ISO/TS 23647:2010
(Main)Vegetable fats and oils — Determination of wax content by gas chromatography
Vegetable fats and oils — Determination of wax content by gas chromatography
ISO/TR 23647:2010 specifies a gas chromatographic method for determining the wax content of crude, degummed, neutralized, winterized, and fully refined vegetable oils, such as sunflower, soybean, rapeseed, corn, and rice bran oils. Waxes are esters of long chain fatty acids and fatty alcohols (having C20 or longer saturated carbon chain). The wax content is expressed in milligrams per kilogram of oil.
Corps gras d'origine végétale — Détermination de la teneur en cires par chromatographie en phase gazeuse
L'ISO/TS 23647:2010 spécifie une méthode de chromatographie en phase gazeuse pour déterminer la teneur en cires des huiles végétales brutes, dégommées, neutralisées, décirées et totalement raffinées comme les huiles de tournesol, de soja, de colza, de maïs et de son de riz. Elle ne s'applique pas aux huiles d'olive ou aux huiles de grignons d'olive. Les cires sont des esters d'acides gras et d'alcools gras à chaîne longue (ayant une chaîne carbonée saturée C20 ou plus longue). La teneur en cires est exprimée en milligrammes par kilogramme d'huile.
General Information
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Standards Content (Sample)
TECHNICAL ISO/TS
SPECIFICATION 23647
First edition
2010-10-01
Vegetable fats and oils — Determination
of wax content by gas chromatography
Corps gras d'origine végétale — Détermination de la teneur en cires par
chromatographie en phase gazeuse
Reference number
©
ISO 2010
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the unlikely event that a problem relating to it is found, please inform the Central Secretariat at the address given below.
© ISO 2010
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means,
electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without permission in writing from either ISO at the address below or
ISO's member body in the country of the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2010 – All rights reserved
Contents Page
Foreword .iv
Introduction.v
1 Scope.1
2 Normative references.1
3 Terms and definitions .1
4 Principle.1
5 Reagents and materials .1
6 Apparatus.2
7 Sampling.3
8 Preparation of the test sample.3
9 Procedure.3
9.1 Preparation of silver nitrate-impregnated silica gel 60 .3
9.2 Column packing.3
9.3 Isolation of waxes.3
9.4 Gas chromatographic determination of waxes .4
10 Precision.6
10.1 Results of interlaboratory test .6
10.2 Repeatability .6
10.3 Reproducibility .6
11 Test report.7
Annex A (informative) Chromatograms .8
Annex B (informative) Results of interlaboratory tests .12
Annex C (informative) Preparation of crystalline sunflower wax standard .13
Bibliography.16
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
In other circumstances, particularly when there is an urgent market requirement for such documents, a
technical committee may decide to publish other types of document:
⎯ an ISO Publicly Available Specification (ISO/PAS) represents an agreement between technical experts in
an ISO working group and is accepted for publication if it is approved by more than 50 % of the members
of the parent committee casting a vote;
⎯ an ISO Technical Specification (ISO/TS) represents an agreement between the members of a technical
committee and is accepted for publication if it is approved by 2/3 of the members of the committee casting
a vote.
An ISO/PAS or ISO/TS is reviewed after three years in order to decide whether it will be confirmed for a
further three years, revised to become an International Standard, or withdrawn. If the ISO/PAS or ISO/TS is
confirmed, it is reviewed again after a further three years, at which time it must either be transformed into an
International Standard or be withdrawn.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO/TS 23647 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 11,
Animal and vegetable fats and oils.
iv © ISO 2010 – All rights reserved
Introduction
Vegetable fats and oils consist predominantly of triacylglycerols, but they also contain small amounts of
non-glyceridic substances often called minor components. The composition of these minor constituents (e.g.
sterols, steryl esters, triterpene dialcohols, and waxes) provides highly characteristic information about the
identity of the oils. Since the physical and chemical steps in the processing of vegetable fats and oils can
cause alteration in their composition and content, analysis of these minor components can be conveniently
applied to characterize the processing steps through which an oil was obtained.
