Meat and meat products — Enumeration of yeasts and moulds — Colony-count technique

Describes a method for the enumeration of yeasts and moulds of meat and meat products, including poultry, by means of the colony-count technique after aerobic incubation between 20 ° and 25 °C for 3, 4 or 5 days.

Viandes et produits à base de viande — Dénombrement des levures et moisissures — Technique par comptage des colonies

La présente Norme internationale prescrit une méthode pour le dénombrement des levures et moisissures dans tous les types de viandes et produits à base de viande, par comptage des colonies entre 20 °C et 25 °C. IMPORTANT -- L'ISO 7954, recommande l'emploi du chloramphénicol ou de l'oxytétracycline comme antibiotiques. Toutefois, ces antibiotiques ne permettent pas d'inhiber suffisamment les micro-organismes Gram-négatifs pouvant être trouvés dans les viandes et notamment les viandes crues. Afin de permettre une mise en évidence suffisante dans les cas où la contamination bactérienne est importante, il est nécessaire d'ajouter de la gentamicine. Étant donné que le chloramphénicol et la gentamicine, en combinaison, empêchent le développement de certains types de levure 116s, l'antibiotique qui est préconisé en variante, c'est-à-dire l'oxytétracycline est à retenir.

General Information

Status
Withdrawn
Publication Date
13-Dec-1995
Withdrawal Date
13-Dec-1995
Technical Committee
Current Stage
9599 - Withdrawal of International Standard
Completion Date
01-Jul-2008
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ISO 13681:1995 - Meat and meat products -- Enumeration of yeasts and moulds -- Colony-count technique
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ISO 13681:1995 - Viandes et produits a base de viande -- Dénombrement des levures et moisissures -- Technique par comptage des colonies
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Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL
IS0
STANDARD
13681
First edition
1995-12-15
Meat and meat products - Enumeration
of yeasts and moulds - Colony-count
technique
Viandes et produits 2 base de viande - Dhnombrement des levures et
moisissures - Technique par comptage des colonies
Reference number
IS0 13681:1995(E)

---------------------- Page: 1 ----------------------
IS0 13681:1995(E)
Foreword
IS0 (the International Organization for Standardization) is a worldwide
federation of national standards bodies (IS0 member bodies). The work
of preparing International Standards is normally carried out through IS0
technical committees. Each member body interested in a subject for
which a technical committee has been established has the right to be
represented on that committee. International organizations, governmental
and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. IS0
collaborates closely with the International Electrotechnical Commission
(IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
Draft International Standards adopted by the technical committees are
circulated to the member bodies for voting. Publication as an International
Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting
a vote.
International Standard IS0 13681 was prepared by Technical Committee
ISOnC 34, Agricultural food products, Subcommittee SC 6, Meat and
meat products.
Annex A forms an integral part of this International Standard. Annex B is
for information only.
0 IS0 1995
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced
or utilized in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying and
microfilm, without permission in writing from the publisher.
International Organization for Standardization
Case Postale 56 l CH-1211 Gen&e 20 l Switzerland
Printed in Switzerland
ii

