ISO 15213:2003

Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for the enumeration of sulfite-reducing bacteria growing under anaerobic conditions

ISO 15213:2003 specifies a horizontal method for the enumeration of sulfite-reducing bacteria growing under anaerobic conditions. It is applicable to products intended for human consumption and the feeding of animals, and environmental samples in the area of food production and food handling.

Microbiologie des aliments — Méthode horizontale pour le dénombrement des bactéries sulfito-réductrices se développant en conditions anaérobies

L'ISO 15213:2003 spécifie une méthode horizontale pour le dénombrement des bactéries sulfito-réductrices se développant en conditions anaérobies. Elle est applicable aux produits destinés à l'alimentation humaine et animale; échantillons d'environnement dans le domaine de la production et de la distribution des aliments.

General Information

• Status: Withdrawn
• Publication Date: 07-May-2003
• ICS: 07.100.30 - Food microbiology
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 9 - Microbiology
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 9 - Microbiology
• Current Stage: 9599 - Withdrawal of International Standard
• Completion Date: 16-Jan-2023

Relations

• Revised: ISO 15213-1:2023 - Microbiology of the food chain — Horizontal method for the detection and enumeration of Clostridium spp. — Part 1: Enumeration of sulfite-reducing Clostridium spp. by colony-count technique
• Effective Date: 26-Jul-2014

Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 15213
First edition
2003-05-01
Microbiology of food and animal feeding
stuffs — Horizontal method for the
enumeration of sulfite-reducing bacteria
growing under anaerobic conditions
Microbiologie des aliments — Méthode horizontale pour le
dénombrement des bactéries sulfito-réductrices se développant en
conditions anaérobies

Reference number
ISO 15213:2003(E)
©
ISO 2003

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ISO 15213:2003(E)
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Published in Switzerland
©
ii ISO 2003 – All rights reserved

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ISO 15213:2003(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International
Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO15213 was prepared by Technical Committee ISO/TC34, Food products, Subcommittee SC9,
Microbiology.
©
ISO 2003 – All rights reserved iii

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ISO 15213:2003(E)
Introduction
Because of the large variety of food and feed products, this horizontal method may not be appropriate in every
detail for certain products. In this case, different methods specific to these products may be used if absolutely
necessary for justified technical reasons. Nevertheless, every attempt will be made to apply this horizontal
method as far as possible.
When this International Standard is next reviewed, account will be taken of all information then available
regarding the extent to which this horizontal method has been followed and the reasons for deviations from this
method in the case of particular products.
The harmonization of test methods cannot be immediate, and for certain group of products International
Standards and/or national standards may already exist that do not comply with this horizontal method. It is
hoped that when such standards are reviewed they will be changed to comply with this International Standard
so that eventually the only remaining departures from this horizontal method will be those necessary for
well-established technical reasons.
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iv ISO 2003 – All rights reserved

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INTERNATIONAL STANDARD ISO 15213:2003(E)
Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal
method for the enumeration of sulfite-reducing bacteria growing
under anaerobic conditions
1Scope
This International Standard specifies a horizontal method for the enumeration of sulfite-reducing bacteria
growing under anaerobic conditions. It is applicable to
— products intended for human consumption and the feeding of animals, and
— environmental samples in the area of food production and food handling.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced document
(including any amendments) applies.
ISO 6887-1:1999, Microbiology of food and animal feeding stuffs — Preparation of test samples, initial
suspension and decimal dilutions for microbiological examination — Part 1: General rules for the preparation of
the initial suspension and decimal dilutions
ISO 8261, Milk and milk products — General guidance for the preparation of test samples, initial suspensions
and decimal dilutions for microbiological examination
ISO 7218:1996, Microbiology of food and animal feeding stuffs — General rules for microbiological
examinations
ISO 7218:1996/Amd.1:2001, Microbiology of food and animal feeding stuffs — General rules for microbiological
examinations — Amendment 1
ISO/TS 11133-1, Microbiology of food and animal feeding stuffs — Guidelines on preparation and production of
culture media — Part 1: General guidelines on quality assurance for the preparation of culture media in the
laboratory
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
sulfite-reducing bacteria growing under anaerobic conditions
bacteria forming countable typical colonies under the conditions specified in this International Standard
4 Principle
4.1 Two agar plates (or tubes) are prepared, using iron sulfite medium, and using a specified quantity of the
test sample if the initial product is liquid, or using a specified quantity of an initial suspension in the case of other
products.
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ISO 2003 – All rights reserved 1

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ISO 15213:2003(E)
Two other agar plates (or tubes) are prepared, under the same conditions, using decimal dilutions of the test
sample or the initial suspension.
◦ ◦
4.2 The plates (or tubes) are incubated under anaerobic conditions at 37 C± 1 C for 24 h to 48 h (final
◦
reading after 48 h), or possibly at 50 C if thermophilic bacteria are suspected. Typical black-coloured colonies
are counted. The black colour of the colonies and the surrounding zone is due to the formation of iron(II) sulfide
as a result of the reaction between sulfide ions and trivalent
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 15213
Première édition
2003-05-01
Microbiologie des aliments — Méthode
horizontale pour le dénombrement des
bactéries sulfito-réductrices se
développant en conditions anaérobies
Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for
the enumeration of sulfite-reducing bacteria growing under anaerobic
conditions

