ISO 4831:2006
(Main)Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for the detection and enumeration of coliforms — Most probable number technique
Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for the detection and enumeration of coliforms — Most probable number technique
ISO 4831:2006 gives general guidelines for the detection and the enumeration of coliforms. It is applicable to products intended for human consumption and for the feeding of animals, and to environmental samples in the area of food production and food handling. Enumeration is carried out by calculation of the most probable number (MPN) after incubation in a liquid medium at 30 °C or 37 °C. This enumeration method is applicable when the number sought is expected to be in the range 1 to 100 per millilitre or per gram of test sample.
Microbiologie des aliments — Méthode horizontale pour la recherche et le dénombrement des coliformes — Technique du nombre le plus probable
L'ISO 4831:2006 donne des directives générales pour la recherche et le dénombrement des coliformes. Elle s'applique à des produits destinés à la consommation humaine et à l'alimentation des animaux, et à des échantillons environnementaux au voisinage de la production et de la manipulation des aliments. Le dénombrement est réalisé par calcul du nombre le plus probable (NPP) après incubation à 30 °C ou à 37 °C en milieu liquide. La méthode de dénombrement est applicable lorsque le nombre attendu est compris entre 1 et 100 par millilitre ou par gramme d'échantillon soumis à l'essai.
General Information
Relations
Buy Standard
Standards Content (Sample)
МЕЖДУНАРОДНЫЙ ISO
СТАНДАРТ 4831
Третье издание
2006-08-15
Микробиология пищевых продуктов и
кормов для животных.
Горизонтальный метод обнаружения
и подсчета колиформных бактерий.
Методика наиболее вероятного числа
Microbiology of food and animal feeding — Horizontal method for the
detection and enumeration of coliforms — Most probable number
technique
Ответственность за подготовку русской версии несёт GOST R
(Российская Федерация) в соответствии со статьёй 18.1 Устава ISO
Ссылочный номер
ISO 4831:2006(R)
©
ISO 2006
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 4831:2006(R)
Отказ от ответственности при работе в PDF
Настоящий файл PDF может содержать интегрированные шрифты. В соответствии с условиями лицензирования, принятыми
фирмой Adobe, этот файл можно распечатать или смотреть на экране, но его нельзя изменить, пока не будет получена
лицензия на установку интегрированных шрифтов в компьютере, на котором ведется редактирование. В случае загрузки
настоящего файла заинтересованные стороны принимают на себя ответственность за соблюдение лицензионных условий
фирмы Adobe. Центральный секретариат ISO не несет никакой ответственности в этом отношении.
Adobe - торговый знак Adobe Systems Incorporated.
Подробности, относящиеся к программным продуктам, использованным для создания настоящего файла PDF, можно найти в
рубрике General Info файла; параметры создания PDF оптимизированы для печати. Были приняты во внимание все меры
предосторожности с тем, чтобы обеспечить пригодность настоящего файла для использования комитетами – членами ISO. В
редких случаях возникновения проблемы, связанной со сказанным выше, просим информировать Центральный секретариат
по адресу, приведенному ниже.
ДОКУМЕНТ ЗАЩИЩЕН АВТОРСКИМ ПРАВОМ
© ISO 2006
Все права сохраняются. Если не указано иное, никакую часть настоящей публикации нельзя копировать или использовать в
какой-либо форме или каким-либо электронным или механическим способом, включая фотокопии и микрофильмы, без
предварительного письменного согласия ISO по адресу ниже или членов ISO в стране регистрации пребывания.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Опубликовано в Швейцарии
ii © ISO 2006 – Все права сохраняются
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 4831:2006(R)
Предисловие
Международная организация по стандартизации (ISO) является всемирной федерацией национальных
организаций по стандартизации (комитетов-членов ISO). Разработка международных стандартов
обычно осуществляется техническими комитетами ISO. Каждый комитет-член, заинтересованный в
деятельности, для которой был создан технический комитет, имеет право быть представленным в этом
комитете. Международные правительственные и неправительственные организации, имеющие связи с
ISO, также принимают участие в работах. Что касается стандартизации в области электротехники, то
ISO работает в тесном сотрудничестве с Международной электротехнической комиссией (IEC).
