ISO 16649-1:2018
(Main)Microbiology of the food chain — Horizontal method for the enumeration of beta-glucuronidase-positive Escherichia coli — Part 1: Colony-count technique at 44 degrees C using membranes and 5-bromo-4-chloro-3-indolyl beta-D-glucuronide
Microbiology of the food chain — Horizontal method for the enumeration of beta-glucuronidase-positive Escherichia coli — Part 1: Colony-count technique at 44 degrees C using membranes and 5-bromo-4-chloro-3-indolyl beta-D-glucuronide
ISO 16649-1:2018 specifies a horizontal method for the enumeration of β-glucuronidase-positive Escherichia coli by colony-count technique after resuscitation using membranes and incubation at 44 °C on a solid medium containing a chromogenic ingredient for detection of the enzyme β-glucuronidase[9][10][13][14][17][18][19][20]. It is applicable to - products intended for human consumption, - products intended for feeding animals, - environmental samples in the area of food production and food handling, and - samples from the primary production stage such as animal faeces, dust, and swabs.
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Méthode horizontale pour le dénombrement des Escherichia coli bêta-glucuronidase positive — Partie 1: Technique de comptage des colonies à 44 degrés C au moyen de membranes et de 5-bromo-4-chloro-3-indolyl bêta-D glucuronide
L'ISO 16649-1:2018 spécifie une méthode horizontale pour le dénombrement des Escherichia coli β-glucuronidase-positive par la technique de comptage des colonies après revivification au moyen de membranes et incubation à 44 °C sur un milieu solide contenant un substrat chromogénique pour la détection de l'enzyme β-glucuronidase.[9][10][13][14][17][18][19][20] Elle est applicable: - aux produits destinés à la consommation humaine, - aux produits destinés à l'alimentation animale, - aux échantillons d'environnement pour la production et la distribution des aliments, et - aux échantillons d'aliments au stade de production primaire tels que les matières fécales d'animaux, la poussière et les écouvillons.
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INTERNATIONAL ISO
STANDARD 16649-1
Second edition
2018-04
Microbiology of the food chain —
Horizontal method for the
enumeration of beta-glucuronidase-
positive Escherichia coli —
Part 1:
Colony-count technique at 44 °C using
membranes and 5-bromo-4-chloro-3-
indolyl beta-D-glucuronide
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Méthode horizontale pour
le dénombrement des Escherichia coli bêta-glucuronidase positive —
Partie 1: Technique de comptage des colonies à 44 °C au moyen de
membranes et de 5-bromo-4-chloro-3-indolyl bêta-D glucuronide
Reference number
ISO 16649-1:2018(E)
©
ISO 2018
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ISO 16649-1:2018(E)
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be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting
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Published in Switzerland
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ISO 16649-1:2018(E)
Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
4.1 Test portion, initial suspension, dilutions and resuscitation step . 2
4.2 Culture on selective medium . 2
4.3 Calculation . 2
5 Culture media and reagents . 2
6 Equipment and consumables . 2
7 Sampling . 3
8 Preparation of test sample . 3
9 Procedure. 3
9.1 General . 3
9.2 Test portion, initial suspension and dilutions . 4
9.3 Resuscitation . 4
9.4 Transfer to selective medium and incubation . 4
9.5 Counting the colony-forming units (cfu) . 4
9.6 Calculation . 4
10 Expression of results . 4
11 Performance characteristics of the method . 5
12 Test report . 5
13 Quality assurance . 5
Annex A (normative) Composition and preparation of culture media and reagents .6
Bibliography .10
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ISO 16649-1:2018(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation on the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO’s adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see the following
URL: www .iso .org/iso/foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 9,
Microbiology.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 16649-1:2001), which has been technically
revised with the following main changes:
— samples from the environment and the primary production stage have been added to the Scope;
— the minimum length of incubation (20 h) for tryptone-bile X-glucuronide agar (TBX) during culture
on selective medium has been adopted;
— performance testing for the quality assurance of the culture media and the membrane for transfer
has been added;
— to improve safety for the user, the solvent dimethyl sulphoxide (DMSO) is no longer recommended
to dissolve the chromogenic substrate (BCIG);
— the composition of the minerals-modified glutamate agar (MMGA) has been corrected (aspartic acid
[12]
0,024 g and arginine 0,02 g) to the values in the original formulation .
A list of all parts in the ISO 16649 series can be found on the ISO website.
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ISO 16649-1:2018(E)
Introduction
Because of the large variety of food and feed products, this horizontal method may not be appropriate
in every detail for certain products. In this case, different methods which are specific to these products
may be used if absolutely necessary for justified technical reasons. Nevertheless, every attempt should
be made to apply this horizontal method as far as possible.
