ISO 14501:1998

Milk and milk powder — Determination of aflatoxin M1 content — Clean-up by immunoaffinity chromatography and determination by high-performance liquid chromatography

Lait et lait en poudre — Détermination de la teneur en aflatoxine M1 — Purification par chromatographie d'immunoaffinité et détermination par chromatographie en phase liquide à haute performance

General Information

• Status: Withdrawn
• Publication Date: 18-Nov-1998
• Withdrawal Date: 18-Nov-1998
• ICS: 67.100.10 - Milk and processed milk products
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 5 - Milk and milk products
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 5 - Milk and milk products
• Current Stage: 9599 - Withdrawal of International Standard
• Completion Date: 11-Oct-2007

Relations

• Revised: ISO 14501:2007 - Milk and milk powder — Determination of aflatoxin M1 content — Clean-up by immunoaffinity chromatography and determination by high-performance liquid chromatography
• Effective Date: 15-Apr-2008
• Consolidates: ISO/IEC 7816-3:1989 - Identification cards — Integrated circuit(s) cards with contacts — Part 3: Electronic signals and transmission protocols
• Effective Date: 06-Jun-2022

Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 14501
First edition
1998-11-15
Milk and milk powder — Determination of
aflatoxin M content — Clean-up
1
by immunoaffinity chromatography and
determination by high-performance liquid
chromatography
Lait et lait en poudre — Détermination de la teneur en aflatoxine M —
1
Purification par chromatographie d’immunoaffinité et détermination par
chromatographie en phase liquide à haute performance
A
Reference number
ISO 14501:1998(E)

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ISO 14501:1998(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide
federation of national standards bodies (ISO member bodies). The work of
preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which
a technical committee has been established has the right to be represented
on that committee. International organizations, governmental and non-
governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO
collaborates closely with the International Electrotechnical Commission
(IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in
the ISO/IEC Directives, Part 3.
Draft International Standards adopted by the technical committees are
circulated to the member bodies for voting. Publication as an International
Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting
a vote.
International Standard ISO 14501 was prepared by Technical Committee
ISO/TC 34, Agricultural food products, Subcommittee SC 5, Milk and milk
products, in collaboration with International Dairy Federation (IDF) and the
Association of Official Analytical Chemists (AOAC International), and will
also be published by these organizations.
Annex A of this International Standard is for information only.
©  ISO 1998
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced
or utilized in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying and
microfilm, without permission in writing from the publisher.
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Printed in Switzerland
ii

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INTERNATIONAL STANDARD  © ISO ISO 14501:1998(E)
Milk and milk powder — Determination of aflatoxin M content —
1
Clean-up by immunoaffinity chromatography and determination by
high-performance liquid chromatography
WARNINGS
1 The method described in this International Standard requires the use of chloroform and aflatoxin M
1
solutions. Chloroform is an ozone-depleting substance. Aflatoxins are carcinogenic to human subjects.
Attention is drawn to the statement made by the International Agency for Research on Cancer (WHO) [4, 5].
2 Adequately protect from daylight the laboratory where the analyses are performed, and keep
aflatoxin standard solutions protected from light, for example by using aluminium foil.
3 The use of non-acid-washed glassware (e.g. tubes, vials, flasks, beakers, syringes) for aqueous
aflatoxin solutions may cause loss of aflatoxin. Moreover, brand new laboratory glassware coming into
contact with aqueous solutions of aflatoxin should be soaked in dilute acid (e.g. sulfuric acid, 2 mol/l) for
several hours, then rinsed well with distilled water to remove all traces of acid (check to ensure pH is in the
range 6 to 8).
4 Use a decontamination procedure for laboratory wastes such as solid compounds, solutions in
organic solvents, glassware, aqueous solutions and spills. The procedure for decontamination was
developed and validated in a programme of the International Agency for Research on Cancer (WHO) [4, 5]
1 Scope
This International Standard specifies a method for the determination of aflatoxin M
content of milk and milk
1
powder. The lowest level of validation is 0,08 mg/kg for whole milk powder i.e. 0,008 mg/l for reconstituted liquid milk.
The method is also applicable to low fat milk, skimmed milk, low fat milk powder and skimmed milk powder.
2 Term and definition
For the purposes of this International Standard, the following term and definition apply.
2.1
aflatoxin M content
1
mass fraction of substances determined by the procedure specified in this International Standard
NOTE The aflatoxin M content is expressed as micrograms per litre or micrograms per kilogram.
1
1

