ISO 12872:2010

Olive oils and olive-pomace oils — Determination of the 2-glyceryl monopalmitate content

ISO 12872:2010 specifies a procedure for the determination of the content, as a percentage mass fraction, of 2-glyceryl monopalmitate content in olive oils and olive-pomace oils that are liquid at ambient temperature (20 °C).

Huiles d'olive et huiles de grignons d'olive — Détermination de la teneur en 2-glycéryl monopalmitate

L'ISO 12872:2010 spécifie une méthode pour la détermination de la teneur, sous forme de fraction massique en pourcentage, en 2-glycéryl monopalmitate des huiles d'olive et des huiles de grignons d'olive liquides à température ambiante (20 °C).

General Information

• Status: Withdrawn
• Publication Date: 27-Apr-2010
• ICS: 67.200.10 - Animal and vegetable fats and oils
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 11 - Animal and vegetable fats and oils
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 11 - Animal and vegetable fats and oils
• Current Stage: 9599 - Withdrawal of International Standard
• Completion Date: 30-Aug-2022

Relations

• Revised: ISO 12872:2022 - Olive oils and olive-pomace oils — Determination of the 2-glyceryl monopalmitate content
• Effective Date: 06-Jun-2022

Standards Content (Sample)

МЕЖДУНАРОДНЫЙ ISO
СТАНДАРТ 12872
Первое издание
2010-05-01


Масла оливковые и оливковые масла
из жмыха. Определение содержания
2-глицерилмонопальмитата
Olive oils and olive-pomace oils — Determination of the 2-glyceryl
monopalmitate content




Ответственность за подготовку русской версии несёт GOST R
(Российская Федерация) в соответствии со статьёй 18.1 Устава ISO
Ссылочный номер
ISO 12872:2010(R)
©
ISO 2010

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 12872:2010(R)
Отказ от ответственности при работе в PDF
Настоящий файл PDF может содержать интегрированные шрифты. В соответствии с условиями лицензирования, принятыми
фирмой Adobe, этот файл можно распечатать или смотреть на экране, но его нельзя изменить, пока не будет получена
лицензия на интегрированные шрифты и они не будут установлены на компьютере, на котором ведется редактирование. В
случае загрузки настоящего файла заинтересованные стороны принимают на себя ответственность за соблюдение
лицензионных условий фирмы Adobe. Центральный секретариат ISO не несет никакой ответственности в этом отношении.
Adobe – торговый знак фирмы Adobe Systems Incorporated.
Подробности, относящиеся к программным продуктам, использованные для создания настоящего файла PDF, можно найти в
рубрике General Info файла; параметры создания PDF были оптимизированы для печати. Были приняты во внимание все
меры предосторожности с тем, чтобы обеспечить пригодность настоящего файла для использования комитетами-членами
ISO. В редких случаях возникновения проблемы, связанной со сказанным выше, просьба проинформировать Центральный
секретариат по адресу, приведенному ниже.


ДОКУМЕНТ ЗАЩИЩЕН АВТОРСКИМ ПРАВОМ


© ISO 2010
Все права сохраняются. Если не указано иное, никакую часть настоящей публикации нельзя копировать или использовать в
какой-либо форме или каким-либо электронным или механическим способом, включая фотокопии и микрофильмы, без
предварительного письменного согласия ISO по соответствующему адресу, указанному ниже, или комитета-члена ISO в стране
заявителя.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail [e-mail]
Web www.iso.org
Опубликовано в Швейцарии

ii © ISO 2010 – Все права сохраняются

---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 12872:2010(R)
Содержание Страница
Предисловие .iv
Введение .v
1  Область применения .1
2  Нормативные ссылки .1
3  Термины и определения .1
4  Принцип.1
5  Реактивы .1
6  Аппаратура.2
7  Отбор проб.3
8  Подготовка пробы для испытания .3
9  Методика .4
9.1  Подготовительные стадии .4
9.2  Колоночная хроматография.4
9.3  Гидролиз под действием панкреатической липазы.5
9.4  Приготовление силилированных производных и газовая хроматография .5
9.5  Газовая хроматография.5
10  Выражение результатов .6
11  Прецизионность.6
11.1  Межлабораторное испытание.6
11.2  Повторяемость .6
11.3  Воспроизводимость .6
12  Протокол испытания.6
Приложение A (информативное) Хроматограммы .7
Приложение B (информативное) Результаты межлабораторного испытания .10
Приложение C (информативное) Приготовление и активность липазы.11
Библиография.13

