ISO/TS 21569-6:2016

Horizontal methods for molecular biomarker analysis — Methods of analysis for the detection of genetically modified organisms and derived products — Part 6: Real-time PCR based screening methods for the detection of cry1Ab/Ac and Pubi-cry DNA sequences

ISO/TS 21569-6:2016 specifies a procedure for the detection of a DNA sequence of the modified cry1Ab/Ac gene and a procedure for the detection of the DNA transition sequence between the maize ubiquitin promoter (Pubi) and the cry1Ab/Ac gene. The modified cry1Ab/Ac gene and the Pubi-cry construct are frequently found in genetically modified Bt plants. Both detection methods are based on real-time PCR and can be used for qualitative screening purposes. For identification and quantification of a specific genetically modified plant (event) a follow-up analysis has to be carried out. ISO/TS 21569-6:2016 is applicable for the analysis of DNA extracted from foodstuffs. It may also be suitable for the analysis of DNA extracted from other products such as feedstuffs and seeds. The application of these methods requires the extraction of an adequate amount of amplifiable DNA from the relevant matrix.

Méthodes horizontales d'analyse moléculaire de biomarqueurs — Méthodes d'analyse pour la détection des organismes génétiquement modifiés et des produits dérivés — Partie 6: Méthodes de criblage par PCR en temps réel pour la détection des séquences ADN cry1Ab/Ac et Pubi-cry

L'ISO/TS 21569-6:2016 spécifie une méthode de détection d'une séquence d'ADN du gène cry1Ab/Ac modifié et une méthode de détection de la séquence d'ADN de transition entre le promoteur de l'ubiquitine du maïs (Pubi) et le gène cry1Ab/Ac. Le gène cry1Ab/Ac modifié et le construit Pubi-cry sont fréquemment observés dans les plantes génétiquement modifiées contenant le gène Bt. Les deux méthodes sont basées sur une méthode par PCR en temps réel et peuvent être utilisées à des fins de criblage qualitatif. Pour l'identification et la quantification d'une plante génétiquement modifiée (événement) spécifique, une analyse complémentaire doit être effectuée. L'ISO/TS 21569-6:2016 est applicable à l'analyse de l'ADN extrait de produits alimentaires. Il peut être également utilisé pour analyser l'ADN extrait d'autres produits tels que des aliments pour animaux et des semences. L'application de ces méthodes exige qu'une quantité adéquate d'ADN amplifiable soit extraite de la matrice étudiée.

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 01-Nov-2016
• ICS: 67.050 - General methods of tests and analysis for food products
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 16 - Horizontal methods for molecular biomarker analysis
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 16 - Horizontal methods for molecular biomarker analysis
• Current Stage: 9092 - International Standard to be revised
• Completion Date: 04-Apr-2024

Standards Content (Sample)

TECHNICAL ISO/TS
SPECIFICATION 21569-6
First edition
2016-11-01
Horizontal methods for molecular
biomarker analysis — Methods
of analysis for the detection of
genetically modified organisms and
derived products —
Part 6:
Real-time PCR based screening
methods for the detection of
cry1Ab/Ac and Pubi-cry DNA
sequences
Méthodes horizontales d’analyse moléculaire de biomarqueurs —
Méthodes d’analyse pour la détection des organismes
génétiquement modifiés et des produits dérivés —
Partie 6: Méthodes de dépistage PCR en temps réel pour la détection
de séquences ADN cry1Ab/Ac et Pubi-cry
Reference number
ISO/TS 21569-6:2016(E)
©
ISO 2016

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO/TS 21569-6:2016(E)

COPYRIGHT PROTECTED DOCUMENT
© ISO 2016, Published in Switzerland
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized otherwise in any form
or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting on the internet or an intranet, without prior
written permission. Permission can be requested from either ISO at the address below or ISO’s member body in the country of
the requester.
ISO copyright office
Ch. de Blandonnet 8 • CP 401
CH-1214 Vernier, Geneva, Switzerland
Tel. [phone]
Fax [phone]
[e-mail]
www.iso.org
ii © ISO 2016 – All rights reserved

---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO/TS 21569-6:2016(E)

Contents Page
Foreword .iv
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
5 Reagents and materials . 2
5.1 General . 2
5.2 PCR reagents . 2
6 Apparatus . 3
7 Procedure. 3
7.1 Preparation of test samples . 3
7.2 Preparation of DNA extracts . 3
7.3 PCR setup . 3
7.4 Temperature-time programme . 4
8 Accept/reject criteria . 4
8.1 General . 4
8.2 Identification .
...

SPÉCIFICATION ISO/TS
TECHNIQUE 21569-6
Première édition
2016-11-01
Méthodes horizontales d’analyse
moléculaire de biomarqueurs —
Méthodes d’analyse pour la détection
des organismes génétiquement
modifiés et des produits dérivés —
Partie 6:
Méthodes de criblage par PCR en
temps réel pour la détection des
séquences ADN cry1Ab/Ac et Pubi-cry
Horizontal methods for molecular biomarker analysis — Methods
of analysis for the detection of genetically modified organisms and
derived products —
Part 6: Real-time PCR based screening methods for the detection of
cry1Ab/Ac and Pubi-cry DNA sequences
Numéro de référence
ISO/TS 21569-6:2016(F)
©
ISO 2016

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO/TS 21569-6:2016(F)

DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2016, Publié en Suisse
Droits de reproduction réservés. Sauf indication contraire, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée
sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie, l’affichage sur
l’internet ou sur un Intranet, sans autorisation écrite préalable. Les demandes d’autorisation peuvent être adressées à l’ISO à
l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Ch. de Blandonnet 8 • CP 401
CH-1214 Vernier, Geneva, Switzerland
Tel. [phone]
Fax [phone]
[e-mail]
www.iso.org
ii © ISO 2016 – Tous droits réservés

---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO/TS 21569-6:2016(F)

Sommaire Page
Avant-propos .iv
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 2
5 Réactifs et matériaux . 2
5.1 Généralités . 2
5.2 Réactifs PCR . 2
6 Appareillage . 3
7 Mode opératoire. 3
7.1 Préparation des échantillons pour essai . 3
7.2 Préparation des extraits d’ADN . 3
7.3 Réaction PCR . 3
7.4 Programme d’amplification . 4
8 Critères d’acceptation/rejet . 4
8.1 Généralités . 4
8.2 Identification .
...