ISO 3496:1978

Meat and meat products — Determination of L(-)- hydroxyproline content (Reference method)

Viande et produits à base de viande — Détermination de la teneur en L(-)-hydroxyproline (Méthode de référence)

General Information

• Status: Withdrawn
• Publication Date: 30-Jun-1978
• Withdrawal Date: 30-Jun-1978
• ICS: 67.120.10 - Meat and meat products
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 6 - Meat, poultry, fish, eggs and their products
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 6 - Meat, poultry, fish, eggs and their products
• Current Stage: 9599 - Withdrawal of International Standard
• Completion Date: 25-Aug-1994

Relations

• Revised: ISO 3496:1994 - Meat and meat products — Determination of hydroxyproline content
• Effective Date: 15-Apr-2008
• Revised: SIST ISO 3496:1995 - Meat and meat products -- Determination of hydroxyproline content
• Effective Date: 12-May-2008

Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL STANDARD 3496
0
Meat and meat products - Determination of
L( -)-hydroxyproline content ( Reference method)
Viande et produits à base de viande - Détermination de la teneur en L (-)-h ydroxyproline
(Méthode de référence)
First edition - 1978-07-01
-
- w
Ref. No. IS0 3496-1978 (E)
UDC 637.5 : 547.747
R
n
Dascriptors : food products, meat, meat products, chemical analysis, determination of content, hydroxyproline.
ci
2
x
O-
Price based on 3 pages

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FOREWORD
IS0 (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation
of national standards institutes (IS0 member bodies). The work of developing
International Standards is carried out through IS0 technical committees. Every
member body interested in a subject for which a technical committee has been set
up has the right to be represented on that committee. International organizations,
governmental and non-governmental, in liaison with 1.50, also take part in the work.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated
to the member bodies for approval before their acceptance as International
Standards by the IS0 Council.
International Standard IS0 3496 was developed by Technical Committee
ISO/TC 34, Agricultural food products, and was circulated to the member bodies
in October 1976.
It has been approved by the member bodies of the following countries :
Australia France Peru
Austria
Germany Poland
Belgium
Hungary Portugal
Brazil
India Romania
Bulgaria
I ran South Africa, Rep. of
Canada Israel United Kingdom
Chile Kenya Yugoslavia
Czechoslovakia Mexico
Egypt, Arab Rep. of Netherlands
The member body of the following country expressed disapproval of the document
on technical grounds :
New Zealand
0 International Organization for standardization, 1978 0
Printed in Switzerland

