ISO 16140-2:2016
(Main)Microbiology of the food chain — Method validation — Part 2: Protocol for the validation of alternative (proprietary) methods against a reference method
Microbiology of the food chain — Method validation — Part 2: Protocol for the validation of alternative (proprietary) methods against a reference method
ISO 16140-2:2016 specifies the general principle and the technical protocol for the validation of alternative, mostly proprietary, methods for microbiology in the food chain. Validation studies according to ISO 16140-2:2016 are intended to be performed by organizations involved in method validation. It is applicable to the validation of methods for the analysis (detection or quantification) of microorganisms in - products intended for human consumption, - products intended for animal feeding, - environmental samples in the area of food and feed production, handling, and - samples from the primary production stage. It is in particular applicable to bacteria and fungi. Some clauses of ISO 16140-2:2016 could be applicable to other (micro) organisms or their metabolites on a case-by-case-basis. In the future, guidance for other organisms (e.g. viruses and parasites) will be included in ISO 16140:2016 (all parts).
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Validation des méthodes — Partie 2: Protocole pour la validation de méthodes alternatives (commerciales) par rapport à une méthode de référence
L'ISO 16140-2 :2016 établit le principe général ainsi que le protocole technique de validation des méthodes alternatives, qui sont pour la plupart commerciales, dans le domaine de la microbiologie de la chaîne alimentaire. Les études de validation conformément à l'ISO 16140-2 :2016 sont destinées à être effectuées par des organismes impliqués dans la validation de méthode. Elle est applicable à la validation de méthodes pour l'analyse (détection ou quantification) de micro-organismes présents dans: - les produits destinés à la consommation humaine, - les produits destinés à l'alimentation animale, - les échantillons environnementaux dans le domaine de la production et de la manutention de produits alimentaires, et - les échantillons au stade de la production primaire. L'ISO 16140-2 :2016 est notamment applicable aux bactéries et aux champignons. Certains paragraphes de l'ISO 16140-2 :2016 peuvent être applicables à d'autres micro-organismes ou à leurs métabolites au cas par cas. À l'avenir, des préconisations concernant d'autres organismes (par exemple, virus et parasites) seront incluses dans l'ISO 16140 (toutes les parties).
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INTERNATIONAL ISO
STANDARD 16140-2
First edition
2016-06-15
Microbiology of the food chain —
Method validation —
Part 2:
Protocol for the validation of
alternative (proprietary) methods
against a reference method
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Validation des méthodes —
Partie 2: Protocole pour la validation de méthodes alternatives
(commerciales) par rapport à une méthode de référence
Reference number
©
ISO 2016
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Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 General principles for the validation of alternative methods . 1
5 Qualitative methods — Technical protocol for validation . 2
5.1 Method comparison study . 2
5.1.1 General considerations . 2
5.1.2 Paired or unpaired study . 2
5.1.3 Sensitivity study . 2
5.1.4 Relative level of detection study . 7
5.1.5 Inclusivity and exclusivity study . 9
5.2 Interlaboratory study .10
5.2.1 General considerations .10
5.2.2 Measurement protocol .10
5.2.3 Calculations and summary of data .12
5.2.4 Interpretation of data .15
6 Quantitative methods — Technical protocol for validation .16
6.1 Method comparison study .16
6.1.1 General considerations .16
6.1.2 Relative trueness study .16
6.1.3 Accuracy profile study.20
6.1.4 Limit of quantification study .24
6.1.5 Inclusivity and exclusivity study .24
6.2 Interlaboratory study .26
6.2.1 General considerations .26
6.2.2 Measurement protocol .26
6.2.3 Calculations, summary, and interpretation of data .27
Annex A (informative) Classification of sample types and suggested target combinations for
validation studies .30
Annex B (normative) Order of preference for use of naturally and artificially contaminated
samples in validation studies .46
Annex C (informative) General protocols for contamination by mixture and artificial
contamination of foods .47
Annex D (informative) Models for RLOD calculations using data from the method
comparison study .50
Annex E (normative) Points to be considered when selecting strains for testing inclusivity
and exclusivity .52
Annex F (informative) Considerations for calculations of the relative level of detection
(RLOD) between laboratories as obtained in an interlaboratory study .54
Annex G (informative) Principle of the accuracy profile for validation of quantitative models .57
Annex H (informative) Application of the accuracy profile in the method comparison study .59
Annex I (informative) Example of the application of the accuracy profile for an
interlaboratory study .62
Bibliography .66
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www.iso.org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation on the meaning of ISO specific terms and expressions related to conformity
assessment, as well as information about ISO’s adherence to the WTO principles in the Technical
Barriers to Trade (TBT) see the following URL: Foreword - Supplementary Information
The committee responsible for this document is ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 9,
Microbiology.
