ISO 4833:1978

Microbiology — General guidance for enumeration of micro-organisms — Colony count technique at 30 degrees C

Microbiologie — Directives générales pour le dénombrement des micro-organismes — Méthode par comptage des colonies obtenues à 30 degrés C

General Information

• Status: Withdrawn
• Publication Date: 31-Jan-1978
• Withdrawal Date: 31-Jan-1978
• ICS: 07.100.30 - Food microbiology
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 9 - Microbiology
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 9 - Microbiology
• Current Stage: 9599 - Withdrawal of International Standard
• Completion Date: 01-Mar-1991

Relations

• Revised: SIST ISO 4833:1997 - Microbiology -- General guidance for the enumeration of micro-organisms -- Colony count technique at 30 degrees C
• Effective Date: 12-May-2008
• Revised: ISO 4833:1991 - Microbiology — General guidance for the enumeration of micro-organisms — Colony count technique at 30 degrees C
• Effective Date: 15-Apr-2008

Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL STANDARD 4833
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION .MEXAYHAPOnHAR OPïAHbi3AUHII no CïAHIIAPïH3AUHH ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION

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FOREWORD
IS0 (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation
of national standards institutes (IS0 member bodies). The work of developing
International Standards is carried out through IS0 technical committees. Every
member body interested in a subject for which a technical committee has been set
up has the right to be represented on that committee. International organizations,
governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated
to the member bodies for approval before their acceptance as International
Standards by the IS0 Council.
International Standard IS0 4833 was developped by Technical Committee
iSO/TC 34, Agricultural foodproducts, and was circulated to the member bodies in
July 1976.
It has been approved by the member bodies of the following countries
Hungary Portugal
Australia
Rom ani a
Austria India
Iran South Africa, Rep. of
Canada
Chile Ireland Spain
Czechoslovakia Israel Turkey
France Mexico United Kingdom
Germany Netherlands U.S.A.
Ghana Poland Yugoslavia
The member bodies of the following countries expressed disapproval of the
document on technical grounds :
New Zealand
Thailand
O International Organization for Standardization, 1978 0
Printed in Switzerland

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INTERNATIONAL STANDARD IS0 4833-1978 (E)
Microbiology - General guidance for enumeration of
micro-organisms - Colony count technique at 30 "C
O INTRODUCTION 2 REFERENCES
This International Standard is intended to provide general IS0 2293, Meat and meat products - Aerobic count at
guidance for the examination of products not dealt with by 30 OC (Reference method).
existing International Standards and for the consideration
ISO3565, Meat and meat products - Detection of
of bodies preparing reference microbiological methods of
sa I monel I ae (Reference method).
test for application to foods or to animal feeding stuffs.
Because of the large variety of products within this field
I)
IS0 . . ., Microbiology - General guidance for preparation
of application, these guidelines may not be appropriate
of dilutions.'
for some products in every detail, and for some other
products it may be necessary to use different methods.
Nevertheless, it is hoped that in all cases every attempt
will be made to apply the guidelines provided as far as
3 DEFINITION
possible and that deviations from them will only be made
if absolutely necessary for technical reasons.
For the purpase of this International Standard, the follow-
ing definition applies :
When this International Standard is next reviewed, account
will be taken of all information then available regarding micro-organisms : Bacteria, yeasts and moulds growing
the extent to which the guidelines have been followed and
aerobically at 30 OC, under the conditions specified.
the reasons for deviation from them in the case of
particular products.
The harmonization of test methods cannot be immediate,
4 PRINCIPLE
and for certain groups of products International Standards
and/or national standards may already exist that do not
4.1 Preparation of two poured plates; using a specified
comply with the guidelines. In cases where International
culture medium, and using a specified quantity of the test
Standards already exist for the product to be tested, they
sample if the initial product is liquid, or using a specified
should befollowed, but it is hoped that when such standards
quantity of an initial suspension in the case of other products.
are reviewed they will be changed to comply with this
8
Preparation of other pairs of poured plates, under the same
International Standard so that eventually the only remain-
conditions, using decimal dilutions of the test sample or of
ing departures from these guidelines will be those necessary
the initial suspension.
for well established technical reasons.
4.2 Aerobic incubation of the plates at 30 "C for 72 h.
1 SCOPE AND FIELD OF APPLICATION
This International Standard gives general guidelines for the
enumeration of micro-organisms present in products 4.3 Calculation of the number of micro-organisms per
intended for human consumption or feeding of animals, by millilitre or per gram of sample from the number of
counting the colonies growing in a solid medium after colonies obtained in selected plates (see 10.1).
incubating aerobically at 30 OC.
A limitation on the applicability of this International
Standard is imposed by the method's susceptibility to a
5 SAMPLING
large degree of variability. The method should be applied
and the results interpreted in the light of the information Carry out sampling in conformity with the International
given in 10.2. Standard dealing with the product concerned.
1) In preparation.
1