Waxes are natural compounds occurring in various vegetable oils and can easily crystallize at low
temperatures resulting in cloudiness. Wax removal is very often a part of the vegetable oil-refining process
(e.g. sunflower, rice bran, corn oil) and its efficiency requires measurement.
This Technical Specification does not cover the analysis of waxes of olive oil.
With the exception of olive oil, there is currently no reliable official method to measure the wax content and
composition of vegetable fats and oils. Cold tests give neither qualitative nor quantitative results; methods
developed for olive oils are not applicable to seed oils and can cause a lot of problems in the interpretation of
results. There is an industrial and commercial need for an International Standard which is applicable to crude,
degummed, pre-dewaxed, winterized, and fully refined vegetable fats and oils.
Waxes from different vegetable oils and fats are separated from triacylglycerols and from other non-glyceridic
compounds containing double bonds by column chromatography using a mixed column packing consisting of
silica gel and silica gel impregnated with AgNO .
The wax fraction is further analysed by capillary gas chromatography. The method also gives information
about the total content of waxes and their composition. The information given by the method can be easily
used to check oil quality and to track the efficiency of the dewaxing process.
TECHNICAL SPECIFICATION ISO/TS 23647:2010(E)
Vegetable fats and oils — Determination of wax content by gas
chromatography
1 Scope
This Technical Specification specifies a gas chromatographic method for determining the wax content of crude,
degummed, neutralized, winterized, and fully refined vegetable oils, such as sunflower, soybean, rapeseed,
corn, and rice bran oils. It is not applicable to olive oils or olive pomace oils.
Waxes are esters of long chain fatty acids and fatty alcohols (having C or longer saturated carbon chain).
The wax content is expressed in milligrams per kilogram of oil.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced
document (including any amendments) applies.
ISO 661, Animal and vegetable fats and oils — Preparation of test sample
3 Terms and definitions
For the purpose of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
wax content
mass fraction of those substances in the sample, which are determined under the conditions specified in this
Technical Specification
NOTE The wax content is expressed in milligrams per kilogram of oil.
4 Principle
The waxes are separated by column chromatography using a mixed column packing consisting of silica gel
and silica gel impregnated with AgNO . Determination of the waxes is carried out using capillary gas
chromatography (GC), applying an internal standard, previously added to the oil.
5 Reagents and materials
WARNING — Attention is drawn to the regulations which specify the handling of dangerous matter.
Technical, organizational and personal safety measures shall be followed.
During the analysis, unless otherwise stated, use only reagents of recognized analytical grade suitable for
HPLC column chromatography and distilled or demineralized water or water of equivalent purity.
5.1 n-Hexane.
5.2 Dichloromethane.
5.3 n-Heptane.
5.4 Chloroform.
5.5 Silica gel 60, of particle size 0,063 mm to 0,200 mm (70 mesh to 230 mesh), such as Merck
1)
No. 107734 .
5.6 Silver nitrate (AgNO ).
2)
5.7 Hexatriacontane (C paraffin).
5.7.1 Internal standard solution, mass concentration 0,1 mg/ml in n-heptane.
5.7.2 Standard for determination of response factor, mass concentration 1 mg/ml in n-heptane.
3)
5.8 Standards for peak identification in the gas chromatogram, pure waxes , e.g. C , C .
40 44
5.8.1 Standard for determination of response factor, stearyl stearate or stearic acid stearyl ester
(C wax), mass concentration 1 mg/ml in chloroform.
5.9 Crystallized sunflower wax, prepared from winter cake or from crude sunflower oil using crystallization.
For the preparation, see Annex C.
5.10 Cotton wool, surgical quality, non-absorbent.
6 Apparatus
6.1 Chromatographic column, made of glass, of internal diameter 30 mm and length 450 mm, equipped
with a polytetrafluoroethylene (PTFE) tap.
6.2 Glass rod, about 600 mm in length.
[4]
6.3 Pasteur pipette, ISO 7712 .
6.4 Vacuum rotary evaporator.
6.5 Round-bottomed flask, capacity 250 ml (to collect wax fraction).
6.6 Pear-shaped flask, capacity 25 ml (to collect the concentrated wax fraction).
6.7 Gas chromatograph, equipped with flame ionization detector, split/splitless injector and integrator or
data acquisition system.
