Fruits, vegetables and derived products — Determination of nitrite and nitrate content — Molecular absorption spectrometric method

The method consists in extracting a test portion with hot water, precipitating the protein by addition of solutions of potassium hexacyanoferrate(II) and zinc acetate, and filtrating the precipitate. Further, reduction of the nitrate to nitrite by metallic cadmium (only for determining the nitrate). Then addition of sulfanilamide chloride and N-(1-naphtyl)ethylenediamine and measurement of the red complex obtained at a wavelength of 538 nm.

Fruits, légumes et produits dérivés — Détermination de la teneur en nitrite et en nitrate — Méthode photométrique d'absorption moléculaire

Sadje, zelenjava in sadni in zelenjavni proizvodi - Določanje vsebnosti nitritov in nitratov - Molekularna absorpcijska spektrometrična metoda

General Information

Status
Published
Publication Date
31-Oct-1984
Current Stage
9093 - International Standard confirmed
Start Date
16-Jul-2004
Completion Date
13-Jan-2022

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ISO 6635:1984 - Fruits, vegetables and derived products -- Determination of nitrite and nitrate content -- Molecular absorption spectrometric method
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ISO 6635:1984 - Fruits, légumes et produits dérivés -- Détermination de la teneur en nitrite et en nitrate -- Méthode photométrique d'absorption moléculaire
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lnternationa Standard

INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATlON.MEIK,CtYHAPO~HAR OPTAHM3ALWlR f-lo CTAH~APTM3ALWl.ORGANlSATlON INTERNATIONALE DE NORMALISATION

Fruits, vegetables and derived products - Determination
of nitrite and nitrate content - Molecular absorption
spectrometric method

Fruits, ldgumes et produits d&iv&s - Dhtermina tion de la teneur en nitrite et en nitrate - Me thode spec tromk trique d’absorp tion

mol~culaire
First edition - 1984-11-01
UDC 634/635 : 543.42 : 536.173/.175 Ref. No. IS0 6635-1984 (E)

Descriptors : agricultural products, fruits, vegetables, fruit and vegetable products, chemical analysis, determination of content, nitrites,

nitrates, spectrochemical analysis.
Price based on 4 pages
---------------------- Page: 1 ----------------------
Foreword

IS0 (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of

national standards bodies (IS0 member bodies). The work of preparing International

Standards is normally carried out through IS0 technical committees. Each member

body interested in a subject for which a technical committee has been established has

the right to be represented on that committee. International organizations, govern-

mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.

Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to

the member bodies for approval before their acceptance as International Standards by

the IS0 Council. They are approved in accordance with IS0 procedures requiring at

least 75 % approval by the member bodies voting.
International Standard IS0 6635 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34,
Agricultural food products.
International Organization for Standardization, 1984
Printed in Switzerland
---------------------- Page: 2 ----------------------
INTERNATIONAL STANDARD IS0 6635-1984 (E)
Fruits, vegetables and derived products - Determination
of nitrite and nitrate content - Molecular absorption
spectrometric method
1 Scope and field of application 3.3 Zinc acetate, solution.
This International Standard specifies a method for the deter-
Dissolve 220 g of zinc acetate dihydrate [Zn(CH3C00)22H20]
mination of the nitrite and nitrate content of fruits, vegetables
in a mixture of water and 30 ml of glacial acetic acid in a
and derived products.
1 000 ml one-mark volumetric flask and make up to the mark
with water.
2 Principle
3.4 Reagent for colour development.
2.1 Determination of nitrite
NOTE - Solutions I and II can be stored in well closed, dark brown
Extraction of a test portion with hot water, precipitation of
bottles for up to 1 week.
the proteins by addition of solutions of potassium hexacyano-
ferrate(ll)l) and zinc acetate, and filtration of the precipitate.
Addition of sulfanilamide chloride and IV-(I-naphthyl)
3.4.1 Solution I.
ethylenediamine dihydrochloride to the filtrate, and spec-
trometric measurement of the red complex obtained in the
presence of nitrite at a wavelength of 538 nm.
Dissolve 0,4 g of sulfanilamide in about 160 ml of water in a
200 ml one-mark volumetric flask by heating on a boiling water-