Numéro de référence
ISO 15213:2003(F)
©
ISO 2003

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ISO 15213:2003(F)
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Publié en Suisse
©
ii ISO 2003 – Tous droits réservés

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ISO 15213:2003(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec la
Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de droits
de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir
identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 15213 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 9,
Microbiologie.
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ISO 2003 – Tous droits réservés iii

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ISO 15213:2003(F)
Introduction
En raison de la grande diversité des produits alimentaires, il est possible que la présente méthode horizontale
ne soit pas applicable dans tous ses détails à certains d'entre eux. Dans ce cas, des méthodes différentes,
spécifiques à ces produits, pourront être utilisées si cela s'avère absolument nécessaire pour des raisons
techniques justifiées. Néanmoins, il convient que tous les efforts soit faits pour appliquer cette méthode
horizontale chaque fois que possible.
Lors du prochain réexamen périodique de la présente Norme internationale, il sera tenu compte de toutes les
évolutions intervenues depuis sa publication et, notamment, dans quelle mesure cette méthode horizontale
aura été suivie ainsi que les raisons des dérogations dans le cas de produits particuliers.
L'harmonisation de toutes les méthodes d'essai ne peut être réalisée de façon immédiate; de ce fait, il peut déjà
exister des Normes internationales et/ou nationales pour certains groupes de produits, qui ne concordent pas
avec la présente méthode horizontale. Lorsque de telles normes viendront en révision, il serait souhaitable de
les aligner avec les prescriptions de la présente Norme internationale et de ne conserver que les seules
divergences justifiées indispensables pour des raisons techniques.
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iv ISO 2003 – Tous droits réservés

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NORME INTERNATIONALE ISO 15213:2003(F)
Microbiologie des aliments — Méthode horizontale pour le
dénombrement des bactéries sulfito-réductrices se développant
en conditions anaérobies
1 Domaine d'application
La présente Norme internationale spécifie une méthode horizontale pour le dénombrement des bactéries
sulfito-réductrices se développant en conditions anaérobies. Elle est applicable aux
— produits destinés à l'alimentation humaine et animale;
—échantillons d'environnement dans le domaine de la production et de la distribution des aliments.
2Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l'application du présent document. Pour les
références datées, seule l'édition citée s'applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document de référence s'applique (y compris les éventuels amendements).
ISO 6887-1:1999, Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons, de la suspension mère et des
dilutions décimales en vue de l'examen microbiologique — Partie 1: Règles générales pour la préparation de la
suspension mère et des dilutions décimales
ISO 8261, Lait et produits laitiers — Lignes directrices générales pour la préparation des échantillons pour
essai, de la suspension mère et des dilutions décimales en vue de l'examen microbiologique
ISO 7218:1996, Microbiologie des aliments — Règles générales pour les examens microbiologiques
ISO 7218:1996/Amd.1:2001, Microbiologie des aliments — Règles générales pour les examens
microbiologiques — Amendement 1
ISO/TS 11133-1, Microbiologie des aliments — Guide pour la préparation et la production des milieux de
culture — Partie 1: Guide général pour l'assurance de la qualité pour la préparation des milieux de culture en
laboratoire
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s'appliquent.
3.1
bactéries sulfito-réductrices se développant en conditions anaérobies
bactéries formant des colonies dénombrables typiques dans les conditions spécifiées dans la présente Norme
internationale
4Principe
4.1 Ensemencement dans la masse de deux boîtes de Petri (ou de deux tubes) de milieu au sulfite de fer avec
une quantité spécifiée de l'échantillon pour essai si le produit initial est liquide, ou avec une quantité spécifiée
de suspension mère dans le cas d'autres produits.
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ISO 2003 – Tous droits réservés 1

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ISO 15213:2003(F)
Préparation de deux autres boîtes (ou tubes) de gélose, dans les mêmes conditions, avec des dilutions
décimales de l'échantillon pour essai ou de la suspension mère.
◦ ◦
4.2 Incubation en anaérobiose des boîtes (ou tubes) à 37 C± 1 Cpendant 24 h à 48 h (lecture finale au
◦
bout de 48 h), éventuellement à 50 C si l'on suspecte la présence de bactéries thermophiles. Dénombrement
de colonies caractéristiques de couleur noire. La couleur noire des colonies et des alentours est due à la
formation de sulfure de fer(II) résultant de la réaction entre les ions sulfure et les ions trivalents ferriques [Fe(III)]
présents dans le milieu.
4.3 Calcul du nombre de bactéries sulfito-réductrices par millilitre ou par gramme d'échantillon, à partir du
nombre de colonies obtenues sur les boîtes (ou t
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