ISO 12871:2019

Olive oils and olive-pomace oils — Determination of aliphatic and triterpenic alcohols content by capillary gas chromatography

This document specifies a procedure for the determination of the content, as a mass fraction expressed as milligrams per kilogram, of aliphatic and triterpenic alcohols in olive oils and olive-pomace oils. NOTE This document is based on COI/T.20/Doc. 26 Rev.2:2017[4].

Huiles d'olive et huiles de grignons d'olive — Détermination de la teneur en alcools aliphatiques et triterpéniques par chromatographie en phase gazeuse sur colonne capillaire

Le présent document spécifie une méthode pour la détermination de la teneur, sous forme de fraction massique exprimée en milligrammes par kilogramme, en alcools aliphatiques et triterpéniques des huiles d'olive et des huiles de grignons d'olive. NOTE Ce document est basé sur la documentation COI/T.20/Doc. 26 Rev.2:2017[4].

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 12-Mar-2019
• ICS: 67.200.10 - Animal and vegetable fats and oils
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 11 - Animal and vegetable fats and oils
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 11 - Animal and vegetable fats and oils
• Current Stage: 9093 - International Standard confirmed
• Due Date: 29-Jan-2025
• Completion Date: 29-Jan-2025

Relations

• Revises: ISO 12871:2010 - Olive oils and olive-pomace oils — Determination of aliphatic alcohols content by capillary gas chromatography
• Effective Date: 04-Mar-2017

Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 12871
Second edition
2019-03
Olive oils and olive-pomace oils —
Determination of aliphatic and
triterpenic alcohols content by
capillary gas chromatography
Huiles d'olive et huiles de grignons d'olive — Détermination de la
teneur en alcools aliphatiques et triterpéniques par chromatographie
en phase gazeuse sur colonne capillaire
Reference number
©
ISO 2019
© ISO 2019
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting
on the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address
below or ISO’s member body in the country of the requester.
ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: [phone]
Fax: [phone]
Email: [e-mail]
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2019 – All rights reserved

Contents Page
Foreword .iv
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 1
5 Reagents . 1
6 Apparatus . 2
7 Sampling . 3
8 Preparation of the test sample . 4
9 Procedure. 4
9.1 Preparation of the unsaponifiable matter . 4
9.2 Separation of alcoholic fractions . 4
9.3 Preparation of the trimethylsilyl ethers . 5
9.4 Gas chromatographic analysis . 6
9.4.1 Preliminary operations and column packing . 6
9.4.2 Operating conditions . 6
9.4.3 Analytical procedure . 7
9.4.4 Peak identification . 7
9.4.5 Quantitative evaluation . 7
10 Precision . 7
10.1 Interlaboratory test. 7
10.2 Repeatability . 8
10.3 Reproducibility . 8
11 Test report . 8
Annex A (informative) Thin-layer chromatography separation example and chromatogram
examples . 9
Annex B (informative) Results of an interlaboratory test .12
Bibliography .13
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see www .iso
.org/iso/foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 11,
Animal and vegetable fats and oils.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 12871:2010), which has been technically
revised. The following change has been made:
— the determination of triterpenic alcohols has been introduced.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/members .html.
iv © ISO 2019 – All rights reserved

