ISO 6558-2:1992

Fruits, vegetables and derived products — Determination of carotene content — Part 2: Routine methods

Specifies two routine methods: method A is for the determination in products having fat content of less than or equal to 5 % (m/m), method B for products having a fat content of more than 5 % (m/m), the limit of 5 % being arbitrary.

Fruits, légumes et produits dérivés — Détermination de la teneur en carotènes — Partie 2: Méthodes pratiques

Sadje, zelenjava in sadni in zelenjavni proizvodi - Določanje vsebnosti karotena - 2. del: Rutinske metode

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 20-May-1992
• ICS: 67.080.01 - Fruits, vegetables and derived products in general
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 3 - Fruits and vegetables and their derived products
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 3 - Fruits and vegetables and their derived products
• Current Stage: 9093 - International Standard confirmed
• Completion Date: 13-Jan-2022
• Ref Project: SIST ISO 6558-2:1995 - Fruits, vegetables and derived products -- Determination of carotene content -- Part 2: Routine methods

Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL
STANDARD
First edition
1992-06-o 1
Fruits, vegetables and derived products -
Determination of carotene content -
Part 2:
Routine methods
- D&termination de la teneur en
Fruits, legumes et produits d&-iv&s
carothes -
Partie 2: M&odes prafiques
Reference number
IS0 6558-2: 1992(E)

---------------------- Page: 1 ----------------------
IS0 6558-2:1992(E)
Foreword
IS0 (the International Organization for Standardization) is a worldwide
federation of national standards bodies (IS0 member bodies). The work
of preparing International Standards is normally carried out through IS0
technical committees. Each member body interested in a subject for
which a technical committee has been established has the right to be
represented on that committee. International organizations, govern-
mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the
work. IS0 collaborates closely with the International Electrotechnical
Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
Draft International Standards adopted by the technical committees are
circulated to the member bodies for voting. Publication as an Inter-
national Standard requires approval by at least 75 % of the member
bodies casting a vote.
International Standard IS0 6558-2 was prepared by Technical Committee
ISO/TC 34, Agricultural food products, Sub-Committee SC 3, Fruit and
vegetable products.
IS0 6558 consists of the following parts, under the general title Fruits,
vegetables and derived products - Determination of carotene content:
- Part 1: Reference method
- Part 2: Routine methods
0 is0 1992
Ail rights reserved. No part of this publication may be reproduced or utilized in any form
or by any means, electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without
permission in writing from the publisher.
international Organization for Standardization
Case Postaie 56 l CH-1211 Geneve 20 l Switzerland
Printed in Switzerland
ii

---------------------- Page: 2 ----------------------
IS0 6558=2:1992(E)
INTERNATIONAL STANDARD
Fruits, vegetables and derived products - Determination of
carotene content -
Part 2:
Routine methods
2.2.2 Extraction mixture, prepared as follows.
1 Scope
Dissolve 0,2 g of hydroquinone in 40 ml of acetone
This part of IS0 6558 specifies two routine methods
and then add 160 ml of the petroleum ether (2.2.1).
for the determination of the carotene (Cd0HS6) con-
tent present in the edible parts of, or added to, fruits,
Sodium sulfate, an hydrous.
2.2.3
vegetables and derived products.
Dry at 100 “C for 2 h to 3 h and keep in a
Method A is for the determination of the carotene
hermetically closed container.
content in products having a fat content of less than
or equal to 5 % (m/m)?
2.2.4 Quartz sand, acid washed and dried in a
muffle furnace.
Method B is for the determination of the carotene
content in products having a fat content of more than
2.2.5 Column packing, use one of the column
5 % (m/m)?
packings specified in 2.2.5.1 to 2.2.5.4.
2 Method A: Determination of carotene 2.251 Aluminium oxide, deactivated by suspen-
sion in water, prepared as follows.
content in products having a fat content of
less or equal to 5 % (m/m)
Heat the aluminium oxide for 3 h in a muffle furnace
at 500 OC, cool and keep in a desiccator. Before use,
transfer 50 g of the aluminium oxide thus prepared
2.1 Principle
into a flask with a ground glass joint, add 5,5 ml of
water and mix thoroughly until a fine uniform sus-
Extraction of carotenes using a mixture of petroleum
pension is obtained. The pH of the suspension thus
ether and acetone. Elimination of the acetone, sep-
obtained is between 9 and 10. The suspension may
aration of the carotenes from the carotenoids by
be kept in a closed flask for 24 h.
column chromatography and determination of the
carotene content by spectrometry.
2.2.5.2 Magnesium oxide/powdered glass mixture,
1 part to 2 parts by mass.
2.2 Reagents and materials
2.253 Aluminium oxide/anhydrous sodium sulfate
Use only reagents of recognized analytical grade
mixture, 3 parts to 1 part by mass.
and distilled or demineralized water or water of at
least equivalent purity.
2.254 Aluminium oxide/calcium hydroxide mix-
ture, 1 part to 1 part by mass.
2.2.1 Petroleum ether, boiling range 50 “C to
2.2.6 Sodium chloride, 300 g/l solution.
70 OC.
1) The limit of 5 % (m/m) adopted for the fat content is arbitrary.
‘.
1

