des valeurs de pH extrêmes, etc. La méthode décrite dans l'ISO 22717:2007 repose sur la recherche de Pseudomonas aeruginosa dans un milieu liquide non sélectif (milieu liquide d'enrichissement), suivie de son isolement sur un milieu gélosé sélectif. D'autres méthodes peuvent être appropriées, en fonction du niveau de détection requis.
General Information
Relations
Buy Standard
Standards Content (Sample)
МЕЖДУНАРОДНЫЙ ISO
СТАНДАРТ 22717
Первое издание
2006-02-01
Косметика. Микробиология.
Обнаружение синегнойной палочки
(Pseudomonas aeruginosa)
Cosmetics — Microbiology — Detection of Pseudomonas aeruginosa
Ответственность за подготовку русской версии несёт ГOST R
(Российская Федерация) в соответствии со статьёй 18.1 Устава ISO
Ссылочный номер
ISO 22717:2006(R)
©
ISO 2006
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 22717:2006(R)
Отказ от ответственности при работе в PDF
Настоящий файл PDF может содержать интегрированные шрифты. В соответствии с условиями лицензирования, принятыми
фирмой Adobe, этот файл можно распечатать или смотреть на экране, но его нельзя изменить, пока не будет получена
лицензия на установку интегрированных шрифтов в компьютере, на котором ведется редактирование. В случае загрузки
настоящего файла заинтересованные стороны принимают на себя ответственность за соблюдение лицензионных условий
фирмы Adobe. Центральный секретариат ISO не несет никакой ответственности в этом отношении.
Adobe - торговый знак фирмы Adobe Systems Incorporated.
Подробности, относящиеся к программным продуктам, использованным для создания настоящего файла PDF, можно найти в
рубрике Гeneral Info файла; параметры создания PDF были оптимизированы для печати. Были приняты во внимание все
меры предосторожности с тем, чтобы обеспечить пригодность настоящего файла для использования комитетами-членами
ISO. В редких случаях возникновения проблемы, связанной со сказанным выше, просьба проинформировать Центральный
секретариат по адресу, приведенному ниже.
ДОКУМЕНТ ЗАЩИЩЕН АВТОРСКИМ ПРАВОМ
© ISO 2006
Все права сохраняются. Если не указано иное, никакую часть настоящей публикации нельзя копировать или использовать в
какой-либо форме или каким-либо электронным или механическим способом, включая фотокопии и микрофильмы, без
предварительного письменного согласия ISO, которое должно быть получено после запроса о разрешении, направленного по
адресу, приведенному ниже, или в комитет-член ISO в стране запрашивающей стороны.
ISO copyriгht office
Case postale 56 • CH-1211 Гeneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyriгht@iso.orг
Web www.iso.orг
Опубликовано в Швейцарии
ii © ISO 2006 – Все права сохраняются
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 22717:2006(R)
Содержание Страница
Предисловие .iv
Введение .v
1 Область применения .1
2 Нормативные ссылки .1
3 Термины и определения .2
4 Принцип.3
5 Растворители и культурная среда.3
5.1 Общие положенияl .3
5.2 Растворители для бактериальной суспензии (раствор триптон хлорид натрия).3
5.3 Культурная среда .4
6 Приборы и стеклянная посуда .6
7 Штаммы микроорганизмов .6
8 Обращение с косметической продукцией и лабораторными образцами .7
9 Процедура.7
9.1 Общие рекомендации .7
9.2 Приготовление первоначальной суспензии в обогатительном бульоне.7
9.3 Инкубация посеянного обогатительного бульона.8
9.4 Обнаружение и идентификация Pseudomonas aeruginosa .8
10 Представление результатов .9
11 Нейтрализация противомикробных свойств продукции .9
11.1 Общее положение.9
11.2 Приготовление посевной культуры .9
11.3 Достоверность метода обнаружения .10
12 Протокол испытания.10
Приложение А (информативное) Другие обогатительные бульоны .12
Приложение В (информативное) Нейтрализаторы противомикробной активности
консервантов и промывных жидкостей .14
Библиография.15
© ISO 2006 – Все права сохраняются iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 22717:2006(R)
Предисловие
Международная организация по стандартизации (ISO) является всемирной федерацией национальных
организаций по стандартизации (комитетов-членов ISO). Разработка международных стандартов
обычно осуществляется техническими комитетами ISO. Каждый комитет-член, заинтересованный в
деятельности, для которой был создан технический комитет, имеет право быть представленным в этом
комитете. Международные правительственные и неправительственные организации, имеющие связи с
ISO, также принимают участие в работах. ISO работает в тесном сотрудничестве с Международной
электротехнической комиссией (IEC) по всем вопросам стандартизации в области электротехники.
Международные стандарты разрабатываются в соответствии с правилами, установленными в
Директивах ISO/IEC, Часть 2.
Основная задача технических комитетов состоит в подготовке международных стандартов. Проекты
международных стандартов, одобренные техническими комитетами, рассылаются комитетам-членам
на голосование. Их опубликование в качестве международных стандартов требует одобрения, по
меньшей мере, 75 % комитетов-членов, принимающих участие в голосовании.
Следует иметь в виду, что некоторые элементы этого документа могут быть объектом патентных прав.
