ISO 17244:2025
(Main)Water quality — Determination of the toxicity of water samples on the embryo-larval development of the Japanese oyster (Magallana gigas) and the blue mussel (Mytilus edulis or M. galloprovincialis)
Water quality — Determination of the toxicity of water samples on the embryo-larval development of the Japanese oyster (Magallana gigas) and the blue mussel (Mytilus edulis or M. galloprovincialis)
This document specifies a method for assessing the effects of chemical and aqueous samples on the embryo-larval development of marine bivalves. This method allows the determination of the concentration levels that result in an abnormality in embryo-larval development. This test is suitable for salinity ranges: — between 20 PSU (practical salinity unit) and 40 PSU for mussels, and — between 25 PSU and 35 PSU for oysters. This method in this document applies to: — chemical substances and preparations, — marine and brackish waters, — streams and aqueous effluents (urban, agricultural, industrial effluents, etc.) as long as the salinity is adjusted or dilution is limited so that the aforementioned salinity ranges are respected, — aqueous extracts (pore water, elutriates, eluates and leachates) from sediments and petroleum products, and — samples of contaminated sediment or dredged material (see Annex C).
Qualité de l’eau — Détermination de la toxicité d’échantillons aqueux sur le développement embryolarvaire de l’huître creuse (Magallana gigas) et de la moule (Mytilus edulis ou M. galloprovincialis)
Le présent document spécifie une méthode pour l’évaluation des effets de substances chimiques et d’échantillons aqueux sur le développement embryolarvaire de bivalves marins. Cette méthode permet de déterminer les niveaux de concentration induisant une anomalie du développement embryolarvaire. Cet essai convient pour des gammes de salinité: — de 20 PSU à 40 PSU (unité de salinité pratique) pour les moules; et — de 25 PSU à 35 PSU pour les huîtres. La méthode décrite dans le présent document s’applique: — aux substances chimiques et préparations; — aux eaux marines et saumâtres; — aux eaux douces et effluents aqueux (urbains, agricoles, industriels, etc.) tant que la salinité est ajustée ou la dilution est limitée de sorte que les gammes de salinité susmentionnées sont respectées; — aux extraits aqueux (eaux interstitielles, élutriats, éluats et lixiviats) de sédiments et de produits pétroliers; et — aux échantillons de sédiments contaminés ou de sédiments de dragage (voir Annexe C).
General Information
Relations
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Standards Content (Sample)
International
Standard
ISO 17244
Second edition
Water quality — Determination of
2025-07
the toxicity of water samples on the
embryo-larval development of the
Japanese oyster (Magallana gigas)
and the blue mussel (Mytilus edulis
or M. galloprovincialis)
Qualité de l’eau — Détermination de la toxicité d’échantillons
aqueux sur le développement embryolarvaire de l’huître
creuse (Magallana gigas) et de la moule (Mytilus edulis ou M.
galloprovincialis)
Reference number
© ISO 2025
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting on
the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address below
or ISO’s member body in the country of the requester.
ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: +41 22 749 01 11
Email: copyright@iso.org
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii
Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
5 Test organisms and seawater. 3
5.1 Spawning stock or mature bivalves .3
5.2 Reference seawater .3
5.2.1 General .3
5.2.2 Natural seawater .3
5.2.3 Artificial seawater .4
5.2.4 Hypersaline brine .4
6 Equipment . 4
7 Reference substance . 5
8 Test procedure . 5
8.1 Collection, preparation and preservation of aqueous samples .5
8.2 Preparation of test samples .6
8.2.1 Chemicals .6
8.2.2 Aqueous samples .6
8.2.3 sediment or dredged material .6
8.3 Selection of concentration range .6
8.4 Collecting gametes .6
8.4.1 General .6
8.4.2 Thermal stimulation .7
8.4.3 Stripping the gametes .8
8.5 Measurement of egg density .8
8.6 Fertilization and inoculation of fertilized eggs .8
8.7 Incubation .9
8.8 Observation .9
8.9 Analytical measurements .10
8.10 Disposal of adults .10
9 Expression of results . 10
10 Validity criteria .12
11 Test report .13
Annex A (informative) Overview of the test applied to the Japanese oyster Magallana gigas . 14
Annex B (informative) Performance data .15
Annex C (informative) Protocol to perform the test in direct contact with sediment .21
Bibliography .23
iii
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through
ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee
has been established has the right to be represented on that committee. International organizations,
governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely
with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are described
in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the different types
of ISO document should be noted. This document was drafted in accordance with the editorial rules of the
ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
ISO draws attention to the possibility that the implementation of this document may involve the use of (a)
patent(s). ISO takes no position concerning the evidence, validity or applicability of any claimed patent
rights in respect thereof. As of the date of publication of this document, ISO had not received notice of (a)
patent(s) which may be required to implement this document. However, implementers are cautioned that
this may not represent the latest information, which may be obtained from the patent database available at
www.iso.org/patents. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and expressions
related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the World Trade
Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see www.iso.org/iso/foreword.html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 147, Water quality, Subcommittee SC 5,
Biological methods.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 17244:2015), which has been technically
revised.
