ISO 14378:2000

Milk and dried milk — Determination of iodide content — Method using high-performance liquid chromatography

Lait et lait en poudre — Détermination de la teneur en iodure — Méthode par chromatographie en phase liquide à haute performance

General Information

• Status: Withdrawn
• Publication Date: 14-Jun-2000
• Withdrawal Date: 14-Jun-2000
• ICS: 67.100.10 - Milk and processed milk products
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 5 - Milk and milk products
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 5 - Milk and milk products
• Current Stage: 9599 - Withdrawal of International Standard
• Completion Date: 24-Sep-2009

Relations

• Revised: ISO 14378:2009 - Milk and dried milk — Determination of iodide content — Method using high-performance liquid chromatography
• Effective Date: 28-Feb-2009

Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 14378
First edition
2000-06-01
Milk and dried milk — Determination
of iodide content — Method using
high-performance liquid chromatography
Lait et lait en poudre — Détermination de la teneur en iodure — Méthode
par chromatographie en phase liquide à haute performance
Reference number
ISO 14378:2000(E)
©
ISO 2000

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ISO 14378:2000(E)
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ISO 14378:2000(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies (ISO
member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO technical
committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and non-governmental, in
liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical
Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 3.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting.
Publication as an International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this International Standard may be the subject of
patent rights other than those identified above. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such
patent rights.
International Standard ISO 14378 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Agricultural food products,
Subcommittee SC 5, Milk and milk products, in collaboration with the International Dairy Federation (IDF) and
AOAC International, and will also be published by these organizations.
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 14378:2000(E)
Milk and dried milk — Determination of iodide content —
Method using high-performance liquid chromatography
WARNING — The use of this International Standard may involve hazardous materials, operations and
equipment. This standard does not purport to address all the safety problems associated with its use. It is
the responsibility of the user of this standard to establish safety and health practices and determine the
applicability of regulatory limitations prior to use.
1 Scope
This International Standard specifies a high-performance liquid chromatographic (HPLC) method for the
determination of the iodide content of pasteurized whole milk and dried skim milk, when present at levels from
0,03�g/gto1�g/g and 0,3�g/g to 10,0�g/g respectively.
NOTE 1 The method has been collaboratively studied with samples of liquid whole milk and dried skim milk. There are no
reasons to expect that the method would not be applicable to skimmed or partially skimmed milk as well as to dried whole milk.
NOTE 2 The method measures free (ionic) iodide. However, the total iodide content of fresh milk and good quality milk
powder, in which no microbial growth has occurred, may contain a mass fraction of 5 % to 10 % of organically bound iodide.
More iodide might be bound organically in milk where microbiological deterioration has been occurred.
2 Normative reference
The following normative document contains provisions which, through reference in this text, constitute provisions of
this International Standard. For dated references, subsequent amendments to, or revisions of, this publication do
not apply. However, parties to agreements based on this International Standard are encouraged to investigate the
possibility of applying the most recent edition of the normative document indicated below. For undated references,
the latest edition of the normative document referred to applies. Members of ISO and IEC maintain registers of
currently valid International Standards.
ISO 3696, Water for analytical laboratory use — Specification and test methods.
3 Term and definition
For the purposes of this International Standard, the following term and definition applies.
3.1
iodide content of pasteurized whole milk or dried skim milk
mass fraction of substances determined by the procedure specified in this International Standard
NOTE The iodide content is conventionally expressed in micrograms per gram.
4Principle