INTERNATIONAL STANDARD ISO 12871:2019(E)
Olive oils and olive-pomace oils — Determination of
aliphatic and triterpenic alcohols content by capillary gas
chromatography
1 Scope
This document specifies a procedure for the determination of the content, as a mass fraction expressed
as milligrams per kilogram, of aliphatic and triterpenic alcohols in olive oils and olive-pomace oils.
[4]
NOTE This document is based on COI/T.20/Doc. 26 Rev.2:2017 .
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content
constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For
undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 661, Animal and vegetable fats and oils — Preparation of test sample
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https: //www .iso .org/obp
— IEC Electropedia: available at http: //www .electropedia .org/
3.1
aliphatic alcohols content
sum of the aliphatic alcohols with carbon number C22, C24, C26, and C28, as a mass fraction, determined
according to the method specified in this document
4 Principle
The oil, to which 1-eicosanol has been added as an internal standard, is saponified with ethanolic
potassium hydroxide and the unsaponifiable matter extracted with diethyl ether. The alcoholic fraction
is separated from the unsaponifiable matter by chromatography on a basic silica gel plate. The alcohols
recovered from the silica gel are transformed into trimethylsilyl ethers (TMSE) and analysed by
capillary gas chromatography.
5 Reagents
Technical, organizational and personal safety measures shall be followed.
During the analysis, unless otherwise stated, use only reagents of recognized analytical grade, and
distilled or demineralized water or water of equivalent purity.
5.1 Potassium hydroxide, ethanolic solution, c(KOH) approximately 2 mol/l.
Dissolve, while cooling, 130 g potassium hydroxide [w(KOH) = 85 % mass fraction minimum] in 200 ml
water and make up to 1 l with ethanol. Store the solution in a well-stoppered opaque glass bottle.
5.2 Potassium hydroxide, ethanolic solution, c (KOH) approximately 0,2 mol/l.
Dissolve 13 g potassium hydroxide in 20 ml water and make up to 1 l with ethanol.
5.3 Diethyl ether.
5.4 Anhydrous sodium sulfate.
5.5 Glass plates, coated with silica gel, without fluorescence indicator, 0,25 mm thick.
Suitable ready-for-use products are available commercially.
5.6 Acetone, chromatography grade.
5.7 Hexane, chromatography grade.
5.8 Diethyl ether, chromatography grade.
5.9 Chloroform, chromatography grade.
5.10 Reference solution for thin-layer chromatography: C20 to C28 aliphatic alcohols 0,5 g/100 ml
solution in chloroform or a fraction of alcohols obtained as indicated in 9.2 from the unsaponifiable
matter of an olive-pomace oil.
5.11 2′,7′-Dichlorofluorescein in ethanol, 0,2 g/100 ml solution. Make slightly basic by adding a few
drops of alcoholic potassium hydroxide solution (5.1).
5.12 Anhydrous pyridine, chromatography grade.
5.13 Hexamethyldisilazane (HMDS).
5.14 Trimethylchlorosilane (TMCS).
5.15 Standard solutions of trimethylsilyl ethers (TMSE), of aliphatic alcohols from C20 to C28.
Prepare from mixtures of pure alcohols immediately prior to use.
5.16 Internal standard solution: solution of 1-eicosanol in chloroform, mass concentration
0,1 g/100 ml.
5.17 Carrier gas: hydrogen or helium, gas chromatography grade.
5.18 Auxiliary gas: nitrogen, gas chromatography grade.
6 Apparatus
Usual laboratory equipment and, in particular, the following.
6.1 Round-bottomed flask, of capacity 250 ml, fitted with a reflux condenser having ground-glass joints.
2 © ISO 2019 – All rights reserved

6.2 Separating funnel, of capacity 500 ml.
6.3 Round-bottomed flasks, of capacity 250 ml.
6.4 Chromatographic chamber for thin-layer chromatography, suitable for glass plates of
dimensions 20 cm × 20 cm.
6.5 Ultraviolet lamp, of wavelength 366 nm or 254 nm.
6.6 Microsyringes, of capacities 100 μl and 500 μl.
6.7 Cylindrical filter funnel with a G3 porous septum (porosity 15 μm to 40 μm), of approximate
dimensions: diameter 2 cm and depth 5 cm, with an attachment suitable for filtration under vacuum and
a 12/21 male ground-glass joint.
6.8 Vacuum conical flask, of capacity 50 ml, with a 12/21 female ground-glass joint which can be
fitted to the filter funnel (6.7).
6.9 Test-tube, of capacity 10 ml, with a tapering bottom and a sealing stopper.
6.10 Gas chromatograph, suitable for use with capillary columns, equipped with the components
specified in 6.11 to 6.14.
6.11 Column oven, capable of maintaining a temperature to within ±1 °C.
6.12 Split injection unit, temperature-adjustable, with a persilylated glass vaporizing element, or an
on-column unit.
6.13 Flame ionization detector.
6.14 Integration system.
6.15 Fused silica capillary column, of length 20 m to 30 m, internal diameter 0,25 mm to 0,32 mm,
1)
with SE-52 or SE-54 liquid phase or equivalent, with a film thickness between 0,10 μm and 0,30 μm.
6.16 Mic
...

