ISO 11816-1:2013

Milk and milk products - Determination of alkaline phosphatase activity - Part 1: Fluorimetric method for milk and milk-based drinks

ISO 11816-1|IDF 155-1:2013 specifies a fluorimetric method for the determination of alkaline phosphatase (ALP, EC 3.1.3.1) activity in raw and heat-treated whole milk, semi-skimmed milk, skimmed milk and flavoured milks. This method is applicable to milk and milk-based drinks from cows, sheep and goats. It is also applicable to milk powder after reconstitution. The instrument can read activities up to 7 000 milliunits per litre (mU/l). If the activity is higher than 7 000 mU/l, it is diluted with alkaline phosphatase-free milk so as to obtain a measurement not higher than 7 000 mU/l.

Lait et produits laitiers — Détermination de l'activité de la phosphatase alcaline — Partie 1: Méthode fluorimétrique pour le lait et les boissons à base de lait

L'ISO 11816-1|FIL 155-1:2013 spécifie une méthode fluorimétrique pour la détermination de l'activité de la phosphatase alcaline (ALP, EC 3.1.3.1) dans les laits crus et traités thermiquement entiers, demi-écrémés, écrémés et dans les laits aromatisés. La méthode est applicable au lait et aux boissons à base de lait de vache, de brebis et de chèvre. Elle est également applicable au lait en poudre après reconstitution. L'appareillage peut lire des activités jusqu'à 7 000 milliunités par litre (mU/l). Si l'activité est supérieure à 7 000 mU/l, une dilution avec du lait exempt de phosphatase alcaline (7.1) est effectuée de façon à obtenir un mesurage ne dépassant pas 7 000 mU/l.

General Information

• Status: Withdrawn
• Publication Date: 21-Oct-2013
• ICS: 67.100.10 - Milk and processed milk products
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 5 - Milk and milk products
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 5 - Milk and milk products
• Current Stage: 9599 - Withdrawal of International Standard
• Start Date: 12-Jan-2024
• Completion Date: 30-Oct-2025

Relations

• Revised: ISO 11816-1:2024 - Milk and milk products - Determination of alkaline phosphatase activity - Part 1: Fluorimetric method for milk and milk-based drinks
• Effective Date: 01-Oct-2022
• Revises: ISO 11816-1:2006 - Milk and milk products - Determination of alkaline phosphatase activity - Part 1: Fluorimetric method for milk and milk-based drinks
• Effective Date: 18-Dec-2010

Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 11816-1
IDF
155-1
Third edition
2013-11-01
Milk and milk products —
Determination of alkaline
phosphatase activity —
Part 1:
Fluorimetric method for milk and
milk-based drinks
Lait et produits laitiers — Détermination de l’activité de la
phosphatase alcaline —
Partie 1: Méthode fluorimétrique pour le lait et les boissons à base de lait
Reference numbers
IDF 155-1:2013(E)
©
ISO and IDF 2013
IDF 155-1:2013(E)
© ISO/IDF 2013
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized otherwise in any form or
by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting on the internet or an intranet, without prior written
permission. Permission can be requested from either ISO or IDF at the respective address below or ISO’s member body in the
country of the requester.
ISO copyright office International Dairy Federation
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20 Silver Building • Bd Auguste Reyers 70/B • B-1030 Brussels
Tel. + 41 22 749 01 11 Tel. + 32 2 733 98 88
Fax + 41 22 749 09 47 Fax + 32 2 733 04 13
E-mail [e-mail] E-mail [e-mail]
Web www.iso.org Web www.fil-idf.org
Published in Switzerland
ii © ISO and IDF 2013 – All rights reserved

IDF 155-1:2013(E)
Contents Page
Foreword .v
1 Scope . 1
2 Terms and definitions . 1
3 Principle . 1
4 Reagents . 1
5 Apparatus . 2
6 Sampling . 3
7 Preparations . 3
7.1 Alkaline phosphatase-free milk . 3
7.2 Preparation of test sample . 4
8 Procedure. 4
8.1 Verification of instrument performance . 4
8.2 Reagent controls to test the suitability of ready-to-use working substrate (4.3) . 5
8.3 Calibration . 5
8.4 Determination . 6
8.5 Test sample-related controls . 6
9 Calculation and expression of results . 7
9.1 Calibration ratio . 7
9.2 Calculation . 8
9.3 Expression of test results . 8
10 Precision . 8
10.1 Collaborative test . 8
10.2 Repeatability . 8
10.3 Reproducibility . 8
11 Test report . 9
Annex A
(informative)
Collaborative trials .10
Bibliography .13
IDF 155-1:2013(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national
standards bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally
carried out through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which
a technical committee has been established has the right to be represented on that committee.
International organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part
in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all
matters of electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2. www.iso.org/directives
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received. www.iso.org/patents
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
The committee responsible for this document is ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 5, Milk and
milk products, and the International Dairy Federation (IDF). It is being published jointly by ISO and IDF.
This third edition of ISO 11816-1|IDF 155-1 cancels and replaces the second edition (ISO 11816-1:2006),
which has been technically revised.
ISO 11816|IDF 155 consists of the following parts, under the general title Milk and milk products —
Determination of alkaline phosphatase activity:
— Part 1: Fluorimetric method for milk and milk-based drinks
— Part 2: Fluorimetric method for cheese
iv © ISO and IDF 2013 – All rights reserved

IDF 155-1:2013(E)
Foreword
IDF (the International Dairy Federation) is a non-profit organization representing the dairy sector
worldwide. IDF membership comprises National Committees in every member country as well as
regional dairy associations having signed a formal agreement on cooperation with IDF. All members of
IDF have the right to be represented on the IDF Standing Committees carrying out the technical work.
IDF collaborates with ISO in the development of standard methods of analysis and sampling for milk and
milk products.
The main task of Standing Committees is to prepare International Standards. Draft International
Standards adopted by the Standing Committees are circulated to the National Committees for
endorsement prior to publication as an International Standard. Publication as an International Standard
requires approval by at least 50 % of IDF National Committees casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. IDF shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
ISO 11816-1|IDF 155-1 was prepared by the International Dairy Federation (IDF) and Technical
Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 5, Milk and milk products. It is being published
jointly by IDF and ISO.
All work was carried out by the Joint ISO-IDF Project Group on Determination of alkaline phosphatase
activity – fluorimetric method, of the Standing Committee on Analytical Methods for Processing Aids and
Indicators, under the aegis of its project leader, Ms. Eileen Garry (USA).
This third edition of ISO 11816-1|IDF 155-1 cancels and replaces IDF 155-1:2006, which has been
technically revised.
ISO 11816|IDF 155 consists of the following parts, under the general title Milk and milk products —
Determination of alkaline phosphatase activity:
— Part 1: Fluorimetric method for milk and milk-based drinks
— Part 2: Fluorimetric method for cheese
INTERNATIONAL STANDARD
IDF 155-1:2013(E)
Milk and milk products — Determination of alkaline
phosphatase activity —
Part 1:
Fluorimetric method for milk and milk-based drinks
1 Scope
This part of ISO 11816|IDF 155 specifies a fluorimetric method for the determination of alkaline
phosphatase (ALP, EC 3.1.3.1) activity in raw and heat-treated whole milk, semi-skimmed milk, skimmed
milk and flavoured milks. This method is applicable to milk and milk-based drinks from cows, sheep and
goats. It is also applicable to milk powder after reconstitution.
The instrument can read activities up to 7 000 milliunits per litre (mU/l). If the activity is higher than
7 000 mU/l, it is diluted with alkaline phosphatase-free milk (7.1) so as to obtain a measurement not
higher than 7 000 mU/l.
2 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
2.1
alkaline phosphatase (ALP) activity
activity of the alkaline phosphatase present in the product, determined by the specified procedure
Note 1 to entry: The alkaline phosphatase activity is expressed as milliunits of enzyme activity per litre of
sample (mU/l).
2.2
unit of alkaline phosphatase activity
amount of alkaline phosphatase enzyme that catalyses the transformation of 1 µmol of substrate per minute
3 Principle
The alkaline phosphatase activity of the sample is measured by a continuous fluorimetric direct
kinetic assay. A non-fluorescent aromatic monophosphoric ester substrate, 2’-[2-benzothiazolyl]-6’-
hydroxybenzothiazole phosphate, in the presence of any alkaline phosphatase derived from the sample,
undergoes hydrolysis of its phosphate radical, producing a highly fluorescent product. Fluorimetric
measurement of alkaline phosphatase (ALP) activity is measured at 38 °C over a 3-min period when
using Fluorophos®. This includes pre-incubation of substrate and sample, followed by multiple kinetic
readings of the reaction rate.
NOTE Although this is a 3-min test, the first minute is an equilibration period to ensure that the sample is at
38 °C. Measurements of activity are actually made from the beginning of the second minute to the end of the third
minute (i.e. over a 2-min period).
4 Reagents
Use only reagents of recognized analytical grade, unless otherwise specified, and distilled or
demineralized water, or water of equivalent purity.
IDF 155-1:2013(E)
1)
4.1 Fluorophos® substrate, in bottles, each containing 144 mg of Fluorophos® substrate powder,
molecular weight 580 grams per mole.
This is a non-fluorescent aromatic monophosphoric ester substrate, 2’-[2-benzothiazolyl]-6’-
hydroxybenzothiazole phosphate (Fluorophos®). The Fluorophos® substrate remains stable for
two years from the date of manufacture, provided it is stored in unopened bottles at between 2 °C and
8 °C; protect against light.
4.2 Substrate buffer solution, diethanolamine (DEA) buffer solution, c(DEA) = 2,4 mol/l, with pH
10,0, in bottles of 240 ml each. The substrate buffer solution remains stable for two years from the date
of manufacture, provided it is stored in unopened bottles at between 2 °C and 8 °C; protect against light.
4.3 Working substrate
Allow the Fluorophos® substrate (4.1) and the substrate buffer solution (4.2) to come to room
temperature. Add the content of one bottle of substrate buffer solution (240 ml) (4.2) to that of one bottle
of Fluorophos® substrate (144 mg) (4.1), and mix well by inversion for 3 min to create ~1,0 millimolar
(pH 10) solution. Use amber glass to protect against light.
Allow the obtained solution to stand at room temperature for at least 30 min prior to use.
Use the A/D (analogue-to-digital) test given in 8.2 to test the suitability of the ready-to-use working substrate.
Do not use the working substrate if a reading above 1 200 FLU (fluorescence units) is obtained (8.2).
The working substrate remains stable for 60 days when protected from light and stored at between 2 °C
and 8 °C, or for 8 h when stored at 38 °C.
NOTE The volume of the working substrate (240 ml) obtained is sufficient for approximately 115 tests.
4.4 Calibrator solutions, Fluoroyellow®(FY) [2’-(2-benzothiazolyl)-6’-hydroxybenzothiazole] in
substrate buffer solution (4.2).
The calibrator solutions remain stable for 18 months from the date of manufacture, provided they are
stored in unopened bottles at between 2 °C and 8 °C. Mix gently prior to use to ensure optimal results.
4.4.1 Calibrator solution A, containing 0 μmol/l of Fluoroyellow®.
−3
4.4.2 Calibrator solution B, containing 17,24 × 10 μmol/l of Fluoroyellow®.
−3
4.4.3 Calibrator solution C, containing 34,48 × 10 μmol/l of Fluoroyellow®.
−3
4.5 Daily instrument control solution, containing 34,48 x10 µmol/l of Fluoroyellow®.
The daily instrument control solution remains stable for 18 months from the date of manufacture,
provided it is stored in unopened bottles at between 2 °C and 8 °C. Mix gently prior to use to ensure
optimal results.
5 Apparatus
Usual laboratory equipment and, in particular, the following.
1) The reagents specified in 4.1 to 4.5 and the apparatus specified in 5.1 to 5.4 (except 5.3.3) comprise the Fluorophos
Test System, which is the trade name of a product supplied by Advanced Instruments, Inc., Two Technology Way,
Norwood, Massachusetts 02062, USA. The manufacturer may change the packaging configurations supplied with
Fluorophos Test system. The user should refer to the manufacturer’s instructions for preparing reagents if different
from those specified herein. Fluorophos and Fluoroyellow are trademarks of Advanced Instruments, Inc. This
information is given for the convenience of users of this document and does not constitute an endorsement by ISO
or IDF of the products named. Equivalent products may be used if they can be shown to lead to the same results.
2 © ISO and IDF 2013 – All rights reserved