---------------------- Page: 2 ----------------------
IS0 13681:1995(E)
INTERNATIONAL STANDARD 0 ISO
Meat and meat products - Enumeration of yeasts and
moulds - Colony-count technique
IS0 7218: -I) Microbiology of food and animal feed-
1 Scope
ing stuffs - ’ General rules for microbiological exam-
ina tions.
This International Standard specifies a method for the
enumeration of yeasts and moulds in all kinds of meat
and meat products,, including poultry, by means of a
3 Definition
colony-count technique at between 20 “C and 25 “C.
For the purposes of this International Standard, the
IMPORTANT - IS0 7954Cll recommends chloram-
following definition applies.
phenicol or oxytetracycline as antibiotic. These rec-
ommended antibiotics do not, however, sufficiently
3.1 yeasts and moulds: Microorganisms that form
inhibit Gram-negative microorganisms occurring in
colonies within 5 days at between 20 “C and 25 “C
meat, especially raw meat. To obtain sufficient
under the conditions specified in this International
inhibition in cases of heavy bacterial contamination,
Standard.
the addition of gentamicin is necessary. Since a com-
bination of chloramphenicol and gentamicin inhibits
certain types of yeasts, the alternatively specified
4 Principle
antibiotic oxytetracycline is the antibiotic of choice.
4.1 Deep inoculation of poured plates, using a
specified selective culture medium contained in Petri
2 Normative references
dishes, with a specified quantity of the test sample if
the initial product is liquid, or with a specified quantity
The following standards contain provisions which,
of the initial suspension in the case of other products.
through reference in this text, constitute provisions
of this International Standard. At the time of publi-
Inoculation of other plates, under the same con-
cation, the editions indicated were valid. All standards
ditions, using decimal dilutions of the initial suspen-
are subject to revision, and parties to agreements
sion.
based on this International Standard are encouraged
to investigate the possibility of applying the most re-
NOTE 1 To distinguish, if necessary, between yeasts and
cent editions of the standards indicated below.
moulds, the use of a surface plate is advisable. Surface
Members of IEC and IS0 maintain registers of cur-
plates are also recommended when heat-sensitive yeasts
rently valid International Standards.
or moulds are expected.
IS0 3100-2:1988, Meat and meat products - Samp-
4.2 Aerobic incubation of the plates at between
ling and preparation of test samples - Part 2: Prep-
20 “C and 25 “C for 3, 4 or 5 days.
ara tion of test samples for microbiological
examination.
4.3 Calculation of the number of yeasts and moulds
IS0 6887: 1983, Microbiology - Genera/ guidance for per gram or per millilitre of sample from the number
the preparation of dilutions for microbiological exam- of colonies obtained on plates chosen at dilution lev-
els so as to give a significant result.
ina tion.
1) To be published. (Revision of IS0 7218:1985)

---------------------- Page: 3 ----------------------
IS0 13681:1995(E)
5.3.3 Gentamicin solution
5 Dilution fluid, culture medium and
reagents
5.3.3.1 Composition
5.1 General
Gentamicin 25 mg 1)
IS0 7218. Water 25 ml
For current laboratory practice, see
1) According to the manufacturer’s specification
5.2 Di lution fluid
of the real gentamicin content of the powder.
See IS0 6887.
5.3.3.2 Preparation
5.3 Agar medium of yeast extract, glucose
Dissolve the gentamicin in the water and sterilize the
and oxytetracycline/gentamicin
solution by filtration.
5.3.1 Base medium
5.3.4 Complete medium
5.3.1 .I Composition
Add 5 ml of the oxytetracycline solution (5.3.2) and
5 ml of the gentamicin solution (5.3.3) to each portion
of 100 ml of sterile base medium (5.3.1), melted and
Yeast extract
5g
kept in a water bath (6.4) set at 47 “C.
(C,H,,O,) 20 9
Glucose
8gto18g’)
Agar
6 Apparatus and glassware
1 000 ml
Water
NOTE 2 Disposable apparatus is an acceptable alterna-
tive to reusable glassware if it has suitable specifications.
I) Depending on the gel strength of the agar.
I
Usual microbiological laboratory equipment and, in
particular, the following.
5.3.1.2 Preparation
6.1 Apparatus for dry sterilization (oven) or wet
Dissolve the components in the water by boiling.
sterilization (autoclave)
If necessary, adjust the pH so that after sterilization
The autoclave can either operate separately or be part
it is 6,6 at 25 “C.
of a general apparatus for preparing and distributing
media.
Transfer the medium to suitable containers (6.6).
See IS0 7218.
Sterilize for IO min in the autoclave (6.1) set at
115 “C.
6.2 Mixer, working on the principle of a centric ro-
tation of the contents of the tube (e.g. Vortex mixer),
5.3.2 Oxytetracycline solution
and capable of mixing 1 ml or 2 ml of sample in a tube
of adequate dimensions with 9 ml or 18 ml of dilution
5.3.2.1 Composition
fluid to obtain a homogeneous suspension.
Oxytetracycline (C,,H,,N,O,) 50 mg
6.3 Incubator, capable of operating at between
25 ml 20 “C + 1 “C and 25 “C + 1 “C.
Water -
-
6.4 Water bath,
capable of operating at
47 “C + 2 “C.
-
5.3.2.2 Preparation
6.5 pH-meter, accurate to within + 0,l pH unit at
Dissolve the oxytetracycline in the water and sterilize -
25 “C.
the solution by filtration.
2

---------------------- Page: 4 ----------------------
0 IS0 IS0 13681:1995(E)
6.6 Culture bottles or flasks the test sample and the moment when the medium
is poured into the dishes shall not exceed 15 min.
Bottles or flasks with non-toxic metallic screw-caps
Carefully mix the inoculum with the medium and al-
may be used.
low the mixture to solidify by leaving the Petri dishes
to stand on a cool horizontal surface.
6.7 Graduated pipettes, calibrated for bacterio-
logical use only, of nominal capacities IO ml and
9.2.4 Invert the
...

