ISO 6888-1:1999/Amd 1:2003
(Amendment)Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for the enumeration of coagulase-positive staphylococci (Staphylococcus aureus and other species) — Part 1: Technique using Baird-Parker agar medium — Amendment 1: Inclusion of precision data
Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for the enumeration of coagulase-positive staphylococci (Staphylococcus aureus and other species) — Part 1: Technique using Baird-Parker agar medium — Amendment 1: Inclusion of precision data
Microbiologie des aliments — Méthode horizontale pour le dénombrement des staphylocoques à coagulase positive (Staphylococcus aureus et autres espèces) — Partie 1: Technique utilisant le milieu gélosé de Baird-Parker — Amendement 1: Inclusion des données de fidélité
General Information
Relations
Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 6888-1
First edition
1999-02-15
AMENDMENT 1
2003-07-01
Microbiology of food and animal feeding
stuffs — Horizontal method for the
enumeration of coagulase-positive
staphylococci (Staphylococcus aureus
and other species) —
Part 1:
Technique using Baird-Parker agar
medium
AMENDMENT 1: Inclusion of precision data
Microbiologie des aliments — Méthode horizontale pour le
dénombrement des staphylocoques à coagulase positive
(Staphylococcus aureus et autres espèces) —
Partie 1: Technique utilisant le milieu gélosé de Baird-Parker
AMENDEMENT 1: Inclusion des données de fidélité
Reference number
ISO 6888-1:1999/Amd.1:2003(E)
©
ISO 2003
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ISO 6888-1:1999/Amd.1:2003(E)
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ISO 6888-1:1999/Amd.1:2003(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
Amendment 1 to ISO 6888-1:1999 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products,
Subcommittee SC 9, Microbiology.
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ISO 6888-1:1999/Amd.1:2003(E)
Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal
method for the enumeration of coagulase-positive
staphylococci (Staphylococcus aureus and other species) —
Part 1:
Technique using Baird-Parker agar medium
AMENDMENT 1: Inclusion of precision data
Page iv
Introduction, Subclause 0.2
Replace part of the second paragraph by the following text.
“Both parts of ISO 6888 are given equivalent status. Nevertheless, it is recommended to use the procedure
described in ISO 6888-2 (see reference [1]) for the foods (such as cheeses made from raw milk and certain
raw meat products) likely to be contaminated by:”
Page 6
Subclause 9.4.1
Replace Note 1 and Note 2 by the following text.
“NOTE 1 Typical colonies are black or grey, shining and convex (1 mm to 1,5 mm in diameter after incubation for 24 h,
and 1,5 mm to 2,5 mm in diameter after incubation for 48 h) and are surrounded by a clear zone which may be partially
opaque. After incubation for at least 24 h, an opalescent ring immediately in contact with the colonies may appear in this
clear zone.
NOTE 2 Atypical colonies have the same size as typical colonies and may present one of the following morphologies:
shining black colonies with or without a narrow white edge; the clear zone is absent or barely visible and the
opalescent ring is absent or hardly visible;
grey colonies free of clear zone.
Atypical colonies are formed mainly by strains of coagulase-positive staphylococci contaminating, for example, dairy
products, shrimps and giblets. They are less often formed by strains of coagulase-positive staphylococci contaminating
other products.
NOTE 3 Other colonies are all the remaining colonies possibly present on the plates that do not show the typical or
atypical appearance described in Notes 1 and 2, and are considered as the background flora.”
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ISO 6888-1:1999/Amd.1:2003(E)
Page 10
Replace Clause 11 by the following text.
11 Precision
11.1 General
The precision of quantitative methods can be expressed in terms of repeatability and reproducibility, as
defined in ISO 5725-2. However, the method of calculation used in ISO 5725-2, based on the mean, is not
always appropriate for microbiological analyses, which do not always show a normal (Gaussian) distribution.