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3 Principle
Aflatoxin M is extracted by passing the test portion through an immunoaffinity column. The column contains
1
specific antibodies bound onto a solid support material. As the sample passes through the column, the antibodies
selectively bind with any aflatoxin M (antigen) present and form an antibody-antigen complex. All other
1
components of the sample matrix are washed off the column with water. Then aflatoxin M is eluted from the
1
column and the eluate is collected. The amount of aflatoxin M present in this eluate is determined by means of
1
high-performance liquid chromatography (HPLC) coupled with fluorimetric detection.
4 Reagents
Use only reagents of recognized analytical grade, unless otherwise specified, and distilled or demineralized water or
water of equivalent purity.
4.1 Immunoaffinity column
The immunoaffinity column shall contain antibodies against aflatoxin M . The column shall have a maximum
1
capacity of not less than 100 ng of aflatoxin M (which corresponds to 2 μg/l when a volume of 50 ml of test portion
1
ed), and shall give a recovery of not less than 80 % for aflatoxin M when a standard solution containing 4 ng
is appli
1
of toxin is applied (which corresponds to 80 ng/l when a volume of 50 ml of sample is applied). Any immunoaffinity
column meeting the performance specifications mentioned above can be used. The performance of the columns
shall be checked regularly and at least once for every batch of columns (see 4.1.1 and 4.1.2).
4.1.1 Capacity check
By means of a pipette (5.4) transfer 1,0 ml of the stock aflatoxin M solution (4.5.2) to a 20 ml conical tube (5.9).
1
Evaporate the solution slowly to dryness using a constant stream of nitrogen (4.3) and dissolve the residue obtained
in 10 ml of the 10 % acetonitrile solution (4.2.2). Shake vigorously.
Add this solution to 40 ml of water. Mix well and apply the whole volume to the immunoaffinity column. Be careful to
follow the recommendations given by the manufacturer for the use of the columns. Wash the column, elute the toxin
and determine the amount bound to the column by HPLC after suitable dilution of the final eluate.
Calculate the recovery for the aflatoxin. Compare the result with the specification under 4.1.
4.1.2 Recovery check
By means of a pipette (5.4) dilute 0,8 ml of the 0,005 mg/ml aflatoxin M working solution (4.5.3) to 10 ml with water.
1
Mix well and apply the whole volume to the immunoaffinity column. Be careful to follow the recommendations given
by the manufacturer for the use of the columns. Wash the column, elute the toxin and determine the amount bound
to the column by HPLC after suitable dilution of the final eluate. Calculate the recovery for the aflatoxin. Compare
the result with the specification under 4.1.
4.2 Acetonitrile, pure, HPLC grade.
4.2.1 Acetonitrile, in water, 25 % solution by volume.
Add 250 ml of acetonitrile (4.2) to 750 ml of water (degas before use).
4.2.2 Acetonitrile, in water, 10 % solution by volume.
Add 100 ml of acetonitrile (4.2) to 900 ml of water (degas before use).
2