A test portion is diluted with water. Insoluble and high-molecular-mass material is removed by filtration through a
25 000 D cut-off membrane. Iodide ions are separated by reverse-phase ion-pair HPLC with an electrochemical
detector and a silver working electrode at 0 mV to 50 mV. The iodide content is calculated by means of a
calibration graph.
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ISO 14378:2000(E)
5 Reagents
Use only reagents of recognized analytical grade or, if appropriate, of special HPLC grade.
5.1 Water, complying with grade 2 of ISO 3696.
5.2 Iodide standard solutions
WARNING: Aqueous solutions of iodides are unstable when exposed to light and shall be protected from
light.
5.2.1 Iodide stock solution, corresponding to 100 mg of iodide per litre.
Dissolve 130,8 mg of potassium iodide (KI) in water in a 1 000 ml one-mark volumetric flask (6.2). Dilute to the
mark with water and mix.
The iodide stock solution may be kept for 1 month if stored in the dark at room temperature.
5.2.2 Iodide working standard solutions, corresponding to 20�g, 50�g, 150�g and 250�g of iodide per litre
respectively.
Pipette 20�l, 50�l, 150�l and 250�l of the iodide stock solution (5.2.1) into four separate 100 ml one-mark
volumetric flasks (6.2). Dilute each solution to the mark with water and mix.
The iodide working standard solutions may be kept for 1 week if stored in the dark at room temperature.
5.3 Acetonitrile (CH CN), HPLC grade.
3
5.4 Hexadecyltrimethylammonium chloride solution [CH (CH ) N(CH ) Cl], 25 % (by mass) solution in water,
3 2 15 3 3
ion-pair chromatography grade.
5.5 HPLC eluent: mixture of disodium hydrogen phosphate and hexadecyltrimethylammonium chloride in a
mixture of acetonitrile and water (68:32 by volume), pH = 6,8.
Dissolve 1,42 g of disodium hydrogen phosphate (Na HPO ) in about 600 ml of water in a 1 000 ml one-mark
2 4
volumetric flask (6.2). Add 1,3 ml of hexadecyltrimethylammonium chloride solution (5.4) and mix well. Then add
320 ml of acetonitrile (5.3) and mix again. Adjust the pH to 6,8 with concentrated orthophosphoric acid (H PO ).
3 4
Dilute to the mark with water and mix well.
Clarify the solution by filtering first through a 1,2�m membrane filter and then through a 0,5�m membrane filter.
Swirl the solution to mix it and simultaneously degas by means of a vacuum or sonification for 2 min before initial
use. The eluent can be modified by the addition of small amounts of water or acetonitrile to achieve minor
adjustments in the retention time of iodide. The eluent may be kept for 1 year, if stored in a tightly closed container.
5.6 n-Pentanol
6 Apparatus
Usual laboratory equipment and, in particular, the following.
6.1 Analytical balance, capable of weighing to the nearest 0,01 g, with a readability of three decimal places.
6.2 One-mark volumetric flasks, of capacities 100 ml and 1 000 ml.
6.3 Micropipettes, capable of delivering 20�l, 50�l, 150�l and 250�l, respectively.
6.4 Graduated pipette, of capacity 2 ml, with 0,1 ml graduations.
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ISO 14378:2000(E)
6.5 Graduated cylinder, of capacity 500 ml.
6.6 pH-meter, with combined glass electrode.
1�
6.7 Membrane filters,1,2�mand0,5�m, Nylon-6-6 , or equivalent, with filter equipment to clarify HPLC eluent.
6.8 Centrifuge, capable of holding 50 ml centrifuge tubes and capable of producing a radial acceleration of
1 000 g.
6.9 Centrifuge tubes, of capacity 50 ml, internal diameter 27 mm, conical, made of disposable plastic, with screw
caps.
6.10 Conical membrane supports, to support membrane filter cone (6.11) in centrifuge tubes (6.9) (Amicon
1�
CS1A , or equivalent).
1�
6.11 Membrane filter cones, 25 000 D to 30 000 D cut-off (Amicon Centreflo CF-25, or equivalent).
Prepare new membrane filter cones before use as follows. Soak in a mixture of ethanol and water (2:8 by volume)
for 1 h. Remove the cone and drain. Mount it in a conical membrane support (6.10) and place it in a 50 ml
centrifuge tube. Centrifuge the cone at a radial acceleration of 900 g to1000 g for5minto10min.
Invert the new membrane filter cone to drain any remaining solvent. Place the prepared cones into supports in
clean, labelled centrifuge tubes (6.9) for sample analysis. After each use, soak the cones immediately in hot water,
flush well with hot water and store them in a mixture of ethanol and water (1:5 by volume). Remove the solvent
before the next use of the cones as described above for new cones.
1�
NOTE Al
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 14378
Première édition
2000-06-01
Lait et lait en poudre — Détermination
de la teneur en iodure — Méthode
par chromatographie en phase liquide
à haute performance
Milk and dried milk — Determination of iodide content — Method using
high-performance liquid chromatography
Numéro de référence
ISO 14378:2000(F)
©
ISO 2000

