ISO 15154:2003

Tobacco — Determination of the content of reducing carbohydrates — Continuous-flow analysis method

ISO 15154:2003 specifies a method for the determination of the content of reducing carbohydrates in tobacco by continuous-flow analysis. This method is applicable to manufactured and unmanufactured tobacco.

Tabac — Détermination de la teneur en hydrates de carbone réducteurs — Méthode par analyse en flux continu

L'ISO 15154:2003 spécifie une méthode pour la détermination de la teneur en hydrates de carbone réducteurs dans le tabac, par analyse en flux continu. Cette méthode est applicable aux tabacs bruts et aux tabacs manufacturés.

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 08-May-2003
• ICS: 65.160 - Tobacco, tobacco products and related equipment
• Technical Committee: ISO/TC 126/SC 2 - Leaf tobacco
• Drafting Committee: ISO/TC 126/SC 2 - Leaf tobacco
• Current Stage: 9093 - International Standard confirmed
• Completion Date: 24-Sep-2020

Relations

• Amended By: ISO 15154:2003/Amd 1:2012 - Tobacco — Determination of the content of reducing carbohydrates — Continuous-flow analysis method — Amendment 1
• Effective Date: 17-Jul-2021

Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 15154
First edition
2003-04-15
Tobacco — Determination of the
content of reducing carbohydrates —
Continuous-flow analysis method
Tabac — Détermination de la teneur en hydrates de carbone
réducteurs — Méthode par analyse en flux continu

Reference number
ISO 15154:2003(E)
©
ISO 2003

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ISO 15154:2003(E)
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Published in Switzerland
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ISO 15154:2003(E)
Contents Page
1 Scope . 1
2 Principle . 1
3 Reagents . 1
4 Apparatus . 2
5 Procedure . 3
6 Calculation . 3
7 Repeatability and reproducibility . 4
8 Test report . 4
Annex A (informative) Prevention of precipitation of PAHBAH . 5
Annex B (informative) Example of continuous-flow analyser . 6
Bibliography . 7
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ISO 15154:2003(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International
Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 15154 was prepared by Technical Committee ISO/TC 126, Tobacco and tobacco products, Subcommittee
SC 2, Leaf tobacco.
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ISO 15154:2003(E)
Introduction
1)
A CORESTA Task Force studied the various widely used procedures for the determination of reducing sugars
in tobacco in order to adopt one of them as the CORESTA Recommended Method. Two procedures were
adopted as ISO 15153 and this International Standard. Studies carried out by the CORESTA Task Force
between 1989 and 1993 have shown that the two methods may not produce identical results. For some
tobaccos the results obtained with the method given in ISO 15153 are higher than those of the method in this
International Standard, because the latter is sensitive to interferences from reducing substances, other than