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4.3 Nitrogen gas
4.4 Chloroform, stabilized with 0,5 % to 1,0 % ethanol (by mass).
4.5 Aflatoxin M standard solutions
1
4.5.1 Calibrant solution
Standard solution of aflatoxin M in chloroform with a nominal concentration of 10 μg/ml.
1
Determine the concentration by measurement of its absorbance at the wavelength for maximum absorption as
follows.
By using the spectrometer (5.11), record the absorbance of the calibrant solution against chloroform as blank
between 340 nm and 370 nm. Measure the absorbance, A, at the wavelength of maximum absorption, λ , close
max
to 360 nm. Calculate the concentration, c in micrograms per millilitre, using the following equation:
i
c = A · M · 100/ε
i
where
A is the numerical value of the absorbance at λ
max;
M is the numerical value of the molar mass of the aflatoxin M in grams per mole (M = 328 g/mol);
1
ε is the numerical value of the absorption coefficient of the toxin in chloroform, in square metres per mole
2
(ε = 1 995 m /mol).
4.5.2 Stock solution
After checking the concentration of the calibrant solution (4.5.1), dilute the calibrant solution in chloroform to give an
aflatoxin M stock solution of 0,1 μg/ml. The stock solution shall be well-stoppered and wrapped in aluminium foil to
1
exclude light.
Store the stock solution in a refrigerator at a temperature below 5 °C in the dark. Under these conditions the stock
solution is stable for about 2 months. After 2 months, the stability should be checked.
4.5.3 Working solutions of aflatoxin M
1
Before preparing working dilutions of the aflatoxin M standard solution, allow the stock solution (4.5.2) to attain
1
ambient temperature before removing aliquots of the solution for subsequent dilution. Prepare working solutions on
the day of use.
Prepare a solution with a concentration of 0,005 μg/ml as follows. By means of a pipette (5.4) transfer 1,0 ml of the
stock solution (4.5.2) to a 20 ml conical tube (5.9). Evaporate the solution to dryness using a gentle stream of
nitrogen (4.3) and dissolve the residue obtained in 20,0 ml of the diluted acetonitrile (4.2.2). Shake occasionally
over a period of 30 min.
Care should be taken when evaporating the solution to dryness to ensure the temperature does not drop so low that
condensation occurs.
Use this diluted solution for the preparation of a series of appropriate dilutions of aflatoxin M standard solution to
1
provide, depending on the injection loop volume, for injection of 0,05 ng, 0,1 ng, 0,2 ng and 0,4 ng of aflatoxin M .
1
Dilute by using diluted acetonitrile solution (4.2.2).
5 Apparatus
Usual laboratory equipment and, in particular, the following.
3

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ISO 14501:1998(E)
5.1  Disposable syringes, of capacities 10 ml and 50 ml.
1)
5.2  Vacuum system (e.g. Büchner flask, Vac-Elute system or peristaltic pump).
5.3  Centrifuge, capable of producing a radial acceleration of 4 000 · g.
5.4  Pipettes, of capacities 1,0 ml, 2,0 ml and 50,0 ml.
, of capacity 250 ml.
5.5  Glass beakers
5.6  Volumetric flask, of capacity 100 ml.
, capable of operating at 30 C 2 C, 50 C 2 C, and between 35 C and 37 C.
5.7 Water baths ° – ° ° – ° ° °
1)
5.8  Filter paper (Whatman No. 4 , or equivalent).
5.9  Graduated conical glass tubes, with ground glass neck and stopper, of capacities of 5 ml, 10 ml and 20 ml.
5.10  HPLC-equipment
5.10.1  Pulse-free pump, suitable for constant volume flow rate of about 1 ml/min.
5.10.2  Injector system, with fixed or variable injection volume loop, suitable for injection of 50 μl to 500 μl.
5.10.3  Reversed-phase HPLC analytical column, with 3 μm or 5 μm packing of octadecyl silicagel plus guard
column filled with reverse-phase material.
5.10.4  Fluorescence detector, capable of providing about 365 nm excitation and 435 nm emission wavelengths
allowing detection of (5 · noise) aflatoxin M when 0,02 ng is injected under suitable chromatographic conditions.
1
5.10.5  Strip chart recorder, with a printer or plotter, or electronic integrator or computer-based data processing
system.
5.11  Spectrometer, capable of measuring at wavelengths from 200 nm to 400 nm, with quartz face cells of optical
path length 1 cm.
5.12  Balance, capable of weighing to the nearest 0,1 g with readability to 0,01 g.
6 Sampling
Sampling is not part of the method specified in this International Standard. A recommended sampling method is
given in ISO 707 [1].
It is important that the laboratory receive a sample which is truly representative and has not been damaged or
changed during tra
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 14501
Première édition
1998-11-15
Lait et lait en poudre — Détermination de
la teneur en aflatoxine M — Purification
1
par chromatographie d’immunoaffinité
et détermination par chromatographie en
phase liquide à haute performance
Milk and milk powder — Determination of aflatoxin M content —
1
Clean-up by immunoaffinity chromatography and determination by high-
performance liquid chromatography
A
Numéro de référence
ISO 14501:1998(F)