ISO
NORME
INTERNATIONALE 13681
Première édition
1995-12-15
Viandes et produits à base de viande -
Dénombrement des levures et
moisissures - Technique par comptage
des colonies
Meat and meat products - Enumeration of yeasts and moulds -
Colony-Count technique
Numéro de référence
ISO 13681:1995(F)

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 13681:1995(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de
I’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de I’ISO. Chaque comité membre intéressé par une
étude a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les
organisations internationales, gouvernementales et non gouvernemen-
tales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux. L’ISO colla-
bore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI)
en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques
sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication comme
Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des co-
mités membres votants.
La Norme internationale ISO 13681 a été élaborée par le comité technique
lSO/TC 34, Produits agricoles alimentaires, sous-comité SC 6, Viande et
produits à base de viande.
L’annexe A fait partie intégrante de la présente Norme internationale.
L’annexe B est donnée uniquement à titre d’information.
0 ISO 1995
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publi-
cation ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun pro-
cédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l‘accord
écrit de l’éditeur.
Organisation internationale de normalisation
Case Postale 56 l CH-1 211 Genève 20 l Suisse
Imprimé en Suisse

---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 13681:1995(F)
NORME INTERNATIONALE 0 ISO
Viandes et produits à base de viande -
Dénombrement des levures et moisissures -
Technique par comptage des colonies
ISO 31 OO-2:1988, Viandes et produits à base de
1 Domaine d’application
viande - Échantillonnage et préparation des échan-
tillons pour essai - Partie 2: Préparation des échan-
La présente Norme internationale prescrit une mé-
tillons pour essai en vue de l’examen
thode pour le dénombrement des levures et moisis-
microbiologique.
sures dans tous les types de viandes et produits à
base de viande, par comptage des colonies entre
ISO 6887: 1983, Microbiologie - Directives générales
20 “C et 25 “C.
pour la préparation des dilutions en vue de l’examen
microbiologique.
IMPORTANT - L’ISO 7954111, recommande I’em-
ploi du chloramphénicol ou de I’oxytétracycline
ISO 7218: -l), Microbiologie des aliments - Règles
comme antibiotiques. Toutefois, ces antibiotiques ne
générales pour les examens microbiologiques.
permettent pas d’inhiber suffisamment les micro-
organismes Gram-négatifs pouvant être trouvés dans
les viandes et notamment les viandes crues. Afin de
permettre une mise en évidence suffisante dans les
3 Définition
cas où la contamination bactérienne est importante,
il est nécessaire d’ajouter de la gentamicine. Étant
Pour les besoins de la présente Norme internationale,
donné que le chloramphénicol et la gentamicine, en
la définition suivante s’applique.
combinaison, empêchent le développement de cer-
tains types de levures, l’antibiotique qui est préconisé
3.1 levures et moisissures: Micro-organismes qui,
en variante, c’est-à-dire I’oxytétracycline est à retenir.
dans les 5 jours et entre 20 “C et 25 “C forment des
colonies lorsque l’essai est effectué dans les condi-
tions prescrites par la présente Norme internationale.
2 Références normatives
Les normes suivantes contiennent des dispositions
4 Principe
qui, par suite de la référence qui en est faite, consti-
tuent des dispositions valables pour la présente
Norme internationale. Au moment de la publication,
4.1 Ensemencement en profondeur d’un milieu de
les éditions indiquées étaient en vigueur. Toute
culture sélectif défini, coulé dans des boîtes de Petri,
norme est sujette à révision et les parties prenantes
avec une quantité définie de l’échantillon pour essai,
des accords fondés sur la présente Norme internatio-
si le produit est liquide, ou avec une quantité définie
nale sont invitées à rechercher la possibilité d’appli-
de la suspension mère pour les autres produits.
quer les éditions les plus récentes des normes
indiquées ci-après. Les membres de la CEI et de I’ISO Dans les mêmes conditions, ensemencement d’au-
possèdent le registre des Normes internationales en tres boîtes avec les dilutions décimales obtenues à
vigueur à un moment donné. partir de la suspension mère.
1) À publier. (Révision de I’ISO 7218:1985)
1