1) Merck No. 107734 is an example of a suitable product available commercially. This information is given for the
convenience of users of this document and does not constitute an endorsement by ISO of this product. Equivalent
products may be used if they can be shown to lead to the same results.
2) Hexatriacontane is available from Sigma-Aldrich with a purity of min. 99 % mass fraction. This information is given for
the convenience of users of this document and does not constitute an endorsement by ISO of this supplier.
3) Pure waxes e.g. behenic acid stearyl ester (C ), stearic acid stearyl ester (C ) and behenic acid behenyl ester (C )
40 36 44
are available from Sigma-Aldrich, purity approximately 99 % mass fraction. This information is given for the convenience
of users of this document and does not constitute an endorsement by ISO of this supplier.
2 © ISO 2010 – All rights reserved
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TECHNICAL ISO/TS
SPECIFICATION 23647
First edition
2010-10-01
Vegetable fats and oils — Determination
of wax content by gas chromatography
Corps gras d'origine végétale — Détermination de la teneur en cires par
chromatographie en phase gazeuse
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Contents Page
Foreword .iv
Introduction.v
1 Scope.1
2 Normative references.1
3 Terms and definitions .1
4 Principle.1
5 Reagents and materials .1
6 Apparatus.2
7 Sampling.3
8 Preparation of the test sample.3
9 Procedure.3
9.1 Preparation of silver nitrate-impregnated silica gel 60 .3
9.2 Column packing.3
9.3 Isolation of waxes.3
9.4 Gas chromatographic determination of waxes .4
10 Precision.6
10.1 Results of interlaboratory test .6
10.2 Repeatability .6
10.3 Reproducibility .6
11 Test report.7
Annex A (informative) Chromatograms .8
Annex B (informative) Results of interlaboratory tests .12
Annex C (informative) Preparation of crystalline sunflower wax standard .13
Bibliography.16
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
In other circumstances, particularly when there is an urgent market requirement for such documents, a
technical committee may decide to publish other types of document:
⎯ an ISO Publicly Available Specification (ISO/PAS) represents an agreement between technical experts in
an ISO working group and is accepted for publication if it is approved by more than 50 % of the members
of the parent committee casting a vote;
⎯ an ISO Technical Specification (ISO/TS) represents an agreement between the members of a technical
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a vote.
An ISO/PAS or ISO/TS is reviewed after three years in order to decide whether it will be confirmed for a
further three years, revised to become an International Standard, or withdrawn. If the ISO/PAS or ISO/TS is
confirmed, it is reviewed again after a further three years, at which time it must either be transformed into an
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Animal and vegetable fats and oils.
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Introduction
Vegetable fats and oils consist predominantly of triacylglycerols, but they also contain small amounts of
non-glyceridic substances often called minor components. The composition of these minor constituents (e.g.
sterols, steryl esters, triterpene dialcohols, and waxes) provides highly characteristic information about the
identity of the oils. Since the physical and chemical steps in the processing of vegetable fats and oils can
cause alteration in their composition and content, analysis of these minor components can be conveniently
applied to characterize the processing steps through which an oil was obtained.
Waxes are natural compounds occurring in various vegetable oils and can easily crystallize at low
temperatures resulting in cloudiness. Wax removal is very often a part of the vegetable oil-refining process
(e.g. sunflower, rice bran, corn oil) and its efficiency requires measurement.
This Technical Specification does not cover the analysis of waxes of olive oil.
With the exception of olive oil, there is currently no reliable official method to measure the wax content and
composition of vegetable fats and oils. Cold tests give neither qualitative nor quantitative results; methods
developed for olive oils are not applicable to seed oils and can cause a lot of problems in the interpretation of
results. There is an industrial and commercial need for an International Standard which is applicable to crude,
degummed, pre-dewaxed, winterized, and fully refined vegetable fats and oils.
Waxes from different vegetable oils and fats are separated from triacylglycerols and from other non-glyceridic
compounds containing double bonds by column chromatography using a mixed column packing consisting of
silica gel and silica gel impregnated with AgNO .
