ISO 9648:1988
(Main)Sorghum — Determination of tannin content
Sorghum — Determination of tannin content
The method consists in extraction by shaking with dimethylformamide, then after centrifuging, addition of ferric ammonium citrate and ammonia to an aliqiot part of the supernatant liquid and spectrometric determination, at 525 nm, of the absorbance of the solution thus obtained, and determing of the tannic content using a calibration curve prepared using tannic acid.
Sorgho — Dosage des tanins
General Information
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Standards Content (Sample)
IS0
INTERNATIONAL STANDARD
9648
First edition
1988-12-15
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION
ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
MEX~YHAPO,lJHAfl OPrAHM3A~Mfl I-IO CTAH~APTM3A~MM
Sorghum - Determination of tannin content
Sorgho - Dosage des tanins
~ Reference number
I IS0 9648 : 1988 (E)
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Iso 9648 : 1988 (El
Foreword
IS0 (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of
national standards bodies (IS0 member bodies). The work of preparing International
Standards is normally carried out through IS0 technical committees. Each member
body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, govern-
mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. IS0
collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all
matters of electrotechnical standardization.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to
the member bodies for approval before their acceptance as International Standards by
the IS0 Council. They are approved in accordance with IS0 procedures requiring at
least 75 % approval by the member bodies voting.
International Standard IS0 9648 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34,
Agricultural food products.
0 International Organization for Standardization, 1988
Printed in Switzerland
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IS0 9648 : 1988 (E)
INTERNATIONAL STANDARD
Determination of tannin content
Sorghum -
is recommended in order to permit inter-laboratory comparison
1 Scope
of results.
This International Standard specifies a universal method for the
determination of tannin content in sorghum grains.
This solution can be kept for 1 week.
It is not specific for one single type of polyphenols. Its
4.2 Ammonia, solution of 8,0 g/l NH3.
usefulness, meanwhile, is justified by the good negative cor-
relation observed between the metabolizable energy of
sorghum grain, measured using animal experiments on cocks, 4.3 Dimethylformamide, 75 % W/n solution.
and the results obtained using this method.
Introduce 75 ml of dimethylformamide into a 100 ml volumetric
flask. Dilute with water, allow to cool and make up to the mark.
2 Normative references
WARNING - Dimethylformamide may be harmful to the
The following standards contain provisions which, through
health when inhaled or allowed to come into contact
reference in this text, constitute provisions of this International
with the skin. It is also irritating to the eyes.
Standard. At the time of publication, the editions indicated
were valid. All standards are subject to revision, and parties to
4.4 Ferric ammonium citrate, having an iron content be-
agreements based on this International Standard are encour-
tween 17 % (m/m) and 20 % (m/m), 3,5 g/l solution,
aged to investigate the possibility of applying the most recent
prepared 24 h before use.
editions of the standards listed below. Members of IEC and IS0
maintain registers of currently valid International Standards.
Since the iron content of the citrate has an influence on the
results, this content shall be respected imperatively.
I SO 712 : 1985, Cereals and cereals products - Determination
of moisture content (Routine reference method).
IS0 950 : 1979, Cereals - Sampling ias grain).
5 Apparatus
Usual laboratory apparatus and, in particular, the following.
3 Principle
Extraction of tannins by shaking with dimethylformamide. 5.1 Mechanical crusher, capable of producing particles
which pass completely through the sieve (5.2).
After centrifuging, addition of ferric ammonium citrate and am-
monia to an aliquot part of the supernatant liquid and spec-
trometric determination, at 525 nm, of the absorbance of the
5.2 Sieve, having apertures of size 0,5 mm.
solution thus obtained. Determination of the tannin content
using a calibration curve prepared using tannic acid.
5.3 Centrifuge, capable of producing a centrifugal acceler-
ation of 3 OOOg (3 000 x 9,81 m/s2).
4 Reagents
5.4 Centrifuge tubes, with a capacity of approximately
All reagents shall be of analytical grade. The water used shall be
50 ml, provided with stoppers ensuring hermetic sealing.
distilled water or water of at least equivalent purity.
5.5 Mechanical stirrer, with a reciprocating motion, or
Tannic acid, 2 g/l solution.
4.1
magnetic stirrer.