This first edition of ISO 16140-2, together with ISO 16140-1, cancels and replaces ISO 16140:2003, which
has been technically revised. It also incorporates the Amendment ISO 16140:2003:Amd.1:2011.
ISO 16140 consists of the following parts, under the general title Microbiology of the food chain —
Method validation:
— Part 1: Vocabulary
— Part 2: Protocol for the validation of alternative (proprietary) methods against a reference method
The following parts are under preparation:
— Part 3: Protocol for the verification of reference and validated alternative methods implemented in a
single laboratory
— Part 4: Protocol for single-laboratory (in-house) method validation
— Part 5: Protocol for factorial interlaboratory validation of non-proprietary methods
— Part 6: Protocol for the validation of alternative (proprietary) methods for microbiological confirmation
and typing
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Introduction
Today, many alternative, mostly proprietary, methods exist that are used to assess the microbiological
quality of raw materials and finished products and the microbiological status of manufacturing
procedures. These methods are often faster and easier to perform than the corresponding standardized
method. The developers, end users, and authorities need a reliable common protocol for the validation
of such alternative methods. The data generated will also provide potential end users with performance
data for a given method, thus, enabling them to make an informed choice on the adoption of a particular
method. The data generated can also be the basis for the certification of a method by an independent
organization.
This part of ISO 16140
— is intended to provide a specific protocol and guidelines for the validation of proprietary
methods intended to be used as a rapid and/or easier method to perform than the corresponding
reference method,
— can also be used for the validation of other non-proprietary methods that are used instead of the
reference method,
— is intended as the successor of the validation protocol published in the first version of ISO 16140
(ISO 16140:2003), and
— is mainly written for the validation of methods that are capable of culturing the target microorganism,
but can also be applied to methods for microorganisms that cannot be cultured such as viruses (e.g.
Norovirus) and protozan parasites (e.g. Cryptosporidium or Giardia). In these cases, some wordings
are to be interpreted so as to fit the situation for non-culturable organisms.
The use of this part of ISO 16140 involves expertise on relevant areas such as microbiology, statistical
design, and analysis as indicated in the respective sections. The statistical expertise encompasses
overview of sampling theory and design of experiments, statistical analysis of (qualitative and
quantitative) microbiological data, and overview of statistical concepts on random sampling, sample
heterogeneity, sample stability, design of experiments, and variance components.
When this part of ISO 16140 is next reviewed, account will be taken of all information then available
regarding the extent to which the guidelines have been followed and the reasons for deviation from
them in the case of particular products.
The harmonization of validation methods cannot be immediate and for certain groups of products,
International Standards and/or national standards may already exist that do not comply with this part
of ISO 16140. It is hoped that when such standards are reviewed, they will be changed to comply with
ISO 16140 so that eventually, the only remaining departures from this part of ISO 16140 will be those
[3]
necessary for well-established technical reasons. For example, ISO 16297 deals with a very specific
validation for a specific subject (the hygienic status of raw milk samples) and will remain as a vertical
standard besides ISO 16140. If such a validation is needed, the vertical standard is more important.
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 16140-2
Première édition
2016-06-15
Microbiologie de la chaîne
alimentaire — Validation des
méthodes —
Partie 2:
Protocole pour la validation de
méthodes alternatives (commerciales)
par rapport à une méthode de
référence
Microbiology of the food chain — Method validation —
Part 2: Protocol for the validation of alternative (proprietary)
methods against a reference method
Numéro de référence
©
ISO 2016
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l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
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Sommaire Page
Avant-propos .v
Introduction .vi
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principes généraux de la validation des méthodes alternatives . 1
5 Méthodes qualitatives — Protocole technique de validation . 2
5.1 Étude comparative des méthodes . 2
5.1.1 Considérations générales . 2
5.1.2 Étude de méthodes appariées ou non appariées . 2
5.1.3 Étude de sensibilité . 3
5.1.4 Étude de niveau relatif de détection . 7
5.1.5 Étude d’inclusivité et étude d’exclusivité. 9
5.2 Étude interlaboratoires .11
5.2.1 Considérations générales .11
5.2.2 Protocole de mesure .11
5.2.3 Calculs et récapitulatif des données .12
5.2.4 Interprétation des données .15
6 Méthodes quantitatives — Protocole technique de validation .17
6.1 Étude comparative des méthodes .17
6.1.1 Considérations générales .17
6.1.2 Étude de justesse relative .17
6.1.3 Étude du profil d’exactitude .21
6.1.4 Étude de la limite de quantification .25
6.1.5 Étude d’inclusivité et étude d’exclusivité.26
6.2 Étude interlaboratoires .27
6.2.1 Considérations générales .27
6.2.2 Protocole de mesure .28
6.2.3 Calculs, récapitulatif et interprétation des données .29
Annexe A (informative) Classification de types d’échantillon et suggestions de
combinaisons cibles pour les études de validation.32
Annexe B (normative) Ordre de préférence pour l’utilisation d’échantillons naturellement
et artificiellement contaminés dans les études de validation .48
Annexe C (informative) Protocoles généraux de contamination par mélange et de
contamination artificielle d’aliments .49
Annexe D (informative) Modèles de calcul de RLOD en utilisant les données provenant de
l’étude comparative des méthodes .52
Annexe E (normative) Aspects à prendre en compte lors du choix des souches pour les
études d’inclusivité et d’exclusivité .54
Annexe F (informative) Considérations pour les calculs du niveau de détection relatif
(RLOD) entre laboratoires effectués dans le cadre d’une étude interlaboratoires .56
Annexe G (informative) Principe du profil d’exactitude pour la validation de
modèles quantitatifs .59
Annexe H (informative) Application du profil d’exactitude dans l’étude comparative
des méthodes .61
Annexe I (informative) Exemple d’application du profil d’exactitude pour une
étude interlaboratoires .64
Bibliographie .68
iv © ISO 2016 – Tous droits réservés
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www.