---------------------- Page: 3 ----------------------
IS0 6558-2:1992(E)
Frozen and deep-frozen products
2.4.3
2.3 Apparatus
Thaw the laboratory sample in a closed container.
apparatus and, in particular, the
Usual laboratory
If necessary, perform step 2.4.2. Add the liquid
follow ing.
formed during thawing and mix the product thor-
oughly.
2.3.1 Spectrometer, suitable for carrying out
measurements at 450 nm, equipped with cells of
10 mm path length.
2.5 Procedure
2.3.2 Witt filter apparatus, with ground-in funnel,
IMPORTANT - Carry out the analysis in a dark
ground glass cover and side tube, for filtering into a
place away from direct light.
beaker or other vessel under diminished pressure.
2.5.1 Test portion
2.3.3 Water-pump.
Weigh a quantity (generally 1 g to IO g) of the pre-
2.3.4 Water-bath, capable of being maintained at a
pared test sample (2.4) containing between 5 pg and
temperature of 30 “C to 35 “C.
150 pg of carotene.
2.3.5 Vacuum evaporator.
2.5.2 Preparation of the test solution
2.3.6 Chromatography column, having a diameter
2.5.2.1 Transfer quantitatively the test portion to a
between IO mm and 15 mm.
mortar (2.3.9) and add about 20 ml of the extraction
mixture (2.2.2). Add 20 g of the anhydrous sodium
2.3.7 Sintered (fritted) filter, grade P40.
sulfate (2.2.3) and 30 g of quartz sand (2.2.4) and
grind well. Decant the extract obtained through a
2.3.8 Cotton wool, soaked with petroleum ether,
filter (2.3.7) into a 500 ml conical flask (2.3.11). Re-
peat the extraction until a colourless extract is ob-
2.3.9 Laboratory mortar and pestle.
tained, collecting the filtered extracts in the conical
flask. Transfer quantitatively the residue to the filter
2.3.10 Desiccator, provided with an efficient
and wash it with the extraction mixture, collecting
desiccant.
the filtrate in the conical flask.
2.3.11 Conical flask, of 500 ml capacity.
2.5.2.2 Transfer the combined extracts into a
1 000 ml separating funnel (2.3.13) and wash several
2.3.12 Round-bottomed flasks, of 100 ml and
times with a total of 300 ml to 400 ml of water in or-
500 ml capacity, with ground glass joints.
der to eliminate the acetone. Agitate the extract
carefully in order to avoid the formation of an
2.3.13 Separating funnel, of 1 000 ml capacity.
emulsion. If an emulsion is formed, repeat the ex-
traction using another test portion and carry out the
2.3.14 One-mark volumetric flasks, of 50 ml and washing procedure as described, but using a
100 ml capacity. 300 g/l sodium chloride solution (2.2.6) in place of
water.
2.4 Preparation of the test sample
2.5.2.3 Add to the washed extract 15 g of the
anhydrous sodium sulfate (2.2.3) mix and leave to
2.4.1 Liquid non-homogeneous products (e .g .
stand for 15 min. Transfer the solution through a fil-
juices, concentrates and syrups)
ter (2.3.7), half-filled with anhydrous sodium sulfate,
into a 500 ml round-bottomed flask (2.3.12). Wash the
Mix the laboratory sample thoroughly.
sodium sulfate with three IO ml quantities of petro-
leum ether (2.2.1), collecting the washings in the
2.4.2 Viscous products (e.g. marmalade and fruits
filtrate.
in syrup) and solid products (e.g. fruits and
vegetables)
2.5.2.4 Concentrate the combined filtrate in a vac-
uum evaporator (2.3.5) over a water-bath (2.3.4) set
Remove seeds and hard seed-cavity walls, if
necessary, and then mix the laboratory sample at 30 “C to 35 OC, transfer it quantitatively into a
thoroughly. 100 ml (or 50 ml) one-mark volumetric flask (2.3.14)
and make up to the mark with petroleum ether (V,).
Weigh all seeds etc. removed from the product to
allow for correction of the analytical result obta
...