Проекты международных стандартов разрабатываются в соответствии с правилами Директив ISO/IEC,
Часть 2.
Основной задачей технических комитетов является подготовка международных стандартов. Проекты
международных стандартов, принятые техническими комитетами, рассылаются комитетам-членам на
голосование. Их опубликование в качестве международных стандартов требует одобрения не менее
75 % комитетов-членов, принимающих участие в голосовании.
Следует иметь в виду, что некоторые элементы настоящего международного стандарта могут быть
объектом патентных прав. Международная организация по стандартизации не может нести
ответственность за идентификацию какого-либо одного или всех патентных прав.
Международный стандарт ISO 4831 подготовил Технический комитет ISO/TC 34, Пищевые продукты,
Подкомитет SC 9, Микробиология.
Это третье издание ISO 4831 отменяет и замещает ISO 4831:1991 и ISO 5541-2:1986. Разделы 4, 9 и 10
стандарта ISO 4831:1991 технически пересмотрены. Основные изменения заключаются в следующем:
⎯ альтернативная процедура выращивания бактерий при 35 °C исключена;
⎯ рассматривается обнаружение и подсчет колиформных бактерий (Разделы 4 и 9);
⎯ описание способов подсчета наиболее вероятного числа (MPN) и колоний (CCT) микроорганизмов
пропущено (Раздел 10), а ссылка дается на ISO 7218.
Принимая во внимание характер изменений в предыдущем издании настоящего международного
стандарта, считается, что упомянутая выше ревизия не затрагивает подтверждение правильности
альтернативных методов на основе требований стандарта ISO 4831:1991.
© ISO 2006 – Все права сохраняются iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 4831:2006(R)
Введение
Так как существует большое разнообразие пищевых продуктов и кормов для животных, то
горизонтальный метод может не подходить во всех подробностях для определенных продуктов. В этом
случае могут быть использованы другие методы, характерные для таких продуктов, если абсолютно
необходимо по обоснованным техническим причинам. Тем не менее, следует предпринимать всякую
попытку, чтобы применить горизонтальный метод по мере возможности.
Когда настоящий международный стандарт будет пересматриваться в очередной раз, то будет
принята во внимание вся информация, имеющаяся в распоряжении к тому времени и касающаяся
меры соблюдения этого горизонтального метода и причин отклонений от него в случае испытания
определенных продуктов.
Невозможно осуществить немедленную гармонизацию методов проведения испытаний. Для
определенных групп продуктов могут уже существовать международные и/или национальные
стандарты, которые не согласуются с настоящим горизонтальным методом. Можно надеяться, что в
ходе ревизии таких стандартов будут внесены изменения, чтобы соответствовать требованиям
настоящего международного стандарта, так что со временем останутся только те отклонения от
настоящего горизонтального метода, которые необходимы по хорошо обоснованным техническим
причинам.
Метод, изложенный в настоящем международном стандарте, является менее точным по сравнению с
описанием в ISO 4832 [1], но он дает возможность проводить микробиологическое исследование на
большей порции образца, позволяя тем самым обнаруживать большее число колиформных бактерий
на грамм или миллилитр продукта. Более того, так как определение “coliforms” (бактерий группы
кишечной палочки), принятое в двух документах, является разным, то пересчитанные микроорганизмы
не обязательно есть одно и тоже.
Метод, который предполагается выбрать для какого-либо частного продукта, рекомендуется
специфицировать в международном стандарте, имеющем отношение к этому продукту.
Если судить о практическом применении метода испытаний, то определение “ coliforms ” в разделе 3,
которое используется в качестве базиса процедуры, не является обязательно идентичным
соответствующим определениям в других опубликованных текстах. Количественное соотношение
штаммов микроорганизмов, показанных в других опубликованных текстах как “ колиформы ” (включая
кишечную палочку Escherichia coli), является неадекватным, чтобы выделялось достаточно газа для
обнаружения микроорганизмов с помощью трубки Дарема (например, “анаэрогенные штаммы”).