sugars, present in tobacco. Collaborative studies have shown that when extracting with distilled water,
hydrolysis of sucrose occurs with some tobaccos.
1) CORESTA: Cooperation Centre for Scientific Research Relative to Tobacco.
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 15154:2003(E)
Tobacco — Determination of the content of reducing
carbohydrates — Continuous-flow analysis method
1Scope
This International Standard specifies a method for the determination of the content of reducing carbohydrates in
tobacco by continuous-flow analysis.
This method is applicable to manufactured and unmanufactured tobacco.
2 Principle
A tobacco extract in 5% acetic acid solution is prepared and the content of reducing carbohydrates in the
◦
extract is determined by reaction with p-hydroxybenzoic acid hydrazide. In alkaline medium at 85 C, a yellow
osazone is formed which has an absorption maximum at 410 nm.
3Reagents
All reagents shall be used according to good laboratory practice and existing national regulations. Use distilled
water or water of at least equivalent purity.
3.1 Polyoxyethylene lauryl ether (Brij 35 solution).
Add 1 litre water to 250 g of Brij 35. Warm and stir until dissolved.
3.2 Sodium hydroxide solution, .c(NaOH) = 0,5 mol/l
Prepare 1 litre of 0,5 mol/l sodium hydroxide from ampoules or dissolve 20,0 g of sodium hydroxide in 800 ml of
water. Mix and allow to cool. After total dissolution, add 0,5 ml of Brij 35 solution (3.1) and dilute to 1 litre with
water.
3.3 Calcium chloride solution, .c(CaCl ) = 0,008 mol/l
2
Dissolve 1,75 g calcium chloride hexahydrate in water. Add 0,5 ml of Brij 35 solution (3.1) and dilute to 1 litre
with water.
2)
If a precipitate occurs, filter the solution through a Whatman No. 1 (or equivalent) filter paper.
3.4 Acetic acid solution (CH COOH), volume fraction of 5%.
3
Prepare a 5% (volume fraction) solution of acetic acid from glacial acetic acid. (This is used in the preparation
of standards and samples and for the wash solution for the continuous flow analyser.)
3.5 Dilute hydrochloric acid, .c(HCl) = 0,5 mol/l
Place 500 ml of water in a 1 litre volumetric flask. Slowly add 42 ml of concentrated hydrochloric acid (a mass
fraction of 37 %). Dilute to volume with water.
2) Whatman No. 1 is an example of a suitable product available commercially. This information is given for the convenience
of the users of and does not constitute an endorsement by ISO of this product.
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ISO 15154:2003(E)
3.6 p-Hydroxybenzoic acid hydrazide solution (PAHBAH), (HOC H CONHNH ).
6 4 2
Place 250 ml of dilute hydrochloric acid (3.5) in a 500 ml volumetric flask. Add 25 g of p-hydroxybenzoic acid
hydrazide and allow to dissolve. Add 10,5 g of citric acid monohydrate [HOC(CH COOH) COOH·H O]. Dilute to
2 2 2
◦
volume
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 15154
Première édition
2003-04-15
Tabac — Détermination de la teneur en
hydrates de carbone réducteurs —
Méthode par analyse en flux continu
Tobacco — Determination of the content of reducing carbohydrates —
Continuous-flow analysis method