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 13681:1995(F)
Afin de faire la distinction entre les levures et
NOTE 1 5.3.2 Solution d’oxytétracycline
moisissures, si cela s’avère nécessaire, il est souhaitable
de réaliser un ensemencement en surface. L’ensemen-
5.3.2-l Composition
cement en surface est également recommandé, si l’on
s’attend à détecter des levures ou moisissures sensibles à
la chaleur.
Oxytétracycline (C,,H,ON,O,) 50 mg
Eau 25 ml
4.2 Incubation aérobie de ces boîtes entre 20 “C et
25 “C pendant ou
3, 4 5 jours.
5.3.2.2 Préparation
Calcul du nombre de levures et moisissures par
4.3
gramme ou par millilitre d’échantillon, à partir du
Dissoudre I’oxytétracycline dans l’eau et stériliser la
nombre de colonies obtenues dans des boîtes choi-
solution par filtration.
sies aux niveaux de dilution donnant un résultat si-
gnificatif.
5.3.3 Solution de gentamicine
5 Diluant, milieu de culture et réactifs
5.3.3.1 Composition
5.1 Généralités
Gentamicine 25 mg 1)
Pour les pratiques courantes de laboratoire, voir
Eau 25 ml
I’ISO 7218.
1) Selon l’indication du fabricant concernant la
5.2 Diluant
teneur réelle en gentamicine de la poudre.
Voir I’ISO 6887.
5.3.3.2 Préparation
5.3 Milieu gélosé à l’extrait de levure, au
glucose et à I’oxytétracycline/gentamicine Dissoudre la gentamicine dans l’eau et stériliser la
solution par filtration.
5.3.1 Milieu de base
5.3.4 Milieu complet
5.3.1 .l Composition
Ajouter 5 ml de solution d’oxytétracycline (5.3.2) et
5 ml de solution de gentamicine (5.3.3) à chaque por-
Extrait de levure
0
tion de 100 ml du milieu de base stérile (5.3.1), fon-
Glucose (C,H,,O,)
20 g due et maintenue dans un bain d’eau (6.4) réglé à
47 “C.
Agar-agar 8gà 18g’)
Eau 1 000 ml
6 Appareillage et verrerie
1) Selon le pouvoir gélifiant de I’agar-agar.
NOTE 2 Le matériel à usage unique est acceptable au
même titre que la verrerie réutilisable, si ses spécifications
sont similaires.
5.3.1.2 Préparation
Matériel courant de laboratoire de microbiologie et,
Dissoudre les composants dans l’eau en portant à
en particulier, ce qui suit.
ébullition.
6.1 Appareil pour la stérilisation en chaleur sèche
Si nécessaire, ajuster le pH de sorte qu’après stérili-
sation, il soit de 6,6 à 25 “C. (four) ou en chaleur humide (autoclave)
Répartir le milieu gélosé dans des récipients appro- L’autoclave peut être soit autonome ou faire partie
d’un ensemble pour la préparation et la répartition des
priés (6.6).
milieux.
Stériliser pendant 10 min à l’autoclave (6.1) réglé à
115 “C. Voir I’ISO 7218.

---------------------- Page: 4 ----------------------
0 ISO ISO 13681:1995(F)
6.2 Mélangeur, basé sur le principe d’une rotation
9 Mode opératoire
centralisé du contenu du tube (par exemple de type
Vortex), permettant de mélanger dans un tube de di-
mensions appropriées 1 ml ou 2 ml d’échantillon avec
9.1 Prise d’essai, suspension mère et
9 ml ou 18 ml de diluant afin d’obtenir une suspen-
dilutions
sion homogène.
Préparer la suspension mère et les dilutions confor-
mément à I’ISO 6887.
et
6.3 Étuve, réglable entre 20 “C + 1 “C
-
25 “C - + 1 “C.
9.2 Ensemencement et incubation
6.4 Bain d’eau, réglable à 47 “C + - 2 “C.
9.2.1 Prendre deux boîtes de Petri stériles (6.8).
6.5 pH-mètre, ayant une précision de réglage de
Transférer, dans chacune de ces boîtes, à l’aide d’une
+ 0,l unité de pH à 25 “C.
-
pipette stérile (6.7), 1 ml de l’échantillon pour essai
s’il est liquide, ou 1 ml de la suspension mère dans le
cas d’autres produits.
6.6 Tubes ou flacons de culture
Des flacons ou tubes de culture munis de
...

