ISO 18363-3:2017
(Main)Animal and vegetable fats and oils — Determination of fatty-acid-bound chloropropanediols (MCPDs) and glycidol by GC/MS — Part 3: Method using acid transesterification and measurement for 2-MCPD, 3-MCPD and glycidol
Animal and vegetable fats and oils — Determination of fatty-acid-bound chloropropanediols (MCPDs) and glycidol by GC/MS — Part 3: Method using acid transesterification and measurement for 2-MCPD, 3-MCPD and glycidol
ISO 18363-3:2017 specifies a procedure for the simultaneous determination of 2-MCPD esters (bound 2-MCPD), 3‐MCPD esters (bound 3‐MCPD) and glycidyl esters (bound glycidol) in a single assay, based on acid catalysed ester cleavage and derivatization of cleaved (free) analytes with phenylboronic acid (PBA) prior to GC/MS analysis. ISO 18363-3:2017 is applicable to solid and liquid fats and oils. For all three analytes the limit of quantification (LOQ) is 0,1 mg/kg and the limit of detection (LOD) is 0,03 mg/kg.
Corps gras d'origines animale et végétale — Détermination des esters de chloropropanediols (MCPD) et d'acides gras et des esters de glycidol et d'acides gras par CPG/SM — Partie 3: Méthode par transestérification acide et mesure du 2-MCPD, du 3-MCPD et du glycidol
ISO 18363-3:2017 spécifie un mode opératoire permettant la détermination simultanée des esters de 2-MCPD (2-MCPD lié), des esters de 3-MCPD (3-MCPD lié) et des esters de glycidol (glycidol lié) en un seul essai, basé sur le clivage des esters par catalyse acide et la dérivatisation des analytes clivés (libres) à l'acide phénylboronique (PBA) avant analyse par CPG/SM. ISO 18363-3:2017 est applicable aux corps gras solides et liquides. Pour l'ensemble des trois analytes, la limite de quantification (LOQ) est de 0,1 mg/kg et la limite de détection (LOD) est de 0,03 mg/kg.
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INTERNATIONAL ISO
STANDARD 18363-3
First edition
2017-12
Animal and vegetable fats and oils —
Determination of fatty-acid-bound
chloropropanediols (MCPDs) and
glycidol by GC/MS —
Part 3:
Method using acid transesterification
and measurement for 2-MCPD,
3-MCPD and glycidol
Corps gras d'origines animale et végétale — Détermination des
esters de chloropropanediols (MCPD) et d'acides gras et des esters de
glycidol et d'acides gras par CPG/SM —
Partie 3: Méthode par transestérification acide et mesure pour le
2-MCPD, le 3-MCPD et le glycidol
Reference number
©
ISO 2017
© ISO 2017, Published in Switzerland
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized otherwise in any form
or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting on the internet or an intranet, without prior
written permission. Permission can be requested from either ISO at the address below or ISO’s member body in the country of
the requester.
ISO copyright office
Ch. de Blandonnet 8 • CP 401
CH-1214 Vernier, Geneva, Switzerland
Tel. +41 22 749 01 11
Fax +41 22 749 09 47
copyright@iso.org
www.iso.org
ii © ISO 2017 – All rights reserved
Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
5 Reagents . 2
5.1 Standard and reference compounds . 2
5.2 Standard solutions . 3
5.2.1 General. 3
5.2.2 Stock solutions (1 mg/ml) . 3
5.2.3 Working solutions . 3
5.3 Other reagents . 4
5.4 Reagent solutions . 4
6 Apparatus . 5
7 Sample . 5
7.1 Sampling . 5
7.2 Preparation of the test sample . 5
8 Procedure. 6
8.1 Test sample preparation . 6
8.2 Preparation of the calibration curve . 7
8.3 Gas chromatography/mass spectrometry references . 7
9 Expression of results . 8
9.1 Quantification of 3-MCPD esters . 8
9.2 Quantification of 2-MCPD esters . 9
9.3 Quantification of glycidyl esters . 9
10 Precision .10
10.1 General .10
10.2 Repeatability .10
10.3 Between-day reproducibility .10
11 Test report .11
Annex A (informative) Construction of the calibration curves .12
Annex B (informative) Results of the interlaboratory test .16
Bibliography .18
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www.iso.org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation on the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO’s adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see the following
URL: www.iso.org/iso/foreword.html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 11,
Animal and vegetable fats and oils.