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INTERNATIONAL STANDARD IS0 3496-1978 (E)
Meat and meat products - Determination of
L( -)-hydroxyproline content ( Reference method)
1 SCOPE AND FIELD OF APPLICATION 5.3 Sodium hydroxide, approximately 10 M solution.
This International Standard specifies a reference method Dissolve 40 g of sodium hydroxide in water. Cool and
for the determination of the L(-1-hydroxyproline content dilute to 100 ml.
of meat and meat products.
5.4 Sodium hydroxide, approximately 1 M solution.
Dissolve 49 of sodium hydroxide in water. Cool and
2 REFERENCE
dilute to 100 mi.
IS0 3100, Meat and meatproducts - Sampling.
5.5 Buffer solution, pH 6,O.
Dissolve in water :
3 DEFINITION
50 g of citric acid monohydrate (C6H,0,.H,0);
L(-1-hydroxyproline content of meat and meat products :
26,3 g of sodium hydroxide;
The amount of L(-)-hydroxyproline determined according
to the procedure specified in this International Standard,
146,l g of sodium acetate trihydrate
and expressed as a percentage by mass.
[ Na(CH,CO, ).3H,O].
Dilute to 1000ml with water. Mix this solution with
200 ml of water and 300 ml of propan-1-01.
4 PRINCIPLE
This solution is stable for several weeks at 4 OC.
Hydrolysis of a test portion in constant-boiling hydro-
chloric acid solution containing tin( I I) chloride. Filtration
5.6 Chloramine-T reagent
and dilution of the hydrolysate. Neutralization, with
sodium hydroxide, of an aliquot portion of the diluted
g of N-chloro-p-toluenesulphonamide, sodium
Dissolve 1,41
hydrolysate. Filtration and dilution. Oxidation of the
salt trihydrate (chloramine-T) in 10 ml of water and
L(-1-hydroxyproline by chloramine-T, followed by the
successively add 10 ml of propan-1-01 and 80 rnl of the
formation of a red compound with p-dimethylamino-
buffer solution (5.5).
benzaldehyde. Photometric measurement at a wavelength
Prepare this solution immediately before use.
of 558 nm.
5.7 Colour reagent
5 REAGENTS
Dissolve 10,O g of p-dimethylaminobenzaldehyde in 35 ml
of perchloric acid solution [60 % (m/m)] and then slowly
All reagents shall be of recognized analytical quality. The
add 65 ml of propan-2-01.
water used shall be distilled water or water of at least
equivalent purity.
Prepare this solution on the day of use.
NOTE - If purification of the pdimethylaminobenzaldehyde is
5.1 Hydrochloric acid solution containing tin( I I) chloride.
necessary (see note to 8.51, proceed as follows :
Dissolve 7,5 g of tin(1 I) chloride dihydrate (SnC12.2H20)
Prepare a saturated solution of the pdimethylaminobenzaldehvde
in water, dilute to 500 ml and add 500 ml of hydrochloric
in hot 70 % (V/V) ethanol. Cool, first at room temperature and
finally in arefrigerator. After about 12 h, filter on a Buchner funnel.
acid (p20 1,19 g/ml).
Wash with a little 70 % (VIV) ethanol. Again dissolve in hot 70 %
(VW) ethanol. Add cold water and agitate thoroughly. Repeat
5.2 Hydrochloric acid, approximately 6 M solution.
this procedure until a sufficient quantity of milk-white crystals
has been formed. Place in the refrigerator overnight. Filter on the
Mix equal volumes of hydrochloric acid (p2,, 1 ,I9 g/ml)
Buchner funnel, wash with 50% (VlV) ethanol and vacuum dry
and water. over phosphorus(\/) oxide.
1

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IS0 3496-1978 (E)
5.8 L(-1-Hydroxyproline standard solutions 8 PROCEDURE
Prepare a stock solution by dissolving 50 mg of
8.1 Preparation of test sample
4-hydroxypyrrolidine-cu-carbonic acid (hydroxyproline) in
water. Add 1 drop of the hydrochloric acid solution (5.2)
8.1 .I Raw meat and raw meat products
and dilute to 100 ml with water. This solution is stable for
at least one month at 4 OC.
Reduce intact meat to small cubes (approximately 0,5 cm3,
i.e. length of side approximately 8 mm) by cutting it while
On the day of use, dilute 5 ml of the stock solution to
it is cold (just below O "Cl, using a sharp knife.
500 ml with water in a volumetric flask. Then prepare
four standard solutions by diluting 10 - 20 - 30 and 40 ml
Either place the sample in a container and seal the latter
of this solution to 100ml with water to obtain
hermetically, or vacuum pack the sample in heat-resistant
L(-1-hydroxyproline concentrations of 0,5 - 1 - 1,5 and
plastic film; then heat so as to maintain a temperature of
2 pg/ml respectively.
at least 70 OC for at least 30 min; cool and proceed as in
8.1.2.
During the remaining stages preparation of the test
sample and the weighing out he test portions, ensure
6 APPARATUS
that the sample is kept well mixed and, in particular, that
Ordinary laboratory apparatus, and in particular : O
any fat or fluid is kept evenly distributed.
NOTE - The heat treatment softens the raw connective tissue and
6.1 Mechanical meat mincer, laboratory size, fitted with a
makes it less resistant to homogenization by mincing.
...

