ISO 11816-1:2006
(Main)Milk and milk products — Determination of alkaline phosphatase activity — Part 1: Fluorimetric method for milk and milk-based drinks
Milk and milk products — Determination of alkaline phosphatase activity — Part 1: Fluorimetric method for milk and milk-based drinks
ISO 11816-1|IDF 155-1:2006 specifies a fluorimetric method for the determination of alkaline phosphatase (ALP, EC 3.1.3.1) activity in pasteurised whole milk, semi-skimmed milk, skimmed milk and flavoured milks. The method is applicable for milk from cows, sheep and goats, and milk-based drinks. The method is also suitable for the determination of high alkaline phosphatase activity in raw milk and heat-treated milk with activities of more than 2 000 mU/l after dilution of the sample as specified.
Lait et produits laitiers — Détermination de l'activité de la phosphatase alcaline — Partie 1: Méthode fluorimétrique pour le lait et les boissons à base de lait
L'ISO 11816-1|FIL 155-1:2006 décrit une méthode fluorimétrique pour la détermination de l'activité de la phosphatase alcaline (ALP, EC 3.1.3.1) dans les laits pasteurisés entiers, demi-écrémés, écrémés et aromatisés. La présente méthode est applicable aux laits de vache, de brebis et de chèvre, et aux boissons à base de lait. La méthode convient également pour la détermination d'activités élevées de la phosphatase alcaline dans le lait cru et le lait traité thermiquement, ayant des activités de plus de 2 000 milliunités par litre (mU/l) après dilution de l'échantillon, comme spécifié.
General Information
Relations
Buy Standard
Standards Content (Sample)
МЕЖДУНАРОДНЫЙ ISO
СТАНДАРТ 11816-1
IDF
155-1
Второе издание
2006-04-15
Молоко и молочные продукты.
Определение активности щелочной
фосфатазы.
Часть 1.
Флуориметрический метод для молока
и молочных напитков
Milk and milk products - Determination of alkaline phosphatase activity
Part 1: Fluorimetric method for milk and milk-based drinks
Ответственность за подготовку русской версии несёт GOST R
(Российская Федерация) в соответствии со статьёй 18.1 Устава ISO
Ссылочные номера
ISO 11816-1:2006(R)
IDF 155-1:2006(R)
©
ISO и IDF 2006
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 11816-1:2006(R)
IDF 155-1:2006(R)
Отказ от ответственности при работе в PDF
Настоящий файл PDF может содержать интегрированные шрифты. В соответствии с условиями лицензирования, принятыми
фирмой Adobe, этот файл можно распечатать или вывести на экран, но его нельзя изменить, пока не будет получена
лицензия на загрузку интегрированных шрифтов в компьютер, на котором ведется редактирование. В случае загрузки
настоящего файла заинтересованные стороны принимают на себя ответственность за соблюдение лицензионных условий
фирмы Adobe. Центральный секретариат ISO не несет никакой ответственности в этом отношении.
Adobe торговый знак фирмы Adobe Systems Incorporated.
Подробности, относящиеся к программным продуктам, использованным для создания настоящего файла PDF, можно найти в
рубрике General info файла; параметры создания PDF были оптимизированы для печати. Были приняты во внимание все
меры предосторожности с тем, чтобы обеспечить пригодность настоящего файла для использования комитетами-членами
ISO. В редких случаях возникновения проблемы, связанной со сказанным выше, просьба проинформировать Центральный
секретариат по адресу, приведенному ниже.
ДОКУМЕНТ ЗАЩИЩЕН АВТОРСКИМ ПРАВОМ
© ISO и IDF 2006
Все права сохраняются. Если не указано иное, никакую часть настоящей публикации нельзя копировать или использовать в
какой-либо форме или каким-либо электронным или механическим способом, включая фотокопии и микрофильмы, без
предварительного письменного согласия ISO или IDF по соответствующему адресу, указанному ниже.
ISO copyright office International Dairy Federation
Case postale 56 •CH-1211 Geneva 20 Diamant Building • Boulevard Auguste Reyers 80 • B-1030 Brussels
Tel. + 41 22 749 01 11 Tel. + 32 2 733 98 88
Fax + 41 22 749 09 47 Fax + 32 2 733 04 13
E-mail copyright@iso.org E-mail info@fil-idf.org
Web www.iso.org Web www.fil-idf.org
Опубликовано в Швейцарии
ii © ISO и IDF 2006 – Все права сохраняются
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 11816-1:2006(R)
IDF 155-1:2006(R)
Содержание Страница
Предисловие .iv
1 Область применения .1
2 Термины и определения .1
3 Принцип.2
4 Реагенты.2
5 Аппаратура.3
6 Отбор проб.4
7 Приготовления.4
7.1 Молоко, не содержащее щелочной фосфатазы.4
7.2 Приготовление образца для испытаний.4
8 Процедура.5
8.1 Верификация рабочих характеристик прибора .5
8.2 Калибровка .5
8.3 Определение.6
8.4 Контрольные тесты .6
9 Вычисление и выражение результатов.8
9.1 Калибровочный коэффициент .8
9.2 Вычисление.8
9.3 Выражение результатов испытания .9
10 Прецизионность.9
10.1 Межлабораторное испытание.9
10.2 Повторяемость .9
10.3 Воспроизводимость .10
11 Протокол испытания.10
Приложение А (информативное) Межлабораторное испытание .11
Библиография.13
© ISO и IDF 2006 – Все права сохраняются iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 11816-1:2006(R)
IDF 155-1:2006(R)
Предисловие
Международная организация по стандартизации (ISO) является всемирной федерацией
национальных организаций по стандартизации (комитетов-членов ISO). Разработка международных
стандартов обычно осуществляется техническими комитетами ISO. Каждый комитет-член,
заинтересованный в деятельности, для которой был создан технический комитет, имеет право быть
представленным в этом комитете. Международные правительственные и неправительственные
организации, имеющие связи с ISO, также принимают участие в работах. Что касается стандартизации
в области электротехники, ISO работает в тесном сотрудничестве с Международной
электротехнической комиссией (IEC).