Поэтому метод, изложенный в настоящем международном стандарте, не позволяет обнаруживать все
штаммы микроорганизмов, на которые в других публикациях ссылаются как на “(предполагаемые)
колиформы” (например, определенные штаммы Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella) (см. ссылку на [2]).
iv © ISO 2006 – Все права сохраняются
---------------------- Page: 4 ----------------------
МЕЖДУНАРОДНЫЙ СТАНДАРТ ISO 4831:2006(R)
Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных.
Горизонтальный метод обнаружения и подсчета колиформных
бактерий. Методика наиболее вероятного числа
1 Область применения
Настоящий международный стандарт дает руководящие указания для обнаружения и установления
количества колиформных бактерий, т.е. бактерий группы кишечной палочки – coliforms. Он
применяется к
⎯ продуктам, предназначенным для потребления человеком и кормления животных, и
⎯ образцам среды окружения в производственных зонах пищевой промышленности и местах
обращения с продуктами.
Установление количества осуществляется путем вычисления наиболее вероятного числа (MPN)
бактерий после инкубации в жидкой среде при температуре 30 °C или 37 °C.
ПРИМЕЧАНИЕ Значение температуры подлежит согласованию между заинтересованными сторонами. Для
молока и молочных продуктов температура инкубации составляет 30 °C.
Настоящий метод установления количества микроорганизмов применяется в случае, когда ожидается,
что искомое число должно быть в диапазоне от 1 до 100 на миллилитр или грамм образца для
испытаний.
Ограничение в применении настоящего международного стандарта продиктовано восприимчивостью
метода к большой степени изменчивости. Информация в разделе 11 дает руководство по возможности
применения метода и интерпретации результатов.
2 Нормативные ссылки
Следующие нормативные документы являются обязательными для применения с настоящим
международным стандартом. Для жестких ссылок применяются только указанное по тексту издание.
Для плавающих ссылок необходимо использовать самое последнее издание нормативного ссылочного
документа (включая любые изменения).
ISO 6887 (все части), Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Подготовка
образцов для испытаний, исходной суспензии и десятикратных разбавлений для
микробиологического исследования
ISO 7218, Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Общие требования и
руководство для микробиологического исследования
ISO 8261, Молоко и молочные продукты. Общие руководящие указания по приготовлению проб для
испытаний, начальных суспензий и десятичных разбавлений для микробиологических исследований
ISO/TS 11133-1, Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Руководящие указания
по подготовке и производству культурных сред. Часть 1. Общие руководящие указания по
обеспечению качества приготовления культурных сред в лаборатории
ISO/TS 11133-2:2003, Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Руководящие
указания по подготовке и производству культурных сред. Часть 2. Практические руководящие
указания по эксплуатационным испытаниям культурных сред
© ISO 2006 – Все права сохраняются 1
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 4831:2006(R)
3 Термины и определения
В настоящем документе используются следующие термины и определения.
3.1
колиформные бактерии, coliforms
бактерии, которые при заданной температуре (т.е. 30 °C или 37 °C, по договоренности) вызывают
ферментацию лактозы с выделением газа в условиях проведения испытания, определенных в
настоящем международном стандарте
3.2
обнаружение колиформных бактерий, detection of coliforms
установление присутствия или отсутствия бактерий группы кишечной палочки в определенном
количестве продукта, когда испытания проводятся в соответствии с методом, заданным в настоящем
международном стандарте
3.3
подсчет колиформных бактерий, enumeration of coliforms
наиболее вероятное число колиформных бактерий, обнаруженных на миллилитр или грамм образца
для испытаний, когда испытание проводится по методу, заданному в этом международном стандарте
4 Принцип
4.1 Обнаружение колиформных бактерий
4.1.1 В пробирку с селективно обогащенной питательной средой вводится затравка испытательной
порции и осуществляется выращивание микроорганизмов при температуре 30 °C или 37 °C (по
договоренности) в течение 24 ч или 48 ч.
