ISO 16297:2013

Milk — Bacterial count — Protocol for the evaluation of alternative methods

ISO 16297|IDF161:2013 gives guidelines for the evaluation of instrumental alternative methods for total bacterial count in raw milk from animals of different species.

Lait — Dénombrement bactérien — Protocole pour l'évaluation des méthodes alternatives

L'ISO 16297|FIL 161:2013 donne des lignes directrices pour l'évaluation de méthodes instrumentales alternatives pour le dénombrement de la flore totale dans le lait cru provenant d'animaux de différentes espèces.

General Information

• Status: Withdrawn
• Publication Date: 23-May-2013
• Withdrawal Date: 23-May-2013
• ICS: 67.100.10 - Milk and processed milk products
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 5 - Milk and milk products
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 5 - Milk and milk products
• Current Stage: 9599 - Withdrawal of International Standard
• Completion Date: 06-Jan-2020

Relations

• Revised: ISO 16297:2020 - Milk — Bacterial count — Protocol for the evaluation of alternative methods
• Effective Date: 15-Dec-2017

Standards Content (Sample)

МЕЖДУНАРОДНЫЙ ISO
СТАНДАРТ 16297
IDF
161

Первое издание
2013-06-01


Молоко. Подсчет бактерий. Протокол
для оценивания альтернативных
методов
Milk — Bacterial count — Protocol for the evaluation of alternative
methods



Ответственность за подготовку русской версии несѐт GOST R
(Российская Федерация) в соответствии со статьѐй 18.1 Устава ISO

Ссылочные номера
ISO 16297:2013(R)

IDF 161:2013(R)
©
ISO и IDF 2013

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 16297:2013(R)
IDF 161:2013(R)

ДОКУМЕНТ ЗАЩИЩЕН АВТОРСКИМ ПРАВОМ


© ISO/IDF 2013
Все права сохраняются. Если не указано иное, никакую часть настоящей публикации нельзя копировать или использовать в
какой-либо форме или каким-либо электронным или механическим способом, включая фотокопии и микрофильмы, без
предварительного письменного согласия ISO, которое должно быть получено после запроса о разрешении, направленного по
адресу, приведенному ниже, или в комитет-член ISO в стране запрашивающей стороны.
ISO copyright office    International Dairy Federation
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20   Silver Building •Bd Auguste Reyers 70/B • B-1030 Brussels
Tel. + 41 22 749 01 11    Tel. + 32 2 733 98 88
Fax + 41 22 749 09 47    Fax + 32 2 733 04 13
E-mail copyright @ iso.org    E-mail [e-mail]
Web www.iso.org    Web www.fil-idf.org

Опубликовано в Швейцарии

ii © ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются

---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 16297:2013(R)
IDF 161:2013(R)
Содержание Страница
Предисловие .iv
Введение .vi
1 Область применения .1
2 Нормативные ссылки .1
3 Термины и определения .1
4 Преобразование результатов .1
5 Характеристики альтернативного метода .2
5.1 Описание метода, который будет оцениваться .2
5.2 Диапазон измерений .2
5.3 Перенос.4
5.4 Стабильность .5
5.5 Прецизионность .6
6 Альтернативный метод как оценка стандартного метода .7
6.1 Определение факторов, влияющих на эту оценку .7
6.2 Протокол измерения .7
6.3 Вычисления .7
6.4 Характеристики альтернативного метода, выраженные в единицах стандартного
метода. 10
7 Оценка детально разработанных характеристик . 10
Приложение (информативное) Выражение параметров прецизионности . 11
Библиография . 13

© ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются iii

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 16297:2013(R)
IDF 161:2013(R)
Предисловие
Международная организация по стандартизации (ISO) является всемирной федерацией
национальных организаций по стандартизации (комитетов-членов ISO). Разработка международных
стандартов обычно осуществляется техническими комитетами ISO. Каждый комитет-член,
заинтересованный в деятельности, для которой был создан технический комитет, имеет право быть
представленным в этом комитете. Международные правительственные и неправительственные
организации, имеющие связи с ISO, также принимают участие в работах. Что касается стандартизации
в области электротехники, ISO работает в тесном сотрудничестве с Международной
электротехнической комиссией (IEC).
Проекты международных стандартов разрабатываются по правилам, указанным в Директивах ISO/IEC,
Часть 2.
Главная задача технических комитетов состоит в разработке международных стандартов. Проекты
международных стандартов, принятые техническими комитетами, рассылаются комитетам-членам на
голосование. Их опубликование в качестве международных стандартов требует одобрения, по
меньшей мере, 75 % комитетов-членов, принимающих участие в голосовании.
Обращается внимание на возможность того, что некоторые элементы данного международного
стандарта могут быть объектом патентных прав. ISO не несет ответственности за идентификацию
какого-либо или всех таких патентных прав.
ISO 16297IDF 161 был разработан Техническим комитетом ISO/TC 34, Пищевые продукты,,
Подкомитетом SC 5, Молоко и молочные продукты, и Международной молочной федерацией (IDF). Он
публикуется совместно ISO и IDF.
iv © ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются

---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 16297:2013(R)
IDF 161:2013(R)
Предисловие
Международная молочная федерация (IDF) является некоммерческой организацией,
представляющей молочный сектор в мировой экономике. Членами IDF являются национальные
комитеты в каждой стране-члене, а также региональные молочные ассоциации, подписавшие
официальное соглашение о сотрудничестве с IDF. Все члены IDF имеют право быть представленными
в постоянных комитетах IDF, выполняющих техническую работу. IDF сотрудничает с ISO в разработке
стандартных методов анализа и отбора проб молока и молочных продуктов.
Главной задачей постоянных комитетов является разработка международных стандартов. Проекты
международных стандартов, принятые рабочими группами и постоянными комитетами, рассылаются
национальным комитетам на голосование. Для их опубликования в качестве международных
стандартов требуется одобрение не менее 50% национальных комитетов IDF, принимающих участие в
голосовании.
Следует иметь в виду, что некоторые элементы настоящего международного стандарта могут быть
объектом патентных прав. IDF не несет ответственности за идентификацию какого-либо одного или
всех таких патентных прав
ISO 16297|IDF 161 был разработан Международной молочной федерацией (IDF) и Техническим
комитетом ISO/TC 34, Пищевые продукты,, Подкомитетом SC 5, Молоко и молочные продукты. Он
публикуется совместно IDF и ISO.
Вся работа была проведена Совместной проектной группой ISO-IDF (S07) Постоянного комитета по
Статистике и автоматизации под эгидой руководителя проекта госпожи. I. Andersson (Швеция).
Настоящее первое издание ISO 16297|IDF 161 отменяет и заменяет IDF 161A:1995, которое было
технически пересмотрено.
© ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются v