ISO не должен нести ответственность за идентификацию какого-либо одного или всех патентных прав
ISO 22717 был подготовлен Техническим комитетом ISO/TC 217, Косметика.
iv © ISO 2006 – Все права сохраняются
---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 22717:2006(R)
Введение
Микробиологическое исследование косметической продукции должно выполняться в соответствии с
соответствующим анализом степени микробиологического риска для того, чтобы обеспечить ее
качество и безопасность для потребителей.
Анализ микробиологического риска зависит от нескольких параметров, таких как:
потенциальное изменение косметической продукции;
патогенность микроорганизмов;
место применения косметической продукции (волосы, кожа, глаза, слизистые оболочки, и т.п.);
типы пользователей (взрослые, дети менее 3 лет).
Для косметической и другой продукции местного применения может быть очень важным обнаружение
кожных болезнетворных микроорганизмов таких, как Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa
and Candida albicans. Обнаружение других видов микроорганизмов может представлять интерес,
поскольку эти микроорганизмы (включая индикаторы фекальных загрязнений типа Escherichia coli)
наводят на мысль о том, что в процессе производства не были соблюдены правила гигиены.
© ISO 2006 – Все права сохраняются v
---------------------- Page: 5 ----------------------
INTERNATIONAL STANDARD ISO 22717:2006(R)
Косметика. Микробиология. Обнаружение синегнойной
палочки (Pseudomonas aeruginosa)
1 Область применения
Настоящий международный стандарт предлагает общие руководящие указания по обнаружению и
идентификации конкретного микроорганизма Pseudomonas aeruginosa (Синегнойной палочки) в
косметической продукции. Микроорганизмы, рассматриваемые как конкретные в данном
международном стандарте, могут отличаться в зависимости от страны в соответствии с
национальными инструкциями или правилами.
Чтобы обеспечить качество и безопасность продукции для потребителя, рекомендуется провести
соответствующий анализ микробиологического риска, чтобы определить типы косметической
продукции, к которой применим данный международный стандарт. К продукции с низкой степенью
микробиологического риска относятся те, которые имеют низкую водную активность, водноспиртовые
продукты, с экстремальными значениями pH и т д.
Метод, описанный в настоящем международном стандарте, основан на обнаружении Pseudomonas
aeruginosa (Синегнойной палочки) в неселективной жидкой среде (обогатительном бульоне), за чем
следует выделение на селективной агаровой среде. Возможны другие методы в зависимости от уровня
требуемого обнаружения.
ПРИМЕЧАНИЕ. Для обнаружения Pseudomonas aeruginosa, субкультуры (пассированные культуры) могут быть
выполнены не неселективной культурной среде, за которой следуют соответствующие этапы идентификации (т.н.
с помощью идентификационных китов).
По причине большого разнообразия косметической продукции в данной области применения,
настоящий метод не может полностью подходить к некоторой продукции (т. н. к некоторым продуктам,
погружаемым в воду). Возможно применение других подходящих международных стандартов
[10]
(ISO 18415 ). Другие методы (т. н. автоматизированный) могут быть заменены испытаниями,
представленными в данном стандарте, при условии, что их эквивалентность была
продемонстрирована или метод был достоверен иначе.
2 Нормативные ссылки
Следующие ссылочные нормативные документы являются обязательными для применения
настоящего документа. Для жестких ссылок применяется только цитируемое издание документа. Для
плавающих ссылок необходимо использовать самое последнее издание нормативного ссылочного
документа (включая любые изменения).
ISO 21148:2005, Косметика. Микробиология. Общие указания по микробиологическому контролю
EN 12353, Химические дезинфицирующие средства и антисептики. Консервация микробных
штаммов, используемых для определения бактерицидной и фунгицидной активности
© ISO 2006 – Все права сохраняются 1
---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 22717:2006(R)
3 Термины и определения
Для данного документа применены следующие термины и определения.
3.1
продукция
product
часть идентифицированной косметической продукции, полученной в лаборатории для испытания
3.2
образец
sample
часть продукции (как минимум 1 г или 1 мл), которая используется при испытании для приготовления
первоначальной суспензии
3.3
первоначальная суспензия
initial suspension
суспензия (или раствор) образца в определенном объеме обогатительного бульона
3.4
растворение (ния) образца
sample dilution(s)
растворение (ния) первоначальной суспензии
3.5
конкретный специфический микроорганизм
specified micro-organism
аэробные мезофильные бактерии или дрожжи, которые нежелательны в косметической продукции и
признаны как кожные патогенные разновидности, которые могут быть вредными для здоровья
человека или являются указанием нарушения гигиены производственного процесса
3.6
Pseudomonas aeruginosa (Синегнойная палочка)
Грамотрицательная палочка, подвижная; колонии гладких клеток, окрашенных в коричневый или
зеленоватый цвет
ПРИМЕЧАНИЕ 1. Основными характеристиками для идентификации являются: рост на селективной питательной
среде агара с цетримидом, позитивная оксидаза, продуцирование диффундирующих флуоресцентных пигментов
и продуцирование растворимого феназинового пигмента (пиоцианина) в подходящей среде.
ПРИМЕЧАНИЕ 2. Pseudomonas aeruginosa -можно изолировать от широкого разнообразия источников
окружающей среды, особенно в воде. Очень высока возможность испортить множество разных подложек. Она
может вызвать инфекции на человеческой коже или в области глаз. Она неприемлема в косметической продукции
по причине ее потенциальной болезнетворности, а также по своей способности воздействовать на физико-
химические свойства косметической формулы.