SLOVENSKI STANDARD
SIST ISO 6558-2:1995
01-marec-1995
6DGMH]HOHQMDYDLQVDGQLLQ]HOHQMDYQLSURL]YRGL'RORþDQMHYVHEQRVWLNDURWHQD
GHO5XWLQVNHPHWRGH
Fruits, vegetables and derived products -- Determination of carotene content -- Part 2:
Routine methods
Fruits, légumes et produits dérivés -- Détermination de la teneur en carotènes -- Partie 2:
Méthodes pratiques
Ta slovenski standard je istoveten z: ISO 6558-2:1992
ICS:
67.080.01 Sadje, zelenjava in njuni Fruits, vegetables and
proizvodi na splošno derived products in general
SIST ISO 6558-2:1995 en
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

---------------------- Page: 1 ----------------------

SIST ISO 6558-2:1995

---------------------- Page: 2 ----------------------

SIST ISO 6558-2:1995
INTERNATIONAL
STANDARD
First edition
1992-06-o 1
Fruits, vegetables and derived products -
Determination of carotene content -
Part 2:
Routine methods
- D&termination de la teneur en
Fruits, legumes et produits d&-iv&s
carothes -
Partie 2: M&odes prafiques
Reference number
IS0 6558-2: 1992(E)

---------------------- Page: 3 ----------------------

SIST ISO 6558-2:1995
IS0 6558-2:1992(E)
Foreword
IS0 (the International Organization for Standardization) is a worldwide
federation of national standards bodies (IS0 member bodies). The work
of preparing International Standards is normally carried out through IS0
technical committees. Each member body interested in a subject for
which a technical committee has been established has the right to be
represented on that committee. International organizations, govern-
mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the
work. IS0 collaborates closely with the International Electrotechnical
Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
Draft International Standards adopted by the technical committees are
circulated to the member bodies for voting. Publication as an Inter-
national Standard requires approval by at least 75 % of the member
bodies casting a vote.
International Standard IS0 6558-2 was prepared by Technical Committee
ISO/TC 34, Agricultural food products, Sub-Committee SC 3, Fruit and
vegetable products.
IS0 6558 consists of the following parts, under the general title Fruits,
vegetables and derived products - Determination of carotene content:
- Part 1: Reference method
- Part 2: Routine methods
0 is0 1992
Ail rights reserved. No part of this publication may be reproduced or utilized in any form
or by any means, electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without
permission in writing from the publisher.
international Organization for Standardization
Case Postaie 56 l CH-1211 Geneve 20 l Switzerland
Printed in Switzerland
ii

---------------------- Page: 4 ----------------------

SIST ISO 6558-2:1995
IS0 6558=2:1992(E)
INTERNATIONAL STANDARD
Fruits, vegetables and derived products - Determination of
carotene content -
Part 2:
Routine methods
2.2.2 Extraction mixture, prepared as follows.
1 Scope
Dissolve 0,2 g of hydroquinone in 40 ml of acetone
This part of IS0 6558 specifies two routine methods
and then add 160 ml of the petroleum ether (2.2.1).
for the determination of the carotene (Cd0HS6) con-
tent present in the edible parts of, or added to, fruits,
Sodium sulfate, an hydrous.
2.2.3
vegetables and derived products.
Dry at 100 “C for 2 h to 3 h and keep in a
Method A is for the determination of the carotene
hermetically closed container.
content in products having a fat content of less than
or equal to 5 % (m/m)?
2.2.4 Quartz sand, acid washed and dried in a
muffle furnace.
Method B is for the determination of the carotene
content in products having a fat content of more than
2.2.5 Column packing, use one of the column
5 % (m/m)?
packings specified in 2.2.5.1 to 2.2.5.4.
2 Method A: Determination of carotene 2.251 Aluminium oxide, deactivated by suspen-
sion in water, prepared as follows.
content in products having a fat content of
less or equal to 5 % (m/m)
Heat the aluminium oxide for 3 h in a muffle furnace
at 500 OC, cool and keep in a desiccator. Before use,
transfer 50 g of the aluminium oxide thus prepared
2.1 Principle
into a flask with a ground glass joint, add 5,5 ml of
water and mix thoroughly until a fine uniform sus-
Extraction of carotenes using a mixture of petroleum
pension is obtained. The pH of the suspension thus
ether and acetone. Elimination of the acetone, sep-
obtained is between 9 and 10. The suspension may
aration of the carotenes from the carotenoids by
be kept in a closed flask for 24 h.
column chromatography and determination of the
carotene content by spectrometry.
2.2.5.2 Magnesium oxide/powdered glass mixture,
1 part to 2 parts by mass.
2.2 Reagents and materials
2.253 Aluminium oxide/anhydrous sodium sulfate
Use only reagents of recognized analytical grade
mixture, 3 parts to 1 part by mass.
and distilled or demineralized water or water of at
least equivalent purity.
2.254 Aluminium oxide/calcium hydroxide mix-
ture, 1 part to 1 part by mass.
2.2.1 Petroleum ether, boiling range 50 “C to
2.2.6 Sodium chloride, 300 g/l solution.
70 OC.
1) The limit of 5 % (m/m) adopted for the fat content is arbitrary.
‘.
1