Проекты международных стандартов разрабатываются по правилам, указанным в Директивах ISO/IEC,
Часть 2.
Главная задача технических комитетов состоит в разработке международных стандартов. Проекты
международных стандартов, принятые техническими комитетами, рассылаются комитетам-членам на
голосование. Их опубликование в качестве международных стандартов требует одобрения, по
меньшей мере, 75 % комитетов-членов, принимающих участие в голосовании.
Обращается внимание на возможность патентования некоторых элементов данного международного
стандарта. ISO не несет ответственности за идентификацию какого-либо или всех таких патентных
прав.
Международный стандарт ISO 11816-1|IDF 155-1 был подготовлен Техническим комитетом ISO/ТК 34,
Пищевые продукты, Подкомитетом ПК 5, Молоко и молочные продукты, и Международной
федерацией молочных продуктов (IDF). Он публикуется совместно ISO и IDF.
Это издание ISO 11816-1⎪IDF 155-1 отменяет и заменяет ISO 11816-1:1997, которое было технически
пересмотрено.
ISO 11816⎪IDF155 состоит из следующих частей, под общим названием Молоко и молочные продукты.
Определение активности щелочной фосфатазы:
⎯ Часть 1. Флуориметрический метод для молока и молочных напитков
⎯ Часть 2. Флуориметрический метод для сыра
iv © ISO и IDF 2006 – Все права сохраняются
---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 11816-1:2006(R)
IDF 155-1:2006(R)
Предисловие
Международная федерация производства молочных продуктов (IDF) является всемирной
федерацией молочного сектора в национальных комитетах каждой страны-члена IDF. Каждый
национальный комитет имеет право быть представленным в постоянных комитетах IDF, выполняющих
техническую работу. IDF сотрудничает с ISO в разработке стандартных методов анализа и отбора
образцов молока и молочных продуктов.
Проекты международных стандартов, принятые рабочими группами и постоянными комитетами
рассылаются национальным комитетам на голосование. Их опубликование в качестве международных
стандартов требует одобрения не менее 50% национальных комитетов, принимающих участие в
голосовании.
Следует иметь в виду, что некоторые элементы настоящего международного стандарта могут быть
объектом патентных прав. ISO не может нести ответственность за идентификацию какого-либо одного
или всех патентных прав.
Международный стандарт ISO 11816-1⏐IDF 155-1 подготовлен Международной федерацией молочных
продуктов (IDF) и Техническим комитетом ISO/TC 34 Пищевые продукты, Подкомитетом ПК 5 Молоко
и молочные продукты. Этот стандарт публикуется совместно ISO и IDF.
Вся работа проделана совместной группой экспертов ISO-IDF по Исследованию свойств под
действием термообработки. Постоянного комитета по Второстепенным компонентам и
исследованию их свойств при поддержке руководителя этого проекта, господина F.Harding (UK).
Это издание ISO 11816-1⏐IDF 155-1 отменяет и заменяет IDF 155A:1999, который был технически
пересмотрен.
ISO 11816⎪IDF 155 состоит из следующих частей, под общим названием Молоко и молочные продукты.
Определение активности щелочной фосфатазы:
⎯ Часть 1. Флуориметрический метод для молока и молочных напитков
⎯ Часть 2. Флуориметрический метод для сыра
© ISO и IDF 2006 – Все права сохраняются v
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 11816-1:2006(R)
МЕЖДУНАРОДНЫЙ СТАНДАРТ
IDF 155-1:2006(R)
Молоко и молочные продукты. Определение активности
щелочной фосфатазы.
Часть 1.
Флуориметрический метод для молока и молочных
напитков
1 Область применения
Эта часть ISO 11816⎪IDF155 устанавливает флуориметрический метод для определения активности
щелочной фосфатазы (ALP, EC 3.1.3.1) в пастеризованном цельном молоке, полужирном и,
обезжиренном молоке. Метод применим для молока коров, овец, коз и для молочных напитков.
Метод также годится для определения высокой активности щелочной фосфатазы в сыром и
термообработанном молоке с активностями более 2000 мЕ/л после заданного разбавления образца.
2 Термины и определения
Для целей этого документа применяются следующие термины и определения.
2.1
активность щелочной фосфатазы
ALP активность
alkaline phosphatase activity
ALP activity
активность щелочной фосфатазы, присутствующей в продукте, определенная методом,
установленным в этой части ISO 11816⎪IDF 155
ПРИМЕЧАНИЕ Активность щелочной фосфатазы выражена в миллиединицах активности фермента на литр
(мЕ/л).
2.2
единица активности щелочной фосфатазы
unit of alkaline phosphatase activity
объем фермента щелочной фосфатазы, который катализирует превращение 1 мкмоль субстрата в
минуту
© ISO и IDF 2006 – Все права сохраняются 1
---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 11816-1:2006(R)
IDF 155-1:2006(R)
3 Принцип
Активность щелочной фосфатазы для образца измеряется путем непрерывного флуориметрического
прямого кинетического анализа. В субстрате нефлуоресцентного ароматического монофосфорного
эфира, 2′-[2-бензотиазолил]-6′-гидроксибензотиазол фосфат, в присутствии любой щелочной
фосфатазы, образованной из этого образца, происходит гидролиз его фосфатного радикала,
производя продукт с интенсивной флуоресценцией. Флуориметрическое измерение активности
о
щелочной фосфатазы (ALP) проводят при 38 С в течение трех минут, используя субстрат. Сюда
включена преинкубация субстрата и образца с последующим многократным кинетическим
считыванием скорости реакции.
ПРИМЕЧАНИЕ Хотя испытание длится 3 мин, первая минута является равновесным периодом для
о
обеспечения температуры образца при 38 C. Измерения активности фактически начинаются со второй минуты и
продолжаются до конца третьей минуты (т.е. за 2-х мин период)
4 Реагенты
Используются только реагенты признанной аналитической чистоты, если нет других указаний, и
дистиллированная или деминерализованная вода или вода аналогичной чистоты.