The main changes are as follows:
— Annex C, which gives a protocol to perform the test in direct contact with sediment, has been added;
— for Japanese oyster, the revised nomenclature, Magallana gigas,has been used;
— the possibility to extend the test duration to 48 h has been included.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www.iso.org/members.html.
iv
Introduction
Traditionally, the level of pollution affecting a marine environment is shown in terms of the concentration
levels of the contaminants present in the environment of interest. However, these measurements do not
provide an estimation of the harmful effects on organisms and have to be complemented with the biological
responses obtained through bioassays (see Reference [5]).
Among the marine organisms used to assess the potential impact of chemicals or discharges into the
environment, bivalve embryos and larvae are, together with sea urchins, among the organisms which are
most frequently used in bioassays (see References [18] and [21]). The embryos and larvae are more sensitive
to pollutants than the adults of the same species. Therefore, they represent the critical stages for the toxicity
tests (see References [19] and [30]). Since 1972, it is recommended to use the Pacific oyster, Magallana gigas,
to assess the quality of seawater (see Reference [35]). Furthermore, their worldwide distribution in coastal
waters, as well as their commercial importance (see Reference [10]), make bivalves the species of choice for
the undertaking of bioassays.
The results of these bioassays demonstrate the necessity to determine the potential toxicity thresholds
of chemicals which can enter the marine environment either accidentally or chronically, as well as the
“biological quality” of an environment or the potential toxicity of river water or a discharge that reach the
sea. Potential toxicity has been defined based on teratological effects (see References [11], [27] and [26]).
This document specifies a method based on the embryo-larval development of bivalves (oyster or mussel). It
can be routinely used to assess development abnormalities caused by the possible presence of chemicals and
mixtures in seawater. It also allows to assess the toxicity of aqueous samples like seawater, surface water,
effluents (urban, agricultural, industrial effluents, etc.), aqueous extracts from sediments and petroleum
products that can be leached in the water column at the time of their resuspension or discharge and presence
in the sea.
This test can be performed throughout the year with embryos and larvae of mature bivalves sampled from
the natural environment during their reproduction periods or mature bivalves which come from a hatchery
where they have been conditioned.
[14]
This bioassay, recommended by the International Council for the Exploration of the Sea (ICES), has
...
Norme
internationale
ISO 17244
Deuxième édition
Qualité de l’eau — Détermination de
2025-07
la toxicité d’échantillons aqueux sur
le développement embryolarvaire
de l’huître creuse (Magallana gigas)
et de la moule (Mytilus edulis ou M.
galloprovincialis)
Water quality — Determination of the toxicity of water samples
on the embryo-larval development of the Japanese oyster
(Magallana gigas) and the blue mussel (Mytilus edulis or M.