---------------------- Page: 5 ----------------------

SIST ISO 6558-2:1995
IS0 6558-2:1992(E)
Frozen and deep-frozen products
2.4.3
2.3 Apparatus
Thaw the laboratory sample in a closed container.
apparatus and, in particular, the
Usual laboratory
If necessary, perform step 2.4.2. Add the liquid
follow ing.
formed during thawing and mix the product thor-
oughly.
2.3.1 Spectrometer, suitable for carrying out
measurements at 450 nm, equipped with cells of
10 mm path length.
2.5 Procedure
2.3.2 Witt filter apparatus, with ground-in funnel,
IMPORTANT - Carry out the analysis in a dark
ground glass cover and side tube, for filtering into a
place away from direct light.
beaker or other vessel under diminished pressure.
2.5.1 Test portion
2.3.3 Water-pump.
Weigh a quantity (generally 1 g to IO g) of the pre-
2.3.4 Water-bath, capable of being maintained at a
pared test sample (2.4) containing between 5 pg and
temperature of 30 “C to 35 “C.
150 pg of carotene.
2.3.5 Vacuum evaporator.
2.5.2 Preparation of the test solution
2.3.6 Chromatography column, having a diameter
2.5.2.1 Transfer quantitatively the test portion to a
between IO mm and 15 mm.
mortar (2.3.9) and add about 20 ml of the extraction
mixture (2.2.2). Add 20 g of the anhydrous sodium
2.3.7 Sintered (fritted) filter, grade P40.
sulfate (2.2.3) and 30 g of quartz sand (2.2.4) and
grind well. Decant the extract obtained through a
2.3.8 Cotton wool, soaked with petroleum ether,
filter (2.3.7) into a 500 ml conical flask (2.3.11). Re-
peat the extraction until a colourless extract is ob-
2.3.9 Laboratory mortar and pestle.
tained, collecting the filtered extracts in the conical
flask. Transfer quantitatively the residue to the filter
2.3.10 Desiccator, provided with an efficient
and wash it with the extraction mixture, collecting
desiccant.
the filtrate in the conical flask.
2.3.11 Conical flask, of 500 ml capacity.
2.5.2.2 Transfer the combined extracts into a
1 000 ml separating funnel (2.3.13) and wash several
2.3.12 Round-bottomed flasks, of 100 ml and
times with a total of 300 ml to 400 ml of water in or-
500 ml capacity, with ground glass joints.
der to eliminate the acetone. Agitate the extract
carefully in order to avoid the formation of an
2.3.13 Separating funnel, of 1 000 ml capacity.
emulsion. If an emulsion is formed, repeat the ex-
traction using another test portion and carry out the
2.3.14 One-mark volumetric flasks, of 50 ml and washing procedure as described, but using a
100 ml capacity. 300 g/l sodium chloride solution (2.2.6) in place of
water.
2.4 Preparation of the test sample
2.5.2.3 Add to the washed extract 15 g of the
anhydrous sodium sulfate (2.2.3) mix and leave to
2.4.1 Liquid non-homogeneous products (e .g .
stand for 15 min. Transfer the solution through a fil-
juices, concentrates and syrups)
ter (2.3.7), half-filled with anhydrous sodium sulfate,
into a 500 ml round-bottomed flask (2.3.12). Wash the
Mix the laboratory sample thoroughly.
sodium sulfate with three IO ml quantities of petro-
leum et
...