3.7
обогатительная бульон (питательная среда))
enrichment бульон
неселективная жидкая среда, содержащая соответствующие нейтрализаторы и/или диспергаторы, и
достоверная для испытываемой продукции
2 © ISO 2006 – Все права сохраняются
---------------------- Page: 7 ----------------------
ISO 22717:2006(R)
4 Принцип
На первом этапе процедуры выполняют обогащение, используя неселективную питательную среду
(бульон), чтобы увеличить число микроорганизмов без риска угнетения селективными ингредиентами,
которые присутствуют в селективной/дифференциальной среде для выращивания.
Второй этап испытания (выделение) выполняется на селективной среде, за чем следуют
идентификационные испытания.
Возможное угнетение микробиологического роста действием образца должно нейтрализоваться, чтобы
[1]
позволить обнаружить жизнеспособные микроорганизмы . Во всех случаях и независимо от
методологии, нейтрализация противомикробных свойств продукции должна проверяться и
[2], [3], [4]
подтверждаться на достоверность .
5 Растворители и культурная среда
5.1 Общие положенияl
Общие инструкции приведены в ISO 21148. Когда в данном документе упоминается вода, используют
дистиллированную воду или очищенную воду, как установлено в ISO 21148.
Обогатительный бульон используют, чтобы диспергировать образец и увеличить первоначальную
микробную популяцию. Он может содержать нейтрализаторы, если испытываемый образец обладает
противомикробными свойствами. Эффективность нейтрализации должна быть показана (смотри
Раздел 11). Информация, относящаяся к подходящим нейтрализаторам, приведена в Приложении B.
Нижеследующий обогатительный бульон пригоден для проверки присутствия Pseudomonas aeruginosa
в соответствии с настоящим международным стандартом при условии, что он удостоверен в
соответствии с Разделом 11.
Разрешается применение других растворителей и культурных сред, если они могут показать свою
пригодность при применении.
5.2 Растворители для бактериальной суспензии (раствор триптон хлорид натрия)
5.2.1 Общее положениеl
Растворитель используется для приготовления бактериальной суспензии, применяемой для
процедуры проверки на достоверность (см. Раздел 11).
5.2.2 Состав
триптон, панкреатическая питательная среда казеина 1,0 г
хлорид натрия 8,5 г
вода 1 000 мл
5.2.3 Приготовление
Компоненты растворяют в воде, перемешивая при нагревании. Распределяют в подходящие
контейнеры. Стерилизуют в автоклаве при 121 °C в течение 15 мин.
После стерилизации и охлаждения pH должно равняться 7,0 ± 0,2 при измерении при комнатной
температуре.
© ISO 2006 – Все права сохраняются 3
---------------------- Page: 8 ----------------------
ISO 22717:2006(R)
5.3 Культурная среда
5.3.1 Общее положение
Культурная среда может быть приготовлена по описаниям, приведенным ниже или из обезвоженной
культурной среды согласно инструкциям изготовителя. Необходимо следовать инструкциям,
предлагаемым поставщиком среды.
ПРИМЕЧАНИЕ. Готовые к использованию среды разрешается использовать, если их состав и/или
продуктивность роста можно сравнить с формулами приведенными здесь.
5.3.2 Агаровая среда для проверки на достоверность (соевая казеиновая агаровая
питательная среда или триптический соевый агар)
5.3.2.1 Состав
панкреатическая питательная среда казеина 15,0 г
папаиновая питательная среда соевой пищи 5,0 г
хлорид натрия 5,0 г
агар 15,0 г
вода 1 000 мл
5.3.2.2 Приготовление
Компоненты или обезвоженную готовую среду растворяют в воде, перемешивая при нагревании.
Распределяют среду в подходящие контейнеры. Стерилизуют в автоклаве при 121 °C в течение 15 мин.
После стерилизации и охлаждения pH должно равняться 7,3 ± 0,2 при измерении при комнатной
температуре.
5.3.3 Обогатительный бульон
5.3.3.1 Быстрорастущий бульон Eugon LT 100
5.3.3.1.1 Общее положение
Данная среда содержит ингредиенты, которые нейтрализуют угнетающие вещества, присутствующие в
образце: лецитин и полисорбат 80 (эфир полиоксиэтиленовой жирной кислоты), и диспергатор:
октоксинол 9.
5.3.3.1.2 Состав
панкреатическая питательная среда казеина 15,0 г
папаиновая питательная среда соевой пищи 5,0 г
L- цистин 0,7 г
хлорид натрия 4,0 г
сульфит натрия 0,2 г
4 © ISO 2006 – Все права сохраняются
---------------------- Page: 9 ----------------------
ISO 22717:2006(R)
глюкоза 5,5 г
яичный лецитин 1,0 г
полисорбат 80 (эфир полиоксиэтиленовой жирной кислоты) 5,0 г
октоксинол 9 1,0 г
вода 1 000 мл
5.3.3.1.3 Приготовление
Один за другим растворяют компоненты в кипящей воде – полисорбат 80, октоксинол 9 и яичный
лецитин до их полного растворения. Другие компоненты растворяют в воде, перемешивая при
нагревании. Распределяют среду в подходящие контейнеры .Стерилизуют в автоклаве при 121 °C в
течение 15 мин.
После стерилизации и охлаждения pH должно равняться 7,0 ± 0,2 при измерении при комнатной
температуре.
5.3.3.2 Другие обогатительные бульоны
Можно использовать и другие обогатительные бульоны, если они соответствуют (см. Приложение A).