A list of all parts in the ISO 18363 series can be found on the ISO website.
iv © ISO 2017 – All rights reserved
Introduction
The ISO 18363 series is a family of International Standards which can be used for the determination of
ester-bound MCPD and glycidol. This introduction describes the methods specified in the three documents
currently published or proposed so that the analyst can decide which methods are suitable for application.
The detailed application of each method is contained within the scope of the individual method.
ISO 18363-1 is a differential method equivalent to the DGF standard C-VI 18 (10) and identical to AOCS
Official Method Cd 29c-13. Briefly, it is based on a fast alkaline catalysed release of 3-MCPD and glycidol
from the ester derivatives. Glycidol is subsequently converted into induced 3-MCPD. It consists of two
parts. The first part (A) allows the determination of the sum of ester-bound 3-MCPD and ester-bound
glycidol, whereas the second part (B) determines ester-bound 3-MCPD only. Both assays are based
on the release of the target analytes 3-MCPD and glycidol from the ester-bound form by an alkaline
catalysed alcoholysis carried out at room temperature. In part A, an acidified sodium chloride solution
is used to stop the reaction and subsequently convert the glycidol into induced 3-MCPD. Thus, 3-MCPD
and glycidol become indistinguishable in part A. In part B, the reaction stop is achieved by the addition
of an acidified chloride-free salt solution which also prevents the conversion of glycidol into induced
MCPD. Thereby, part B allows the determination of the genuine 3-MCPD content. Finally, the glycidol
content of the sample is proportional to the difference of both assays (A – B) and can be calculated
when the transformation ratio from glycidol to 3-MCPD has been determined. ISO 18363-1 is applicable
to the fast determination of ester-bound 3-MCPD and glycidol in refined and non-refined vegetable oils
and fats. ISO 18363-1 can also apply to animal fats and used frying oils and fats, but a validation study
has to be undertaken before the analysis of these matrices. Any free analytes within the sample would
be included in the results, but the document does not allow the distinction between free and bound
analytes. However, as of publication, research has not shown any evidence of a free analyte content as
high as the esterified analyte content in refined vegetable oils and fats. In principle, ISO 18363-1 can
also be modified in such a way that the determination of 2-MCPD is feasible, but again, a validation
study has to be undertaken before the analysis of this analyte.
ISO 18363-2 (proposed) will represent AOCS Official Method Cd 29b-13. Briefly, it will be based on a slow
alkaline release of MCPD and glycidol from the ester derivatives. Glycidol is subsequently converted
into 3-MBPD. ISO 18363-2 will consist of two sample preparations that differ in the use of internal
standards. Both preparations will be used for the determination of ester-bound 2-MCPD and 3-MCPD.
In part A, a preliminary result for ester-bound glycidol will be determined. Because the 3-MCPD present
in the sample will be converted to some minor extent into induced glycidol by the sample preparation,
part B will serve to quantify this amount of induced glycidol that is subsequently subtracted from the
preliminary glycidol result of part A. By the use of isotopically labelled free MCPD isomers in assay A
and isotopically labelled ester-bound 2-MCPD and 3-MCPD in part B, the efficiency of ester cleavage will
be able to be monitored. Both assays A and B will be based on the release of the target analytes 2-MCPD,
3-MCPD, and glycidol from the ester-bound form by a slow alkaline catalysed alcoholysis in the cold.
In both sample preparations, the reaction will be stopped by the addition of an acidified concentrated
sodium bromide solution so as to convert the unstable and volatile glycidol into 3-MBPD which shows
comparable properties to 3-MCPD with regard to its stability and chromatographic performance.
