Water quality — Test for inhibition of oxygen consumption by activated sludge

Specified a method for assessing the inhibitory effect of a test material. This effect may include the effect on respiration and nitrification. This method gives information on inhibitory or stimulatory effects after a short exposure of the test material on activated sludge micro-organisms. It is applicable to chemical substances which are soluble under the conditions of the test.

Qualité de l'eau — Essai d'inhibition de la consommation d'oxygène par des boues activées

1.1 La présente Norme internationale spécifie une méthode pour l'évaluation de l'effet inhibiteur du produit à expérimenter sur la consommation d'oxygène des micro-organismes de boues activées. Cet effet inhibiteur peut inclure les effets sur la respiration et la nitrification. 1.2 La méthode fournit une indication sur les effets inhibiteurs ou stimulateurs après un temps d'exposition court (jusqu'à 180 min) du produit à expérimenter sur les micro-organismes des boues activées. 1.3 La méthode est applicable aux substances chimiques solubles dans les conditions de l'essai. Un soin particulier doit être pris avec les produits de faible solubilité aqueuse et avec les produits qui consomment ou produisent l'oxygène physico-chimiquement. Deux exemples de l'application de la méthode sont donnés dans l'annexe. La méthode A a pour but de reproduire les conditions des eaux de surface, tandis que la méthode B a pour but de reproduire les conditions des installations de traitement bio

General Information

Status
Withdrawn
Publication Date
16-Jul-1986
Withdrawal Date
16-Jul-1986
Current Stage
9599 - Withdrawal of International Standard
Completion Date
15-Jan-2007
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ISO 8192:1986 - Water quality -- Test for inhibition of oxygen consumption by activated sludge
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Standards Content (Sample)

International Standard
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION.MEX,LtYHAPOflHAR OPrAHM3AWlR fl0 CTAH~APTM3ALWWORGANISATiON INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Water quality - Test for inhibition of Oxygen
consumption by activated sludge
Qual.&! de l’eau - Essai d’inhibition de Ia consommation d’oxyg&ne par des boues activbes
First edition - 1986-07-15
UDC 614.777
Ref. No. ISO 8192-1986 (E)
Descriptors : water, quality, sewage treatment sludges, tests,
determination, inhibition, consumption, Oxygen, apparatus.
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---------------------- Page: 1 ----------------------
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of
national Standards bodies (ISO member bodies). The work of preparing International
Standards is normally carried out through ISO technical committees. Esch member
body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, govern-
mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to
the member bodies for approval before their acceptance as International Standards by
the ISO Council. They are approved in accordance with ISO procedures requiring at
least 75 % approval by the member bodies voting.
International Standard ISO 8192 was prepared by Technical Committee ISO/TC 147,
Wa ter quality.
Users should note that all International Standards undergo revision from time to time
and that any reference made herein to any other International Standard implies its
latest edition, unless otherwise stated.
0 International Organkation for Standardkation, 1986
Printed in Switzerland

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INTERNATIONAL STANDARD ISO 81924986 (E)
Test for inhibition of Oxygen
Water quality -
consumption by activated sludge
WARNING AND SAFETY PRECAUTIONS - Activated sludge and sewage may contain potentially pathogenic
organisms. Therefore appropriate precautions should be taken when handling them.
Toxic test materials and those whose properties are unknown should be handled with care.
0 Introduction NOTES
1 Results with volatile material should be interpreted with caution and
This International Standard specifies a method for assessing
are likely to underestimate any inhibitory effects because of the difficul-
the potential toxicity of substances, mixtures or waste water to
ty of maintaining the initial concentration.
activated sludge. Information generated by this method may be
2 Results with insoluble materials should similarly be treated with
helpful in estimating the effect of a test material on mixed
caution and cannot be easily quantified; again, inhibitory effects may
bacterial communities in the aquatic environment especially in
be underestimated if the solubility of the compound in the test medium
aerobic biological treatment Systems.
changes.
The annex forms an integral part of the Standard.
1.4 The results from this test should be considered only as a
guide to the likely toxicity of the test material, since sludges of
different sources may differ in bacterial composition and con-
centration. Also, laboratory tests cannot truly simulate en-
vironmental conditions. For example no account is taken of
1 Scope and field of application
longer-term adaptation of the activated sludge micro-
organisms to the test material, or of materials which may ad-
1.1 This International Standard specifies a method for sorb on to the sludge and build up to a toxic concentration over
assessing the inhibitory effect of a test material on the Oxygen a longer period of time than that allowed in the test.
consumption of activated sludge micro-organisms. The in-
hibitory effect may include the effect on respiration and
nitrification.
2 Definitions
For the purpose of this International Standard, the following
1.2 This method gives information on inhibitory or
definitions apply.
stimulatory effects after a short exposure (up to 180 min) of the
test material on activated sludge micro-organisms.
2.1 activated sludge : Accumulated biological mass (floc)
produced in the treatment of waste water by the growth of
1.3 This method is applicable to Chemical substances which
bacteria and other micro-organisms in the presence of dis-
are soluble under the conditions of the test. Special care has to
solved Oxygen. (Definition taken from ISO 6107/1.)
be taken with those materials of low water solubility and with
materials which consume or produce Oxygen physico-
chemically.
2.2 suspended solids: Solids removed from activated
sludge by filtration or centrifuging and dried at about 100 OC to
a constant mass.
Two examples of the application are given in the annex.
Method A is intended to represent the conditions in sur-face
waters, while method B is intended to represent the conditions Determined as dry mass per unit volume, this quantity is ex-
pressed in grams per litre or milligrams per litre.
in biological waste water treatment plants. Results obtained by
these two approaches may be different. lt is essential that the
test report identifies which method was selected.
2.3 Oxygen consumption rate: Uptake of Oxygen by ac-
tivated sludge micro-organisms per unit volume of sludge, in
For volatile materials only the first example may be applicable.
unit time.
This method tan also be used to test waste waters.
This quantity is expressed in milligrams per litre per hour.
1

