Animal and vegetable fats and oils - Gas chromatography of fatty acid methyl esters - Part 2: Preparation of methyl esters of fatty acids (ISO 12966-2:2017)

ISO 12966-2:2017 specifies methods of preparing the methyl esters of fatty acids.
It includes methods for preparing fatty acid methyl esters from animal and vegetable fats and oils, fatty acids and soaps. To cover different requirements, four methylation methods are specified, namely:
a)    a "rapid" transmethylation procedure under alkaline conditions;
b)    a "general" transmethylation/methylation procedure under sequential alkaline and acid conditions;
c)    a BF3 transmethylation procedure;
d)    an alternative procedure using acid-catalysed transmethylation of glycerides.
Methyl esters so produced are used in various analytical procedures requiring such derivatives, e.g. gas-liquid chromatography (GLC), thin-layer chromatography (TLC) and infrared spectrometry (IR).
Milk and milk products (or fat coming from milk and milk products) are excluded from the scope of this document.

Tierische und pflanzliche Fette und Öle - Gaschromatographie von Fettsäuremethylestern - Teil 2: Herstellung von Fettsäuremethylestern (ISO 12966-2:2017)

Corps gras d'origines animale et végétale - Chromatographie en phase gazeuse des esters méthyliques d'acides gras - Partie 2: Préparation des esters méthyliques d'acides gras (ISO 12966-2:2017)

ISO 12966-2:2017 spécifie des méthodes de préparation des esters méthyliques d'acides gras.
Il comprend des méthodes de préparation des esters méthyliques d'acides gras à partir de corps gras d'origines animale et végétale, d'acides gras et de savons. Afin de répondre à différentes exigences, quatre méthodes de méthylation sont spécifiées, à savoir:
a)    une méthode de transméthylation «rapide» en conditions alcalines;
b)    une méthode de transméthylation/méthylation «générale» en conditions alcalines et acides séquentielles;
c)    une méthode de transméthylation au BF3;
d)    une méthode alternative reposant sur la transméthylation par catalyse acide de glycérides.
Les esters méthyliques ainsi obtenus sont utilisés dans diverses méthodes d'analyse exigeant des produits dérivés de ce type, par exemple la chromatographie gaz-liquide (CGL), la chromatographie sur couche mince (CCM) et la spectrométrie infrarouge (IR).
Le lait et les produits laitiers (ou les matières grasses provenant du lait et des produits laitiers) ne font pas partie du domaine d'application du présent document.

Rastlinske in živalske maščobe in olja - Plinska kromatografija metilnih estrov maščobnih kislin - 2. del: Priprava metilnih estrov maščobnih kislin (ISO 12966-2:2017)

Ta del standarda ISO 12966-4:2015 določa metodo za določanje metilnih estrov maščobnih kislin (FAME), pridobljenih s transesterifikacijo ali esterifikacijo iz maščob, olj in maščobnih kislin, s kapilarno plinsko kromatografijo (GLC). Metilne estre maščobnih kislin C8 do C24 je mogoče ločiti z uporabo metode iz tega dela standarda ISO 12966, vključno z metilnimi estri nasičenih maščobnih kislin, metilnimi estri cis- in trans-enkratno nenasičenih maščobnih kislin ter metilnimi estri cis- in trans-večkratno nenasičenih maščobnih kislin.
Ta metoda velja za surove, rafinirane in delno ali povsem hidrogenirane maščobe, olja in maščobne kisline, pridobljene iz živalskih in rastlinskih virov.
Ta metoda ni primerna za analizo mlečnih izdelkov, maščob in olj prežvekovalcev ali izdelkov z dodano konjugirano linolno kislino (CLA). Mleko in mlečni izdelki (ali maščoba iz mleka in mlečnih izdelkov) niso zajeti v tem delu standarda ISO 12966.
Standard 12966-4:2015 se ne uporablja za dimerne, trimerne, polimerne in oksidirane maščobne kisline ter maščobe in olja.