ISO
NORME
6558-2
INTERNATIONALE
Première édition
1992-06-o 1
Fruits, légumes et produits dérivés -
Détermination de la teneur en carotènes -
Partie 2:
Méthodes pratiques
Fruits, vegetables and derived products - Determination of carotene
content -
Part 2: Routine methods
Numéro de référence
ISO 6558-2: 1992(F)

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 6558=2:1992(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres
de I’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque comité membre inté-
ressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique créé
à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO participent également aux tra-
vaux. L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique
internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotech-
nique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techni-
ques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication
comme Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins
des comités membres votants.
La Norme internationale ISO 6558-2 a été élaborée par le comité tech-
nique ISO/TC 34, Produits agricoles alimentaires, sous-comité SC 3,
Produits dérivés des fruits et légumes.
L’ISO 6558 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre gé-
néral Fruits, légumes et produits dérivés - Détermination de la teneur
en carotènes:
- Partie ?: Méthode de référence
- Partie 2: Méthodes pratiques
8 ISO 1992
Droits de reproduction réservés. Aucune partie de cette publication ne peut être repro-
duite ni utilisée sous quelque forme que Ce Soit et par aucun procédé, électronique ou
mécanique, y compris la photocopie et kS microfilms, sans l’accord écrit de l’éditeur.
Organisation Internationale de normalisation
Case Postale 56 l CH-1211 Genève 20 l Suisse
Imprimé en Suisse
ii

---------------------- Page: 2 ----------------------
., z
NORME INTERNATIONALE ISO &58-2ii r992(F)
Fruits, légumes et produits dérivés - Détermination de la
teneur en carotènes -
Partie 2:
Méthodes pratiques
2.2.1 Éther de pétrole, de point d’ébullition situé
1 Domaine d’application
entre 50 “C et 70 “C.
La présente partie de I’ISO 6558 prescrit deux mé-
2.2.2 Mélange d’extraction, préparé comme suit.
thodes pratiques pour la détermination de la teneur
en carotènes (C,,H,,), présents dans les parties co-
Dissoudre 0,2 g d’hydroquinone dans 40 ml d’acé-
mestibles, ou ajoutés, dans les fruits, légumes et
tone, puis ajouter 160 ml d’éther de pétrole (2.2.1).
produits dérivés.
La méthode A est destinée à la détermination de la
2.2.3 Sulfate de sodium, anhydre.
teneur en carotènes dans des produits dont la te-
neur en matières grasses est inférieure ou égale à
Sécher à 100 OC pendant 2 h à 3 h et conserver dans
5 Oh (m/m)‘).
un récipient hermétiquement clos.
La méthode 6 est destinée à la détermination de la
2.2.4 Sable quartzeux, lavé à l’acide et séché dans
teneur en carotènes dans des produits dont la te-
un four à moufle.
neur en matières grasses est supérieure à
5 % (m/m)Q.
2.2.5 Garnissage de colonne, utiliser l’un des gar-
nissages de colonne spécifiés en 2.2.5.1 à 2.2.5.4.
2 Méthode A: Détermination de la teneur
en carotènes dans des produits dont la
2.2.5.1 Oxyde d’aluminium désactivé, en suspen-
sion dans l’eau, préparé comme suit.
teneur en matières grasses est inférieure
ou égale à 5 % (m/m)
Chauffer l’oxyde d’aluminium pendant 3 h, dans un
four à moufle, à 500 “C. Laisser refroidir et conser-
2.1 Principe ver dans un dessiccateur. Avant utilisation, transfé-
rer 50 g d’oxyde d’aluminium ainsi préparé, dans un
Extraction des carotènes par un mélange d’éther de flacon à col rodé, y ajouter 5,5 ml d’eau et mélanger
pétrole et d’acétone. Élimination de l’acétone, sé- soigneusement jusqu’à obtention d’une fine sus-
paration des carotènes des caroténoides par chro- pension uniforme. Le pH de la suspension ainsi ob-
matographie sur colonne et détermination de la tenue est compris entre 9 et 10. La suspension peut
teneur en carotènes par spectrométrie.
être conservée dans un flacon fermé pendarit 24 h.
2.252 Mélange d’oxyde de magnésium/poudre de
2.2 Réactifs et produits
verre, 1 partie pour 2 parties en masse.
Utiliser uniquement des réactifs de qualité analyti-
que reconnue, et de l’eau distillée ou déminéralisée
2.253 Mélange d’oxyde d’aluminiumkulfate de
ou de l’eau de pureté au moins équivalente. sodium anhydre, 3 parties pour 1 partie en masse.
1) La limite de 5 % (r@n) adoptée pour la teneur en matières grasses est arbitraire.
1