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 12871
Second edition
2019-03
Olive oils and olive-pomace oils —
Determination of aliphatic and
triterpenic alcohols content by
capillary gas chromatography
Huiles d'olive et huiles de grignons d'olive — Détermination de la
teneur en alcools aliphatiques et triterpéniques par chromatographie
en phase gazeuse sur colonne capillaire
Reference number
©
ISO 2019
© ISO 2019
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting
on the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address
below or ISO’s member body in the country of the requester.
ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: [phone]
Fax: [phone]
Email: [e-mail]
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2019 – All rights reserved

Contents Page
Foreword .iv
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 1
5 Reagents . 1
6 Apparatus . 2
7 Sampling . 3
8 Preparation of the test sample . 4
9 Procedure. 4
9.1 Preparation of the unsaponifiable matter . 4
9.2 Separation of alcoholic fractions . 4
9.3 Preparation of the trimethylsilyl ethers . 5
9.4 Gas chromatographic analysis . 6
9.4.1 Preliminary operations and column packing . 6
9.4.2 Operating conditions . 6
9.4.3 Analytical procedure . 7
9.4.4 Peak identification . 7
9.4.5 Quantitative evaluation . 7
10 Precision . 7
10.1 Interlaboratory test. 7
10.2 Repeatability . 8
10.3 Reproducibility . 8
11 Test report . 8
Annex A (informative) Thin-layer chromatography separation example and chromatogram
examples . 9
Annex B (informative) Results of an interlaboratory test .12
Bibliography .13
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see www .iso
.org/iso/foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 11,
Animal and vegetable fats and oils.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 12871:2010), which has been technically
revised. The following change has been made:
— the determination of triterpenic alcohols has been introduced.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/members .html.
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 12871:2019(E)
Olive oils and olive-pomace oils — Determination of
aliphatic and triterpenic alcohols content by capillary gas
chromatography
1 Scope
This document specifies a procedure for the determination of the content, as a mass fraction expressed
as milligrams per kilogram, of aliphatic and triterpenic alcohols in olive oils and olive-pomace oils.
[4]
NOTE This document is based on COI/T.20/Doc. 26 Rev.2:2017 .
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content
constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For
undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 661, Animal and vegetable fats and oils — Preparation of test sample
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https: //www .iso .org/obp
— IEC Electropedia: available at http: //www .electropedia .org/
3.1
aliphatic alcohols content
sum of the aliphatic alcohols with carbon number C22, C24, C26, and C28, as a mass fraction, determined
according to the method specified in this document
4 Principle
The oil, to which 1-eicosanol has been added as an internal standard, is saponified with ethanolic
potassium hydroxide and the unsaponifiable matter extracted with diethyl ether. The alcoholic fraction
is separated from the unsaponifiable matter by chromatography on a basic silica gel plate. The alcohols
recovered from the silica gel are transformed into trimethylsilyl ethers (TMSE) and analysed by
capillary gas chromatography.
5 Reagents
Technical, organizational and personal safety measures shall be followed.
During the analysis, unless otherwise stated, use only reagents of recognized analytical grade, and
distilled or demineralized water or water of equivalent purity.
5.1 Potassium hydroxide, ethanolic solution, c(KOH) approximately 2 mol/l.
Dissolve, while cooling, 130 g potassium hydroxide [w(KOH) = 85 % mass fraction minimum] in 200 ml
water and make up to 1 l with ethanol. Store the solution in a well-stoppered opaque glass bottle.
5.2 Potassium hydroxide, ethanolic solution, c (KOH) approximately 0,2 mol/l.
Dissolve 13 g potassium hydroxide in 20 ml water and make up to 1 l with ethanol.
5.3 Diethyl ether.
5.4 Anhydrous sodium sulfate.
5.5 Glass plates, coated with silica gel, without fluorescence indicator, 0,25 mm thick.
Suitable ready-for-use products are available commercially.
5.6 Acetone, chromatography grade.
5.7 Hexane, chromatography grade.
5.8 Diethyl ether, chromatography grade.
5.9 Chloroform, chromatography grade.
5.10 Reference solution for thin-layer chromatography: C20 to C28 aliphatic alcohols 0,5 g/100 ml
solution in chloroform or a fraction of alcohols obtained as indicated in 9.2 from the unsaponifiable
matter of an olive-pomace oil.
5.11 2′,7′-Dichlorofluorescein in ethanol, 0,2 g/100 ml solution. Make slightly basic by adding a few
drops of alcoholic potassium hydroxide solution (5.1).
5.12 Anhydrous pyridine, chromatography grade.
5.13 Hexamethyldisilazane (HMDS).
5.14 Trimethylchlorosilane (TMCS).
5.15 Standard solutions of trimethylsilyl ethers (TMSE), of aliphatic alcohols from C20 to C28.
Prepare from mixtures of pure alcohols immediately prior to use.
5.16 Internal standard solution: solution of 1-eicosanol in chloroform, mass concentration
0,1 g/100 ml.
5.17 Carrier gas: hydrogen or helium, gas chromatography grade.
5.18 Auxiliary gas: nitrogen, gas chromatography grade.
6 Apparatus
Usual laboratory equipment and, in particular, the following.
6.1 Round-bottomed flask, of capacity 250 ml, fitted with a reflux condenser having ground-glass joints.
2 © ISO 2019 – All rights reserved