galloprovincialis)
Numéro de référence
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2025
Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en œuvre, aucune partie de cette
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: +41 22 749 01 11
E-mail: copyright@iso.org
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
ii
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe. 2
5 Organismes d’essai et eau de mer . 3
5.1 Géniteurs ou bivalves matures .3
5.2 Eau de mer de référence .4
5.2.1 Généralités .4
5.2.2 Eau de mer naturelle .4
5.2.3 Eau de mer artificielle.4
5.2.4 Saumure hypersaline .5
6 Matériel . 5
7 Substance de référence . 6
8 Procédure d’essai . 6
8.1 Prélèvement, préparation et conservation des échantillons aqueux .6
8.2 Préparation des échantillons pour essai .6
8.2.1 Substances chimiques .6
8.2.2 Échantillons aqueux .6
8.2.3 Sédiments ou sédiments de dragage .7
8.3 Choix de la gamme de concentration .7
8.4 Prélèvement de gamètes .7
8.4.1 Généralités .7
8.4.2 Stimulation thermique .7
8.4.3 Stripping des gamètes .8
8.5 Mesure de la densité d’œufs .9
8.6 Fécondation et ensemencement des œufs fécondés .9
8.7 Incubation .10
8.8 Observation .10
8.9 Mesures analytiques .10
8.10 Élimination des adultes .10
9 Expression des résultats .11
10 Critères de validité .13
11 Rapport d’essai .13
Annexe A (informative) Vue d’ensemble de l’essai appliqué à l’huître creuse Magallana gigas .15
Annexe B (informative) Données de performance .16
Annexe C (informative) Protocole de réalisation de l’essai en contact direct avec le sédiment .22
Bibliographie .25
iii
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux
de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire
partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a
été rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir
www.iso.org/directives).
L’ISO attire l’attention sur le fait que la mise en application du présent document peut entraîner l’utilisation
d’un ou de plusieurs brevets. L’ISO ne prend pas position quant à la preuve, à la validité et à l’applicabilité
de tout droit de brevet revendiqué à cet égard. À la date de publication du présent document, l’ISOn'avait
pasreçu notification qu’un ou plusieurs brevets pouvaient être nécessaires à sa mise en application.
Toutefois, il y a lieu d’avertir les responsables de la mise en application du présent document que des
informations plus récentes sont susceptibles de figurer dans la base de données de brevets, disponible à
l'adresse www.iso.org/brevets. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir identifié tout ou
partie de tels droits de propriété.
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données pour
information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion de
l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles techniques au
commerce (OTC), voir www.iso.org/avant-propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 147, Qualité de l’eau, sous-comité SC 5,
Méthodes biologiques.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 17244:2015), qui a fait l’objet d’une
révision technique.
Les principales modifications sont les suivantes:
— l’Annexe C, qui fournit un protocole de réalisation de l’essai en contact direct avec le sédiment, a été
ajoutée;
— pour l’huître creuse, la nomenclature révisée, Magallana gigas, a été utilisée;
— la possibilité d’étendre la durée de l’essai à 48 h a été incluse.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes se
trouve à l’adresse www.iso.org/fr/members.html.
iv
Introduction
Habituellement, le niveau de pollution affectant un environnement marin est présenté en termes de
niveaux de concentration des contaminants présents dans l’environnement étudié. Cependant, ces mesures
ne permettent pas de fournir une estimation des effets nocifs sur les organismes et doivent donc être
complétées par les réponses biologiques obtenues au moyen de bio-essais (voir la Référence [5]).
Parmi les organismes marins utilisés afin d’évaluer l’impact potentiel des substances chimiques ou des rejets
arrivant dans l’environnement, les embryons et larves de bivalves sont, avec les oursins, les organismes les
plus fréquemment utilisés dans le cadre de bio-essais (voir les Références [18] et [21]). Les embryons et
larves sont plus sensibles aux polluants que les adultes de la même espèce. Ils représentent donc les stades
critiques pour les essais de toxicité (voir les Références [19] et [30]). Depuis 1972, il est recommandé
d’utiliser l’huître creuse, Magallana gigas, afin d’évaluer la qualité de l’eau de mer (voir la Référence [35]). De
plus, leur présence dans les eaux côtières à l’échelle mondiale, ainsi que leur importance commerciale (voir
la Référence [10]) font des bivalves des espèces de choix pour la réalisation de bio-essais.