IDF 155-1:2013(E)
5.1 Filter fluorimeter, with thermostatically controlled cuvette holder, capable of operating at
38 °C ± 1 °C and right-angle optics, allowing excitation at a wavelength of 440 nm and emission at between
1)
520 nm and 560 nm [e.g. Fluorophos® instrument ].
5.2 Cuvettes, disposable, of non-fluorescent glass.
5.3 Pipettes
5.3.1 Fixed-volume dispenser, capable of dispensing 2,0 ml.
5.3.2 Positive-displacement or air displacement pipette, of capacity 0,075 ml.
Follow strict instructions for pipetting technique as this is a critical step in generating accurate results.
Ensure that piston of pipette bore is tightly secured prior to use.
5.3.3 Pipettes, of capacity 2 ml and 3 ml.
5.4 Incubator block, capable of maintaining a temperature of 38 °C ± 1 °C, suitable for holding cuvettes.
5.5 Suitable laboratory-grade film.
5.6 Vortex mixer.
5.7 Water bath, capable of maintaining a temperature of 63 °C ± 1 °C and 95 °C ± 1 °C.
5.8 One-mark volumetric flasks, of capacity 100 ml.
6 Sampling
Sampling is not part of the method specified in this part of ISO 11816|IDF 155. A recommended sampling
method is given in ISO 707|IDF 50.
A representative sample should have been sent to the laboratory. It should not have been damaged or
changed during transport or storage.
7 Preparations
7.1 Alkaline phosphatase-free milk
Prepare phosphatase-free milk of the type to be tested by carefully dispensing the desired portion of
milk into a test tube or suitable container, ensuring that no milk touches the rim or sides of the container.
Place the tube or container with the milk portion in the water bath (5.7) set at 95 °C. Preheat the milk
portion to 95 °C, before starting its 5-min heating period at that temperature. Check the temperature by
using a thermometer or thermistor probe placed in the centre of the tube or container. When the milk
portion reaches 95 °C, immediately start its 5-min heating period. Cool the whole portion rapidly after
the heating period.
Test the thus-treated milk portion to ensure that its ALP activity is less than 10 mU/l.
IDF 155-1:2013(E)
7.2 Preparation of test sample
7.2.1 General
Carefully mix all test samples prior to use.
NOTE It is usually not necessary to prewarm test samples.
7.2.2 Pasteurized test samples
Use pasteurized test samples as delivered, in amounts as required.
7.2.3 Dilution of test samples with high ALP values
Prepare dilutions of the test samples of milk using phosphatase-free milk (7.1) in order to bring their
ALP levels within the analytical range of assay (<7 000 mU/l). Mix the diluted solutions well.
8 Procedure
8.1 Verification of instrument performance
8.1.1 General
It is important to check instrument performance for drift, stray light and stability prior to analysing test
samples. Follow good laboratory practice principles when operating the filter fluorimeter (5.1).
Quality control tests include
a) the daily A/D test, used to check the proper functioning of the equipment,
b) the daily instrument control test, using the daily instrument control solution (4.5) to monitor any
electronic or optical drift in the fluorimeter, and
c) the use of external positive, negative and normal controls, described in 8.1.3, which are recommended
for monitoring daily instrument precision parameters.
8.1.2 A/D tests
8.1.2.1 When using the Fluorophos® instrument, perform the A/D tests daily before testing commence
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 11816-1
FIL
155-1
Troisième édition
2013-11-01
Lait et produits laitiers —
Détermination de l’activité de la
phosphatase alcaline —
Partie 1:
Méthode fluorimétrique pour le lait et
les boissons à base de lait
Milk and milk products — Determination of alkaline phosphatase
activity —
Part 1: Fluorimetric method for milk and milk-based drinks
Numéros de référence
FIL 155-1:2013(F)
©
ISO et FIL 2013
FIL 155-1:2013(F)
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO/FIL 2013
Droits de reproduction réservés. Sauf indication contraire, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée
sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie, l’affichage sur
l’internet ou sur un Intranet, sans autorisation écrite préalable. Les demandes d’autorisation peuvent être adressées à l’ISO ou à
la FIL, à l’une ou l’autre des adresses ci-après, ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office Fédération Internationale du Lait
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20 Silver Building • Bd Auguste Reyers 70/B • B-1030 Brussels
Tel. + 41 22 749 01 11 Tel. + 32 2 733 98 88
Fax + 41 22 749 09 47 Fax + 32 2 733 04 13
E-mail [e-mail] E-mail [e-mail]
Web www.iso.org Web www.fil-idf.org
Publié en Suisse
ii © ISO et FIL 2013 – Tous droits réservés

FIL 155-1:2013(F)
Sommaire Page
Avant-propos .v
1 Domaine d’application . 1
2 Termes et définitions . 1
3 Principe . 1
4 Réactifs . 2
5 Appareillage . 3
6 Échantillonnage . 3
7 Préparations . 3
7.1 Lait exempt de phosphatase alcaline . 3
7.2 Préparation de l’échantillon pour essai . 4
8 Mode opératoire. 4
8.1 Vérification des performances de l’appareillage . 4
8.2 Contrôles de réactifs pour évaluer l’adéquation du substrat de travail prêt à l’emploi (4.3) .
8.3 Étalonnage . 5
8.4 Détermination . 6
8.5 Contrôles relatifs aux échantillons pour essai . 7
9 Calcul et expression des résultats . 7
9.1 Rapport d’étalonnage . 7
9.2 Calcul . 8
9.3 Expression des résultats d’essai . 8
10 Fidélité . 8
10.1 Essai interlaboratoires . 8
10.2 Répétabilité . 9
10.3 Reproductibilité . 9
11 Rapport d’essai . 9
Annexe A
(informative)
Essais interlaboratoires .10
Bibliographie .13
© ISO et FIL 2013 – Tous droits réservés iii