ISO
NORME
INTERNATIONALE 13681
Première édition
1995-12-15
Viandes et produits à base de viande -
Dénombrement des levures et
moisissures - Technique par comptage
des colonies
Meat and meat products - Enumeration of yeasts and moulds -
Colony-Count technique
Numéro de référence
ISO 13681:1995(F)

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ISO 13681:1995(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de
I’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de I’ISO. Chaque comité membre intéressé par une
étude a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les
organisations internationales, gouvernementales et non gouvernemen-
tales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux. L’ISO colla-
bore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI)
en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques
sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication comme
Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des co-
mités membres votants.
La Norme internationale ISO 13681 a été élaborée par le comité technique
lSO/TC 34, Produits agricoles alimentaires, sous-comité SC 6, Viande et
produits à base de viande.
L’annexe A fait partie intégrante de la présente Norme internationale.
L’annexe B est donnée uniquement à titre d’information.
0 ISO 1995
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publi-
cation ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun pro-
cédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l‘accord
écrit de l’éditeur.
Organisation internationale de normalisation
Case Postale 56 l CH-1 211 Genève 20 l Suisse
Imprimé en Suisse

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ISO 13681:1995(F)
NORME INTERNATIONALE 0 ISO
Viandes et produits à base de viande -
Dénombrement des levures et moisissures -
Technique par comptage des colonies
ISO 31 OO-2:1988, Viandes et produits à base de
1 Domaine d’application
viande - Échantillonnage et préparation des échan-
tillons pour essai - Partie 2: Préparation des échan-
La présente Norme internationale prescrit une mé-
tillons pour essai en vue de l’examen
thode pour le dénombrement des levures et moisis-
microbiologique.
sures dans tous les types de viandes et produits à
base de viande, par comptage des colonies entre
ISO 6887: 1983, Microbiologie - Directives générales
20 “C et 25 “C.
pour la préparation des dilutions en vue de l’examen
microbiologique.
IMPORTANT - L’ISO 7954111, recommande I’em-
ploi du chloramphénicol ou de I’oxytétracycline
ISO 7218: -l), Microbiologie des aliments - Règles
comme antibiotiques. Toutefois, ces antibiotiques ne
générales pour les examens microbiologiques.
permettent pas d’inhiber suffisamment les micro-
organismes Gram-négatifs pouvant être trouvés dans
les viandes et notamment les viandes crues. Afin de
permettre une mise en évidence suffisante dans les
3 Définition
cas où la contamination bactérienne est importante,
il est nécessaire d’ajouter de la gentamicine. Étant
Pour les besoins de la présente Norme internationale,
donné que le chloramphénicol et la gentamicine, en
la définition suivante s’applique.
combinaison, empêchent le développement de cer-
tains types de levures, l’antibiotique qui est préconisé
3.1 levures et moisissures: Micro-organismes qui,
en variante, c’est-à-dire I’oxytétracycline est à retenir.
dans les 5 jours et entre 20 “C et 25 “C forment des
colonies lorsque l’essai est effectué dans les condi-
tions prescrites par la présente Norme internationale.
2 Références normatives
Les normes suivantes contiennent des dispositions
4 Principe
qui, par suite de la référence qui en est faite, consti-
tuent des dispositions valables pour la présente
Norme internationale. Au moment de la publication,
4.1 Ensemencement en profondeur d’un milieu de
les éditions indiquées étaient en vigueur. Toute
culture sélectif défini, coulé dans des boîtes de Petri,
norme est sujette à révision et les parties prenantes
avec une quantité définie de l’échantillon pour essai,
des accords fondés sur la présente Norme internatio-
si le produit est liquide, ou avec une quantité définie
nale sont invitées à rechercher la possibilité d’appli-
de la suspension mère pour les autres produits.
quer les éditions les plus récentes des normes
indiquées ci-après. Les membres de la CEI et de I’ISO Dans les mêmes conditions, ensemencement d’au-
possèdent le registre des Normes internationales en tres boîtes avec les dilutions décimales obtenues à
vigueur à un moment donné. partir de la suspension mère.
1) À publier. (Révision de I’ISO 7218:1985)
1