Therefore ISO 16140, which has been especially developed for microbiological methods and which uses
robust estimators for calculating repeatability and reproducibility, has been followed. These statistics have the
advantage of being less sensitive to extreme values, thus permitting outliers by statistical tests to be retained.
These estimators are therefore used in this part of ISO 6888.
Details of an interlaboratory test on the precision of the method are summarized in Annex A. The values
derived from this interlaboratory test may not be applicable to concentration ranges and matrices other than
those given. Precision data were determined using three types of food contaminated at various levels and for
reference materials. Factors such as the strain considered, the competitive flora and the physiological status
of target and competitors have an influence on the precision values.
11.2 Repeatability
11.2.1 Repeatability limit
The absolute difference between two single (log -transformed) test results (number of coagulase-positive
10
staphylococci per gram or per millilitre) or the ratio of the higher to the lower of the two test results on the
normal scale, obtained using the same method on identical test material by the same operator using the same
apparatus within the shortest feasible time interval, will in not more than 5 % of cases be greater than the
repeatability limit (r).
11.2.2 Overall values
As a general indication of the repeatability limit (r), the following values can be used when testing food
samples in general. These values of r are general means for all matrices considered:
r = 0,28 (expressed as an absolute difference between log -transformed test results), or
10
r = 1,9 (expressed as a ratio of the higher to the lower of the two test results on the normal scale).
For reference materials (capsules containing approximately 5 000 CFU, see Annex A), the following values
can be used:
r = 0,19 (expressed as an absolute difference between log -transformed test results), or
10
r = 1,55 (expressed as a ratio of the higher to the lower of the two test results on the normal scale).
4
EXAMPLE A first test result of 10 000 or 1,0 × 10 of coagulase-positive staphylococci per gram of food was
observed
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 6888-1
Première édition
1999-02-15
AMENDEMENT 1
2003-07-01
Microbiologie des aliments — Méthode
horizontale pour le dénombrement des
staphylocoques à coagulase positive
(Staphylococcus aureus et autres
espèces) —
Partie 1:
Technique utilisant le milieu gélosé de
Baird-Parker
AMENDEMENT 1: Inclusion des données de
fidélité
Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for
the enumeration of coagulase-positive staphylococci (Staphylococcus
aureus and other species) —
Part 1: Technique using Baird-Parker agar medium
AMENDMENT 1: Inclusion of precision data
Numéro de référence
ISO 6888-1:1999/Amd.1:2003(F)
©
ISO 2003
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ISO 6888-1:1999/Amd.1:2003(F)
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Publié en Suisse
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Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'Amendement 1 à l'ISO 6888-1:1999 a été élaboré par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires,
sous-comité SC 9, Microbiologie.
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ISO 6888-1:1999/Amd.1:2003(F)
Microbiologie des aliments — Méthode horizontale pour le
dénombrement des staphylocoques à coagulase positive
(Staphylococcus aureus et autres espèces) —
Partie 1:
Technique utilisant le milieu gélosé de Baird-Parker
AMENDEMENT 1: Inclusion des données de fidélité
Page iv
Introduction, Paragraphe 0.2
ème
Remplacer la partie introductive du 2 alinéa par le texte suivant.
«Les deux parties de l'ISO 6888 ont un statut équivalent. Néanmoins, il est recommandé d'utiliser la méthode
spécifiée dans l'ISO 6888-2 (voir la référence [1]) pour les denrées alimentaires (telles que les fromages au
lait cru et certains produits carnés crus) susceptibles d'être contaminées par»
Page 7
Paragraphe 9.4.1
Remplacer la Note 1 et la Note 2 par le texte suivant.
«NOTE 1 Les colonies caractéristiques sont noires ou grises, brillantes et convexes (1 mm à 1,5 mm de diamètre
après 24 h d'incubation et 1,5 mm à 2,5 mm de diamètre après 48 h d'incubation) et sont entourées d'une auréole claire
qui peut être partiellement opaque. Après au moins 24 h d'incubation, un anneau opalescent peut apparaître dans cette
zone claire immédiatement au contact des colonies.