FIL 155-1:2013(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne
la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/CEI, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/CEI, Partie 2, www.iso.
org/directives.
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant les
références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de l’élaboration
du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou sur la liste ISO des déclarations de brevets reçues,
www.iso.org/brevets.
Les éventuelles appellations commerciales utilisées dans le présent document sont données pour
information à l’intention des utilisateurs et ne constituent pas une approbation ou une recommandation.
Le comité chargé de l’élaboration du présent document est l’ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité
SC 5, Lait et produits laitiers et la Fédération internationale du Lait (FIL). Il est publié conjointement par
l’ISO et la FIL.
Cette troisième édition de l’ISO 11816-1|FIL 155-1 annule et remplace la deuxième édition
(ISO 11816-1:2006), qui a fait l’objet d’une révision technique.
L’ISO 11816|FIL 155 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Lait et produits
laitiers — Détermination de l’activité de la phosphatase alcaline:
— Partie 1: Méthode fluorimétrique pour le lait et les boissons à base de lait
— Partie 2: Méthode fluorimétrique pour le fromage
iv © ISO et FIL 2013 – Tous droits réservés

FIL 155-1:2013(F)
Avant-propos
La FIL (Fédération Internationale du Lait) est une fédération mondiale du secteur laitier avec un Comité
National dans chacun de ses pays membres. Chaque Comité National a le droit de faire partie des Comités
permanents de la FIL auxquels sont confiés les travaux techniques. La FIL collabore avec l’ISO et avec pour
l’élaboration de méthodes normalisées d’analyse et d’échantillonnage pour le lait et les produits laitiers.
La tâche principale des Comités permanents est d’élaborer les Normes internationales. Les projets de
Normes internationales ayant reçu l’approbation des Comités permanents sont soumis aux Comités
Nationaux pour entérinement avant publication comme Normes internationales. Leur publication
comme Normes internationales requiert l’approbation de 50 % au moins des Comités Nationaux votants.
L’attention est attirée sur le fait que certains éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de brevets. La FIL ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir identifié de tels droits de
propriété et averti de leur existence.
Les éventuelles appellations commerciales utilisées dans le présent document sont données pour
information à l’intention des utilisateurs et ne constituent pas une approbation ou une recommandation.
L’ISO 11816-1|FIL 155-1 a été élaborée par la Fédération Internationale du Lait (FIL) et par le comité
technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 5, Lait et produits laitiers. Elle est publiée
conjointement par la FIL et l’ISO.
L’ensemble des travaux a été réalisé par le Groupe de projet mixte ISO-FIL relatif à la Détermination de
l’activité de la phosphatase alcaline — méthode fluorimétrique, du Comité permanent chargé des Méthodes
analytiques pour les aides et indicateurs de procédés industriels, sous la conduite de son chef de projet,
Mme Eileen Garry (États-Unis).
Cette troisième édition de l’ISO 11816-1|FIL 155-1 annule et remplace la FIL 155-1:2006, qui a fait l’objet
d’une révision technique.
L’ISO 11816|FIL 155 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Lait et produits
laitiers — Détermination de l’activité de la phosphatase alcaline:
— Partie 1: Méthode fluorimétrique pour le lait et les boissons à base de lait
— Partie 2: Méthode fluorimétrique pour le fromage
© ISO et FIL 2013 – Tous droits réservés v

NORME INTERNATIONALE
FIL 155-1:2013(F)
Lait et produits laitiers — Détermination de l’activité de la
phosphatase alcaline —
Partie 1:
Méthode fluorimétrique pour le lait et les boissons à base
de lait
1 Domaine d’application
La présente partie de l’ISO 11816|FIL 155 spécifie une méthode fluorimétrique pour la détermination
de l’activité de la phosphatase alcaline (ALP, EC 3.1.3.1) dans les laits crus et traités thermiquement
entiers, demi-écrémés, écrémés et dans les laits aromatisés. La méthode est applicable au lait et aux
boissons à base de lait de vache, de brebis et de chèvre. Elle est également applicable au lait en poudre
après reconstitution.
L’appareillage peut lire des activités jusqu’à 7 000 milliunités par litre (mU/l). Si l’activité est supérieure
à 7 000 mU/l, une dilution avec du lait exempt de phosphatase alcaline (7.1) est effectuée de façon à
obtenir un mesurage ne dépassant pas 7 000 mU/l.
2 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
2.1
activité de la phosphatase alcaline (ALP)
activité de la phosphatase alcaline présente dans un produit, déterminée suivant le mode opératoire spécifié
Note 1 à l’article: L’activité de la phosphatase alcaline est exprimée en milliunités d’activité enzymatique par litre
d’échantillon (mU/l).
2.2
unité d’activité de la phosphatase alcaline
quantité d’enzyme phosphatase alcaline qui catalyse la transformation de 1 µmol de substrat par minute
3 Principe
L’activité de la phosphatase alcaline de l’échantillon se mesure en effectuant un essai cinétique
direct fluorimétrique continu. Un substrat d’ester monophosphorique aromatique non fluorescent,
2’-[2-benzothiazolyl]-6’-hydroxybenzothiazole phosphate, en présence de phosphatase alcaline issue de
l’échantillon, subit une hydrolyse de son radical phosphate et produit un composé hautement fluorescent.
Le mesurage fluorimétrique de l’activité de la phosphatase alcaline (ALP) est effectué à 38 °C sur une
période de 3 min lorsque l’on utilise le Fluorophos®. Ce mesurage comprend la préincubation du substrat
et de l’échantillon, suivie de plusieurs lectures cinétiques de la vitesse de réaction.
NOTE Bien que l’essai dure 3 min, la première minute est une période d’équilibration afin de s’assurer que
l’échantillon est à 38 °C. Les mesurages d’activité sont en effet réalisés du début de la deuxième minute à la fin de
la troisième minute (c’est-à-dire sur une période de 2 min).
© ISO et FIL 2013 – Tous droits réservés 1

FIL 155-1:2013(F)
4 Réactifs
Sauf spécification contraire, utiliser exclusivement des réactifs de qualité analytique reconnue et de
l’eau distillée ou déminéralisée ou de l’eau de pureté équivalente.
1)
4.1 Substrat Fluorophos® , en flacons, contenant chacun 144 mg de poudre de substrat Fluorophos®,
masse moléculaire 580 g/mol.
Il s’agit d’un substrat d’ester monophosphorique aromatique non fluorescent, 2’-[2-benzothiazolyl]-6’-
hydroxybenzothiazole phosphate (Fluorophos®). Le substrat Fluorophos® reste stable pendant 2 ans
après sa date de fabrication lorsqu’il est conservé, dans le flacon non ouvert, entre 2 °C et 8 °C; garder à
l’abri de la lumière.
4.2 Solution tampon de substrat, solution tampon de diéthanolamine (DEA), c(DEA) = 2,4 mol/l, pH 10,0,
en flacons de 240 ml. La solution tampon de substrat reste stable pendant 2 ans après sa date de fabrication
lorsqu’elle est conservée, dans le flacon non ouvert, entre 2 °C et 8 °C; garder à l’abri de la lumière.
4.3 Substrat de travail
Amener le substrat Fluorophos® (4.1) et la solution tampon de substrat (4.2) à température ambiante.
Ajouter le contenu d’un flacon de solution tampon de substrat (240 ml) (4.2) à un flacon de substrat ®
Fluorophos (144 mg) (4.1), puis mélanger avec soin en retournant le récipient pendant 3 min pour
créer une solution d’environ 1,0 millimole (pH 10). Utiliser un verre ambré pour protéger de la lumière.
Laisser la solution ainsi obtenue reposer à température ambiante pendant au moins 30 min avant utilisation.
Utiliser l’essai A/D (analogique/numérique) donné en 8.2 pour vérifier que le substrat de travail prêt
pour utilisation est bon. Ne pas utiliser le substrat de travail en cas d’obtention d’une valeur supérieure
à 1200 FLU (unités de fluorescence) (8.2).
Le substrat de travail reste stable pendant 60 jours lorsqu’il est conservé à l’abri de la lumière entre 2 °C
et 8 °C, ou pendant 8 h lorsqu’il est conservé à 38 °C.
NOTE Le volume de substrat de travail obtenu (240 ml) suffit pour effectuer environ 115 essais.
4.4 Solutions étalons, Fluoroyellow® (FY) [2’-(2-benzothiazolyl)-6’-hydroxybenzothiazole] dans une
solution tampon de substrat (4.2).
Les solutions étalons restent stables pendant 18 mois après leur date de fabrication lorsqu’elles sont
conservées dans des flacons non ouverts entre 2 °C et 8 °C. Mélanger doucement avant utilisation pour
obtenir des résultats optimaux.
4.4.1 Solution étalon A, contenant 0 μmol/l de Fluoroyellow®.
−3
4.4.2 Solution étalon B, contenant 17,24 × 10 μmol/l de Fluoroyellow®.
−3
4.4.3 Solution étalon C, contenant 34,48 × 10 μmol/l de Fluoroyellow®.
1) Les réactifs spécifiés en 4.1 à 4.5 et les appareils spécifiés en 5.1 à 5.4 (sauf 5.3.3) sont disponibles sous
l’appellation commerciale «Fluorophos Test System» et sont fournis par Advanced Instruments, Inc., Two Technology
Way, Norwood, Massachusetts 02062, États-Unis. La configuration des emballages fournis avec le Fluorophos Test
System peut être modifiée par le fabricant. II convient que l’utilisateur se réfère aux instructions du fabricant pour
la préparation des réactifs s’ils se révèlent différents de ceux spécifiés dans le présent document. Fluorophos et
Fluoroyellow sont des marques déposées de Advanced Instruments, Inc. Cette information est donnée à l’intention
des utilisateurs du présent document et ne signifie nullement que l’ISO ou la FIL approuvent ou recommandent
l’emploi exclusif des produits ainsi désignés. Des produits équivalents peuvent être utilisés s’il est démontré qu’ils
conduisent aux mêmes résultats.
2 © ISO et FIL 2013 – Tous droits réservés