iso.org/directives).
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www.iso.org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la signification des termes et expressions spécifiques de l’ISO liés à
l’évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion de l’ISO aux principes
de l’OMC concernant les obstacles techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: Avant-propos —
Informations supplémentaires.
Le comité chargé de l’élaboration du présent document est l’ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-
comité SC 9, Microbiologie.
Cette première édition de l’ISO 16140-2, conjointement avec l’ISO 16140-1, annule et remplace
l’ISO 16140:2003. Cette édition constitue une révision technique. Elle incorpore également
l’Amendement ISO 16140:2003:Amd.1:2011.
L’ISO 16140 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Microbiologie de la chaîne
alimentaire — Validation des méthodes:
— Partie 1: Vocabulaire
— Partie 2: Protocole pour la validation de méthodes alternatives (commerciales) par rapport à une
méthode de référence
Les parties suivantes sont en cours de préparation:
— Partie 3: Protocole de vérification de méthodes de référence et alternatives validées appliquées dans un
laboratoire
— Partie 4: Protocole pour la validation de méthodes de laboratoire (internes)
— Partie 5: Protocole pour la validation interlaboratoires de méthodes non commerciales par plan factoriel
— Partie 6: Protocole pour la validation de méthodes alternatives (commerciales) pour la confirmation
microbiologique et le typage
Introduction
De nombreuses méthodes alternatives, qui sont pour la plupart commerciales, sont actuellement
utilisées pour évaluer la qualité microbiologique de matières premières et de produits finis ainsi que
l’état microbiologique de l’environnement de production. Ces méthodes sont souvent plus rapides
et plus faciles à mettre en œuvre que la méthode normalisée correspondante. Les développeurs, les
utilisateurs finaux et les autorités ont besoin d’un protocole commun et fiable permettant de valider ces
méthodes alternatives. Les données obtenues fourniront également aux utilisateurs finaux potentiels
des données de performance pour une méthode donnée, leur permettant ainsi de faire un choix réfléchi
concernant l’adoption d’une méthode particulière. Ces données obtenues peuvent également constituer
la base de la certification d’une méthode par un organisme indépendant.
La présente partie de l’ISO 16140:
— vise à fournir un protocole et des lignes directrices spécifiques pour la validation des méthodes
commerciales plus rapides et plus faciles à mettre en œuvre que la méthode de référence
correspondante,
— peut également être appliquée pour la validation d’autres méthodes non commerciales, utilisées à la
place de la méthode de référence,
— vise à remplacer le protocole de validation publié dans la première version de l’ISO 16140
(ISO 16140:2003), et
— est principalement rédigée pour la validation de méthodes permettant de cultiver le micro-
organisme cible, mais peut également être appliquée aux méthodes relatives aux micro-organismes
non cultivables, notamment les virus (par exemple le norovirus) et les parasites protozoaires (par
exemple Cryptosporidium ou Giardia). Dans ces cas-là, certaines expressions doivent être interprétées
pour s’adapter à la situation des organismes non cultivables.
L’application de la présente partie de l’ISO 16140 requiert une expertise des domaines tels que la
microbiologie, la réalisation de plans d’expérience et l’analyse statistiques, comme indiqué dans les
parties respectives. L’expertise statistique comprend un aperçu de la théorie de l’échantillonnage,
des plans d’expériences, des analyses statistiques de données microbiologiques (qualitatives et
quantitatives) et un aperçu de concepts statistiques relatifs à l’échantillonnage aléatoire, l’hétérogénéité
de l’échantillon, la stabilité de l’échantillon, les plans d’expérienc
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.