The wax fraction is further analysed by capillary gas chromatography. The method also gives information
about the total content of waxes and their composition. The information given by the method can be easily
used to check oil quality and to track the efficiency of the dewaxing process.
TECHNICAL SPECIFICATION ISO/TS 23647:2010(E)
Vegetable fats and oils — Determination of wax content by gas
chromatography
1 Scope
This Technical Specification specifies a gas chromatographic method for determining the wax content of crude,
degummed, neutralized, winterized, and fully refined vegetable oils, such as sunflower, soybean, rapeseed,
corn, and rice bran oils. It is not applicable to olive oils or olive pomace oils.
Waxes are esters of long chain fatty acids and fatty alcohols (having C or longer saturated carbon chain).
The wax content is expressed in milligrams per kilogram of oil.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
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document (including any amendments) applies.
ISO 661, Animal and vegetable fats and oils — Preparation of test sample
3 Terms and definitions
For the purpose of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
wax content
mass fraction of those substances in the sample, which are determined under the conditions specified in this
Technical Specification
NOTE The wax content is expressed in milligrams per kilogram of oil.
4 Principle
The waxes are separated by column chromatography using a mixed column packing consisting of silica gel
and silica gel impregnated with AgNO . Determination of the waxes is carried out using capillary gas
chromatography (GC), applying an internal standard, previously added to the oil.
5 Reagents and materials
WARNING — Attention is drawn to the regulations which specify the handling of dangerous matter.
Technical, organizational and personal safety measures shall be followed.
During the analysis, unless otherwise stated, use only reagents of recognized analytical grade suitable for
HPLC column chromatography and distilled or demineralized water or water of equivalent purity.
5.1 n-Hexane.
5.2 Dichloromethane.
5.3 n-Heptane.
5.4 Chloroform.
5.5 Silica gel 60, of particle size 0,063 mm to 0,200 mm (70 mesh to 230 mesh), such as Merck
1)
No. 107734 .
5.6 Silver nitrate (AgNO ).
2)
5.7 Hexatriacontane (C paraffin).
5.7.1 Internal standard solution, mass concentration 0,1 mg/ml in n-heptane.
5.7.2 Standard for determination of response factor, mass concentration 1 mg/ml in n-heptane.
3)
5.8 Standards for peak identification in the gas chromatogram, pure waxes , e.g. C , C .
40 44
5.8.1 Standard for determination of response factor, stearyl stearate or stearic acid stearyl ester
(C wax), mass concentration 1 mg/ml in chloroform.
5.9 Crystallized sunflower wax, prepared from winter cake or from crude sunflower oil using crystallization.
For the preparation, see Annex C.
5.10 Cotton wool, surgical quality, non-absorbent.
6 Apparatus
6.1 Chromatographic column, made of glass, of internal diameter 30 mm and length 450 mm, equipped
with a polytetrafluoroethylene (PTFE) tap.
6.2 Glass rod, about 600 mm in length.
[4]
6.3 Pasteur pipette, ISO 7712 .
6.4 Vacuum rotary evaporator.
6.5 Round-bottomed flask, capacity 250 ml (to collect wax fraction).
6.6 Pear-shaped flask, capacity 25 ml (to collect the concentrated wax fraction).
6.7 Gas chromatograph, equipped with flame ionization detector, split/splitless injector and integrator or
data acquisition system.
1) Merck No. 107734 is an example of a suitable product available commercially. This information is given for the
convenience of users of this document and does not constitute an endorsement by ISO of this product. Equivalent
products may be used if they can be shown to lead to the same results.
2) Hexatriacontane is available from Sigma-Aldrich with a purity of min. 99 % mass fraction. This information is given for
the convenience of users of this document and does not constitute an endorsement by ISO of this supplier.