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IS0 4833-1978 (E)
O and -t 5 OC, and in conditions that prevent any change in
6 APPARATUS AND GLASSWARE
their composition. They shall not be kept for longer than
Usual microbiological laboratory equipment, and in
1 month.
particular :
7.2 Dilution fluid
6.1 Apparatus for dry sterilization (oven) or wet
sterilization (autoclave). Use a peptone-based dilution fluid containing sodium
chloride, buffered or not; for example, peptone-saline
Apparatus that will enter into contact with the culture
dilution fluid (see 5.3 of iSO2293) or buffered peptone
media, the dilution fluid or the sample, except for
water (see 6.2.1 of IS0 3565).
apparatus that is supplied sterile (particularly plastics
apparatus), shall be sterilized either
7.3 Plate count medium
- by being kept at 170 to 175 OC for not less than
Composition
1 h in an oven, or
tryptone' ) 5,O g
- by being kept at 121 f 1 OC for not less than 20 min
dehydrated yeast extract 25 g
in an autoclave.
anhydrous D-glucose (anhydrous dextrose) 1 ,O g
agar in powder or flake form 18 g2)
9 to
6.2 Incubator, capable of being controlled at 30 * 1 OC.
water 1 O00 ml
Preparation
6.3 Petri dishes made of glass or plastics, diameter 90 to
1 O0 mm.
Dissolve the components or the dehydrated complete
medium in the water by boiling. Adjust the pH, if
6.4 Total delivery pipettes (blow-out pipettes), having a
necessary (checking with the pH meter), so that after
nominal capacity of 1 ml.
sterilization it is 7,O f 0,2 at 25 OC.
Dispense the medium into test tubes (6.8). in quantities
6.5 Water bath or similar apparatus, capable of being
of 15 ml per tube, or into flasks or bottles of capacity
controlled at 45 f 0,5 OC.
not greater than 500 ml, in quantities of approximately
half the volume of the container.
6.6 Colony counting equipment consisting of an
illuminated base with a dark background fitted with a
Sterilize in an autoclave at 121 f I OC for 20 min. if
magnifying lens to be used at a magnification of 1,5 diam-
the medium is to be used immediately, cool it to
eters, and a mec
...

~
NORME INTERNATIONALE 4833
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION .MEXnYHAPOnHAII OPïAHH3AUHII il0 CrAHnAFTH3A4;HH*ORGANlSATlON INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Microbiologie - Directives générales pour le dénombrement
*
des micro-organismes - Méthode par comptage des colonies
obtenues à 30 OC
Microbiology - General guidance for enumeration of micro-oryanisms - Colony count technique at 30 OC
Première édition - 1978-02-01
LL
-
Réf. no : IS0 4833-1978 (FI
CDU 663.1
Co
%
-_
FJ Descripteuts : produit alimentaire, produit animal, analyse microbiologique, comptage, micro-organisme.
el
Co
rs
- 8
Prix basé sur 4 pages

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-
AVANT-PROPOS
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d'organismes nationaux de normalisation (comités membres de I'ISO). L'élaboration
des Normes internationales est confiée aux comités techniques de I'ISO. Chaque
comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique
correspondant. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I'ISO, participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont
soumis aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme
Normes internationales par le Conseil de I'ISO.
La Norme internationale IS0 4833 a été élaborée par le comité technique
ISO/TC 34, Produits agricoles alimentaires, et a été soumise aux comités membres
en juillet 1976.
Les comités membres des pays suivants l'ont approuvée :
Afrique du Sud, Rép. d' Ghana Pologne
Allemagne, R.F, Hongrie Portugal
Australie Inde Roumanie
Autriche Iran Royaume-Uni
Canada Irlande Tchécoslovaquie
Chili Israël Turquie
Espagne Mexique U.S.A.
Yougoslavie
France Pays-Bas
Les comités membres des pays suivants l'ont désapprouvée pour des raisons
techniques :
Nouvelle-Zélande
Thaïlande
O Organisation internationale de normalisation, 1978 O
Imprimé en Suisse