---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 16297:2013(R)
IDF 161:2013(R)
Введение
Требованием любого количественного измерения в микробиологии является рассмотрение
микробиологического состояния в пробе как одной точки в координатах многомерной системы, которая
будет проецироваться на одномерную шкалу применяемого метода, т.е. чашечного подсчета,
проточной цитометрии. Такие аспекты, как флора (типы и количества микроорганизмов и их
распределение), фаза роста, сублетальное повреждение, метаболическая активность и предыстория,
влияют в большей или меньшей степени на любой измеряемый параметр. Очевидно, что любое
проецирование n-мерной ситуации на одномерную шкалу дает весьма ограниченную картину реальной
ситуации. В этом отношении приходится принимать неизбежный результат, независимо от того, какой
метод измерения предпочитается.
Термин стандартный (официальный или опорный) метод в этом международном стандарте означает
метод, международно признанный экспертами, используемый в законодательстве или по
договоренности между сторонами. Альтернативный метод согласно требованиям для его оценивания
должен ссылаться на стандартный метод и быть основан на исследовании подходящих образцов для
целевого использования.
vi © ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются

---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 16297:2013(R)
МЕЖДУНАРОДНЫЙ СТАНДАРТ
IDF 161:2013(R)

Молоко. Подсчет бактерий. Протокол для оценивания
альтернативных методов
1 Область применения
Настоящий международный стандарт дает руководящие указания относительно оценивания
инструментальных альтернативных методов для определения общего количества бактерий в сыром
молоке от животных различных видов.
ПРИМЕЧАНИЕ Этот документ является дополнением к ISO 16140 и ISO 8196|IDF 128 (см. Раздел 2 и ссылку [1]).
2 Нормативные ссылки
Следующие ссылочные нормативные документы являются обязательными при применении данного
документа. Для жестких ссылок применяется только цитированное издание документа. Для плавающих
ссылок необходимо использовать самое последнее издание нормативного ссылочного документа
(включая любые изменения).
ISO 5725-1, Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1.
Общие принципы и определения
ISO 5725-2, Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2.
Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода
измерения
ISO 8196-1|IDF 128-1, Молоко. Определение и оценивание общей точности альтернативных
методов анализа молока. Часть1. Аналитические признаки альтернативных методов
ISO 8196-2|IDF 128-2, Молоко. Определение и оценивание общей точности альтернативных
методов анализа молока. Часть 2. Калибровка и контроль качества в лаборатории по анализу
молочной продукции
ISO 16140-1, Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Метод валидации. Часть 1.
Словарь
ISO 16140-2, Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Метод валидации. Часть 2.
Протокол валидации альтернативных (фирменных) методов в сравнении с эталонным методом
ISO 21187|IDF 196:2004, Молоко. Количественное определение бактериологического качества.
Руководство по проверке и зависимости между результатами типового и базового методов
3 Термины и определения
Применительно к этому документу используются термины и определения, данные в ISO 8196-1|IDF 128-1
и ISO 8196-2|IDF 128-2.
Для определений прецизионности, повторяемости и воспроизводимости см. ISO 5725-1, ISO 5725-2,
ISO 8196-1|IDF 128-1 и ISO 16140-1.
4 Преобразование результатов
Предпосылкой для статистики, наиболее распространенной в оценке методов измерения, является
приближение нормального распределения данных. Экспоненциальный рост микроорганизмов обычно
ведет к распределению с правым хвостом для количественных микробиологических параметров.
Таким образом, необходимо преобразование первичных данных для приближения нормальности.
© ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются 1

---------------------- Page: 7 ----------------------
ISO 16297:2013(R)
IDF 161:2013(R)
Обычно это общепринятое логарифмическое преобразование или преобразование методом
извлечения квадратного корня для низких количественных уровней бактерий. Наиболее подходящее
преобразование можно проверять путем сравнения гистограмм. Все статистические данные затем
вычисляют из преобразованных данных, если не установлено иначе, и только окончательные данные
повторно преобразуют, чтобы дать пользователю более выразительное представление ситуации (см.
также Приложение A).
5 Характеристики альтернативного метода
ПРИМЕЧАНИЕ Параметры, приведенные в этом разделе, не нужно полностью оценивать для каждого
альтернативного метода. Например, диапазон измерений (см. 5.2) чашечного метода с петлей определяется
используемой петлей.
5.1 Описание метода, который будет оцениваться
5.1.1 Описание
Описание исследуемого метода должно соответствовать контрольному списку в 5.1.2.
Большая часть информации содержится в технических условиях для данного метода, предоставляемых
ответственным поставщиком или любым другим источником (автором) установленного метода.
5.1.2 Контрольный список
a) Принцип метода.
b) Параметр или единица.
c) Технический проект процедуры измерения.
d) Область применения:
1) цель: например, научное исследование, тестирование, классификация молока;
2) матрица: например, сырое коровье молоко.
e) Поставщик(и) прибора, реактивов, стандартов.
f) Технические условия метода, предоставляемые производителем или автором:
1) предпосылки отбора проб и приготовления образцов (часто в сравнении с ситуацией анализа
жиров);
2) возможности для консервации проб [реактив(ы), условие(я) хранения];
3) количественный (единицы: исследуемый метод или эталонный метод) и качественный (вид
охваченных микроорганизмов) спектральный анализ;
4) прецизионность (в единицах исследуемого метода или в единицах эталонного метода);
5) точность оценки (в единицах эталонного метода);
6) количество образцов в час;
7) перечень ссылок.
5.2 Диапазон измерений
5.2.1 Нижний предел количественного определения
Нижний предел количественного анализа определяется как среднее для молока без бактерий плюс n-
кратное его стандартного отклонения; обычно n = 10. См. также ISO 16140-2.
2 © ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются

---------------------- Page: 8 ----------------------
ISO 16297:2013(R)
IDF 161:2013(R)
Анализируют молоко без бактерий или с очень низкой концентрацией бактерий. Преобразуют данные,
вычисляя квадратный корень из каждого результата. Вычисляют среднее, x , и стандартное
отклонение, s, преобразованных результатов. Вычисляют нижний предел количественного
определения как xns .
5.2.2 Верхний предел количественного определения
Верхний предел количественного анализа определяют посредством самого высокого показания
метода или путем методологических ограничений, например эффект совпадений, неточность верхних
пределов измерений, засорение фильтров. Совпадение бывает, когда два или более элементов
измеряемого параметра детектируются одновременно и идентифицируются только как одна единица.
Например, при поточной цитометрии, если две бактериальные клетки проходят детектор
одновременно, они детектируются как одна. Эффект совпадения выше при более высоких
концентрациях измеряемого параметра.
Верхний предел количественного анализа определяется как самая высокая концентрация, когда
показания прибора еще линейные согласно 5.2.3.
5.2.3 Линейность приборного сигнала
Зависимость между показаниями прибора и ожидаемыми значениями должна быть линейной в
диапазоне подсчета бактерий. Отклонения от линейности могут происходить от неспецифических
сигналов и эффектов совпадений.
Проверку линейности сначала проводят визуально с помощью подходящих графиков, чтобы получить
представление о форме зависимости. Всякий раз, когда появляется явное отклонение от линейности,
вычисляют количественный параметр, чтобы показать, является ли наблюдаемый тренд приемлемым
или нет.
Для достижения этого используют молоко с высоким количеством бактерий, последовательно
разбавляя его молоком с низким количеством бактерий и в результате получая набор как минимум из
10 образцов, охватывающий рассматриваемый диапазон концентраций.
Измеряют все образцы не менее четырех раз и вычисляют средний результат для каждого образца.
Получают измеренное значение в расчете на один образец. Используют измеренные значения для
молока с высоким количеством бактерий и для молока с низким количеством бактерий, чтобы
вычислить значения для промежуточных образцов из применяемых отношений концентраций. В
результате получают математическое ожидание для каждого образца. Затем применяют линейную
регрессию с ожидаемыми значениями в расчете на один образец, C , по оси x и измеренными
e
значениями в расчете на один образец, C , по оси y. Вычисляют остатки ΔC = C , – (a × C , + b)
meas 1i meas i e i
регрессии. Откладывают остатки ΔC по оси y относительно ожидаемых значений, C , на оси x.
1i e
Визуальный контроль точек на графике обычно дает достаточно информации о линейности сигнала.
Любой резко отклоняющийся остаток должен привести к исключению соответствующего результата и к
возобновлению вычисления.
Искривление можно выразить отношением, r , используя Уравнение (1):
L
CC
 
max min
r100 (1)
L
CC
 
meas,max meas,min
где
ΔC величина максимального остатка регрессии;
max
ΔC величина минимального остатка регрессии;
min
C ,
измеренное значение для молока с высоким количеством бактерий;
meas max
C , измеренное значение для молока с низким количеством бактерий.
meas min
Отношение, r , должно быть меньше 5 %.
L
ПРИМЕЧАНИЕ Чтобы оценить линейность, используются необработанные данные, выраженные в единицах
обычного метода без логарифмического или любого другого преобразования.
© ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются 3

---------------------- Page: 9 ----------------------
ISO 16297:2013(R)
IDF 161:2013(R)
5.3 Перенос
Эффекты переноса могут возникать в аналитических системах, которые действуют непрерывно. Это
происходит из-за переноса некоторой порции материала из одного испытательного образца в соседний
образец или последующие образцы.
Вследствие применения механизированных процессов анализа не только соседний образец, но также
образцы в последующих позициях могут испытывать различные воздействия, например от
инкубационных камер с периодической циркуляцией.
Этот эффект можно проверить, анализируя последовательно молоко с высоким количеством бактерий
и холостые образцы. Перенос вызывает увеличение количественных значений для холостого образца
по сравнению с нормальным значением холостого образца (значение холостого образца,
последовательно анализируемое после предыдущего холостого образца).
Перенос может быть выражен в процентном отношении к соответствующему предыдущему молочному
образцу.
Чтобы оценить перенос с достаточной определенностью, количество образцов и количество бактерий
в молочных образцах должны быть достаточно высокими. Образцы должны быть репрезентативными
для обычных проб, особенно относительно срока хранения (увеличение срока хранения ведет к
повышению вязкости молока и к потенциальному увеличению переноса). Один из способов
проведения испытания описан в нижеприведенном примере. Детальные и теоретические аспекты и
[1]
альтернативные установки для оценивания переноса даны в ISO 8196-3|IDF 128-3.
Приведенный в качестве примера способ для оценивания эффекта переноса состоит в проведении
анализа как минимум для 10 наборов проб, каждый из которых включает один молочный образец с
очень высоким количеством бактерий с двумя последующими холостыми образцами. В качестве
холостых образцов могут применяться вода или молоко с пренебрежимо малым количеством бактерий.
(молоко, холостой образец , холостой образец ) , (молоко, холостой образец , холостой образец ) …
1 2 1 1 2 2
(молоко, холостой образец , холостой образец )
1 2 n
Относительный перенос, COR, выраженный в процентах, может быть вычислен для каждого набора
...