© ISO 2010 – Все права сохраняются iii

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 12872:2010(R)
Предисловие
Международная организация по стандартизации (ISO) является всемирной федерацией национальных
организаций по стандартизации (комитетов-членов ISO). Разработка международных стандартов
обычно осуществляется техническими комитетами ISO. Каждый комитет-член ISO, заинтересованный
в деятельности, для которой был создан технический комитет, имеет право быть представленным в
этом комитете. Международные организации, правительственные и неправительственные, имеющие
связи с ISO, также принимают участие в работах. ISO непосредственно сотрудничает с
Международной электротехнической комиссией (IEC) по всем вопросам электротехнической
стандартизации.
Международные стандарты разрабатываются в соответствии с правилами, приведенными в
Директивах ISO/IEC, Часть 2.
Основная задача технических комитетов состоит в подготовке международных стандартов. Проекты
международных стандартов, одобренные техническими комитетами, рассылаются комитетам-членам
на голосование. Их опубликование в качестве международных стандартов требует одобрения, по
меньшей мере, 75 % комитетов-членов, принимающих участие в голосовании.
Следует иметь в виду, что некоторые элементы настоящего документа могут быть объектом патентных
прав. ISO не должен нести ответственность за идентификацию какого-либо одного или всех патентных
прав.
ISO 12872 разработан Техническим комитетом ISO/TC 34, Пищевые продукты, Подкомитетом SC 11,
Животные и растительные жиры и масла.
iv © ISO 2010 – Все права сохраняются

---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 12872:2010(R)
Введение
[6]
Международный оливковый совет (IOC) опубликовал документ COI/T.20/Doc. 23:2003 , который
является составной частью Торговых норм, применяемых к оливковому маслу и оливковому маслу,
полученному из жмыха. Документ COI/T.20/Doc. 23 применялся к оливковому маслу и оливковому
маслу, полученному из жмыха, и использовался для установления различия между рафинированным
оливковым маслом однократного прессования и нерафинированным оливковым маслом из жмыха.
Оливковый жмых представляет собой остаточную пасту, которая все еще содержит переменное
количество воды и масла после прессования или центрифугирования.
В 2008 году Совет IOC представил этот документ ISO/TC 34/SC 11 для одобрения в качестве
международного стандарта.
© ISO 2010 – Все права сохраняются v

---------------------- Page: 5 ----------------------
МЕЖДУНАРОДНЫЙ СТАНДАРТ ISO 12872:2010(R)

Масла оливковые и оливковые масла из жмыха.
Определение содержания 2-глицерилмонопальмитата
1 Область применения
Настоящий международный стандарт устанавливает методику определения содержания 2-
глицерилмонопальмитата, в процентах массовой доли, в оливковом масле и в оливковом масле из
жмыха, которые являются жидкими при температуре окружающей среды (20 °C).
[6]
ПРИМЕЧАНИЕ Этот международный стандарт разработан на основе документа COI/T.20/Doc. 23:2006 .
2 Нормативные ссылки
Следующие ссылочные нормативные документы являются обязательными при применении данного
документа. Для жестких ссылок применяется только цитированное издание документа. Для плавающих
ссылок необходимо использовать самое последнее издание нормативного ссылочного документа
(включая любые изменения).
ISO 661, Жиры и масла животные и растительные. Приготовление пробы для испытания
3 Термины и определения
Применительно к этому документу используются следующие термины и определения.
3.1
содержание 2-глицерилмонопальмитата
2-glyceryl monopalmitate content
массовая доля 2-глицерилмонопальмитата в моноацилглицероловой фракции, определенного в
соответствии с методом, установленным в этом международном стандарте
ПРИМЕЧАНИЕ Содержание 2- глицерилмонопальмитата выражают в процентах.
4 Принцип
Подвергают масло после соответствующей подготовки действию панкреатической липазы. Имеет
место частичный гидролиз, специфичный для положений 1 и 3 триацилглицероловой молекулы,
поэтому в качестве продуктов реакции образуются 2-моноацилглцеролы. Определяют процентное
содержание 2-глицерилмонопальмитата в моноацилглицероловой фракции после силилирования
методом капиллярной газовой хроматографии.
5 Реактивы
ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЕ — Выполняют любые местные регламентирующие правила, которые
устанавливают требования к обращению с опасными веществами. Необходимо соблюдать
технические, организационные и персональные меры безопасности.
© ISO 2010 – Все права сохраняются 1

