ISO 5983:1979

Animal feeding stuffs — Determination of nitrogen content and calculation of crude protein content

Aliments des animaux — Détermination de la teneur en azote en vue du calcul de la teneur en protéines brutes

General Information

• Status: Withdrawn
• Publication Date: 30-Nov-1979
• Withdrawal Date: 30-Nov-1979
• ICS: 65.120 - Animal feeding stuffs
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 10 - Animal feeding stuffs
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 10 - Animal feeding stuffs
• Current Stage: 9599 - Withdrawal of International Standard
• Completion Date: 23-Oct-1997

Relations

• Revised: ISO 5983:1997 - Animal feeding stuffs — Determination of nitrogen content and calculation of crude protein content — Kjeldahl method
• Effective Date: 15-Apr-2008

Standards Content (Sample)

International Standard @ 5983
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANOARDIZATIONaME~YHAPOflHAR OPrAHMBAUMR il0 CTAHflAPTM3AUMM.ORGANlSATlON INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Animal feeding stuffs - Determination of nitrogen
L
content and calculation of crude protein content
Aliments des animaux - Détermination de la teneur en azote en vue du calcul de la teneur en protéines brutes
First edition - 1979-12-27
- UDC 636.0851.087 : 543.846 Ref. No. IS0 5983-1979 (E)
e
m Q)
Descriptors : animal nutrition, food products, chemical analysis, determination of content, nitrogen, proteins, Kjeldahl method
z
O
E Price based on 4 pages

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FOREWORD
IS0 (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation
of national standards institutes (IS0 member bodies). The work of developing
International Standards is carried out through IS0 technical committees. Every
member body interested in a subject for which a technical committee has been set
up has the right to be represented on that committee. International organizations,
governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
Draft international Standards adopted by the technical committees are circulated
to the member bodies for approval before their acceptance as International
Standards by the IS0 Council.
International Standard IS0 5983 was developed by Technical Committee
lSO/TC 34, Agricultural food products, and was circulated to the member bodies
in November 1977.
It has been approved by the member bodies of the following countries :
Australia Iran Romania
Bulgaria Ireland South Africa, Rep. of
Canada Israel Spain
Mexico Thai I and
Czechoslovakia
Egypt, Arab Rep. of Netherlands Turkey
Ethiopia New Zealand United Kingdom
France Philippines USA
Hungary Poland USSR
Y ug os1 ad i a
India Portugal
No member body expressed disapproval of the document.
@ International Orsanization for Standardization, 1979
Printed in Switzerland

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IS0 5983-1979 (E)
INTERNATIONAL STANDARD
Animal feeding stuffs - Determination of nitrogen
content and calculation of crude protein content
1 SCOPE should be taken. Solutions containing mercury should not
be discarded directly into drainage systems but should be
This international Standard specifies a method for the collected for subsequent treatment.
determination of the nitrogen content of animal feeding
stuffs by the Kjeldahl process, and a method for the
5.2.1 Mercury; or
calculation of the crude protein content.
For general directions on the application of the Kjeldahl 5.2.2 Mercury(i1) oxide (HgO); or
method, see IS0 1871.
L
5.2.3 Copper(l1) oxide (CuO); or
5.2.4 Copper(l1) sulphate pentahydrate (CuS0,.5H20).
2 FIELD OF APPLICATION
The method does not distinguish between protein nitrogen
5.3 Sulphuric acid, pz0 1,84 g/mi.
and non-protein nitrogen. If it is important to determine
the content of non-protein nitrogen, appropriate methods
5.4 Paraffin wax.
should be used.
Under certain circumstances, full recovery of nitrogen in 5.5 Sucrose.
nitrates and nitrites is not possible by this method.
5.6 Standards :
5.6.1 Acetanilide [melting point 114 OC; nitrogen (NI
3 REFERENCE
content 10,37 % (m/m)].
IS0 1871, Agricultural food products - General directions
5.6.2 Tryptophan [melting point 282 OC; nitrogen (NI
for the determination of nitrogen by the Kjeldahl method.
content 13,37 % (m/m)].
5.7 Sodium hydroxide solution, 33 % (m/m).
4 PRINCIPLE
c
Digestion of organic matter by sulphuric acid in the presence 5.8 Mercury precipitation reagent :
of a catalyst, rendering of the reaction product alkaline,
distillation and titration of the liberated ammonia. 5-8.1 Sodium thiosulphate solution, prepared by
Calculation of the nitrogen content and multiplication of dissolving 80 9 of sodium thiosulphate pentahydrate
the result by the conventional factor 6,25 to obtain the (Na2s203.5H20) in Oo0 Of water;or
crude protein content.
5.8.2 Sodium or potassium hypophosphite.
5.9 Collecting liquid :
5 REAGENTS
5.9.1 Sulphuric acid, 0,l N or 0,25 N standard volumetric
All reagents shall be of recognized analytical quality. The
solution; or
water used shall be distilled water or water of at least
equivalent purity.
5.9.2 Boric acid solution, 40 g/I.
All reagents [except the standards (5.6)] shall be practically
free from nitrogenous compounds.
5.10 Solution for titration :
5.10.1 Sodium hydroxide, 0,î N or 0,25 N standard
5,l Potassium sulphate.
volumetric solution; or
5.2 Catalyst :
WARNING - Attention is drawn to the toxic hazards of 5.10.2 Sulphuric acid, 0,l N or 0,25 N standard volumetric
mercury compounds. All necessary handling precautions solution.
1