5.3.4 Селективная агаровая среда для выделения Pseudomonas aeruginosa
5.3.4.1 Питательный агар с цетримидом
5.3.4.1.1 Состав
панкреатическая питательная среда желатина 20,0 г
хлорид магния 1,4 г
сульфат калия 10,0 г
цетримид (бромид цетилтриметиламония) 0,3 г
агар 13,6 г
глицерин 10,0 мл
вода 1 000 мл
5.3.4.1.2 Приготовление
Растворяют в воде все твердые компоненты и добавляют глицерин. Нагревают при частом
перемешивании и кипятят в течение 1 мин до растворения.
Распред
...
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 22717
First edition
2006-02-01
Cosmetics — Microbiology — Detection
of Pseudomonas aeruginosa
Cosmétiques — Microbiologie — Détection de Pseudomonas
aeruginosa
Reference number
ISO 22717:2006(E)
©
ISO 2006
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 22717:2006(E)
PDF disclaimer
This PDF file may contain embedded typefaces. In accordance with Adobe's licensing policy, this file may be printed or viewed but
shall not be edited unless the typefaces which are embedded are licensed to and installed on the computer performing the editing. In
downloading this file, parties accept therein the responsibility of not infringing Adobe's licensing policy. The ISO Central Secretariat
accepts no liability in this area.
Adobe is a trademark of Adobe Systems Incorporated.
Details of the software products used to create this PDF file can be found in the General Info relative to the file; the PDF-creation
parameters were optimized for printing. Every care has been taken to ensure that the file is suitable for use by ISO member bodies. In
the unlikely event that a problem relating to it is found, please inform the Central Secretariat at the address given below.
© ISO 2006
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means,
electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without permission in writing from either ISO at the address below or
ISO's member body in the country of the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2006 – All rights reserved
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 22717:2006(E)
Contents Page
Foreword. iv
Introduction . v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions. 1
4 Principle. 2
5 Diluents and culture media. 2
5.1 General. 2
5.2 Diluent for the bacterial suspension (tryptone sodium chloride solution). 3
5.3 Culture media . 3
6 Apparatus and glassware . 5
7 Strains of micro-organisms . 6
8 Handling of cosmetic products and laboratory samples . 6
9 Procedure . 6
9.1 General recommendation . 6
9.2 Preparation of the initial suspension in the enrichment broth . 6
9.3 Incubation of the inoculated enrichment broth . 7
9.4 Detection and Identification of Pseudomonas aeruginosa . 7
10 Expression of results . 8
11 Neutralization of the antimicrobial properties of the product. 8
11.1 General. 8
11.2 Preparation of the inoculum . 8
11.3 Validation of the detection method. 8
12 Test report . 9
Annex A (informative) Other enrichment broths. 10
Annex B (informative) Neutralizers of antimicrobial activity of preservatives and rinsing liquids . 12
Bibliography . 13
© ISO 2006 – All rights reserved iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 22717:2006(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 22717 was prepared by Technical Committee ISO/TC 217, Cosmetics.
iv © ISO 2006 – All rights reserved
---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 22717:2006(E)
Introduction
Microbiological examinations of cosmetic products shall be carried out according to an appropriate
microbiological risk analysis in order to ensure their quality and safety for consumers.
Microbiological risk analysis depends on several parameters such as:
⎯ potential alteration of cosmetic products;
⎯ pathogenicity of micro-organisms;
⎯ site of application of the cosmetic product (hair, skin, eyes, mucous membranes, etc.);
⎯ type of users (adults, children under 3 years).
For cosmetics and other topical products, the detection of skin pathogens such as Staphylococcus aureus,
Pseudomonas aeruginosa and Candida albicans may be relevant. The detection of other kinds of
micro-organism might be of interest since these micro-organisms (including indicators of faecal contamination
e.g. Escherichia coli) suggest hygienic failure during the manufacturing process.
© ISO 2006 – All rights reserved v
---------------------- Page: 5 ----------------------
INTERNATIONAL STANDARD ISO 22717:2006(E)
Cosmetics — Microbiology — Detection of Pseudomonas
aeruginosa
1 Scope
This International Standard gives general guidelines for the detection and identification of the specified
micro-organism Pseudomonas aeruginosa in cosmetic products. Micro-organisms considered as specified in
this International Standard might differ from country to country according to national practices or regulations.
In order to ensure product quality and safety for consumers, it is advisable to perform an appropriate
microbiological risk analysis to determine the types of cosmetic product to which this International Standard is
applicable. Products considered to present a low microbiological risk include those with low water activity,
hydro-alcoholic products, extreme pH values, etc.
The method described in this International Standard is based on the detection of Pseudomonas aeruginosa in
a non-selective liquid medium (enrichment broth), followed by isolation on a selective agar medium. Other
methods may be appropriate, depending on the level of detection required.
NOTE For the detection of Pseudomonas aeruginosa, subcultures can be performed on non-selective culture media
followed by suitable identification steps (e.g. using identification kits).
Because of the large variety of cosmetic products within this field of application, this method may not be
appropriate in every detail for some products (e.g. certain water immiscible products). Other International
[10]
Standards (ISO 18415 ) may be appropriate. Other methods (e.g. automated) may be substituted for the
tests presented here provided that their equivalence has been demonstrated or the method has been
otherwise validated.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced
document (including any amendments) applies.