---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 12872:2010(R)
При анализе, если не указано иначе, используют только реактивы признанного аналитического
качества и дистиллированную или деминерализованную воду либо воду эквивалентной чистоты.
5.1 Силикагель, с размером частиц от 0,063 мм до 0,200 мм (70/280 меш), приготовленный
следующим образом: помещают силикагель в фарфоровую чашку, сушат в сушильном шкафу при
температуре 160 °C в течение 4 ч, затем охлаждают при температуре охлаждающей среды в
эксикаторе. Добавляют объем воды, который эквивалентен 5 % массы силикагеля, следующим
образом: взвешивают 152 г силикагеля в колбе Эрленмейера вместимостью 500 мл, добавляют 8 г
воды, закрывают пробкой и осторожно гомогенизируют. Оставляют для отстаивания по меньшей мере
на 12 ч перед использованием.
5.2 н-Гексан, хроматографического качества.
5.3 Изопропанол.
5.4 Смесь изопропанол-вода, объемные доли 50 мл/100 мл.
5.5 Панкреатическая липаза, активностью от 2,0 до 10 единиц липазы на миллиграмм (см.
Приложение C).
5.6 Буферный раствор трис-(оксиметил)аминометана: готовят водный раствор (1 моль/л) с pH 8
и смешивают с концентрированной HCl, объемные доли 50 мл/100 мл.
5.7 Холат натрия, специального ферментативного качества, водный раствор, массовая доля
0,1 г/100 г.
Используют этот раствор в пределах 15 дней после приготовления.
5.8 Хлорид кальция, водный раствор, массовая доля 22 г/100 г.
5.9 Диэтиловый эфир, хроматографического качества.
5.10 Элюирующий растворитель: смесь н-гептан-диэтиловый эфир, объемная доля н-гексана
87 мл/100 мл и диэтилового эфира 13 мл/100 мл.
5.11 Гидроксид натрия, водный раствор, массовая доля 12 г/100 г.
5.12 Фенолфталеин, этанольный раствор, массовая концентрация 1 г/100 мл.
5.13 Газ-носитель: водород или гелий, хроматографического качества.
5.14 Вспомогательные газы: водород, не содержащий влаги и органических соединений, и
синтетический воздух, газ хроматографического качества.
5.15 Реактив для силилирования: смесь пиридина, гексаметилдисилазана (HMDS) и
триметилхлорсилана (TMCS); объемные доли: 9 мл/13 мл, 3 мл/13 мл и 1 мл/13 мл соответственно.
5.16 Стандартные пробы: чистые моноацилглицеролы и смеси моноацилглицеролов известного
состава, аналогичного составу пробы.
6 Аппаратура
Обычная лабораторная аппаратура и в частности следующая.
6.1 Колбы Эрленмейера, вместимостью 25 мл.
6.2 Химические стаканы, вместимостью 100 мл, 250 мл и 300 мл.
6.3 Стеклянная хроматографическая колонка, внутренним диаметром от 21 мм до 23 мм, длиной
400 мм, с мембраной и запорным краном.
2 © ISO 2010 – Все права сохраняются

---------------------- Page: 7 ----------------------
ISO 12872:2010(R)
[2]
6.4 Мерные цилиндры, вместимостью 10 мл, 50 мл, 100 мл и 200 мл, ISO 4788 класс A.
6.5 Круглодонные колбы, вместимостью 100 мл и 250 мл.
6.6 Роторный испаритель.
6.7 Центрифужные пробирки, с коническим дном, вместимостью 10 мл и пришлифованной
стеклянной пробкой.
6.8 Центрифуга, подходящая для пробирок вместимостью 10 мл и 100 мл.
6.9 Водяная баня, способная поддерживать температуру (40 ± 0,5) °C.
[1]
6.10 Градуированные пипетки, вместимостью 1 мл и 2 мл, ISO 835 класс A.
6.11 Шприц для подкожных инъекций, вместимостью 1 мл.
6.12 Микрошприц, вместимостью 100 мкл.
6.13 Делительная воронка, вместимостью 1 000 мл.
6.14 Газовый хроматограф, пригодный для использования с капиллярными колонками,
оборудованный компонентами, указанными в 6.14.1 – 6.14.5.
6.14.1 Холодный инжектор для ввода проб непосредственно в колонку.
6.14.2 Пламенно-ионизационный детектор.
6.14.3 Термостат колонки, способный поддерживать температуру в пределах ± 1 °C.
6.14.4 Интегратор на основе компьютера.
6.14.5 Капиллярная колонка из плавленого кварца, длиной от 8 м до 12 м, внутренним диаметром
от 0,25 мм до 0,32 мм, покрытая метилполисилоксаном или 5 % фенилметилполисилоксаном,
толщиной пленки от 0,10 мкм до 0,30 мкм, пригодная для использования при 370 °C.
6.15 Микрошприц, вместимостью 10 мкл, с закаленной иглой, минимальной длиной 7,5 см,
пригодный для ввода проб непосредственно в колонку.
7 Отбор проб
Отбор проб не включен в метод, установленный в этом международном стандарте. Рекомендуемый
[3]
метод отбора проб приводится в ISO 5555 .
Важно поставлять в лабораторию действительно представительную пробу, которая не была
подвергнута порче или изменению во время транспортировки или хранения.
8 Подготовка пробы для испытания
Готовят пробу для испытания в соответствии с ISO 661. В случае масел со свободной кислотностью
свыше 3 % требуется стадия нейтрализации, как указано здесь.
Вводят 50 г масла в делительную воронку вместимостью 1 000 мл (6.13) и растворяют его в 200 мл
н-гексана (5.2). Добавляют 100 мл изопропанола (5.3) и объем раствора гидроксида натрия (5.11),
соответствующий свободной кислотности масла плюс еще 5 %. Энергично встряхивают в течение
1 мин, добавляют 100 мл воды, снова встряхивают и оставляют для отстаивания.
После разделения удаляют нижний мылкий слой. Также удаляют какой-либо промежуточный слой
слизи и нерастворимых веществ, которые часто образуются. Промывают раство
...