FIL 155-1:2013(F)
−3
4.5 Solution de contrôle quotidien des instruments, contenant 34,48 × 10 µmol/l de Fluoroyellow®.
La solution de contrôle quotidien des instruments reste stable pendant 18 mois après sa date de
fabrication lorsqu’elle est conservée dans des flacons non ouverts entre 2 °C et 8 °C. Mélanger doucement
avant utilisation pour obtenir des résultats optimaux.
5 Appareillage
Matériel courant de laboratoire et, en particulier, ce qui suit.
5.1 Fluorimètre à filtre, avec un support de cuvettes à contrôle thermostatique, capable de fonctionner
à 38 °C ± 1 °C et avec une optique à angle droit, permettant une excitation à une longueur d’onde de
1)
440 nm et une émission entre 520 nm et 560 nm [appareillage Fluorophos® par exemple].
5.2 Cuvettes, jetables, en verre non fluorescent.
5.3 Pipettes
5.3.1 Pipette à volume fixe, permettant de délivrer 2,0 ml.
5.3.2 Pipette à déplacement positif ou pipette à piston, de 0,075 ml de capacité.
Suivre à la lettre les instructions de la technique de pipetage car cette étape est cruciale pour l’obtention
de résultats précis. Veiller à bien immobiliser le piston de l’alésage de la pipette avant utilisation.
5.3.3 Pipettes, de 2 ml et 3 ml de capacité.
5.4 Bloc d’incubation, pouvant maintenir une température de 38 °C ± 1 °C et pouvant contenir des cuvettes.
5.5 Film de qualité pour laboratoire approprié.
5.6 Agitateur/mélangeur Vortex.
5.7 Bain d’eau, pouvant maintenir une température de 63 °C ± 1 °C et 95 °C ± 1 °C.
5.8 Fioles jaugées à un trait, de 100 ml de capacité.
6 Échantillonnage
L’échantillonnage ne fait pas partie de la méthode spécifiée dans la présente partie de l’ISO 11816|FIL 155.
Une méthode d’échantillonnage recommandée est fournie dans l’ISO 707|FIL 50.
Il est important que le laboratoire reçoive un échantillon réellement représentatif, non endommagé ou
modifié lors du transport ou de l’entreposage.
7 Préparations
7.1 Lait exempt de phosphatase alcaline
Préparer du lait exempt de phosphatase, du même type que l’échantillon à analyser, en versant avec soin
la quantité de lait voulue dans un tube à essai ou dans un récipient adapté, en veillant à ce que le lait ne
touche pas le bord ou les côtés du récipient.
© ISO et FIL 2013 – Tous droits réservés 3

FIL 155-1:2013(F)
Placer le tube ou le récipient contenant le lait dans le bain d’eau (5.7) réglé à 95 °C. Préchauffer le lait à
95 °C avant de démarrer la période de chauffage de 5 min à cette température. Contrôler la température
à l’aide d’un thermomètre ou d’une sonde à thermistance, placée au centre du tube ou du récipient. Dès
que la température du lait atteint 95 °C, démarrer la période de chauffage de 5 min. À l’issue de cette
période de chauffage, refroidir le lait rapidement.
Soumettre à essai le lait ainsi traité afin de s’assurer que son activité ALP est inférieure à 10 mU/l.
7.2 Préparation de l’échantillon pour essai
7.2.1 Généralités
Mélanger soigneusement tous les échantillons pour essai avant utilisation.
NOTE Il est généralement inutile de préchauffer les échantillons pour essai.
7.2.2 Échantillons pour essai pasteurisés
Utiliser les échantillons pour essai pasteurisés tels que livrés, dans les quantités requises.
7.2.3 Dilution d’échantillons pour essai avec des valeurs d’ALP élevées
Préparer des dilutions des échantillons de lait en utilisant du lait exempt de phosphatase (7.1), de
manière que leurs niveaux d’ALP se situent dans la plage analytique de l’essai (<7 000 mU/l). Mélanger
soigneusement les solutions diluées.
8 Mode opératoire
8.1 Vérification des performances de l’appareillage
8.1.1 Généralités
Il est important de vérifier les performances de l’appareillage en matière d’écarts, de lumière parasite
et de stabilité avant de procéder à l’analyse des échantillons pour essai. Veiller à utiliser le fluorimètre à
filtre (5.1) conformément aux principes de bonnes pratiques de laboratoire.
Les essais réalisés dans le cadre du contrôle qualité comprennent:
a) l’essai quotidien A/D utilisé pour vérifier le bon fonctionnement de l’équipement,
b) l’essai pour le contrôle quotidien de l’appareillage en utilisant la solution de contrôle quotidien de
l’instrument (4.5) pour identifier tout écart électronique ou optique du fluorimètre, et
c) l’utilisation de contrôles externes positifs, négatifs et normaux, décrits en 8.1.3, qui sont recommandés
dans le cadre de la surveillance quotidienne des paramètres de fidélité de l’appareillage.
8.1.2 Essais A/D
8.1.2.1 Si l’on utilise l’appareillage Fluorophos®, effectuer les essais A/D quotidiennement avant de
commencer l’essai proprement dit.
8.1.2.2 Accéder à l’essai A/D via le menu «SETUP». Appuyer sur «SETUP», puis sélectionner l’option
de menu «A/D Test» en appuyant sur < ou > . Sans rien mettre dans le support de cuvettes, appuyer sur
«START». Attendre que les chiffres apparaissant à l’écran se stabilisent. Il convient que l’affichage indique
302 ± 4. Si le résultat se situe en dehors de cet intervalle, nettoyer les filtres d’excitation et d’émission,
puis répéter l’essai A/D.
...

МЕЖДУНАРОДНЫЙ ISO
СТАНДАРТ 11816-1
IDF
155-1
Третье издание
2013-11-01
Молоко и молочные продукты.
Определение активности щелочной
фосфатазы.
Часть 1.
Флуориметрический метод для молока
и молочных напитков
Milk and milk products — Determination of alkaline phosphatase activity
— Part 1: Fluorimetric method for milk and milk-based drinks
.
Ответственность за подготовку русской версии несѐт GOST R
(Российская Федерация) в соответствии со статьѐй 18.1 Устава ISO

Ссылочный номер
IDF 155-1:2013(R)
©
ISO и IDF 2013
IDF 155-1:2013(R)
ДОКУМЕНТ ЗАЩИЩЕН АВТОРСКИМ ПРАВОМ

©  ISO/IDF 2013
Все права сохраняются. Если не задано иначе, никакую часть настоящей публикации нельзя копировать или использовать в
какой-либо форме или каким-либо электронным или механическим способом, включая фотокопии и микрофильмы, без
предварительного письменного согласия офиса ISO по адресу, указанному ниже, или членов ISO в стране регистрации
пребывания.
ISO copyright office International Dairy Federation
Case postale 56 CH-1211 Geneva 20 Silver Building Boulevard Auguste Reyers 70/B B-1030 Brussels
Tel. + 41 22 749 01 11 Tel. + 32 2 733 98 88
Fax + 41 22 749 09 47 Fax + 32 2 733 04 13
E-mail [e-mail] E-mail [e-mail]
Web www.iso.org Web www.fil-idf.org
Опубликовано в Швейцарии
ii © ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются

IDF 155-1:2013(R)
Содержание Страница
Предисловие. iv
1 Область применения . 1
2 Термины и определения . 1
3 Принцип . 1
4 Реактивы . 2
5 Аппаратура . 3
6 Отбор проб . 3
7 Приготовления . 3
7.1 Молоко, не содержащее щелочной фосфатазы . 3
7.2 Приготовление испытательного образца . 4
8 Процедура . 4
8.1 Верификация рабочих характеристик прибора . 4
8.2 Контрольные реактивы для проверки пригодности готового к использованию
рабочего субстрата (4.3) . 6
8.3 Калибровка . 6
8.4 Определение . 6
8.5 Контрольные проверки, связанные с испытательным образцом. 7
9 Вычисление и выражение результатов . 8
9.1 Калибровочный коэффициент . 8
9.2 Вычисление . 8
9.3 Выражение результатов испытания . 9
10 Прецизионность . 9
10.1 Совместное испытание . 9
10.2 Повторяемость. 9
10.3 Воспроизводимость . 9
11 Протокол испытаний. 9
Приложение А (информативное) Совместные испытания . 10
Библиография . 13

© ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются iii

IDF 155-1:2013(R)
Предисловие
Международная организация по стандартизации (ISO) является всемирной федерацией
национальных организаций по стандартизации (комитетов-членов ISO). Разработка международных
стандартов обычно осуществляется техническими комитетами ISO. Каждый комитет-член,
заинтересованный в деятельности, для которой был создан технический комитет, имеет право быть
представленным в этом комитете. Международные правительственные и неправительственные
организации, имеющие связи с ISO, также принимают участие в работах. Что касается стандартизации
в области электротехники, ISO работает в тесном сотрудничестве с Международной
электротехнической комиссией (IEC).
Процедуры, использованные для разработки этого документа, и процедуры, предназначенные для его
дальнейшего ведения, описаны в Директивах ISO/IEC, Часть 1. В частности, обращается внимание на
разные критерии, необходимые для одобрения разных типов документов ISO. Проект этого документа
был разработан согласно редакционным правилам, указанным в Директивах ISO/IEC, Часть 2.
www.iso.org/directives
Обращается внимание на возможность того, что некоторые элементы данного международного
стандарта могут быть объектом патентных прав. ISO не несет ответственности за идентификацию
какого-либо или всех таких патентных прав. Детали всех патентных прав, идентифицированных в
процессе разработки данного документа, будут указаны во Введении и/или в списке патентных
деклараций, полученных ISO. www.iso.org/patents
Любое торговое название, использованное в этом документе, дается в качестве информации для
удобства пользователей и не является рекомендацией.
Этот документ был разработан Техническим комитетом ISO/TC 34, Пищевые продукты, Подкомитетом
SC 5, Молоко и молочные продукты, и Международной молочной федерацией (IDF). Он публикуется
совместно ISO и IDF.
Настоящее третье издание ISO 11816-1|IDF 155-1 отменяет и заменяет второе издание
(ISO 11816-1:2006), которое было технически пересмотрено.
ISO 11816|IDF 155 состоит из следующих частей, под общим названием Молоко и молочные
продукты. Определение активности щелочной фосфатазы:
— Часть 1. Флуориметрический метод для молока и молочных напитков
— Часть 2. Флуориметрический метод для сыра
iv © ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются

IDF 155-1:2013(R)
Предисловие
Международная молочная федерация (IDF) является некоммерческой организацией,
представляющей молочный сектор в мировой экономике. Членами IDF являются национальные
комитеты в каждой стране-члене, а также региональные молочные ассоциации, подписавшие
официальное соглашение о сотрудничестве с IDF. Все члены IDF имеют право быть представленными
в постоянных комитетах IDF, выполняющих техническую работу. IDF сотрудничает с ISO в разработке
стандартных методов анализа и отбора проб молока и молочных продуктов.
Главной задачей постоянных комитетов является разработка международных стандартов. Проекты
международных стандартов, принятые рабочими группами и постоянными комитетами, рассылаются
национальным комитетам на голосование. Для их опубликования в качестве международных
стандартов требуется одобрение не менее 50% национальных комитетов IDF, принимающих участие в
голосовании.
Следует иметь в виду, что некоторые элементы настоящего международного стандарта могут быть
объектом патентных прав. IDF не несет ответственности за идентификацию какого-либо одного или
всех таких патентных прав.
Любое торговое название, использованное в этом документе, дается в качестве информации для
удобства пользователей и не является рекомендацией.
ISO 11816-1|IDF 155-1 был разработан Международной молочной федерацией (IDF) и Техническим
комитетом ISO/TC 34, Пищевые продукты,, Подкомитетом SC 5, Молоко и молочные продукты. Он
публикуется совместно IDF и ISO.
Вся работа была проведена Совместной проектной группой ISO-IDF по Определению активности
щелочной фосфатазы – флуориметрический метод Постоянного комитета по Аналитическим
методам для технологических добавок и индикаторов под эгидой руководителя этого проекта
госпожи Eileen Garry (США).
Это третье издание ISO 11816-1|IDF 155-1 отменяет и заменяет IDF 155-1:2006, который был
технически пересмотрено technically revised.
ISO 11816|IDF 155 состоит из следующих частей под общим названием Молоко и молочные продукты.
Определение активности щелочной фосфатазы:
— Часть 1. Флуориметрический метод для молока и молочных напитков
— Часть 2.Флуориметрический метод для сыра

© ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются v

МЕЖДУНАРОДНЫЙ СТАНДАРТ
IDF 155-1:2013(R)
)
Молоко и молочные продукты. Определение активности
щелочной фосфатазы.
Часть 1.
Флуориметрический метод для молока и молочных
напитков
1 Область применения
Эта часть ISO 11816|IDF 155 устанавливает флуориметрический метод для определения активности
щелочной фосфатазы (ALP, EC 3.1.3.1) в сыром и термообработанном цельном молоке, а также в
полужирном, обезжиренном и ароматизированном молоке. Данный метод применяется для молока
коров, овец и коз и для молочных напитков. Он также применим для сухого молока после
восстановления.
Применяемый прибор позволяет считывать активности вплоть до 7000 миллиединиц на литр (мЕ/л).
Если активность выше 7000 мЕ/л, образец разбавляют молоком, не содержащим щелочную
фосфатазу (7.1), чтобы получить уровень не выше 7000 мЕ/л.
2 Термины и определения
Применительно к настоящему документу используются следующие термины и определения.
2.1
активность щелочной фосфатазы (ALP)
alkaline phosphatase (ALP) activity
активность щелочной фосфатазы, присутствующей в продукте, определенная установленным методом
ПРИМЕЧАНИЕ Активность щелочной фосфатазы выражена в миллиединицах активности фермента на литр пробы (мЕ/л).
2.2
единица активности щелочной фосфатазы
unit of alkaline phosphatase activity
количество фермента щелочной фосфатазы, которое катализирует превращение 1 мкмоль субстрата в минуту
3 Принцип
Активность щелочной фосфатазы образца измеряется путем непрерывного флуориметрического
прямого кинетического анализа. В субстрате нефлуоресцентного ароматического монофосфорного
эфира, 2’-[2-бензотиазолил]-6’-гидроксибензотиазол фосфат, в присутствии любой щелочной
фосфатазы, образованной из этого образца, происходит гидролиз его фосфатного радикала,
производя сильно флуоресцирующий продукт. Флуориметрические измерения активности щелочной
фосфатазы (ALP) проводят при 38 °C в течение 3 минут, используя Флуорофос®. Сюда включена
преинкубация субстрата и образца с последующим многократным кинетическим считыванием скорости
реакции.
ПРИМЕЧАНИЕ Хотя испытание длится 3 мин, первая минута является равновесным периодом для
обеспечения температуры образца 38 °С. Измерения активности фактически начинаются со второй минуты и
продолжаются до конца третьей минуты (т.е. 2 мин).
IDF 155-1:2013(R)
4 Реактивы
Используются только реактивы признанной аналитической чистоты, если нет других указаний, и
дистиллированная или деминерализованная вода или вода аналогичной чистоты.
4.1 Субстрат Флуорофоса®, Субстрат Флуорофоса® в пробирках, каждая из которых содержит
144 мг порошка Флуорофоса®.
Это субстрат нефлуоресцентного ароматического монофосфорного эфира, 2'-[2-бензотиазолил]-6'-
гидроксибензотиазол фосфат (Флуорофос®). Субстрат Флуорофоса® остается стабильным в течение
двух лет от даты изготовления, если его хранить в закрытых пробирках при температуре от 2 °С до
8 °С; защищать от света.
4.2 Буферный раствор субстрата, буферный раствор диэтаноламина (DEA), c(DEA) = 2,4 мольl/л,
с pH 10,0, в пробирках емкостью 240 мл каждая. Буферный раствор субстрата остается стабильным в
течение двух лет с момента изготовления, если его хранить в закрытых пробирках при температуре от
2 °С до 8 °С; также его следует защищать от света.
4.3 Рабочий субстрат
Оставляют субстрат Флуорофоса® (4.1) и буферный раствор субстрата (4.2) до достижения комнатной
температуры. Добавляют содержимое одной пробирки с буферным раствором субстрата (240 мл) к
содержимому одной пробирки с субстратом Флуорофоса® (144 мг) (4.1) и хорошо перемешивают,
переворачивая в течение 3 мин для получения ~1,0 миллимолярного раствора (pH 10). Используют
бутылочное стекло для защиты от света.
Перед использованием полученный раствор выдерживают при комнатной температуре как минимум 30 мин.
Применяют A/D (аналого-цифровой) тест, описанный в 8.2, для проверки пригодности готового к
использованию рабочего субстрата. Не следует использовать рабочий субстрат, если получено
показание выше 1200 FLU (единицы флуоресценции) (8.2).
Рабочий субстрат остается стабильным в течение 60 дней, если он защищен от света и хранится при
температуре от 2 °С до 8 °С, или в течение 8 ч, если хранится при 38 °С.
ПРИМЕЧАНИЕ Полученный объем рабочего субстрата (240 мл) является достаточным приблизительно для
115 тестов.
4.4 Калибровочные растворы, Флуорожелтый®(FY) [2'-(2-бензотиазолил)-6'-гидроксибензотиазол]
в буферном растворе субстрата (4.2).
Калибровочные растворы остаются стабильными в течение 18 месяцев с момента изготовления, если
их хранить в закрытых пробирках при температуре от 2 °C до 8 °C. Для получения оптимальных
результатов их следует плавно перемешать перед использованием.
4.4.1 Калибровочный раствор A, содержащий 0 мкмоль/л Флуорожелтого®.
−3
4.4.2 Калибровочный раствор B, содержащий 17,24 × 10 мкмоль/л Флуорожелтого ®.