Moreover, the major excess of bromide ions will prevent the undesired formation of 3-MCPD from
glycidol in the case of samples which contain naturally occurring amounts of chloride. ISO 18363-2
will be applicable to the determination of ester-bound 3-MCPD, 2-MCPD, and glycidol in refined and
unrefined vegetable oils and fats. It w
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STANDARD 18363-3
First edition
2017-12
Animal and vegetable fats and oils —
Determination of fatty-acid-bound
chloropropanediols (MCPDs) and
glycidol by GC/MS —
Part 3:
Method using acid transesterification
and measurement for 2-MCPD,
3-MCPD and glycidol
Corps gras d'origines animale et végétale — Détermination des
esters de chloropropanediols (MCPD) et d'acides gras et des esters de
glycidol et d'acides gras par CPG/SM —
Partie 3: Méthode par transestérification acide et mesure pour le
2-MCPD, le 3-MCPD et le glycidol
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Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
5 Reagents . 2
5.1 Standard and reference compounds . 2
5.2 Standard solutions . 3
5.2.1 General. 3
5.2.2 Stock solutions (1 mg/ml) . 3
5.2.3 Working solutions . 3
5.3 Other reagents . 4
5.4 Reagent solutions . 4
6 Apparatus . 5
7 Sample . 5
7.1 Sampling . 5
7.2 Preparation of the test sample . 5
8 Procedure. 6
8.1 Test sample preparation . 6
8.2 Preparation of the calibration curve . 7
8.3 Gas chromatography/mass spectrometry references . 7
9 Expression of results . 8
9.1 Quantification of 3-MCPD esters . 8
9.2 Quantification of 2-MCPD esters . 9
9.3 Quantification of glycidyl esters . 9
10 Precision .10
10.1 General .10
10.2 Repeatability .10
10.3 Between-day reproducibility .10
11 Test report .11
Annex A (informative) Construction of the calibration curves .12
Annex B (informative) Results of the interlaboratory test .16
Bibliography .18
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www.iso.org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation on the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO’s adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see the following
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This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 11,
Animal and vegetable fats and oils.
A list of all parts in the ISO 18363 series can be found on the ISO website.
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Introduction
The ISO 18363 series is a family of International Standards which can be used for the determination of
ester-bound MCPD and glycidol. This introduction describes the methods specified in the three documents
currently published or proposed so that the analyst can decide which methods are suitable for application.
The detailed application of each method is contained within the scope of the individual method.
ISO 18363-1 is a differential method equivalent to the DGF standard C-VI 18 (10) and identical to AOCS
Official Method Cd 29c-13. Briefly, it is based on a fast alkaline catalysed release of 3-MCPD and glycidol
from the ester derivatives. Glycidol is subsequently converted into induced 3-MCPD. It consists of two
parts. The first part (A) allows the determination of the sum of ester-bound 3-MCPD and ester-bound
glycidol, whereas the second part (B) determines ester-bound 3-MCPD only. Both assays are based
on the release of the target analytes 3-MCPD and glycidol from the ester-bound form by an alkaline
catalysed alcoholysis carried out at room temperature. In part A, an acidified sodium chloride solution
is used to stop the reaction and subsequently convert the glycidol into induced 3-MCPD. Thus, 3-MCPD
and glycidol become indistinguishable in part A. In part B, the reaction stop is achieved by the addition
of an acidified chloride-free salt solution which also prevents the conversion of glycidol into induced
MCPD. Thereby, part B allows the determination of the genuine 3-MCPD content. Finally, the glycidol
content of the sample is proportional to the difference of both assays (A – B) and can be calculated
when the transformation ratio from glycidol to 3-MCPD has been determined. ISO 18363-1 is applicable
to the fast determination of ester-bound 3-MCPD and glycidol in refined and non-refined vegetable oils
and fats. ISO 18363-1 can also apply to animal fats and used frying oils and fats, but a validation study
has to be undertaken before the analysis of these matrices. Any free analytes within the sample would
be included in the results, but the document does not allow the distinction between free and bound
analytes. However, as of publication, research has not shown any evidence of a free analyte content as
high as the esterified analyte content in refined vegetable oils and fats. In principle, ISO 18363-1 can
also be modified in such a way that the determination of 2-MCPD is feasible, but again, a validation
study has to be undertaken before the analysis of this analyte.
ISO 18363-2 (proposed) will represent AOCS Official Method Cd 29b-13. Briefly, it will be based on a slow
alkaline release of MCPD and glycidol from the ester derivatives. Glycidol is subsequently converted
into 3-MBPD. ISO 18363-2 will consist of two sample preparations that differ in the use of internal
standards. Both preparations will be used for the determination of ester-bound 2-MCPD and 3-MCPD.
In part A, a preliminary result for ester-bound glycidol will be determined. Because the 3-MCPD present
in the sample will be converted to some minor extent into induced glycidol by the sample preparation,
part B will serve to quantify this amount of induced glycidol that is subsequently subtracted from the
preliminary glycidol result of part A. By the use of isotopically labelled free MCPD isomers in assay A
and isotopically labelled ester-bound 2-MCPD and 3-MCPD in part B, the efficiency of ester cleavage will
be able to be monitored. Both assays A and B will be based on the release of the target analytes 2-MCPD,
3-MCPD, and glycidol from the ester-bound form by a slow alkaline catalysed alcoholysis in the cold.