2.2 Determination of nitrate bath. Cool and filter if necessary, then add, while agitating,

20 ml of hydrochloric acid (eZO = I,19 g/ml). Dilute to the
Extraction of a test portion with hot water, precipitation of the
mark with water and mix.
proteins by addition of solutions of potassium hexacyanofer-
rate(ll)l) and zinc acetate, and filtration of the precipitate.
Reduction of the nitrate to nitrite by metallic cadmium. Addi-
3.4.2 Solution II.
tion of sulfanilamide chloride and IV-( 1 -naphthyl)ethylene-
diamine dihydrochloride to the filtrate, and spectrometric
Dissolve 0,l g of /V-l I-naphthyl)ethylenediamine dihydro-
measurement of the red complex obtained in the presence of
chloride (C10H7NHCH,CH2NH,~2HCI) in water in a 100 ml one-
nitrite at a wavelength of 538 nm.
mark volumetric flask. Make up to the mark with water and
mix.
3 Reagents
3.4.3 Solution Ill.
All reagents shall be of recognized analytical grade and the
water used shall be distilled water or water of at least equivalent
purity.
Dilute 445 ml of hydrochloric acid (eZO = 1 ,I9 g/ml) to the
mark with water in a 1 000 ml one-mark volumetric flask.
3.1 Disodium tetraborate, saturated solution.
Dissolve 50 g of disodium tetraborate decahydrate
3.5 Zinc, in rods about 150 mm long and of diameter 5 to
(Na2B,0,~10H20) in 1 000 ml of tepid water and cool to room
7 mm.
temperature.
3.6 Cadmium sulfate, solution.
3.2 Potassium hexacyanoferrate(II), solution.
Dissolve 106 g of potassium hexacyanoferrate(II) trihydrate
Dissolve 40 g of cadmium sulfate octahydrate (3CdSO,g8H,O)

[K,Fe(CN)Gm3H,01 in water in a 1 000 ml one-mark volumetric in water in a 200 ml one-mark volumetric flask and make up to

flask and make up to the mark with water. the mark with water.
1) Formerly known as potassium ferrocyanide.
---------------------- Page: 3 ----------------------
IS0 66354984 (E)
3.7 Cadmium. 4.1.4 Fluted filter paper, nitrite-free.
Place the zinc rods (3.5) in a 250 ml tall-form beaker containing
4.1.5 Conical flasks, of ca pacity 25 ml, fitted with ground-
200 ml of the cadmium sulfate solution (3.6) and leave for 1 h,
glass stoppers.
regularly scraping off the reduced cadmium, using the spatula
(4.1.7).
4.1.6 Boiling water-bath.
Pulverize in the beaker using the stirring rod (4.1.8). Before
use, treat the cadmium collected from the zinc rods with
4.1.7 Spatula, the end of which is coated with PTFE.
hydrochloric acid, c(HCI) = 0,l mol/ll), then wash several
times with water.
4.1.8 Stirring rod, with the end flattened and covered with
PTFE.
Pulverize the cadmium collected and keep it in water.
4.1.9 Spectrometer, with selectors for continuous or
3.8 Ammoniacal buffer solution, pH 9,6.
suitable for measurements at a
discontinuous variation,
wavelength of 538 nm, fitted with cells of thickness 1 cm.
Dissolve 37,4 g of ammonium chloride (NH&I) in about 900 ml
of water in a 1 000 ml one-mark volumetric flask. Adjust the

solution to pH 9,6 with concentrated ammonia solution, 4.1.10 Analytical balance.