NORME INTERNATIONALE 3496
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION*ME~~HAPOLIHAR OPrAHM3AUHR Il0 CTAHIIAPTH3AUMH.ORGANlSATlON INTERNATIONALE DE NORMALISATION
9 Viande et produits à base de viande - Détermination de la
teneur en L( -)-hydroxyproline (Méthode de référence)
Meat and meat products - Determination of L (-)-h ydroxyproline content (Reference method)
Première edition - 1978-07-01
1
U.
-
CDU 637.5 : 547.747 Réf. no : IS0 3496-1978 (FI
CO
PE
r
Descripteurs : produit alimentaire, viande, produit à base de viande, analyse chimique, dosage, hydroxyproline.
%
Prix basé sur 3 pages

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AVANT-PROPOS
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d'organismes nationaux de normalisation (comités membres de I'ISO). L'élaboration
des Normes internationales est confiée aux comités techniques de I'ISO. Chaque
comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique
ant. Les organisations internationales, gouver
gouvernementales, en liaison avec I'ISO, participent également
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont
soumis aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme
Normes internationales par le Conseil de I'ISO.
La Norme internationale IS03496 a été élaborée par le comité technique
ISOITC 34, Produits agricoles alimentaires, et a été soumise aux comités membres
en octobre 1976.
Les comités membres des pays suivants l'ont approuvée :
Afrique du Sud, Rép. d' Égypte, Rép. arabe d' Pérou
Allemagne France Pologne
Australie Hongrie Portugal
Autriche Inde Roumanie
Iran Roy au me- Uni
Belgique
Israël Tchécoslovaquie
Brésil
Kenya Yougoslavie
Bulgarie
Canada Mexique
Chili Pays-Bas
Le comité membre du pays suivant l'a désapprouvée pour des raisons techniques :
Nouvelle-Zélande
O Organisation internationale de normalisation, 1978
Imprimé en Suisse

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NORME INTERNATIONALE IS0 3496-1978 (F)
Viande et produits à base de viande - Détermination de la
teneur en L(-)-hydroxyproline (Méthode de référence)
1 OBJET ET DOMAINE D'APPLICATION
5.2 Acide chlorhydrique, solution environ 6 M.
La présente Norme internationale spécifie une méthode de
Mélanger des volumes égaux d'acide chlorhydrique
référence pour la détermination de la teneur en L(-)-hydro-
(p20 1,19 g/mi) et d'eau.
xyproline des viandes et produits à base de viande.
--
5.3 Hydroxyde de sodium, solution environ 10 M.
2 REFERENCE
Dissoudre 409 d'hydroxyde de sodium dans de l'eau.
IS0 3100, Viandes et produits à base de viande - Échan-
Refroidir et compléter à 100 ml.
tillonnage.
3 DÉFINITION
5.4 Hydroxyde de sodium, solution environ 1 M.
teneur en L(-)-hydroxyproline des viandes et produits à
Dissoudre 4 g d'hydroxyde de sodium dans de l'eau. Re-
base de viande : Teneur en L(-1-hydroxyproline déterminée
froidir et compléter à 100 mi.
selon le mode opératoire décrit dans la présente Norme
internationale et exprimée en pourcentage en masse.
5.5 Solution tampon, pH 6,O.
4 PRINCIPE
Dissoudre dans de l'eau :
Hydrolyse d'une prise d'essai par ébullition continue dans
une solution d'acide chlorhydrique contenant du chlorure 50 g d'acide citrique monohydraté (C,H,O,.H,O);
d'étain(l1). Filtration puis dilution de I'hydrolysat. Neutra-
26.3 g d'hydroxyde de sodium;
lisation, au moyen de l'hydroxyde de sodium, d'une partie
aliquote de I'hydrolysat dilué. Filtration, puis dilution.
1461 g d'acétate de sodium trihydraté
Oxydation de la L(-)-hydroxyproline par la chloramine T,
[Na(CH3C02).3H20].
puis formation d'un composé de couleur rouge avec le
Compléter à 1000ml avec de l'eau. Mélanger cette solu-
p-diméthylaminobenzaldéhyde. Mesurage photométrique
tion avec 200 ml d'eau et 300 ml de propanol-1.
à une longueur d'onde de 558 nm.
Cette solution reste stable durant plusieurs semaines
à 4 Oc.
5 RÉACTIFS
Tous les réactifs doivent être de qualité analytique
reconnue. L'eau utilisée doit être de l'eau distillée ou de
5.6 Réactif à la chloramine T
l'eau de pureté au moins équivalente.
Dissoudre 1,41 g de N-chloro-p-toluène sulfonamide, sel de
5.1 Acide chlorhydrique, solution contenant du chlorure
sodium trihydraté (chloramine TI dans 10 ml d'eau, puis
d'étain(1 I). ajouter successivement 10 ml de propanol-I et 80 ml de la
solution tampon (5.5).
Dissoudre 7,5 g de chlorure d'étain(1 I) dihydraté
Cette solution doit être préparée immédiatement avant uti-
(SnC12.2H20) dans de l'eau, diluer à 500 ml et ajouter
500 ml d'acide chlorhydrique (p20 1,19 g/ml). lisation.