3) Pure waxes e.g. behenic acid stearyl ester (C ), stearic acid stearyl ester (C ) and behenic acid behenyl ester (C )
40 36 44
are available from Sigma-Aldrich, purity approximately 99 % mass fraction. This information is given for the convenience
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SPÉCIFICATION ISO/TS
TECHNIQUE 23647
Première édition
2010-10-01
Corps gras d'origine végétale —
Détermination de la teneur en cires par
chromatographie en phase gazeuse
Vegetable fats and oils — Determination of wax content by gas
chromatography
Numéro de référence
©
ISO 2010
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de l'ISO à l'adresse ci-après ou du comité membre de l'ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2010 – Tous droits réservés
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction.v
1 Domaine d'application .1
2 Références normatives.1
3 Termes et définitions .1
4 Principe.1
5 Réactifs et matériaux .2
6 Appareillage .3
7 Échantillonnage.3
8 Préparation de l'échantillon pour essai .3
9 Mode opératoire.3
9.1 Préparation de gel de silice 60 imprégné de nitrate d'argent .3
9.2 Garnissage de la colonne.4
9.3 Isolement des cires .4
9.4 Détermination de la teneur en cires par chromatographie en phase gazeuse .4
10 Fidélité .7
10.1 Essai interlaboratoires.7
10.2 Répétabilité .7
10.3 Reproductibilité .7
11 Rapport d'essai.7
Annexe A (informative) Chromatogrammes.8
Annexe B (informative) Résultats des essais interlaboratoires.12
Annexe C (informative) Préparation d'un étalon de cire de tournesol cristalline .13
Bibliographie.17
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
Dans d'autres circonstances, en particulier lorsqu'il existe une demande urgente du marché, un comité
technique peut décider de publier d'autres types de documents:
⎯ une Spécification publiquement disponible ISO (ISO/PAS) représente un accord entre les experts dans
un groupe de travail ISO et est acceptée pour publication si elle est approuvée par plus de 50 % des
membres votants du comité dont relève le groupe de travail;
⎯ une Spécification technique ISO (ISO/TS) représente un accord entre les membres d'un comité technique
et est acceptée pour publication si elle est approuvée par 2/3 des membres votants du comité.
Une ISO/PAS ou ISO/TS fait l'objet d'un examen après trois ans afin de décider si elle est confirmée pour trois
nouvelles années, révisée pour devenir une Norme internationale, ou annulée. Lorsqu'une ISO/PAS ou
ISO/TS a été confirmée, elle fait l'objet d'un nouvel examen après trois ans qui décidera soit de sa
transformation en Norme internationale soit de son annulation.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO/TS 23647 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 11,
Corps gras d'origines animale et végétale.
iv © ISO 2010 – Tous droits réservés
Introduction
Les corps gras d'origine végétale comprennent principalement des triacylglycérols. Toutefois, ils contiennent
aussi de petites quantités de substances non glycéridiques souvent appelées constituants mineurs. La
composition de ces constituants mineurs (par exemple stérols, esters de stérols, alcools triterpéniques et
cires) fournit des informations très caractéristiques sur l'identité des huiles. Étant donné que les étapes
physiques et chimiques du traitement des corps gras d'origine végétale peuvent altérer leur composition et
leur teneur, l'analyse de ces composants mineurs peut être adéquatement appliquée pour caractériser les
étapes de traitement ayant permis d'obtenir une huile.
Les cires sont des composés naturels se trouvant dans diverses huiles végétales et peuvent facilement
cristalliser à basse température, donnant un aspect trouble. Bien souvent, l'élimination de la cire constitue une
partie du processus de raffinage des huiles végétales (par exemple huiles de tournesol, de son de riz, de
maïs) et son efficacité nécessite d'être mesurée.
La présente Spécification technique ne couvre pas l'analyse des cires d'huile d'olive.
À ce jour, il n'existe aucune méthode officielle fiable pour mesurer la teneur et la composition en cires des
corps gras d'origine végétale, excepté l'huile d'olive. Le «cold test» fournit un résultat qui n'est ni qualitatif ni
quantitatif; les méthodes développées pour les huiles d'olive ne sont pas applicables aux huiles de graines
oléagineuses et peuvent engendrer de nombreux problèmes lors de l'interprétation des résultats. Il est
nécessaire, tant d'un point de vue industriel que commercial, de disposer d'une Norme internationale qui soit
applicable aux corps gras d'origine végétale bruts, dégommés, pré-décirés, décirés et totalement raffinés.