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 16297
IDF
161
First edition
2013-06-01
Milk — Bacterial count — Protocol for
the evaluation of alternative methods
Lait — Dénombrement bactérien — Protocole pour l’évaluation des
méthodes alternatives
Reference numbers
ISO 16297:2013(E)
IDF 161:2013(E)
©
ISO and IDF 2013

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 16297:2013(E)
IDF 161:2013(E)
COPYRIGHT PROTECTED DOCUMENT
© ISO/IDF 2013
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized otherwise in any form or
by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting on the internet or an intranet, without prior written
permission. Permission can be requested from either ISO or IDF at the respective address below or ISO’s member body in the
country of the requester.
ISO copyright office International Dairy Federation
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20 Silver Building • Bd Auguste Reyers 70/B • B-1030 Brussels
Tel. + 41 22 749 01 11 Tel. + 32 2 733 98 88
Fax + 41 22 749 09 47 Fax + 32 2 733 04 13
E-mail [e-mail] E-mail [e-mail]
Web www.iso.org Web www.fil-idf.org
Published in Switzerland
ii © ISO and IDF 2013 – All rights reserved

---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 16297:2013(E)
IDF 161:2013(E)
Contents Page
Foreword .iv
Introduction .vi
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Transformation of results . 1
5 Attributes of the alternative method . 2
5.1 Description of the method to be evaluated . 2
5.2 Measuring range . 2
5.3 Carry-over . 3
5.4 Stability . 5
5.5 Precision . 5
6 The alternative method as an estimate of the reference method .6
6.1 Evaluation of factors affecting the estimation . 6
6.2 Measurement protocol . 7
6.3 Calculations . 7
6.4 Attributes of the alternative method expressed in units of the reference method .10
7 Rating of the elaborated attributes .10
Annex A (informative) Expression of precision parameters .11
Bibliography .13
© ISO and IDF 2013 – All rights reserved iii

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 16297:2013(E)
IDF 161:2013(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national
standards bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally
carried out through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which
a technical committee has been established has the right to be represented on that committee.
International organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part
in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all
matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International
Standards adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting.
Publication as an International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies
casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 16297|IDF 161 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 5, Milk
and milk products and the International Dairy Federation (IDF). It is being published jointly by ISO and IDF.
iv © ISO and IDF 2013 – All rights reserved

---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 16297:2013(E)
IDF 161:2013(E)
Foreword
IDF (the International Dairy Federation) is a non-profit organization representing the dairy sector
worldwide. IDF membership comprises National Committees in every member country as well as
regional dairy associations having signed a formal agreement on cooperation with IDF. All members of
IDF have the right to be represented at the IDF Standing Committees carrying out the technical work.
IDF collaborates with ISO in the development of standard methods of analysis and sampling for milk and
milk products.
The main task of Standing Committees is to prepare International Standards. Draft International
Standards adopted by the Standing Committees are circulated to the National Committees for
endorsement prior to publication as an International Standard. Publication as an International Standard
requires approval by at least 50 % of IDF National Committees casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. IDF shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 16297|IDF 161 was prepared by the International Dairy Federation (IDF) and Technical
Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 5, Milk and milk products. It is being published
jointly by IDF and ISO.
All work was carried out by Joint ISO-IDF Project Group (S07) of the Standing Committee on Statistics
and automation under the aegis of its project leader, Mrs. I. Andersson (SE).
This first edition of ISO 16297|IDF 161 cancels and replaces IDF 161A:1995, which has been
technically revised.
© ISO and IDF 2013 – All rights reserved v

---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 16297:2013(E)
IDF 161:2013(E)
Introduction
Any quantitative measurement in microbiology should consider that there is a requirement for the
microbiological state in a sample to be regarded as one point within the co-ordinates of a multidimensional
system, which is to be projected on to the one-dimensional scale of the method applied, i.e. plate count,
flow cytometry. Aspects such as flora (types and numbers of microorganisms and their distribution),
growth phase, sub-lethal damage, metabolic activity, and history, influence to a greater or lesser extent
any parameter that is measured. It is evident that any projection of an n-dimensional situation on to an
one-dimensional scale is bound to provide a picture of the real situation that is rather restricted. In this
respect one has to bow to the inevitable, regardless of which method of measurement is preferred.
The term reference (or official or anchor) method in this International Standard means a method
internationally recognized by experts, used in legislation or by agreement between the parties. There
are requirements for evaluation of an alternative method to refer to the reference method and to be
based on the examination of suitable samples for its intended use.
vi © ISO and IDF 2013 – All rights reserved

---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 16297:2013(E)
INTERNATIONAL STANDARD
IDF 161:2013(E)
Milk — Bacterial count — Protocol for the evaluation of
alternative methods
1 Scope
This International Standard gives guidelines for the evaluation of instrumental alternative methods for
total bacterial count in raw milk from animals of different species.
NOTE The document is considered complementary to ISO 16140 and ISO 8196|IDF 128 (see Clause 2 and
Reference [1]).
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced
document (including any amendments) applies.
ISO 5725-1, Accuracy (trueness and precision) of measurement methods and results — Part 1: General
principles and definitions
ISO 5725-2, Accuracy (trueness and precision) of measurement methods and results — Part 2: Basic method
for the determination of repeatability and reproducibility of a standard measurement method
ISO 8196-1|IDF 128-1, Milk — Definition and evaluation of the overall accuracy of alternative methods of
milk analysis — Part 1: Analytical attributes of alternative methods
ISO 8196-2|IDF 128-2, Milk — Definition and evaluation of the overall accuracy of alternative methods of
milk analysis — Part 2: Calibration and quality control in the dairy laboratory
ISO 16140-1, Microbiology of food and animal feed — Method validation — Part 1: Vocabulary
ISO 16140-2, Microbiology of food and animal feed — Method validation — Part 2: Protocol for the validation
of alternative (proprietary) methods against a reference method
ISO 21187|IDF 196:2004, Milk — Quantitative determination of bacteriological quality — Guidance for
establishing and verifying a conversion relationship between routine method results and anchor method results
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the terms and definitions given in ISO 8196-1|IDF 128-1 and
ISO 8196-2|IDF 128-2 apply.
For the definitions of precision, repeatability and reproducibility, see ISO 5725-1, ISO 5725-2,
ISO 8196-1|IDF 128-1, and ISO 16140-1.
4 Transformation of results
A prerequisite for statistics most common in the evaluation of measuring methods is the approximation
of a normal distribution of the data. The exponential multiplication of microorganisms usually leads to
a right-tailed distribution of quantitative microbiological parameters. Thus, in general, transformation
of the raw data is necessary for approximation of normality. This is usually a common logarithmic
transformation or a square root transformation for low bacteria levels. The most appropriate
transformation can be checked by comparing histograms. All statistics are then computed from the
© ISO and IDF 2013 – All rights reserved 1