General Information

Status
Published
Publication Date
25-Apr-2017
Withdrawal Date
30-Oct-2017
Current Stage
6060 - Definitive text made available (DAV) - Publishing
Start Date
26-Apr-2017
Completion Date
26-Apr-2017

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SLOVENSKI STANDARD
01-julij-2017
1DGRPHãþD
SIST EN ISO 12966-2:2011
5DVWOLQVNHLQåLYDOVNHPDãþREHLQROMD3OLQVNDNURPDWRJUDILMDPHWLOQLKHVWURY
PDãþREQLKNLVOLQGHO3ULSUDYDPHWLOQLKHVWURYPDãþREQLKNLVOLQ ,62

Animal and vegetable fats and oils - Gas chromatography of fatty acid methyl esters -
Part 2: Preparation of methyl esters of fatty acids (ISO 12966-2:2017)
Tierische und pflanzliche Fette und Öle - Gaschromatographie von
Fettsäuremethylestern - Teil 2: Herstellung von Fettsäuremethylestern (ISO 12966-
2:2017)
Corps gras d'origines animale et végétale - Chromatographie en phase gazeuse des
esters méthyliques d'acides gras - Partie 2: Préparation des esters méthyliques d'acides
gras (ISO 12966-2:2017)
Ta slovenski standard je istoveten z: EN ISO 12966-2:2017
ICS:
67.200.10 5DVWOLQVNHLQåLYDOVNH Animal and vegetable fats
PDãþREHLQROMD and oils
71.040.50 Fizikalnokemijske analitske Physicochemical methods of
metode analysis
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

EN ISO 12966-2
EUROPEAN STANDARD
NORME EUROPÉENNE
April 2017
EUROPÄISCHE NORM
ICS 67.200.10 Supersedes EN ISO 12966-2:2011
English Version
Animal and vegetable fats and oils - Gas chromatography
of fatty acid methyl esters - Part 2: Preparation of methyl
esters of fatty acids (ISO 12966-2:2017)
Corps gras d'origines animale et végétale - Tierische und pflanzliche Fette und Öle -
Chromatographie en phase gazeuse des esters Gaschromatographie von Fettsäuremethylestern - Teil
méthyliques d'acides gras - Partie 2: Préparation des 2: Herstellung von Fettsäuremethylestern (ISO 12966-
esters méthyliques d'acides gras (ISO 12966-2:2017) 2:2017)
This European Standard was approved by CEN on 3 April 2017.

CEN members are bound to comply with the CEN/CENELEC Internal Regulations which stipulate the conditions for giving this
European Standard the status of a national standard without any alteration. Up-to-date lists and bibliographical references
concerning such national standards may be obtained on application to the CEN-CENELEC Management Centre or to any CEN
member.
This European Standard exists in three official versions (English, French, German). A version in any other language made by
translation under the responsibility of a CEN member into its own language and notified to the CEN-CENELEC Management
Centre has the same status as the official versions.

CEN members are the national standards bodies of Austria, Belgium, Bulgaria, Croatia, Cyprus, Czech Republic, Denmark, Estonia,
Finland, Former Yugoslav Republic of Macedonia, France, Germany, Greece, Hungary, Iceland, Ireland, Italy, Latvia, Lithuania,
Luxembourg, Malta, Netherlands, Norway, Poland, Portugal, Romania, Serbia, Slovakia, Slovenia, Spain, Sweden, Switzerland,
Turkey and United Kingdom.
EUROPEAN COMMITTEE FOR STANDARDIZATION
COMITÉ EUROPÉEN DE NORMALISATION

EUROPÄISCHES KOMITEE FÜR NORMUNG

CEN-CENELEC Management Centre: Avenue Marnix 17, B-1000 Brussels
© 2017 CEN All rights of exploitation in any form and by any means reserved Ref. No. EN ISO 12966-2:2017 E
worldwide for CEN national Members.