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IS0 5983-1979 (E)
Add 25 ml of the sulphuric acid (5.3) for the first gram of
5.1 1 Mixed indicator.
dry matter of the test portion and 6 to 12 ml for each
Dissolve 2 g of methyl red and 1 g of methylene blue in
additional gram of dry matter (starch and fat digestion
1 O00 ml of 95 % (V/M ethanol.
require about 6 and 12 ml respectively). Mix thoroughly,
ensuring complete wetting of the test portion.
5.1 2 Litmus paper.
Heat the flask moderately at first to prevent foam from
5.13 Boiling aid : granulated pumice stone, or glass beads
rising into the neck of the flask or escaping from the flask.
of diameter 5 to 7 mm, or carborundum chips, washed in
hydrochloric acid and calcined.
NOTE - It may be advisable to add an anti-foaming agent such as
paraffin wax (5.4).
6 APPARATUS
Heat moderately, swirling from time to time, until the mass
has carbonized and the foam has disappeared; then heat
Usual laboratory apparatus not otherwise specified, and in
is boiling steadily. Heating
more intensively until the liquid
particular :
is adequate if the boiling acid condenses towards the middle
6.1 Analytical balance. of the neck of the Kjeldahl flask. Avoid overheating of the
walls of the flask not in contact with liquid; if a naked
6.2 Digestion, distillation and titration apparatus.
flame is used, such over-heating can be prevented by placing
the flask on a sheet of asbestos with a hole of diameter
7 SAMPLE slightly less than that of the flask at the liquid level.
Store the sample in such a way that deterioration and Throughout the heating, the flask should be supported so
change in composition are prevented. that its axis is inclined at an angle of 30 to 45' to the
vertical.
8 PROCEDURE
After the liquid has become clear, continue heating for 1 h
in the case of a mercury catalyst, or for 2 h in the case
8.1 Test portion
of a copper catalyst.
Weigh, to the nearest 1 mg, a mass of the test sample
Leave to cool. If the cold digest solidifies, recommence
chosen according to the expected nitrogen content so that
the determination using a larger amount of sulphuric acid
the test portion contains between 0,005 and 0,08 g of
than that specified above.
nitrogen and, preferably, more than 0,02 g. The mass of the
test portion should be between 0,5 and 2,0 g (preferably
1,o 9).
NOTE -When the inhomogeneity of the sample makes it necessary
8.2.2 Distillation of ammonia
to take an amount greater than that prescribed, and hence the
expected amount of nitrogen may exceed 0.08g. increase
Carefully add 250 to 350 ml of water to dissolve the
proportionally the amount of su
...