= 088 g/ml, and make up to the mark with water.
@20
4.2 Procedure
3.9 Sodium nitrite, standard solution.
4.2.1 Preparation of the test sample
Weigh, to the nearest 1 mg, 3 g of sodium nitrite (NaN0$2),
previously dried at 115 + 5 OC to constant mass, and dissolve it
Mix the laboratory sample well. If necessary, first remove
in 50 ml of water. Transfer quantitatively to a 1 000 ml one-
stones and hard seed-cavity walls and pass the laboratory
mark volumetric flask, shake well and make up to the mark.
sample through a mechanical grinding mill.
Pipette 5 ml of this solution into a 1 000 ml one-mark
Allow frozen or deep frozen products to thaw in a closed vessel
volumetric flask and make up to the mark.
and add the liquid formed during this process to the product
before homogenization.
...

SLOVENSKI STANDARD
SIST ISO 6635:1995
01-marec-1995

6DGMH]HOHQMDYDLQVDGQLLQ]HOHQMDYQLSURL]YRGL'RORþDQMHYVHEQRVWLQLWULWRYLQ

QLWUDWRY0ROHNXODUQDDEVRUSFLMVNDVSHNWURPHWULþQDPHWRGD

Fruits, vegetables and derived products -- Determination of nitrite and nitrate content --

Molecular absorption spectrometric method

Fruits, légumes et produits dérivés -- Détermination de la teneur en nitrite et en nitrate --

Méthode photométrique d'absorption moléculaire
Ta slovenski standard je istoveten z: ISO 6635:1984
ICS:
67.080.01 Sadje, zelenjava in njuni Fruits, vegetables and
proizvodi na splošno derived products in general
SIST ISO 6635:1995 en

2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

---------------------- Page: 1 ----------------------
SIST ISO 6635:1995
---------------------- Page: 2 ----------------------
SIST ISO 6635:1995
lnternationa Standard

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Fruits, vegetables and derived products - Determination
of nitrite and nitrate content - Molecular absorption
spectrometric method

Fruits, ldgumes et produits d&iv&s - Dhtermina tion de la teneur en nitrite et en nitrate - Me thode spec tromk trique d’absorp tion

mol~culaire
First edition - 1984-11-01
UDC 634/635 : 543.42 : 536.173/.175 Ref. No. IS0 6635-1984 (E)

Descriptors : agricultural products, fruits, vegetables, fruit and vegetable products, chemical analysis, determination of content, nitrites,

nitrates, spectrochemical analysis.
Price based on 4 pages
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SIST ISO 6635:1995
Foreword

IS0 (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of

national standards bodies (IS0 member bodies). The work of preparing International

Standards is normally carried out through IS0 technical committees. Each member

body interested in a subject for which a technical committee has been established has

the right to be represented on that committee. International organizations, govern-

mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.

Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to

the member bodies for approval before their acceptance as International Standards by

the IS0 Council. They are approved in accordance with IS0 procedures requiring at

least 75 % approval by the member bodies voting.
International Standard IS0 6635 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34,
Agricultural food products.
International Organization for Standardization, 1984
Printed in Switzerland
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SIST ISO 6635:1995
INTERNATIONAL STANDARD IS0 6635-1984 (E)
Fruits, vegetables and derived products - Determination
of nitrite and nitrate content - Molecular absorption
spectrometric method
1 Scope and field of application 3.3 Zinc acetate, solution.
This International Standard specifies a method for the deter-
Dissolve 220 g of zinc acetate dihydrate [Zn(CH3C00)22H20]
mination of the nitrite and nitrate content of fruits, vegetables
in a mixture of water and 30 ml of glacial acetic acid in a
and derived products.
1 000 ml one-mark volumetric flask and make up to the mark
with water.
2 Principle
3.4 Reagent for colour development.
2.1 Determination of nitrite
NOTE - Solutions I and II can be stored in well closed, dark brown
Extraction of a test portion with hot water, precipitation of
bottles for up to 1 week.
the proteins by addition of solutions of potassium hexacyano-
ferrate(ll)l) and zinc acetate, and filtration of the precipitate.
Addition of sulfanilamide chloride and IV-(I-naphthyl)
3.4.1 Solution I.
ethylenediamine dihydrochloride to the filtrate, and spec-
trometric measurement of the red complex obtained in the
presence of nitrite at a wavelength of 538 nm.
Dissolve 0,4 g of sulfanilamide in about 160 ml of water in a
200 ml one-mark volumetric flask by heating on a boiling water-

