ISO/TS 17919:2013
(Main)Microbiology of the food chain — Polymerase chain reaction (PCR) for the detection of food-borne pathogens — Detection of botulinum type A, B, E and F neurotoxin-producing clostridia
Microbiology of the food chain — Polymerase chain reaction (PCR) for the detection of food-borne pathogens — Detection of botulinum type A, B, E and F neurotoxin-producing clostridia
ISO/TS 17919:2013 specifies a horizontal method for the molecular detection of clostridia carrying botulinum neurotoxin A, B, E, and F genes by a PCR method. This method detects the genes and not the toxins, therefore a positive result does not necessarily mean the presence of these toxins in the sample investigated. ISO/TS 17919:2013 is applicable to products for human consumption, animal feed, and environmental samples. The PCR assays for detection of genetic sequences encoding specific toxin types are described in annexes.
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Réaction de polymérisation en chaîne (PCR) pour la détection de micro-organismes pathogènes dans les aliments — Détection des clostridies productrices de neurotoxine botulique de type A, B, E et F
L'ISO/TS 17919:2013 spécifie une méthode horizontale de détection moléculaire des clostridies portant les gènes A, B, E et F de neurotoxine botulique par réaction de polymérisation en chaîne (PCR). Cette méthode détecte les gènes, et non les toxines. Par conséquent, un résultat positif n'est pas nécessairement synonyme de présence de ces toxines dans l'échantillon examiné. L'ISO/TS 17919:2013 s'applique aux produits destinés à être consommés par l'Homme, aux aliments pour animaux et aux échantillons environnementaux. Les réactions de PCR de détection des séquences génétiques codant ces types particuliers de toxine sont décrites.
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Relations
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Standards Content (Sample)
TECHNICAL ISO/TS
SPECIFICATION 17919
First edition
2013-11-01
Microbiology of the food chain —
Polymerase chain reaction (PCR) for
the detection of food-borne pathogens
— Detection of botulinum type A, B, E
and F neurotoxin-producing clostridia
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Réaction de polymérisation
en chaîne (PCR) pour la détection de micro-organismes pathogènes
dans les aliments — Détection des clostridies productrices de
neurotoxine botulique de type A, B, E et F
Reference number
©
ISO 2013
© ISO 2013
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized otherwise in any form
or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting on the internet or an intranet, without prior
written permission. Permission can be requested from either ISO at the address below or ISO’s member body in the country of
the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2013 – All rights reserved
Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Symbols and abbreviated terms . 1
4.1 Symbols . 1
4.2 Abbreviated terms . 2
5 Principle . 2
5.1 General . 2
5.2 Microbial enrichment . 2
5.3 Nucleic acid extraction . 2
5.4 Amplification by PCR . 2
5.5 Detection of PCR products . 2
5.6 Confirmation . 2
6 Reagents . 3
6.1 General . 3
6.2 Culture media . 3
6.3 Nucleic acid extraction . 4
6.4 Reagents for PCR . 5
7 Apparatus and equipment . 5
7.1 General . 5
7.2 Equipment for sample preparation prior to enrichment . 5
7.3 Equipment for microbial enrichment . . 5
7.4 Equipment used for nucleic acid extraction . 6
7.5 Equipment used for PCR . 6
7.6 Equipment used for the detection of the PCR product . 6
8 Sampling . 7
9 Procedure. 7
9.1 Sample preparation prior to enrichment . 7
9.2 Microbial enrichment . 7
9.3 Nucleic acid preparation. 8
9.4 PCR amplification . 9
9.5 Confirmation of a positive PCR result . 9
Annex A (normative) Flow-diagram of the procedure .10
Annex B (informative) Multiplex PCR assays for detection of genes encoding botulinum
neurotoxin types A, B, E, and F using agarose gel electrophoresis .11
Annex C (informative) Assays for detection of genes encoding botulinum neurotoxin types A, B, E,
and F using real-time PCR .29
Annex D (informative) Preparation of C. botulinum spores.40
Bibliography .46
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International
Standards adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting.
Publication as an International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies
casting a vote.
In other circumstances, particularly when there is an urgent market requirement for such documents, a
technical committee may decide to publish other types of document:
— an ISO Publicly Available Specification (ISO/PAS) represents an agreement between technical
experts in an ISO working group and is accepted for publication if it is approved by more than 50 %
of the members of the parent committee casting a vote;
— an ISO Technical Specification (ISO/TS) represents an agreement between the members of a
technical committee and is accepted for publication if it is approved by 2/3 of the members of the
committee casting a vote.