Les résultats de ces bio-essais prouvent qu’il est nécessaire de déterminer les seuils de toxicité potentielle
des substances chimiques qui peuvent arriver dans l’environnement marin, de manière accidentelle ou
chronique, ainsi que la «qualité biologique» d’un environnement ou la toxicité potentielle de l’eau des cours
d’eau ou d’un rejet atteignant la mer. La toxicité potentielle a été définie sur la base des effets tératogènes
(voir les Références [11], [27] et [26]).
Le présent document spécifie une méthode fondée sur le développement embryolarvaire de bivalves
(huître ou moule). Il peut être utilisé en routine afin d’évaluer les anomalies de développement causées
par la présence éventuelle de substances chimiques et de mélanges dans l’eau de mer. Il permet également
d’évaluer la toxicité d’échantillons aqueux, comme des eaux de mer, des eaux de surface, des effluents
(effluents urbains, agricoles, industriels
...
FINAL DRAFT
International
Standard
ISO/FDIS 17244
ISO/TC 147/SC 5
Water quality — Determination of
Secretariat: DIN
the toxicity of water samples on
Voting begins on:
the embryo-larval development of
2025-04-07
Japanese oyster (Magallana gigas)
Voting terminates on:
and blue mussel (Mytilus edulis or
2025-06-02
M. galloprovincialis)
RECIPIENTS OF THIS DRAFT ARE INVITED TO SUBMIT,
WITH THEIR COMMENTS, NOTIFICATION OF ANY
RELEVANT PATENT RIGHTS OF WHICH THEY ARE AWARE
AND TO PROVIDE SUPPOR TING DOCUMENTATION.
IN ADDITION TO THEIR EVALUATION AS
BEING ACCEPTABLE FOR INDUSTRIAL, TECHNO
LOGICAL, COMMERCIAL AND USER PURPOSES, DRAFT
INTERNATIONAL STANDARDS MAY ON OCCASION HAVE
TO BE CONSIDERED IN THE LIGHT OF THEIR POTENTIAL
TO BECOME STAN DARDS TO WHICH REFERENCE MAY BE
MADE IN NATIONAL REGULATIONS.
Reference number
ISO/FDIS 17244:2025(en) © ISO 2025
FINAL DRAFT
ISO/FDIS 17244:2025(en)
International
Standard
ISO/FDIS 17244
ISO/TC 147/SC 5
Water quality — Determination of
Secretariat: DIN
the toxicity of water samples on
Voting begins on:
the embryo-larval development of
Japanese oyster (Magallana gigas)
Voting terminates on:
and blue mussel (Mytilus edulis or
M. galloprovincialis)
RECIPIENTS OF THIS DRAFT ARE INVITED TO SUBMIT,
WITH THEIR COMMENTS, NOTIFICATION OF ANY
RELEVANT PATENT RIGHTS OF WHICH THEY ARE AWARE
AND TO PROVIDE SUPPOR TING DOCUMENTATION.
© ISO 2025
IN ADDITION TO THEIR EVALUATION AS
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BEING ACCEPTABLE FOR INDUSTRIAL, TECHNO
LOGICAL, COMMERCIAL AND USER PURPOSES, DRAFT
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Published in Switzerland Reference number
ISO/FDIS 17244:2025(en) © ISO 2025
ii
ISO/FDIS 17244:2025(en)
Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
5 Test organisms and seawater. 3
5.1 Spawning stock or mature bivalves .3
5.2 Reference seawater .3
5.2.1 General .3
5.2.2 Natural seawater .3
5.2.3 Artificial seawater .4
5.2.4 Hypersaline brine .4
6 Equipment . 4
7 Reference substance . 5
8 Test procedure . 5
8.1 Collection, preparation and preservation of aqueous samples .5
8.2 Preparation of test samples .6
8.2.1 Chemicals .6
8.2.2 Aqueous samples .6
8.2.3 sediment or dredged material .6
8.3 Selection of concentration range .6
8.4 Collecting gametes .6
8.4.1 General .6
8.4.2 Thermal stimulation .7
8.4.3 Stripping the gametes .8
8.5 Measurement of egg density .9
8.6 Fertilization and inoculation of fertilized eggs .9
8.7 Incubation .10
8.8 Observation .10
8.9 Analytical measurements .10
8.10 Disposal of adults .10
9 Expression of results .11
10 Validity criteria .13
11 Test report .13
Annex A (informative) Overview of the test applied to the Japanese oyster Magallana gigas . 14
Annex B (informative) Performance data .15
Annex C (informative) Protocol to perform the test in direct contact with sediment .21
Bibliography .23
iii
ISO/FDIS 17244:2025(en)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through
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in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the different types
of ISO document should be noted. This document was drafted in accordance with the editorial rules of the
ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
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rights in respect thereof. As of the date of publication of this document, ISO had not received notice of (a)
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Biological methods.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 17244:2015), which has been technically
revised.