6.2 Separating funnel, of capacity 500 ml.
6.3 Round-bottomed flasks, of capacity 250 ml.
6.4 Chromatographic chamber for thin-layer chromatography, suitable for glass plates of
dimensions 20 cm × 20 cm.
6.5 Ultraviolet lamp, of wavelength 366 nm or 254 nm.
6.6 Microsyringes, of capacities 100 μl and 500 μl.
6.7 Cylindrical filter funnel with a G3 porous septum (porosity 15 μm to 40 μm), of approximate
dimensions: diameter 2 cm and depth 5 cm, with an attachment suitable for filtration under vacuum and
a 12/21 male ground-glass joint.
6.8 Vacuum conical flask, of capacity 50 ml, with a 12/21 female ground-glass joint which can be
fitted to the filter funnel (6.7).
6.9 Test-tube, of capacity 10 ml, with a tapering bottom and a sealing stopper.
6.10 Gas chromatograph, suitable for use with capillary columns, equipped with the components
specified in 6.11 to 6.14.
6.11 Column oven, capable of maintaining a temperature to within ±1 °C.
6.12 Split injection unit, temperature-adjustable, with a persilylated glass vaporizing element, or an
on-column unit.
6.13 Flame ionization detector.
6.14 Integration system.
6.15 Fused silica capillary column, of length 20 m to 30 m, internal diameter 0,25 mm to 0,32 mm,
1)
with SE-52 or SE-54 liquid phase or equivalent, with a film thickness between 0,10 μm and 0,30 μm.
6.16 Mic
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 12871
Deuxième édition
2019-03
Huiles d'olive et huiles de grignons
d'olive — Détermination de la
teneur en alcools aliphatiques et
triterpéniques par chromatographie
en phase gazeuse sur colonne
capillaire
Olive oils and olive-pomace oils — Determination of aliphatic and
triterpenic alcohols content by capillary gas chromatography
Numéro de référence
©
ISO 2019
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2019
Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en œuvre, aucune partie de cette
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: [phone]
Fax: [phone]
E-mail: [e-mail]
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2019 – Tous droits réservés

Sommaire Page
Avant-propos .iv
1 Domaine d'application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 1
5 Réactifs . 1
6 Appareillage . 2
7 Échantillonnage . 4
8 Préparation de l'échantillon pour essai . 4
9 Mode opératoire. 4
9.1 Préparation de l'insaponifiable . 4
9.2 Séparation des fractions alcooliques . 5
9.3 Préparation des triméthylsilyléthers . 6
9.4 Analyse par chromatographie en phase gazeuse . 6
9.4.1 Opérations préliminaires et conditionnement de la colonne. 6
9.4.2 Conditions opératoires . 6
9.4.3 Mode opératoire d'analyse . 7
9.4.4 Identification des pics . 7
9.4.5 Évaluation quantitative . 7
10 Fidélité . 8
10.1 Essai interlaboratoires . 8
10.2 Répétabilité . 8
10.3 Reproductibilité . 8
11 Rapport d'essai . 8
Annexe A (informative) Exemple de séparation chromatographique sur couche mince et
exemples de chromatogramme .10
Annexe B (informative) Résultats d'un essai interlaboratoires .13
Bibliographie .14
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/directives).
L'attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion
de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir www .iso .org/avant -propos.
Le présent document a été préparé par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, et le sous-
comité SC 11, Corps gras d'origines animale et végétale.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 12871:2010), qui a fait l’objet d’une
révision technique. Le changement suivant a été apporté:
— la détermination des alcools triterpéniques a été introduite.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/fr/members .html.
iv © ISO 2019 – Tous droits réservés