® 1)
4.1 Субстрат Флуорофоса , в пробирках, каждая из которых содержит 144 мг порошка
Флуорофоса® .
Это субстрат нефлуоресцентного ароматического монофосфорного эфира, 2′-[2-бензотиазолил]-6′-
гидроксибензотиазол фосфат (Флуорофос®). Субстрат Флуорофоса® остается стабильным в течение
о о
двух лет, если его хранить в закрытых пробирках при температуре от 2 С до 8 С.
4.2 Буферный раствор субстрата, буферный раствор диэтаноламина (DEA), c(DEA) = 2,4 moль/л, с
pH 10,0, в пробирках емкостью 240 мл каждая.
Буферный раствор субстрата остается стабильным в течение 2 лет, если его хранить в закрытых
о о
пробирках при температуре от 2 С до 8 С.
4.3 Рабочий субстрат
Оставляют субстрат Флуорофоса®) (4.1) и буферный раствор субстрата (4.2) до достижения
комнатной температуры. Добавляют содержимое одной пробирки c буферным раствором субстрата
(240 мл) (4.2) к содержимому одной пробирки c Флуорофосом® (144 мг) (4.1) и хорошо перемешивают,
переворачивая, в течение 3 мин. Используют желтое стекло для защиты против света.
Перед использованием полученный раствор выдерживают при комнатной температуре как минимум
30 мин.
1) Реагенты, установленные в 4.1-4.5, и аппаратура, установленная в 5.1-5.4 (кроме 5.3.3), доступны для
приобретения как Флуорофосная испытательная система у фирмы Advanced Instruments, Inc., Two Technology Way,
Norwood, Massachusetts 02062, USA. Изготовитель может изменять конфигурации упаковок, поставляемых с
Флуорофосной испытательной системой. Пользователь должен обращаться к инструкциям изготовителя для
приготовления реагентов, если они отличаются от реагентов, установленных здесь. Флуорофос и Флуорожелтый
являются зарегистрированными торговыми марками фирмы Advanced Instruments, Inc. и примерами подходящих
продуктов, имеющихся на промышленном рынке.
Эта информация дается для удобства пользователей данного документа и не является рекомендацией ISO или
IDF для этих продуктов.
2 © ISO и IDF 2006 – Все права сохраняются
---------------------- Page: 7 ----------------------
ISO 11816-1:2006(R)
IDF 155-1:2006(R)
Используют аналого-цифровой тест, описанный в 8.4.1.1, для проверки устойчивости готового к
использованию рабочего субстрата.
Рабочий субстрат остается стабильным в течение 60 дней, если он защищен от света и хранится при
о о о
температуре от 2 С до 8 С, или в течение 8 ч, если хранится при 38 С. Не следует использовать
рабочий субстрат, если получено показание выше 1200 (см. 8.4.1.1.5).
ПРИМЕЧАНИЕ Полученный объем рабочего субстрата (240 мл) является достаточным приблизительно для
115 тестов.
4.4 Рабочие калибровочные растворы, Флуорожелтый®(FY) 2′-[2-бензотиазолил]-6′-
гидроксибензотиазол] в буферном растворе DEA (4.2).
Рабочие калибровочные растворы остаются стабильными в течение 18 месяцев, когда их хранят при
о о
температуре от 2 С до 8 С.
4.4.1 Калибровочный раствор А, содержащий 0 мкмоль/л Флуорожелтого®.
–3
4.4.2 Калибровочный раствор В, содержащий 17,24 × 10 мкмоль/л Флуорожелтого®.
–3
4.4.3 Калибровочный раствор С, содержащий 34,48 × 10 мкмоль/л Флуорожелтого®.
–3
4.5 Раствор для ежедневного контроля прибора, содержащий 34,48 × 10 мкмоль/л
Флуорожелтого®.
5 Аппаратура
Обычное лабораторное оборудование и, в частности, следующее.
5.1 Фильтровальный флуориметр, с термостатически регулируемым держателем кюветы при
поддержании рабочей температуры от 38 °C ± 1 °C и правоугольной оптической системой,
допускающей возбуждение при длине волны 440 нм и испускание при 520 нм – 560 нм [например,
1)
прибор Флуорофос® ]. Измерения должны быть оптимизированы согласно инструкциям
изготовителей.
5.2 Кюветы, сменные, из нефлуоресцентного стекла, диаметром 12 мм и длиной 75 мм.
5.3 Пипетки.
5.3.1 Дозатор фиксированного объема, дозирующий по 2,0 мл.
5.3.2 Пипетка вытеснительного типа или нагнетательная, емкостью 0,075 мл.
5.3.3 Пипетка, емкостью 2 мл.
5.4 Инкубаторный блок, поддерживающий температуру 38 °C ±1 °C, подходящий для помещения в
них кювет.
2)
5.5 Парафильм , или другая подходящая пленка лабораторного класса.
2) Парафильм является примером подходящего продукта, выпускаемого в промышленности. Эта информация
дается для удобства пользователей данного международного стандарта и не является рекомендацией ISO или
IDF для этого продукта.
.
© ISO и IDF 2006 – Все права сохраняются 3
---------------------- Page: 8 ----------------------
ISO 11816-1:2006(R)
IDF 155-1:2006(R)
5.6 Вихревая мешалка.
5.7 Водяная баня, поддерживающая температуру 63 °C ± 1 °C и 95 °C ± 1 °C.
5.8 Мерные колбы с одной меткой, емкостью 100 мл.
6 Отбор проб
В лабораторию должна быть отправлена представительная проба. Ее следует оберегать от
повреждений или изменений во время транспортировки или хранения.
Отбор проб не является частью метода, установленного в данном международном стандарте.
Рекомендованный метод отбора проб дан в ISO 707/IDF 50.
7 Приготовления
7.1 Молоко, не содержащее щелочной фосфатазы
Приготовляют молоко без фосфатазы того типа, который будет испытываться, тщательно дозируя
требуемую порцию молока в пробирку или подходящий контейнер, следя, чтобы молоко не касалось
краев или стенок контейнера.