The main changes, listed in the Foreword, introduced in this document compared to ISO 16649-1:2001
[5]
are considered as minor (see ISO 17468) .
When this document is next reviewed, account will be taken of all information then available regarding
the extent to which this horizontal method has been followed and the reasons for deviations from this
method in the case of particular products.
The harmonization of test methods cannot be immediate and, for certain groups of products,
International Standards and/or national standards may already exist that do not comply with this
horizontal method. It is hoped that when such standards are reviewed they will be changed to comply
with this document so that eventually the only remaining departures from this horizontal method will
be those necessary for well-established technical reasons.
There are three horizontal methods (ISO 16649-1, ISO 16649-2 and ISO 16649-3) for the enumeration
[3][4]
of β-glucuronidase-positive Escherichia coli .
The user may choose either ISO 16649-1, ISO 16649-2 or ISO 16649-3. All parts are for general
application. However, ISO 16649-1 or ISO 16649-3, which both include a resuscitation step, should be
used in preference for foodstuffs likely to contain sub-lethally injured cells as a result of properties
associated with the food or processing conditions.
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 16649-1:2018(E)
Microbiology of the food chain — Horizontal method
for the enumeration of beta-glucuronidase-positive
Escherichia coli —
Part 1:
Colony-count technique at 44 °C using membranes and
5-bromo-4-chloro-3-indolyl beta-D-glucuronide
1 Scope
This document specifies a horizontal method for the enumeration of β-glucuronidase-positive
Escherichia coli by colony-count technique after resuscitation using membranes and incubation at 44 °C
[9]
on a solid medium containing a chromogenic ingredient for detection of the enzyme β-glucuronidase
[10][13][14][17][18][19][20]
. It is applicable to
— products intended for human consumption,
— products intended for feeding animals,
— environmental samples in the area of food production and food handling, and
— samples from the primary production stage such as animal faeces, dust, and swabs.
WARNING — Some strains of Escherichia coli may grow poorly or not at all in media incubated
-
at 44 °C. This includes strains of E. coli O157:H7 and O157:H . Additionally, some strains of
Escherichia coli, notably those belonging to serotype O157:H7, are mostly β-glucuronidase
[11]
negative . Consequently, some strains of E. coli, including pathogenic ones, will not be detected
by this method. β-glucuronidase activity may also be exhibited at 44 °C by certain other members
[15] [16]
of the Enterobacteriaceae, notably Shigella and Salmonella .
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content
constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For
undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 6887 (all parts), Microbiology of the food chain — Preparation of test samples, initial suspension and
decimal dilutions for microbiological examination
ISO 7218, Microbiology of food and animal feeding stuffs — General requirements and guidance for
microbiological examinations
ISO 11133, Microbiology of food, animal feed and water — Preparation, production, storage and
performance testing of culture media
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:
— IEC Electropedia: available at http: //www .electropedia .org/
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ISO 16649-1:2018(E)
— ISO Online browsing platform: available at https: //www .iso .org/obp
3.1
β-glucuronidase-positive Escherichia coli
bacteria which at 44 °C forms typical, blue or blue-green colonies on tryptone-bile X-glucuronide agar
(TBX) under the conditions specified in this document
3.2
enumeration of β-glucuronidase-positive Escherichia coli
determination of the number of colony-forming units (cfu) of β-glucuronidase-positive Escherichia coli
(3.1), per gram of sample, per millilitre, per square centimetre or per sampling device when the analysis
is carried out in accordance with this document
4 Principle
4.1 Test portion, initial suspension, dilutions and resuscitation step
A specified quantity of the test sample, initial suspension or decimal dilutions, is inoculated onto
[13][14]
membranes overlaid on minerals-modified glutamate agar (MMGA), then incubated at 37 °C for 4 h .
4.2 Culture on selective medium
For isolation, the membranes from the resuscitation stage on the MMGA are transferred to tryptone-
bile X-glucuronide agar (TBX), then incubated at 44 °C for 20 h to 24 h.
4.3 Calculation
The number of colony-forming units (cfu) of β-glucuronidase-positive Escherichia coli per gram or per
millilitre of sample is calculated from the number of typical blue or blue-green colonies per plate.
5 Culture media and reagents
For current laboratory practice, see ISO 7218 and ISO 11133.
Composition of culture media and reagents and their preparation are described in Annex A.
For performance testing of culture media and membrane for transfer, see ISO 11133 and Annex A.