4.1.2 В пробирку с подтверждающей средой вводится затравка, полученная согласно 4.1.1, когда
замечено помутнение и/или образование газа. Затем в этой пробирке осуществляется выращивание
микроорганизмов при температуре 30 °C или 37 °C (по договоренности) в течение 24 ч или 48 ч.
4.1.3 Присутствие колиформных бактерий подтверждается в случае, если помутнение и/или
образование газа замечено после исследования пробирки, полученной согласно 4.1.2
4.2 Установление количества методом наиболее вероятного числа
4.2.1 В три пробирки с селективно обогащенной жидкой питательной средой двойной крепости
вводится затравка заданного количества испытательного образца, если исходный продукт является
жидким, или заданного количества исходной суспензии в случае испытания других продуктов.
4.2.2 В три пробирки с селективно обогащенной жидкой питательной средой обычной крепости
вводится затравка заданного количества испытательного образца, если исходный продукт является
жидким, или заданного количества исходной суспензии в случае испытания других продуктов. Затем, в
таких же условиях, в дополнительные пробирки с питательной средой обычной крепости вводятся
десятичные разбавления испытательного образца или исходной суспензии.
4.2.3 В пробирках, содержащих селективно обогащенную питательную среду двойной крепости,
выращиваются микроорганизмы при температуре 30 °C или 37 °C (по договоренности) в течение 24 ч,
а в пробирках, содержащих селективно обогащенную питательную среду обычной крепости,
выращиваются микроорганизмы в течение 24 ч или 48 ч и после этого периода эти пробирки
исследуются на образование пузырьков газа или помутнение, предотвращающее обнаружение
формирования газа.
4.2.4 В ряд пробирок с подтверждающей питательной средой вводятся затравки культур из пробирок
с селективно обогащенной питательной средой двойной крепости и затравки культур из пробирок с
2 © ISO 2006 – Все
...
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 4831
Third edition
2006-08-15
Microbiology of food and animal feeding
stuffs — Horizontal method for the
detection and enumeration of
coliforms — Most probable number
technique
Microbiologie des aliments — Méthode horizontale pour la recherche et
le dénombrement des coliformes — Technique du nombre le plus
probable
Reference number
ISO 4831:2006(E)
©
ISO 2006
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 4831:2006(E)
PDF disclaimer
This PDF file may contain embedded typefaces. In accordance with Adobe's licensing policy, this file may be printed or viewed but
shall not be edited unless the typefaces which are embedded are licensed to and installed on the computer performing the editing. In
downloading this file, parties accept therein the responsibility of not infringing Adobe's licensing policy. The ISO Central Secretariat
accepts no liability in this area.
Adobe is a trademark of Adobe Systems Incorporated.
Details of the software products used to create this PDF file can be found in the General Info relative to the file; the PDF-creation
parameters were optimized for printing. Every care has been taken to ensure that the file is suitable for use by ISO member bodies. In
the unlikely event that a problem relating to it is found, please inform the Central Secretariat at the address given below.
© ISO 2006
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means,
electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without permission in writing from either ISO at the address below or
ISO's member body in the country of the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2006 – All rights reserved
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 4831:2006(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 4831 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 9,
Microbiology.
This third edition of ISO 4831 cancels and replaces ISO 4831:1991 and ISO 5541-2:1986. Clauses 4, 9
and 10 of ISO 4831:1991 have been technically revised. The main changes are as follows:
⎯ the alternative procedure of incubation at 35 °C has been deleted;
⎯ detection and enumeration of coliforms are covered (Clauses 4 and 9);
⎯ description of the MPN and the CCT have been omitted (Clause 10) and reference is given to ISO 7218.
Considering the nature of the changes to the previous edition of this International Standard, it is considered
that the validation of alternative methods based on ISO 4831:1991 is not affected by this revision.