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 6558=2:1992(F)
2.2.5.4 Mélange d’oxyde d’aluminium/hydroxyde de Éliminer les pépins et les parois dures des cavités
calcium, 1 partie pour 1 partie en masse. des graines, si nécessaire, puis mélanger soi-
gneusement l’échantillon pour laboratoire.
2.2.6 Chlorure de sodium, solution à 300 g/l.
Peser toutes les graines, etc. éliminées du produit
afin de permettre de rapporter le résultat d’analyse
2.3 Appareillage
au résidu.
Matériel courant de laboratoire, et notamment
2.4.3 Produits congelés
2.3.1 Spectromètre, permettant d’effectuer les me-
Décongeler l’échantillon pour laboratoire dans un
surages à une longueur d’onde de 450 nm et équipé
récipient couvert. Si nécessaire, réaliser l’opération
de cuves de 10 mm de parcours optique.
prescrite en 2.4.2. Ajouter le liquide formé lors de la
décongélation et mélanger soigneusement.
2.3.2 Appareil de filtration de Witt, comprenant un
entonnoir rodé, un couvercle rodé et une tubulure
latérale destiné à la filtration, sous pression réduite, 2.5 Mode opératoire
dans un bécher ou autre type de récipient.
IMPORTANT - Effectuer l’analyse dans un endroit
à l’abri de la lumière.
2.3.3 Pompe à eau.
2.3.4 Bain d’eau, réglable de 30 “C à 35 “C.
2.51 Prise d’essai
2.35 Évaporateur à vide. Peser une quantité (en général, de 1 g à 10 g) de
l’échantillon pour essai préparé (2.4) contenant en-
tre 5 pg et 150 pg de carotènes.
2.3.6 Colonnes chromatographiques, d’un diamètre
compris entre 10 mm et 15 mm.
2.52 Préparation de la solution d’essai
2.3.7 Filtre à plaque en verre fritté, grade P40.
2.5.2.1 Transférer quantitativement la prise d’essai
2.3.8 Coton, imbibé d’éther de pétrole.
dans un mortier (2.3.9) et ajouter environ 20 ml de
mélange d’extraction (2.2.2). Ajouter 20 g de sulfate
2.3.9 Mortier de laboratoire et pilon. de sodium anhydre (2.2.3) et 30 g de sable
quartzeux (2.2.4) et bien broyer. Décanter l’extrait
obtenu sur filtre (2.3.7) dans une fiole conique de
2.3.10 Dessiccateur, garni d’un déshydratant effi-
500 ml (2.3.11). Répéter l’extraction jusqu’à obten-
cace.
tion d’un extrait incolore, en rassemblant les ex-
traits filtrés dans la fiole conique. Transférer
2.3.11 Fiole conique, de 500 ml de capacité.
quantitativement le résidu sur le filtre et le laver
avec le mélange d’extraction en rassemblant le
2.3,12 Ballons à fond rond, à col rodé, de 100 ml
filtrat dans la fiole conique.
et 500 ml de capacité.
2.5.2.2 Transvaser les extraits réunis dans une
2.3,13 Ampoules à décanter, de 1 000 ml de capa-
ampoule à décanter de 1 000 ml (2.3.13) et laver
cité.
plusieurs fois avec au total 300 ml à 400 ml d’eau
pour éliminer l’acétone. Effectuer l’agitation avec
2.3.14 Fioles jaugées, de 50 ml et 100 ml de capa-
précaution, afin d’éviter la formation d’une émul-
cité.
sion. En cas de formation d’une émulsion, répéter
l’extraction en utilisant une autre prise d’essai et
2.4 Préparation de l’échantillon pour essai
effectuer le lavage comme décrit, mais en utilisant
la solution de chlorure de sodium (2.2.6) à la place
de l’eau.
2.4.1 Produits liquides non homogènes (par
exemple, jus, nectars et sirops)
2.5.2.3 Ajouter à l’extrait lavé, 15 g de sulfate de
soigneusement l’échantillon pour labora-
Mélanger
sodium anhydre (2.2.3) mélanger et laisser reposer
toire.
durant 15 min. Transférer la solution sur un filtre
(2.3.7) rempli à moitié de sulfate de sodium anhydre,
2.4.2 Produits visqueux (par exemple, marmelades, dans un ballon à fond rond de 500 ml (2.3.12). Laver
fruits au sirop) et produits solides (par exemple, le sulfate de sodium trois fois avec 10 ml d’éther de
fruits et légumes) pétrole (2.2.1) a chaque fois, en rassemblant les
eaux de lavage dans le filtrat.
2

---------------------- Page: 4 ----------------------
ISCi 6558-2:1992(F)
2.5.3.4 Selon l’intensité de la couleur de I’éluant,
2.5.2.4 Concentrer le filtrat réuni dans un évapo-
ajuster son volume (par concentration ou dilution
rateur à vi
...