An ISO/PAS or ISO/TS is reviewed after three years in order to decide whether it will be confirmed for
a further three years, revised to become an International Standard, or withdrawn. If the ISO/PAS or
ISO/TS is confirmed, it is reviewed again after a further three years, at which time it must either be
transformed into an International Standard or be withdrawn.
ISO/TS 17919 was prepared by the European Committee for Standardization (CEN) Technical Committee
CEN/TC 275 Food analysis — Horizontal methods, in collaboration with Technical Committee ISO/TC 34,
Food products, Subcommittee SC 9, Microbiology, in accordance with the Agreement on technical
cooperation between ISO and CEN (Vienna Agreement).
iv © ISO 2013 – All rights reserved
Introduction
Botulinum neurotoxin-producing clostridia are ubiquitous in the environment. Botulism is a severe
neuroparalytic disease resulting from the action of botulinum neurotoxins (BoNTs). Seven different
serotypes of BoNTs (type A to G) and a number of subtypes have been identified to date.
BoNT type A (BoNT/A), type B (BoNT/B), type E (BoNT/E) and type F (BoNT/F) are mainly responsible
for botulism in humans and the genes encoding these toxins are the targets of this Technical Specification.
BoNT type A, B, E, and F-producing clostridia exist in four physiologically distinct groups (Group I
Clostridium botulinum, Group II C. botulinum, C. baratii, C. butyricum).
The International Organization for Standardization (ISO) draws attention to the fact that it is claimed
that compliance with this document may involve the use of patents.
ISO take no position concerning the evidence, validity and scope of this patent right.
The holder of this patent right has assured ISO that they are willing to negotiate licences under reasonable
and non-discriminatory terms and conditions with applicants throughout the world. In this respect, the
statement of the holder of this patent right is registered with ISO. Information may be obtained from:
Applied Biosystems, LLC
Scott Miller, Legal Department
5781 Van Allen Way
CARLSBAD
CA 92008
USA
Tel: +1 760 476 4387
Fax: +1 760 476 6048
e-mail: Scott.miller@lifetechnologies.com
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights other than those identified above. ISO shall not be held responsible for identifying any or
all such patent rights.
ISO (www.iso.org/patents) maintains an on-line database of patents relevant to its documents. Users
are encouraged to consult the databases for the most up-to-date information concerning patents.
TECHNICAL SPECIFICATION ISO/TS 17919:2013(E)
Microbiology of the food chain — Polymerase chain
reaction (PCR) for the detection of food-borne pathogens
— Detection of botulinum type A, B, E and F neurotoxin-
producing clostridia
1 Scope
This Technical Specification specifies a horizontal method for the molecular detection of clostridia
carrying botulinum neurotoxin A, B, E, and F genes by a PCR method. This method detects the genes
and not the toxins, therefore a positive result does not necessarily mean the presence of these toxins in
the sample investigated. This Technical Specification is applicable to products for human consumption,
animal feed, and environmental samples.
The PCR assays for detection of genetic sequences encoding specific toxin types are described
in Annexes B and C.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced
document (including any amendments) applies
...
TECHNICAL ISO/TS
SPECIFICATION 17919
First edition
2013-11-01
Microbiology of the food chain —
Polymerase chain reaction (PCR) for
the detection of food-borne pathogens
— Detection of botulinum type A, B, E
and F neurotoxin-producing clostridia
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Réaction de polymérisation
en chaîne (PCR) pour la détection de micro-organismes pathogènes
dans les aliments — Détection des clostridies productrices de
neurotoxine botulique de type A, B, E et F
Reference number
©
ISO 2013
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Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Symbols and abbreviated terms . 1
4.1 Symbols . 1
4.2 Abbreviated terms . 2
5 Principle . 2
5.1 General . 2
5.2 Microbial enrichment . 2
5.3 Nucleic acid extraction . 2
5.4 Amplification by PCR . 2
5.5 Detection of PCR products . 2
5.6 Confirmation . 2
6 Reagents . 3
6.1 General . 3
6.2 Culture media . 3
6.3 Nucleic acid extraction . 4
6.4 Reagents for PCR . 5
7 Apparatus and equipment . 5
7.1 General . 5
7.2 Equipment for sample preparation prior to enrichment . 5
7.3 Equipment for microbial enrichment . . 5
7.4 Equipment used for nucleic acid extraction . 6
7.5 Equipment used for PCR . 6
7.6 Equipment used for the detection of the PCR product . 6
8 Sampling . 7
9 Procedure. 7
9.1 Sample preparation prior to enrichment . 7
9.2 Microbial enrichment . 7
9.3 Nucleic acid preparation. 8
9.4 PCR amplification . 9
9.5 Confirmation of a positive PCR result . 9
Annex A (normative) Flow-diagram of the procedure .10
Annex B (informative) Multiplex PCR assays for detection of genes encoding botulinum
neurotoxin types A, B, E, and F using agarose gel electrophoresis .11
Annex C (informative) Assays for detection of genes encoding botulinum neurotoxin types A, B, E,
and F using real-time PCR .29
Annex D (informative) Preparation of C. botulinum spores.40
Bibliography .46
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
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ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
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The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International
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Publication as an International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies
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In other circumstances, particularly when there is an urgent market requirement for such documents, a
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— an ISO Publicly Available Specification (ISO/PAS) represents an agreement between technical
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of the members of the parent committee casting a vote;
— an ISO Technical Specification (ISO/TS) represents an agreement between the members of a
technical committee and is accepted for publication if it is approved by 2/3 of the members of the
committee casting a vote.