2.2 Determination of nitrate bath. Cool and filter if necessary, then add, while agitating,

20 ml of hydrochloric acid (eZO = I,19 g/ml). Dilute to the
Extraction of a test portion with hot water, precipitation of the
mark with water and mix.
proteins by addition of solutions of potassium hexacyanofer-
rate(ll)l) and zinc acetate, and filtration of the precipitate.
Reduction of the nitrate to nitrite by metallic cadmium. Addi-
3.4.2 Solution II.
tion of sulfanilamide chloride and IV-( 1 -naphthyl)ethylene-
diamine dihydrochloride to the filtrate, and spectrometric
Dissolve 0,l g of /V-l I-naphthyl)ethylenediamine dihydro-
measurement of the red complex obtained in the presence of
chloride (C10H7NHCH,CH2NH,~2HCI) in water in a 100 ml one-
nitrite at a wavelength of 538 nm.
mark volumetric flask. Make up to the mark with water and
mix.
3 Reagents
3.4.3 Solution Ill.
All reagents shall be of recognized analytical grade and the
water used shall be distilled water or water of at least equivalent
purity.
Dilute 445 ml of hydrochloric acid (eZO = 1 ,I9 g/ml) to the
mark with water in a 1 000 ml one-mark volumetric flask.
3.1 Disodium tetraborate, saturated solution.
Dissolve 50 g of disodium tetraborate decahydrate
3.5 Zinc, in rods about 150 mm long and of diameter 5 to
(Na2B,0,~10H20) in 1 000 ml of tepid water and cool to room
7 mm.
temperature.
3.6 Cadmium sulfate, solution.
3.2 Potassium hexacyanoferrate(II), solution.
Dissolve 106 g of potassium hexacyanoferrate(II) trihydrate
Dissolve 40 g of cadmium sulfate octahydrate (3CdSO,g8H,O)

[K,Fe(CN)Gm3H,01 in water in a 1 000 ml one-mark volumetric in water in a 200 ml one-mark volumetric flask and make up to

flask and make up to the mark with water. the mark with water.
1) Formerly known as potassium ferrocyanide.
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SIST ISO 6635:1995
IS0 66354984 (E)
3.7 Cadmium. 4.1.4 Fluted filter paper, nitrite-free.
Place the zinc rods (3.5) in a 250 ml tall-form beaker containing
4.1.5 Conical flasks, of ca pacity 25 ml, fitted with ground-
200 ml of the cadmium sulfate solution (3.6) and leave for 1 h,
glass stoppers.
regularly scraping off the reduced cadmium, using the spatula
(4.1.7).
4.1.6 Boiling water-bath.
Pulverize in the beaker using the stirring rod (4.1.8). Before
use, treat the cadmium collected from the zinc rods with
4.1.7 Spatula, the end of which is coated with PTFE.
hydrochloric acid, c(HCI) = 0,l mol/ll), then wash several
times with water.
4.1.8 Stirring rod, with the end flattened and covered with
PTFE.
Pulverize the cadmium collected and keep it in water.
4.1.9 Spectrometer, with selectors for continuous or
3.8 Ammoniacal buffer solution, pH 9,6.
suitable for measurements at a
discontinuous variation,
wavelength of 538 nm, fitted with cells of thickness 1 cm.
Dissolve 37,4 g of ammonium chloride (NH&I) in about 900 ml
of water in a 1 000 ml one-mark volumetric flask. Adjust the

solution to pH 9,6 with concentrated ammonia solution, 4.1.10 Analytical balance.

= 088 g/ml, and make up to the mark with water.
@20
4.2 Procedure
3.9 Sodium nitrite, standard solution.
4.2.1 Preparation of the test sample
Weigh, to the nearest 1 mg, 3 g of sodium nitrite (NaN0$2),
previously dried at 115 + 5 OC to c
...