NOTE 2 Les colonies non caractéristiques ont la même taille que les colonies caractéristiques et peuvent présenter
l'une des morphologies suivantes:
colonies noires et brillantes avec ou sans bord blanc étroit; la zone claire et l'anneau opalescent sont absents ou à
peine visibles;
colonies grises dépourvues de zone claire.
Les colonies non caractéristiques sont surtout formées de souches de staphylocoques à coagulase positive contaminant,
par exemple, les produits laitiers, les crevettes et les abats. Ce sont moins souvent des souches de staphylocoques à
coagulase positive qui contaminent les autres produits.
NOTE 3 Les autres colonies sont celles éventuellement présentes sur les boîtes et qui n'ont pas l'apparence décrite
dans les Notes 1 et 2 pour les colonies caractéristiques et non caractéristiques. Ces colonies sont considérées comme
faisant partie de la flore annexe.»
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ISO 6888-1:1999/Amd.1:2003(F)
Page 10
Remplacer l'Article 11 existant par le texte suivant.
11 Fidélité
11.1 Généralités
La fidélité des méthodes quantitatives peut être exprimée en termes de reproductibilité et de répétabilité,
selon les définitions de l'ISO 5725-2. Cependant, les méthodes de calculs utilisées dans l'ISO 5725-2, basées
sur les moyennes, ne sont pas toujours applicables aux analyses microbiologiques dont les résultats ne
montrent pas forcément une distribution normale (Gaussienne). C'est pour cette raison qu'a été utilisé
l'ISO 16140, spécialement appropriée aux méthodes microbiologiques et décrivant des indicateurs de
robustesse pour les calculs de répétabilité et reproductibilité. Ces tests statistiques ont l'avantage d'être moins
sensibles aux valeurs extrêmes et permettent la prise en compte des résultats aberrants. Ce sont ces tests
qui ont été retenus pour les calculs utilisés dans la présente partie de l'ISO 6888.
Les détails concernant un essai interlaboratoires relatif à la fidélité de la méthode sont résumés dans
l'Annexe A. Les valeurs dérivées de cet essai peuvent ne pas être applicables aux plages de concentrations
ou aux matrices autres que celles données. Les données de fidélité ont été déterminées pour trois catégories
d'aliments contaminées à différents niveaux et pour un matériau de référence. Des facteurs, tels que le choix
des souches, la flore compétitive et l'état physiologique du micro-organisme cible et des compétiteurs, sont
susceptibles d'influer sur les données de fidélité.
11.2 Répétabilité
11.2.1 Limite de répétabilité
La différence absolue entre deux résultats d'essai individuels indépendants (transformés en log ) (nombre de
10
staphylocoques à coagulase positive par gramme ou par millilitre) ou le rapport, sur une échelle normale,
entre le plus élevé et le plus bas des deux résultats d'essai obtenus à l'aide de la même méthode sur un
matériau identique soumis à l'essai dans le même laboratoire par le même opérateur utilisant le même
appareillage dans un intervalle de temps le plus court possible, n'excédera que dans 5 % des cas au plus la
limite de répétabilité (r).
11.2.2 Valeurs générales
Les valeurs suivantes pour la limite de répétabilité (r) sont données à titre indicatif et peuvent être utilisées
dans un cadre général d'analyse des aliments. Ces valeurs de r ont été obtenues sur la base de moyennes
calculées pour toutes les matrices de l'étude:
r = 0,28 (exprimé en différence absolue de log entre les résultats d'analyse), ou
10
r = 1,9 (exprimé comme rapport, sur une échelle normale, entre le plus élevé et le plus bas des deux
résultats d'essai).
Concernant le matériau de référence (capsules contenant 5 000 ufc, voir Annexe A), les valeurs suivantes
peuvent être utilisées:
r = 0,19 (exprimé en différence absolue de log entre les résultats d'analyse), ou
10
r = 1,55 (exprimé comme rapport,
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.