NORME INTERNATIONALE ISO 12871:2019(F)
Huiles d'olive et huiles de grignons d'olive —
Détermination de la teneur en alcools aliphatiques et
triterpéniques par chromatographie en phase gazeuse sur
colonne capillaire
1 Domaine d'application
Le présent document spécifie une méthode pour la détermination de la teneur, sous forme de fraction
massique exprimée en milligrammes par kilogramme, en alcools aliphatiques et triterpéniques des
huiles d'olive et des huiles de grignons d'olive.
[4]
NOTE Ce document est basé sur la documentation COI/T.20/Doc. 26 Rev.2:2017 .
2 Références normatives
Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur
contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique.
Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s'applique (y compris les
éventuels amendements).
ISO 661, Corps gras d'origines animale et végétale — Préparation de l'échantillon pour essai
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en
normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https: //www .iso .org/obp
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse http: //www .electropedia .org/
3.1
teneur en alcools aliphatiques
Somme des alcools aliphatiques avec un nombre de carbones C22, C24, C26 et C28, sous forme de
fraction massique, déterminée selon la méthode spécifiée dans le présent document
4 Principe
L'huile, additionnée de 1-eicosanol comme étalon interne, est saponifiée avec de l'hydroxyde de
potassium en solution dans l'éthanol, puis l'insaponifiable est extrait avec de l'éther diéthylique. La
fraction des alcools est séparée de l'extrait insaponifiable par chromatographie sur plaque de gel de
silice basique. Les alcools récupérés dans le gel de silice sont transformés en triméthylsilyléthers
(TMSE) et analysés par chromatographie en phase gazeuse sur colonne capillaire.
5 Réactifs
Des mesures de sécurité technique, organisationnelle et personnelle doivent être prises.
Au cours de l'analyse, sauf indication contraire, utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique
reconnue, de l'eau distillée ou déminéralisée, ou de l'eau de pureté équivalente.
5.1 Hydroxyde de potassium, solution éthanolique, c(KOH) ≈ 2 mol/l.
Dissoudre, tout en refroidissant, 130 g d'hydroxyde de potassium [w(KOH) = 85 % de fraction massique
minimale] dans 200 ml d'eau et compléter à 1 l avec de l'éthanol. Conserver la solution dans une bouteille
de verre opaque bien bouchée.
5.2 Hydroxyde de potassium, solution éthanolique, c(KOH) ≈ 0,2 mol/l.
Dissoudre 13 g d'hydroxyde de potassium dans 20 ml d'eau distillée et compléter à 1 l avec de l'éthanol.
5.3 Éther diéthylique.
5.4 Sulfate de sodium anhydre.
5.5 Plaques de verre, recouvertes de gel de silice, sans indicateur de fluorescence, de 0,25 mm
d'épaisseur.
Des produits prêts à l'emploi appropriés sont disponibles dans le commerce.
5.6 Acétone, qualité pour chromatographie.
5.7 Hexane, qualité pour chromatographie.
5.8 Éther diéthylique, qualité pour chromatographie.
5.9 Chloroforme, qualité pour chromatographie.
5.10 Solutions de référence pour chromatographie sur couche mince: Solution d’alcools
aliphatiques de C20 à C28, à 0,5 g/100 ml dans du chloroforme, ou une fraction d'alcools obtenue comme
indiqué en 9.2 à partir de l’insaponifiable d'une huile de grignons d'olive.
5.11 2′,7′-dichlorofluorescéine, solution éthanolique à 0,2 g/100 ml. Rendre légèrement basique
par addition de quelques gouttes de solution alcoolique d'hydroxyde de potassium (5.1).
5.12 Pyridine anhydre, qualité pour chromatographie.
5.13 Hexaméthyldisilazane (HMDS).
5.14 Triméthylchlorosilane (TMCS).
5.15 Solutions étalon de triméthylsilyléthers (TMSE) des alcools aliphatiques de C20 à C28. À
préparer au moment de l'emploi à partir de mélanges d'alcools purs.
5.16 Solution étalon interne: solution de 1-eicosanol dans le chloroforme, concentration massique
de 0,1 g/100 ml.
5.17 Gaz vecteur: hydrogène ou hélium, qualité pour chromatographie en phase gazeuse.
5.18 Gaz auxiliaire: azote, qualité pour chromatographie en phase gazeuse.
6 Appareillage
Matériel courant de laboratoire et, en particulier, ce qui suit.
2 © ISO 2019 – Tous droits réservés