Norme internationale @ 5983
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATIONOME~YHAPO~HAR OPiAHMJAUMR no CTAHfiAPTM3AUMM.ORGANlSATlON INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Aliments des animaux - Détermination de la teneur en
L
azote en vue du calcul de la teneur en protéines brutes
Animal feeding stuffs - Determination of nitrogen content and calculation of crude protein content
Première édition - 1979-12-27
- CDU 636.085/.087 : 543.846
Réf. no : IS0 5983-1979 (FI
I
m
r- Descripteurs : nutrition animale, produit animal, analyse chimique, dosage, azote, protéine, méthode de Kjeldahl.
E
O
Prix basé sur 4 pages
v,

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AVANT-PROPOS
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d'organismes nationaux de normalisation (comités membres de I'ISO). L'élaboration
est confiée aux comités techniques de I'ISO. Chaque
des Normes internationales
comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique
correspondant. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I'ISO, participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont
soumis aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme
Normes internationales par le Conseil de I'ISO.
La Norme internationale IS0 5983 a été élaborée par le comité technique
ISO/TC 34, Produits agricoles alimentaires, et a été soumise aux comités membres
en novembre 1977.
Les comités membres des pays suivants l'ont approuvée
Portugal
Afrique du Sud, Rép. d' Inde
I ran Roumanie
Australie
Royaume-Uni
Bulgarie Irlande
Tchécoslovaquie
Canada Israël
Mexique Thaïlande
Égypte, Rép. arabe d'
Nouvelle-Zélande Turquie
Espagne
Ethiopie Pays-Bas URSS
France Philippines USA
Hongrie Pologne Yougoslavie
Aucun comité membre ne l'a désapprouvée.
O Organisation internationale de normalisation, 1979
Imprimé en Suisse

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IS0 5983-1979 (F)
NORM E I NTE R NAT ION ALE
Aliments des animaux - Détermination de la teneur en
azote en vue du calcul de la teneur en protéines brutes
nécessaires pour leur manipulation doivent être prises. Les
1 OBJET
solutions contenant du mercure ne doivent pas être jetées
La présente Norme internationale spécifie une méthode de
directement dans les conduits mais mises de côté en vue
détermination de la teneur en azote des aliments des
d'un traitement ultérieur.
animaux selon la méthode de Kjeldahl, et une méthode de
calcul de la teneur en protéines brutes.
5.2.1 Mercure; ou
Pour les directives générales en vue de l'application de la
méthode de Kjeldahl, voir IS0 1871.
'L. 5.2.2 Oxyde de mercure(l1) (HgO); ou
5.2.3 Oxyde de cuivre(l1) (CuO); ou
2 DOMAINE D'APPLICATION
5.2.4 Sulfate de cuivre(l1) pentahydraté (CuS0,.5H20).
La méthode ne permet pas de distinguer entre azote
protéique et azote non protéique. Lorsqu'il est important
de déterminer la teneur en azote non protéique, des
5.3 Acide sulfurique, pz0 1,84 g/ml.
méthodes appropriées doivent être utilisées.
5.4 Paraffine.
cas, la récupération de la totalité de l'azote
Dans certains
des nitrates et nitrites n'est pas possible par cette méthode.
5.5 Saccharose.
3 RÉFÉRENCE
5.6 Étalons :
IS0 1871, Produits agricoles alimentaires - Directives
5.6.1 Acétanilide [point de fusion : 114 OC; teneur en
générales pour le dosage de /'azote selon la méthode de
azote (N) : 10,37 % (m/m)].
Kjeldahl.
5.6.2 Tryptophane [point de fusion : 282 OC; teneur en
azote (N) : 13,37 % (mlm)].
4 PRINCIPE
L
Minéralisation de la matière organique par l'acide sulfu- 5.7 Hydroxyde de sodium, solution à 33 % (m/m).
rique en présence d'un catalyseur, alcalinisation des produits
de la réaction, distillation et titrage de l'ammoniac libéré.
5.8 Réactif pour la précipitation du mercure :
Calcul de la teneur en azote et multiplication du résultat
5.8.1 Thiosulfate de sodium, solution préparée en dissol-
par le facteur conventionnel 6,25 afin d'obtenir la teneur en
vant 80 g de thiosulfate de sodium pentahydraté
protéines brutes.
(Na2S20,.5H,0) dans 1 O00 ml d'eau; ou
5 RÉACTIFS
5.8.2 Hypophosphite de sodium ou de potassium.
Tous les réactifs doivent être de qualité analytique reconnue.
5.9 Liquide de récupération :
L'eau utilisée doit être de l'eau distillée ou de l'eau de
pureté au moins équivalente.
5.9.1 Acide sulfurique, solution titrée 0,l N ou 0,25 N; ou
Tous les réactifs [à l'exception des étalons (5.611 doivent
5.9.2 Acide borique, solution à 40 g/1.
être pratiquement exempts de composés azotés.
5.10 Solution de titrage :
5.1 Sulfate de potassium.
5.10.1 Hydroxyde de sodium, solution titrée 0,l N ou
5.2 Catalyseur :
0,25 N; ou
AVERTISSEMENT - L'attention est attirée sur les risques
de toxicité des composés du mercure. Toutes les précautions 5.10.2 Acide sulfurique, solution titrée 0,l N ou 0,25 N.
1