Contents Page
European foreword . 3

European foreword
This document (EN ISO 12966-2:2017) has been prepared by Technical Committee ISO/TC 34 “Food
products” in collaboration with Technical Committee CEN/TC 307 “Oilseeds, vegetable and animal fats
and oils and their by-products - Methods of sampling and analysis” the secretariat of which is held by
AFNOR.
This European Standard shall be given the status of a national standard, either by publication of an
identical text or by endorsement, at the latest by October 2017 and conflicting national standards shall
be withdrawn at the latest by October 2017.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. CEN [and/or CENELEC] shall not be held responsible for identifying any or all such patent
rights.
This document supersedes EN ISO 12966-2:2011.
According to the CEN-CENELEC Internal Regulations, the national standards organizations of the
following countries are bound to implement this European Standard: Austria, Belgium, Bulgaria,
Croatia, Cyprus, Czech Republic, Denmark, Estonia, Finland, Former Yugoslav Republic of Macedonia,
France, Germany, Greece, Hungary, Iceland, Ireland, Italy, Latvia, Lithuania, Luxembourg, Malta,
Netherlands, Norway, Poland, Portugal, Romania, Serbia, Slovakia, Slovenia, Spain, Sweden, Switzerland,
Turkey and the United Kingdom.
Endorsement notice
The text of ISO 12966-2:2017 has been approved by CEN as EN ISO 12966-2:2017 without any
modification.
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 12966-2
Second edition
2017-03
Animal and vegetable fats and oils —
Gas chromatography of fatty acid
methyl esters —
Part 2:
Preparation of methyl esters of fatty
acids
Corps gras d’origines animale et végétale — Chromatographie en
phase gazeuse des esters méthyliques d’acides gras —
Partie 2: Préparation des esters méthyliques d’acides gras
Reference number
ISO 12966-2:2017(E)
©
ISO 2017
ISO 12966-2:2017(E)
© ISO 2017, Published in Switzerland
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized otherwise in any form
or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting on the internet or an intranet, without prior
written permission. Permission can be requested from either ISO at the address below or ISO’s member body in the country of
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CH-1214 Vernier, Geneva, Switzerland
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Fax +41 22 749 09 47
copyright@iso.org
www.iso.org
ii © ISO 2017 – All rights reserved

ISO 12966-2:2017(E)
Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Reactions . 1
5 Methodology . 2
5.1 Preparation of test sample . 2
5.2 Rapid method . 2
5.2.1 Applicability . 2
5.2.2 Principle . 2
5.2.3 Reagents . 3
5.2.4 Apparatus . 3
5.2.5 Procedure . 3
5.3 General method . 4
5.3.1 Applicability . 4
5.3.2 Principle . 4
5.3.3 Reagents . 4
5.3.4 Apparatus and materials . 5
5.3.5 Procedure . 5
5.4 Transmethylation using boron trifluoride (BF ) catalyst . 6
5.4.1 Principle . 6
5.4.2 Applicability . 6
5.4.3 Reagents . 6
5.4.4 Apparatus . 7
5.4.5 Procedure . 8
5.5 Acid-catalysed transmethylation of glycerides . 9
5.5.1 Principle . 9
5.5.2 Reagents . 9
5.5.3 Apparatus .10
5.5.4 Preparation of test sample .10
5.5.5 Procedure .10
Annex A (informative) Thin-layer chromatography method for testing the completeness
of derivatization .11
Bibliography .15
ISO 12966-2:2017(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/ directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the su
...