Since the origin of tannic acid has a definite influence on the
calibration curve, the use of Merck reference 773 tannic acid’) 5.6 Mechanical shaker for test tubes (Vortex type).
1) Merck reference 773 tannic acid is an example of a suitable product available commercially. This information is given for the convenience of users
of this International Standard and does not constitute an endorsement by IS0 of this product.
1
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IS0 9648 : 1988 (El
5.7 Spectrometer, with cells 10 mm thick, permitting cessively add 5 ml of water and 1 ml of the ferric ammonium
citrate solution (4.4) using a pipette, shake for a few seconds
measurements at 525 nm.
using the shaker (5.61, then add 1 ml of the ammonia solution
(4.2) using a pipette and shake again for a few seconds using
5.8 Pipettes, of 1 ml, 5 ml and 20 ml capacity.
the shaker (5.6).
5.9 Graduated pipettes, of 5 ml and 10 ml capacity.
8.3.4 Transfer the solutions obtained in 8.3.2 and 8.3.3 into
Test tubes, 140 mm x 14 mm.
5.10
measuring cells and, 10 min + 1 min after the end of the
operations carried out in 8.3.2 and 8.3.3, measure the absor-
5.11 Volumetric flasks, of 20 ml capacity,
bances, at 525 nm, using the spectrometer (5.7) against a
water blank.
6 Sampl
...
ISO
NORME INTERNATIONALE 9648
Première édition
1988-12-15
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION
ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
MEXAYHAPOJJHAR OPTAHM3A~MR Il0 CTAHflAPTM3A~Wl
Sorgho - Dosage des tanins
Sorghum -
Determina tion of tannin content
Numéro de référence
KO 9648 : 1988 (F)
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IsO 9648 : ‘1988 (FI
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I’ISO). L’élaboration
des Normes internationales est en général confiée aux comités techniques de I’ISO.
Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux. L’ISO col-
labore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I’ISO. Les Normes internationales sont approuvées confor-
mément aux procédures de I’ISO qui requièrent l’approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale ISO 9648 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34,
Produits agricoles alimentaires.
0 Organisation internationale de normalisation, 1988
Imprimé en Suisse
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ISO 9648 : 1988 (F)
NORME INTERNATIONALE
Dosage des tanins
Sorgho -
4.1 Acide tannique, solution à 2 g/l.
1 Domaine d’application
La présente Norme internationale prescrit une méthode globale
L’origine de l’acide tannique ayant une influence certaine sur la
de dosage des tanins dans les graines de sorgho.
courbe d’étalonnage, il est, en conséquence, recommandé
d’utiliser l’acide tannique Merck référence 773’), pour permet-
Elle n’est pas spécifique d’un seul type de polyphénols. Son
tre une comparaison des résultats entre laboratoires.
intérêt se justifie cependant par la bonne corrélation négative
qui a été observée entre l’énergie métabolisable des graines de
Cette solution se conserve une semaine.
sorgho, mesuree par expérimentation animale sur des coqs, et
les résultats obtenus par cette méthode.
4.2 Ammoniaque, solution à 8,0 g/l de NHS.
2 Références normatives
4.3 Diméthylformamide, solution à 75 % WV).
Les normes suivantes contiennent des dispositions qui, par
Dans une fiole jaugée de 100 ml, introduire 75 ml de diméthyl-
suite de la référence qui en est faite, constituent des disposi-
formamide. Diluer avec de l’eau, laisser refroidir et compléter
tions valables pour la présente norme internationale. Au
au trait repére.
moment de la publication, les éditions indiquées étaient en
vigueur. Toute norme est sujette à révision et les parties pre-
AVERTISSEMENT - La diméthylformamide est une
nantes des accords fondés sur cette norme internationale sont
substance nocive par inhalation et contact avec la peau,
invitées à rechercher la possibilité d’appliquer les éditions les
et irritante pour les yeux.
plus récentes des normes indiquées ci-après. Les membres de
la CEI et de I’ISO possédent le registre des normes internationa-
4.4 Citrate d’ammonium et de fer(lll), ayant une teneur
les en vigueur à un moment donné.
en fer comprise entre 17 % (mlm) et 20 % (mlm), solution à
3,5 g/l, préparée 24 h avant emploi.