The main changes are as follows:
— Annex C, which gives a protocol to perform the test in direct contact with sediment, has been added;
— for Japanese oyster, the revised nomenclature, Magallana gigas, has been used;
— the possibility to extend the test duration to 48 h has been included.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
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iv
ISO/FDIS 17244:2025(en)
Introduction
Traditionally, the level of pollution affecting a marine environment is shown in terms of the concentration
levels of the contaminants present in the environment of interest. However, these measurements do not
provide an estimation of the harmful effects on organisms and have to be complemented with the biological
responses obtained through bioassays (see Reference [5]).
Among the marine organisms used to assess the potential impact of chemicals or discharges into the
environment, bivalve embryos and larvae are, together with sea urchins, among the organisms which are
most frequently used in bioassays (see References [18] and [21]). The embryos and larvae are more sensitive
to pollutants than the adults of the same species. Therefore, they represent the critical stages for the toxicity
tests (see References [19] and [30]). Since 1972, it is recommended to use the Pacific oyster, Magallana gigas,
to assess the quality of seawater (see Reference [35]). Furthermore, their worldwide distribution in coastal
waters, as well as their commercial importance (see Reference [10]), make bivalves the species of choice for
the undertaking of bioassays.
The results of these bioassays demonstrate the necessity to determine the potential toxicity thr
...
ISO/FDIS 17244:2025(E)
ISO/TC 147/SC 5/WG 2
Secretariat: DIN
Date: 2025-03-24
Water quality — Determination of the toxicity of water samples on
the embryo-larval development of Japanese oyster (Magallana
gigas) and blue mussel (Mytilus edulis or M. galloprovincialis)
Qualité de l'eau — Détermination de la toxicité d'échantillons aqueux sur le développement embryo-
larvaire d'huître creuse (Magallana gigas) et moule (Mytilus edulis ou galloprovincialis)
FDIS stage
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www.iso.org
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Published in Switzerland.
iii
ISO/FDIS 17244:2025(en)
Contents
Foreword . v
Introduction . vi
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
5 Test organisms and seawater . 3
5.1 Spawning stock or mature bivalves . 3
5.2 Reference seawater . 4
6 Equipment . 5
7 Reference substance . 6
8 Test procedure . 6
8.1 Collection, preparation and preservation of aqueous samples . 6
8.2 Preparation of test samples . 6
8.3 Selection of concentration range . 7
8.4 Collecting gametes . 7
8.5 Measurement of egg density . 10
8.6 Fertilization and inoculation of fertilized eggs . 10
8.7 Incubation. 11
8.8 Observation . 11
8.9 Analytical measurements . 12
8.10 Disposal of adults . 12
9 Expression of results . 12
10 Validity criteria . 15
11 Test report . 15
Annex A (informative) Overview of the test applied to the Japanese oyster Magallana gigas . 16
Annex B (informative) Performance data . 18
Annex C (informative) Protocol to perform the test in direct contact with sediment . 27
Bibliography . 30
iv
ISO/FDIS 17244:2025(en)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
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in respect thereof. As of the date of publication of this document, ISO had not received notice of (a) patent(s)
which may be required to implement this document. However, implementers are cautioned that this may not
represent the latest information, which may be obtained from the patent database available at
www.iso.org/patents. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and expressions
related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the World Trade
Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see www.iso.org/iso/foreword.html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 147, Water quality, Subcommittee SC 5,
Biological methods.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 17244:2015), which has been technically
revised.