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ISO 8192-1986 US
The pH of this Solution shall be 7,5 zt: 0,5.
2.4 specific Oxygen consumption rate: Uptake of Oxygen
by activated sludge micro-organisms per unit mass of micro-
organisms (suspended solid& in unit time.
If the prepared medium is not used immediately, it shall be
stored in the dark at 0 to 4 OC, for no longer than 1 week, in
This quantity is expressed in milligrams per gram per hour.
conditions which do not produce any Change in its compo-
sition.
25 inhibition of Oxygen consumption: Decrease of the
Oxygen consumption rate of an activated sludge in the
NOTE - Alternatively, sterilize the medium Prior to storage, or add the
presence of the test material, compared with that of a similar
peptone and meat extract shortly before carrying out the test. Before
mixture without test material.
use, ensure the medium is mixed thoroughly and adjust the pH as
necessary.
This quantity is expressed as a percentage.
The range of concentration of a test
2.6 toxic range:
4.3 Test material, stock Solution.
material over which 0 to 100 % inhibition occurs.
The test material may be pure chemicals, mixtures of
2.7 EC 50: Effective concentration of the test material giving
chemicals, Chemical products, or waste waters.
a calculated or interpolated inhibition of Oxygen consumption
of 50 % compared with a blank control.
Prepare a stock Solution of the test material in water at a
suitable concentration, for example 1 g/l or 10 g/l. Waste
water may be used without dilution.
3 Principle
For insoluble materials a Suspension or dispersion may be
Activated sludge in the presence of a suitable, easily
prepared or the test material may be added directly to the test
biodegradable Substrate will consume Oxygen rapidly at a rate
vessel. Take care to ensure as much homogeneity as possible.
depending on, among other factors, the concentration of
micro-organisms. Addition of a toxic concentration of a test
material tan result in a decrease in the Oxygen consumption
4.4 Reference substance, stock Solution.
rate. The rates are measured using an Oxygen electrode. The
percentage inhibition of the Oxygen consumption is estimated
Dissolve a suitable quantity of the reference substance in
by comparison with a control mixture containing no test
water. 1 g of 3,5-dichlorophenol in 1 000 mf of water has been
material.
found to be suitable.
The sensitivity of the activated sludge tan be checked with a
suitable reference substance. Any abiotic Oxygen consumption
4.5 lsotonic Solution (sec table 2).
due to physico-Chemical processes tan also be detected.
Table 2 - Isotonic Solution
4 Medium and reagents
Constituent 1 Quantity 1
I
4.1 General
Sodium chloride ( NaCI)
Magnesium sulfate heptahydrate (MgSO4 = 7H20)
The Chemical products used for the preparation of the medium
Water
and the reagents shall be of recognized analytical grade.
The water used shall be distilled or deionized water, free from
substances that might inhibit the growth of micro-organisms
5 Inoculum
under the test conditions.
Measurements of pH shall be made using a pH meter,
For general use, activated sludge should be taken from the
measurements being referred to the temperature of test.
aeration tank of a waste water plant treating predominantly
domestic sewage and working normally. Depending on the pur-
4.2 Synthetic medium, stock Solution (see table 1).
pose of the test, any type of activated sludge at a suitable con-
centration, for example 2 to 4 g/l, tan also be used. However,
Table 1 - Synthetic medium
activated sludges from different treatment plants may have dif-
(IOO-fold OECD synthetic sewage)
ferent characteristics and sensitivities.
Quantity
Constituent
Where possible, aerate the activated sludge and use it within
Peptone
16 g
24 h of collection. If this is not possible, feed it daily with an ap-
Meat extract
11 9
propriate Substrate, for example a synthetic medium (sec 4.2).
Urea
39
Sodium chloride (NaCI)
017 g
Calcium chloride dihydrate (CaCl2 . 2H20) Where necessary, remove coarse particles by settling for a
0,4 g
Magnesium sulfate heptahydrate (MgS04 . 7H20) 02 9
short period, for example 15 min, and decanting the upper
Dipotassium hydrogen Phosphate (K,HPOa)
23 g
layer of finer solids for use. Alternatively, the sludge may be
1000 ml
Water
mixed using a blender for a few seconds.
2