---------------------- Page: 7 ----------------------
ISO 16297:2013(E)
IDF 161:2013(E)
transformed data, unless specified otherwise, and only the final results are re-transformed to give a
more expressive idea of the situation to the user (see also Annex A).
5 Attributes of the alternative method
NOTE The parameters outlined in this clause do not need to be evaluated completely for every alternative
method. For example, the measuring range (see 5.2) of the plate loop method is determined by the loop(s) used.
5.1 Description of the method to be evaluated
5.1.1 Description
The description of the method under study shall be in line with the checklist in 5.1.2.
Most of the information is found in the specification of the method given by the responsible supplier or
any other source (author) of the technique specified.
5.1.2 Checklist
a) Principle of the method.
b) Parameter or unit.
c) Technical design of the measurement procedure.
d) Field of application:
1) purpose: e.g. research, screening, milk grading;
2) matrix: e.g. raw milk from cows.
e) Supplier(s) of instrument, reagents, standards.
f) Specification of the method given by the producer or the author:
1) prerequisites for sampling (often compared to the situation of fat analysis);
2) possibilities for sample preservation [reagent(s), storage condition(s)];
3) quantitative (units: method under study or reference method) and qualitative (the kind of
microorganisms covered) spectrum;
4) precision (in units of the method under study or in reference method units);
5) accuracy of the estimate (in reference method units);
6) samples per hour;
7) list of references.
5.2 Measuring range
5.2.1 Lower limit of quantification
The lower limit of quantification is defined as the average of milk without bacteria plus the n-fold of its
standard deviation; generally, n = 10. See also ISO 16140-2.
Analyse milk without bacteria or with a very low concentration of bacteria. Transform data by calculating
square root from each result. Calculate the mean, x , and the standard deviation, s, of the transformed
results. Calculate the lower limit of quantification as xn+ s .
2 © ISO and IDF 2013 – All rights reserved

---------------------- Page: 8 ----------------------
ISO 16297:2013(E)
IDF 161:2013(E)
5.2.2 Upper limit of quantification
The upper limit of quantification is determined by the highest possible reading of the method or by
methodological limitations, e.g. coincidence effects, inaccuracy in the upper measuring range, clogging
of filters. Coincidence is when two or more elements of the measurand are detected simultaneously and
identified as only one unit. For example, with flow cytometry, if two bacterial cells pass the detector
simultaneously, they are detected as one. The coincidence effect is higher with higher concentrations
of a measurand.
Upper limit of quantification is determined as the highest concentration where the instrument is still
linear according to 5.2.3.
5.2.3 Linearity of the instrument signal
The relationship between the instrument readings and the expected values shall be linear within the
concerned range of bacterial counts. Deviations from linearity may stem from non-specific signals and
coincidence effects.
A linearity check is at first performed visually using appropriate graphs to obtain an impression of the
shape of the relationship. Whenever deviation from linearity appears evident, a quantitative parameter
is calculated to indicate whether the observed trend is acceptable or not.
To achieve this, use a high bacterial count milk diluted serially with low bacterial count milk, resulting
in a set of at least 10 samples covering the concentration range of interest.
Measure all samples at least four times and calculate the average result for each sample. This gives the
measured value per sample. Use the measured values for the high count milk and the low count milk to
calculate values for the intermediate samples from the applied mixing ratios. This results in an expected
value for each sample. Then apply linear regression with the expected values per sample, C , on the x-axis
e
and the measured values per sample, C , on the y-axis. Calculate the residuals ΔC = C , – (a × C , +
meas 1i meas i e i
b) from the regression. Plot the residuals ΔC on the y-axis versus the expected values, C , on the x-axis. A
1i e
visual inspection of the data points usually yields sufficient information about the linearity of the signal.
Any outlying residual should lead to deletion of the related result and to renewal of the calculation.
The curving can be expressed by the ratio, r , using Formula (1):
L
Δ−CCΔ
()
maxmin
r = ×100 (1)
L
CC−
()
meas,max meas,min
where
ΔC is the value of the maximum residual from the regression;
max
ΔC is the value of the minimum residual from the regression;
min
C , is the measured value for the high count milk;
meas max
C , is the measured value for the low count milk.
meas min
The ratio, r , shall be less than 5 %.
L
NOTE To evaluate linearity, use the raw data expressed in units of the routine method without logarithmic or
any other transformation.
5.3 Carry-over
Carry-over effects can occur in analytical systems that operate continuously. It derives from the transfer
of a certain portion of sample material from one test sample to the next or further sample(s).
© ISO and IDF 2013 – All rights reserved 3