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 12872
First edition
2010-05-01


Olive oils and olive-pomace oils —
Determination of the 2-glyceryl
monopalmitate content
Huiles d'olive et huiles de grignons d'olive — Détermination de la teneur
en 2-glycéryl monopalmitate





Reference number
ISO 12872:2010(E)
©
ISO 2010

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 12872:2010(E)
PDF disclaimer
This PDF file may contain embedded typefaces. In accordance with Adobe's licensing policy, this file may be printed or viewed but
shall not be edited unless the typefaces which are embedded are licensed to and installed on the computer performing the editing. In
downloading this file, parties accept therein the responsibility of not infringing Adobe's licensing policy. The ISO Central Secretariat
accepts no liability in this area.
Adobe is a trademark of Adobe Systems Incorporated.
Details of the software products used to create this PDF file can be found in the General Info relative to the file; the PDF-creation
parameters were optimized for printing. Every care has been taken to ensure that the file is suitable for use by ISO member bodies. In
the unlikely event that a problem relating to it is found, please inform the Central Secretariat at the address given below.


COPYRIGHT PROTECTED DOCUMENT


©  ISO 2010
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means,
electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without permission in writing from either ISO at the address below or
ISO's member body in the country of the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail [e-mail]
Web www.iso.org
Published in Switzerland

ii © ISO 2010 – All rights reserved

---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 12872:2010(E)
Contents Page
Foreword .iv
Introduction.v
1 Scope.1
2 Normative references.1
3 Terms and definitions .1
4 Principle.1
5 Reagents.1
6 Apparatus.2
7 Sampling.3
8 Preparation of the test sample.3
9 Procedure.4
9.1 Preparatory steps .4
9.2 Column chromatography.4
9.3 Hydrolysis with pancreatic lipase.4
9.4 Preparation of the silylated derivatives and gas chromatography .5
9.5 Gas chromatography .5
10 Expression of results.5
11 Precision.6
11.1 Interlaboratory test.6
11.2 Repeatability .6
11.3 Reproducibility .6
12 Test report.6
Annex A (informative) Chromatograms .7
Annex B (informative) Results of an interlaboratory test .10
Annex C (informative) Preparation and activity of the lipase.11
Bibliography.13

© ISO 2010 – All rights reserved iii

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 12872:2010(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 12872 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 11, Animal
and vegetable fats and oils.
iv © ISO 2010 – All rights reserved

---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 12872:2010(E)
Introduction
As part of the Trade standard applying to olive oils and olive-pomace oils, the International Olive Council
[6]
(IOC) published COI/T.20/Doc. 23:2006 . COI/T.20/Doc. 23 was applicable to olive and olive-pomace oils
and was used to distinguish between lampante virgin olive oils and crude olive-pomace oils. Olive pomace is
the residual paste which still contains a variable amount of water and oil after pressing or centrifuging.
In 2008, the IOC submitted the document to ISO/TC 34/SC 11 for adoption as an International Standard.