ISO 712 : 1985, Céréales et produits céréaliers - Ddtermination
de la teneur en eau fMéthode de réfërence pratique).
La teneur en fer du citrate ayant une influence sur les résultats,
ISO 950 : 1979, Céréales - Échan tilfonnage (des grains).
celle-ci doit être respectée impérativement.
3 Principe
5 Appareillage
Extraction des tanins par le diméthylformamide avec agitation.
Matériel courant de laboratoire, et notamment
Après centrifugation, addition de citrate d’ammonium et de
fer(lll) et d’ammoniaque à une partie aliquote du liquide surna-
5.1 Broyeur mécanique, permettant d’obtenir des particules
geant et mesure spectrométrique de I’absorbance de la solution
passant intégralement au travers du tamis (5.2).
ainsi obtenue, a 525 nm. Détermination de la teneur en tanins
en utilisant une courbe d’étalonnage préparée à partir d’acide
tannique.
5.2 Tamis, de 0,5 mm d’ouverture de maille.
5.3 Centrifugeuse, permettant d’obtenir une accélération
4 Réactifs
centrifuge de 3 OOOg (3 000 x 9,81 m/s2).
Tous les réactifs doivent être de qualité analytique. L’eau utili-
sée doit être de l’eau distillée ou de pureté au moins
5.4 Tubes à centrifuger, d’environ 50 ml de capacité,
équivalente.
munis de bouchons fermant hermétiquement.
1) L’acide tannique Merck référence 773 est un exemple d’un produit approprié disponible sur le marché. Cette information est donnée à l’intention
des utilisateurs de la présente Norme internationale et ne signifie nullement que I’ISO approuve ou recommande l’emploi exclusif de ce produit.
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Iso 9648 : 1988 (FI
à mouvement de va-et-vient, ou 8.3.2 Prélever, à l’aide d’une pipette (5.81, 1 ml du liquide sur-
5.5 Agitateur mécanique,
nageant (8.3.1) et l’introduire dans un tube à essais (5.10).
agitateur magnétique.
Ajouter successivement à la pipette: 6 ml d’eau et 1 ml de la
solution d’ammoniaque (4.21, puis agiter pendant quelques
5.6 Agitateur mécanique à
(type
secondes à l’aide de l’agitateur (5.6).
Vortex).
5.7 Spectromètre, équipé de cuves de 10 mm d’épaisseur,
8.3.3 Prélever, à l’aide d’une pipette (5.8), 1 ml du liquide sur-
permettant d’effectuer les mesures à 525 nm.
nageant (8.3.1) et l’introduire dans un tube à essais (5.10).
Ajouter successivement à la pipette: 5 ml d’eau, 1 ml de la
solution de citrate d’ammonium et de fer(lll) (4.41, agiter pen-
5.8 Pipettes, de 1 ml, 5 ml
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ISO
NORME INTERNATIONALE 9648
Première édition
1988-12-15
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION
ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
MEXAYHAPOJJHAR OPTAHM3A~MR Il0 CTAHflAPTM3A~Wl
Sorgho - Dosage des tanins
Sorghum -
Determina tion of tannin content
Numéro de référence
KO 9648 : 1988 (F)
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IsO 9648 : ‘1988 (FI
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I’ISO). L’élaboration
des Normes internationales est en général confiée aux comités techniques de I’ISO.
Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux. L’ISO col-
labore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I’ISO. Les Normes internationales sont approuvées confor-
mément aux procédures de I’ISO qui requièrent l’approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale ISO 9648 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34,
Produits agricoles alimentaires.
0 Organisation internationale de normalisation, 1988
Imprimé en Suisse
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ISO 9648 : 1988 (F)
NORME INTERNATIONALE
Dosage des tanins
Sorgho -
4.1 Acide tannique, solution à 2 g/l.
1 Domaine d’application
La présente Norme internationale prescrit une méthode globale
L’origine de l’acide tannique ayant une influence certaine sur la
de dosage des tanins dans les graines de sorgho.
courbe d’étalonnage, il est, en conséquence, recommandé
d’utiliser l’acide tannique Merck référence 773’), pour permet-
Elle n’est pas spécifique d’un seul type de polyphénols. Son
tre une comparaison des résultats entre laboratoires.
intérêt se justifie cependant par la bonne corrélation négative
qui a été observée entre l’énergie métabolisable des graines de
Cette solution se conserve une semaine.
sorgho, mesuree par expérimentation animale sur des coqs, et
les résultats obtenus par cette méthode.