In both sample preparations, the reaction will be stopped by the addition of an acidified concentrated
sodium bromide solution so as to convert the unstable and volatile glycidol into 3-MBPD which shows
comparable properties to 3-MCPD with regard to its stability and chromatographic performance.
Moreover, the major excess of bromide ions will prevent the undesired formation of 3-MCPD from
glycidol in the case of samples which contain naturally occurring amounts of chloride. ISO 18363-2
will be applicable to the determination of ester-bound 3-MCPD, 2-MCPD, and glycidol in refined and
unrefined vegetable oils and fats. It w
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NORME ISO
INTERNATIONALE 18363-3
Première édition
2017-12
Corps gras d'origines animale et
végétale — Détermination des esters
de chloropropanediols (MCPD) et
d'acides gras et des esters de glycidol
et d'acides gras par CPG/SM —
Partie 3:
Méthode par transestérification acide
et mesure du 2-MCPD, du 3-MCPD et
du glycidol
Animal and vegetable fats and oils — Determination of fatty-acid-
bound chloropropanediols (MCPDs) and glycidol by GC/MS —
Part 3: Method using acid transesterification and measurement for
2-MCPD, 3-MCPD and glycidol
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sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie, l’affichage sur
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l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
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Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 2
5 Réactifs . 2
5.1 Composés étalons et composés de référence . 2
5.2 Solutions étalons . 3
5.2.1 Généralités . 3
5.2.2 Solutions stock (1 mg/ml) . 3
5.2.3 Solutions de travail . 3
5.3 Autres réactifs . 4
5.4 Solutions de réactifs . 4
6 Appareillage . 5
7 Échantillon . 6
7.1 Échantillonnage . 6
7.2 Préparation de l’échantillon pour essai . 6
8 Mode opératoire. 6
8.1 Préparation de l’échantillon pour essai . 6
8.2 Préparation de la droite d’étalonnage . 7
8.3 Références relatives à la chromatographie en phase gazeuse/spectrométrie de
masse (CPG/SM) . 7
9 Expression des résultats. 8
9.1 Quantification des esters de 3-MCPD . 8
9.2 Quantification des esters de 2-MCPD . 9
9.3 Quantification des esters de glycidol .10
10 Fidélité .11
10.1 Généralités .11
10.2 Répétabilité .11
10.3 Reproductibilité entre jours .11
11 Rapport d’essai .11
Annexe A (informative) Construction des droites d’étalonnage .12
Annexe B (informative) Résultats de l’essai interlaboratoire .16
Bibliographie .18
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/ directives).
L'attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/ brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion
de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: www .iso .org/ avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-
comité SC 11, Corps gras d'origines animale et végétale.
Une liste de toutes les parties de la série ISO 18363 se trouve sur le site Web de l’ISO.
iv © ISO 2017 – Tous droits réservés
Introduction
La série ISO 18363 est une famille de Normes internationales pouvant être utilisée pour la détermination
des esters de MCPD et de glycidol. La présente introduction décrit les méthodes spécifiées dans les trois
documents actuellement publiés ou proposés, afin de permettre à l’analyste de décider des méthodes
appropriées en fonction de son application. L’application détaillée de chaque méthode figure dans le
domaine d’application de la méthode concernée.
