ISO 14378:2009

Milk and dried milk — Determination of iodide content — Method using high-performance liquid chromatography

ISO 14378|IDF 167:2009 specifies a high-performance liquid chromatographic (HPLC) method for the determination of the iodide content of pasteurized whole milk and dried skimmed milk, when present at levels from 0,03 µg/g to 1 µg/g and 0,3 µg/g to 10,0 µg/g, respectively.

Lait et lait en poudre — Détermination de la teneur en iodure — Méthode par chromatographie en phase liquide à haute performance

L'ISO 14378|FIL 167:2009 spécifie une méthode par chromatographie liquide à haute performance (CLHP) pour déterminer la teneur en iodure du lait entier pasteurisé et du lait écrémé en poudre, lorsque ce composé est présent à des niveaux compris entre 0,03 µg/g et 1 µg/g et entre 0,3 µg/g et 10,0 µg/g respectivement.

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 23-Sep-2009
• ICS: 67.100.10 - Milk and processed milk products
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 5 - Milk and milk products
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 5 - Milk and milk products
• Current Stage: 9093 - International Standard confirmed
• Completion Date: 13-Jan-2022

Relations

• Revises: ISO 14378:2000 - Milk and dried milk — Determination of iodide content — Method using high-performance liquid chromatography
• Effective Date: 28-Feb-2009

Standards Content (Sample)

МЕЖДУНАРОДНЫЙ ISO
СТАНДАРТ 14378
IDF
167
Второе издание
2009-10-01

Молоко и сухое молоко. Определение
содержания йодида. Метод с
применением жидкостной
хроматографии высокого разрешения
Milk and dried milk — Determination of iodide content — Method using
high performance liquid chromatography



Ответственность за подготовку русской версии несёт GOST R
(Российская Федерация) в соответствии со статьёй 18.1 Устава ISO
Ссылочные номера
ISO 14378:2009(R)
IDF 167:2009(R)
©
ISO и IDF 2009

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 14378:2009(R)
IDF 167:2009(R)
Отказ от ответственности при работе в PDF
Настоящий файл PDF может содержать интегрированные шрифты. В соответствии с условиями лицензирования, принятыми
фирмой Adobe, этот файл можно распечатать или смотреть на экране, но его нельзя изменить, пока не будет получена
лицензия на интегрированные шрифты и они не будут установлены на компьютере, на котором ведется редактирование. В
случае загрузки настоящего файла заинтересованные стороны принимают на себя ответственность за соблюдение
лицензионных условий фирмы Adobe. Центральный секретариат ISO не несет никакой ответственности в этом отношении.
Adobe – торговый знак фирмы Adobe Systems Incorporated.
Подробности, относящиеся к программным продуктам, использованные для создания настоящего файла PDF, можно найти в
рубрике General Info файла; параметры создания PDF были оптимизированы для печати. Были приняты во внимание все
меры предосторожности с тем, чтобы обеспечить пригодность настоящего файла для использования комитетами-членами
ISO. В редких случаях возникновения проблемы, связанной со сказанным выше, просьба проинформировать Центральный
секретариат по адресу, приведенному ниже.


ДОКУМЕНТ ОХРАНЯЕТСЯ АВТОРСКИМ ПРАВОМ


© ISO и IDF 2009
Если не указано иное, никакую часть настоящей публикации нельзя копировать или использовать в какой-либо форме или
каким-либо электронным или механическим способом, включая фотокопии и микрофильмы, без предварительного письменного
согласия ISO и IDF, которое должно быть получено после запроса о разрешении, направленного по адресу, приведенному ниже.
ISO copyright office International Dairy Federation
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20 Diamant Building • Boulevard Auguste Reyers 80 • B-1030 Brussels
Tel. + 41 22 749 01 11 Tel. + 32 2 733 98 88
Fax + 41 22 749 09 47 Fax + 32 2 733 04 13
E-mail [e-mail] E-mail [e-mail]
Web www.iso.org Web www.fil-idf.org
Опубликовано в Швейцарии