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ISO 8192-1986 (E)
7.3 Reference mixtures
If inhibitory material is thought to be present, the sludge may
be washed as follows: first centrifuge the sludge for about
10 min at approximately 10 000 m/s* and discard the super-
Prepare mixtures, F,, wi th a suitable reference compound in
natant. Resuspend the sludge in chlorine-free tap water or an
the same way if required
(sec 7.7).
isotonic washing Solution (4.5), remove this by recentrifuging
and then repeat if necessary the washing and centrifuging pro-
7.4 Blank control
cess. Determine the dry mass of a Sample of the sludge. Finally
resuspend the sludge in chlorine-free tap water or the isotonic
At least one blank control, F,, shall be prepared which contains
Solution to obtain a suitable concentration of activated sludge,
an equal volume of activated sludge and synthetic medium as
for example about 3 g/l suspended solids.
the test mixture but no test material. Dilute with water to the
same volume as the test mixtures.
In all cases the origin, the concentratio n and pretreatme nt
anY
report.
of the activated sludg e sh all be stated in the test
7.5 Physico-Chemical test
If required, prepare mixtures, F,c, to measure the physico-
6 Apparatus
Chemical Oxygen consumption. They contain test material, syn-
thetic medium and water as the test mixtures, but no activated
Usual laboratory equipment, and sludge. If required, add an inhibitor such as mercury chloride to
prevent a biological Oxygen consumption.
6.1 Test vessels, such as 300 ml BOD bottles or Erlenmeyer
7.6 Preliminary test
flasks with Stoppers (see clause A.l) or 1 000 ml beakers (see
clause A.2). To measure the Oxygen concentration in a BOD
bottle a suitable pre-bored stopper as an adapter for the Oxygen
To estimate the range of concentrations needed in a definitive
electrode is required. To avoid loss of displaced liquid on inser-
test for determining the inhibition of Oxygen consumption, a
tion of the Oxygen electrode, first insert a funnel or glass tube
preliminary test is useful.
through the stopper.
Carry out the test using at least three concentrations of test
material, for example 1; 10; and 100 mg/l, a blank control and,
6.2 Device for measuring Oxygen: a suitable Oxygen elec-
if necessary, a physico-Chemical control with the highest con-
trode and a recorder (see ISO 5814, VlMer quality - Deter-
centration of test material. If possible the lowest concentration
mination of dissolved Oxygen - Electrochemical probe
of test material used shall have no effect on the Oxygen
methodl.
consumption.
63 . Magnetit stirrers.
7.7 Definitive test
6.4 Aeration device. If necessary, pass air through an ap- Carry out the test using a range of concentration deduced from
the preliminary test. lt is necessary to use at least five concen-
propriate filter to remove dust and oil and through wash bottles
containing water to humidify the air. Aerate the test vessels trations in a logarithmic series. A blank control shall be includ-
ed. The physico-Chemical control need not be repeated if there
with Pasteur pipettes, or other aeration devices which do not
is no Oxyge
...

Norme interna.tionale
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATIONWtlE~YHAPOJJ-lAR OPI-AHM3AUMR Il0 CTAH~APTkl3A~MM~ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Essai d’inhibition de la consommation
Qualité de l’eau -
d’oxygène par des boues activées
Test for inhibition of oxygen consumption by activated sludge
M/ater quality -
Première édition - 1986-07-15
CDU 614.777 Réf. no : ISO 8192-1986 (F)
LL
-
essai, détermination, inhibition, consommation, oxygéne, appareil.
Descripteurs : eau, qualité, boue de traitement des eaux,
0
Prix basé sur 9 pages
!E

---------------------- Page: 1 ----------------------
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I’ISO). L’élaboration
des Normes internationales est confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque
comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique
créé a cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouverne-
mentales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I’ISO. Les Normes internationales sont approuvées confor-
mément aux procédures de I’ISO qui requiérent l’approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale ISO 8192 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 147,
Qualitt! de l’eau.
L’attention des utilisateurs est attirée sur le fait que toutes les Normes internationales
sont de temps en temps soumises à révision et que toute référence faite à une autre
Norme internationale dans le présent document implique qu’il s’agit, sauf indication
contraire, de la dernière édition.
0 Organisation internationale de normalisation, 1986
Imprimé en Suisse