An ISO/PAS or ISO/TS is reviewed after three years in order to decide whether it will be confirmed for
a further three years, revised to become an International Standard, or withdrawn. If the ISO/PAS or
ISO/TS is confirmed, it is reviewed again after a further three years, at which time it must either be
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ISO/TS 17919 was prepared by the European Committee for Standardization (CEN) Technical Committee
CEN/TC 275 Food analysis — Horizontal methods, in collaboration with Technical Committee ISO/TC 34,
Food products, Subcommittee SC 9, Microbiology, in accordance with the Agreement on technical
cooperation between ISO and CEN (Vienna Agreement).
iv © ISO 2013 – All rights reserved
Introduction
Botulinum neurotoxin-producing clostridia are ubiquitous in the environment. Botulism is a severe
neuroparalytic disease resulting from the action of botulinum neurotoxins (BoNTs). Seven different
serotypes of BoNTs (type A to G) and a number of subtypes have been identified to date.
BoNT type A (BoNT/A), type B (BoNT/B), type E (BoNT/E) and type F (BoNT/F) are mainly responsible
for botulism in humans and the genes encoding these toxins are the targets of this Technical Specification.
BoNT type A, B, E, and F-producing clostridia exist in four physiologically distinct groups (Group I
Clostridium botulinum, Group II C. botulinum, C. baratii, C. butyricum).
The International Organization for Standardization (ISO) draws attention to the fact that it is claimed
that compliance with this document may involve the use of patents.
ISO take no position concerning the evidence, validity and scope of this patent right.
The holder of this patent right has assured ISO that they are willing to negotiate licences under reasonable
and non-discriminatory terms and conditions with applicants throughout the world. In this respect, the
statement of the holder of this patent right is registered with ISO. Information may be obtained from:
Applied Biosystems, LLC
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TECHNICAL SPECIFICATION ISO/TS 17919:2013(E)
Microbiology of the food chain — Polymerase chain
reaction (PCR) for the detection of food-borne pathogens
— Detection of botulinum type A, B, E and F neurotoxin-
producing clostridia
1 Scope
This Technical Specification specifies a horizontal method for the molecular detection of clostridia
carrying botulinum neurotoxin A, B, E, and F genes by a PCR method. This method detects the genes
and not the toxins, therefore a positive result does not necessarily mean the presence of these toxins in
the sample investigated. This Technical Specification is applicable to products for human consumption,
animal feed, and environmental samples.
The PCR assays for detection of genetic sequences encoding specific toxin types are described
in Annexes B and C.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced
document (including any amendments) applies
...