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ISO 13681:1995(F)
Afin de faire la distinction entre les levures et
NOTE 1 5.3.2 Solution d’oxytétracycline
moisissures, si cela s’avère nécessaire, il est souhaitable
de réaliser un ensemencement en surface. L’ensemen-
5.3.2-l Composition
cement en surface est également recommandé, si l’on
s’attend à détecter des levures ou moisissures sensibles à
la chaleur.
Oxytétracycline (C,,H,ON,O,) 50 mg
Eau 25 ml
4.2 Incubation aérobie de ces boîtes entre 20 “C et
25 “C pendant ou
3, 4 5 jours.
5.3.2.2 Préparation
Calcul du nombre de levures et moisissures par
4.3
gramme ou par millilitre d’échantillon, à partir du
Dissoudre I’oxytétracycline dans l’eau et stériliser la
nombre de colonies obtenues dans des boîtes choi-
solution par filtration.
sies aux niveaux de dilution donnant un résultat si-
gnificatif.
5.3.3 Solution de gentamicine
5 Diluant, milieu de culture et réactifs
5.3.3.1 Composition
5.1 Généralités
Gentamicine 25 mg 1)
Pour les pratiques courantes de laboratoire, voir
Eau 25 ml
I’ISO 7218.
1) Selon l’indication du fabricant concernant la
5.2 Diluant
teneur réelle en gentamicine de la poudre.
Voir I’ISO 6887.
5.3.3.2 Préparation
5.3 Milieu gélosé à l’extrait de levure, au
glucose et à I’oxytétracycline/gentamicine Dissoudre la gentamicine dans l’eau et stériliser la
solution par filtration.
5.3.1 Milieu de base
5.3.4 Milieu complet
5.3.1 .l Composition
Ajouter 5 ml de solution d’oxytétracycline (5.3.2) et
5 ml de solution de gentamicine (5.3.3) à chaque por-
Extrait de levure
0
tion de 100 ml du milieu de base stérile (5.3.1), fon-
Glucose (C,H,,O,)
20 g due et maintenue dans un bain d’eau (6.4) réglé à
47 “C.
Agar-agar 8gà 18g’)
Eau 1 000 ml
6 Appareillage et verrerie
1) Selon le pouvoir gélifiant de I’agar-agar.
NOTE 2 Le matériel à usage unique est acceptable au
même titre que la verrerie réutilisable, si ses spécifications
sont similaires.
5.3.1.2 Préparation
Matériel courant de laboratoire de microbiologie et,
Dissoudre les composants dans l’eau en portant à
en particulier, ce qui suit.
ébullition.
6.1 Appareil pour la stérilisation en chaleur sèche
Si nécessaire, ajuster le pH de sorte qu’après stérili-
sation, il soit de 6,6 à 25 “C. (four) ou en chaleur humide (autoclave)
Répartir le milieu gélosé dans des récipients appro- L’autoclave peut être soit autonome ou faire partie
d’un ensemble pour la préparation et la répartition des
priés (6.6).
milieux.
Stériliser pendant 10 min à l’autoclave (6.1) réglé à
115 “C. Voir I’ISO 7218.

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0 ISO ISO 13681:1995(F)
6.2 Mélangeur, basé sur le principe d’une rotation
9 Mode opératoire
centralisé du contenu du tube (par exemple de type
Vortex), permettant de mélanger dans un tube de di-
mensions appropriées 1 ml ou 2 ml d’échantillon avec
9.1 Prise d’essai, suspension mère et
9 ml ou 18 ml de diluant afin d’obtenir une suspen-
dilutions
sion homogène.
Préparer la suspension mère et les dilutions confor-
mément à I’ISO 6887.
et
6.3 Étuve, réglable entre 20 “C + 1 “C
-
25 “C - + 1 “C.
9.2 Ensemencement et incubation
6.4 Bain d’eau, réglable à 47 “C + - 2 “C.
9.2.1 Prendre deux boîtes de Petri stériles (6.8).
6.5 pH-mètre, ayant une précision de réglage de
Transférer, dans chacune de ces boîtes, à l’aide d’une
+ 0,l unité de pH à 25 “C.
-
pipette stérile (6.7), 1 ml de l’échantillon pour essai
s’il est liquide, ou 1 ml de la suspension mère dans le
cas d’autres produits.
6.6 Tubes ou flacons de culture
Des flacons ou tubes de culture munis de
...

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