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NORME INTERNATIONALE
ISO 81924986 (F)
Qualité de l’eau - Essai d’inhibition de la consommation
d’oxygène par des boues activées
SÉCURITÉ - Les boues activées et les eaux d’egouts peuvent contenir des
AVERTISSEMENT ET PRÉCAUTIONS DE
Par conséquent des précautions appropriées doivent être prises pour les
organismes potentiellement pathogènes.
manipuler.
dont les proprietes sont inconnues doivent être manipules avec soin.
Les produits pour essais toxiques et ceux
0 Introduction NOTES
1 Les résultats avec les produits volatils doivent être interprétés avec
La présente Norme internationale spécifie une methode pour
précaution et sont susceptibles de sous-estimer certains effets inhibi-
évaluer la toxicite potentielle de substances, de mélanges ou
teurs, du fait de la difficulté à maintenir la concentration initiale.
d’eaux résiduaires vis-à-vis des boues activées. L’information
2 Les résultats avec les produits insolubles doivent être de même
obtenue par cette méthode peut être utile pour estimer l’effet
interprétés avec précaution et ne peuvent être aisément quantifiés, les
d’un produit à expérimenter sur les populations bactériennes
effets inhibiteurs pouvant être sous-estimés si la solubilité du composé
mixtes dans l’environnement aquatique dans les systèmes de
dans le milieu d’essai est diminuée.
traitement biologique aérobie.
1.4 Les résultats de l’essai ne doivent être considérés que
L’annexe fait partie intégrante de la norme.
comme indicatifs de la toxicité probable du produit à expéri-
menter, les boues d’origines diverses pouvant differer dans leur
1 Objet et domaine d’application
composition et leur concentration. De plus, les essais de labo-
ratoire ne peuvent réellement simuler les conditions de I’envi-
ronnement. Par exemple, il n’y a pas de prise en compte d’une
1.1 La présente Norme internationale spécifie une méthode
adaptation a la longue des micro-organismes des boues acti-
pour l’évaluation de l’effet inhibiteur du produit à expérimenter
vées au produit à expérimenter, ou d’une adsorption possible
sur la consommation d’oxygène des micro-organismes de
du produit sur les boues ne conduisant à une toxicité qu’après
boues activées. Cet effet inhibiteur peut inclure les effets sur la
une durée plus longue que celle de l’essai.
respiration et la nitrif ication.
1.2 La méthode fournit une indication sur les effets inhibi-
2 Définitions
teurs ou stimulateurs aprés un temps d’exposition court
(jusqu’à 180 min) du produit à expérimenter sur les micro-
Dans le cadre de la présente Norme internationale, les défini-
organismes des boues activées.
tions suivantes sont applicables.
1.3 La méthode est applicable aux substances chimiques
2.1 boue activee: Amas biologique (floc) formé, au cours
solubles dans les conditions de l’essai. Un soin particulier doit
du traitement d’une eau résiduaire, par la croissance de bacté-
être pris avec les produits de faible solubilité aqueuse et avec les
ries et d’autres micro-organismes en présence d’oxygéne dis-
produits qui consomment ou produisent I’oxygéne physico-
sous. (Définition de I’ISO 6107/1.)
chimiquement.
2.2 matieres en suspension: Matières eliminées des boues
Deux exemples de l’application de la méthode sont donnés
activées par filtration ou centrifugation et sechées à environ
dans l’annexe. La méthode A a pour but de reproduire les con-
100 OC à masse constante.
ditions des eaux de surface, tandis que la méthode B a pour but
de reproduire les conditions des installations de traitement bio-
Déterminée en tant que masse à sec par unité de volume, cette
logique d’eaux résiduaires. Les résultats obtenus par ces deux
quantité est exprimée en grammes par litre ou en milligrammes
approches peuvent être différents. II est essentiel que le procés-
par litre.
verbal d’essai indique quelle méthode a été choisie.
Pour les produits volatils, seul le premier exemple est 2.3 taux de consommation d’oxygène : Consommation
applicable.
d’oxygène par les micro-organismes de boues activées pour un
volume unitaire de boue, par unité de temps.
Cette méthode peut être aussi utilisée pour tester les eaux resi-
duaires. Cette quantité est exprimée en milligrammes par litre par heure.
1

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ISO 81924986 (FI
2.4 taux spécifique de consommation d’oxygène: Con- Tableau 1 - Milieu synthétique
sommation d’oxygène par les micro-organismes de boues acti- (eau d’égout synthétique OCDE diluée au l/lOO)
vées par unité de temps et par unité de masse de micro-
Constituant Quantité
organismes (matières en suspension).
I
Peptone
16 9
Extrait de viande
Cette quantité est exprimée en milligrammes par gramme par
11 g
Urée
3g
heure.
Chlorure de sodium (NaCI)
67 g
Chlorure de calcium dihydraté (CaCl2 . 2H20)
014 g
Sulfate de magnésium heptahydraté (MSS04 . 7H20)
2.5 inhibition de la consommation en oxygène: Diminu-
02 g
Hydrogénophosphate de potassium (K2HP04)
23 g
tion du taux de consommation d’oxygène d’une boue activée
Eau
1 000 ml
en présence du produit à expérimenter, par rapport à un même
mélange sans produit à expérimenter.
Le pH de la solution doit être de 7,5 + 0,5.
Cette quantité est exprimée en pourcentage.
Si les milieux de culture préparés ne sont pas utilisés extempo-
ranément, les conserver, sauf spécification contraire, à I’obscu-
2.6 niveau toxique: Niveau de concentration d’un produit à
rité à 0 à 4 OC pendant 1 semaine au maximum, dans des condi-
expérimenter au-dessus duquel se produit l’inhibition de 0 à
tions évitant toute modification de leur composition.
100 %.
NOTE
- En variante, stériliser le milieu préalablement au stockage, ou
ajouter la peptone ou l’extrait de viande peu de temps avant d’effectuer
2.7 CE 50: Concentration efficace d’un produit à expérimen-
l’essai. Avant utilisation, s’assurer que le milieu est mélangé minutieu-
ter produisant une inhibition d’oxygène de 50 %, par rapport à
sement et ajuster le pH tel qu’il sera nécessaire.
l’essai à blanc, déduite par calcul ou interpolation.
4.3 Produit à expérimenter, solution mère.
3 Principe Les produits à expérimenter peuvent être des substances chimi-
ques pures, des mélanges de substances, des produits chimi-
ques ou des eaux résiduaires.
La boue activée en présence d’un substrat adéquat facilement
biodégradable, consommera rapidement de l’oxygène à un taux
Préparer une solution mère du produit à expérimenter par dis-
dépendant, entre autres, de la concentration en micro-
solution dans de l’eau à une concentration satisfaisante, par
organismes. L’ajout d’un produit à expérimenter à une concen-
exemple 1 g/l ou 10 g/l. Les eaux résiduaires peuvent être utili-
tration toxique peut provoquer une diminution du taux de con-
sées sans dilution.
sommation d’oxygène. Ces taux sont mesurés à l’aide d’une
électrode à oxygène. Le pourcentage d’inhibition de la consom-
Pour les produits insolubles, une suspension ou une dispersion
mation d’oxygène est estimé par comparaison à un mélange
peut être préparée, ou le produit à expérimenter peut être
témoin ne contenant pas de produit à expérimenter.
ajouté directement dans le récipient d’essai. Veiller à obtenir la
meilleure homogénéité possible.
La sensibilité de la boue activée peut être vérifiée à l’aide d’une
substance de référence. Toute consommation abiotique d’oxy-
gène due aux processus physico-chimiques peut également
4.4 Substance de référence, solution mère.
être détectée.
Dissoudre dans de l’eau une quantité adéquante de la subs-
tance de référence choisie. Le 3,5-dichlorophénol à 1 g/l est
recommandé.
4 Milieux et réactifs
4.5 Solution isotonique (voir tableau 2).
4.1 Généralités
- Solution isotonique
Tableau 2
Les produits chimiques utilisés pour la préparation des milieux
Constituant Quantité
de culture et des réactifs doivent être de qualité analytique
reconnue.
Chlorure de sodium (NaCI)
5g
Sulfate de magnésium heptahydraté
0,12 g
Eau 1 000 ml
L’eau utilisée doit être de l’eau distillée ou déminéralisée,
exempte de substances susceptibles d’inhiber la croissance des
micro-organismes dans les conditions de l’essai.
5 Inoculum
Les mesures du pH doivent être effectuées au pH-mètre, et rap-
Pour l’usage général, les boues activées doivent être prélevées
portées à la température de l’essai.
dans les bassins d’aération d’une station d’eau résiduaires trai-
tant de facon prédominante des eaux d’égouts d’origine
4.2 Milieu synthétique, solution mère (voir tableau 1).
domestique et fonctionnant normalement. Tout type de boue
2