Numéro de référence
ISO 15154:2003(F)
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ISO 2003

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ISO 15154:2003(F)
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© ISO 2003
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E-mail [e-mail]
Web www.iso.org
Publié en Suisse
©
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ISO 15154:2003(F)
Sommaire Page
1 Domaine d'application . 1
2 Principe . 1
3Réactifs . 1
4 Appareillage . 2
5 Mode opératoire . 3
6 Calculs . 3
7Répétabilité et reproductibilité . 4
8 Rapport d'essai . 4
Annexe A (informative) Prévention de tout précipité de PAHBAH . 5
Annexe B (informative) Exemple d'analyseur à flux continu . 6
Bibliographie . 7
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ISO 15154:2003(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec la
Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de droits
de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir
identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 15154 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 126, Tabac et produits du tabac, sous-comité SC 2,
Tabacs en feuilles.
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iv ISO 2003 – Tous droits réservés

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ISO 15154:2003(F)
Introduction
1)
Un groupe de travail du CORESTA a étudié les différents modes opératoires utilisés pour la détermination des
sucres réducteurs dans le tabac afin d'en retenir un qui deviendra la méthode recommandée par le CORESTA.
Deux modes opératoires ont été adoptés: l'ISO 15153 et la présente Norme internationale. Des études menées
par le groupe de travail du CORESTA entre 1989 et 1993 ont montré que ces deux méthodes peuvent ne pas
donner les mêmes résultats. Pour certains tabacs, les résultats obtenus avec la méthode de l'ISO 15153 sont
plus élevés que ceux obtenus avec la méthode de la présente Norme internationale car la méthode de
l'ISO 15153 est sensible aux interférences dues aux substances réductrices, autres que les sucres et présentes
dans le tabac. Des études interlaboratoires ont montré que l'extraction à l'eau distillée s'accompagne d'une
hydrolyse du saccharose, dans le cas de certains tabacs.
1) CORESTA: Centre de coopération pour les recherches scientifiques relatives au tabac.
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NORME INTERNATIONALE ISO 15154:2003(F)
Tabac — Détermination de la teneur en hydrates de carbone
réducteurs — Méthode par analyse en flux continu
1 Domaine d'application
La présente Norme internationale spécifie une méthode pour la détermination de la teneur en hydrates de
carbone réducteurs dans le tabac, par analyse en flux continu.
La présente méthode est applicable aux tabacs bruts et aux tabacs manufacturés.
2Principe
Un extrait de tabac en solution dans l'acide acétique à 5% est préparé et la teneur en hydrates de carbone
réducteurs de l'extrait est déterminée par réaction avec de l'hydrazide p-hydrobenzoïque. Dans un milieu alcalin
◦
85 C 410 nm
à , se forme une osazone jaune qui possède un maximum d'absorption à .
3Réactifs
Tous les réactifs doivent être utilisés selon les bonnes pratiques de laboratoire et les réglementations
nationales en vigueur. Utiliser de l'eau distillée ou de pureté au moins équivalente.
3.1 Éther laurique de polyoxyéthylène (solution de Brij 35)
Ajouter 1 litre d'eau à 250 g de solution de Brij 35. Chauffer et agiter jusqu'à dissolution.
3.2 Solution d'hydroxyde de sodium, .c(NaOH) = 0,5 mol/l
Préparer 1litre de solution d'hydroxyde de sodium à 0,5 mol/l à partir d'ampoules ou dissoudre 20,0 g
d'hydroxyde de sodium dans 800 ml d'eau. Mélanger et laisser refroidir. Après complète dissolution, ajouter
0,5 ml de solution de Brij 35 (3.1) et compléter à 1 litre avec de l'eau.
3.3 Solution de chlorure de calcium, .c(CaCl ) = 0,008 mol/l
2
Dissoudre 1,75 g de chlorure de calcium hexahydraté dans de l'eau. Ajouter 0,5 ml de solution de Brij 35 (3.1)
et compléter à 1 litre avec de l'eau.
2)
Si un précipité se forme, filtrer la solution à travers un papier-filtre Whatman n° 1 (ou l'équivalent).
3.4 Solution d'acide acétique (CH COOH), 5% en fraction volumique.
3
Préparer une solution d'acide acétique à 5%(fraction volumique) à partir d'acide acétique cristallisable. (Ceci
est utilisé dans la préparation d'étalons, d'échantillons et de la solution de rinçage de l'analyseur à flux continu.)
2) Whatman n° 1 est un exemple de produit approprié disponible sur le marché. Cette information est donnée à l'intention
des utilisateurs de la présente Norme internationale et ne signifie nullement que l'ISO approuve ou recommande l'emploi
exclusif du produit ainsi désigné.
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ISO 2003 – Tous droits réservés 1

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ISO 15154:2003(F)
3.5 Acide chlorhydrique dilué, .c(HCl) = 0,5 mol/l
Verser 500 ml d'eau dans une fiole jaugée de 1 litre. Ajouter lentement 42 ml d'acide chlorhydrique concentré
(37 % en fraction massique). Compléter au volume avec de l'eau.
3.6 Solution d'hydrazide p-hydrobenzoïque (PAHBAH), (HOC H CONHNH ).
6 4 2
Verser 250 ml d'acide chlorhydrique dilué (3.5) dans une fiole jaugée de 500 ml. Ajouter 25 g d'hydrazide
p-hydrobenzoïque et laisser se dissoudre. Ajouter 10,5 g d'acide citrique monohydraté
[HOC(CH COOH) COOH,H O]. Compléter au volume avec de l'acide chlorhydrique dilué (3.5). Conserver à
2 2 2
◦
et sortir du réfrigérateur uniquement le volume nécessaire pour couvrir les besoins journaliers.
5 C
Il
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