6.1 Ballon, d'une capacité de 250 ml, muni d'un réfrigérant à reflux avec embouts rodés.
6.2 Ampoule à décanter, d'une capacité de 500 ml.
6.3 Ballons, d'une capacité de 250 ml.
6.4 Enceinte pour chromatographie sur couche mince, adaptée pour des plaques de verre de 20 cm
x 20 cm.
6.5 Lampe à lumière ultraviolette, de longueur d'onde de 366 nm ou 254 nm.
6.6 Microseringues, de capacité 100 µl et 500 µl.
6.7 Creuset cylindrique filtrant à septum poreux G3 (porosité 1
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 12871
Deuxième édition
2019-03
Huiles d'olive et huiles de grignons
d'olive — Détermination de la
teneur en alcools aliphatiques et
triterpéniques par chromatographie
en phase gazeuse sur colonne
capillaire
Olive oils and olive-pomace oils — Determination of aliphatic and
triterpenic alcohols content by capillary gas chromatography
Numéro de référence
©
ISO 2019
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© ISO 2019
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Publié en Suisse
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Sommaire Page
Avant-propos .iv
1 Domaine d'application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 1
5 Réactifs . 1
6 Appareillage . 2
7 Échantillonnage . 4
8 Préparation de l'échantillon pour essai . 4
9 Mode opératoire. 4
9.1 Préparation de l'insaponifiable . 4
9.2 Séparation des fractions alcooliques . 5
9.3 Préparation des triméthylsilyléthers . 6
9.4 Analyse par chromatographie en phase gazeuse . 6
9.4.1 Opérations préliminaires et conditionnement de la colonne. 6
9.4.2 Conditions opératoires . 6
9.4.3 Mode opératoire d'analyse . 7
9.4.4 Identification des pics . 7
9.4.5 Évaluation quantitative . 7
10 Fidélité . 8
10.1 Essai interlaboratoires . 8
10.2 Répétabilité . 8
10.3 Reproductibilité . 8
11 Rapport d'essai . 8
Annexe A (informative) Exemple de séparation chromatographique sur couche mince et
exemples de chromatogramme .10
Annexe B (informative) Résultats d'un essai interlaboratoires .13
Bibliographie .14
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/directives).
L'attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion
de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir www .iso .org/avant -propos.
Le présent document a été préparé par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, et le sous-
comité SC 11, Corps gras d'origines animale et végétale.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 12871:2010), qui a fait l’objet d’une
révision technique. Le changement suivant a été apporté:
— la détermination des alcools triterpéniques a été introduite.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/fr/members .html.
iv © ISO 2019 – Tous droits réservés