Les cires de différents corps gras d'origine végétale sont séparées des triacylglycérols et d'autres composés
non glycéridiques contenant des doubles liaisons insaturées par chromatographie sur colonne en utilisant un
garnissage de colonne mixte constitué de gel de silice et de gel de silice imprégné d'AgNO .
La fraction de cire est ensuite analysée par chromatographie en phase gazeuse sur colonne capillaire. La
méthode donne également des informations sur la teneur totale en cires ainsi que sur leur composition. Les
informations données par la méthode peuvent être facilement utilisées pour contrôler la qualité de l'huile et
suivre l'efficacité du processus de décirage.
SPÉCIFICATION TECHNIQUE ISO/TS 23647:2010(F)
Corps gras d'origine végétale — Détermination de la teneur en
cires par chromatographie en phase gazeuse
1 Domaine d'application
La présente Spécification technique spécifie une méthode de chromatographie en phase gazeuse pour
déterminer la teneur en cires des huiles végétales brutes, dégommées, neutralisées, décirées et totalement
raffinées comme les huiles de tournesol, de soja, de colza, de maïs et de son de riz. Elle ne s'applique pas
aux huiles d'olive ou aux huiles de grignons d'olive.
Les cires sont des esters d'acides gras et d'alcools gras à chaîne longue (ayant une chaîne carbonée saturée
C ou plus longue).
La teneur en cires est exprimée en milligrammes par kilogramme d'huile.
2 Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l'application du présent document. Pour les
références datées, seule l'édition citée s'applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document de référence s'applique (y compris les éventuels amendements).
ISO 661, Corps gras d'origines animale et végétale — Préparation de l'échantillon pour essai
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s'appliquent.
3.1
teneur en cires
fraction massique de ces substances dans l'échantillon, déterminée dans les conditions spécifiées dans la
présente Spécification technique
NOTE La teneur en cires est exprimée en milligrammes par kilogramme d'huile.
4 Principe
Les cires sont séparées par chromatographie sur colonne en utilisant un garnissage de colonne mixte
constitué de gel de silice et de gel de silice imprégné d'AgNO . La détermination de la teneur en cires est
effectuée par chromatographie en phase gazeuse sur colonne capillaire (CG), en utilisant un étalon interne
préalablement ajouté à l'huile.
5 Réactifs et matériaux
AVERTISSEMENT — L'attention est attirée sur les réglementations qui s'appliquent à la manipulation
de substances dangereuses. Des mesures de sécurité d'ordre technique, organisationnel et personnel
doivent être suivies.
Au cours de l'analyse, sauf indication contraire, utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique
reconnue appropriés à la chromatographie sur colonne CLHP et de l'eau distillée ou déminéralisée ou de l'eau
de pureté équivalente.
5.1 n-Hexane.
5.2 Dichlorométhane.
5.3 n-Heptane.
5.4 Chloroforme.
5.5 Gel de silice 60, d'une granulométrie de 0,063 mm à 0,200 mm (70 mesh à 230 mesh), tel que Merck
1)
n° 107734 .
5.6 Nitrate d'argent (AgNO ).
2)
5.7 Hexatriacontane (paraffine C ).
5.7.1 Solution d'étalon interne, concentration en masse 0,1 mg/ml dans du n-heptane.
5.7.2 Étalon pour déterminer le facteur de réponse, concentration en masse 1 mg/ml dans du n-heptane.
3)
5.8 Étalons pour identifier les pics du chromatogramme en phase gazeuse, cires pures , par exemple
C , C .
40 44
5.8.1 Étalon pour déterminer le facteur de réponse, stéarate de stéaryle ou ester stéarylique d'acide
stéarique (cire C ), concentration en masse 1 mg/ml dans du chloroforme.
5.9 Cire de tournesol cristallisée, préparée à partir de gâteau de décirage ou d'huile de tournesol brute
en utilisant la cristallisation. Voir l'Annexe C pour la préparation.
5.10 Coton, de qualité chirurgicale, non absorbant.
1) Merck n° 107734 est l'appellation commerciale d'un produit fourni par Merck. Cette information est donnée à
l'intention des utilisateurs de la présente Spécification technique et ne signifie null
...