---------------------- Page: 9 ----------------------
ISO 16297:2013(E)
IDF 161:2013(E)
Due to the design of a mechanized process of analysis, not only the next sample, but also samples in a
later position can be influenced due, for example, to incubation wells with a periodic circulation.
This effect can be tested by analysing consecutively milk with high bacterial count and blank samples.
Carry-over causes an increase of blank sample values compared to normal blank sample value (value of
blank sample analysed after another blank sample).
The carry-over can be expressed as percentage of the corresponding preceding milk sample.
For evaluation of carry-over, the number of samples and the bacterial count of the milk samples should be
high enough to estimate the carry-over with sufficient certainty. The samples should be representative
of the routine samples, especially regarding the storage time (longer storage time leading to higher milk
viscosity and potentially higher carry-over). One way of setting up the test is described in the example
below. For detailed and theoretical aspects and alternative setups of carry-over estimation, it is referred
[1]
to ISO 8196-3|IDF 128-3.
As an example, one way to estimate the carry-over effect is to analyse at least 10 sets of
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 16297
FIL
161
Première édition
2013-06-01
Lait — Dénombrement bactérien —
Protocole pour l’évaluation des
méthodes alternatives
Milk — Bacterial count — Protocol for the evaluation of
alternative methods
Numéros de référence
ISO 16297:2013(F)
FIL 161:2013(F)
©
ISO et FIL 2013

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 16297:2013(F)
FIL 161:2013(F)
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO/FIL 2013
Droits de reproduction réservés. Sauf indication contraire, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée
sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie, l’affichage sur
l’internet ou sur un Intranet, sans autorisation écrite préalable. Les demandes d’autorisation peuvent être adressées à l’ISO ou à
la FIL, à l’une ou l’autre des adresses ci-après, ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office International Dairy Federation
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20 Silver Building • Bd Auguste Reyers 70/B • B-1030 Brussels
Tel. + 41 22 749 01 11 Tel. + 32 2 733 98 88
Fax + 41 22 749 09 47 Fax + 32 2 733 04 13
E-mail [e-mail] E-mail [e-mail]
Web www.iso.org Web www.fil-idf.org
Publié en Suisse
ii © ISO et FIL 2013 – Tous droits réservés

---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 16297:2013(F)
FIL 161:2013(F)
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .vi
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Transformation des résultats . 1
5 Caractéristiques d’une méthode alternative . 2
5.1 Description de la méthode à évaluer . 2
5.2 Plage de mesure . 2
5.3 Contamination d’un échantillon sur l’autre . 4
5.4 Stabilité . 6
5.5 Fidélité . 7
6 Méthode alternative utilisée comme estimation de la méthode de référence.7
6.1 Évaluation des facteurs affectant l’estimation . 8
6.2 Protocole d’essai . 8
6.3 Calculs . 8
6.4 Caractéristiques de la méthode alternative exprimées dans les unités de la méthode
de référence .11
7 Évaluation des caractéristiques obtenues .12
Annexe A (informative) Expression des paramètres de fidélité .13
Bibliographie .15
© ISO et FIL 2013 – Tous droits réservés iii

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 16297:2013(F)
FIL 161:2013(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne
la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives
ISO/CEI, Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d’élaborer les Normes internationales. Les projets de
Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote.
Leur publication comme Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des comités
membres votants.
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de
ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L’ISO 16297|FIL 161 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité
SC 5, Lait et produits laitiers et par la Fédération internationale du lait (FIL). Elle est publiée conjointement
par l’ISO et la FIL.
iv © ISO et FIL 2013 – Tous droits réservés

---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 16297:2013(F)
FIL 161:2013(F)
Avant-propos
La FIL (Fédération internationale du lait) est une organisation sans but lucratif représentant le
secteur laitier mondial. Les membres de la FIL se composent des comités nationaux dans chaque pays
membre et des associations laitières régionales avec lesquelles la FIL a signé des accords de coopération.
Tout membre de la FIL a le droit de faire partie des comités permanents de la FIL auxquels sont confiés
les travaux techniques. La FIL collabore avec l’ISO pour l’élaboration de méthodes normalisées d’analyse
et d’échantillonnage du lait et des produits laitiers.
La tâche principale des comités permanents est d’élaborer des Normes internationales. Les projets
de Normes internationales adoptés par les comités permanents sont soumis aux comités nationaux
pour approbation avant publication en tant que Norme internationale. La publication comme Norme
internationale requiert l’approbation de 50 % au moins des comités nationaux de la FIL votants.
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. La FIL ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L’ISO 16297|FIL 161 a été élaborée par la Fédération internationale du lait (FIL) et le comité technique
ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 5, Lait et produits laitiers. Elle est publiée conjointement
par la FIL et l’ISO.
L’ensemble des travaux a été confié à l’équipe d’action mixte ISO-FIL (S07) du comité permanent chargé
des Statistiques et l’automatisation, sous la conduite de son chef de projet, Mme. I. Andersson (SE).
Cette première édition de l’ISO 16297|FIL 161 annule et remplace la FIL 161A:1995, qui a fait l’objet d’une
révision technique.
© ISO et FIL 2013 – Tous droits réservés v

---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 16297:2013(F)
FIL 161:2013(F)
Introduction
En microbiologie, il convient que tout mesurage quantitatif tienne compte du fait que l’état microbiologique
dans un échantillon exige d’être considéré comme un point parmi les coordonnées d’un système
multidimensionnel, qui doit être projeté sur l’échelle unidimensionnelle de la méthode appliquée, c’est-à-
dire le dénombrement sur boîte, la cytométrie de flux. Les aspects tels que la flore (types et nombres de
micro-organismes ainsi que leur distribution), la phase de croissance, les dommages sublétaux, l’activité
et l’histoire métaboliques, influencent à un degré plus ou moins élevé tout paramètre mesuré. Il est
évident que toute projection d’une situation n-dimensionnelle sur une échelle unidimensionnelle est
une représentation plutôt limitée de la situation réelle. À cet égard, il faut s’incliner devant l’inévitable,
quelle que soit la méthode de mesure préférée.
Dans la présente Norme internationale, la méthode de référence (ou officielle ou d’ancrage) désigne une
méthode internationalement reconnue par les experts, utilisée dans la législation ou dans le cadre d’un
accord entre les parties. Il est exigé que l’évaluation d’une méthode alternative se réfère à la méthode de
référence et repose sur l’examen d’échantillons appropriés à l’usage prévu.
vi © ISO et FIL 2013 – Tous droits réservés