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IS0 3496-1978 (FI
6.8 Spectrophotomètre, permettant des mesurages à une
5.7 Réactif colorimétrique
longueur d'onde de 558 f 2 mm, ou colorimètre photo-
Dissoudre 10 g de p-diméthylaminobenzaldéhyde dans
électrique, équipé d'un filtre interférentiel avec absorption
35 ml d'une solution d'acide perchlorique 160 % (m/m)],
maximale ii 558 f 2 nm.
puis verser lentement 65 ml de propanol-2.
O mm de parcours optique.
verre, de 1
Cette solution doit être préparée le jour de son utilisation.
NOTE - S'il est nécessaire de purifier le p-diméthylaminobenzal-
6.10 Balance analytique.
déhyde (voir note de 8.5), opérer Comme suit :
Préparer, & chaud, une solution saturée de p-diméthylaminobenzal-
déhyde dans de l'éthanol à 70 % (V/V). Refroidir d'abord à la tem- 7 ÉCHANTILLON
pérature ambiante et enfin dans un réfrigérateur. Après environ
12h. filtrer sur un entonnoir de Buchner. Laver avec un peu 7.1 Opérer sur un échantillon représentatif d'au moins
d'éthanol à 70% (V/V). Dissoudre de nouveau à chaud, dans de
200 g. Voir IS0 3100.
l'éthanol à 70 % (V/V). Ajouter de l'eau glacée et agiter soigneu-
sement. Poursuivre ces opérations jusqu'à l'obtention d'une quan-
7.2 Conserver l'échantillon de façon à éviter toute
tité suffisante de cristaux blanc laiteux. Laisser 1 nuit aii réfri-
gérateur. Filtrer sur l'entonnoir de Buchner, laver avec de l'éthanol détérioration et tout changement dans sa composition.
à 50 % (V/V), puis sécher sous pression réduite en présence d'oxyde
de phosphore(\/).
8 MODE OPÉRATOIRE
5.8 L(-1-Hydroxyproline, solutions étalons
8.1 Préparation de l'échantillon pour essai
Préparer une solution mère d'acide hydroxypyrrolidine-c-
carbonique (hydroxyproline) en dissolvant 50 mg
8.1.1 Viandes crues et produits a' base de viande crue
d'hydroxyproline dans de l'eau. Ajouter 1 goutte de la
Au moyen d'un couteau bien aiguisé, découper la viande
solution d'acide chlorhydrique (5.2) et compléter à 100 ml
en petits cubes (d'environ 0,5 cm3 de volume, c'est-à-dire
avec de l'eau. Cette solution reste stable durant au moins
d'environ 8 mm de côté) alors qu'elle est encore froide
1 moisà4'~.
(très légèrement en dessous de O OC).
Le jour de l'emploi, introduire 5 ml de la solution mère
On peut également placer l'échantillon dans un récipient que
dans une fiole jaugée et compléter à 500 ml avec de l'eau.
l'on bouchera hermétiquement, ou l'emballer sous pression
Préparer ensuite quatre solutions étalons en prélevant 10 -
réduite dans un sac en plastique thermorésistant; chau
...