о
Помещают пробирку или контейнер с образцом молока в водяную баню (5.7.), установленную на 95 С.
о
Предварительно нагревают образец молока до 95 С и затем продолжают его подогрев в течение 5
мин при этой температуре. Температуру контролируют термометром или термисторным зондом,
помещенным в центр пробирки или контейнера. 5-мин период подогрева начинают сразу же, как только
о
образец молока достигнет 95 С. Все быстро охлаждают после периода нагрева.
Таким образом обработанный образец молока тестируют, чтобы удостовериться, что активность
щелочной фосфатазы меньше 10 мЕ/л.
7.2 Приготовление образца для испытаний
7.2.1 Общие вопросы
Перед использованием все испытуемые образцы тщ
...
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 11816-1
IDF
155-1
Second edition
2006-04-15
Milk and milk products — Determination
of alkaline phosphatase activity —
Part 1:
Fluorimetric method for milk
and milk-based drinks
Lait et produits laitiers — Détermination de l'activité de la phosphatase
alcaline
Partie 1: Méthode fluorimétrique pour le lait et les boissons à base de
lait
Reference numbers
ISO 11816-1:2006(E)
IDF 155-1:2006(E)
©
ISO and IDF 2006
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 11816-1:2006(E)
IDF 155-1:2006(E)
PDF disclaimer
This PDF file may contain embedded typefaces. In accordance with Adobe's licensing policy, this file may be printed or viewed but
shall not be edited unless the typefaces which are embedded are licensed to and installed on the computer performing the editing. In
downloading this file, parties accept therein the responsibility of not infringing Adobe's licensing policy. Neither the ISO Central
Secretariat nor the IDF accepts any liability in this area.
Adobe is a trademark of Adobe Systems Incorporated.
Details of the software products used to create this PDF file can be found in the General Info relative to the file; the PDF-creation
parameters were optimized for printing. Every care has been taken to ensure that the file is suitable for use by ISO member bodies
and IDF national committees. In the unlikely event that a problem relating to it is found, please inform the ISO Central Secretariat at the
address given below.
© ISO and IDF 2006
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means,
electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without permission in writing from either ISO or IDF at the respective
address below.
ISO copyright office International Dairy Federation
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20 Diamant Building • Boulevard Auguste Reyers 80 • B-1030 Brussels
Tel. + 41 22 749 01 11 Tel. + 32 2 733 98 88
Fax + 41 22 749 09 47 Fax + 32 2 733 04 13
E-mail copyright@iso.org E-mail info@fil-idf.org
Web www.iso.org Web www.fil-idf.org
Published in Switzerland
ii © ISO and IDF 2006 – All rights reserved
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 11816-1:2006(E)
IDF 155-1:2006(E)
Contents Page
Foreword. iv
1 Scope . 1
2 Terms and definitions. 1
3 Principle. 1
4 Reagents. 2
5 Apparatus . 3
6 Sampling. 3
7 Preparations . 3
7.1 Alkaline phosphatase-free milk. 3
7.2 Preparation of test sample. 4
8 Procedure . 4
8.1 Verification of instrument performance . 4
8.2 Calibration . 4
8.3 Determination. 5
8.4 Control tests. 5
9 Calculation and expression of results. 7
9.1 Calibration ratio . 7
9.2 Calculation. 7
9.3 Expression of test results. 7
10 Precision. 8
10.1 Interlaboratory test . 8
10.2 Repeatability. 8
10.3 Reproducibility. 8
11 Test report . 8
Annex A (informative) Interlaboratory trial . 9
Bibliography . 11
© ISO and IDF 2006 – All rights reserved iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 11816-1:2006(E)
IDF 155-1:2006(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through
ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has
been established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental
and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 11816-1⎪IDF 155-1 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee
SC 5, Milk and milk products, and the International Dairy Federation (IDF). It is being published jointly by ISO
and IDF.
This edition of ISO 11816-1⎪IDF 155-1 cancels and replaces ISO 11816-1:1997, which has been technically
revised.
ISO 11816⎪IDF 155 consists of the following parts, under the general title Milk and milk products —
Determination of alkaline phosphatase activity:
⎯ Part 1: Fluorimetric method for milk and milk-based drinks
⎯ Part 2: Fluorimetric method for cheese
iv © ISO and IDF 2006 – All rights reserved
---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 11816-1:2006(E)
IDF 155-1:2006(E)
Foreword
IDF (the International Dairy Federation) is a worldwide federation of the dairy sector with a National
Committee in every member country. Every National Committee has the right to be represented on the IDF
Standing Committees carrying out the technical work. IDF collaborates with ISO in the development of
standard methods of analysis and sampling for milk and milk products.
Draft International Standards adopted by the Action Teams and Standing Committees are circulated to the
National Committees for voting. Publication as an International Standard requires approval by at least 50 % of
the IDF National Committees casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. IDF shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 11816-1⎪IDF 155-1 was prepared by the International Dairy Federation (IDF) and Technical Committee
ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 5, Milk and milk products. It is being published jointly by IDF
and ISO.
All work was carried out by the Joint ISO-IDF Action Team Characterization to heat treatment, of the Standing
Committee on Minor components and characterization of physical properties, under the aegis of its project
leader, Mr F. Harding (UK).
This edition of ISO 11816-1⎪IDF 155-1 cancels and replaces IDF 155A:1999, which has been technically
revised.
ISO 11816⎪IDF 155 consists of the following parts, under the general title Milk and milk products —
Determination of alkaline phosphatase activity:
⎯ Part 1: Fluorimetric method for milk and milk-based drinks
⎯ Part 2: Fluorimetric method for cheese
© ISO and IDF 2006 – All rights reserved v
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 11816-1:2006(E)
INTERNATIONAL STANDARD
IDF 155-1:2006(E)
Milk and milk products — Determination of alkaline
phosphatase activity —
Part 1:
Fluorimetric method for milk and milk-based drinks
1 Scope
This part of ISO 11816⎪IDF 155 specifies a fluorimetric method for the determination of alkaline phosphatase
(ALP, EC 3.1.3.1) activity in pasteurized whole milk, semi-skimmed milk, skimmed milk and flavoured milks.