ii © ISO и IDF 2009 – Все права сохраняются

---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 14378:2009(R)
IDF 167:2009(R)
Предисловие
Международная организация по стандартизации (ISO) является всемирной федерацией
национальных организаций по стандартизации (комитетов-членов ISO). Разработка международных
стандартов обычно осуществляется техническими комитетами ISO. Каждый комитет-член ISO,
заинтересованный в деятельности, для которой был создан технический комитет, имеет право быть
представленным в этом комитете. Международные организации, правительственные и
неправительственные, имеющие связи с ISO, также принимают участие в работах. ISO
непосредственно сотрудничает с Международной электротехнической комиссией (IEC) по всем
вопросам электротехнической стандартизации.
Международные стандарты разрабатываются в соответствии с правилами, приведенными в
Директивах ISO/IEC, Часть 2.
Основная задача технических комитетов состоит в подготовке международных стандартов. Проекты
международных стандартов, одобренные техническими комитетами, рассылаются комитетам-членам
на голосование. Их опубликование в качестве международных стандартов требует одобрения, по
меньшей мере, 75 % комитетов-членов, принимающих участие в голосовании.
Следует иметь в виду, что некоторые элементы настоящего документа могут быть объектом патентных
прав. ISO не должен нести ответственность за идентификацию какого-либо одного или всех патентных
прав.
ISO 14378⎪IDF 167 разработан Техническим комитетом ISO/TC 34, Пищевые продукты, Подкомитетом
SC 5, Молоко и молочные продукты, и Международной федерацией молочной промышленности (IDF).
Этот стандарт должен быть опубликован совместно ISO и IDF.
Настоящее второе издание ISO 14378⎪IDF 167 отменяет и заменяет первое издание (ISO 14378:2000),
которое было подвергнуто незначительному пересмотру.
© ISO и IDF 2009 – Все права сохраняются iii

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 14378:2009(R)
IDF 167:2009(R)
Предисловие
Международная федерация по молочному животноводству (IDF) является некоммерческой
организацией, представляющей всемирное молочное животноводство. Членами IDF являются
Национальные комитеты каждой страны-члена, а также региональные ассоциации по молочному
животноводству, которые имеют подписанное официальное соглашение о совместной деятельности с
IDF. Каждый член IDF имеет право быть представленным в Постоянных комитетах IDF,
осуществляющих техническую работу. IDF сотрудничает с ISO по вопросам разработки стандартных
методов анализа и отбора проб молока и молочных продуктов.
Основная задача Постоянных комитетов состоит в подготовке международных стандартов. Проекты
международных стандартов, принятые Рабочими группами и Постоянными комитетами, рассылаются
Национальным комитетам для голосования. Их опубликование в качестве международных стандартов
требует одобрения не менее 50 % Национальных комитетов IDF, принимающих участие в голосовании.
Следует иметь в виду, что некоторые элементы настоящего документа могут быть объектом патентных
прав. IDF не должен нести ответственность за идентификацию какого-либо одного или всех патентных
прав.
ISO 14378⎪IDF 167 подготовлен Международной федерацией молочной промышленности (IDF) и
Техническим комитетом ISO/TC 34, Пищевые продукты, Подкомитетом SC 5, Молоко и молочные
продукты. Этот стандарт должен быть опубликован совместно IDF и ISO.
Вся работа была проведена под руководством совместной ISO-IDF Группы экспертов (E15 —Тяжелые
металлы и другие элементы), которая в настоящее время входит в состав совместной ISO-IDF
Рабочей группы по Микросоединениям Постоянного комитета по Микроэлементам и определению
физических свойств.
Настоящее издание ISO 14378⎪IDF 167 отменяет и заменяет IDF 167:1994, которое было подвергнуто
незначительному пересмотру.

iv © ISO и IDF 2009 – Все права сохраняются

---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 14378:2009(R)
МЕЖДУНАРОДНЫЙ СТАНДАРТ
IDF 167:2009(R)

Молоко и сухое молоко. Определение содержания йодида.
Метод с применением жидкостной хроматографии высокого
разрешения
ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЕ — Применение настоящего международного стандарта может включать
использование опасных материалов, операций и оборудования. Лица, использующие этот
стандарт, должны быть ознакомлены с обычной лабораторной практикой. В этом стандарте не
ставится цель решить все проблемы безопасности, связанные с его применением.
Пользователь этого стандарта сам несет ответственность за обеспечение охраны здоровья и
техники безопасности, а также определение применимости регламентных ограничений до его
использования.
1 Область применения
В настоящем международном стандарте устанавливается метод с применением жидкостной
хроматографии высокого разрешения (HPLC) для определения содержания йодида в пастеризованном
цельном молоке и сухом обезжиренном молоке от 0,03 мкг/г до 1 мкг/г и 0,3 мкг/г до 10,0 мкг/г
соответственно.
ПРИМЕЧАНИЕ 1 Метод был совместно исследован на пробах жидкого цельного и сухого обезжиренного молока.
Нет оснований полагать, что данный метод не применим к обезжиренному или частично обезжиренному молоку, а
также к сухому цельному молоку.
ПРИМЕЧАНИЕ 2 Этим методом измеряют содержание свободного (ионного) йодида. Однако содержание
общего йодида в свежем молоке и в сухом молоке высокого качества, в котором не происходило развития
микроорганизмов, может включать от 5 % до 10 % (массовая доля) органически связанного йодида. В молоке,
подвергнутом микробиологической порче, может содержаться больше органически связанного йодида.
2 Нормативные ссылки
Следующие ссылочные нормативные документы являются обязательными при применении данного
документа. Для жестких ссылок применяется только цитированное издание документа. Для плавающих
ссылок необходимо использовать самое последнее издание нормативного ссылочного документа
(включая любые изменения).
ISO 3696, Вода для лабораторного анализа. Технические требования и методы испытания
3 Термины и определения
Применительно к этому документу используются следующие термины и определения.
3.1
содержание йодида в пастеризованном цельном молоке
содержание йодида в сухом обезжиренном молоке
iodide content of pasteurized whole milk
iodide content of dried skimmed milk
массовая доля веществ, определенная по методике, установленной в данном международном стандарте
ПРИМЕЧАНИЕ Обычно содержание йодида выражают в микрограммах на грамм.
© ISO и IDF 2009 – Все права сохраняются 1