SPÉCIFICATION ISO/TS
TECHNIQUE 17919
Première édition
2013-11-01
Microbiologie de la chaîne
alimentaire — Réaction de
polymérisation en chaîne (PCR)
pour la détection de micro-
organismes pathogènes dans les
aliments — Détection des clostridies
productrices de neurotoxine
botulique de type A, B, E et F
Microbiology of the food chain — Polymerase chain reaction (PCR)
for the detection of food-borne pathogens — Detection of botulinum
type A, B, E and F neurotoxin-producing clostridia
Numéro de référence
©
ISO 2013
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2013
Droits de reproduction réservés. Sauf indication contraire, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée
sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie, l’affichage sur
l’internet ou sur un Intranet, sans autorisation écrite préalable. Les demandes d’autorisation peuvent être adressées à l’ISO à
l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
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Publié en Suisse
ii © ISO 2013 – Tous droits réservés
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Symboles et termes abrégés . 2
4.1 Symboles . 2
4.2 Termes abrégés . 2
5 Principes . 2
5.1 Généralités . 2
5.2 Enrichissement microbien . 2
5.3 Extraction des acides nucléiques . 2
5.4 Amplification par PCR. 2
5.5 Détection des produits PCR . 2
5.6 Confirmation . 3
6 Réactifs . 3
6.1 Généralités . 3
6.2 Milieux de culture . 3
6.3 Extraction des acides nucléiques . 4
6.4 Réactifs pour la PCR. 5
7 Appareillage et matériel . 5
7.1 Généralités . 5
7.2 Matériel pour la préparation des échantillons avant enrichissement . 5
7.3 Matériel pour l’enrichissement microbien . 6
7.4 Matériel utilisé pour l’extraction des acides nucléiques . 6
7.5 Matériel utilisé pour la PCR . 6
7.6 Matériel utilisé pour la détection des produits PCR . 6
8 Échantillonnage . 7
9 Mode opératoire. 7
9.1 Préparation de l’échantillon avant enrichissement . 7
9.2 Enrichissement microbien . 7
9.3 Préparation des acides nucléiques . 8
9.4 Amplification par PCR. 9
9.5 Confirmation d’un résultat PCR positif . 9
Annexe A (normative) Schéma du mode opératoire .11
Annexe B (informative) Réactions de PCR multiplex pour la détection de gènes codant les types A,
B, E et F de la neurotoxine botulique utilisant une électrophorèse en gel d’agarose .12
Annexe C (informative) Essais pour la détection des gènes codant les types A, B, E et F de
neurotoxine botulique utilisant la PCR en temps réel .30
Annexe D (informative) Préparation des spores de C. botulinum .42
Bibliographie .48
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne
la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives
ISO/CEI, Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d’élaborer les Normes internationales. Les projets de
Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote.
Leur publication comme Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des comités
membres votants.
Dans d’autres circonstances, en particulier lorsqu’il existe une demande urgente du marché, un comité
technique peut décider de publier d’autres types de documents:
— une Spécification publiquement disponible ISO (ISO/PAS) représente un accord entre les experts
dans un groupe de travail ISO et est acceptée pour publication si elle est approuvée par plus de 50 %
des membres votants du comité dont relève le groupe de travail;
— une Spécification technique ISO (ISO/TS) représente un accord entre les membres d’un comité technique
et est acceptée pour publication si elle est approuvée par 2/3 des membres votants du comité.
Une ISO/PAS ou ISO/TS fait l’objet d’un examen après trois ans afin de décider si elle est confirmée pour
trois nouvelles années, révisée pour devenir une Norme internationale, ou annulée. Lorsqu’une ISO/PAS
ou ISO/TS a été confirmée, elle fait l’objet d’un nouvel examen après trois ans qui décidera soit de sa
transformation en Norme internationale soit de son annulation.
L’ISO/TS 17919 a été élaborée par le Comité européen de normalisation (CEN) comité technique
CEN/TC 275 Analyse des produits alimentaires — Méthodes horizontales, en collaboration avec le comité
technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 9, Microbiologie, conformément à l’Accord de
coopération technique entre l’ISO et le CEN (Accord de Vienne).
iv © ISO 2013 – Tous droits réservés
Introduction
Les clostridies productrices de neurotoxine botulique sont ubiquitaires dans l’environnement. Elles sont
à l’origine du botulisme, une affection neuroparalytique sévère due à l’action de neurotoxines botuliques
(BoNT). À ce jour, sept sérotypes différents de BoNT (types A à G) ainsi qu’un certain nombre de leurs
sous-types ont été identifiés.
Les principales BoNT responsables du botulisme chez l’Homme sont celles du type A (BoNT/A), du
type B (BoNT/B), du type E (BoNT/E) et du type F (BoNT/F) et la présente Spécification technique
traite des gènes codant ces toxines. Les clostridies productrices de BoNT des types A, B, E et F sont
classées en quatre groupes distincts sur le plan physiologique (Groupe I Clostridium botulinum, Groupe II
C. botulinum, C. baratii, C. butyricum).
L’Organisation internationale de normalisation (ISO) attire l’attention sur le fait qu’il est déclaré que la
conformité avec les dispositions du présent document peut impliquer l’utilisation de brevets.