ISO 21148:2005, Cosmetics — Microbiology — General instructions for microbiological examination
EN 12353, Chemical disinfectants and antiseptics — Preservation of microbial strains used for the
determination of bactericidal and fungicidal activity
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
product
portion of an identified cosmetic product received in the laboratory for testing
3.2
sample
portion of the product (at least 1 g or 1 ml) that is used in the test to prepare the initial suspension
© ISO 2006 – All rights reserved 1
---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 22717:2006(E)
3.3
initial suspension
suspension (or solution) of the sample in a defined volume of an appropriate enrichment broth
3.4
sample dilution(s)
dilution(s) of the initial suspension
3.5
specified micro-organism
aerobic mesophilic bacteria or yeast that is undesirable in a cosmetic product and is recognized as a skin
pathogen species that may be harmful for human health or as indication of hygienic failure in the
manufacturing process
3.6
Pseudomonas aeruginosa
Gram-negative rod, motile; smooth colonies pigmented brown or greenish
NOTE 1 The main characteristics for identification are: growth on selective cetrimide agar medium, oxidase positive,
production of diffusible fluorescent pigments and production of a soluble phenazine pigment (pyocyanin) in suitable media.
NOTE 2 Pseudomonas aeruginosa may be isolated from a wide variety of environmental sources, especially in water
and has a very high potential to spoil many different substrates. It may produce infections of human skin or eye area. It is
undesirable in cosmetic products for its potential pathogenicity and its capacity to affect the physico-chemical properties of
the cosmetic formula.
3.7
enrichment broth
non-selective liquid medium containing suitable neutralizers and/or dispersing agents and validated for the
product under test
4 Principle
The first step of the procedure is to perform an enrichment by using a non-selective broth medium to increase
the number of micro-organisms without the risk of inhibition by the selective ingredients that are present in
selective/differential growth media.
The second step of the test (isolation) is performed on a selective medium followed by identification tests.
The possible inhibition of microbial growth by the sample shall be neutralized to allow the detection of viable
[1]
micro-organisms . In all cases and whatever the methodology, the neutralization of the antimicrobial
[2], [3], [4]
properties of the product shall be checked and validated .
5 Diluents and culture media
5.1 General
General instructions are given in ISO 21148. When water is mentioned in this document, use distilled water or
purified water as specified in ISO 21148.
The enrichment broth is used to disperse the sample and to increase the initial microbial population. It may
contain neutralizers if the specimen to be tested has antimicrobial properties. The efficacy of the neutralization
shall be demonstrated (see Clause 11). Information relative to suitable neutralizers is given in Annex B.
The following enrichment broth is suitable for checking the presence of Pseudomonas aeruginosa in
accordance with this International Standard provided that it is validated in accordance with Clause 11.
Other diluents and culture media may be used if they can be demonstrated to be suitable for use.
2 © ISO 2006 – All rights reserved
---------------------- Page: 7 ----------------------
ISO 22717:2006(E)
5.2 Diluent for the bacterial suspension (tryptone sodium chloride solution)
5.2.1 General
The diluent is used for the preparation of bacterial suspension used for the validation procedure
(see Clause 11).
5.2.2 Composition
⎯ tryptone, pancreatic digest of casein 1,0 g
⎯ sodium chloride 8,5 g
⎯ water 1 000 ml
5.2.3 Preparation
Dissolve the components in water by mixing whilst heating. Dispense into suitable containers. Sterilize in the
autoclave at 121 °C for 15 min.
After sterilization and cooling down, the pH shall be equivalent to 7,0 ± 0,2 when measured at room
temperature.
5.3 Culture media
5.3.1 General
Culture media may be prepared using the descriptions provided below or from dehydrated culture media
according to the instructions of the manufacturer. The instructions provided by the supplier of the media
should be followed.
NOTE Ready to use media may be used when their composition and/or growth yields are comparable to those of the
formulas given herein.
5.3.2 Agar medium for validation (soybean–casein digest agar medium or tryptic soy agar)
5.3.2.1 Composition
⎯ pancreatic digest of casein 15,0 g
⎯ papaic digest of soybean meal 5,0 g
⎯ sodium chloride 5,0 g
⎯ agar 15,0 g
⎯ water 1 000 ml
5.3.2.2 Preparation
Dissolve the components or the dehydrated complete medium in the water by mixing whilst heating. Dispense
the medium into suitable containers. Sterilize in the autoclave at 121 °C for 15 min.
After sterilization and cooling down, the pH shall be equivalent to 7,3 ± 0,2 when measured at room
temperature.
© ISO 2006 – All rights reserved 3
---------------------- Page: 8 ----------------------
ISO 22717:2006(E)
5.3.3 Enrichment broth
5.3.3.1 Eugon LT 100 broth
5.3.3.1.1 General
This medium contains ingredients that neutralize inhibitory substances present in the sample: lecithin and
polysorbate 80, and dispersing agent: octoxynol 9.
5.3.3.1.2 Composition
⎯ pancreatic digest of casein 15,0 g
⎯ papaic digest of soybean meal 5,0 g
⎯ L-cystine 0,7 g
⎯ sodium chloride 4,0 g
⎯ sodium sulfite 0,2 g
⎯ glucose 5,5 g
⎯ egg lecithin 1,0 g
⎯ polysorbate 80 5,0 g
⎯ octoxynol 9 1,0 g
⎯ water 1 000 ml
5.3.3.1.3 Preparation
Dissolve the components, one after another, in boiling water – polysorbate 80, octoxynol 9 and egg lecithin
until their complete dissolution. Dissolve the other components by mixing whilst heating. Dispense the medium
into suitable containers. Sterilize in the autoclave at 121 °C for 15 min.