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ISO 81924986 (F)
activée de concentration satisfaisante, par exemple 2 à 4 g/l, 7 Mode opératoire
peut être utilisé selon l’objectif de l’essai. Cependant, des
boues activées provenant de différentes installations de traite-
7.1 Généralités
ment peuvent avoir des caractéristiques et des sensibilités diffé-
rentes.
Dans la mesure du possible, effectuer l’essai à une température
constante de 20 + 2 OC, dans une atmosphère exempte de
Dans la mesure du possible, aérer la boue activée et l’utiliser
poussiéres et de vapeurs toxiques.
dans les 24 h suivant le prélévement. Si cela n’est pas possible,
l’alimenter quotidiennement avec un substrat approprié, par
7.2 Mélanges d’essai
exemple un milieu synthétique (voir 4.2).
Préparer dans les récipients d’essais (6.1) des mélanges, Fr,
Si nécessaire, éliminer les particules grossières par sédimenta-
contenant de l’eau de dilution, un milieu synthétique et le pro-
tion pendant un temps court, par exemple 15 min, et par
duit à expérimenter afin d’obtenir différentes concentrations
décantation de la couche supérieure des particules les plus
connues telles que requises. Ajuster le pH a 7,5 + 0,5, ajouter
fines pour emploi. En alternative, la boue peut être homogénéi-
I’inoculum et compléter avec de l’eau pour obtenir des volumes
sée à l’aide d’un agitateur pendant quelques secondes.
finals égaux. Si l’effet d’inhibition du pH doit être testé, ne pas
ajuster le pH.
Si un produit inhibiteur est supposé présent, la boue peut être
lavée comme suit: tout d’abord, centrifuger la boue environ
10 min à approximativement 10 000 m/s2 et éliminer le surna- 7.3 Mélanges de référence
geant. Remettre la boue en suspension dans de l’eau du robinet
exempte de chlore ou dans une solution isotonique (4.5) élimi- Préparer si nécessaire de la même facon (voir 7.7) des mélan-
de référence adéquat.
née après une nouvelle centrifugation. Répéter si nécessaire les avec le composé
g-1 FR,
opérations de lavage et de centrifugation. Déterminer la masse
à sec d’un échantillon de boue. Remettre enfin en suspension la
7.4 Essai à blanc
boue dans de l’eau du robinet exempte de chlore ou dans la
solution isotonique afin d’obtenir une concentration convena-
Au moins un essai à blanc, F,, doit être préparé contenant les
ble de boue activée, par exemple, 3 g/l de matières en suspen-
mêmes volumes de boue activée et de milieu synthétique, mais
sion.
pas le produit à expérimenter. Compléter avec de l’eau au
même volume que pour les mélanges d’essai.
Dans tous les cas, l’origine, la concentration et tout prétraite-
ment de la boue activée doivent être indiqués dans le procés-
7.5 Essai physico-chimique
verbal d’essai.
Si nécessaire, préparer des mélanges, Fpc, pour la détermina-
tion de la consommation physico-chimique d’oxygène. Ils con-
6 Appareillage
tiennent le produit à expérimenter, le milieu synthétique et de
l’eau comme les mélanges d’essai, mais pas de boue activée. Si
Matériel courant de laboratoire et,
nécessaire, ajouter un inhibiteur tel que le chlorure mercurique
afin de prévenir une consommation biologique de I’oxygéne.
6.1 Récipients pour essai, tels que bouteilles à DB0 de
300 ml ou fioles d’Erlenmeyer équipées de bouchons (voir cha-
7.6 Essai préliminaire
pitre A.1 1 ou béchers de 1 000 ml (voir chapitre A.21
Afin d’estimer la gamme de concentrations nécessaires à la réa-
Pour mesurer la concentration en oxygéne dans une bouteille à
lisation d’un essai définitif pour la détermination de l’inhibition
DBO, un bouchon approprié préalablement percé permettant
de la consommation d’oxygène, un essai préliminaire est utile.
l’adaptation d’une électrode à oxygène est nécessaire. Afin
d’éviter des pertes de liquide, introduire tout d’abord à travers
Effectuer l’essai avec au moins trois concentrations du produit
le bouchon un entonnoir ou un large tube de verre.
à expérimenter, par exemple 1; 10 et 100 mg/l, un essai à blanc
et, si nécessaire, un témoin physico-chimique avec la plus forte
6.2 Dispositif de mesure de l’oxygène: électrode polaro-
concentration en produit à expérimenter. Si possible, la plus
graphique à oxygéne et enregistreur (voir ISO 5814, Qualité de
faible concentration en produit à expérimenter utilisée doit
l’eau - Dosage de l’oxygène dissous
...