L’ISO ne prend pas position quant à la preuve, à la validité et à la portée de ces droits de propriété.
Le détenteur de ces droits de propriété a donné l’assurance à l’ISO qu’il consent à négocier des licences
avec des demandeurs du monde entier, soit gratuites, soit à des termes et conditions raisonnables et non
discriminatoires. À ce propos, la déclaration du détenteur des droits de propriété est enregistrée à l’ISO.
Des informations peuvent être demandées à:
Applied Biosystems, LLC
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États-Unis
Tel: +1 760 476 4387
Fax: +1 760 476 6048
email: Scott.miller@lifetechnologies.com
L’attention est d’autre part attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent
faire l’objet de droits de propriété autres que ceux qui ont été mentionnés ci-dessus. L’ISO ne saurait être
tenue pour responsable de l’identification de ces droits de propriété en tout ou partie.
L’ISO (www.iso.org/brevets) tient à jour des bases de données en ligne des droits de propriété relatifs à
ses documents. Les utilisateurs sont invités à consulter les bases de données pour avoir l’information la
plus à jour sur les droits de propriété.
SPÉCIFICATION TECHNIQUE ISO/TS 17919:2013(F)
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Réaction de
polymérisation en chaîne (PCR) pour la détection de
micro-organismes pathogènes dans les aliments —
Détection des clostridies productrices de neurotoxine
botulique de type A, B, E et F
1 Domaine d’application
La présente Spécification technique spécifie une méthode horizontale de détection moléculaire des
clostridies portant les gènes A, B, E et F de neurotoxine botulique par réaction de polymérisation en
chaîne (PCR). Cette méthode détecte les gènes, et non les toxines. Par conséquent, un résultat positif
n’est pas nécessairement synonyme de présence de ces toxines dans l’échantillon examiné. La présente
Spécification technique s’applique aux produits destinés à être consommés par l’Homme, aux aliments
pour animaux et aux échantillons environnementaux.
La réaction de
...
SPÉCIFICATION ISO/TS
TECHNIQUE 17919
Première édition
2013-11-01
Microbiologie de la chaîne
alimentaire — Réaction de
polymérisation en chaîne (PCR)
pour la détection de micro-
organismes pathogènes dans les
aliments — Détection des clostridies
productrices de neurotoxine
botulique de type A, B, E et F
Microbiology of the food chain — Polymerase chain reaction (PCR)
for the detection of food-borne pathogens — Detection of botulinum
type A, B, E and F neurotoxin-producing clostridia
Numéro de référence
©
ISO 2013
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Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Symboles et termes abrégés . 2
4.1 Symboles . 2
4.2 Termes abrégés . 2
5 Principes . 2
5.1 Généralités . 2
5.2 Enrichissement microbien . 2
5.3 Extraction des acides nucléiques . 2
5.4 Amplification par PCR. 2
5.5 Détection des produits PCR . 2
5.6 Confirmation . 3
6 Réactifs . 3
6.1 Généralités . 3
6.2 Milieux de culture . 3
6.3 Extraction des acides nucléiques . 4
6.4 Réactifs pour la PCR. 5
7 Appareillage et matériel . 5
7.1 Généralités . 5
7.2 Matériel pour la préparation des échantillons avant enrichissement . 5
7.3 Matériel pour l’enrichissement microbien . 6
7.4 Matériel utilisé pour l’extraction des acides nucléiques . 6
7.5 Matériel utilisé pour la PCR . 6
7.6 Matériel utilisé pour la détection des produits PCR . 6
8 Échantillonnage . 7
9 Mode opératoire. 7
9.1 Préparation de l’échantillon avant enrichissement . 7
9.2 Enrichissement microbien . 7
9.3 Préparation des acides nucléiques . 8
9.4 Amplification par PCR. 9
9.5 Confirmation d’un résultat PCR positif . 9
Annexe A (normative) Schéma du mode opératoire .11
Annexe B (informative) Réactions de PCR multiplex pour la détection de gènes codant les types A,
B, E et F de la neurotoxine botulique utilisant une électrophorèse en gel d’agarose .12
Annexe C (informative) Essais pour la détection des gènes codant les types A, B, E et F de
neurotoxine botulique utilisant la PCR en temps réel .30
Annexe D (informative) Préparation des spores de C. botulinum .42
Bibliographie .48
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne
la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives
ISO/CEI, Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d’élaborer les Normes internationales. Les projets de
Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote.
Leur publication comme Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des comités
membres votants.