6 Equipment and consumables
Disposable equipment is an acceptable alternative to reusable glassware if it has suitable specifications.
Usual microbiological laboratory equipment (see ISO 7218) and, in particular, the following.
6.1 Apparatus for dry sterilization (oven) or wet sterilization (autoclave). As specified in
ISO 7218.
6.2 Drying cabinet or ventilated oven, capable of being maintained between 25 °C and 50 °C, or a
laminar airflow cabinet.
6.3 Incubator, capable of operating at 37 °C ± 1 °C.
6.4 Incubator, capable of operating at 44 °C ± 1 °C.
6.5 Water bath, capable of operating at 47 °C to 50 °C.
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ISO 16649-1:2018(E)
6.6 Refrigerator (for storage of prepared media), capable of operating at 5 °C ± 3 °C.
6.7 Blunt-ended forceps, sterile, of approximately 12 cm length.
6.8 Sterile and non-inhibitory membranes, made of cellulose acetate or mixed esters of cellulose,
with 0,45 µm to 1,2 µm pore size and 85 mm diameter.
6.9 pH-meter, capable of being read to the nearest 0,01 pH unit at 25 °C, enabling measurements to be
made which are accurate to ±0,1 pH unit.
6.10 Sterile graduated pipettes or automatic pipettes, of nominal capacity 1 ml.
6.11 Sterile petri dishes with a diameter of approximately 90 mm diameter.
6.12 Sterile spreaders, made of glass or plastic, for example, hockey sticks made from a rod of
approximately 3,5 mm diameter and 20 cm length, bent at right angles about 3 cm from one end and with
the cut ends made smooth by heating.
7 Sampling
Sampling is not part of the method specified in this document. See the specific International Standard
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 16649-1
Deuxième édition
2018-04
Microbiologie de la chaîne
alimentaire — Méthode horizontale
pour le dénombrement des
Escherichia coli bêta-glucuronidase
positive —
Partie 1:
Technique de comptage des colonies
à 44 °C au moyen de membranes et de
5-bromo-4-chloro-3-indolyl bêta-D
glucuronide
Microbiology of the food chain — Horizontal method for the
enumeration of beta-glucuronidase-positive Escherichia coli —
Part 1: Colony-count technique at 44 °C using membranes and
5-bromo-4-chloro-3-indolyl beta-D-glucuronide
Numéro de référence
ISO 16649-1:2018(F)
©
ISO 2018
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ISO 16649-1:2018(F)
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publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
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être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
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Publié en Suisse
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ISO 16649-1:2018(F)
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 2
4 Principe . 2
4.1 Prise d'essai, suspension mère, dilutions et étape de revivification . 2
4.2 Culture en milieu sélectif. 2
4.3 Calcul . 2
5 Milieux de culture et réactifs . 2
6 Matériel et consommables . 2
7 Prélèvement . 3
8 Préparation de l’échantillon pour essai . 4
9 Mode opératoire. 4
9.1 Généralités . 4
9.2 Prise d'essai, suspension mère et dilutions . 4
9.3 Revivification . 4
9.4 Transfert sur le milieu sélectif et incubation . 4
9.5 Comptage des unités formant colonie (UFC) . 5
9.6 Calcul . 5
10 Expression des résultats. 5
11 Caractéristiques de performance de la méthode . 5
12 Rapport d’essai . 5
13 Assurance qualité . 5
Annexe A (normative) Composition et préparation des milieux de culture et des réactifs .6
Bibliographie .10
© ISO 2018 – Tous droits réservés iii
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ISO 16649-1:2018(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/directives).
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www .iso .org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la signification des termes et expressions spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation
de la conformité, ou pour toute autre information au sujet de l’adhésion de l’ISO aux principes de
l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles techniques au commerce (OTC),
voir le lien suivant: www .iso .org/iso/foreword .html.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-
comité SC 9, Microbiologie.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 16649-1:2001) qui a fait l'objet
d'une révision technique en appliquant les modifications principales suivantes:
— des échantillons de l’environnement et au stade de production primaire ont été ajoutés dans le
domaine d’application;
— une durée d’incubation minimale (20 h) a été fixée pour la gélose tryptone-bile-X-glucuronide (TBX)
pendant la culture en milieu sélectif;
— des essais de performance pour l'assurance qualité des milieux de culture et la membrane de
transfert ont été ajoutés;
— pour améliorer la sécurité de l’utilisateur, le solvant diméthylsulfoxyde (DMSO) n’est plus
recommandé pour dissoudre le substrat chromogénique (BCIG);
— la composition de la gélose au glutamate modifiée (MMGA) a été corrigée (0,024 g d’acide aspartique
[12]
et 0,02 g d’arginine) selon les valeurs de la formulation originale .