After sterilization and cooling down, the pH shall be equivalent to 7,0 ± 0,2 when measured at room
temperature.
5.3.3.2 Other enrichment broths
Other enrichment broths may be used as appropriate (see Annex A).
5.3.4 Selective agar medium for isolation of Pseudomonas aeruginosa
5.3.4.1 Cetrimide agar medium
5.3.4.1.1 Composition
⎯ pancreatic digest of gelatin 20,0 g
⎯ magnesium chloride 1,4 g
⎯ potassium sulfate 10,0 g
⎯ cetrimide (cetyltrimethylammonium bromide) 0,3 g
4 © ISO 2006 – All rights reserved
---------------------- Page: 9 ----------------------
ISO 22717:2006(E)
⎯ agar 13,6 g
⎯ glycerin 10,0 ml
⎯ water 1 000 ml
5.3.4.1.2 Preparation
Dissolve all solid components in the water, and add the glycerin. Heat, with frequent agitation, and boil for
1 min to effect dissolution.
Dispense in suitable flasks and sterilize at 121 °C for 15 min.
Af
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 22717
Première édition
2006-02-01
Cosmétiques — Microbiologie —
Recherche de Pseudomonas aeruginosa
Cosmetics — Microbiology — Detection of Pseudomonas aeruginosa
Numéro de référence
ISO 22717:2006(F)
©
ISO 2006
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 22717:2006(F)
PDF – Exonération de responsabilité
Le présent fichier PDF peut contenir des polices de caractères intégrées. Conformément aux conditions de licence d'Adobe, ce fichier
peut être imprimé ou visualisé, mais ne doit pas être modifié à moins que l'ordinateur employé à cet effet ne bénéficie d'une licence
autorisant l'utilisation de ces polices et que celles-ci y soient installées. Lors du téléchargement de ce fichier, les parties concernées
acceptent de fait la responsabilité de ne pas enfreindre les conditions de licence d'Adobe. Le Secrétariat central de l'ISO décline toute
responsabilité en la matière.
Adobe est une marque déposée d'Adobe Systems Incorporated.
Les détails relatifs aux produits logiciels utilisés pour la création du présent fichier PDF sont disponibles dans la rubrique General Info
du fichier; les paramètres de création PDF ont été optimisés pour l'impression. Toutes les mesures ont été prises pour garantir
l'exploitation de ce fichier par les comités membres de l'ISO. Dans le cas peu probable où surviendrait un problème d'utilisation,
veuillez en informer le Secrétariat central à l'adresse donnée ci-dessous.
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2006
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée sous
quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l'accord écrit
de l'ISO à l'adresse ci-après ou du comité membre de l'ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax. + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Version française parue en 2007
Publié en Suisse
ii © ISO 2006 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 22717:2006(F)
Sommaire Page
Avant-propos. iv
Introduction . v
1 Domaine d'application. 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions. 2
4 Principe. 2
5 Diluants et milieux de culture. 3
5.1 Généralités . 3
5.2 Diluant pour la suspension bactérienne (Solution de tryptone et de chlorure de sodium). 3
5.3 Milieux de culture. 3
6 Appareillage et verrerie. 6
7 Souches de microorganismes. 6
8 Manipulation des produits cosmétiques et des échantillons de laboratoire . 6
9 Mode opératoire . 7
9.1 Recommandations générales. 7
9.2 Préparation de la suspension initiale dans le milieu liquide d'enrichissement. 7
9.3 Incubation du milieu liquide d'enrichissement ensemencé. 7
9.4 Recherche et identification de Pseudomonas aeruginosa. 8
10 Expression des résultats . 8
11 Neutralisation des propriétés antimicrobiennes du produit . 9
11.1 Généralités . 9
11.2 Préparation de l'inoculum. 9
11.3 Validation de la méthode de recherche. 9
12 Rapport d'essai . 10
Annexe A (informative) Autres milieux liquides d'enrichissement . 11
Annexe B (informative) Neutralisants de l'activité antimicrobienne des conservateurs et liquides
de rinçage . 13
Bibliographie . 14
© ISO 2006 – Tous droits réservés iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 22717:2006(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 22717 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 217, Cosmétiques.
iv © ISO 2006 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 22717:2006(F)
Introduction
Les examens microbiologiques des produits cosmétiques doivent être réalisés conformément à une analyse
de risque appropriée afin de garantir leur qualité et la sécurité des consommateurs.
L'analyse de risque microbiologique dépend de plusieurs paramètres tels que
⎯ l'altération potentielle des produits cosmétiques,
⎯ le caractère pathogène des microorganismes,
⎯ le site d'application du produit cosmétique (cheveux, peau, yeux, muqueuses, etc.),
⎯ la catégorie d'utilisateurs (adultes, enfants de moins de 3 ans).
Pour les cosmétiques et d'autres produits topiques, la recherche d'agents pathogènes pour la peau tels que
Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa et Candida albicans peut être justifiée. La recherche
d'autres sortes de microorganismes peut aussi présenter de l'intérêt, car ceux-ci (y compris des indicateurs de
contamination fécale, par exemple Escherichia coli) laissent penser à une défaillance de l'hygiène au cours du
processus de fabrication.