The method is applicable for milk from cows, sheep and goats, and milk-based drinks.
The method is also suitable for the determination of high alkaline phosphatase activity in raw milk and heat-
treated milk with activities of more than 2 000 mU/l after dilution of the sample as specified.
2 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
2.1
alkaline phosphatase activity
APL activity
activity of the alkaline phosphatase present in the product, determined by the procedure specified in this part
of ISO 11816⎪IDF 155
NOTE The alkaline phosphatase activity is expressed as milliunits of enzyme activity per litre (mU/l).
2.2
unit of alkaline phosphatase activity
amount of alkaline phosphatase enzyme that catalyses the transformation of 1 µmol of substrate per minute
3 Principle
The alkaline phosphatase activity of the sample is measured by a continuous fluorimetric direct kinetic assay.
A non-fluorescent aromatic monophosphoric ester substrate, 2′-[2-benzothiazolyl]-6′-hydroxybenzothiazole
phosphate, in the presence of any alkaline phosphatase derived from the sample, undergoes hydrolysis of its
phosphate radical, producing a highly fluorescent product. Fluorimetric measurement of alkaline phosphatase
(ALP) activity is measured at 38 °C over a 3-min period when using the substrate. This includes pre-
incubation of substrate and sample, followed by multiple kinetic readings of the reaction rate.
NOTE Although this is a 3-min test, the first minute is an equilibration period to ensure that the sample is at 38 °C.
Measurements of activity are actually made from the beginning of the second minute to the end of the third minute
(i.e. over a 2-min period).
© ISO and IDF 2006 – All rights reserved 1
---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 11816-1:2006(E)
IDF 155-1:2006(E)
4 Reagents
Use only reagents of recognized analytical grade, unless otherwise specified, and distilled or demineralized
water or water of equivalent purity.
® 1) ®
4.1 Fluorophos substrate , in bottles, each containing 144 mg of Fluorophos substrate powder.
This is a non-fluorescent aromatic monophosphoric ester substrate, 2′-[2-benzothiazolyl]-6′-hydroxybenzothiazole
® ®
phosphate (Fluorophos ). The Fluorophos substrate remains stable for 2 years when stored in unopened
bottles at between 2 °C and 8 °C.
4.2 Substrate buffer solution, diethanolamine (DEA) buffer solution, c(DEA) = 2,4 mol/l, with pH 10,0, in
bottles of 240 ml each.
The substrate buffer solution remains stable for 2 years when stored in unopened bottles at between 2 °C and
8 °C.
4.3 Working substrate
®
Allow the Fluorophos substrate (4.1) and the substrate buffer solution (4.2) to come to room temperature.
®
Add the content of one bottle of substrate buffer solution (240 ml) (4.2) to that of one bottle Fluorophos
substrate (144 mg) (4.1) and mix well by inversion for 3 min. Use amber glass to protect against light.
Allow the obtained solution stand at room temperature for at least 30 min prior to use.
Use the analog-to-digital test given in 8.4.1.1 to test the suitability of the ready to use working substrate.
The working substrate remains stable for 60 days when protected from light and stored at between 2 °C and
8 °C, or for 8 h when stored at 38 °C. Do not use the working substrate if a reading above 1 200 is obtained
(see 8.4.1.1.5).
NOTE The obtained volume of the working substrate (240 ml) is sufficient for approximately 115 tests.
®
4.4 Working calibrator solutions, Fluoroyellow (FY) [2′-(2-benzothiazolyl)-6′-hydroxybenzothiazole] in
DEA buffer (4.2).
The working calibrator solutions remain stable for 18 months when stored at between 2 °C and 8 °C.
®
4.4.1 Calibrator solution A, containing 0 µmol/l of Fluoroyellow .
–3 ®
4.4.2 Calibrator solution B, containing 17,24 × 10 µmol/l of Fluoroyellow .
–3 ®
4.4.3 Calibrator solution C, containing 34,48 × 10 µmol/l of Fluoroyellow .
–3 ®
4.5 Daily instrument control solution, containing 34,48 × 10 µmol/l of Fluoroyellow .
1) The reagents specified in 4.1 to 4.5 and the apparatus specified in 5.1 to 5.4 (except 5.3.3) are available as
Fluorophos Test System from Advanced Instruments, Inc., Two Technology Way, Norwood, Massachusetts 02062, USA.
The manufacturer may change packaging configurations supplied with the Fluorophos Test System. The user should refer
to the manufacturer’s instructions for preparing reagents if different from those specified herein. Fluorophos and
Fluoroyellow are registered trademarks of Advanced Instruments, Inc. and are examples of suitable products available
commercially.
This information is given for the convenience of users of this document and does not constitute an endorsement by either
ISO or IDF of these products.
2 © ISO and IDF 2006 – All rights reserved
---------------------- Page: 7 ----------------------
ISO 11816-1:2006(E)
IDF 155-1:2006(E)
5 Apparatus
Usual laboratory equipment and, in particular, the following.
5.1 Filter fluorimeter, with thermostatically controlled cuvette holder, capable of operating at 38 °C ± 1 °C
and right-angle optics, allowing excitation at a wavelength of 440 nm and emission at between 520 nm and
® 1)
560 nm [e.g. Fluorophos instrument ]. Measurements should be optimized according to the manufacturers
instructions.
5.2 Cuvettes, disposable, non-fluorescent glass, of diameter 12 mm and of length 75 mm.
5.3 Pipettes.
5.3.1 Fixed-volume dispenser, capable of dispensing 2,0 ml.
5.3.2 Positive-displacement or air-displacement pipette, of capacity 0,075 ml.
5.3.3 Pipette, of capacity 2 ml.
5.4 Incubator block, capable of maintaining a temperature of 38 °C ± 1 °C, suitable for holding cuvettes.
2)
5.5 Parafilm , or other suitable laboratory-grade film.
5.6 Vortex mixer.
5.7 Water bath, capable of maintaining a temperature of 63 °C ± 1 °C and 95 °C ± 1 °C.
5.8 One-mark volumetric flasks, of capacity 100 ml.
6 Sampling
A representative sample should have been sent to the laboratory. It should not have been damaged or
changed during transport or storage.