ISO
NORME
6558-2
INTERNATIONALE
Première édition
1992-06-o 1
Fruits, légumes et produits dérivés -
Détermination de la teneur en carotènes -
Partie 2:
Méthodes pratiques
Fruits, vegetables and derived products - Determination of carotene
content -
Part 2: Routine methods
Numéro de référence
ISO 6558-2: 1992(F)

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 6558=2:1992(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres
de I’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque comité membre inté-
ressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique créé
à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO participent également aux tra-
vaux. L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique
internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotech-
nique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techni-
ques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication
comme Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins
des comités membres votants.
La Norme internationale ISO 6558-2 a été élaborée par le comité tech-
nique ISO/TC 34, Produits agricoles alimentaires, sous-comité SC 3,
Produits dérivés des fruits et légumes.
L’ISO 6558 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre gé-
néral Fruits, légumes et produits dérivés - Détermination de la teneur
en carotènes:
- Partie ?: Méthode de référence
- Partie 2: Méthodes pratiques
8 ISO 1992
Droits de reproduction réservés. Aucune partie de cette publication ne peut être repro-
duite ni utilisée sous quelque forme que Ce Soit et par aucun procédé, électronique ou
mécanique, y compris la photocopie et kS microfilms, sans l’accord écrit de l’éditeur.
Organisation Internationale de normalisation
Case Postale 56 l CH-1211 Genève 20 l Suisse
Imprimé en Suisse
ii

---------------------- Page: 2 ----------------------
., z
NORME INTERNATIONALE ISO &58-2ii r992(F)
Fruits, légumes et produits dérivés - Détermination de la
teneur en carotènes -
Partie 2:
Méthodes pratiques
2.2.1 Éther de pétrole, de point d’ébullition situé
1 Domaine d’application
entre 50 “C et 70 “C.
La présente partie de I’ISO 6558 prescrit deux mé-
2.2.2 Mélange d’extraction, préparé comme suit.
thodes pratiques pour la détermination de la teneur
en carotènes (C,,H,,), présents dans les parties co-
Dissoudre 0,2 g d’hydroquinone dans 40 ml d’acé-
mestibles, ou ajoutés, dans les fruits, légumes et
tone, puis ajouter 160 ml d’éther de pétrole (2.2.1).
produits dérivés.
La méthode A est destinée à la détermination de la
2.2.3 Sulfate de sodium, anhydre.
teneur en carotènes dans des produits dont la te-
neur en matières grasses est inférieure ou égale à
Sécher à 100 OC pendant 2 h à 3 h et conserver dans
5 Oh (m/m)‘).
un récipient hermétiquement clos.
La méthode 6 est destinée à la détermination de la
2.2.4 Sable quartzeux, lavé à l’acide et séché dans
teneur en carotènes dans des produits dont la te-
un four à moufle.
neur en matières grasses est supérieure à
5 % (m/m)Q.
2.2.5 Garnissage de colonne, utiliser l’un des gar-
nissages de colonne spécifiés en 2.2.5.1 à 2.2.5.4.
2 Méthode A: Détermination de la teneur
en carotènes dans des produits dont la
2.2.5.1 Oxyde d’aluminium désactivé, en suspen-
sion dans l’eau, préparé comme suit.
teneur en matières grasses est inférieure
ou égale à 5 % (m/m)
Chauffer l’oxyde d’aluminium pendant 3 h, dans un
four à moufle, à 500 “C. Laisser refroidir et conser-
2.1 Principe ver dans un dessiccateur. Avant utilisation, transfé-
rer 50 g d’oxyde d’aluminium ainsi préparé, dans un
Extraction des carotènes par un mélange d’éther de flacon à col rodé, y ajouter 5,5 ml d’eau et mélanger
pétrole et d’acétone. Élimination de l’acétone, sé- soigneusement jusqu’à obtention d’une fine sus-
paration des carotènes des caroténoides par chro- pension uniforme. Le pH de la suspension ainsi ob-
matographie sur colonne et détermination de la tenue est compris entre 9 et 10. La suspension peut
teneur en carotènes par spectrométrie.
être conservée dans un flacon fermé pendarit 24 h.
2.252 Mélange d’oxyde de magnésium/poudre de
2.2 Réactifs et produits
verre, 1 partie pour 2 parties en masse.
Utiliser uniquement des réactifs de qualité analyti-
que reconnue, et de l’eau distillée ou déminéralisée
2.253 Mélange d’oxyde d’aluminiumkulfate de
ou de l’eau de pureté au moins équivalente. sodium anhydre, 3 parties pour 1 partie en masse.
1) La limite de 5 % (r@n) adoptée pour la teneur en matières grasses est arbitraire.
1