Реактивы, установленные в 4.1 до 4.5, и аппаратура, установленная в 5.1 до 5.4 (кроме 5.3.3), входят в
испытательную систему Флуорофос, которая является торговым названием продукта, поставляемого фирмой
Advanced Instruments, Inc., Two Technology Way, Norwood, Massachusetts 02062, USA. Изготовитель может
изменять конфигурации упаковок, поставляемых с испытательной системой Флуорофос. Пользователь должен
обращаться к инструкциям изготовителя для приготовления реактивов, если они отличаются от реактивов,
установленных здесь. Флуорофос и Флуорожелтый являются торговыми марками фирмы Advanced Instruments, Inc.
Эта информация дается только для удобства пользователей данного документа и не является рекомендацией ISO
или IDF для этих продуктов. Можно использовать аналогичные продукты, если есть данные, что они дадут такие
же результаты.
2 © ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются

IDF 155-1:2013(R)
−3
4.4.3 Калибровочный раствор C, содержащий 34,48 × 10 мкмоль/л Флуорожелтого ®.
−3
4.5 Раствор для ежедневного контроля прибора, содержащий 34,48 x10 мкмоль/л
Флуорожелтого ®.
Раствор для ежедневного контроля прибора остается стабильным в течение 18 месяцев с момента
изготовления, если его хранить в закрытых пробирках при температуре от 2 °C до 8 °C. Перед
использованием его следует плавно перемешать для получения оптимальных результатов.
5 Аппаратура
Обычное лабораторное оборудование и, в частности, следующее.
5.1 Фильтровальный флуориметр, с термостатически регулируемым держателем кюветы при
поддержании температуры (38 ± 1) °С и правоугольной оптической системой, допускающей
возбуждение при длине волны 440 нм и испускание при 520-560 нм (например, прибор Флуорофос®).
5.2 Кюветы, сменные, из нефлуоресцентного стекла.
5.3 Пипетки
5.3.1 Дозатор фиксированного объема, обеспечивающий дозирование по 2,0 млl.
5.3.2 Пипетка вытеснительного типа или нагнетательная, вместимостью 0,075 мл.
Необходимо строго соблюдать инструкции по технике пипетирования, так как оно является особенно
важным для получения точных результатов. Перед использованием необходимо удостовериться, что
герметичность поршня пипетки обеспечена.
5.3.3 Пипетки, вместимостью 2 мл и 3 мл.
5.4 Инкубаторный блок, поддерживающий температуру 38 °C ± 1 °C, подходящий для помещения
кювет.
5.5 Подходящая лабораторная пленка парафильм.
5.6 Вихревая мешалка.
5.7 Водяная баня, поддерживающая температуру 63 °C ± 1 °C и 95 °C ± 1 °C.
5.8 Мерные колбы с одной меткой, вместимостью 100 мл.
6 Отбор проб
Отбор проб не является частью метода, установленного в этой части ISO 11816|IDF 155.
рекомендованный метод отбора проб дан в ISO 707|IDF 50.
В лабораторию следует отправлять репрезентативную пробу. Она не должна быть повреждена или
изменена во время транспортировки или хранения.
7 Приготовления
7.1 Молоко, не содержащее щелочной фосфатазы
Приготовляют молоко без фосфатазы того типа, который будет испытываться, тщательно дозируя
© ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются 3

IDF 155-1:2013(R)
требуемую порцию молока в пробирку или подходящий контейнер, следя, чтобы оно не касалось краев
или стенок контейнера.
о
Помещают пробирку или контейнер с порцией молока в водяную баню (5.7.), установленную на 95 С.
о
Предварительно нагревают эту порцию молока до 95 С и затем продолжают еѐ подогрев в течение 5
мин при этой температуре. Температуру контролируют термометром или термисторным зондом,
о
помещенным в центр пробирки или контейнера. Когда температура молока достигает 95 С, сразу же
начинают 5-мин период подогрева. После периода нагрева всю порцию быстро охлаждают.
Обработанную таким образом порцию молока проверяют для гарантии, что активность щелочной
фосфатазы меньше 10 мЕ/л.
7.2 Приготовление испытательного образца
7.2.1 Общие вопросы
Перед использованием все испытательные образцы тщательно перемешивают
ПРИМЕЧАНИЕ В предварительном нагреве испытательных образцов обычно нет необходимости.
7.2.2 Пастеризованные испытательные образцы
Пастеризованные образцы используют в состоянии после поставки, в требуемых количествах.
7.2.3 Разбавление испытательных образцов с высокими значениями ALP
Для приготовления разбавленных образцов используют молоко без фосфатазы (7.1), чтобы их уровни
активности щелочной фосфатазы ALP соответствовали аналитическому диапазону испытания ( 7000
мЕ/л). Разбавленные растворы хорошо перемешивают.
8 Процедура
8.1 Верификация рабочих характеристик прибора
8.1.1 Общие вопросы
Важно, чтобы до проведения испытания образцов была проведена проверка рабочих характеристик прибора
на отклонение, рассеянное световое излучение и стабильность. При работе с фильтровальным
флуориметром следует соблюдать принципы надлежащей лабораторной практики (5.1).
Контрольные тесты качества включают
a) ежедневный тест A/D, используемый для проверки правильного функционирования оборудования,
b) ежедневный контрольный тест прибора с использованием ежедневного контрольного раствора в
приборе (4.5) для мониторинга любого электронного или оптического отклонения флуориметра, и
c) использование внешних положительных, отрицательных и нормальных контрольных проверок,
описанных в 8.1.3, которые рекомендуются для ежедневного мониторинга параметров
прецизионности прибора.
4 © ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются

IDF 155-1:2013(R)
8.1.2 Тесты A/D
8.1.2.1 При использовании прибора Флуорофос® тесты A/D проводят ежедневно перед началом
испытания.
8.1.2.2 Получают доступ к тесту A/D через меню “SETUP”. Нажимают клавишу “SETUP”, затем
выбирают пункт меню “A/D Test”, нажимая or . При пустом держателе кюветы нажимают “START”.
Ждут, когда цифры, появляющиеся на экране дисплея, стабилизируются. Показание дисплея должно
быть 302 4. Если показание будет вне этого диапазона, очищают фильтры возбуждения и испускания
и повторяют тест A/D.
8.1.2.3 С помощью дозатора переносят 2,0 мл раствора для ежедневного контроля прибора
(4.5) в маркированную кювету. Помещают кювету в инкубаторный блок (5.4), установленный на 38°C,
на 20 мин. Вставляют предварительно нагретую кювету в держатель кюветы. Закрывают крышкой.
Когда показание дисплея стабильно, записывают отображаемое значение, которое должно быть 602
12. Если значение вне этого диапазона, используют маленькую отвертку из поставки и медленно
поворачивают винт потенциометра с левой стороны прибора по часовой стрелке или против, как
необходимо, пока показание дисплея не будет 602. Оставляют на 15 мин для уравновешивания чисел.
8.1.3 Контрольные тесты
Выполняют позитивные, негативные и PhosphaCheck-N (контроль фосфатазы) кон
...