4.2 Ammoniaque, solution à 8,0 g/l de NHS.
2 Références normatives
4.3 Diméthylformamide, solution à 75 % WV).
Les normes suivantes contiennent des dispositions qui, par
Dans une fiole jaugée de 100 ml, introduire 75 ml de diméthyl-
suite de la référence qui en est faite, constituent des disposi-
formamide. Diluer avec de l’eau, laisser refroidir et compléter
tions valables pour la présente norme internationale. Au
au trait repére.
moment de la publication, les éditions indiquées étaient en
vigueur. Toute norme est sujette à révision et les parties pre-
AVERTISSEMENT - La diméthylformamide est une
nantes des accords fondés sur cette norme internationale sont
substance nocive par inhalation et contact avec la peau,
invitées à rechercher la possibilité d’appliquer les éditions les
et irritante pour les yeux.
plus récentes des normes indiquées ci-après. Les membres de
la CEI et de I’ISO possédent le registre des normes internationa-
4.4 Citrate d’ammonium et de fer(lll), ayant une teneur
les en vigueur à un moment donné.
en fer comprise entre 17 % (mlm) et 20 % (mlm), solution à
3,5 g/l, préparée 24 h avant emploi.
ISO 712 : 1985, Céréales et produits céréaliers - Ddtermination
de la teneur en eau fMéthode de réfërence pratique).
La teneur en fer du citrate ayant une influence sur les résultats,
ISO 950 : 1979, Céréales - Échan tilfonnage (des grains).
celle-ci doit être respectée impérativement.
3 Principe
5 Appareillage
Extraction des tanins par le diméthylformamide avec agitation.
Matériel courant de laboratoire, et notamment
Après centrifugation, addition de citrate d’ammonium et de
fer(lll) et d’ammoniaque à une partie aliquote du liquide surna-
5.1 Broyeur mécanique, permettant d’obtenir des particules
geant et mesure spectrométrique de I’absorbance de la solution
passant intégralement au travers du tamis (5.2).
ainsi obtenue, a 525 nm. Détermination de la teneur en tanins
en utilisant une courbe d’étalonnage préparée à partir d’acide
tannique.
5.2 Tamis, de 0,5 mm d’ouverture de maille.
5.3 Centrifugeuse, permettant d’obtenir une accélération
4 Réactifs
centrifuge de 3 OOOg (3 000 x 9,81 m/s2).
Tous les réactifs doivent être de qualité analytique. L’eau utili-
sée doit être de l’eau distillée ou de pureté au moins
5.4 Tubes à centrifuger, d’environ 50 ml de capacité,
équivalente.
munis de bouchons fermant hermétiquement.
1) L’acide tannique Merck référence 773 est un exemple d’un produit approprié disponible sur le marché. Cette information est donnée à l’intention
des utilisateurs de la présente Norme internationale et ne signifie nullement que I’ISO approuve ou recommande l’emploi exclusif de ce produit.
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Iso 9648 : 1988 (FI
à mouvement de va-et-vient, ou 8.3.2 Prélever, à l’aide d’une pipette (5.81, 1 ml du liquide sur-
5.5 Agitateur mécanique,
nageant (8.3.1) et l’introduire dans un tube à essais (5.10).
agitateur magnétique.
Ajouter successivement à la pipette: 6 ml d’eau et 1 ml de la
solution d’ammoniaque (4.21, puis agiter pendant quelques
5.6 Agitateur mécanique à
(type
secondes à l’aide de l’agitateur (5.6).
Vortex).
5.7 Spectromètre, équipé de cuves de 10 mm d’épaisseur,
8.3.3 Prélever, à l’aide d’une pipette (5.8), 1 ml du liquide sur-
permettant d’effectuer les mesures à 525 nm.
nageant (8.3.1) et l’introduire dans un tube à essais (5.10).
Ajouter successivement à la pipette: 5 ml d’eau, 1 ml de la
solution de citrate d’ammonium et de fer(lll) (4.41, agiter pen-
5.8 Pipettes, de 1 ml, 5 ml
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Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.