SPÉCIFICATION ISO/TS
TECHNIQUE 23647
Première édition
2010-10-01
Corps gras d'origine végétale —
Détermination de la teneur en cires par
chromatographie en phase gazeuse
Vegetable fats and oils — Determination of wax content by gas
chromatography
Numéro de référence
©
ISO 2010
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E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2010 – Tous droits réservés
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction.v
1 Domaine d'application .1
2 Références normatives.1
3 Termes et définitions .1
4 Principe.1
5 Réactifs et matériaux .2
6 Appareillage .3
7 Échantillonnage.3
8 Préparation de l'échantillon pour essai .3
9 Mode opératoire.3
9.1 Préparation de gel de silice 60 imprégné de nitrate d'argent .3
9.2 Garnissage de la colonne.4
9.3 Isolement des cires .4
9.4 Détermination de la teneur en cires par chromatographie en phase gazeuse .4
10 Fidélité .7
10.1 Essai interlaboratoires.7
10.2 Répétabilité .7
10.3 Reproductibilité .7
11 Rapport d'essai.7
Annexe A (informative) Chromatogrammes.8
Annexe B (informative) Résultats des essais interlaboratoires.12
Annexe C (informative) Préparation d'un étalon de cire de tournesol cristalline .13
Bibliographie.17
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
Dans d'autres circonstances, en particulier lorsqu'il existe une demande urgente du marché, un comité
technique peut décider de publier d'autres types de documents:
⎯ une Spécification publiquement disponible ISO (ISO/PAS) représente un accord entre les experts dans
un groupe de travail ISO et est acceptée pour publication si elle est approuvée par plus de 50 % des
membres votants du comité dont relève le groupe de travail;
⎯ une Spécification technique ISO (ISO/TS) représente un accord entre les membres d'un comité technique
et est acceptée pour publication si elle est approuvée par 2/3 des membres votants du comité.
Une ISO/PAS ou ISO/TS fait l'objet d'un examen après trois ans afin de décider si elle est confirmée pour trois
nouvelles années, révisée pour devenir une Norme internationale, ou annulée. Lorsqu'une ISO/PAS ou
ISO/TS a été confirmée, elle fait l'objet d'un nouvel examen après trois ans qui décidera soit de sa
transformation en Norme internationale soit de son annulation.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO/TS 23647 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 11,
Corps gras d'origines animale et végétale.
iv © ISO 2010 – Tous droits réservés
Introduction
Les corps gras d'origine végétale comprennent principalement des triacylglycérols. Toutefois, ils contiennent
aussi de petites quantités de substances non glycéridiques souvent appelées constituants mineurs. La
composition de ces constituants mineurs (par exemple stérols, esters de stérols, alcools triterpéniques et
cires) fournit des informations très caractéristiques sur l'identité des huiles. Étant donné que les étapes
physiques et chimiques du traitement des corps gras d'origine végétale peuvent altérer leur composition et
leur teneur, l'analyse de ces composants mineurs peut être adéquatement appliquée pour caractériser les
étapes de traitement ayant permis d'obtenir une huile.
Les cires sont des composés naturels se trouvant dans diverses huiles végétales et peuvent facilement
cristalliser à basse température, donnant un aspect trouble. Bien souvent, l'élimination de la cire constitue une
partie du processus de raffinage des huiles végétales (par exemple huiles de tournesol, de son de riz, de
maïs) et son efficacité nécessite d'être mesurée.
La présente Spécification technique ne couvre pas l'analyse des cires d'huile d'olive.
À ce jour, il n'existe aucune méthode officielle fiable pour mesurer la teneur et la composition en cires des
corps gras d'origine végétale, excepté l'huile d'olive. Le «cold test» fournit un résultat qui n'est ni qualitatif ni
quantitatif; les méthodes développées pour les huiles d'olive ne sont pas applicables aux huiles de graines
oléagineuses et peuvent engendrer de nombreux problèmes lors de l'interprétation des résultats. Il est
nécessaire, tant d'un point de vue industriel que commercial, de disposer d'une Norme internationale qui soit
applicable aux corps gras d'origine végétale bruts, dégommés, pré-décirés, décirés et totalement raffinés.