Norme internationale

INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDAF?DIZATION.ME~YHAPO~HAR OPI-AHl+l3AlWlR fl0 CTAH~APTbl3Al&lbWORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION

Fruits, légumes et produits dérivés -
Détermination de la teneur en nitrite et en nitrate -
Méthode spectrométrique d’absorption moléculaire

Fruits, vegetables and derived products - Determina tion of nitrite and nitrate content - Molecular absorption spec trome trie

method
Première édition - 1984-11-01
CDU 634/635: 543.42 : 536.173/.175
Réf. no : ISO 6635-1984 (F)

fruit, légume, produit dérivé des fruits et légumes, analyse chimique, dosage, nitrite, nitrate, méthode

Descripteurs : produit agricole,
spectrochimique.
Prix basé sur 4 pages
---------------------- Page: 1 ----------------------
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale

d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I’ISO). L’élaboration

des Normes internationales est confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque

comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique

créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouverne-

mentales, en liaison avec I’ISO, participent également aux travaux.

Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis

aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-

nationales par le Conseil de I’ISO. Les Normes internationales sont approuvées confor-

mément aux procédures de I’ISO qui requièrent l’approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.

La Norme internationale ISO 6635 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34,

Produits agricoles alimentaires.
0 Organisation internationale de normalisation, 1984
Imprimé en Suisse
---------------------- Page: 2 ----------------------
NORME INTERNATIONALE ISO 66354984 (F)
Fruits, légumes et produits dérivés -
Détermination de la teneur en nitrite et en nitrate -
Méthode spectrométrique d’absorption moléculaire
1 Objet et domaine d’application 3.3 Acétate de zinc, solution.
Dans une fiole jaugée de 1 000 ml, dissoudre 220 g d’acétate de
La présente Norme internationale spécifie une méthode de
zinc dihydraté [ZnKH3C00),.2HzOl dans un mélange formé
détermination de la teneur en nitrite et en nitrate des fruits, des
d’eau et de 30 ml d’acide acétique cristallisable. Compléter au
légumes et des produits dérivés.
trait repère avec de l’eau.
2 Principe
3.4 Réactif pour le développement de la coloration.
NOTE - Les solutions I et Il peuvent être conservées dans des flacons
2.1 Dosage de nitrite
brun foncé bien fermés, au réfrigérateur durant une semaine.
Extraction à l’eau chaude d’une prise d’essai, précipitation des
3.4.1 Solution 1.
protéines par I’hexacyanoferrate(II)l) de potassium et l’acétate
de zinc, et filtration du précipité. Addition de chlorure de sulfa-
Dans une fiole jaugée de 200 ml, introduire 0,4 g de sulfanila-
nilamide et de dichlorhydrate de Wnaphtyl-1) éthylène diamine
mide, les dissoudre dans environ 160 ml d’eau en chauffant au
au filtrat, et mesurage spectrométrique du complexe rouge
bain d’eau bouillante. Refroidir et filtrer si nécessaire, ajouter
obtenu en présence de nitrite, à une longueur d’onde de
alors tout en agitant 20 ml d’acide chlorhydrique
538 nm.
1,19 g/ml). Ajuster au trait repère avec de l’eau et
(em =
homogénéiser.
2.2 Dosage de nitrate
3.4.2 Solution II.
Extraction à l’eau chaude d’une prise d’essai, précipitation des
protéines par l’hexacyanoferrate(ll)t) de potassium et l’acétate
Dans une fiole jaugée de 100 ml, dissoudre 0,l g de A/-( naph-
de zinc, et filtration du précipité. Réduction du nitrate extrait
tyl-1 )-éthylène diamine (CI~H7NHCH,CH,NH,.2HCI). Ajuster
dans le filtrat en nitrite, par du cadmium métallique. Addition
au trait repére avec de l’eau et homogénéiser.
de chlorure de sulfanilamide et de dichlorhydrate de
N-(naphtyl-1) éthyléne diamine au filtrat, et mesurage spectro-
3.4.3 Solution Ill.
métrique du complexe rouge obtenu en présence de nitrite, à
une longueur d’onde de 538 nm.
Dans une fiole jaugée de 1 000 ml, introduire 445 ml d’acide
chlorhydrique (eZO = 1,19 g/ml), ajuster au trait repère avec de
l’eau.
3 Réactifs
3.5 Zinc, en baguettes d’environ 150 mm de longueur et de 5
Tous les réactifs doivent être de qualité analytique reconnue.
à 7 mm de diamétre.
L’eau utilisée doit être de l’eau distillée ou de l’eau de pureté au
moins équivalente.
3.6 Sulfate de cadmium, solution.
3.1 Tétraborate disodique, solution saturée.
Dans une fiole jaugée de 200 ml, dissoudre 40 g de sulfate de