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ISO 14501:1998(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération
mondiale d'organismes nationaux de normalisation (comités membres de
l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une
étude a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les
organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales,
en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore
étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI) en
ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles
données dans les Directives ISO/CEI, Partie 3.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques
sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication comme
Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale ISO 14501 a été élaborée par le comité technique
ISO/TC 34, Produits agricoles alimentaires, sous-comité SC 5, Lait et
produits laitiers, en collaboration avec la Fédération internationale de
laiterie (FIL) et l’AOAC International, et sera également publiée par ces
organisations.
L’annexe A de la présente Norme internationale est donnée uniquement à
titre d’information.
©  ISO 1998
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publi-
cation ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun pro-
cédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l'accord
écrit de l'éditeur.
Organisation internationale de normalisation
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NORME INTERNATIONALE  © ISO ISO 14501:1998(F)
Lait et lait en poudre — Détermination de la teneur en
aflatoxine M — Purification par chromatographie d’immunoaffinité
1
et détermination par chromatographie en phase liquide à haute
performance
AVERTISSEMENTS
1 La méthode décrite dans la présente Norme internationale nécessite l'utilisation de solution de
chloroforme et d'aflatoxine M . Le chloroforme est une substance appauvrissant l'ozone. Les aflatoxines
1
présentent un danger cancérigène pour l'homme. On attire l'attention sur la déclaration de l'Agence
internationale pour la recherche sur le cancer (OMS) [4, 5].
2 Protéger correctement de la lumière du jour le laboratoire dans lequel sont effectuées les analyses
et conserver les solutions étalons d'aflatoxine à l'abri de la lumière (par exemple, à l'aide d'une feuille
d'aluminium).
3 L'utilisation d'une verrerie lavée avec des produits non acides (par exemple, tubes, flacons, ballons
et fioles, béchers, seringues) pour les solutions aqueuses d'aflatoxine peut provoquer une perte
d'aflatoxine. De plus, il convient de laisser tremper pendant plusieurs heures dans de l'acide dilué (par
exemple de l'acide sulfurique à 2 mol/l) la verrerie neuve de laboratoire entrant en contact avec les
solutions aqueuses d'aflatoxine destinées au stockage, puis de les rincer à l'eau distillée afin de retirer
toute trace d'acide (vérifier que le pH se situe entre 6 et 8).
4 Utiliser une méthode de décontamination des déchets de laboratoire tels que composés solides,
solutions dans les solvants organiques, verrerie, solutions aqueuses et pilules. La méthode de
décontamination a été mise au point et validée dans un programme de l'Agence internationale pour la
recherche contre le cancer (OMS) [4, 5].
1 Domaine d’application
La présente Norme internationale spécifie une méthode pour le dosage de l'aflatoxine M dans le lait et le lait en
1
poudre. Le plus bas niveau validé se situe à 0,08 μg/kg de poudre de lait entier, ce qui correspond à 0,008 μg/l de
lait liquide reconstitué. La méthode est également applicable au lait à faible teneur en matière grasse, au lait
écrémé et au lait en poudre à faible teneur en matière grasse ou écrémé
2 Terme et définition
Pour les besoins de la présente Norme internationale, le terme et la définition suivants s'appliquent.
1