Les cires de différents corps gras d'origine végétale sont séparées des triacylglycérols et d'autres composés
non glycéridiques contenant des doubles liaisons insaturées par chromatographie sur colonne en utilisant un
garnissage de colonne mixte constitué de gel de silice et de gel de silice imprégné d'AgNO .
La fraction de cire est ensuite analysée par chromatographie en phase gazeuse sur colonne capillaire. La
méthode donne également des informations sur la teneur totale en cires ainsi que sur leur composition. Les
informations données par la méthode peuvent être facilement utilisées pour contrôler la qualité de l'huile et
suivre l'efficacité du processus de décirage.
SPÉCIFICATION TECHNIQUE ISO/TS 23647:2010(F)
Corps gras d'origine végétale — Détermination de la teneur en
cires par chromatographie en phase gazeuse
1 Domaine d'application
La présente Spécification technique spécifie une méthode de chromatographie en phase gazeuse pour
déterminer la teneur en cires des huiles végétales brutes, dégommées, neutralisées, décirées et totalement
raffinées comme les huiles de tournesol, de soja, de colza, de maïs et de son de riz. Elle ne s'applique pas
aux huiles d'olive ou aux huiles de grignons d'olive.
Les cires sont des esters d'acides gras et d'alcools gras à chaîne longue (ayant une chaîne carbonée saturée
C ou plus longue).
La teneur en cires est exprimée en milligrammes par kilogramme d'huile.
2 Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l'application du présent document. Pour les
références datées, seule l'édition citée s'applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document de référence s'applique (y compris les éventuels amendements).
ISO 661, Corps gras d'origines animale et végétale — Préparation de l'échantillon pour essai
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s'appliquent.
3.1
teneur en cires
fraction massique de ces substances dans l'échantillon, déterminée dans les conditions spécifiées dans la
présente Spécification technique
NOTE La teneur en cires est exprimée en milligrammes par kilogramme d'huile.
4 Principe
Les cires sont séparées par chromatographie sur colonne en utilisant un garnissage de colonne mixte
constitué de gel de silice et de gel de silice imprégné d'AgNO . La détermination de la teneur en cires est
effectuée par chromatographie en phase gazeuse sur colonne capillaire (CG), en utilisant un étalon interne
préalablement ajouté à l'huile.
5 Réactifs et matériaux
AVERTISSEMENT — L'attention est attirée sur les réglementations qui s'appliquent à la manipulation
de substances dangereuses. Des mesures de sécurité d'ordre technique, organisationnel et personnel
doivent être suivies.
Au cours de l'analyse, sauf indication contraire, utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique
reconnue appropriés à la chromatographie sur colonne CLHP et de l'eau distillée ou déminéralisée ou de l'eau
de pureté équivalente.
5.1 n-Hexane.
5.2 Dichlorométhane.
5.3 n-Heptane.
5.4 Chloroforme.
5.5 Gel de silice 60, d'une granulométrie de 0,063 mm à 0,200 mm (70 mesh à 230 mesh), tel que Merck
1)
n° 107734 .
5.6 Nitrate d'argent (AgNO ).
2)
5.7 Hexatriacontane (paraffine C ).
5.7.1 Solution d'étalon interne, concentration en masse 0,1 mg/ml dans du n-heptane.
5.7.2 Étalon pour déterminer le facteur de réponse, concentration en masse 1 mg/ml dans du n-heptane.
3)
5.8 Étalons pour identifier les pics du chromatogramme en phase gazeuse, cires pures , par exemple
C , C .
40 44
5.8.1 Étalon pour déterminer le facteur de réponse, stéarate de stéaryle ou ester stéarylique d'acide
stéarique (cire C ), concentration en masse 1 mg/ml dans du chloroforme.
5.9 Cire de tournesol cristallisée, préparée à partir de gâteau de décirage ou d'huile de tournesol brute
en utilisant la cristallisation. Voir l'Annexe C pour la préparation.
5.10 Coton, de qualité chirurgicale, non absorbant.
1) Merck n° 107734 est l'appellation commerciale d'un produit fourni par Merck. Cette information est donnée à
l'intention des utilisateurs de la présente Spécification technique et ne signifie null
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.