© ISO 2006 – All rights reserved iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 4831:2006(E)
Introduction
Because of the large variety of food and feed products, this horizontal method may not be appropriate in every
detail for certain products. In this case, different methods, which are specific to these products, may be used if
absolutely necessary for justified technical reasons. Nevertheless, every attempt should be made to apply this
horizontal method as far as possible.
When this International Standard is next reviewed, account will be taken of all information then available
regarding the extent to which this horizontal method has been followed and the reasons for deviations from
this method in the case of particular products.
The harmonization of test methods cannot be immediate and, for certain groups of products, International
Standards and/or national standards may already exist that do not comply with this horizontal method. It is
hoped that when such standards are reviewed they will be changed to comply with this International Standard
so that eventually the only remaining departures from this horizontal method will be those necessary for
well-established technical reasons.
[1]
The technique described in this International Standard is less precise than that described in ISO 4832 , but
allows a microbiological examination to be carried out on a larger test portion, thus permitting a lower number
of coliforms per gram or per millilitre of product to be detected. Moreover, since the definition of “coliforms”
adopted in the two documents is different, the microorganisms enumerated are not necessarily the same.
For any particular product, the method to be chosen will be specified in the International Standard dealing with
that product.
For the purposes of a practicable test method, the definition of “coliforms” given in Clause 3 and used as the
basis for the procedure is not necessarily identical to corresponding definitions given in other published texts.
A proportion of strains of the microorganisms described in other published texts as “coliforms” (including
Escherichia coli) fail to produce enough gas to be detectable by use of a Durham tube (i.e. “anaerogenic
strains”). Therefore the method described in this International Standard will not detect all strains of the
microorganisms referred to in other publications as “(presumptive) coliforms” (e.g. certain strains of
Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella) (see Reference [2]).
iv © ISO 2006 – All rights reserved
---------------------- Page: 4 ----------------------
INTERNATIONAL STANDARD ISO 4831:2006(E)
Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal
method for the detection and enumeration of coliforms — Most
probable number technique
1 Scope
This International Standard gives general guidelines for the detection and the enumeration of coliforms. It is
applicable to
⎯ products intended for human consumption and for the feeding of animals, and
⎯ environmental samples in the area of food production and food handling.
Enumeration is carried out by calculation of the most probable number (MPN) after incubation in a liquid
medium at 30 °C or 37 °C.
NOTE The temperature is subject to agreement between the parties concerned. In the case of milk and milk products,
the temperature of incubation is 30 °C.
This enumeration method is applicable when the number sought is expected to be in the range 1 to 100 per
millilitre or per gram of test sample.
A limitation on the applicability of this International Standard is imposed by the susceptibility of the method to
a large degree of variability. The information given in Clause 11 provides guidance on the applicability of the
method and on the interpretation of the results.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced
document (including any amendments) applies.
ISO 6887 (all parts), Microbiology of food and animal feeding stuffs — Preparation of test samples, initial
suspension and decimal dilutions for microbiological examination
ISO 7218, Microbiology of food and animal feeding stuffs — General requirements and guidance for
microbiological examinations
ISO 8261, Milk and milk products — General guidance for the preparation of test samples, initial suspensions
and decimal dilutions for microbiological examination
ISO/TS 11133-1, Microbiology of food and animal feeding stuffs — Guidelines on preparation and production
of culture media — Part 1: General guidelines on quality assurance for the preparation of culture media in the
laboratory
ISO/TS 11133-2:2003, Microbiology of food and animal feeding stuffs — Guidelines on preparation and
production of culture media — Part 2: Practical guidelines on performance testing of culture media
© ISO 2006 – All rights reserved 1
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 4831:2006(E)
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
coliforms
bacteria which, at the specified temperature (i.e. 30 °C or 37 °C, as agreed) cause fermentation of lactose
with the production of gas under the test conditions specified in this International Standard
3.2
detection of coliforms
determination of the presence or absence of these bacteria, in a particular quantity of product, when tests are
carried out in accordance with the method specified in this International Standard
3.3
enumeration of coliforms
most probable number of coliforms found per millilitre or per gram of the test sample, when the test is carried
out in accordance with the method specified in this International Standard
4 Principle
4.1 Detection of coliforms
4.1.1 A tube of selective enrichment broth is inoculated with the test portion and incubated at 30 °C or 37 °C
(as agreed) for 24 h or 48 h.