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© ISO
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2.1
teneur en aflatoxine M
1
fraction massique de substances, déterminée selon le mode opératoire prescrit dans la présente Norme
internationale
NOTE La teneur en aflatoxine M est exprimée respectivement en microgrammes par litre (μg/l) ou en microgrammes par
1
kilogramme (μg/kg).
3 Principe
L’aflatoxine M est extraite par passage de la prise d'essai à travers une colonne d'immunoaffinité. La colonne
1
contient des anticorps spécifiques fixés sur un support solide. Au fur et à mesure que l'échantillon traverse la
colonne, les anticorps se lient de manière sélective à toute aflatoxine M (antigène) présente et constituent un
1
complexe anticorps-antigène. Tous les autres composants de la matrice échantillon sont éliminés de la colonne
avec de l'eau. L'aflatoxine M est ensuite éluée de la colonne et l'éluat recueilli. La quantité d'aflatoxine M présente
1 1
dans l'éluat est déterminée par chromatographie en phase liquide à haute performance (CLHP) associée à une
détection fluorimétrique.
4 Réactifs
Sauf indication contraire, utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique reconnue, et de l'eau distillée ou
déminéralisée ou de l’eau de pureté équivalente.
4.1 Colonne d'immunoaffinité
La colonne d'immunoaffinité doit contenir des anticorps anti-aflatoxine M . La capacité ne doit pas être inférieure à
1
100 ng d'aflatoxine M (ce qui correspond à 2 μg/l pour 50 ml de prise d'essai utilisés) et son taux de récupération
1
ne doit pas être inférieur à 80 % d'aflatoxine M en cas d'utilisation d'une solution étalon contenant 4 ng de toxine
1
(ce qui correspond à 80 ng/l pour 50 ml d'échantillon utilisés). Toute colonne d'immunoaffinité répondant aux
spécifications de performance susmentionnées peut être utilisée. Les performances des colonnes doivent être
contrôlées régulièrement et au moins une fois pour chaque lot de colonnes (voir 4.1.1 et 4.1.2).
4.1.1 Contrôle de la capacité
À l'aide d'une pipette (5.4), transvaser 2,0 ml de la solution de garde d'aflatoxine M (4.5.2) dans un tube conique
1
de 20 ml (5.9). Laisser la solution s'évaporer jusqu'à siccité sous flux constant d’azote (4.3) et reprendre le résidu
obtenu dans 10 ml de solution d'acétonitrile à 10 % (4.2.2) et bien mélanger.
Ajouter cette solution à 40 ml d'eau. Bien mélanger et verser la totalité du volume dans la colonne d'immunoaffinité.
Veiller à suivre les recommandations données par le fabricant pour l'utilisation des colonnes. Laver la colonne, éluer
la toxine et déterminer la quantité fixée sur la colonne par CLHP après dilution appropriée de l'éluat final.
Calculer le taux de récupération d'aflatoxine. Comparer le résultat à la spécification donnée en 4.1.
4.1.2 Contrôle du taux de récupération
À l'aide d'une pipette (5.4), diluer 0,8 ml de la solution de travail d'aflatoxine M à 0,005 μg/ml (4.5.3) à 10 ml avec
1
de l'eau. Bien mélanger et verser la totalité du volume dans la colonne d'immunoaffinité. Veiller à suivre les
recommandations données par le fabricant pour l'utilisation des colonnes. Laver la colonne, éluer la toxine et
déterminer la quantité fixée sur la colonne par CLHP après dilution appropriée de l'éluat final. Calculer le taux de
récupération d'aflatoxine. Comparer le résultat à la spécification donnée en 4.1.
2

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ISO 14501:1998(F)
4.2 Acétonitrile pur, qualité pour HPLC.
4.2.1 Acétonitrile, mélange aqueux à 25 % en volume.
Ajouter 250 ml d'acétonitrile (4.2) à 750 ml d'eau.
4.2.2 Acétonitrile, mélange aqueux à 10 % en volume.
Ajouter 100 ml d'acétonitrile (4.2) à 900 ml d'eau.
4.3 Azote gaz.
4.4 Chloroforme, stabilisé par 0,5 % à 1,0 % en masse d'éthanol.
4.5 Solutions étalons d'aflatoxine M
1
4.5.1 Solution mère
Solution étalon d'aflatoxine M dans du chloroforme à une concentration nominale de 10 μg/ml.
1
Déterminer la concentration en mesurant l'absorbance à la longueur d'onde correspondant à l'absorption maximale
de la manière suivante.
À l'aide du spectromètre (5.11), enregistrer l'absorbance de la solution étalon par rapport au chloroforme comme
blanc entre 340 nm et 370 nm. Mesurer l'absorbance, A, à la longueur d'onde correspondant à l'absorption
maximale λ , proche de 360 nm. Calculer la concentration, c , exprimée en microgrammes par millilitre (μg/ml), à
max i
l’aide de l'équation suivante:
c = A × M × 100/ε
i
où
A est la valeur numérique de l'absorbance à λ
max
;
M est la valeur numérique de la masse molaire de l'aflatoxine M , exprimée en grammes par mole (g/mol)
1
(M = 328 g/mol);
ε est la valeur numérique du coefficient d'absorption de la toxine dans le chloroforme, exprimée en mètres
² ²
carrés par mole (m /mol) (ε = 1 995 m /mol).
4.5.2 Solution étalon
Après vérification de la solution mère (4.5.1), diluer celle-ci de façon à arriver à une teneur en aflatoxine M de
1
0,1 μg/ml. La fiole contenant la solution étalon doit être bien bouchée et enveloppée dans une feuille d'aluminium à
l'abri de la lumière.
Conserver la solution étalon dans l'obscurité au réfrigérateur à une température inférieure à 5 °C. Dans ces
conditions, la solution étalon est stable pendant 2 mois environ. Au-delà de 2 mois, il convient de vérifier sa stabilité.
4.5.3 Solutions de travail d'aflatoxine M
1
Avant de préparer les dilutions de travail de la solution étalon d'aflatoxine M , laisser la solution étalon (4.5.2)
1
parvenir à température ambiante avant de prélever les parties aliquotes de solution en vue de la dilution. Préparer
les solutions de travail le jour de leur utilisation.
Préparer une solution à 0,005 μg/ml . À l'aide d'une pipette (5.4), introduire 1,0 ml de solution étalon (4.5.2) dans un
tube conique de 20 ml (5.9). Laisser s’évaporer la solution jusqu’à siccité sous un faible courant d'azote (4.3) et
dissoudre le résidu obtenu dans 20,0 ml d'acétonitrile dilué (4.2.2). Agiter de temps en temps pendant 30 min.
3