SLOVENSKI STANDARD
oSIST prEN ISO 12966-2:2017
01-februar-2017
5DVWOLQVNHLQåLYDOVNHPDãþREHLQROMD3OLQVNDNURPDWRJUDILMDPHWLOHVWURY
PDãþREQLKNLVOLQGHO3ULSUDYDPHWLOHVWURYPDãþREQLKNLVOLQ ,62',6

Animal and vegetable fats and oils - Gas chromatography of fatty acid methyl esters -
Part 2: Preparation of methyl esters of fatty acids
Tierische und pflanzliche Fette und Öle - Gaschromatographie von
Fettsäuremethylestern - Teil: 2: Herstellung von Fettsäuremethylestern (ISO/DIS 12966-
2:2016); Deutsche und Englische Fassung prEN ISO 12966-2:2016
Corps gras d'origines animale et végétale - Chromatographie en phase gazeuse des
esters méthyliques d'acides gras - Partie 2: Préparation des esters méthyliques d'acides
gras
Ta slovenski standard je istoveten z: prEN ISO 12966-2
ICS:
67.200.10 5DVWOLQVNHLQåLYDOVNH Animal and vegetable fats
PDãþREHLQROMD and oils
71.040.50 Fizikalnokemijske analitske Physicochemical methods of
metode analysis
oSIST prEN ISO 12966-2:2017 de
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

oSIST prEN ISO 12966-2:2017
oSIST prEN ISO 12966-2:2017
EUROPÄISCHE NORM
ENTWURF
prEN ISO 12966-2
EUROPEAN STANDARD
NORME EUROPÉENNE
Dezember 2016
ICS 67.200.10 Vorgesehen als Ersatz für EN ISO 12966-2:2011
Deutsche Fassung
Tierische und pflanzliche Fette und Öle - Gaschromatographie
von Fettsäuremethylestern - Teil 2: Herstellung von
Fettsäuremethylestern (ISO/FDIS 12966-2:2016)
Animal and vegetable fats and oils - Gas chromatography of Corps gras d'origines animale et végétale -
fatty acid methyl esters - Part 2: Preparation of methyl Chromatographie en phase gazeuse des esters
esters of fatty acids (ISO/FDIS 12966-2:2016) méthyliques d'acides gras - Partie 2: Préparation des esters
méthyliques d'acides gras (ISO/FDIS 12966-2:2016)
Dieser Europäische Norm-Entwurf wird den CEN-Mitgliedern zur parallelen Umfrage vorgelegt. Er wurde vom Technischen Komitee
CEN/TC 307 erstellt.
Wenn aus diesem Norm-Entwurf eine Europäische Norm wird, sind die CEN-Mitglieder gehalten, die CEN-Geschäftsordnung zu erfüllen, in
der die Bedingungen festgelegt sind, unter denen dieser Europäischen Norm ohne jede Änderung der Status einer nationalen Norm zu
geben ist.
Dieser Europäische Norm-Entwurf wurde vom CEN in drei offiziellen Fassungen (Deutsch, Englisch, Französisch) erstellt. Eine Fassung in
einer anderen Sprache, die von einem CEN-Mitglied in eigener Verantwortung durch Übersetzung in seine Landessprache gemacht und
dem Management-Zentrum des CEN-CENELEC mitgeteilt worden ist, hat den gleichen Status wie die offiziellen Fassungen.

CEN-Mitglieder sind die nationalen Normungsinstitute von Belgien, Bulgarien, Dänemark, Deutschland, der ehemaligen jugoslawischen
Republik Mazedonien, Estland, Finnland, Frankreich, Griechenland, Irland, Island, Italien, Kroatien, Lettland, Litauen, Luxemburg, Malta,
den Niederlanden, Norwegen, Österreich, Polen, Portugal, Rumänien, Schweden, der Schweiz, der Slowakei, Slowenien, Spanien, der
Tschechischen Republik, der Türkei, Ungarn, dem Vereinigten Königreich und Zypern.

Die Empfänger dieses Norm-Entwurfs werden gebeten, mit ihren Kommentaren jegliche relevante Patentrechte, die sie kennen, mitzuteilen
und unterstützende Dokumentationen zur Verfügung zu stellen.

Warnvermerk : Dieses Schriftstück hat noch nicht den Status einer Europäischen Norm. Es wird zur Prüfung und Stellungnahme
vorgelegt. Es kann sich noch ohne Ankündigung ändern und darf nicht als Europäischen Norm in Bezug genommen werden.