Dans 1 000 ml d’eau tiéde, dissoudre 50 g de tétraborate disodi- cadmium octohydraté (3CdS0,.8HZO) dans de l’eau et complé-

que décahydraté (Na,B,0,.10H20) et laisser refroidir à la tem- ter au trait repère.

pérature ambiante.
3.7 Cadmium.
3.2 Hexacyanoferrate(lI1 de potassium, solution.
Dans un bécher de 250 ml (forme haute) contenant 200 ml de la

Dans une fiole jaugée de 1 000 ml, dissoudre 106 g d’hexacya- solution de sulfate de cadmium (3.6), introduire les baguettes

noferrate(ll) de potassium trihydraté [ K,Fe( CN),.3H,O] dans de de zinc (3.5), en grattant régulièrement à l’aide de la spatule

l’eau et compléter au trait repère avec de l’eau. (4.1.7) le cadmium réduit pendant 1 h.

1) Anciennement appelé ferrocyanure de potassium.
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 66354984 (FI
4.1.6 Bain d’eau bouillante.
Pulvériser dans le bécher à l’aide de l’agitateur (4.1.8). Traiter le
cadmium recueilli sur les baguettes de zinc, avant chaque utili-
sation, avec de l’acide chlorhydrique, C(H~I) = 0,l mol/ll),
4.1.7 Spatule, dont le bout est recouvert de PTFE.
puis laver à plusieurs reprises avec de l’eau.
4.1.8 Agitateur, à bout aplati et recouvert de PTFE.
Réduire en poudre le cadmium recueilli et le conserver dans de
l’eau.
4.1.9 Spectromètre, à sélecteur de radiations à variation
continue ou discontinue, permettant des mesurages à une lon-
3.8 Solution tampon ammoniacale, pH 9’6.
gueur d’onde de 538 nm, équipé de cuves de 1 cm d’épaisseur.
Dans une fiole jaugée de 1 000 ml, dissoudre 37’4 g de chlorure
d’ammonium (NH,CI) dans environ 900 ml d’eau. Ajuster la
4.1.10 Balance analytique.
solution à pH 9’6 avec une solution concentrée d’hydroxyde
d’ammonium, ezo = 0’88 g/ml, et compléter au trait repère
avec de l’eau. 4.2 Mode opératoire
3.9 Nitrite de sodium, solution étalon.
4.2.1 Préparation de l’échantillon pour essai
Peser, à 1 mg près, 3 g de nitrite de sodium (NaNO,lz) préala-
blement séché à 115 & 5 OC jusqu’à masse constante, et les
dissoudre dans 50 ml d’eau. Transvaser quantitativement la
solution dans une fiole jaugée de 1 000 ml, bien agiter et com-
pléter au trait repère.
Laisser décongeler en vase clos les produits congelés ou surge-
lés et ajouter le liquide formé au cours de ce processus au pro-
Prélever, à l’aide d’une pipette, 5 ml de cette solution, les intro-
duit avant l’homogénéisation.
duire dans une fiole jaugée de 1 000 ml et compléter au trait
repère.
4.2.2 Prise d’essai
1 ml de cette solution étalon contient 10 pg d’ion nitrite (NO, 1.
Prélever, à l’aide d’une pipette (4.1.31, 1 à 10 ml, o
...