Une liste de toutes les parties de la série ISO 16649 est disponible sur le site Internet de l’ISO.
iv © ISO 2018 – Tous droits réservés
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ISO 16649-1:2018(F)
Introduction
En raison de la diversité des produits alimentaires, il est possible que la présente méthode horizontale
ne soit pas applicable dans tous ses détails à certains d'entre eux. Dans ce cas, des méthodes différentes,
spécifiques à ces produits, pourront être utilisées si cela s'avère absolument nécessaire pour des
raisons techniques justifiées. Néanmoins, il convient que tous les efforts soient faits pour appliquer
cette méthode horizontale chaque fois que possible.
Les principales modifications énumérées dans l’avant-propos, introduites dans le présent document
[5]
par rapport à l’ISO 16649-1:2001, sont considérées comme mineures (voir l’ISO 17468 ).
Lors du prochain réexamen périodique du présent document, il sera tenu compte de toutes les évolutions
intervenues depuis sa publication et, notamment, dans quelle mesure la présente méthode horizontale
aura été suivie ainsi que les raisons des dérogations dans le cas de produits particuliers.
L'harmonisation de toutes les méthodes d'essai ne peut être réalisée de façon immédiate; de ce fait, il
peut déjà exister des Normes internationales et/ou nationales pour certains groupes de produits, qui ne
concordent pas avec la présente méthode horizontale. Lorsque de telles normes viendront en révision, il
serait souhaitable de les aligner sur le présent document et de ne conserver que les seules divergences
justifiées indispensables pour des raisons techniques.
Il existe tois méthodes horizontales (ISO 16649-1, ISO 16649-2 et ISO 16649-3) permettant de
[3][4]
dénombrer les Escherichia coli β-glucuronidase positive .
L'utilisateur peut choisir aussi bien l'ISO 16649-1 que l'ISO 16649-2 ou que l’ISO 16649-3. Toutes
les parties sont d'application générale. Toutefois, il est recommandé d'utiliser l'ISO 16649-1 ou
l’ISO 16649-3, qui incluent toutes deux une étape de revivification, pour les produits susceptibles de
contenir des cellules ayant subi des dommages sublétaux en raison des propriétés associées à l’aliment
ou des conditions de traitement.
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NORME INTERNATIONALE ISO 16649-1:2018(F)
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Méthode
horizontale pour le dénombrement des Escherichia coli
bêta-glucuronidase positive —
Partie 1:
Technique de comptage des colonies à 44 °C au moyen
de membranes et de 5-bromo-4-chloro-3-indolyl bêta-D
glucuronide
1 Domaine d’application
Le présent document spécifie une méthode horizontale pour le dénombrement des Escherichia coli
β-glucuronidase-positive par la technique de comptage des colonies après revivification au moyen de
membranes et incubation à 44 °C sur un milieu solide contenant un substrat chromogénique pour la
[9][10][13][14][17][18][19][20]
détection de l’enzyme β-glucuronidase. Elle est applicable:
— aux produits destinés à la consommation humaine,
— aux produits destinés à l’alimentation animale,
— aux échantillons d'environnement pour la production et la distribution des aliments, et
— aux échantillons d’aliments au stade de production primaire tels que les matières fécales d’animaux,
la poussière et les écouvillons.
AVERTISSEMENT — Certaines souches d’Escherichia coli se développent peu ou pas du tout dans
-
un milieu incubé à 44 °C, notamment les souches d’E. coli O157:H7 et O157:H . De plus, certaines
souches d’Escherichia coli, notamment celles appartenant au sérotype O157:H7, sont en majorité
[11]
β-glucuronidase négative. Par conséquent, des souches d’Escherichia coli, notamment
certaines souches pathogènes, ne seront pas détectées par la présente méthode. D’autres
[15] [16]
entérobactéries, notamment Shigella et Salmonella, peuvent également exprimer une
activité β-glucuronidase à 44 °C.
2 Références normatives
Les documents suivants sont référencés dans le texte de telle sorte qu’une partie ou la totalité de leur
contenu constitue les exigences du présent document. Pour les références datées, seule l'édition citée
s'applique. Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s'applique (y
compris les éventuels amendements).