4.1.2 A tube of confirmation medium is inoculated from the tube obtained in 4.1.1 when opacity and/or gas
formation has been noted, and incubated at 30 °C or 37 °C (as agreed) for 24 h or 48 h.
4.1.3 The presence of coliforms is confirmed in the case that opacity and gas formation have been noted
after examination of the tube obtained in 4.1.2.
4.2 Enumeration by the MPN technique
4.2.1 Three tubes of double-strength liquid selective enrichment medium are inoculated with a specified
quantity of the test sample if the initial product is liquid, or with a specified quantity of an initial suspension in
the case of other products.
4.2.2 Three tubes of single-strength liquid selective enrichment medium are inoculated with a specified
quantity of the test sample if the initial product is liquid, or with a specified quantity of an initial suspension in
the case of other products. Then, under the same conditions, further tubes of single-strength medium are
inoculated with decimal dilutions of the test sample or of the initial suspension.
4.2.3 The tubes containing double-strength selective enrichment medium are incubated at 30 °C or 37 °C
(as agreed) for 24 h, and the tubes containing single-strength medium are incubated for 24 h or 48 h, after
which period these tubes are examined for gas formation or opacity preventing the detection of gas formation.
4.2.4 A series of tubes of the confirmation medium are inoculated with the cultures from the tubes of
double-strength selective enrichment medium, and with the cultures from the tubes
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 4831
Troisième édition
2006-08-15
Microbiologie des aliments — Méthode
horizontale pour la recherche et le
dénombrement des coliformes —
Technique du nombre le plus probable
Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for
the detection and enumeration of coliforms — Most probable number
technique
Numéro de référence
ISO 4831:2006(F)
©
ISO 2006
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 4831:2006(F)
PDF – Exonération de responsabilité
Le présent fichier PDF peut contenir des polices de caractères intégrées. Conformément aux conditions de licence d'Adobe, ce fichier
peut être imprimé ou visualisé, mais ne doit pas être modifié à moins que l'ordinateur employé à cet effet ne bénéficie d'une licence
autorisant l'utilisation de ces polices et que celles-ci y soient installées. Lors du téléchargement de ce fichier, les parties concernées
acceptent de fait la responsabilité de ne pas enfreindre les conditions de licence d'Adobe. Le Secrétariat central de l'ISO décline toute
responsabilité en la matière.
Adobe est une marque déposée d'Adobe Systems Incorporated.
Les détails relatifs aux produits logiciels utilisés pour la création du présent fichier PDF sont disponibles dans la rubrique General Info
du fichier; les paramètres de création PDF ont été optimisés pour l'impression. Toutes les mesures ont été prises pour garantir
l'exploitation de ce fichier par les comités membres de l'ISO. Dans le cas peu probable où surviendrait un problème d'utilisation,
veuillez en informer le Secrétariat central à l'adresse donnée ci-dessous.
© ISO 2006
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée sous
quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l'accord écrit
de l'ISO à l'adresse ci-après ou du comité membre de l'ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax. + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2006 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 4831:2006(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 4831 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 9,
Microbiologie.
Cette troisième édition de l'ISO 4831 annule et remplace l'ISO 4831:1991 et l'ISO 5541-2:1986. Les Articles 4,
9 et 10 de l'ISO 4831:1991 ont fait l'objet d'une révision technique. Les principales modifications sont les
suivantes:
⎯ la technique alternative d’incubation à 35 °C a été supprimée;
⎯ la méthode de recherche et la méthode de dénombrement des coliformes sont couvertes (Articles 4 et 9);
⎯ la méthode de calcul du nombre le plus probable et de comptage des colonies a été supprimée
(Article 10) et est référencée dans l'ISO 7218.