© ISO 2006 – Tous droits réservés v
---------------------- Page: 5 ----------------------
NORME INTERNATIONALE ISO 22717:2006(F)
Cosmétiques — Microbiologie — Recherche de Pseudomonas
aeruginosa
1 Domaine d'application
La présente Norme internationale donne des lignes directrices générales pour la recherche et l'identification
du microorganisme spécifié Pseudomonas aeruginosa dans les produits cosmétiques. Les microorganismes
considérés comme spécifiés dans la présente Norme internationale peuvent différer d'un pays à un autre,
suivant les pratiques ou les réglementations nationales.
Pour garantir la qualité du produit et la sécurité des consommateurs, il est recommandé d'effectuer une
analyse appropriée du risque microbiologique afin de déterminer les types de produit cosmétique qui relèvent
de la présente Norme internationale. Les produits dont on considère qu'ils présentent un faible risque
microbiologique comprennent ceux ayant une faible activité de l'eau, les produits hydroalcooliques, ceux
ayant des valeurs de pH extrêmes, etc.
La méthode décrite dans la présente Norme internationale repose sur la recherche de Pseudomonas
aeruginosa dans un milieu liquide non sélectif (milieu liquide d'enrichissement), suivie de son isolement sur un
milieu gélosé sélectif. D'autres méthodes peuvent être appropriées, en fonction du niveau de détection requis.
NOTE Pour la recherche de Pseudomonas aeruginosa, il est possible de réaliser des subcultures sur des milieux de
culture non sélectifs avant de procéder aux étapes appropriées d'identification (en utilisant, par exemple, des kits
d'identification).
En raison de la grande variété de produits cosmétiques entrant dans le champ d'application de la présente
Norme internationale, il se peut que la présente méthode ne soit pas adaptée, en tout point, à quelques
produits (par exemple certains produits non miscibles à l'eau). D'autres Normes internationales
[10]
(ISO 18415 ) peuvent convenir. Il est possible de remplacer les essais présentés ici par d'autres méthodes
(par exemple automatisées) sous réserve que leur équivalence ait été démontrée ou que la méthode ait été
validée par ailleurs.
2 Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l'application du présent document. Pour les
références datées, seule l'édition citée s'applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document de référence s'applique (y compris les éventuels amendements).
ISO 21148:2005, Cosmétiques — Microbiologie — Instructions générales pour les examens microbiologiques
EN 12353, Antiseptiques et désinfectants chimiques — Conservation des souches microbiennes utilisées
pour la détermination de l'activité bactéricide et fongicide
© ISO 2006 – Tous droits réservés 1
---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 22717:2006(F)
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s'appliquent.
3.1
produit
portion d'un produit cosmétique identifié, reçue au laboratoire pour essais
3.2
échantillon
portion du produit (au moins 1 g ou 1 ml) utilisée lors de l'essai pour préparer la suspension initiale
3.3
suspension initiale
suspension (ou solution) de l'échantillon dans un volume défini d'un milieu liquide d'enrichissement
3.4
dilution(s) de l'échantillon
dilution(s) de la suspension initiale
3.5
microorganisme spécifié
bactérie aérobie mésophile ou levure qui est indésirable dans un produit cosmétique et qui est reconnue
comme étant une espèce pathogène pour la peau, susceptible d'être néfaste pour la santé humaine ou
considérée comme indication de défaillance de l'hygiène dans le processus de fabrication
3.6
Pseudomonas aeruginosa
bacille Gram négatif mobile, colonies lisses pigmentées de couleur marron ou verdâtre
NOTE 1 Les principales caractéristiques pour l'identification sont les suivantes: croissance sur milieu sélectif gélose
cétrimide, oxydase positive, production de pigments fluorescents diffusibles et production de pigment phénazine soluble
(pyocyanine) dans les milieux appropriés.
NOTE 2 Pseudomonas aeruginosa peut être isolé à partir d'une grande variété de sources environnementales,
notamment l'eau; il est capable de contaminer un grand nombre de substrats différents. Il peut être à l'origine d'infections
cutanées ou oculaires chez l'homme. Sa présence est donc indésirable dans les produits cosmétiques en raison de son
caractère potentiellement pathogène et de sa capacité à modifier les propriétés physicochimiques de la formulation du
cosmétique.
3.7
milieu liquide d'enrichissement
milieu liquide non sélectif contenant des neutralisants et/ou des agents dispersants appropriés, validé pour le
produit en essai
4 Principe
La première étape du mode opératoire est de procéder à l'enrichissement en utilisant un milieu liquide non
sélectif pour augmenter le nombre de microorganismes, de façon à éviter le risque d'inhibition par les
ingrédients sélectifs présents dans les milieux de culture sélectifs/différentiels.
La seconde étape de l'essai (isolement) est réalisée sur un milieu sélectif, avant les essais d'identification.
L'inhibition potentielle de la croissance microbienne par l'échantillon doit être neutralisée pour permettre la
[1]
recherche des microorganismes viables . Dans tous les cas et quelle que soit la méthode employée, la
[2], [3], [4]
neutralisation des propriétés antimicrobiennes du produit doit être vérifiée et validée .
2 © ISO 2006 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 7 ----------------------
ISO 22717:2006(F)
5 Diluants et milieux de culture
5.1 Généralités
Des instructions générales sont données dans l'ISO 21148. Lorsque le présent document mentionne
l'utilisation d'eau, cela doit être de l'eau distillée ou de l'eau purifiée comme spécifié dans l'ISO 21148.