ISO 6887 (toutes les parties), Microbiologie de la chaîne alimentaire — Préparation des échantillons, de la
suspension mère et des dilutions décimales en vue de l’examen microbiologique
ISO 7218, Microbiologie des aliments — Exigences générales et recommandations pour les examens
microbiologiques
ISO 11133, Microbiologie des aliments et de l’eau — Préparation, production, stockage et essais de
performance des milieux de culture
© ISO 2018 – Tous droits réservés 1
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ISO 16649-1:2018(F)
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s'appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en
normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse http: //www .electropedia .org/
— ISO Online Browsing Platform (OBP): disponible à l’adresse https: //www .iso .org/obp
3.1
Escherichia coli β-glucuronidase positive
bactérie qui, à 44 °C, forme des colonies bleues ou bleu-vert caractéristiques sur la gélose tryptone-bile-
X-glucuronide (TBX), dans les conditions spécifiées dans le présent document
3.2
dénombrement des Escherichia coli β-glucuronidase positive
détermination du nombre d’unités formant colonie (UFC) d’Escherichia coli β-glucuronidase positive
(3.1), par gramme d'échantillon, par millilitre, par centimètre carré ou par dispositif de prélèvement,
lorsque l’analyse est effectuée conformément au présent document
4 Principe
4.1 Prise d'essai, suspension mère, dilutions et étape de revivification
Ensemencement d'une quantité spécifiée de l'échantillon pour essai, de la suspension mère ou de
dilutions décimales, sur des membranes de cellulose posées sur la gélose au glutamate modifiée
[13][14]
(MMGA), puis incubation à 37 °C pendant 4 h .
4.2 Culture en milieu sélectif
À l’issue de l’étape de revivification, transfert des membranes de la gélose MMGA sur la gélose tryptone-
bile-glucuronide (TBX), puis incubation à 44 °C pendant 20 h à 24 h.
4.3 Calcul
Calcul du nombre d’UFC d'Escherichia coli β-glucuronidase positive par gramme ou par millilitre
d'échantillon, à partir du nombre de colonies caractéristiques bleues ou bleu-vert par boîte.
5 Milieux de culture et réactifs
Pour les pratiques courantes de laboratoire, voir l'ISO 7218 et l’ISO 11133.
La composition des milieux de culture et des réactifs et leur préparation sont décrites dans l’Annexe A.
Pour les essais de performance des milieux de culture et la membrane de transfert, voir l’ISO 11133 et
l’Annexe A.
6 Matériel et consommables
Un matériel à usage unique est acceptable au même titre que la verrerie réutilisable, si ses spécifications
sont appropriées.
Matériel courant de laboratoire de microbiologie (voir l’ISO 7218), et en particulier, ce qui suit.
2 © ISO 2018 – Tous droits réservés
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ISO 16649-1:2018(F)
6.1 Appareil de stérilisation en chaleur sèche (four) ou en chaleur humide (autoclave). Comme
spécifié dans l’ISO 7218.
6.2 Enceinte de séchage ou étuve ventilée, pouvant être maintenue à une température comprise
entre 25 °C et 50 °C, ou hotte à flux laminaire.
6.3 Étuve, réglable à 37 °C ± 1 °C.
6.4 Étuve, réglable à 44 °C ± 1 °C.
6.5 Bain d'eau, réglable entre 47 °C et 50 °C.
6.6 Réfrigérateur (pour le stockage des milieux préparés), réglable à 5 °C ± 3 °C.
6.7 Pinces à extrémité plate, stériles, d'environ 12 cm de long.
6.8 Membranes stériles et non inhibitrices, fabriquées en acétate de cellulose ou en esters mixtes
de cellulose, ayant une ouverture de pores de 0,45 µm à 1,2 µm et un diamètre de 85 mm.
6.9 pH-mètre, d’une précision de ± 0,01 unité pH à 25 °C, permettant de réaliser des mesures précises
à ± 0,1 unité pH.
6.10 Pipettes graduées stériles ou pipettes automatiques, d’une capacité nominale de 1 ml.
6.11 Boîtes de Petri stériles, d’un diamètre d’environ 90 mm.
6.12 Étaleurs stériles, en verre ou en plastique, par exemple baguettes en verre en forme de crosses de
hockey faites à partir d'une tige d'environ 3,5 mm de diamètre et 20 cm de long, coudées à angle droit à
3 cm environ des extrémités et dont les bords de coupe sont rendus lisses par chauffage.
7 Prélèvement
Le prélèvement ne fait pas partie de la méthode spécifiée dans le présent document. Voir la Norme
internationale spécifique du produit concerné. S'il n'existe pas de Norme internationale spécifique
applicable au prélèvement du produit concerné, il est recommandé que les parties concernées se
mettent d’accord à ce sujet.
Des méthodes de prélèvement recommandées sont données dans les documents suivants:
[7]
— l’ISO/TS 17728
...
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