ISO 6647:1987

Rice — Determination of amylose content

Riz — Détermination de la teneur en amylose

General Information

• Status: Withdrawn
• Publication Date: 22-Apr-1987
• Withdrawal Date: 22-Apr-1987
• ICS: 67.060 - Cereals, pulses and derived products
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 4 - Cereals and pulses
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 4 - Cereals and pulses
• Current Stage: 9599 - Withdrawal of International Standard
• Completion Date: 10-Apr-1998

Standards Content (Sample)

SO
647
INTERNATIONAL STANDARD
st edition
67-04-15
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION
ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
MEXAYHAPOAHAR OPrAHM3AUMR no CTAHAAPTM3AUMM
Rice - Determination of amylose content
Riz - Détermination de la teneur en amylose
Reference number
IS0 6647 : 1987 (E)
I

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Foreword
IS0 (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of
national standards bodies (IS0 member bodies). The work of preparing International
Standards is normally carried out through IS0 technical committees. Each member
body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, govern-
mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to
the member bodies for approval before their acceptance as International Standards by
the IS0 Council. They are approved in accordance with IS0 procedures requiring at
least 75 % approval by the member bodies voting.
International Standard IS0 6647 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34,
Agricultural food products.
Users should note that all International Standards undergo revision from time to time
and that any reference made herein to any other International Standard implies its
latest edition, unless otherwise stated.
0 International Organization for Standardization, 1987 0
Printed in Switzerland

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IS0 6647 : 1987 (E)
INTERNATIONAL STANDARD
Rice - Determination of amylose content
1 Scope and field of application Sodium hydroxide, 1 mol/l solution.
5.3
This International Standard specifies a method for the deter-
5.4 Sodium hydroxide, 0,09 mol/l solution.
mination of the amylose content of uncooked, milled rice.
5.5 Acetic acid, 1 mol/l solution.
2 Reference
5.6 Iodine solution.
IS0 950, Cereals - Sampling (as grain).
Weigh, to the nearest 5 mg, 2,000 g of potassium iodide in a
weighing bottle fitted with a stopper. Add sufficient water to
3 Definitions
form a saturated solution. Add 0,200 g of iodine, weighed to
the nearest 1 mg. When all the iodine has dissolved, transfer
For the purpose of this International Standard, the following
the solution quantitatively to a 100 ml volumetric flask, make
definitions apply.
up to volume with water and mix.
3.1 amylose : Polysaccharide constituent of starch, the
Prepare a fresh solution on each day of use and protect it from
macromolecules of which have a predominantly linear struc-
light.
ture.
5.7 Potato amylose, free of amylopectin, standard 1 g/l
3.2 amylopectin : Polysaccharide constituent of starch, the
suspension.
macromolecules of which have a branched structure.
5.7.1 Defat the amylose by refluxing with methanol (5.1) for
3.3 milled rice: Rice obtained after a milling operation
16 h in a Soxhlet extractor or for 4 h in a Goldfisch extractor at
which involves removing from the husked rice all or part of its
a rate of 5 to 6 drops/s (see note 1).
pericarp and germ.
5.7.2 Spread the defatted amylose on a tray and leave for 2
4 Principle days to allow evaporation of residual methanol and for moisture
content equilibrium to be reached. Treat the amylopectin (5.8)
Grinding of the rice to a fine flour to destroy the crystallinity of
and the test samples (8.1) similarly (see note 21.
the starch in order to aid complete dispersion and gelatiniza-
tion, followed by defatting of the flour. Dispersion of a test por-
5.7.3 Weigh 100 i 0,5 mg of the defatted and conditioned
tion in sodium hydroxide solution, then addition of an iodine
amylose into a 100 ml volumetric flask. Carefully add 1 mi of
solution to an aliquot portion and spectrometric determination
ethanol (5.21, rinsing down any amylose adhering to the walls
of the absorbance, at 620 nm, of the colour complex formed.
of the flask. Add 9,0 ml of 1 mol/l sodium hydroxide solution
(5.3) and leave at ambient temperature for 15 to 24 h, without
Reading of the amylose content of the sample from a calibra-
shaking to disperse the amylose.
tion graph, prepared using mixtures of amylose and amylopec-
tin to make allowance for the effect of amylopectin on the
Make up to volume with water and mix vigorously.
colour of the amylose-iodine complex of the test solution.
1 ml of this standard suspension contains 1 mg of amylose.
5 Reagents
NOTES
1 The potato amylose should be pure and should be tested by am-
All the reagents used shall be of recognized analytical quality
perometric or potentiometric titration. Some commercial preparations
at least
and the water used shall be distilled water or water of
are impure and would give erroneously high results for the amylose
equivalent purity.
content of rice samples. Pure amylose should bind 19 % to 20 % of its
own mass of iodine.
5.1 Methanol, 85 % ( V/V).
2 Because the test samples, the amylose and the amylopectin are
conditioned in the same environment, no correction for moisture con-
tent is necessary and the results are obtained on a dry milled rice basis.
5.2 Ethanol, 95 % ( V/V).
1