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ISO 14378:2000(F)
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ISO 14378:2000(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales, en
liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec la Commission
électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI, Partie 3.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour
vote. Leur publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités
membres votants.
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments de la présente Norme internationale peuvent faire
l’objet de droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de
ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
La Norme internationale ISO 14378 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits agricoles
alimentaires, sous-comité SC 5, Lait et produits laitiers, en collaboration avec la Fédération internationale de
laiterie (FIL) et l’AOAC International (Association des chimistes analytiques officiels); elle sera également publiée
par ces deux organisations.
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NORME INTERNATIONALE ISO 14378:2000(F)
Lait et lait en poudre — Détermination de la teneur en iodure —
Méthode par chromatographie en phase liquide à haute
performance
AVERTISSEMENT — L’utilisation de la présente Norme internationale peut impliquer l’emploi de produits,
d’opérations et d’équipements à caractère dangereux. La présente Norme internationale ne prétend pas
aborder tous les problèmes de sécurité qui sont, le cas échéant, liés à son utilisation. Il incombe à
l’utilisateur d’établir des pratiques appropriées en matière d’hygiène et de sécurité, et de s’assurer du
respect de la réglementation nationale en vigueur.
1 Domaine d'application
La présente Norme Internationale spécifie une méthode par chromatographie liquide à haute performance (CLHP)
pour déterminer la teneur en iodure du lait entier pasteurisé et du lait écrémé en poudre, lorsque ce composé est
présent à des niveaux compris entre 0,03 μg/g et 1 μg/g et entre 0,3 μg/g et 10,0 μg/g respectivement.
NOTE 1 Cette méthode a fait l'objet d'une étude interlaboratoires effectuée avec des échantillons de lait entier liquide et de
lait écrémé en poudre. Il n'y a pas de raison de supposer que la méthode ne pourrait pas s'appliquer au lait écrémé ou
partiellement écrémé aussi bien qu'au lait entier en poudre.
NOTE 2 Cette méthode mesure l’iodure libre (ionique). Toutefois, la teneur totale d’iodure dans le lait frais et le lait en
poudre de bonne qualité, dans lesquels aucune culture microbienne n’a été décelée, peut comprendre une fraction massique de
5 % à 10 % d’iodure organique lié. La proportion d’iodure organique lié peut être plus élevée dans le lait dans lequel une
détérioration microbiologique a pu être observée.
2 Référence normative
Le document normatif suivant contient des dispositions qui, par suite de la référence qui y est faite, constituent des
dispositions valables pour la présente Norme internationale. Pour les références datées, les amendements
ultérieurs ou les révisions de ces publications ne s’appliquent pas. Toutefois, les parties prenantes aux accords
fondés sur la présente Norme internationale sont invitées à rechercher la possibilité d'appliquer l’édition la plus
récente du document normatif indiqué ci-après. Pour les références non datées, la dernière édition du document
normatif en référence s’applique. Les membres de l'ISO et de la CEI possèdent le registre des Normes
internationales en vigueur.
ISO 3696, Eau pour laboratoire à usage analytique — Spécification et méthodes d’essai.
3 Terme et définition
Pour les besoins de la présente Norme internationale, le terme et la définition suivants s'appliquent.
3.1
teneur en iodure du lait entier pasteurisé ou du lait écrémé en poudre
fraction massique de substances, déterminée par le mode opératoire décrit dans la présente Norme internationale
NOTE Par convention, la teneur en iodure s'exprime en microgrammes par gramme de produit.
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ISO 14378:2000(F)
4Principe
Dilution d'une prise d'essai avec de l'eau. Élimination des composés insolubles et de haut poids moléculaire par
filtration au travers d'une membrane dont le seuil de coupure est de 25 000 D. Séparation de l'iodure par CLHP de
paires d'ions en phase inverse et détection avec un détecteur électrochimique muni d'une électrode en argent
fonctionnant de 0 mV à 50 mV. Les résultats sont représentés quantitativement au moyen d'une courbe
d'étalonnage.
5 Réactifs
Utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique reconnue ou, si nécessaire, de qualité spéciale pour
chromatographie liquide à haute performance (CLHP).
5.1 Eau, conforme au grade 2 de l’ISO 3696.
5.2 Solutions étalons d'iodure
AVERTISSEMENT — Les solutions aqueuses d'iodure exposées à la lumière sont instables et doivent, par
conséquent, être protégées de la lumière.
5.2.1 Solution mère d'iodure, correspondant à 100 mg d'iodure par litre.
Dans une fiole jaugée de 1 000 ml (6.2), dissoudre 130,8 mg d'iodure de potassium (KI) dans de l'eau. Compléter
au trait de jauge avec de l'eau et mélanger.
Cette solution peut être conservée pendant 1 mois si elle est entreposée à température ambiante et à l'abri de la
lumière.
5.2.2 Solutions de travail d'iodure, correspondant à 20 μg, 50 μg, 150 μg et 250 μg d'iodure par litre
respectivement.
Dans quatre fioles jaugées de 100 ml (6.2), pipetter respectivement 20 μl, 50 μl, 150 μl et 250 μl de la solution
mère d'iodure (5.2.1). Dans chaque fiole, ajuster au trait de jauge avec de l'eau et mélanger.
Ces solutions peuvent être conservées pendant 1 semaine si elles sont entreposées à température ambiante et à
l'abri de la lumière.
5.3 Acétonitrile (CH CN), pour chromatographie CLHP.
3
5.4 Chlorure d'hexadécyltriméthylammonium [CH (CH ) N(CH ) Cl)], solution aqueuse à 25 % (en masse)
3 2 15 3 3
pour chromatographie de paires d'ions.
5.5 Éluant CLHP: mélange d’hydrogénophosphate disodique et de chlorure d'hexadécyltriméthylammonium en
solution dans un mélange eau/acétonitrile (68:32 en volume), pH = 6,8.
Dans une fiole jaugée de 1 000 ml, dissoudre 1,42 g d'hydrogénophosphate disodique (Na HPO ) dans environ
2 4
600 ml d'eau. Ajouter 1,3 ml de la solution de chlorure d'hexadécyltriméthylammonium (5.4) et bien mélanger. Puis
ajouter 320 ml d'acétonitrile (5.3) et mélanger à nouveau. Ajuster le pH à 6,8 avec de l'acide phosphorique (H PO )
3 4
concentré. Compléter au trait de jauge avec de l'eau et bien mélanger.
Clarifier la solution en filtrant d'abord sur une membrane de filtration de 1,2 μm, puis sur une membrane de filtration
de 0,5 μm. Faire tourner la solution pour la mélanger et, simultanément, la dégazer par évacuation ou sonification
pendant 2 min avant la première utilisation. L'éluant peut être modifié par addition de petites quantités d'eau ou
d'acétonitrile pour effectuer de petits ajustements du temps de rétention de l'iodure. S'il est entreposé dans un
récipient hermétique, l'éluant peut se conserver pendant 1 an.
5.6 n-Pentanol.
2 © ISO 2000 – Tous droits réservés