© ISO 2010 – All rights reserved v

---------------------- Page: 5 ----------------------
INTERNATIONAL STANDARD ISO 12872:2010(E)

Olive oils and olive-pomace oils — Determination of the
2-glyceryl monopalmitate content
1 Scope
This International Standard specifies a procedure for the determination of the content, as a percentage mass
fraction, of 2-glyceryl monopalmitate in olive oils and olive-pomace oils that are liquid at ambient temperature
(20 °C).
[6]
NOTE This International Standard is based on COI/T.20/Doc. 23:2006 .
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced
document (including any amendments) applies.
ISO 661, Animal and vegetable fats and oils — Preparation of test sample
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
2-glyceryl monopalmitate content
mass fraction of 2-glyceryl monopalmitate in the monoacylglycerol fraction, determined according to the
method specified in this International Standard
NOTE The 2-glyceryl monopalmitate content is expressed as a percentage.
4 Principle
The oil, after suitable preparation, is subjected to the action of pancreatic lipase. A partial hydrolysis takes
place that is specific for positions 1 and 3 of the triacylglycerol molecule so that 2-monoacylglycerols are
obtained as reaction products. The percentage of 2-glyceryl monopalmitate in the monoacylglycerol fraction is
determined, after silylation, by capillary gas chromatography.
5 Reagents
WARNING — Comply with any local regulations which specify the handling of hazardous substances.
Technical, organizational and personal safety measures shall be followed.
During the analysis, unless otherwise stated, use only reagents of recognized analytical grade, and distilled or
demineralized water or water of equivalent purity.
© ISO 2010 – All rights reserved 1

---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 12872:2010(E)
5.1 Silica gel, with a particle size of 0,063 mm to 0,200 mm (70/280 mesh), prepared as follows: put the
silica gel into a porcelain cup, dry in an oven at 160 °C for 4 h, then cool at ambient temperature in a
desiccator. Add a volume of water equivalent to 5 % of the mass of the silica gel as follows: weigh 152 g of
silica gel into a 500 ml Erlenmeyer flask, add 8 g of water, stopper and homogenize carefully. Leave to settle
for at least 12 h before using.
5.2 n-Hexane, chromatography grade.
5.3 Isopropanol.
5.4 Isopropanol-water mixture, volume fractions 50 ml/100 ml.
5.5 Pancreatic lipase, activity between 2,0 and 10 lipase units per milligram (see Annex C).
5.6 Buffer solution of tris(hydroxymethyl)aminomethane: prepare an aqueous solution (1 mol/l) with
pH 8 and mix with concentrated HCl, volume fractions 50 ml/100 ml.
5.7 Sodium cholate, special enzyme grade, aqueous solution, mass fraction 0,1 g/100 g.
Use this solution within 15 days of preparation.
5.8 Calcium chloride, aqueous solution, mass fraction 22 g/100 g.
5.9 Diethyl ether, chromatography grade.
5.10 Elution solvent: mixture of n-hexane-diethyl ether, volume fraction of n-hexane 87 ml/100 ml and of
diethyl ether 13 ml/100 ml.
5.11 Sodium hydroxide, aqueous solution, mass fraction 12 g/100 g.
5.12 Phenolphthalein, ethanolic solution, mass concentration 1 g/100 ml.
5.13 Carrier gas: hydrogen or helium, gas chromatography grade.
5.14 Auxiliary gases: hydrogen, free from moisture and organic substances, and synthetic air, gas
chromatography grade.
5.15 Silylation reagent: mixture of pyridine, hexamethyldisilazane (HMDS) and trimethylchlorosilane
(TMCS); volume fractions: 9 ml/13 ml, 3 ml/13 ml, and 1 ml/13 ml, respectively.
5.16 Reference samples: pure monoacylglycerols and mixtures of monoacylglycerols with a known
composition similar to that of the sample.
6 Apparatus
Usual laboratory equipment and in particular the following.
6.1 Erlenmeyer flasks, of capacity 25 ml.
6.2 Beakers, of capacities 100 ml, 250 ml, and 300 ml.
6.3 Glass chromatography column, 21 mm to 23 mm internal diameter, 400 mm in length, with septum
and stopcock.
[2]
6.4 Measuring cylinders, of capacities 10 ml, 50 ml, 100 ml, and 200 ml, ISO 4788 class A.
6.5 Round-bottomed flasks, of capacities 100 ml and 250 ml.
6.6 Rotary evaporator.
2 © ISO 2010 – All rights reserved