Dans d’autres circonstances, en particulier lorsqu’il existe une demande urgente du marché, un comité
technique peut décider de publier d’autres types de documents:
— une Spécification publiquement disponible ISO (ISO/PAS) représente un accord entre les experts
dans un groupe de travail ISO et est acceptée pour publication si elle est approuvée par plus de 50 %
des membres votants du comité dont relève le groupe de travail;
— une Spécification technique ISO (ISO/TS) représente un accord entre les membres d’un comité technique
et est acceptée pour publication si elle est approuvée par 2/3 des membres votants du comité.
Une ISO/PAS ou ISO/TS fait l’objet d’un examen après trois ans afin de décider si elle est confirmée pour
trois nouvelles années, révisée pour devenir une Norme internationale, ou annulée. Lorsqu’une ISO/PAS
ou ISO/TS a été confirmée, elle fait l’objet d’un nouvel examen après trois ans qui décidera soit de sa
transformation en Norme internationale soit de son annulation.
L’ISO/TS 17919 a été élaborée par le Comité européen de normalisation (CEN) comité technique
CEN/TC 275 Analyse des produits alimentaires — Méthodes horizontales, en collaboration avec le comité
technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 9, Microbiologie, conformément à l’Accord de
coopération technique entre l’ISO et le CEN (Accord de Vienne).
iv © ISO 2013 – Tous droits réservés
Introduction
Les clostridies productrices de neurotoxine botulique sont ubiquitaires dans l’environnement. Elles sont
à l’origine du botulisme, une affection neuroparalytique sévère due à l’action de neurotoxines botuliques
(BoNT). À ce jour, sept sérotypes différents de BoNT (types A à G) ainsi qu’un certain nombre de leurs
sous-types ont été identifiés.
Les principales BoNT responsables du botulisme chez l’Homme sont celles du type A (BoNT/A), du
type B (BoNT/B), du type E (BoNT/E) et du type F (BoNT/F) et la présente Spécification technique
traite des gènes codant ces toxines. Les clostridies productrices de BoNT des types A, B, E et F sont
classées en quatre groupes distincts sur le plan physiologique (Groupe I Clostridium botulinum, Groupe II
C. botulinum, C. baratii, C. butyricum).
L’Organisation internationale de normalisation (ISO) attire l’attention sur le fait qu’il est déclaré que la
conformité avec les dispositions du présent document peut impliquer l’utilisation de brevets.
L’ISO ne prend pas position quant à la preuve, à la validité et à la portée de ces droits de propriété.
Le détenteur de ces droits de propriété a donné l’assurance à l’ISO qu’il consent à négocier des licences
avec des demandeurs du monde entier, soit gratuites, soit à des termes et conditions raisonnables et non
discriminatoires. À ce propos, la déclaration du détenteur des droits de propriété est enregistrée à l’ISO.
Des informations peuvent être demandées à:
Applied Biosystems, LLC
Scott Miller, Legal Department
5781 Van Allen Way
CARLSBAD
CA 92008
États-Unis
Tel: +1 760 476 4387
Fax: +1 760 476 6048
email: Scott.miller@lifetechnologies.com
L’attention est d’autre part attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent
faire l’objet de droits de propriété autres que ceux qui ont été mentionnés ci-dessus. L’ISO ne saurait être
tenue pour responsable de l’identification de ces droits de propriété en tout ou partie.
L’ISO (www.iso.org/brevets) tient à jour des bases de données en ligne des droits de propriété relatifs à
ses documents. Les utilisateurs sont invités à consulter les bases de données pour avoir l’information la
plus à jour sur les droits de propriété.
SPÉCIFICATION TECHNIQUE ISO/TS 17919:2013(F)
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Réaction de
polymérisation en chaîne (PCR) pour la détection de
micro-organismes pathogènes dans les aliments —
Détection des clostridies productrices de neurotoxine
botulique de type A, B, E et F
1 Domaine d’application
La présente Spécification technique spécifie une méthode horizontale de détection moléculaire des
clostridies portant les gènes A, B, E et F de neurotoxine botulique par réaction de polymérisation en
chaîne (PCR). Cette méthode détecte les gènes, et non les toxines. Par conséquent, un résultat positif
n’est pas nécessairement synonyme de présence de ces toxines dans l’échantillon examiné. La présente
Spécification technique s’applique aux produits destinés à être consommés par l’Homme, aux aliments
pour animaux et aux échantillons environnementaux.
La réaction de
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.