Étant donné la nature des modifications apportées à l'édition précédente de la présente Norme internationale,
il est considéré que la validation des méthodes alternatives basée sur l'ISO 4831:1991 n'est pas affectée par
la présente révision.
© ISO 2006 – Tous droits réservés iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 4831:2006(F)
Introduction
En raison de la grande variété des produits alimentaires et des produits pour animaux, la méthode horizontale
peut ne pas être totalement appropriée pour certains produits. Dans ce cas, des méthodes différentes
spécifiques à ces produits peuvent être utilisées si cela est absolument nécessaire pour des raisons
techniques justifiées. Néanmoins, tous les efforts doivent être faits pour appliquer cette méthode horizontale
autant que faire se peut.
Lorsque la présente Norme Internationale sera réexaminée, il sera tenu compte de tous les renseignements
disponibles à ce moment là, à savoir dans quelle mesure cette méthode horizontale a été suivie et les raisons
pour lesquelles il aura été nécessaire d'y déroger dans le cas de produits particuliers.
L'harmonisation des méthodes d'essai ne peut pas être immédiate et, pour certains groupes de produits, des
Normes internationales et/ou des normes nationales qui ne sont pas en conformité avec cette méthode
horizontale peuvent exister. Il est souhaitable que, lorsqu'elles viendront en révision, elles soient alignées sur
la présente Norme internationale pour que, finalement, les seules divergences restantes soient celles qui sont
nécessaires pour des raisons techniques bien établies.
La technique décrite dans la présente Norme internationale est moins précise que celle décrite dans
[1]
ISO 4832 , mais elle permet d'effectuer un examen microbiologique sur une prise d'essai plus importante et,
par conséquent, de détecter un plus petit nombre de coliformes par gramme ou par millilitre de produit.
D'autre part, le définition des «coliformes» adoptée dans les deux documents étant différente, on ne
dénombre pas nécessairement les mêmes micro-organismes.
Pour chaque produit particulier, le choix de la technique sera précisé dans la Norme Internationale concernant
ce produit.
Pour les besoins d'une méthode d'essai efficace, la définition des «coliformes» donnée dans l'Article 3 et
servant de base à la technique n'est pas nécessairement identique aux définitions correspondantes données
dans d'autres textes publiés Une certaine proportion de souches des micro-organismes désignés sous le nom
de «coliformes» (y compris les Escherichia coli) dans d'autres textes publiés, ne produisent pas suffisamment
de gaz pour pouvoir être décelées au moyen des cloches de Durham (c'est-à-dire des souches anaérogènes).
C'est pourquoi la technique décrite dans la présente Norme Internationale ne détectera pas la totalité des
souches de micro-organismes désignés dans d'autres publications, sous le nom de «coliformes (présumés)»
(par exemple certaines souches de Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella) (Voir Référence [2]).
iv © ISO 2006 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 4 ----------------------
NORME INTERNATIONALE ISO 4831:2006(F)
Microbiologie des aliments — Méthode horizontale pour la
recherche et le dénombrement des coliformes — Technique
du nombre le plus probable
1 Domaine d'application
La présente Norme internationale donne des directives générales pour la recherche et le dénombrement des
coliformes. La présente Norme internationale s'applique à
⎯ des produits destinés à la consommation humaine et à l'alimentation des animaux, et
⎯ des échantillons environnementaux au voisinage de la production et de la manipulation des aliments.
Le dénombrement est réalisé par calcul du nombre le plus probable (NPP) après incubation à 30 °C ou à
37 °C en milieu liquide.
NOTE Cette température faisant l'objet d'un accord entre les parties concernées. Dans le cas du lait et des produits
laitiers, la température d'incubation est 30 °C.