Sampling is not part of the method specified in this part of ISO 11816⎪IDF 155. A recommended sampling
method is given in ISO 707⎪IDF 50.
7 Preparations
7.1 Alkaline phosphatase-free milk
Prepare phosphatase-free milk of the type to be tested by carefully dispensing the desired portion of milk into
a test tube or suitable container, ensuring that no milk touches the rim or sides of the container.
Place the tube or container with the milk portion in the water bath (5.7) set at 95 °C. Preheat the milk portion
to 95 °C, before starting its 5-min heating period at that temperature. Check the temperature by using a
thermometer or thermistor probe placed in the centre of the tube or container. When the milk portion reaches
95 °C, immediately start the 5-min heating period. Cool the whole rapidly after the heating period.
Test the thus-treated milk portion to ensure that its ALP activity is less then 10 mU/l.
2) Parafilm is an example of a suitable product available commercially. This information is given for the conven
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 11816-1
FIL
155-1
Deuxième édition
2006-04-15
Version corrigée
2006-09-01
Lait et produits laitiers — Détermination
de l'activité de la phosphatase alcaline —
Partie 1:
Méthode fluorimétrique pour le lait et les
boissons à base de lait
Milk and milk products — Determination of alkaline phosphatase
activity —
Part 1: Fluorimetric method for milk and milk-based drinks
Numéros de référence
ISO 11816-1:2006(F)
FIL 155-1:2006(F)
©
ISO et FIL 2006
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 11816-1:2006(F)
FIL 155-1:2006(F)
PDF – Exonération de responsabilité
Le présent fichier PDF peut contenir des polices de caractères intégrées. Conformément aux conditions de licence d'Adobe, ce fichier
peut être imprimé ou visualisé, mais ne doit pas être modifié à moins que l'ordinateur employé à cet effet ne bénéficie d'une licence
autorisant l'utilisation de ces polices et que celles-ci y soient installées. Lors du téléchargement de ce fichier, les parties concernées
acceptent de fait la responsabilité de ne pas enfreindre les conditions de licence d'Adobe. Le Secrétariat central de l'ISO et la FIL
déclinent toute responsabilité en la matière.
Adobe est une marque déposée d'Adobe Systems Incorporated.
Les détails relatifs aux produits logiciels utilisés pour la création du présent fichier PDF sont disponibles dans la rubrique General Info
du fichier; les paramètres de création PDF ont été optimisés pour l'impression. Toutes les mesures ont été prises pour garantir
l'exploitation de ce fichier par les comités membres de l'ISO et les comités nationaux de la FIL. Dans le cas peu probable où
surviendrait un problème d'utilisation, veuillez en informer le Secrétariat central de l'ISO à l'adresse donnée ci-dessous.
© ISO et FIL 2006
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée sous
quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l'accord écrit
soit de l'ISO soit de la FIL à l'adresse respective ci-après.
ISO copyright office Fédération Internationale de Laiterie
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20 Diamant Building • Boulevard Auguste Reyers 80 • B-1030 Bruxelles
Tel. + 41 22 749 01 11 Tel. + 32 2 733 98 88
Fax + 41 22 749 09 47 Fax + 32 2 733 04 13
E-mail copyright@iso.org E-mail info@fil-idf.org
Web www.iso.org Web www.fil-idf.org
Publié en Suisse
ii © ISO et FIL 2006 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 11816-1:2006(F)
FIL 155-1:2006(F)
Sommaire Page
Avant-propos. iv
1 Domaine d'application. 1
2 Termes et définitions. 1
3 Principe. 1
4 Réactifs . 2
5 Appareillage . 3
6 Échantillonnage . 3
7 Préparations . 3
7.1 Lait exempt de phosphatase alcaline . 3
7.2 Préparation de l'échantillon pour essai. 4
8 Mode opératoire . 4
8.1 Vérification des performances de l'appareillage. 4
8.2 Étalonnage. 4
8.3 Détermination. 5
8.4 Essais de contrôle . 5
9 Calcul et expression des résultats. 7
9.1 Ratio d'étalonnage. 7
9.2 Calcul . 7
9.3 Expression des résultats des essais. 8
10 Fidélité . 8
10.1 Essai interlaboratoires . 8
10.2 Répétabilité. 8
10.3 Reproductibilité. 8
11 Rapport d'essai . 9
Annexe A (informative) Essai interlaboratoires . 10
Bibliographie . 12
© ISO et FIL 2006 – Tous droits réservés iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 11816-1:2006(F)
FIL 155-1:2006(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux
de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire
partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 11816-1⎪FIL 155-1 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits agricoles alimentaires,
sous-comité SC 5, Lait et produits laitiers, et la Fédération internationale de laiterie (FIL). Elle est publiée
conjointement par l'ISO et la FIL.
Cette édition de l'ISO 11816-1⎪FIL 155-1 annule et remplace l'ISO 11816-1:1997, dont elle constitue une
révision technique.
L'ISO 11816⎪FIL 155 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Lait et produits
laitiers — Détermination de l'activité de la phosphatase alcaline:
⎯ Partie 1: Méthode fluorimétrique pour le lait et les boissons à base de lait
⎯ Partie 2: Méthode fluorimétrique pour le fromage
La présente version corrigée de l'ISO 11816-1⎪FIL 155-1 comprend les modifications suivantes:
Page 8, Tableau 1 — Limites de répétabilité, valeurs r
et
Tableau 2 — Limites de reproductibilité, valeurs R
Les valeurs données dans ces deux tableaux étaient inexactes et ont été modifiées. Elles sont maintenant
identiques aux valeurs correctes de la version anglaise du présent document.
iv © ISO et FIL 2006 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 11816-1:2006(F)
FIL 155-1:2006(F)
Avant-propos
La FIL (Fédération internationale de laiterie) est une fédération mondiale du secteur laitier avec un Comité
National dans chacun de ses pays membres. Chaque Comité National a le droit de faire partie des Comités
permanents de la FIL auxquels sont confiés les travaux techniques. La FIL collabore avec l'ISO pour
l'élaboration de méthodes normalisées d'analyse et d'échantillonnage pour le lait et les produits laitiers.