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IS0 6647 : 1987 (E)
After defatting, spread the flour in a thin layer on a dish or
5.8 Amylopectin, standard 1 g/l suspension.
watch glass and leave for 2 days to allow evaporation of
Prepare from milled glutinous (waxy) rice with a starch content residual methanol and for moisture content equilibrium to be
known to be at least 99 % (m/m) amylopectin. Steep the mil- reached (see note 2 to 5.7).
led glutinous rice and blend in a suitable laboratory blender
NOTES
(6.1) to a finely divided state. Remove protein by exhaustive ex-
traction with detergent (sodium dodecylbenzene sulfonate,
1 If it is desired to use a larger test sample which is beyond the
20 g/l solution, with 2 g/l sodium sulfite solution added just
capacity of the micro-mill, divide the sample into portions of suitable
size and, after grinding each, thoroughly mix the portions of flour ob-
before use) or alkali (sodium hydroxide, 3 g/l solution), wash
tained. Alternatively the larger sample could be ground in a macro-mill
and then defat by refluxing with methanol (5.1) for 16 h in a
capable of providing a homogeneous flour of the particle size required.
Soxhlet extractor or for 4 h in a Goldfisch extractor at a rate of
5 to
...

IS0
NORME INTERNATIONALE
6647
Première édition
1987-04-15
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION
ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
MEXAYHAPOflHAR OPTAHM3AYMR no CTAHnAPTM3AYHM
Riz - Détermination de la teneur en amylose
Rice - Determination of amylose content
Numéro de référence
IS0 6647 : 1987 (F)

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Avant-propos
L‘ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de WO). L‘élaboration
des Normes internationales est normalement confiée aux comités techniques de I’ISO.
Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I‘ISO participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I’ISO. Les Normes internationales sont approuvées confor-
mément aux procédures de I’ISO qui requièrent l‘approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale IS0 6647 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34,
Produits agricoles alimentaires.
L’attention des utilisateurs est attirée sur le fait que toutes les Normes internationales
sont de temps en temps soumises à révision et que toute référence faite à une autre
Norme internationale dans le présent document implique qu‘il s’agit, sauf indication
contraire, de la dernière édition.
&
0 Organisation internationale de normalisation, 1987
Imprimé en Suisse