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Un soin particulier doit être apporté lors de l’évaporation de la solution pour éviter toute perte de toxine et s’assurer
qu’aucune baisse de température ne provoque de la condensation.
Utiliser cette solution diluée pour la préparation d'une série de dilutions appropriées de solution étalon d'aflatoxine
M , afin de permettre, en fonction du volume de la boucle d'injection, l'injection de 0,05 ng, 0,1 ng, 0,2 ng et 0,4 ng
1
d'aflatoxine M . Diluer à l’aide d’acétonitrile dilué (4.2.2).
1
5 Appareillage
Matériel courant de laboratoire, et notamment:
5.1 Seringues à usage unique, de 10 ml et 50 ml de capacité respective.
1)
5.2 Installation de vide (c'est-à-dire ballon de Büchner, système Vac-Elute ou pompe péristaltique).
5.3 Centrifugeuse, pouvant provoquer une accélération radiale de 4 000 × g.
5.4 Pipettes, de 1,0 ml, 2,0 ml et 50,0 ml de capacité respective.
5.5 Béchers en verre, de 250 ml de capacité.
5.6 Fiole jaugée, de 100 ml de capacité.
5.7 Bains d'eau, capable de fonctionner à 30 °C ± 2 °C, 50 °C ± 2 °C et entre 35 °C et 37 °C.
1)
5.8 Papier filtre (Whatman n° 4 ou équivalent).
5.9 Tubes en verre coniques gradués, à col et bouchon en verre rodé, de 5 ml, 10 ml et 20 ml de capacité
respective.
5.10 Appareillage pour CLHP
convenant pour un débit-volume constant d'environ 1 ml/min.
5.10.1 Pompe à flux régulier,
5.10.2 Système d'injection, dont le volume est fixe ou variable, convenant pour une injection de 50 μl à 500 μl.
5.10.3 Colonne analytique pour chromatographie à polarité de phase inversée, garnie de gel de silice
octadécyle de 3 μm ou 5 μm, et avec colonne de garde remplie de matériau à polarité de phase inversée.
5.10.4 Détecteur de fluorescence, pouvant, à des longueurs d'onde d'excitation d'environ 365 nm et d'émission
de 435 nm, permettre la détection (5 × bruit de fond) de 0,02 ng d'aflatoxine M injectée dans des conditions
1
chromatographiques appropriées.
5.10.5 Enregistreur à papier déroulant, ou intégrateur électronique ou système de traitement des données
informatisé.
5.11 Spectromètre, pouvant mesurer des longueurs d'onde comprises de 200 nm à 400 nm, avec cellules en
quartz de 1 cm de parcours optique.
5.12 Balance, pouvant peser à 0,1 g près et ayant une résolution de 0,01 g.

1) Le système Vac-Elute et Whatman sont des exemples de produits appropriés disponibles sur le marché. Cette information
est donnée à l'intention des utilisateurs de la présente Norme internationale et ne signifie nullement que l'ISO approuve ou
recommande l'emploi exclusif des produits ainsi désignés.
4

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ISO 14501:1998(F)
6 Échantillonnage
L'échantillonnage ne fait pas partie de la méthode spécifié
...