---------------------- Page: 7 ----------------------
ISO 12872:2010(E)
6.7 Centrifuge tubes, conical bottom, of capacity 10 ml, with ground-glass stopper.
6.8 Centrifuge, suitable for 10 ml and 100 ml tubes.
6.9 Water bath, capable of maintaining a temperature of (40 ± 0,5) °C.
[1]
6.10 Graduated pipettes, of capacities 1 ml and 2 ml, ISO 835 class A.
6.11 Hypodermic syringe, 1 ml.
6.12 Microsyringe, 100 µl.
6.13 Separating funnel, 1 000 ml.
6.14 Gas chromatograph, suitable for use with capillary columns, equipped with the components specified
in 6.14.1 to 6.14.5.
6.14.1 Cold on-column injector.
6.14.2 Flame ionization detector.
6.14.3 Column oven, capable of maintaining the temperature to within ± 1 °C.
6.14.4 Computer-based integration system.
6.14.5 Fused silica capillary column, of length 8 m to 12 m and internal diameter 0,25 mm to 0,32 mm,
coated with methylpolysiloxane or 5 % phenyl methylpolysiloxane, with a film thickness of 0,10 µm to 0,30 µm,
suitable for use at 370 °C.
6.15 Microsyringe, 10 µl, with hardened needle, of minimum length 7,5 cm in length, suitable for on-column
injection.
7 Sampling
Sampling is not part of the method specified in this International Standard. A recommended sampling method
[3]
is given in ISO 5555 .
It is important that the laboratory receive a truly representative sample which has not been damaged or
changed during transport or storage.
8 Preparation of the test sample
Prepare the test sample in accordance with ISO 661. Oils with a free acidity greater than 3 % require a
neutralization step as specified here.
Introduce 50 g of the oil into a 1 000 ml separating funnel (6.13) and dissolve it in 200 ml of n-hexane (5.2).
Add 100 ml of isopropanol (5.3) and a volume of sodium hydroxide solution (5.11) corresponding to the free
acidity of the oil plus an excess of 5 %. Shake vigorously for 1 min, add 100 ml of water, shake again and
leave to settle.
After separation, remove the lower soapy layer. Also remove any intermediate layer of mucilage and insoluble
mat
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 12872
Première édition
2010-05-01



Huiles d'olive et huiles de grignons
d'olive — Détermination de la teneur en
2-glycéryl monopalmitate
Olive oils and olive-pomace oils — Determination of the 2-glyceryl
monopalmitate content





Numéro de référence
ISO 12872:2010(F)
©
ISO 2010

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 12872:2010(F)
PDF – Exonération de responsabilité
Le présent fichier PDF peut contenir des polices de caractères intégrées. Conformément aux conditions de licence d'Adobe, ce fichier
peut être imprimé ou visualisé, mais ne doit pas être modifié à moins que l'ordinateur employé à cet effet ne bénéficie d'une licence
autorisant l'utilisation de ces polices et que celles-ci y soient installées. Lors du téléchargement de ce fichier, les parties concernées
acceptent de fait la responsabilité de ne pas enfreindre les conditions de licence d'Adobe. Le Secrétariat central de l'ISO décline toute
responsabilité en la matière.
Adobe est une marque déposée d'Adobe Systems Incorporated.
Les détails relatifs aux produits logiciels utilisés pour la création du présent fichier PDF sont disponibles dans la rubrique General Info
du fichier; les paramètres de création PDF ont été optimisés pour l'impression. Toutes les mesures ont été prises pour garantir
l'exploitation de ce fichier par les comités membres de l'ISO. Dans le cas peu probable où surviendrait un problème d'utilisation,
veuillez en informer le Secrétariat central à l'adresse donnée ci-dessous.


DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT


©  ISO 2010
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée sous
quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l'accord écrit
de l'ISO à l'adresse ci-après ou du comité membre de l'ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail [e-mail]
Web www.iso.org
Publié en Suisse

ii © ISO 2010 – Tous droits réservés

---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 12872:2010(F)
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction.v
1 Domaine d'application .1
2 Références normatives.1
3 Termes et définitions .1
4 Principe.1
5 Réactifs.1
6 Appareillage .2
7 Échantillonnage.3
8 Préparation de l'échantillon pour essai .3
9 Mode opératoire.4
9.1 Étapes préparatoires.4
9.2 Chromatographie sur colonne .4
9.3 Hydrolyse par la lipase pancréatique.5
9.4 Préparation des dérivés silylés et de la chromatographie en phase gazeuse.5
9.5 Chromatographie en phase gazeuse.5
10 Expression des résultats.6
11 Fidélité .6
11.1 Essai interlaboratoires.6
11.2 Répétabilité .6
11.3 Reproductibilité .6
12 Rapport d'essai.6
Annexe A (informative) Chromatogrammes.7
Annexe B (informative) Résultats d'un essai interlaboratoires.10
Annexe C (informative) Préparation et activité de la lipase.11
Bibliographie.13

© ISO 2010 – Tous droits réservés iii

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 12872:2010(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 12872 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 11,
Corps gras d'origines animale et végétale.
iv © ISO 2010 – Tous droits réservés