Norme interna.tionale
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATIONWtlE~YHAPOJJ-lAR OPI-AHM3AUMR Il0 CTAH~APTkl3A~MM~ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Essai d’inhibition de la consommation
Qualité de l’eau -
d’oxygène par des boues activées
Test for inhibition of oxygen consumption by activated sludge
M/ater quality -
Première édition - 1986-07-15
CDU 614.777 Réf. no : ISO 8192-1986 (F)
LL
-
essai, détermination, inhibition, consommation, oxygéne, appareil.
Descripteurs : eau, qualité, boue de traitement des eaux,
0
Prix basé sur 9 pages
!E

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Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I’ISO). L’élaboration
des Normes internationales est confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque
comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique
créé a cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouverne-
mentales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I’ISO. Les Normes internationales sont approuvées confor-
mément aux procédures de I’ISO qui requiérent l’approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale ISO 8192 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 147,
Qualitt! de l’eau.
L’attention des utilisateurs est attirée sur le fait que toutes les Normes internationales
sont de temps en temps soumises à révision et que toute référence faite à une autre
Norme internationale dans le présent document implique qu’il s’agit, sauf indication
contraire, de la dernière édition.
0 Organisation internationale de normalisation, 1986
Imprimé en Suisse

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NORME INTERNATIONALE
ISO 81924986 (F)
Qualité de l’eau - Essai d’inhibition de la consommation
d’oxygène par des boues activées
SÉCURITÉ - Les boues activées et les eaux d’egouts peuvent contenir des
AVERTISSEMENT ET PRÉCAUTIONS DE
Par conséquent des précautions appropriées doivent être prises pour les
organismes potentiellement pathogènes.
manipuler.
dont les proprietes sont inconnues doivent être manipules avec soin.
Les produits pour essais toxiques et ceux
0 Introduction NOTES
1 Les résultats avec les produits volatils doivent être interprétés avec
La présente Norme internationale spécifie une methode pour
précaution et sont susceptibles de sous-estimer certains effets inhibi-
évaluer la toxicite potentielle de substances, de mélanges ou
teurs, du fait de la difficulté à maintenir la concentration initiale.
d’eaux résiduaires vis-à-vis des boues activées. L’information
2 Les résultats avec les produits insolubles doivent être de même
obtenue par cette méthode peut être utile pour estimer l’effet
interprétés avec précaution et ne peuvent être aisément quantifiés, les
d’un produit à expérimenter sur les populations bactériennes
effets inhibiteurs pouvant être sous-estimés si la solubilité du composé
mixtes dans l’environnement aquatique dans les systèmes de
dans le milieu d’essai est diminuée.
traitement biologique aérobie.
1.4 Les résultats de l’essai ne doivent être considérés que
L’annexe fait partie intégrante de la norme.
comme indicatifs de la toxicité probable du produit à expéri-
menter, les boues d’origines diverses pouvant differer dans leur
1 Objet et domaine d’application
composition et leur concentration. De plus, les essais de labo-
ratoire ne peuvent réellement simuler les conditions de I’envi-
ronnement. Par exemple, il n’y a pas de prise en compte d’une
1.1 La présente Norme internationale spécifie une méthode
adaptation a la longue des micro-organismes des boues acti-
pour l’évaluation de l’effet inhibiteur du produit à expérimenter
vées au produit à expérimenter, ou d’une adsorption possible
sur la consommation d’oxygène des micro-organismes de
du produit sur les boues ne conduisant à une toxicité qu’après
boues activées. Cet effet inhibiteur peut inclure les effets sur la
une durée plus longue que celle de l’essai.
respiration et la nitrif ication.
1.2 La méthode fournit une indication sur les effets inhibi-
2 Définitions
teurs ou stimulateurs aprés un temps d’exposition court
(jusqu’à 180 min) du produit à expérimenter sur les micro-
Dans le cadre de la présente Norme internationale, les défini-
organismes des boues activées.
tions suivantes sont applicables.
1.3 La méthode est applicable aux substances chimiques
2.1 boue activee: Amas biologique (floc) formé, au cours
solubles dans les conditions de l’essai. Un soin particulier doit
du traitement d’une eau résiduaire, par la croissance de bacté-
être pris avec les produits de faible solubilité aqueuse et avec les
ries et d’autres micro-organismes en présence d’oxygéne dis-
produits qui consomment ou produisent I’oxygéne physico-
sous. (Définition de I’ISO 6107/1.)
chimiquement.
2.2 matieres en suspension: Matières eliminées des boues
Deux exemples de l’application de la méthode sont donnés
activées par filtration ou centrifugation et sechées à environ
dans l’annexe. La méthode A a pour but de reproduire les con-
100 OC à masse constante.
ditions des eaux de surface, tandis que la méthode B a pour but
de reproduire les conditions des installations de traitement bio-
Déterminée en tant que masse à sec par unité de volume, cette
logique d’eaux résiduaires. Les résultats obtenus par ces deux
quantité est exprimée en grammes par litre ou en milligrammes
approches peuvent être différents. II est essentiel que le procés-
par litre.
verbal d’essai indique quelle méthode a été choisie.
Pour les produits volatils, seul le premier exemple est 2.3 taux de consommation d’oxygène : Consommation
applicable.
d’oxygène par les micro-organismes de boues activées pour un
volume unitaire de boue, par unité de temps.
Cette méthode peut être aussi utilisée pour tester les eaux resi-
duaires. Cette quantité est exprimée en milligrammes par litre par heure.
1