EUROPÄISCHES KOMITEE FÜR NORMUNG
EUROPEAN COMMITTEE FOR STANDARDIZATION

COMITÉ EUROPÉEN DE NORMALISATION

CEN-CENELEC Management-Zentrum: Avenue Marnix 17, B-1000 Brüssel
© 2016 CEN Alle Rechte der Verwertung, gleich in welcher Form und in welchem Ref. Nr. prEN ISO 12966-2:2016 D
Verfahren, sind weltweit den nationalen Mitgliedern von CEN vorbehalten.

oSIST prEN ISO 12966-2:2017
FprEN ISO 12966-2:2016 (D)
Inhalt
Seite
Europäisches Vorwort . 4
Vorwort . 5
Einleitung . 6
1 Anwendungsbereich . 9
2 Normative Verweisungen . 9
3 Begriffe . 9
4 Reaktionen . 9
5 Verfahrensweise . 10
5.1 Vorbereitung der Untersuchungsprobe . 10
5.2 Schnellverfahren . 10
5.2.1 Anwendbarkeit . 10
5.2.2 Kurzbeschreibung . 10
5.2.3 Reagenzien . 10
5.2.4 Geräte . 11
5.2.5 Verfahren . 11
5.3 Allgemeines Verfahren . 12
5.3.1 Anwendbarkeit . 12
5.3.2 Kurzbeschreibung . 12
5.3.3 Reagenzien . 12
5.3.4 Geräte und Materialien . 13
5.3.5 Verfahren . 13
5.4 Transmethylierung mit Bortriflourid (BF )-Katalysator . 14
5.4.1 Kurzbeschreibung . 14
5.4.2 Anwendbarkeit . 14
5.4.3 Reagenzien . 14
5.4.4 Geräte . 15
5.4.5 Verfahren . 16
5.5 Säurekatalysierte Transmethylierung der Glyceride . 18
5.5.1 Kurzbeschreibung . 18
5.5.2 Reagenzien . 18
5.5.3 Geräte . 18
5.5.4 Vorbereitung der Untersuchungsprobe . 18
oSIST prEN ISO 12966-2:2017
FprEN ISO 12966-2:2016 (D)
5.5.5 Verfahren . 19
Anhang A (informativ) Dünnschichtchromatographisches Verfahren für die Prüfung der
Vollständigkeit der Derivatisierung . 20
Literaturhinweise. 24