---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 16297:2013(F)
NORME INTERNATIONALE
FIL 161:2013(F)
Lait — Dénombrement bactérien — Protocole pour
l’évaluation des méthodes alternatives
1 Domaine d’application
La présente Norme internationale donne des lignes directrices pour l’évaluation de méthodes
instrumentales alternatives pour le dénombrement de la flore totale dans le lait cru provenant d’animaux
de différentes espèces.
NOTE La présente Norme internationale est considérée comme complémentaire à l’ISO 16140 et
l’ISO 8196|FIL 128 (voir l’Article 2 et la Référence [1]).
2 Références normatives
Les documents de référence ci-après sont indispensables à l’application du présent document. Pour les
références datées, seule l’édition citée s’applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document de référence s’applique (y compris les éventuels amendements).
ISO 5725-1, Exactitude (justesse et fidélité) des résultats et méthodes de mesure — Partie 1: Principes
généraux et définitions
ISO 5725-2, Exactitude (justesse et fidélité) des résultats et méthodes de mesure — Partie 2: Méthode de
base pour la détermination de la répétabilité et de la reproductibilité d’une méthode de mesure normalisée
ISO 8196-1|FIL 128-1, Lait — Définition et évaluation de la précision globale des méthodes alternatives
d’analyse du lait — Partie 1: Attributs analytiques des méthodes alternatives
ISO 8196-2|FIL 128-2, Lait — Définition et évaluation de la précision globale des méthodes alternatives
d’analyse du lait — Partie 2: Calibrage et contrôle qualité dans les laboratoires laitiers
ISO 16140-1, Microbiologie des aliments - Validation des méthodes — Partie 1: Vocabulaire
ISO 16140-2, Microbiologie des aliments — Validation des méthodes — Partie 2: Protocole pour la validation
de méthodes alternatives (brevetées) par rapport à une méthode de référence
ISO 21187|FIL 196:2004, Lait — Mesure quantitative de la qualité bactériologique — Lignes directrices
pour établir et vérifier une relation de conversion entre les résultats de la méthode de routine et les résultats
de la méthode d’ancrage
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions donnés dans l’ISO 8196-1|FIL 128-1 et
dans l’ISO 8196-2|FIL 128-2 s’appliquent.
Pour les définitions de la fidélité, de la répétabilité et de la reproductibilité, voir l’ISO 5725-1, l’ISO 5725-2,
l’ISO 8196-1|FIL 128-1 et l’ISO 16140-1.
4 Transformation des résultats
Un préalable aux traitements statistiques le plus couramment utilisé en évaluation de méthodes de mesure
est que la distribution des données soit assimilable à une loi normale. La multiplication exponentielle des
micro-organismes entraîne généralement une distribution dissymétrique vers la droite des paramètres
microbiologiques quantitatifs. Ainsi, une transformation des données brutes est en général nécessaire
pour l’obtention d’une population normale. Il s’agit habituellement d’une transformation logarithmique
© ISO et FIL 2013 – Tous droits réservés 1

---------------------- Page: 7 ----------------------
ISO 16297:2013(F)
FIL 161:2013(F)
décimale ou d’une transformation racine carrée pour les faibles taux de bactéries. La transformation
la plus adaptée peut être contrôlée en comparant les histogrammes. Sauf indication contraire, toutes
les statistiques sont ensuite calculées à partir des données transformées et seuls les résultats finaux
sont retransformés pour donner une idée plus réaliste de la situation à l’utilisateur (voir également
l’Annexe A).
5 Caractéristiques d’une méthode alternative
NOTE Les paramètres indiqués dans le présent article n’ont pas besoin d’être évalués intégralement pour
chaque méthode alternative. Par exemple, la plage de mesure (voir 5.2) de la méthode de l’anse calibrée est
déterminée par l’anse ou (les anses) utilisée(s).
5.1 Description de la méthode à évaluer
5.1.1 Description
La description de la méthode à l’étude doit être conforme à la liste de contrôle donnée en 5.1.2.
La majorité des informations figure dans la spécification de la méthode donnée par le fournisseur
responsable ou par toute autre source (auteur) de la technique spécifiée.
5.1.2 Liste de contrôle
a) Principe de la méthode.
b) Paramètre ou unité.
c) Conception technique du mode opératoire de mesure.
d) Domaine d’application:
1) objectif: par exemple recherche, criblage, classement du lait;
2) matrice: par exemple lait cru de vaches.
e) Fournisseur(s) de l’appareil, des réactifs, des étalons.
f) Spécification de la méthode donnée par le producteur ou l’auteur:
1) préalables à l’échantillonnage (souvent comparés au cas de l’analyse de la matière grasse);
2) possibilités de conservation de l’échantillon [réactif(s), condition(s) de stockage];
3) aspect quantitatif (unités: méthode à l’étude ou méthode de référence) et qualitatif (type de
micro-organismes concernés) de la méthode;
4) fidélité (dans les unités de la méthode à l’étude ou méthode de référence);
5) précision de l’estimation (dans les unités de la méthode de référence);
6) échantillons par heure;
7) liste des références.
5.2 Plage de mesure
5.2.1 Limite inférieure de quantification
La limite inférieure de quantification est définie comme étant la moyenne du lait sans bactérie plus
n-fois son écart-type; en général, n = 10. Voir également l’ISO 16140-2.
2 © ISO et FIL 2013 – Tous droits réservés