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ISO 81924986 (FI
2.4 taux spécifique de consommation d’oxygène: Con- Tableau 1 - Milieu synthétique
sommation d’oxygène par les micro-organismes de boues acti- (eau d’égout synthétique OCDE diluée au l/lOO)
vées par unité de temps et par unité de masse de micro-
Constituant Quantité
organismes (matières en suspension).
I
Peptone
16 9
Extrait de viande
Cette quantité est exprimée en milligrammes par gramme par
11 g
Urée
3g
heure.
Chlorure de sodium (NaCI)
67 g
Chlorure de calcium dihydraté (CaCl2 . 2H20)
014 g
Sulfate de magnésium heptahydraté (MSS04 . 7H20)
2.5 inhibition de la consommation en oxygène: Diminu-
02 g
Hydrogénophosphate de potassium (K2HP04)
23 g
tion du taux de consommation d’oxygène d’une boue activée
Eau
1 000 ml
en présence du produit à expérimenter, par rapport à un même
mélange sans produit à expérimenter.
Le pH de la solution doit être de 7,5 + 0,5.
Cette quantité est exprimée en pourcentage.
Si les milieux de culture préparés ne sont pas utilisés extempo-
ranément, les conserver, sauf spécification contraire, à I’obscu-
2.6 niveau toxique: Niveau de concentration d’un produit à
rité à 0 à 4 OC pendant 1 semaine au maximum, dans des condi-
expérimenter au-dessus duquel se produit l’inhibition de 0 à
tions évitant toute modification de leur composition.
100 %.
NOTE
- En variante, stériliser le milieu préalablement au stockage, ou
ajouter la peptone ou l’extrait de viande peu de temps avant d’effectuer
2.7 CE 50: Concentration efficace d’un produit à expérimen-
l’essai. Avant utilisation, s’assurer que le milieu est mélangé minutieu-
ter produisant une inhibition d’oxygène de 50 %, par rapport à
sement et ajuster le pH tel qu’il sera nécessaire.
l’essai à blanc, déduite par calcul ou interpolation.
4.3 Produit à expérimenter, solution mère.
3 Principe Les produits à expérimenter peuvent être des substances chimi-
ques pures, des mélanges de substances, des produits chimi-
ques ou des eaux résiduaires.
La boue activée en présence d’un substrat adéquat facilement
biodégradable, consommera rapidement de l’oxygène à un taux
Préparer une solution mère du produit à expérimenter par dis-
dépendant, entre autres, de la concentration en micro-
solution dans de l’eau à une concentration satisfaisante, par
organismes. L’ajout d’un produit à expérimenter à une concen-
exemple 1 g/l ou 10 g/l. Les eaux résiduaires peuvent être utili-
tration toxique peut provoquer une diminution du taux de con-
sées sans dilution.
sommation d’oxygène. Ces taux sont mesurés à l’aide d’une
électrode à oxygène. Le pourcentage d’inhibition de la consom-
Pour les produits insolubles, une suspension ou une dispersion
mation d’oxygène est estimé par comparaison à un mélange
peut être préparée, ou le produit à expérimenter peut être
témoin ne contenant pas de produit à expérimenter.
ajouté directement dans le récipient d’essai. Veiller à obtenir la
meilleure homogénéité possible.
La sensibilité de la boue activée peut être vérifiée à l’aide d’une
substance de référence. Toute consommation abiotique d’oxy-
gène due aux processus physico-chimiques peut également
4.4 Substance de référence, solution mère.
être détectée.
Dissoudre dans de l’eau une quantité adéquante de la subs-
tance de référence choisie. Le 3,5-dichlorophénol à 1 g/l est
recommandé.
4 Milieux et réactifs
4.5 Solution isotonique (voir tableau 2).
4.1 Généralités
- Solution isotonique
Tableau 2
Les produits chimiques utilisés pour la préparation des milieux
Constituant Quantité
de culture et des réactifs doivent être de qualité analytique
reconnue.
Chlorure de sodium (NaCI)
5g
Sulfate de magnésium heptahydraté
0,12 g
Eau 1 000 ml
L’eau utilisée doit être de l’eau distillée ou déminéralisée,
exempte de substances susceptibles d’inhiber la croissance des
micro-organismes dans les conditions de l’essai.
5 Inoculum
Les mesures du pH doivent être effectuées au pH-mètre, et rap-
Pour l’usage général, les boues activées doivent être prélevées
portées à la température de l’essai.
dans les bassins d’aération d’une station d’eau résiduaires trai-
tant de facon prédominante des eaux d’égouts d’origine
4.2 Milieu synthétique, solution mère (voir tableau 1).
domestique et fonctionnant normalement. Tout type de boue
2