L’ISO 18363-1 est une méthode différentielle équivalente à la norme C-VI 18 (10) de la DGF et identique
à la méthode officielle Cd 29c-13 de l’AOCS. En résumé, elle repose sur la libération rapide par catalyse
alcaline de 3-MCPD et de glycidol à partir de leurs dérivés esters. Le glycidol est par la suite converti
en 3-MCPD. Elle comprend deux parties. La première partie (A) permet de déterminer la somme des
esters de 3-MCPD et des esters de glycidol, tandis que la seconde partie (B) ne détermine que les esters
de 3-MCPD. Les deux analyses reposent sur la libération des analytes cibles, le 3-MCPD et le glycidol,
à partir des esters par alcoolyse en présence d’un catalyseur alcalin à température ambiante. Dans
la partie A, une solution acidifiée de chlorure de sodium est utilisée pour interrompre la réaction qui
induit par la suite la conversion du glycidol en 3-MCPD. Il n’est par conséquent plus possible de faire la
distinction entre le 3-MCPD et le glycidol dans la partie A. Dans la partie B, la réaction est interrompue
par ajout d’une solution saline acidifiée exempte de chlorure qui évite aussi la conversion du glycidol
en MCPD. La partie B permet donc de déterminer la véritable teneur en 3-MCPD. Enfin, la teneur en
glycidol de l’échantillon est proportionnelle à la différence entre les deux analyses (A – B) et peut être
calculée lorsque le coefficient de transformation du glycidol en 3-MCPD a été déterminé. L’ISO 18363-1
est applicable à la détermination rapide des esters de 3-MCPD et de glycidol dans les corps gras d’origine
végétale raffinés et non raffinés. L’ISO 18363-1 peut également s’appliquer aux graisses animales et aux
huiles de friture usagées, mais une étude de validation doit être menée avant de procéder à l’analyse de
ces matrices. Les analytes libres éventuellement contenus dans l’échantillon sont habituellement inclus
dans les résultats, mais le document ne permet pas de faire la distinction entre les analytes libres et
les analytes liés. Néanmoins, les études disponibles au moment de la publication ne révèlent aucune
teneur en analytes libres aussi élevée que la teneur en analytes estérifiés dans les corps gras d’origine
végétale raffinés. En principe, la présente partie de l’ISO 18363-1 peut également être modifiée de façon
à permettre la détermination du 2-MCPD, mais une fois encore, une étude de validation doit être menée
avant d’analyser cet analyte.
L’ISO 18363-2 (proposé) correspondra à la méthode officielle Cd 29b-13 de l’AOCS. En résumé,
elle reposera sur une libération alcaline lente de MCPD et de glycidol à partir des formes esters. Le
glycidol est par la suite converti en 3-MBPD. L’ISO 18363-2 comprend deux préparations d’échantillons
qui se distinguent par l’utilisation d’étalons internes. Les deux préparations seront utilisées pour la
détermination des esters de 2-MCPD et de 3-MCPD. Un résultat préliminaire pour les esters de glycidol
sera déterminé dans la partie A. Comme le 3-MCPD présent dans l’échantillon sera partiellement
converti en glycidol lors de la préparation de l’échantillon, la partie B servira à quantifier la teneur
en glycidol issue de cette transformation qui est ensuite soustraite du résultat préliminaire obtenu
pour le glycidol dans la partie A. L’utilisation d’isomères isotopiques de MCPD libres dans l’analyse A
et de formes isotopiques d’esters de 2-MCPD et de
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NORME ISO
INTERNATIONALE 18363-3
Première édition
2017-12
Corps gras d'origines animale et
végétale — Détermination des esters
de chloropropanediols (MCPD) et
d'acides gras et des esters de glycidol
et d'acides gras par CPG/SM —
Partie 3:
Méthode par transestérification acide
et mesure du 2-MCPD, du 3-MCPD et
du glycidol
Animal and vegetable fats and oils — Determination of fatty-acid-
bound chloropropanediols (MCPDs) and glycidol by GC/MS —
Part 3: Method using acid transesterification and measurement for
2-MCPD, 3-MCPD and glycidol
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Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 2
5 Réactifs . 2
5.1 Composés étalons et composés de référence . 2
5.2 Solutions étalons . 3
5.2.1 Généralités . 3
5.2.2 Solutions stock (1 mg/ml) . 3
5.2.3 Solutions de travail . 3
5.3 Autres réactifs . 4
5.4 Solutions de réactifs . 4
6 Appareillage . 5
7 Échantillon . 6
7.1 Échantillonnage . 6
7.2 Préparation de l’échantillon pour essai . 6
8 Mode opératoire. 6
8.1 Préparation de l’échantillon pour essai . 6
8.2 Préparation de la droite d’étalonnage . 7
8.3 Références relatives à la chromatographie en phase gazeuse/spectrométrie de
masse (CPG/SM) . 7
9 Expression des résultats. 8
9.1 Quantification des esters de 3-MCPD . 8
9.2 Quantification des esters de 2-MCPD . 9
9.3 Quantification des esters de glycidol .10
10 Fidélité .11
10.1 Généralités .11
10.2 Répétabilité .11
10.3 Reproductibilité entre jours .11
11 Rapport d’essai .11
Annexe A (informative) Construction des droites d’étalonnage .12
Annexe B (informative) Résultats de l’essai interlaboratoire .16
Bibliographie .18
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/ directives).