Les projets de Normes internationales adoptés par les Équipes d'Action et les Comités permanents sont
soumis aux Comités Nationaux pour vote. Leur publication comme Normes internationales requiert
l'approbation de 50 % au moins des Comités Nationaux de la FIL votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. La FIL ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 11816-1⎪FIL 155-1 a été élaborée par la Fédération internationale de laiterie (FIL) et le comité
technique ISO/TC 34, Produits agricoles alimentaires, sous-comité SC 5, Lait et produits laitiers. Elle est
publiée conjointement par la FIL et l'ISO.
L'ensemble des travaux a été confié à l'Équipe d'Action mixte ISO-FIL, Caractérisation du traitement
thermique du Comité permanent Composants mineurs et caractérisation des propriétés physiques, sous la
conduite de son chef de projet, Monsieur F. Harding (Royaume-Uni).
Cette édition de l'ISO 11816-1⎪FIL 155-1 annule et remplace la FIL 155A:1999, dont elle constitue une
révision technique.
L'ISO 11816⎪FIL 155 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Lait et produits
laitiers — Détermination de l'activité de la phosphatase alcaline:
⎯ Partie 1: Méthode fluorimétrique pour le lait et les boissons à base de lait
⎯ Partie 2: Méthode fluorimétrique pour le fromage
La présente version corrigée de l'ISO 11816-1⎪FIL 155-1 comprend les modifications suivantes:
Page 8, Tableau 1 — Limites de répétabilité, valeurs r
et
Tableau 2 — Limites de reproductibilité, valeurs R
Les valeurs données dans ces deux tableaux étaient inexactes et ont été modifiées. Elles sont maintenant
identiques aux valeurs correctes de la version anglaise du présent document.
© ISO et FIL 2006 – Tous droits réservés v
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 11816-1:2006(F)
NORME INTERNATIONALE
FIL 155-1:2006(F)
Lait et produits laitiers — Détermination de l'activité
de la phosphatase alcaline —
Partie 1:
Méthode fluorimétrique pour le lait et les boissons
à base de lait
1 Domaine d'application
La présente partie de l'ISO 11816⎪FIL 155 décrit une méthode fluorimétrique pour la détermination de
l'activité de la phosphatase alcaline (ALP, EC 3.1.3.1) dans les laits pasteurisés entiers, demi-écrémés,
écrémés et aromatisés. La présente méthode est applicable aux laits de vache, de brebis et de chèvre, et aux
boissons à base de lait.
La méthode convient également pour la détermination d'activités élevées de la phosphatase alcaline dans le
lait cru et le lait traité thermiquement, ayant des activités de plus de 2 000 milliunités par litre (mU/l) après
dilution de l'échantillon, comme spécifié.
2 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s'appliquent.
2.1
activité de la phosphatase alcaline
activité ALP
activité de la phosphatase alcaline présente dans un produit, déterminée suivant le mode opératoire spécifié
dans la présente partie de l'ISO 11816⎪FIL 155
NOTE L'activité de la phosphatase alcaline est exprimée en milliunités d'activité enzymatique par litre (mU/l).
2.2
unité d'activité de la phosphatase alcaline
quantité d'enzyme phosphatase alcaline qui catalyse la transformation de 1 µmol de substrat par minute
3 Principe
L'activité de la phosphatase alcaline de l'échantillon se mesure en effectuant un essai cinétique direct
fluorimétrique continu. Un substrat d'ester monophosphorique aromatique non fluorescent,
2′-[2-benzothiazolyl]-6′-hydroxybenzothiazole phosphate, en présence de phosphatase alcaline issue de
l'échantillon, subit une hydrolyse de son radical phosphate et produit un composé hautement fluorescent. Le
mesurage fluorimétrique de l'activité de la phosphatase alcaline (ALP) est effectué à 38 °C sur une période de
3 min. Ce mesurage comprend la préincubation du substrat et de l'échantillon, suivie de plusieurs lectures
cinétiques de la vitesse de réaction.
NOTE Bien que l'essai dure 3 min, la première minute est une période d'équilibration afin de s'assurer que
l'échantillon est à 38 °C. Les mesurages d'activité sont en effet réalisés du début de la deuxième minute à la fin de la
troisième minute (c'est-à-dire sur une période de 2 min).
© ISO et FIL 2006 – Tous droits réservés 1
---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 11816-1:2006(F)
FIL 155-1:2006(F)
4 Réactifs
Sauf indication contraire, utiliser exclusivement des réactifs de qualité analytique reconnue et de l'eau distillée,
de l'eau déminéralisée ou de l'eau de pureté équivalente.
® 1) ®
4.1 Substrat Fluorophos , en flacons, contenant chacun 144 mg de poudre de substrat Fluorophos .
Substrat d'ester monophosphorique aromatique non fluorescent, par exemple 2′-[2-benzothiazolyl]-6′-
® ®
hydroxybenzothiazole phosphate (Fluorophos ). Le substrat Fluorophos , si le flacon n'a pas été ouvert,
reste stable pendant 2 ans lorsqu'il est conservé entre 2 °C et 8 °C.
4.2 Solution tampon de substrat
Solution tampon de diéthanolamine (DEA), c(DEA) = 2,4 mol/l, pH 10,0, en flacons de 240 ml.
La solution tampon de substrat reste stable pendant 2 ans lorsqu'elle est conservée entre 2 °C et 8 °C, si le
flacon n'a pas été ouvert.