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IS0 5983-1979 (FI
5.1 1 Indicateur mixte. sulfate de cuivre( Il) pentahydraté (5.2.4) peut également
être utilisé, mais il est alors nécessaire, pour récupérer tout
Dissoudre 2 g de rouge de méthyle et 1 g de bleu de méthy-
l'azote, d'adopter une durée plus longue pour la minérali-
lène dans 1 O00 ml d'éthanol à 95 % (V/V).
sat ion.
5.12 Papier de tournesol.
NOTE - Le mercure est préférable comme catalyseur dans le cas de
fortes teneurs en protéines.
5.13 Régularisateur d'ébullition : pierre ponce en grains,
ou billes en verre de 5 à 7 mm de diamètre, ou morceaux de Ajouter 25 ml de l'acide sulfurique (5.3) pour le premier
lavés à l'acide chlorhydrique et calcinés. la prise d'essai et 6 à 12 ml
carborundum gramme de matière sèche de
pour chaque gramme supplémentaire de matière sèche (la
minéralisation de l'amidon et des corps gras nécessite
6 APPAREILLAGE
respectivement environ 6 et 12 ml). Mélanger soigneu-
sement de façon à assurer un mouillage complet de la prise
Matériel courant de laboratoire non spécifié par ailleurs, et
d'essai.
notamment :
Chauffer le ballon tcjut d'abord doucement pour éviter
6.1 Balance analytique.
la mousse monte dans le col du ballon ou s'échappe
que de
du ballon.
6.2 Appareillage pour la minéralisation, la distillation et le
NOTE - II peut être utile d'ajouter un agent antirnoussant tel que
titrage.
de la paraffine (5.4). v
Chauffer avec modération, en agitant de temps en temps
7 ÉCHANTILLON
par tournoiement, jusqu'à carbonisation de la masse et
disparition de la mousse; chauffer ensuite plus fort jusqu'à
Conserver l'échantillon de facon à éviter toute modification
ébullition régulière du liquide. Le chauffage est correct si
ou toute détérioration de sa composition.
l'acide bouillant se condense au niveau du milieu du col du
ballon de Kjeldahl. Éviter la surchauffe des parois du ballon
qui ne sont pas au contact du liquide. Dans le cas où l'on
8 MODE OPÉRATOIRE
utilise une flamme nue, cette surchauffe est évitée en
posant le ballon sur une plaque d'amiante munie d'un
8.1 Prise d'essai
orifice de diamètre légèrement inférieur à celui du ballon
Peser, à 1 mg près, une masse de l'échantillon pour essai
au niveau du liquide.
choisie en fonction de la teneur présumée en azote, de
facon que la prise d'essai contienne entre 0,005 et 0,08 g Pendant la durée de chauffage, disposer le ballon sur un
d'azote et, de préférence, plus de 0,02 g. La masse de la support tel que son axe soit incliné de 30 à 45' par rapport
prise d'essai doit être comprise entre 0.5 et 2,O g (de à la verticale.
préférence 1 ,O 9).
Lorsque la solution est devenue limpide, poursuivre le
NOTE - Lorsque l'hétérogénéité de l'échantillon rend nécessaire
chauffage durant 1 h dans le cas de l'utilisation d'un
le prélèvement d'une quantité supérieure à celle qui est prescrite,
catalyseur au mercure, et durant 2 h dans le cas de
la quantité présumée d'azote pouvant alors dépasser 0.08 g,
l'utilisation d'un catalyseur au cuivre.
augmenter proportionnellement la quantité d'acide sulfurique dans
8.2.2). si l'on utilise l'acide sulfurique
la
...