---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 12872:2010(F)
Introduction
Dans le cadre de la Norme commerciale applicable aux huiles d'olive et aux huiles de grignons d'olive, le
[6]
Conseil oléicole international (COI) a publié la COI/T.20/Doc. 23:2006 . La COI/T.20/Doc. 23 était applicable
aux huiles d'olive et aux huiles de grignons d'olive et était utilisée pour faire la distinction entre les huiles
d'olive vierges lampantes et les huiles de grignons d'olive brutes. Les grignons d'olive constituent la pâte
résiduelle qui contient encore une quantité variable d'eau et d'huile après pressage ou centrifugation.
En 2008, le COI a soumis le document à l'ISO/TC 34/SC 11 en vue de son adoption en tant que Norme
internationale.

© ISO 2010 – Tous droits réservés v

---------------------- Page: 5 ----------------------
NORME INTERNATIONALE ISO 12872:2010(F)

Huiles d'olive et huiles de grignons d'olive — Détermination de
la teneur en 2-glycéryl monopalmitate
1 Domaine d'application
La présente Norme internationale spécifie une méthode pour la détermination de la teneur, sous forme de
fraction massique en pourcentage, en 2-glycéryl monopalmitate des huiles d'olive et des huiles de grignons
d'olive liquides à température ambiante (20 °C).
[6]
NOTE La présente Norme internationale est fondée sur la méthode COI/T.20/Doc. 23:2006 .
2 Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l'application du présent document. Pour les
références datées, seule l'édition citée s'applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document de référence s'applique (y compris les éventuels amendements).
ISO 661, Corps gras d'origines animale et végétale — Préparation de l'échantillon pour essai
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s'appliquent.
3.1
teneur en 2-glycéryl monopalmitate
fraction massique de 2-glycéryl monopalmitate dans la fraction monoglycéridique, déterminée conformément
à la méthode spécifiée dans la présente Norme internationale
NOTE La teneur en 2-glycéryl monopalmitate est exprimée en pourcentage.
4 Principe
Après une préparation appropriée, l'huile est soumise à l'action de la lipase pancréatique. Une hydrolyse
partielle et spécifique aux positions 1 et 3 de la molécule de triglycéride entraîne la formation de
2-monoglycérides. Le pourcentage de 2-glycéryl monopalmitate dans la fraction monoglycéridique est
déterminé, après silylation, par chromatographie en phase gazeuse sur colonne capillaire.
5 Réactifs
AVERTISSEMENT — Il est nécessaire de se conformer à toute réglementation locale relative à la
manipulation des substances dangereuses. Des mesures de sécurité technique, organisationnelle et
personnelle doivent être suivies.
Au cours de l'analyse, sauf indication contraire, utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique
reconnue et de l'eau distillée ou déminéralisée ou de l'eau de pureté équivalente.
© ISO 2010 – Tous droits réservés 1

---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 12872:2010(F)
5.1 Gel de silice, ayant une granulométrie comprise entre 0,063 mm et 0,200 mm (70/280 mesh), préparé
comme suit: mettre le gel de silice dans une capsule de porcelaine, sécher à l'étuve à 160 °C pendant 4 h,
puis laisser refroidir à température ambiante dans un dessiccateur. Ajouter un volume d'eau équivalent à 5 %
de la masse de gel de silice, comme suit: dans un Erlenmeyer de 500 ml, peser 152 g de gel de silice et
ajouter 8 g d'eau, boucher et agiter délicatement pour homogénéiser. Laisser reposer au moins 12 h avant
l'emploi.
5.2 n-Hexane, qualité pour chromatographie.
5.3 Isopropanol.
5.4 Mélange isopropanol-eau, fractions volumiques 50 ml/100 ml.
5.5 Lipase pancréatique, activité comprise entre 2,0 et 10 unités de lipase par milligramme (voir
Annexe C).
5.6 Solution tampon de tris(hydroxyméthyl)aminométhane: préparer une solution aqueuse (1 mol/l) de
pH 8 et mélanger avec du HCl concentré, fractions volumiques 50 ml/100 ml.
5.7 Cholate de sodium, qualité enzymatique, solution aqueuse, fraction massique 0,1 g/100 g.
Utiliser cette solution dans les 15 jours suivant sa préparation.
5.8 Chlorure de calcium, solution aqueuse, fraction massique 22 g/100 g.
5.9 Éther diéthylique, qualité pour chromatographie.
5.10 Solvant d'élution: mélange de n-hexane-éther diéthylique, fraction volumique de n-hexane
87 ml/100 ml et fraction volumique d'éther diéthylique 13 ml/100 ml.
5.11 Hydroxyde de sodium, solution aqueuse, fraction massique 12 g/100 g.
5.12 Phénolphtaléine, solution éthanolique, concentration en masse 1 g/100 ml.
5.13 Gaz vecteur: hydrogène ou hélium, qualité pour chromatographie en phase gazeuse.
5.14 Gaz auxiliaires: hydrogène, exempt d'humidité et de substances organiques, et air synthétique, qualité
pour chromatographie en phase gazeuse.
5.15 Réactif de silylation: mélange de pyridine, d'hexaméthyldisilazane (HMDS) et de triméthylchlorosilane
(TMCS), fractions volumiques: 9 ml/13 ml, 3 ml/13 ml et 1 ml/13 ml, respectivement.
5.16 Échantillons de référence: monoglycérides purs et mélanges de monoglycérides ayant une
composition connue similaire à celle de l'échantillon.
6 Appareillage
Matériel courant de laboratoire et, en particulier, ce qui suit.
6.1 Erlenmeyer, d'une capacité de 25 ml.
6.2 Béchers, de capacités 100 ml, 250 ml et 300 ml.
6.3 Colonne en verre pour chromatographie, diamètre intérieur de 21 mm à 23 mm, longueur 400 mm,
équipée d'un septum et d'un robinet.
[2]
6.4 Éprouvettes graduées, de capacités 10 ml, 50 ml, 100 ml et 200 ml, ISO 4788 classe A.
2 © ISO 2010 – Tous droits réservés