NORME INTERNATIONALE ISO 12871:2019(F)
Huiles d'olive et huiles de grignons d'olive —
Détermination de la teneur en alcools aliphatiques et
triterpéniques par chromatographie en phase gazeuse sur
colonne capillaire
1 Domaine d'application
Le présent document spécifie une méthode pour la détermination de la teneur, sous forme de fraction
massique exprimée en milligrammes par kilogramme, en alcools aliphatiques et triterpéniques des
huiles d'olive et des huiles de grignons d'olive.
[4]
NOTE Ce document est basé sur la documentation COI/T.20/Doc. 26 Rev.2:2017 .
2 Références normatives
Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur
contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique.
Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s'applique (y compris les
éventuels amendements).
ISO 661, Corps gras d'origines animale et végétale — Préparation de l'échantillon pour essai
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en
normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https: //www .iso .org/obp
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse http: //www .electropedia .org/
3.1
teneur en alcools aliphatiques
Somme des alcools aliphatiques avec un nombre de carbones C22, C24, C26 et C28, sous forme de
fraction massique, déterminée selon la méthode spécifiée dans le présent document
4 Principe
L'huile, additionnée de 1-eicosanol comme étalon interne, est saponifiée avec de l'hydroxyde de
potassium en solution dans l'éthanol, puis l'insaponifiable est extrait avec de l'éther diéthylique. La
fraction des alcools est séparée de l'extrait insaponifiable par chromatographie sur plaque de gel de
silice basique. Les alcools récupérés dans le gel de silice sont transformés en triméthylsilyléthers
(TMSE) et analysés par chromatographie en phase gazeuse sur colonne capillaire.
5 Réactifs
Des mesures de sécurité technique, organisationnelle et personnelle doivent être prises.
Au cours de l'analyse, sauf indication contraire, utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique
reconnue, de l'eau distillée ou déminéralisée, ou de l'eau de pureté équivalente.
5.1 Hydroxyde de potassium, solution éthanolique, c(KOH) ≈ 2 mol/l.
Dissoudre, tout en refroidissant, 130 g d'hydroxyde de potassium [w(KOH) = 85 % de fraction massique
minimale] dans 200 ml d'eau et compléter à 1 l avec de l'éthanol. Conserver la solution dans une bouteille
de verre opaque bien bouchée.
5.2 Hydroxyde de potassium, solution éthanolique, c(KOH) ≈ 0,2 mol/l.
Dissoudre 13 g d'hydroxyde de potassium dans 20 ml d'eau distillée et compléter à 1 l avec de l'éthanol.
5.3 Éther diéthylique.
5.4 Sulfate de sodium anhydre.
5.5 Plaques de verre, recouvertes de gel de silice, sans indicateur de fluorescence, de 0,25 mm
d'épaisseur.
Des produits prêts à l'emploi appropriés sont disponibles dans le commerce.
5.6 Acétone, qualité pour chromatographie.
5.7 Hexane, qualité pour chromatographie.
5.8 Éther diéthylique, qualité pour chromatographie.
5.9 Chloroforme, qualité pour chromatographie.
5.10 Solutions de référence pour chromatographie sur couche mince: Solution d’alcools
aliphatiques de C20 à C28, à 0,5 g/100 ml dans du chloroforme, ou une fraction d'alcools obtenue comme
indiqué en 9.2 à partir de l’insaponifiable d'une huile de grignons d'olive.
5.11 2′,7′-dichlorofluorescéine, solution éthanolique à 0,2 g/100 ml. Rendre légèrement basique
par addition de quelques gouttes de solution alcoolique d'hydroxyde de potassium (5.1).
5.12 Pyridine anhydre, qualité pour chromatographie.
5.13 Hexaméthyldisilazane (HMDS).
5.14 Triméthylchlorosilane (TMCS).
5.15 Solutions étalon de triméthylsilyléthers (TMSE) des alcools aliphatiques de C20 à C28. À
préparer au moment de l'emploi à partir de mélanges d'alcools purs.
5.16 Solution étalon interne: solution de 1-eicosanol dans le chloroforme, concentration massique
de 0,1 g/100 ml.
5.17 Gaz vecteur: hydrogène ou hélium, qualité pour chromatographie en phase gazeuse.
5.18 Gaz auxiliaire: azote, qualité pour chromatographie en phase gazeuse.
6 Appareillage
Matériel courant de laboratoire et, en particulier, ce qui suit.
2 © ISO 2019 – Tous droits réservés

6.1 Ballon, d'une capacité de 250 ml, muni d'un réfrigérant à reflux avec embouts rodés.
6.2 Ampoule à décanter, d'une capacité de 500 ml.
6.3 Ballons, d'une capacité de 250 ml.
6.4 Enceinte pour chromatographie sur couche mince, adaptée pour des plaques de verre de 20 cm
x 20 cm.
6.5 Lampe à lumière ultraviolette, de longueur d'onde de 366 nm ou 254 nm.
6.6 Microseringues, de capacité 100 µl et 500 µl.
6.7 Creuset cylindrique filtrant à septum poreux G3 (porosité 1
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