oSIST prEN ISO 12966-2:2017
FprEN ISO 12966-2:2016 (D)
Europäisches Vorwort
Dieses Dokument (FprEN ISO 12966-2:2016) wurde vom Technischen Komitee ISO/TC 34 „Food products“
in Zusammenarbeit mit dem Technischen Komitee CEN/TC 307 „Ölsamen, tierische und pflanzliche Fette
und Öle und deren Nebenprodukte — Probenahme- und Untersuchungsverfahren“ erarbeitet, dessen
Sekretariat vom AFNOR gehalten wird.
Dieses Dokument ist derzeit zur parallelen formellen Abstimmung vorgelegt.
Dieses Dokument wird EN ISO 12966-2:2011 ersetzen.
Anerkennungsnotiz
Der Text von ISO/FDIS 12966-2:2016 wurde vom CEN als FprEN ISO 12966-2:2016 ohne irgendeine
Abänderung genehmigt.
oSIST prEN ISO 12966-2:2017
FprEN ISO 12966-2:2016 (D)
Vorwort
ISO (die Internationale Organisation für Normung) ist eine weltweite Vereinigung von Nationalen
Normungsorganisationen (ISO-Mitgliedsorganisationen). Die Erstellung von Internationalen Normen wird
normalerweise von ISO Technischen Komitees durchgeführt. Jede Mitgliedsorganisation, die Interesse an
einem Thema hat, für welches ein Technisches Komitee gegründet wurde, hat das Recht, in diesem Komitee
vertreten zu sein. Internationale Organisationen, staatlich und nicht-staatlich, in Liaison mit ISO, nehmen
ebenfalls an der Arbeit teil. ISO arbeitet eng mit der Internationalen Elektrotechnischen Kommission (IEC)
bei allen elektrotechnischen Themen zusammen.
Die Verfahren, die bei der Entwicklung dieses Dokuments angewendet wurden und die für die weitere Pflege
vorgesehen sind, werden in den ISO/IEC-Direktiven, Teil 1 beschrieben. Im Besonderen sollten die für die
verschiedenen ISO-Dokumentenarten notwendigen Annahmekriterien beachtet werden. Dieses Dokument
wurde in Übereinstimmung mit den Gestaltungsregeln der ISO/IEC-Direktiven, Teil 2 erarbeitet
(siehe www.iso.org/directives).
Es wird auf die Möglichkeit hingewiesen, dass einige Elemente dieses Dokuments Patentrechte berühren
können. ISO ist nicht dafür verantwortlich, einige oder alle diesbezüglichen Patentrechte zu identifizieren.
Details zu allen während der Entwicklung des Dokuments identifizierten Patentrechten finden sich in der
Einleitung und/oder in der ISO-Liste der empfangenen Patenterklärungen (siehe www.iso.org/patents).
Jeder in diesem Dokument verwendete Handelsname wird als Information zum Nutzen der Anwender
angegeben und stellt keine Anerkennung dar.
Eine Erläuterung der Bedeutung ISO-spezifischer Benennungen und Ausdrücke, die sich auf
Konformitätsbewertung beziehen, sowie Informationen über die Beachtung der Grundsätze der
Welthandelsorganisation (WTO) zu technischen Handelshemmnissen (TBT, en: Technical Barriers to Trade)
durch ISO enthält der folgende Link: www.iso.org/iso/foreword.html.
Das für dieses Dokument verantwortliche Komitee ist ISO/TC 34, Food products, Unterkomitee SC 11, Animal
and vegetable fats and oils.
Diese zweite Ausgabe ersetzt die erste Ausgabe (ISO 12966-2:2011), die eine geringfügige Änderung
darstellt.
Die Änderungen im Vergleich zur vorhergehenden Ausgabe sind die folgenden:
— Milch und Milcherzeugnisse (und Fette daraus) sind vom Anwendungsbereich der Norm ausgeschlossen
worden.
Eine Liste aller Teile der Normenreihe ISO 12966 kann auf der ISO-Website gefunden werden.
oSIST prEN ISO 12966-2:2017
FprEN ISO 12966-2:2016 (D)
Einleitung
Allgemeines
Öle und Fette (d. h. flüssige und feste Lipide) bestehen überwiegend aus Fettsäureglycerinestern
(Triacylglycerin, TAG) mit kleineren Mengen an Fettsäuresterylestern und langkettigen aliphatischen
Alkoholen. Wegen der hohen Molekularmasse der TAG und der daraus folgenden Schwerflüchtigkeit sind sie
schwer direkt durch Gaschromatographie (GC) zu analysieren, besonders wenn eine ausführliche Analyse
von ungesättigten Fettsäuren notwendig ist. Fettsäuren selbst lassen sich nicht gut chromatographieren (mit
Ausnahme der kurzkettigen Fettsäuren, z. B. Buttersäure und Pentansäure). Es ist deshalb eine bessere
Praxis, vor der GC Fettsäureester zu bilden, üblicherweise Fettsäuremethylester (FAME).
Die Analyse der Öle und Fette wird im Literaturhinweis [9] umfassend beschrieben.
Bei der Analyse von Fettsäuren ist die Bildung der FAME ein kritischer Arbeitsgang. Die nicht quantitative
Umwandlung der Fettsäuren zu FAM
...

Questions, Comments and Discussion

Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.