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ISO 14378:2000(F)
6 Appareillage
Matériel courant de laboratoire et, en particulier, ce qui suit.
6.1 Balance analytique, précise à 0,01 g près, avec une lecture à trois décimales.
6.2 Fioles jaugées à un trait, de 100 ml et 1 000 ml de capacité.
6.3 Micropipettes, permettant de délivrer 20 μl, 50 μl, 150 μl et 250 μl respectivement.
6.4 Pipette graduée, de 2 ml de capacité, avec graduations de 0,1 ml.
6.5 Éprouvette graduée, de 500 ml de capacité.
6.6 pH-mètre, avec électrode combinée en verre.
1)
6.7 Membranes de filtration de 1,2 μm et 0,5 μm, Nylon 6-6 ou équivalent, avec un équipement de filtration
pour clarifier l'éluant CLHP.
6.8 Centrifugeuse, pouvant contenir des tubes à centrifuger de 50 ml et produire une force centrifuge de
1 000 g.
6.9 Tubes à centrifuger, de 50 ml de capacité et de 27 mm de diamètre intérieur, coniques, en matière
plastique jetable, munis de bouchons vissables.
6.10 Supports de membranes coniques, pour soutenir les membranes coniques (6.11) dans les tubes à
1)
centrifuger (6.9) (Amicon CS1A ou équivalent).
1)
6.11 Membranes de filtration coniques, de seuil de coupure de 25 000 D à 30 000 D (Amicon Centreflo CF-25
ou équivalent).
Avant utilisation, préparer de nouvelles membranes coniques de la façon suivante. Faire tremper dans un mélange
d'éthanol et d'eau (2:8 en volume) pendant 1 h. Retirer le cône et l’égoutter. Le monter sur un support (6.10) et le
placer dans un tube à centrifuger de 50 ml. Centrifuger le cône pendant 5 min à 10 min, entre 900 g et 1 000 g.
Retourner le cône pour égoutter tout résidu de solvant. Mettre les cônes ainsi préparés sur des supports dans des
tubes à centrifuger (6.9) propres et étiquetés en vue de l'analyse des échantillons. Après chaque utilisation,
tremper les cônes immédiatement dans de l'eau chaude, bien rincer à l'eau chaude et conserver dans un mélange
d’éthanol et d’eau (1:5 en volume). Éliminer le solvant avant toute nouvelle utilisation comme décrit ci-dessus pour
les cônes neufs.
1)
NOTE On peut aussi employer des unités de filtration Millipore Ultrafre-PF
...