La méthode de dénombrement est applicable lorsque le nombre attendu est compris entre 1 et 100 par
millilitre ou par gramme d'échantillon soumis à l'essai.
Des limites sont imposées aux possibilités d'application de la présente Norme internationale, du fait que cette
méthode est sujette à de grandes variations. Les informations données dans l'Article 11 donnent des
indications sur l'applicabilité de la méthode et sur l'interprétation des résultats.
2 Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l'application du présent document. Pour les
références datées, seule l'édition citée s'applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document de référence s'applique (y compris les éventuels amendements).
ISO 6887 (toutes les parties), Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons, de la suspension
mère et des dilutions décimales en vue de l'examen microbiologique
ISO 7218, Microbiologie des aliments — Recommandations et règles générales pour les examens
microbiologiques
ISO 8261, Lait et produits laitiers — Lignes directrices générales pour la préparation des échantillons pour
essai, de la suspension mère et des dilutions décimales en vue de l'examen microbiologique
ISO/TS 11133-1, Microbiologie des aliments — Guide pour la préparation et la production des milieux de
culture — Partie 1: Guide général pour l'assurance de la qualité pour la préparation des milieux de culture en
laboratoire
ISO/TS 11133-2:2003, Microbiologie des aliments — Guide pour la préparation et la production des milieux de
culture — Partie 2: Guide général pour les essais de performance des milieux de culture
© ISO 2006 – Tous droits réservés 1
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 4831:2006(F)
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s'appliquent.
3.1
coliformes
bactéries qui, à la température spécifiée (c'est-à-dire 30 °C ou 37 °C, selon accord), fermentent le lactose
avec production de gaz, lorsque l'essai est effectué dans les conditions spécifiées dans la présente Norme
internationale
3.2
recherche des coliformes
mise en évidence de la présence ou de l'absence de ces bactéries, dans une certaine quantité de produit,
lorsque les essais sont réalisés en accord avec la méthode spécifique de la présente Norme internationale
3.3
dénombrement des coliformes
nombre le plus probable de coliformes trouvés par millilitre ou par gramme de l'échantillon pour essai, lorsque
les essais sont réalisés en accord avec la méthode spécifique de la présente Norme internationale
4 Principe
4.1 Recherche des coliformes
4.1.1 Ensemencement de la prise d'essai dans un tube de bouillon d'enrichissement sélectif, puis
incubation à 30 °C ou 37 °C (selon accord des parties) pendant 24 h ou 48 h.
4.1.2 Ensemencement d'un milieu de confirmation à partir de la culture obtenue en 4.1.1 quand un trouble
et/ou du gaz apparaissent, puis incubation à 30 °C ou 37 °C (selon accord des parties) pendant 24 h ou 48 h.
4.1.3 La présence de coliformes est confirmée dans le cas où un trouble ou la formation de gaz
apparaissent dans les tubes obtenus en 4.1.2
4.2 Dénombrement par la technique du NPP
4.2.1 Ensemencement de trois tubes de milieu d'enrichissement sélectif liquide double concentration avec
une quantité déterminée de l'échantillon pour essai, si le produit initial est liquide, ou avec une quantité
déterminée de suspension mère dans le cas d'autres produits.
4.2.2 Ensemencement de trois tubes de milieu d'enrichissement sélectif liquide simple concentration avec
une quantité déterminée de l'échantillon pour essai, si le produit initial est liquide, ou avec une quantité
déterminée de suspension mère dans le cas d'autres produits. Puis, dans les mêmes conditions,
ensemencement des tubes de milieu simple concentration suivants avec les dilutions décimales obtenues à
partir de l'échantillon pour essai ou de la suspension mère.
4.2.3 Incubation à 30 °C ou 37 °C (selon accord) pendant 24 h des tubes de milieu d'enrichissement
sélectif double concentration et pendant 24 h ou 48 h, des tubes de milieu simple concentration et examen de
ces tubes pour déterminer la formation éventuelle de gaz ou d'une opacité empêchant la détection de
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.