The main changes are as follows:
— Annex C— addition of Annex C:, which gives a protocol to perform the test in direct contact with sediment,
has been added;
— for Japanese oyster, the use of revised nomenclature:, Magallana gigas, has been used;
— the possibility to extend the test duration to 48h48 h has been included.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www.iso.org/members.html.
v
ISO/FDIS 17244:2025(en)
Introduction
Traditionally, the level of pollution affecting a marine environment is shown in terms of the concentration
levels of the contaminants present in the environment of interest. However, these measurements do not
provide an estimation of the harmful effects on organisms and have to be complemented with the biological
responses obtained through bioassays (see Reference [5[5]).]).
Among the marine organisms used to assess the potential impact of chemicals or discharges into the
environment, bivalve embryos and larvae are, together with sea urchins, among the organisms which are most
frequently used in bioassays (see References [18Reference [18])] and [21 [21]).]). The embryos and larvae
are more sensitive to pollutants than the adults of the same species. They thereforeTherefore, they represent
the critical stages for the toxicity tests (see References [19[19]] and [30 [30]).]). Since 1972, it’sit is
recommended theto use of the Pacific oyster, Magallana gigas, to assess the quality of seawater (see
Reference [35[35]).]). Furthermore, their worldwide distribution in coastal waters, as well as their
commercial importance (see Reference [10[10]),]), make bivalves the species of choice for the undertaking of
bioassays.
The results of these bioassays demonstrate the necessity to determine the potential toxicity thresholds of
chemicals which can enter the marine environment either accidentally or chronically, as well as the “biological
quality” of an environment or the potential toxicity of river water or a discharge that reach the sea. Potential
toxicity has been defined based on teratological effects (see References [11], [27[11], [27]] and [26[26]).]).
This document specifies a method based on the embryo-larval development of bivalves (oyster or mussel). It
can be routinely used to assess development abnormalities caused by the possible presence of chemicals and
mixtures in seawater. It also allows to assess the toxicity of aqueous samples like seawater, surface water,
effluents (urban, agricultural, industrial effluents, etc.), aqueous extracts from sediments, and petroleum
products that can be leached in the water column at the time of their resuspension or discharge and presence
in the sea.
This test can be performed throughout the year with embryos and larvae of mature bivalves sampled from the
natural environment during their reproduction periods or mature bivalves which come from a hatchery where
they have been conditioned.
[14
This bioassay, recommended by the International Council for the Exploration of the Sea (ICES), ), (see
] [31
Reference [14]), has been the subject of the first European inter-calibration test performed in 1991. (see
]
Reference [31]). The protocol described in this document corresponds to a modification and simplification of
the ASTM standard method (1994) (see Reference [3[3]).].
The toxicity assessment of metals performed on M. gigas and Mytilus edulis demonstrated that both organisms
had a similar level of sensitivity (see References [19[19]] and [15 [15]).]). Two other studies performed on
urban effluents showed similar findings for both species (see References [16[16]] and [28 [28]).]). These
observations have been confirmed by the work carried out on mercury (see Reference [4[4]),]), which
compared the findings of four embryo-larval tests: M. edulis, M. galloprovincialis, M. gigas and C. virginica.
Another study showed that the embryos of M. gigas are more sensitive to metals and hydrocarbons than the
other marine organisms which are commonly used, for example, polychaete, amphipods, fish and crustaceans
(see Reference [8[8]).]).
The sensitivity of the bivalve embryo-larval development confirms the suitability of this test to assess the
toxicity of chemicals and aqueous samples. The pH, salinity and temperature range acceptable to bivalves
make them easy to use in ecotoxicity studies, particularly when assessing the quality of coastal and estuarine
environments (see Reference [11[11]).]).
vi
ISO/FDIS 17244:2025(en)
Water quality — Determination of the toxicity of water samples on the
embryo-larval development of Japanese oyster (Magallana gigas) and
blue mussel (Mytilus edulis or M. galloprovincialis)
WARNING — Persons using this document should be familiar with normal laboratory practice. This
document does not purport to address all of the safety problems, if any, associated with its use. It is
the responsibility of the user to establish appropriate safety and health practices and to ensure
compliance with any national regulatory conditions.