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IS0 6647 : 1987 (F)
NORM E I NTERN ATlON ALE
Riz - Détermination de la teneur en amylose
1 Objet et domaine d'application 5.2 Éthanol, à 95 % ( V/V).
La présente Norme internationale spécifie une méthode de
5.3 Hydroxyde de sodium, solution à 1 mol/l.
détermination de la teneur en amylose du riz usiné, non cuit.
Hydroxyde de sodium, solution à 0,09 mol/l.
5.4
2 Références
5.5 Acide acétique, solution à 1 mol/l.
IS0 950, Céréales - Échantillonnage {des grains).
5.6 lode, solution.
c
Peser, à 5 mg près, 2,000 g d'iodure de potassium dans une
3 Définitions
fiole munie d'url bouchon. Ajouter de l'eau en vue d'obtenir
une solution saturée, puis ajouter 0,200 g d'iode, pesé à 1 mg
Dans le cadre de la présente Norme internationale, les défini-
près. Quand tout l'iode est dissous, transvaser la solution quan-
tions suivantes sont applicables.
titativement dans une fiole jaugée de 100 ml, ajuster au trait
repère avec de l'eau et homogénéiser.
3.1 amylose : Polysaccharide constituant de l'amidon, dont
Préparer cette solution chaque jour et la garder à l'abri de la
les macromolécules présentent une structure à prédominance
lumière.
linéaire.
5.7 Amylose de pomme de terre, exempte d'amylopec-
amylopectine : Polysaccharide constituant de l'amidon
3.2
tine, suspension étalon à 1 g/l.
dont les macromolécules présentent une structure ramifiée.
5.7.1 Délipider l'amylose avec du méthanol (5.1) sous reflux
3.3 riz usiné : Riz obtenu après une opération d'usinage qui
pendant 16 h dans un appareil de type Soxhlet ou pendant 4 h
consiste à débarrasser le riz décortiqué de tout ou partie de son
dans un appareil de type Goldfisch, à raison de 5 à 6 gouttes par
péricarpe et du germe.
seconde (voir note 1).
5.7.2 Etaler l'amylose délipidée sur un plateau et laisser repo-
ser pendant 2 jours pour permettre l'évaporation du méthanol
1) Principe
-
résiduel et l'équilibre de la teneur en eau. Traiter de la même
Broyage du riz en particules fines en vue de détruire la cristalli-
façon I'amylopectine (5.8) et les échantillons pour essai (8.1 )
nité de l'amidon, de façon à permettre une complète dispersion
(voir note 21.
et une gélatinisation, suivi d'une délipidation. Mise en suspen-
sion d'une prise d'essai dans une solution d'hydroxyde de
sodium, puis addition d'une solution d'iode à une partie ali-
5.7.3 Peser 100 f 0,5 mg d'amylose ainsi délipidée et condi-
quote et mesure spectrométrique de I'absorbance, à 620 nm,
tionnée dans une fiole jaug6e de 100 ml. Ajouter avec précau-
du complexe coloré formé.
tion 1 ml d'éthanol (5.2) en rinçant l'amylose adhérant à la paroi
de la fiole. Ajouter 9,0 ml de solution d'hydroxyde de sodium à
Détermination de la teneur en amylose en utilisant une courbe
1 mol/l (5.3) et laisser reposer à température ambiante pendant
d'étalonnage préparée avec des mélanges d'amylose et d'amy-
15 à 24 h sans agitation pour disperser l'amylose.
lopectine, tenant donc compte de l'effet de I'amylopectine sur
la couleur du complexe amylose-iode de la solution d'essai. Compléter au volume avec de l'eau et homogénéiser vigoureu-
sement.
1 ml de cette suspension étalon contient 1 mg d'amylose.
5 Réactifs
NOTES
réactifs doivent être de qualité analytique et l'eau utili-
1 L'amylose de pomme de terre doit être pure et vérifiée par titrage
sée doit être de l'eau distillée ou de pureté au moins équiva-
ampérométrique ou potentiométrique. Certaines préparations commer-
lente.
ciales sont impures et donneraient des résultats trop élevés pour la
teneur en amylose du riz. L'amylose pure doit fixer 19 % à 20 % de sa
Méthanol, à 85 % ( V/V).
5.1
propre masse diode.
1

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IS0 6647 : 1987 (FI
Délipider la farine avec du méthanol à 85 % (5.1) sous reflux
2 Du fait que les échantillons pour essai, l'amylose et I'amylopectine
pendant 16 h dans un appareil de type Soxhlet ou pendant 4 h
sont équilibrés dans le même milieu, aucune correction de teneur en
dans un appareil de type Goldfisch à raison de 5 à 6 gouttes par
eau n'est nécessaire, et les résultats sont obtenus sur matière sèche du
seconde (voir note 2).
riz usiné.
Après délipidation, étaler la farine en une couche mince sur une
Amylopectine, suspension étalon, à 1 g/l.
5.8
capsule ou un verre de montre et laisser reposer pendant 2 jours
pour permettre l'évaporation du méthanol résiduel et l'équilibre
Préparer I'amylopectine à partir de riz usiné gluant ayant un
de la teneur en eau (voir note 2 en 5.7).
amidon constitué d'au moins 99 % (m/m) d'amylopectine.
Mouiller le riz usiné gluant et le broyer dans un broyeur de labo-
NOTES
ratoire approprié (6.1) jusqu'à obtention d'un état finement
1 Si l'on désire utiliser un échantillon pour essai plus important, supé-
d' isé. Eliminer les protéines par extraction complète à l'aide
rieur à la capacité du micro-broyeur, diviser l'échantillon en portions de
dkétergent (dodécylbenzène sulfonate de sodium, solution
quantité convenable et, après avoir broyé chaque portion, bien mélan-
à 20 gN, avec une solution de sulfite de sodium à 2 g/l ajoutée
ger les farines obtenues. Un tel échantillon peut être également broyé
juste avant emploi) ou d'un alcali (hydroxyde de sodium, solu-
dans un broyeur plus important capable de produire une farine homo-
tion à 3 g/H, laver puis délipid
...