Norme internationale

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Détermination de la teneur en nitrite et en nitrate -
Méthode spectrométrique d’absorption moléculaire

Fruits, vegetables and derived products - Determina tion of nitrite and nitrate content - Molecular absorption spec trome trie

method
Première édition - 1984-11-01
CDU 634/635: 543.42 : 536.173/.175
Réf. no : ISO 6635-1984 (F)

fruit, légume, produit dérivé des fruits et légumes, analyse chimique, dosage, nitrite, nitrate, méthode

Descripteurs : produit agricole,
spectrochimique.
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Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale

d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I’ISO). L’élaboration

des Normes internationales est confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque

comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique

créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouverne-

mentales, en liaison avec I’ISO, participent également aux travaux.

Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis

aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-

nationales par le Conseil de I’ISO. Les Normes internationales sont approuvées confor-

mément aux procédures de I’ISO qui requièrent l’approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.

La Norme internationale ISO 6635 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34,

Produits agricoles alimentaires.
0 Organisation internationale de normalisation, 1984
Imprimé en Suisse
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NORME INTERNATIONALE ISO 66354984 (F)
Fruits, légumes et produits dérivés -
Détermination de la teneur en nitrite et en nitrate -
Méthode spectrométrique d’absorption moléculaire
1 Objet et domaine d’application 3.3 Acétate de zinc, solution.
Dans une fiole jaugée de 1 000 ml, dissoudre 220 g d’acétate de
La présente Norme internationale spécifie une méthode de
zinc dihydraté [ZnKH3C00),.2HzOl dans un mélange formé
détermination de la teneur en nitrite et en nitrate des fruits, des
d’eau et de 30 ml d’acide acétique cristallisable. Compléter au
légumes et des produits dérivés.
trait repère avec de l’eau.
2 Principe
3.4 Réactif pour le développement de la coloration.
NOTE - Les solutions I et Il peuvent être conservées dans des flacons
2.1 Dosage de nitrite
brun foncé bien fermés, au réfrigérateur durant une semaine.
Extraction à l’eau chaude d’une prise d’essai, précipitation des
3.4.1 Solution 1.
protéines par I’hexacyanoferrate(II)l) de potassium et l’acétate
de zinc, et filtration du précipité. Addition de chlorure de sulfa-
Dans une fiole jaugée de 200 ml, introduire 0,4 g de sulfanila-
nilamide et de dichlorhydrate de Wnaphtyl-1) éthylène diamine
mide, les dissoudre dans environ 160 ml d’eau en chauffant au
au filtrat, et mesurage spectrométrique du complexe rouge
bain d’eau bouillante. Refroidir et filtrer si nécessaire, ajouter
obtenu en présence de nitrite, à une longueur d’onde de
alors tout en agitant 20 ml d’acide chlorhydrique
538 nm.
1,19 g/ml). Ajuster au trait repère avec de l’eau et
(em =
homogénéiser.
2.2 Dosage de nitrate
3.4.2 Solution II.
Extraction à l’eau chaude d’une prise d’essai, précipitation des
protéines par l’hexacyanoferrate(ll)t) de potassium et l’acétate
Dans une fiole jaugée de 100 ml, dissoudre 0,l g de A/-( naph-
de zinc, et filtration du précipité. Réduction du nitrate extrait
tyl-1 )-éthylène diamine (CI~H7NHCH,CH,NH,.2HCI). Ajuster
dans le filtrat en nitrite, par du cadmium métallique. Addition
au trait repére avec de l’eau et homogénéiser.
de chlorure de sulfanilamide et de dichlorhydrate de
N-(naphtyl-1) éthyléne diamine au filtrat, et mesurage spectro-
3.4.3 Solution Ill.
métrique du complexe rouge obtenu en présence de nitrite, à
une longueur d’onde de 538 nm.
Dans une fiole jaugée de 1 000 ml, introduire 445 ml d’acide
chlorhydrique (eZO = 1,19 g/ml), ajuster au trait repère avec de
l’eau.
3 Réactifs
3.5 Zinc, en baguettes d’environ 150 mm de longueur et de 5
Tous les réactifs doivent être de qualité analytique reconnue.
à 7 mm de diamétre.
L’eau utilisée doit être de l’eau distillée ou de l’eau de pureté au
moins équivalente.
3.6 Sulfate de cadmium, solution.
3.1 Tétraborate disodique, solution saturée.
Dans une fiole jaugée de 200 ml, dissoudre 40 g de sulfate de