4.3 Substrat de travail
®
Amener le substrat Fluorophos (4.1) et la solution tampon de substrat (4.2) à température ambiante. Ajouter
le contenu d'un flacon de solution tampon de substrat (240 ml) (4.2) à un flacon de substrat Fluorophos
(144 mg) (4.1), puis mélanger avec soin en retournant le récipient pendant 3 min. Utiliser un verre ambré pour
protéger de la lumière.
Laisser la solution ainsi obtenue reposer à température ambiante pendant au moins 30 min avant utilisation.
Utiliser l'essai analogique/numérique (A/D) donné en 8.4.1.1 pour vérifier que le substrat de travail prêt pour
utilisation convient.
Le substrat de travail reste stable pendant 60 jours lorsqu'il est conservé à l'abri de la lumière entre 2 °C et
8 °C, ou pendant 8 h lorsqu'il est conservé à 38 °C. Ne pas utiliser le substrat actif en cas d'obtention d'une
lecture supérieure à 1 200 (voir 8.4.1.1.5).
NOTE Le volume de substrat de travail obtenu (240 ml) suffit pour mener environ 115 essais.
®
4.4 Solutions étalons de travail, Fluoroyellow (FY) [2′-(2-benzothiazolyl)-6′-hydroxybenzothiazole] dans
une solution tampon DEA (4.2).
Les solutions étalons restent stables pendant 18 mois lorsqu'elles sont conservées entre 2 °C et 8 °C.
®
4.4.1 Solution étalon A, contenant 0 µmol/l de Fluoroyellow .
–3 ®
4.4.2 Solution étalon B, contenant 17,24 × 10 µmol/l de Fluoroyellow .
–3 ®
4.4.3 Solution étalon C, contenant 34,48 × 10 µmol/l de Fluoroyellow .
–3 ®
4.5 Solution quotidienne de contrôle des instruments, contenant 34,48 × 10 µmol/l de Fluoroyellow .
1) Les réactifs spécifiés de 4.1 à 4.5 et les appareils spécifiés de 5.1 à 5.4 (sauf 5.3.3) sont disponibles sous l'appellation
«Fluorophos Test System» et commercialisés par la firme Advanced Instruments, Inc., Two Technology Way, Norwood,
Massachusetts 02062, États-Unis. La configuration des emballages fournis avec le Fluorophos Test System peut être
modifiée par le fabricant. II convient que l'utilisateur se réfère aux instructions du fabricant pour la préparation des réactifs
s'ils se révèlent différents de ceux spécifiés dans la présente norme. Fluorophos et Fluoroyellow sont des marques
déposées de la firme Advanced Instruments, Inc. et sont des exemples de produits appropriés disponibles sur le marché.
Cette information est donnée par souci de commodité à l'intention des utilisateurs du présent document et ne saurait
constituer un engagement de l'ISO ou de la FIL à l'égard de ce(s) produit(s).
2 © ISO et FIL 2006 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 7 ----------------------
ISO 11816-1:2006(F)
FIL 155-1:2006(F)
5 Appareillage
Matériel courant de laboratoire et, notamment, l'appareillage suivant:
5.1 Fluorimètre à filtre, avec un support de cuvettes à contrôle thermostatique, capable de fonctionner à
38 °C ± 1 °C et avec une optique à angle droit, permettant une excitation à une longueur d'onde de 440 nm et
1)
une émission située entre 520 nm et 560 nm [Fluorophos , par exemple]. Il convient d'optimiser les
mesurages conformément aux instructions du fabricant.
5.2 Cuvettes, jetables, en verre non fluorescent, de 12 mm de diamètre et de 75 mm de longueur.
5.3 Pipettes.
5.3.1 Pipette à écoulement, à volume fixe, permettant de délivrer 2,0 ml.
5.3.2 Pipette à déplacement positif ou pipette à piston, de 0,075 ml de capacité.
5.3.3 Pipette, de 2 ml de capacité.
5.4 Bloc d'incubation, pouvant être maintenu à une température de 38 °C ± 1 °C et pouvant supporter les
cuvettes.
2)
5.5 Parafilm ou autre film approprié de qualité pour laboratoire.
5.6 Agitateur/mélangeur Vortex.
5.7 Bain d'eau, pouvant être maintenu à une température de 63 °C ± 1 °C et 95 °C ± 1 °C.
5.8 Fioles jaugées à un trait, de 100 ml de capacité.
6 Échantillonnage
Il est important que le laboratoire reçoive un échantillon réellement représentatif de la portion échantillonnée,
non endommagé ou modifié lors du transport et de l'entreposage.
L'échantillonnage ne fait pas partie de la méthode spécifiée dans la présente partie de l'ISO 11816⎪FIL 155.
Une méthode d'échantillonnage recommandée est fournie dans l'ISO 707⎪FIL 50.
7 Préparations
7.1 Lait exempt de phosphatase alcaline
Préparer du lait sans phosphatase du même type que l'échantillon à analyser, en versant avec soin la prise
de lait voulue dans un tube à essai ou un conteneur adapté, en veillant à ce que le lait ne touche pas le bord
et les côtés du conteneur.
Placer le tube ou le conteneur renfermant la prise de lait dans le bain d'eau (5.7) chauffé à 95 °C. Préchauffer
la prise de lait à 95 °C avant de démarrer la période de chauffage de 5 min à cette température. Contrôler la
température à l'aide d'un thermomètre ou d'une sonde à thermistance, placée au centre du tube ou du
conteneur. Dès que la température de la prise de lait a atteint 95 °C, démarrer la période de chauffage de
5 min. À l'issue de cette période de chauffage, refroidir rapidement le tout.
Soumettre à essai la prise de lait ainsi traitée en vue de s'assurer que son activité ALP est inférieure à
10 mU/l.
2) Le parafilm est un exemple de produit approprié disponible sur le marché. Cette information est donnée par souci de
commodité à l'intention des utilisateurs de la présente norme et ne saurait constituer un engagement de l'ISO ou de la FIL
à l'égard de ce produit.
© ISO
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.