МЕЖДУНАРОДНЫЙ ISO
СТАНДАРТ 11816-1
IDF
155-1
Третье издание
2013-11-01
Молоко и молочные продукты.
Определение активности щелочной
фосфатазы.
Часть 1.
Флуориметрический метод для молока
и молочных напитков
Milk and milk products — Determination of alkaline phosphatase activity
— Part 1: Fluorimetric method for milk and milk-based drinks
.
Ответственность за подготовку русской версии несѐт GOST R
(Российская Федерация) в соответствии со статьѐй 18.1 Устава ISO

Ссылочный номер
IDF 155-1:2013(R)
©
ISO и IDF 2013
IDF 155-1:2013(R)
ДОКУМЕНТ ЗАЩИЩЕН АВТОРСКИМ ПРАВОМ

©  ISO/IDF 2013
Все права сохраняются. Если не задано иначе, никакую часть настоящей публикации нельзя копировать или использовать в
какой-либо форме или каким-либо электронным или механическим способом, включая фотокопии и микрофильмы, без
предварительного письменного согласия офиса ISO по адресу, указанному ниже, или членов ISO в стране регистрации
пребывания.
ISO copyright office International Dairy Federation
Case postale 56 CH-1211 Geneva 20 Silver Building Boulevard Auguste Reyers 70/B B-1030 Brussels
Tel. + 41 22 749 01 11 Tel. + 32 2 733 98 88
Fax + 41 22 749 09 47 Fax + 32 2 733 04 13
E-mail [e-mail] E-mail [e-mail]
Web www.iso.org Web www.fil-idf.org
Опубликовано в Швейцарии
ii © ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются

IDF 155-1:2013(R)
Содержание Страница
Предисловие. iv
1 Область применения . 1
2 Термины и определения . 1
3 Принцип . 1
4 Реактивы . 2
5 Аппаратура . 3
6 Отбор проб . 3
7 Приготовления . 3
7.1 Молоко, не содержащее щелочной фосфатазы . 3
7.2 Приготовление испытательного образца . 4
8 Процедура . 4
8.1 Верификация рабочих характеристик прибора . 4
8.2 Контрольные реактивы для проверки пригодности готового к использованию
рабочего субстрата (4.3) . 6
8.3 Калибровка . 6
8.4 Определение . 6
8.5 Контрольные проверки, связанные с испытательным образцом. 7
9 Вычисление и выражение результатов . 8
9.1 Калибровочный коэффициент . 8
9.2 Вычисление . 8
9.3 Выражение результатов испытания . 9
10 Прецизионность . 9
10.1 Совместное испытание . 9
10.2 Повторяемость. 9
10.3 Воспроизводимость . 9
11 Протокол испытаний. 9
Приложение А (информативное) Совместные испытания . 10
Библиография . 13

© ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются iii

IDF 155-1:2013(R)
Предисловие
Международная организация по стандартизации (ISO) является всемирной федерацией
национальных организаций по стандартизации (комитетов-членов ISO). Разработка международных
стандартов обычно осуществляется техническими комитетами ISO. Каждый комитет-член,
заинтересованный в деятельности, для которой был создан технический комитет, имеет право быть
представленным в этом комитете. Международные правительственные и неправительственные
организации, имеющие связи с ISO, также принимают участие в работах. Что касается стандартизации
в области электротехники, ISO работает в тесном сотрудничестве с Международной
электротехнической комиссией (IEC).
Процедуры, использованные для разработки этого документа, и процедуры, предназначенные для его
дальнейшего ведения, описаны в Директивах ISO/IEC, Часть 1. В частности, обращается внимание на
разные критерии, необходимые для одобрения разных типов документов ISO. Проект этого документа
был разработан согласно редакционным правилам, указанным в Директивах ISO/IEC, Часть 2.
www.iso.org/directives
Обращается внимание на возможность того, что некоторые элементы данного международного
стандарта могут быть объектом патентных прав. ISO не несет ответственности за идентификацию
какого-либо или всех таких патентных прав. Детали всех патентных прав, идентифицированных в
процессе разработки данного документа, будут указаны во Введении и/или в списке патентных
деклараций, полученных ISO. www.iso.org/patents
Любое торговое название, использованное в этом документе, дается в качестве информации для
удобства пользователей и не является рекомендацией.
Этот документ был разработан Техническим комитетом ISO/TC 34, Пищевые продукты, Подкомитетом
SC 5, Молоко и молочные продукты, и Международной молочной федерацией (IDF). Он публикуется
совместно ISO и IDF.
Настоящее третье издание ISO 11816-1|IDF 155-1 отменяет и заменяет второе издание
(ISO 11816-1:2006), которое было технически пересмотрено.
ISO 11816|IDF 155 состоит из следующих частей, под общим названием Молоко и молочные
продукты. Определение активности щелочной фосфатазы:
— Часть 1. Флуориметрический метод для молока и молочных напитков
— Часть 2. Флуориметрический метод для сыра
iv © ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются

IDF 155-1:2013(R)
Предисловие
Международная молочная федерация (IDF) является некоммерческой организацией,
представляющей молочный сектор в мировой экономике. Членами IDF являются национальные
комитеты в каждой стране-члене, а также региональные молочные ассоциации, подписавшие
официальное соглашение о сотрудничестве с IDF. Все члены IDF имеют право быть представленными
в постоянных комитетах IDF, выполняющих техническую работу. IDF сотрудничает с ISO в разработке
стандартных методов анализа и отбора проб молока и молочных продуктов.
Главной задачей постоянных комитетов является разработка международных стандартов. Проекты
международных стандартов, принятые рабочими группами и постоянными комитетами, рассылаются
национальным комитетам на голосование. Для их опубликования в качестве международных
стандартов требуется одобрение не менее 50% национальных комитетов IDF, принимающих участие в
голосовании.
Следует иметь в виду, что некоторые элементы настоящего международного стандарта могут быть
объектом патентных прав. IDF не несет ответственности за идентификацию какого-либо одного или
всех таких патентных прав.
Любое торговое название, использованное в этом документе, дается в качестве информации для
удобства пользователей и не является рекомендацией.
ISO 11816-1|IDF 155-1 был разработан Международной молочной федерацией (IDF) и Техническим
комитетом ISO/TC 34, Пищевые продукты,, Подкомитетом SC 5, Молоко и молочные продукты. Он
публикуется совместно IDF и ISO.
Вся работа была проведена Совместной проектной группой ISO-IDF по Определению активности
щелочной фосфатазы – флуориметрический метод Постоянного комитета по Аналитическим
методам для технологических добавок и индикаторов под эгидой руководителя этого проекта
госпожи Eileen Garry (США).
Это третье издание ISO 11816-1|IDF 155-1 отменяет и заменяет IDF 155-1:2006, который был
технически пересмотрено technically revised.
ISO 11816|IDF 155 состоит из следующих частей под общим названием Молоко и молочные продукты.
Определение активности щелочной фосфатазы:
— Часть 1. Флуориметрический метод для молока и молочных напитков
— Часть 2.Флуориметрический метод для сыра

© ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются v

МЕЖДУНАРОДНЫЙ СТАНДАРТ
IDF 155-1:2013(R)
)
Молоко и молочные продукты. Определение активности
щелочной фосфатазы.
Часть 1.
Флуориметрический метод для молока и молочных
напитков
1 Область применения
Эта часть ISO 11816|IDF 155 устанавливает флуориметрический метод для определения активности
щелочной фосфатазы (ALP, EC 3.1.3.1) в сыром и термообработанном цельном молоке, а также в
полужирном, обезжиренном и ароматизированном молоке. Данный метод применяется для молока
коров, овец и коз и для молочных напитков. Он также применим для сухого молока после
восстановления.
Применяемый прибор позволяет считывать активности вплоть до 7000 миллиединиц на литр (мЕ/л).
Если активность выше 7000 мЕ/л, образец разбавляют молоком, не содержащим щелочную
фосфатазу (7.1), чтобы получить уровень не выше 7000 мЕ/л.
2 Термины и определения
Применительно к настоящему документу используются следующие термины и определения.
2.1
активность щелочной фосфатазы (ALP)
alkaline phosphatase (ALP) activity
активность щелочной фосфатазы, присутствующей в продукте, определенная установленным методом
ПРИМЕЧАНИЕ Активность щелочной фосфатазы выражена в миллиединицах активности фермента на литр пробы (мЕ/л).
2.2
единица активности щелочной фосфатазы
unit of alkaline phosphatase activity
количество фермента щелочной фосфатазы, которое катализирует превращение 1 мкмоль субстрата в минуту
3 Принцип
Активность щелочной фосфатазы образца измеряется путем непрерывного флуориметрического
прямого кинетического анализа. В субстрате нефлуоресцентного ароматического монофосфорного
эфира, 2’-[2-бензотиазолил]-6’-гидроксибензотиазол фосфат, в присутствии любой щелочной
фосфатазы, образованной из этого образца, происходит гидролиз его фосфатного радикала,
производя сильно флуоресцирующий продукт. Флуориметрические измерения активности щелочной
фосфатазы (ALP) проводят при 38 °C в течение 3 минут, используя Флуорофос®. Сюда включена
преинкубация субстрата и образца с последующим многократным кинетическим считыванием скорости
реакции.
ПРИМЕЧАНИЕ Хотя испытание длится 3 мин, первая минута является равновесным периодом для
обеспечения температуры образца 38 °С. Измерения активности фактически начинаются со второй минуты и
продолжаются до конца третьей минуты (т.е. 2 мин).
IDF 155-1:2013(R)
4 Реактивы
Используются только реактивы признанной аналитической чистоты, если нет других указаний, и
дистиллированная или деминерализованная вода или вода аналогичной чистоты.
4.1 Субстрат Флуорофоса®, Субстрат Флуорофоса® в пробирках, каждая из которых содержит
144 мг порошка Флуорофоса®.
Это субстрат нефлуоресцентного ароматического монофосфорного эфира, 2'-[2-бензотиазолил]-6'-
гидроксибензотиазол фосфат (Флуорофос®). Субстрат Флуорофоса® остается стабильным в течение
двух лет от даты изготовления, если его хранить в закрытых пробирках при температуре от 2 °С до
8 °С; защищать от света.
4.2 Буферный раствор субстрата, буферный раствор диэтаноламина (DEA), c(DEA) = 2,4 мольl/л,
с pH 10,0, в пробирках емкостью 240 мл каждая. Буферный раствор субстрата остается стабильным в
течение двух лет с момента изготовления, если его хранить в закрытых пробирках при температуре от
2 °С до 8 °С; также его следует защищать от света.
4.3 Рабочий субстрат
Оставляют субстрат Флуорофоса® (4.1) и буферный раствор субстрата (4.2) до достижения комнатной
температуры. Добавляют содержимое одной пробирки с буферным раствором субстрата (240 мл) к
содержимому одной пробирки с субстратом Флуорофоса® (144 мг) (4.1) и хорошо перемешивают,
переворачивая в течение 3 мин для получения ~1,0 миллимолярного раствора (pH 10). Используют
бутылочное стекло для защиты от света.
Перед использованием полученный раствор выдерживают при комнатной температуре как минимум 30 мин.
Применяют A/D (аналого-цифровой) тест, описанный в 8.2, для проверки пригодности готового к
использованию рабочего субстрата. Не следует использовать рабочий субстрат, если получено
показание выше 1200 FLU (единицы флуоресценции) (8.2).
Рабочий субстрат остается стабильным в течение 60 дней, если он защищен от света и хранится при
температуре от 2 °С до 8 °С, или в течение 8 ч, если хранится при 38 °С.
ПРИМЕЧАНИЕ Полученный объем рабочего субстрата (240 мл) является достаточным приблизительно для
115 тестов.
4.4 Калибровочные растворы, Флуорожелтый®(FY) [2'-(2-бензотиазолил)-6'-гидроксибензотиазол]
в буферном растворе субстрата (4.2).
Калибровочные растворы остаются стабильными в течение 18 месяцев с момента изготовления, если
их хранить в закрытых пробирках при температуре от 2 °C до 8 °C. Для получения оптимальных
результатов их следует плавно перемешать перед использованием.
4.4.1 Калибровочный раствор A, содержащий 0 мкмоль/л Флуорожелтого®.
−3
4.4.2 Калибровочный раствор B, содержащий 17,24 × 10 мкмоль/л Флуорожелтого ®.