Le milieu liquide d'enrichissement est utilisé pour disperser l'échantillon et pour augmenter la population
microbienne initiale. Il peut contenir des neutralisants si l'échantillon à soumettre à essai possède des
propriétés antimicrobiennes. L'efficacité de la neutralisation doit être démontrée (voir Article 11). L'Annexe B
fournit des informations relatives aux neutralisants appropriés.
Le milieu liquide d'enrichissement suivant peut être utilisé pour vérifier la présence de Pseudomonas
aeruginosa conformément à la présente Norme internationale, à condition d'avoir été validé conformément à
l'Article 11.
D'autres diluants et milieux de culture sont utilisables s'il peut être démontré que leur emploi convient.
5.2 Diluant pour la suspension bactérienne (Solution de tryptone et de chlorure de sodium)
5.2.1 Généralités
Le diluant est utilisé pour préparer la suspension bactérienne utilisée pour la validation (voir Article 11).
5.2.2 Composition
⎯ Tryptone, peptone pancréatique de caséine 1,0 g
⎯ Chlorure de sodium 8,5 g
⎯ Eau 1 000 ml
5.2.3 Préparation
Dissoudre les composants dans l'eau en mélangeant tout en chauffant. Répartir dans des récipients
appropriés. Stériliser à l'autoclave à 121 °C pendant 15 min.
Après stérilisation et refroidissement, le pH doit être de 7,0 ± 0,2, le mesurage étant effectué à la température
ambiante.
5.3 Milieux de culture
5.3.1 Généralités
Les milieux de culture peuvent être préparés comme indiqué ci-dessous ou à partir de milieux de culture
déshydratés conformément aux instructions du fabricant. Il convient de suivre les instructions données par le
fournisseur de ces milieux.
NOTE Il est possible d'utiliser des milieux prêts à l'emploi quand leur composition et/ou leurs performances de
croissance sont comparables à celles des formules indiquées ici.
© ISO 2006 – Tous droits réservés 3
---------------------- Page: 8 ----------------------
ISO 22717:2006(F)
5.3.2 Milieu gélosé pour validation [milieu gélosé aux peptones de caséine et de soja ou gélose
trypto-caséine soja (TSA)]
5.3.2.1 Composition
⎯ Peptone pancréatique de caséine 15,0 g
⎯ Peptone papaïque de soja 5,0 g
⎯ Chlorure de sodium 5,0 g
⎯ Gélose 15,0 g
⎯ Eau 1 000 ml
5.3.2.2 Préparation
Dissoudre les composants ou le milieu complet déshydraté dans l'eau en mélangeant tout en chauffant.
Répartir dans des récipients appropriés. Stériliser à l'autoclave à 121 °C pendant 15 min.
Après stérilisation et refroidissement, le pH doit être de 7,3 ± 0,2, le mesurage étant effectué à la température
ambiante.
5.3.3 Milieu liquide d'enrichissement
5.3.3.1 Bouillon Eugon LT 100
5.3.3.1.1 Généralités
Ce milieu contient des ingrédients qui neutralisent les substances inhibitrices présentes dans l'échantillon:
Lécithine et polysorbate 80 ainsi qu'un agent dispersant: octoxynol 9.
5.3.3.1.2 Composition
⎯ Peptone pancréatique de caséine 15,0 g
⎯ Peptone papaïque de soja 5,0 g
⎯ L-cystine 0,7 g
⎯ Chlorure de sodium 4,0 g
⎯ Sulfite de sodium 0,2 g
⎯ Glucose 5,5 g
⎯ Lécithine d'œuf 1,0 g
⎯ Polysorbate 80 5,0 g
⎯ Octoxynol 9 1,0 g
⎯ Eau 1 000 ml
4 © ISO 2006 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 9 ----------------------
ISO 22717:2006(F)
5.3.3.1.3 Préparation
Dissoudre les composants les uns après les autres dans l'eau bouillante — polysorbate 80, octoxynol 9 et
Lécithine d'œuf jusqu'à dissolution complète. Dissoudre les autres composants en mélangeant tout en
chauffant. Répartir le milieu dans des récipients appropriés. Stériliser à l'autoclave à 121 °C pendant 15 min.
Après stérilisation et refroidissement, le pH doit être égal à 7,0 ± 0,2, le mesurage étant effectué à la
température ambiante.
5.3.3.2 Autres milieux liquides d'enrichissement
D'autres milieux liquides d'enrichissement peuvent être utilisés s'ils sont appropriés (voir Annexe A).
5.3.4 Milieu gélosé sélectif pour isolement de Pseudomonas aeruginosa
5.3.4.1 Milieu gélosé-cétrimide
5.3.4.1.1 Composition
⎯ Peptone pancréatique de gélatine 20,0 g
⎯ Chlorure de magnésium 1,4 g
⎯ Sulfate de potassium 10,0 g
⎯ Cétrimide (bromure de cétyltriméthylammonium) 0,3 g
⎯ Gélose 13,6 g
⎯ Glycérine 10,0 ml
⎯ Eau 1 000 ml
5.3.4.1.2 Préparation
Dissoudre tous les composants solides dans l'eau et ajouter la glycérine. Chauffer en agitant souvent et
laisser bouillir pendant 1 min pour dissoudre.
Répartir dans des récipients app
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.