---------------------- Page: 8 ----------------------
ISO 16297:2013(F)
FIL 161:2013(F)
Analyser le lait sans bactérie ou ayant une très faible concentration en bactéries. Transformer les
données en calculant la racine carrée à partir de chaque résultat. Calculer la moyenne, x , et l’écart-
type, s, des résultats transformés. Calculer la limite inférieure de quantification sous la forme xn+ s .
5.2.2 Limite supérieure de quantification
La limite supérieure de quantification est déterminée par le résultat de mesure le plus élevé permis par
la méthode ou par des limites méthodologiques, par exemple les effets de coïncidence, l’imprécision dans
la partie supérieure de la plage, le colmatage des filtres. La coïncidence a lieu lorsque deux éléments ou
plus du mesurande sont détectés simultanément et identifiés comme étant une seule unité. Par exemple,
avec la cytométrie de flux, si deux cellules bactériennes traversent en même temps le détecteur, elles
sont détectées comme étant une seule unité. L’effet de coïncidence est supérieur avec des concentrations
plus élevées d’un mesurande.
La limite supérieure de quantification est déterminée comme étant la concentration maximale à laquelle
l’instrument reste linéaire, conformément à 5.2.3.
5.2.3 Linéarité du signal de l’appareil
La relation entre les lectures de l’instrument et les valeurs attendues doit être linéaire dans la gamme de
dénombrements bactériens concernée. Tout écart à la linéarité peut provenir de signaux non spécifiques
et d’effets de coïncidence.
Un contrôle de la linéarité est d’abord effectué visuellement en utilisant des graphiques appropriés pour
avoir une première impression du caractère de la relation. Dès qu’un écart à la linéarité apparaît de façon
évidente, un paramètre quantitatif est calculé pour indiquer si la tendance observée est acceptable ou non.
Pour cela, utiliser un lait ayant des dénombrements bactériens élevés et dilué en série avec du lait à
faible dénombrement bactérien, ce qui permet d’obtenir un jeu d’au moins 10 échantillons représentant
la gamme de concentration concernée.
Mesurer tous les échantillons au moins quatre fois et calculer le résultat moyen pour chaque échantillon.
Cela donne la valeur mesurée par échantillon. Utiliser les valeurs mesurées pour le lait à dénombrement
élevé et le lait à faible dénombrement pour calculer les valeurs pour les échantillons intermédiaires à
partir des rapports de mélange appliqués. Cela donne une valeur attendue pour chaque échantillon.
Appliquer ensuite la régression linéaire avec les valeurs attendues pour chaque échantillon, C , sur
e
l’axe des abscisses et avec les valeurs mesurées pour chaque échantillon, C sur l’axe des ordonnées.
meas,
Calculer les valeurs résiduelles ΔC = C , – (a × C , + b) à partir de la régression. Représenter
1i meas i e i
graphiquement les valeurs résiduelles ΔC sur l’axe des ordonnées en fonction des valeurs attendues C
1i e
sur l’axe des abscisses. En général, une observation visuelle des points de données fournit suffisamment
d’informations sur la linéarité du signal. Il convient que toute valeur résiduelle aberrante entraîne la
suppression du résultat associé et le renouvellement du calcul.
La courbure peut être exprimée par le rapport, r , à l’aide de la Formule (1):
L
Δ−CCΔ
()
maxmin
r = ×100 (1)
L
CC−
()
meas,max meas,min
où
ΔC est la valeur résiduelle maximale à partir de la régression;
max
ΔC est la valeur résiduelle minimale à partir de la régression;
min
C est la valeur mesurée pour le lait à dénombrement élevé;
meas, max
C est la valeur mesurée pour le lait à faible dénombrement.
meas, min
© ISO et FIL 2013 – Tous droits réservés 3

---------------------- Page: 9 ----------------------
ISO 16297:2013(F)
FIL 161:2013(F)
Le rapport, r , doit être inférieur à 5 %.
L
NOTE Pour évaluer la linéarité, utiliser les données brutes exprimées dans les unités de la méthode de routine
sans transformation logarithmique ou autre.
5.3 Contamination d’un échantillon sur l’autre
Des effets de contamination d’un échantillon sur l’autre peuvent se produire dans les systèmes
analytiques fonctionnant en continu. Ils sont la conséquence du transfert d’une certaine partie du
matériau échantillonné d’un échantillon pour essai vers l’échantillon ou (les échantillons) suivant(s).
En raison de la conception d’un processus d’analyse automatisé, non seulement l’échantillon suivant,
mais également les échantillons en position ultérieure peuvent être influencés, en raison des puits
d’incubation à circulation périodique.
Cet effet peut être mesuré en analysant consécutivement du lait à dénombrement bactérien élevé et des
blancs. La contamination d’un échantillon sur l’autre provoque une augmentation des valeurs des blancs
par comparaison à la valeur normale des blancs (valeur des blancs analysés après un autre blanc).
La contamination d’un échantillon sur l’autre peut être exprimée en pourcentage de l’échantillon de lait
précédent correspondant.
Pour évaluer la contamination d’un échantillon sur l’autre, il convient que le nombre d’échantillons
et le dénombrement bactérien des échantillons de lait soient suffisamment élevés pour estimer la
contamination d’un échantillon sur l’autre avec une certitude suffisante. Il convient que les échantillons
soient représentatifs des échantillons de routine, notamment en ce qui concerne la durée de conservation
(durée de conservation plus longue, ce qui donne une viscosité plus élevée du lait et une contamination
d’un échantillon sur l’autre potentiellement plus élevée). L’exemple suivant décrit une manière d’effectuer
l’essai. Pour les aspects détaillés et théoriques ainsi que pour les autres paramètres d’estimation de la
[1]
contamination d’un échantillon sur l’autre, il est fait référence à l’ISO 8196-3|FIL 128-3 .
À titre d’exemple, une façon d’estimer l’effet de contamination d’un échantillon sur l’autre consiste à
analyser au moins dix jeux d’échantillons contenant chacun un échantillon de lait à dénombrement
bactérien très élevé puis deux blancs. Les blancs peuvent être de l’eau ou du lait ayant un dénombrement
bactérien négligeab
...