L'attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/ brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion
de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: www .iso .org/ avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-
comité SC 11, Corps gras d'origines animale et végétale.
Une liste de toutes les parties de la série ISO 18363 se trouve sur le site Web de l’ISO.
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Introduction
La série ISO 18363 est une famille de Normes internationales pouvant être utilisée pour la détermination
des esters de MCPD et de glycidol. La présente introduction décrit les méthodes spécifiées dans les trois
documents actuellement publiés ou proposés, afin de permettre à l’analyste de décider des méthodes
appropriées en fonction de son application. L’application détaillée de chaque méthode figure dans le
domaine d’application de la méthode concernée.
L’ISO 18363-1 est une méthode différentielle équivalente à la norme C-VI 18 (10) de la DGF et identique
à la méthode officielle Cd 29c-13 de l’AOCS. En résumé, elle repose sur la libération rapide par catalyse
alcaline de 3-MCPD et de glycidol à partir de leurs dérivés esters. Le glycidol est par la suite converti
en 3-MCPD. Elle comprend deux parties. La première partie (A) permet de déterminer la somme des
esters de 3-MCPD et des esters de glycidol, tandis que la seconde partie (B) ne détermine que les esters
de 3-MCPD. Les deux analyses reposent sur la libération des analytes cibles, le 3-MCPD et le glycidol,
à partir des esters par alcoolyse en présence d’un catalyseur alcalin à température ambiante. Dans
la partie A, une solution acidifiée de chlorure de sodium est utilisée pour interrompre la réaction qui
induit par la suite la conversion du glycidol en 3-MCPD. Il n’est par conséquent plus possible de faire la
distinction entre le 3-MCPD et le glycidol dans la partie A. Dans la partie B, la réaction est interrompue
par ajout d’une solution saline acidifiée exempte de chlorure qui évite aussi la conversion du glycidol
en MCPD. La partie B permet donc de déterminer la véritable teneur en 3-MCPD. Enfin, la teneur en
glycidol de l’échantillon est proportionnelle à la différence entre les deux analyses (A – B) et peut être
calculée lorsque le coefficient de transformation du glycidol en 3-MCPD a été déterminé. L’ISO 18363-1
est applicable à la détermination rapide des esters de 3-MCPD et de glycidol dans les corps gras d’origine
végétale raffinés et non raffinés. L’ISO 18363-1 peut également s’appliquer aux graisses animales et aux
huiles de friture usagées, mais une étude de validation doit être menée avant de procéder à l’analyse de
ces matrices. Les analytes libres éventuellement contenus dans l’échantillon sont habituellement inclus
dans les résultats, mais le document ne permet pas de faire la distinction entre les analytes libres et
les analytes liés. Néanmoins, les études disponibles au moment de la publication ne révèlent aucune
teneur en analytes libres aussi élevée que la teneur en analytes estérifiés dans les corps gras d’origine
végétale raffinés. En principe, la présente partie de l’ISO 18363-1 peut également être modifiée de façon
à permettre la détermination du 2-MCPD, mais une fois encore, une étude de validation doit être menée
avant d’analyser cet analyte.
L’ISO 18363-2 (proposé) correspondra à la méthode officielle Cd 29b-13 de l’AOCS. En résumé,
elle reposera sur une libération alcaline lente de MCPD et de glycidol à partir des formes esters. Le
glycidol est par la suite converti en 3-MBPD. L’ISO 18363-2 comprend deux préparations d’échantillons
qui se distinguent par l’utilisation d’étalons internes. Les deux préparations seront utilisées pour la
détermination des esters de 2-MCPD et de 3-MCPD. Un résultat préliminaire pour les esters de glycidol
sera déterminé dans la partie A. Comme le 3-MCPD présent dans l’échantillon sera partiellement
converti en glycidol lors de la préparation de l’échantillon, la partie B servira à quantifier la teneur
en glycidol issue de cette transformation qui est ensuite soustraite du résultat préliminaire obtenu
pour le glycidol dans la partie A. L’utilisation d’isomères isotopiques de MCPD libres dans l’analyse A
et de formes isotopiques d’esters de 2-MCPD et de
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.