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 6558=2:1992(F)
2.2.5.4 Mélange d’oxyde d’aluminium/hydroxyde de Éliminer les pépins et les parois dures des cavités
calcium, 1 partie pour 1 partie en masse. des graines, si nécessaire, puis mélanger soi-
gneusement l’échantillon pour laboratoire.
2.2.6 Chlorure de sodium, solution à 300 g/l.
Peser toutes les graines, etc. éliminées du produit
afin de permettre de rapporter le résultat d’analyse
2.3 Appareillage
au résidu.
Matériel courant de laboratoire, et notamment
2.4.3 Produits congelés
2.3.1 Spectromètre, permettant d’effectuer les me-
Décongeler l’échantillon pour laboratoire dans un
surages à une longueur d’onde de 450 nm et équipé
récipient couvert. Si nécessaire, réaliser l’opération
de cuves de 10 mm de parcours optique.
prescrite en 2.4.2. Ajouter le liquide formé lors de la
décongélation et mélanger soigneusement.
2.3.2 Appareil de filtration de Witt, comprenant un
entonnoir rodé, un couvercle rodé et une tubulure
latérale destiné à la filtration, sous pression réduite, 2.5 Mode opératoire
dans un bécher ou autre type de récipient.
IMPORTANT - Effectuer l’analyse dans un endroit
à l’abri de la lumière.
2.3.3 Pompe à eau.
2.3.4 Bain d’eau, réglable de 30 “C à 35 “C.
2.51 Prise d’essai
2.35 Évaporateur à vide. Peser une quantité (en général, de 1 g à 10 g) de
l’échantillon pour essai préparé (2.4) contenant en-
tre 5 pg et 150 pg de carotènes.
2.3.6 Colonnes chromatographiques, d’un diamètre
compris entre 10 mm et 15 mm.
2.52 Préparation de la solution d’essai
2.3.7 Filtre à plaque en verre fritté, grade P40.
2.5.2.1 Transférer quantitativement la prise d’essai
2.3.8 Coton, imbibé d’éther de pétrole.
dans un mortier (2.3.9) et ajouter environ 20 ml de
mélange d’extraction (2.2.2). Ajouter 20 g de sulfate
2.3.9 Mortier de laboratoire et pilon. de sodium anhydre (2.2.3) et 30 g de sable
quartzeux (2.2.4) et bien broyer. Décanter l’extrait
obtenu sur filtre (2.3.7) dans une fiole conique de
2.3.10 Dessiccateur, garni d’un déshydratant effi-
500 ml (2.3.11). Répéter l’extraction jusqu’à obten-
cace.
tion d’un extrait incolore, en rassemblant les ex-
traits filtrés dans la fiole conique. Transférer
2.3.11 Fiole conique, de 500 ml de capacité.
quantitativement le résidu sur le filtre et le laver
avec le mélange d’extraction en rassemblant le
2.3,12 Ballons à fond rond, à col rodé, de 100 ml
filtrat dans la fiole conique.
et 500 ml de capacité.
2.5.2.2 Transvaser les extraits réunis dans une
2.3,13 Ampoules à décanter, de 1 000 ml de capa-
ampoule à décanter de 1 000 ml (2.3.13) et laver
cité.
plusieurs fois avec au total 300 ml à 400 ml d’eau
pour éliminer l’acétone. Effectuer l’agitation avec
2.3.14 Fioles jaugées, de 50 ml et 100 ml de capa-
précaution, afin d’éviter la formation d’une émul-
cité.
sion. En cas de formation d’une émulsion, répéter
l’extraction en utilisant une autre prise d’essai et
2.4 Préparation de l’échantillon pour essai
effectuer le lavage comme décrit, mais en utilisant
la solution de chlorure de sodium (2.2.6) à la place
de l’eau.
2.4.1 Produits liquides non homogènes (par
exemple, jus, nectars et sirops)
2.5.2.3 Ajouter à l’extrait lavé, 15 g de sulfate de
soigneusement l’échantillon pour labora-
Mélanger
sodium anhydre (2.2.3) mélanger et laisser reposer
toire.
durant 15 min. Transférer la solution sur un filtre
(2.3.7) rempli à moitié de sulfate de sodium anhydre,
2.4.2 Produits visqueux (par exemple, marmelades, dans un ballon à fond rond de 500 ml (2.3.12). Laver
fruits au sirop) et produits solides (par exemple, le sulfate de sodium trois fois avec 10 ml d’éther de
fruits et légumes) pétrole (2.2.1) a chaque fois, en rassemblant les
eaux de lavage dans le filtrat.
2

---------------------- Page: 4 ----------------------
ISCi 6558-2:1992(F)
2.5.3.4 Selon l’intensité de la couleur de I’éluant,
2.5.2.4 Concentrer le filtrat réuni dans un évapo-
ajuster son volume (par concentration ou dilution
rateur à vi
...