---------------------- Page: 7 ----------------------
ISO 12872:2010(F)
6.5 Ballons, de capacités 100 ml et 250 ml.
6.6 Évaporateur rotatif.
6.7 Tubes pour centrifugeuse, à fond conique, d'une capacité de 10 ml, avec bouchon rodé.
6.8 Centrifugeuse, pour tubes de 10 ml et 100 ml.
6.9 Bain-marie, permettant de maintenir une température de (40 ± 0,5) °C.
[1]
6.10 Pipettes graduées, de capacités 1 ml et 2 ml, ISO 835 classe A.
6.11 Seringue hypodermique, de 1 ml.
6.12 Microseringue, de 100 µl.
6.13 Ampoule à décanter, de 1 000 ml.
6.14 Chromatographe en phase gazeuse, approprié au fonctionnement avec colonnes capillaires, équipé
des éléments spécifiés de 6.14.1 à 6.14.5.
6.14.1 Dispositif d'injection «on column» à froid.
6.14.2 Détecteur à ionisation de flamme.
6.14.3 Four pour colonne, capable de maintenir la température à ± 1 °C.
6.14.4 Système informatique d'intégration.
6.14.5 Colonne capillaire en silice fondue, de 8 m à 12 m de long, d'un diamètre intérieur de 0,25 mm
à 0,32 mm, recouverte d'un film de méthylpolysiloxane ou de phényl méthylpolysiloxane 5 %, d'une épaisseur
de 0,10 µm à 0,30 µm, pouvant être utilisée à 370 °C.
6.15 Microseringue, de 10 µl, munie d'une aiguille rigide, d'une longueur minimale de 7,5 cm, pour injection
directe sur colonne.
7 Échantillonnage
L'échantillonnage ne fait pas partie de la méthode spécifiée dans la présente Norme internationale. Une
[3]
méthode d'échantillonnage recommandée est indiquée dans l'ISO 5555 .
Il est important que le laboratoire reçoive un échantillon réellement représentatif, non endommagé ou modifié
lors du transport ou de l'entreposage.
8 Préparation de l'échantillon pour essai
Préparer l'échantillon pour essai conformément à l'ISO 661. Les huiles ayant une acidité libre supérieure à
3 % nécessitent une étape de neutralisation comme spécifié ici.
Dans une ampoule à décanter de 1 000 ml (6.13), introduire 50 g d'huile et diluer dans 200 ml de
n-hexane (5.2). Ajouter 100 ml d'isopropanol (5.3) et un volume de la solution d'hydroxyde de sodium (5.11)
correspondant à l'acidité libre de l'huile avec un excès de 5 %. Agiter énergiquement pendant 1 min. Ajouter
100 ml d'eau, agiter de nouveau et laisser reposer.
Après décantation, éliminer la couche inférieure contenant les savons. Éliminer également toutes couches
intermédiaires de mucilage et de substances insolubles qui apparaissent souvent. Laver la solution hexanique
© ISO 2010 – Tous droits réservés 3

---------------------- Page: 8 --
...