Реактивы, установленные в 4.1 до 4.5, и аппаратура, установленная в 5.1 до 5.4 (кроме 5.3.3), входят в
испытательную систему Флуорофос, которая является торговым названием продукта, поставляемого фирмой
Advanced Instruments, Inc., Two Technology Way, Norwood, Massachusetts 02062, USA. Изготовитель может
изменять конфигурации упаковок, поставляемых с испытательной системой Флуорофос. Пользователь должен
обращаться к инструкциям изготовителя для приготовления реактивов, если они отличаются от реактивов,
установленных здесь. Флуорофос и Флуорожелтый являются торговыми марками фирмы Advanced Instruments, Inc.
Эта информация дается только для удобства пользователей данного документа и не является рекомендацией ISO
или IDF для этих продуктов. Можно использовать аналогичные продукты, если есть данные, что они дадут такие
же результаты.
2 © ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются

IDF 155-1:2013(R)
−3
4.4.3 Калибровочный раствор C, содержащий 34,48 × 10 мкмоль/л Флуорожелтого ®.
−3
4.5 Раствор для ежедневного контроля прибора, содержащий 34,48 x10 мкмоль/л
Флуорожелтого ®.
Раствор для ежедневного контроля прибора остается стабильным в течение 18 месяцев с момента
изготовления, если его хранить в закрытых пробирках при температуре от 2 °C до 8 °C. Перед
использованием его следует плавно перемешать для получения оптимальных результатов.
5 Аппаратура
Обычное лабораторное оборудование и, в частности, следующее.
5.1 Фильтровальный флуориметр, с термостатически регулируемым держателем кюветы при
поддержании температуры (38 ± 1) °С и правоугольной оптической системой, допускающей
возбуждение при длине волны 440 нм и испускание при 520-560 нм (например, прибор Флуорофос®).
5.2 Кюветы, сменные, из нефлуоресцентного стекла.
5.3 Пипетки
5.3.1 Дозатор фиксированного объема, обеспечивающий дозирование по 2,0 млl.
5.3.2 Пипетка вытеснительного типа или нагнетательная, вместимостью 0,075 мл.
Необходимо строго соблюдать инструкции по технике пипетирования, так как оно является особенно
важным для получения точных результатов. Перед использованием необходимо удостовериться, что
герметичность поршня пипетки обеспечена.
5.3.3 Пипетки, вместимостью 2 мл и 3 мл.
5.4 Инкубаторный блок, поддерживающий температуру 38 °C ± 1 °C, подходящий для помещения
кювет.
5.5 Подходящая лабораторная пленка парафильм.
5.6 Вихревая мешалка.
5.7 Водяная баня, поддерживающая температуру 63 °C ± 1 °C и 95 °C ± 1 °C.
5.8 Мерные колбы с одной меткой, вместимостью 100 мл.
6 Отбор проб
Отбор проб не является частью метода, установленного в этой части ISO 11816|IDF 155.
рекомендованный метод отбора проб дан в ISO 707|IDF 50.
В лабораторию следует отправлять репрезентативную пробу. Она не должна быть повреждена или
изменена во время транспортировки или хранения.
7 Приготовления
7.1 Молоко, не содержащее щелочной фосфатазы
Приготовляют молоко без фосфатазы того типа, который будет испытываться, тщательно дозируя
© ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются 3

IDF 155-1:2013(R)
требуемую порцию молока в пробирку или подходящий контейнер, следя, чтобы оно не касалось краев
или стенок контейнера.
о
Помещают пробирку или контейнер с порцией молока в водяную баню (5.7.), установленную на 95 С.
о
Предварительно нагревают эту порцию молока до 95 С и затем продолжают еѐ подогрев в течение 5
мин при этой температуре. Температуру контролируют термометром или термисторным зондом,
о
помещенным в центр пробирки или контейнера. Когда температура молока достигает 95 С, сразу же
начинают 5-мин период подогрева. После периода нагрева всю порцию быстро охлаждают.
Обработанную таким образом порцию молока проверяют для гарантии, что активность щелочной
фосфатазы меньше 10 мЕ/л.
7.2 Приготовление испытательного образца
7.2.1 Общие вопросы
Перед использованием все испытательные образцы тщательно перемешивают
ПРИМЕЧАНИЕ В предварительном нагреве испытательных образцов обычно нет необходимости.
7.2.2 Пастеризованные испытательные образцы
Пастеризованные образцы используют в состоянии после поставки, в требуемых количествах.
7.2.3 Разбавление испытательных образцов с высокими значениями ALP
Для приготовления разбавленных образцов используют молоко без фосфатазы (7.1), чтобы их уровни
активности щелочной фосфатазы ALP соответствовали аналитическому диапазону испытания ( 7000
мЕ/л). Разбавленные растворы хорошо перемешивают.
8 Процедура
8.1 Верификация рабочих характеристик прибора
8.1.1 Общие вопросы
Важно, чтобы до проведения испытания образцов была проведена проверка рабочих характеристик прибора
на отклонение, рассеянное световое излучение и стабильность. При работе с фильтровальным
флуориметром следует соблюдать принципы надлежащей лабораторной практики (5.1).
Контрольные тесты качества включают
a) ежедневный тест A/D, используемый для проверки правильного функционирования оборудования,
b) ежедневный контрольный тест прибора с использованием ежедневного контрольного раствора в
приборе (4.5) для мониторинга любого электронного или оптического отклонения флуориметра, и
c) использование внешних положительных, отрицательных и нормальных контрольных проверок,
описанных в 8.1.3, которые рекомендуются для ежедневного мониторинга параметров
прецизионности прибора.
4 © ISO и IDF 2013 – Все права сохраняются

IDF 155-1:2013(R)
8.1.2 Тесты A/D
8.1.2.1 При использовании прибора Флуорофос® тесты A/D проводят ежедневно перед началом
испытания.
8.1.2.2 Получают доступ к тесту A/D через меню “SETUP”. Нажимают клавишу “SETUP”, затем
выбирают пункт меню “A/D Test”, нажимая or . При пустом держателе кюветы нажимают “START”.
Ждут, когда цифры, появляющиеся на экране дисплея, стабилизируются. Показание дисплея должно
быть 302 4. Если показание будет вне этого диапазона, очищают фильтры возбуждения и испускания
и повторяют тест A/D.
8.1.2.3 С помощью дозатора переносят 2,0 мл раствора для ежедневного контроля прибора
(4.5) в маркированную кювету. Помещают кювету в инкубаторный блок (5.4), установленный на 38°C,
на 20 мин. Вставляют предварительно нагретую кювету в держатель кюветы. Закрывают крышкой.
Когда показание дисплея стабильно, записывают отображаемое значение, которое должно быть 602
12. Если значение вне этого диапазона, используют маленькую отвертку из поставки и медленно
поворачивают винт потенциометра с левой стороны прибора по часовой стрелке или против, как
необходимо, пока показание дисплея не будет 602. Оставляют на 15 мин для уравновешивания чисел.
8.1.3 Контрольные тесты
Выполняют позитивные, негативные и PhosphaCheck-N (контроль фосфатазы) кон
...