IMPORTANT — It is absolutely essential that tests conducted in accordance with this document be
carried out by suitably qualified staff.
1 Scope
This document specifies a method for assessing the effects of chemical and aqueous samples on the embryo-
larval development of marine bivalves. This method allows the determination of the concentration levels that
result in an abnormality in embryo-larval development. This test is suitable for salinity ranges between 20 PSU
(Practical Salinity Unit) and 40 PSU for mussels and between 25 PSU and 35 PSU for oysters.:
— between 20 PSU (practi
...
PROJET FINAL
Norme
internationale
ISO/FDIS 17244
ISO/TC 147/SC 5
Qualité de l’eau — Détermination de
Secrétariat: DIN
la toxicité d’échantillons aqueux sur
Début de vote:
le développement embryolarvaire
2025-04-07
de l’huître creuse (Magallana gigas)
Vote clos le:
et de la moule (Mytilus edulis ou M.
2025-06-02
galloprovincialis)
Water quality — Determination of the toxicity of water samples
on the embryo-larval development of Japanese oyster (Magallana
gigas) and blue mussel (Mytilus edulis or M. galloprovincialis)
LES DESTINATAIRES DU PRÉSENT PROJET SONT
INVITÉS À PRÉSENTER, AVEC LEURS OBSERVATIONS,
NOTIFICATION DES DROITS DE PROPRIÉTÉ DONT ILS
AURAIENT ÉVENTUELLEMENT CONNAISSANCE ET À
FOURNIR UNE DOCUMENTATION EXPLICATIVE.
OUTRE LE FAIT D’ÊTRE EXAMINÉS POUR
ÉTABLIR S’ILS SONT ACCEPTABLES À DES FINS
INDUSTRIELLES, TECHNOLOGIQUES ET COM-MERCIALES,
AINSI QUE DU POINT DE VUE DES UTILISATEURS, LES
PROJETS DE NORMES
INTERNATIONALES DOIVENT PARFOIS ÊTRE CONSIDÉRÉS
DU POINT DE VUE DE LEUR POSSI BILITÉ DE DEVENIR DES
NORMES POUVANT
SERVIR DE RÉFÉRENCE DANS LA RÉGLEMENTATION
NATIONALE.
Numéro de référence
ISO/FDIS 17244:2025(fr) © ISO 2025
PROJET FINAL
ISO/FDIS 17244:2025(fr)
Norme
internationale
ISO/FDIS 17244
ISO/TC 147/SC 5
Qualité de l’eau — Détermination de
Secrétariat: DIN
la toxicité d’échantillons aqueux sur
Début de vote:
le développement embryolarvaire
2025-04-07
de l’huître creuse (Magallana gigas)
Vote clos le:
et de la moule (Mytilus edulis ou M.
2025-06-02
galloprovincialis)
Water quality — Determination of the toxicity of water samples
on the embryo-larval development of Japanese oyster (Magallana
gigas) and blue mussel (Mytilus edulis or M. galloprovincialis)
LES DESTINATAIRES DU PRÉSENT PROJET SONT
INVITÉS À PRÉSENTER, AVEC LEURS OBSERVATIONS,
NOTIFICATION DES DROITS DE PROPRIÉTÉ DONT ILS
AURAIENT ÉVENTUELLEMENT CONNAISSANCE ET À
FOURNIR UNE DOCUMENTATION EXPLICATIVE.
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
OUTRE LE FAIT D’ÊTRE EXAMINÉS POUR
ÉTABLIR S’ILS SONT ACCEPTABLES À DES FINS
© ISO 2025 INDUSTRIELLES, TECHNOLOGIQUES ET COM-MERCIALES,
AINSI QUE DU POINT DE VUE DES UTILISATEURS, LES
Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en œuvre, aucune partie de cette
PROJETS DE NORMES
INTERNATIONALES DOIVENT PARFOIS ÊTRE CONSIDÉRÉS
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
DU POINT DE VUE DE LEUR POSSI BILITÉ DE DEVENIR DES
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
NORMES POUVANT
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
SERVIR DE RÉFÉRENCE DANS LA RÉGLEMENTATION
NATIONALE.
ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: +41 22 749 01 11
E-mail: copyright@iso.org
Web: www.iso.org
Publié en Suisse Numéro de référence
ISO/FDIS 17244:2025(fr) © ISO 2025
ii
ISO/FDIS 17244:2025(fr)
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe. 2
5 Organismes d’essai et eau de mer . 3
5.1 Géniteurs ou bivalves matures .3
5.2 Eau de mer de référence .4
5.2.1 Généralités .4
5.2.2 Eau de mer naturelle .4
5.2.3 Eau de mer artificielle.4
5.2.4 Saumure hypersaline .5
6 Matériel . 5
7 Substance de référence . 6
8 Procédure d’essai . 6
8.1 Prélèvement, préparation et conservation des échantillons aqueux .6
8.2 Préparation des échantillons pour essai .6
8.2.1 Substances chimiques .6
8.2.2 Échantillons aqueux .6
8.2.3 Sédiments ou sédiments de dragage .7
8.3 Choix de la gamme de concentration .7
8.4 Prélèvement de gamètes .7
8.4.1 Généralités .7
8.4.2 Stimulation thermique .7
8.4.3 Stripping des gamètes .9
8.5 Mesure de la densité d’œufs .9
8.6 Fécondation et ensemencement des œufs fécondés .9
8.7 Incubation .10
8.8 Observation .10
8.9 Mesures analytiques .11
8.10 Élimination des adultes .11
9 Expression des résultats .11
10 Critères de validité .13
11 Rapport d’essai . 14
Annexe A (informative) Vue d’ensemble de l’essai appliqué à l’huître creuse Magallana gigas .15
Annexe B (informative) Données de performance .16
Annexe C (informative) Protocole de réalisation de l’essai en contact direct avec le sédiment .22
Bibliographie .25
iii
ISO/FDIS 17244:2025(fr)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes nationaux
de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de
faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales
et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux. L’ISO collabore
étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui concerne la normalisation
électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a
été rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir
www.iso.org/directives).
L’ISO attire l’attention sur le fait que la mise en application du présent document peut entraîner l’utilisation
d’un ou de plusieurs brevets. L’ISO ne prend pas position quant à la preuve, à la validité et à l’applicabilité
de tout droit de brevet revendiqué à cet égard. À la date de publication du présent document, l’ISO n’avait
pas reçu notification qu’un ou plusieurs brevets pouvaient être nécessaires à sa mise en application.
Toutefois, il y a lieu d’avertir les responsables de la mise en application du présent document que des
informations plus récentes sont susceptibles de figurer dans la base de données de brevets, disponible à
l’adresse www.iso.org/brevets. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir identifié de tels
droits de propriété.
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données pour
information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion de
l’ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles techniques au
commerce (OTC), voir www.iso.org/avant-propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 147, Qualité de l’eau, sous-comité SC 5,
Méthodes biologiques.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 17244:2015), qui a fait l’objet d’une
révision technique.
Les principales modifications sont les suivantes:
— l’Annexe C, qui fournit un protocole de réalisation de l’essai en contact direct avec le sédiment, a été
ajoutée;
— pour l’huître creuse, la nomenclature révisée, Magallana gigas, a été utilisée;
— la possibilité d’étendre la durée de l’essai à 48 h a été incluse.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes se
trouve à l’adresse www.iso.org/fr/members.html.
iv
ISO/FDIS 17244:2025(fr)
Introduction
Habituellement, le niveau de pollution affectant un environnement marin est présenté en termes de
niveaux de concentration des contaminants présents dans l’environnement étudié. Cependant, ces mesures
ne permettent pas de fournir une estimation des effets nocifs sur les organismes et doivent donc être
complétées par les réponses biologiques
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.