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IS0 4833-1978 (F)
NORME INTERNATIONALE
Microbiologie - Directives générales pour le dénombrement
des micro-organismes - Méthode par comptage des colonies
obtenues à 30 "C
O INTRODUCTION
est sujette à de grandes variations. II est recommandé
d'appliquer cette norme et d'interpréter les résultats à la
La présente Norme internationale se propose de fournir des
lumière des renseignements donnés en 10.2.
directives générales pour l'examen des produits non traités
dans les Normes internationales existant actuellement et
pour être étudiées par les organismes élaborant des
2 RÉFÉRENCES
méthodes d'essai microbiologiques destinées à être appli-
IS0 2293, Viandes et produits à base de viande - Dénom-
quées à des produits alimentaires ou à des aliments pour
brement des germes aérobies à 30 C (Méthode de référence).
animaux. En raison de la grande ,diversité des produits
entrant dans ce domaine d'application, il est possible que
IS0 3565, Viandes et produits à base de viande -
ces directives, dans tous leurs détails, ne conviennent pas
Recherche des salmonellae (Méthode de référence).
exactement à certains produits et que, pour certains autres
produits, il puisse être nécessaire d'employer des méthodes
IS0 . . ., Microbiologie - Directives générales pour la
différentes. Néanmoins, il est à espérer que, dans tous les
préparation des di1utions.I )
cas, tous les efforts seront faits pour appliquer chaque fois
qu'il sera possible les directives données et qu'on n'aura
3 DÉFINITION
recours à des dérogations que si cela est absolument néces-
saire pour des raisons techniques.
Pour les besoins de la présente Norme internationale, la
définition suivante est applicable :
Lorsque la présente Norme internationale sera réexaminée,
il sera tenu compte de tous les renseignements disponibles
micro-organismes : Bactéries, levures et moisissures se
à ce moment-là, à savoir dans quelle mesure les directives
développant en aérobies à 30 OC, dans les conditions opé-
auront été suivies et les raisons pour lesquelles il aura été
ratoires décrites.
nécessaire d'y déroger dans le cas de produits particuliers.
L'harmonisation des méthodes d'essai ne peut pas être
4 PRINCIPE
immédiate et, pour certains groupes de produits, des normes
nationales et/ou des Normes internationales existent
4.1 Ensemencement en profondeur d'un milieu de culture
peut-être déjà, qui ne concordent pas avec ces directives. Au
défini, coulé dans deux boîtes de Petri, avec une quantité
cas où des Normes internationales existent déjà pour le
déterminée de l'échantillon pour essai si le produit à
produit à contrôler, elles devront être appliquées, mais il
examiner est liquide, ou avec une quantité déterminée de
serait souhaitable que, lorsqu'elles viendront en révision,
suspension mère dans le cas d'autre produits.
elles soient modifiées de façon à se conformer à la présente
les mêmes conditions, ensemencement des dilutions
Dans
Norme internationale si bien que, finalement, les seules
décimales obtenues à partir de l'échantillon pour essai ou
divergences restantes seront celles qui auront été nécessaires
de la suspension mère.
pour des raisons techniques bien établies.
4.2 Incubation de ces boîtes durant 72 h à 30°C en
aérobiose.
1 OBJET ET DOMAINE D'APPLICATION
La présente Norme internationale donne des directives
4.3 Calcul du nombre de micro-organismes par millilitre
générales pour le dénombrement des micro-organismes
à partir du nombre de colonies
ou par gramme d'échantillon,
dans les produits destinés à la consommation humaine
obtenues dans les boîtes de Petri retenues (voir 10.1 ).
ou à l'alimentation animale, par comptage des colonies
obtenues en milieu solide, après incubation en aérobiose
à 30 OC.
5 ÉCHANTILLONNAGE
Des limites sont imposées aux possibilités d'application de
Effectuer l'échantillonnage conformément à la Norme inter-
la présente Norme internationale, du fait que cette méthode nationale du produit concerné.
1) En préparation.
1

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6 APPAREILLAGE ET VERRERIE 7.2 Diluant
Matériel courant de laboratoir iologie, et Utiliser un diluant, tamponné ou non, à base de peptone
du chlorure de sodium, par exemple diluant
notamment :
(voir 5.3 de i'iSO2293) ou eau peptonée
6.1 Appareil pour la stérilisatio tamponnée (voir 6.2.1 de I'ISO 3565).
ou en chaleur humide (autoclave)
Le matériel en contact avec I
7.3 Gélose pour dénombrement
diluant et l'échantillon, sauf s'il
ment celui en plastique), doit ê Composition
t I'd&
- soit- en id"& trvptonel
comprise entry170 et i75 durant au moins 1 h,
extrait de levure déshydraté
dextrose anhydre 1,o 9
agar-agar en poudre ou en paillettes
9 à 18g2)
eau 1000ml
6.2 Étuve, réglable à 30 f 1 OC.
Préparation
6.3 Boîtes de Petri, en verre ou en plastique, diamètre de Dissoudre, dans l'eau à l'ébullition, les composants ou
90 à 100 mm. le milieu complet déshydraté. Si nécessaire, ajuster le pH
(en contrôlant au pH-mètre) de sorte qu'après stériti-
6.4 Pipettes à écoulement total (pipettes à souffler), de
sation, il soit de 7,O f 0,2 à 25 OC.
capacité nominale 1 ml.
Répartir le milieu dans des tubes à essais (6.8), à raison
de 15 ml par tube, ou dans des fioles dont la capacité
6.5 Bain d'eau, ou équipement similaire, réglable
ne dépasse pas 500 ml, à raison d'environ la moitié du
à 45 k 0,5 OC.
volume de la fiole,
6.6 Appareil de comptage de colonies, comportant un
Stériliser à l'autoclave à 121 f 1 OC durant 20 min.
système d'éclairage avec fond noir, muni d'une loupe
Si le milieu est utilisé extemporanément, le refroidir à
devant être utilisée à un grossissement de 1,5 et d'un
45 f 0,5 OC au bain d'eau (6.5) avant emploi.
compteur numérique mécanique ou élec
...