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ISO 81924986 (F)
activée de concentration satisfaisante, par exemple 2 à 4 g/l, 7 Mode opératoire
peut être utilisé selon l’objectif de l’essai. Cependant, des
boues activées provenant de différentes installations de traite-
7.1 Généralités
ment peuvent avoir des caractéristiques et des sensibilités diffé-
rentes.
Dans la mesure du possible, effectuer l’essai à une température
constante de 20 + 2 OC, dans une atmosphère exempte de
Dans la mesure du possible, aérer la boue activée et l’utiliser
poussiéres et de vapeurs toxiques.
dans les 24 h suivant le prélévement. Si cela n’est pas possible,
l’alimenter quotidiennement avec un substrat approprié, par
7.2 Mélanges d’essai
exemple un milieu synthétique (voir 4.2).
Préparer dans les récipients d’essais (6.1) des mélanges, Fr,
Si nécessaire, éliminer les particules grossières par sédimenta-
contenant de l’eau de dilution, un milieu synthétique et le pro-
tion pendant un temps court, par exemple 15 min, et par
duit à expérimenter afin d’obtenir différentes concentrations
décantation de la couche supérieure des particules les plus
connues telles que requises. Ajuster le pH a 7,5 + 0,5, ajouter
fines pour emploi. En alternative, la boue peut être homogénéi-
I’inoculum et compléter avec de l’eau pour obtenir des volumes
sée à l’aide d’un agitateur pendant quelques secondes.
finals égaux. Si l’effet d’inhibition du pH doit être testé, ne pas
ajuster le pH.
Si un produit inhibiteur est supposé présent, la boue peut être
lavée comme suit: tout d’abord, centrifuger la boue environ
10 min à approximativement 10 000 m/s2 et éliminer le surna- 7.3 Mélanges de référence
geant. Remettre la boue en suspension dans de l’eau du robinet
exempte de chlore ou dans une solution isotonique (4.5) élimi- Préparer si nécessaire de la même facon (voir 7.7) des mélan-
de référence adéquat.
née après une nouvelle centrifugation. Répéter si nécessaire les avec le composé
g-1 FR,
opérations de lavage et de centrifugation. Déterminer la masse
à sec d’un échantillon de boue. Remettre enfin en suspension la
7.4 Essai à blanc
boue dans de l’eau du robinet exempte de chlore ou dans la
solution isotonique afin d’obtenir une concentration convena-
Au moins un essai à blanc, F,, doit être préparé contenant les
ble de boue activée, par exemple, 3 g/l de matières en suspen-
mêmes volumes de boue activée et de milieu synthétique, mais
sion.
pas le produit à expérimenter. Compléter avec de l’eau au
même volume que pour les mélanges d’essai.
Dans tous les cas, l’origine, la concentration et tout prétraite-
ment de la boue activée doivent être indiqués dans le procés-
7.5 Essai physico-chimique
verbal d’essai.
Si nécessaire, préparer des mélanges, Fpc, pour la détermina-
tion de la consommation physico-chimique d’oxygène. Ils con-
6 Appareillage
tiennent le produit à expérimenter, le milieu synthétique et de
l’eau comme les mélanges d’essai, mais pas de boue activée. Si
Matériel courant de laboratoire et,
nécessaire, ajouter un inhibiteur tel que le chlorure mercurique
afin de prévenir une consommation biologique de I’oxygéne.
6.1 Récipients pour essai, tels que bouteilles à DB0 de
300 ml ou fioles d’Erlenmeyer équipées de bouchons (voir cha-
7.6 Essai préliminaire
pitre A.1 1 ou béchers de 1 000 ml (voir chapitre A.21
Afin d’estimer la gamme de concentrations nécessaires à la réa-
Pour mesurer la concentration en oxygéne dans une bouteille à
lisation d’un essai définitif pour la détermination de l’inhibition
DBO, un bouchon approprié préalablement percé permettant
de la consommation d’oxygène, un essai préliminaire est utile.
l’adaptation d’une électrode à oxygène est nécessaire. Afin
d’éviter des pertes de liquide, introduire tout d’abord à travers
Effectuer l’essai avec au moins trois concentrations du produit
le bouchon un entonnoir ou un large tube de verre.
à expérimenter, par exemple 1; 10 et 100 mg/l, un essai à blanc
et, si nécessaire, un témoin physico-chimique avec la plus forte
6.2 Dispositif de mesure de l’oxygène: électrode polaro-
concentration en produit à expérimenter. Si possible, la plus
graphique à oxygéne et enregistreur (voir ISO 5814, Qualité de
faible concentration en produit à expérimenter utilisée doit
l’eau - Dosage de l’oxygène dissous
...

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