Dans 1 000 ml d’eau tiéde, dissoudre 50 g de tétraborate disodi- cadmium octohydraté (3CdS0,.8HZO) dans de l’eau et complé-

que décahydraté (Na,B,0,.10H20) et laisser refroidir à la tem- ter au trait repère.

pérature ambiante.
3.7 Cadmium.
3.2 Hexacyanoferrate(lI1 de potassium, solution.
Dans un bécher de 250 ml (forme haute) contenant 200 ml de la

Dans une fiole jaugée de 1 000 ml, dissoudre 106 g d’hexacya- solution de sulfate de cadmium (3.6), introduire les baguettes

noferrate(ll) de potassium trihydraté [ K,Fe( CN),.3H,O] dans de de zinc (3.5), en grattant régulièrement à l’aide de la spatule

l’eau et compléter au trait repère avec de l’eau. (4.1.7) le cadmium réduit pendant 1 h.

1) Anciennement appelé ferrocyanure de potassium.
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ISO 66354984 (FI
4.1.6 Bain d’eau bouillante.
Pulvériser dans le bécher à l’aide de l’agitateur (4.1.8). Traiter le
cadmium recueilli sur les baguettes de zinc, avant chaque utili-
sation, avec de l’acide chlorhydrique, C(H~I) = 0,l mol/ll),
4.1.7 Spatule, dont le bout est recouvert de PTFE.
puis laver à plusieurs reprises avec de l’eau.
4.1.8 Agitateur, à bout aplati et recouvert de PTFE.
Réduire en poudre le cadmium recueilli et le conserver dans de
l’eau.
4.1.9 Spectromètre, à sélecteur de radiations à variation
continue ou discontinue, permettant des mesurages à une lon-
3.8 Solution tampon ammoniacale, pH 9’6.
gueur d’onde de 538 nm, équipé de cuves de 1 cm d’épaisseur.
Dans une fiole jaugée de 1 000 ml, dissoudre 37’4 g de chlorure
d’ammonium (NH,CI) dans environ 900 ml d’eau. Ajuster la
4.1.10 Balance analytique.
solution à pH 9’6 avec une solution concentrée d’hydroxyde
d’ammonium, ezo = 0’88 g/ml, et compléter au trait repère
avec de l’eau. 4.2 Mode opératoire
3.9 Nitrite de sodium, solution étalon.
4.2.1 Préparation de l’échantillon pour essai
Peser, à 1 mg près, 3 g de nitrite de sodium (NaNO,lz) préala-
blement séché à 115 & 5 OC jusqu’à masse constante, et les
dissoudre dans 50 ml d’eau. Transvaser quantitativement la
solution dans une fiole jaugée de 1 000 ml, bien agiter et com-
pléter au trait repère.
Laisser décongeler en vase clos les produits congelés ou surge-
lés et ajouter le liquide formé au cours de ce processus au pro-
Prélever, à l’aide d’une pipette, 5 ml de cette solution, les intro-
duit avant l’homogénéisation.
duire dans une fiole jaugée de 1 000 ml et compléter au trait
repère.
4.2.2 Prise d’essai
1 ml de cette solution étalon contient 10 pg d’ion nitrite (NO, 1.
Prélever, à l’aide d’une pipette (4.1.31, 1 à 10 ml, o
...

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