---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 14378:2009(R)
IDF 167:2009(R)
4 Принцип
Пробу для анализа разбавляют водой. Нерастворимые и высокомолекулярные вещества удаляются
при фильтровании через отделяющую мембрану 25 000 D. Йодид-ионы отделяются с помощью
обращенно-фазовой ионопарной жидкостной хроматографии высокого разрешения HPLC с
электрохимическим детектором и серебрянным рабочим электродом с потенциалом от 0 мВ до 50 мВ.
Содержание йодида рассчитывают с помощью калибровочного графика.
5 Реактивы
Используют только реактивы признанного аналитического качества или, если так определено,
специального сорта HPLC.
5.1 Вода, соответствующая ISO 3696, класс 2.
5.2 Стандартные растворы йодида.
ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЕ — Защищают водные растворы йодида от света, поскольку они не
устойчивы при воздействии излучения видимой части спектра.
5.2.1 Основной раствор йодида, соответствующий 100 мг йодида на литр.
Растворяют 130,8 мг йодида калия (KI) в воде в мерной колбе с одной меткой вместимостью 1 000 мл
(6.2). Разбавляют до метки водой и перемешивают.
Основной раствор йодида можно использовать в течение 1 месяца при условии, что он хранится в
темноте при комнатной температуре.
5.2.2 Рабочий стандартный раствор йодида, соответствующий 20 мкг, 50 мкг, 150 мкг и 250 мкг
йодида на литр соответственно.
Переносят с помощью пипетки 20 мкл, 50 мкл, 150 мкл и 250 мкл основного раствора йодида (5.2.1) в
четыре отдельные мерные колбы с одной меткой вместимостью 100 мл (6.2). Разбавляют каждый
раствор до метки водой и перемешивают.
Рабочие стандартные растворы йодида можно использовать в течение 1 недели при условии, что они
хранятся в темноте при комнатной температуре.
5.3 Ацетонитрил (CH CN), сорта HPLC.
3
5.4 Раствор хлорида гексадецилтриметиламмония [CH (CH ) N(CH ) Cl], 25 % (по массе)
3 2 15 3 3
раствор в воде, для ионопарной хроматографии.
5.5 Элюент для HPLC: смесь гидрофосфата натрия и хлорида гексадецилтриметиламмония в
смеси ацетонитрила и воды (68 + 32 частей по объему), pH = 6,8.
Растворяют 1,42 г гидрофосфата натрия (Na HPO ) примерно в 600 мл воды в мерной колбе с
2 4
одной меткой вместимостью 1 000 мл (6.2). Добавляют 1,3 мл раствора хлорида
гексадецилтриметиламмония (5.4) и хорошо перемешивают. Затем добавляют 320 мл ацетонитрила
(5.3) и снова перемешивают. Доводят pH до 6,8 с помощью концентрированной ортофосфорной
кислоты (H PO ). Разбавляют до метки водой и хорошо перемешивают.
3 4
Осветляют раствор, фильтруя его сначала через мембранный фильтр с размером пор 1,2 мкм, а затем
через мембранный фильтр с размером пор 0,5 мкм. Для перемешивания взбалтывают раствор с
образованием завихрения и сразу же дегазируют с помощью вакуума или обработки ультразвуком в
течение 2 мин перед первоначальным использованием. Для незначительной корректировки времени
удерживания йодида можно модифицировать элюент путем добавления небольших количеств воды
2 © ISO и IDF 2009 – Все права сохраняются

---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 14378:2009(R)
IDF 167:2009(R)
или ацетонитрила. Элюент можно использовать в течение 1 года при условии, что он хранится в
плотно закрытой емкости.
5.6 н-Пентанол.
6 Аппаратура
Обычная лабораторная аппаратура и, в частности, следующая.
6.1 Аналитические весы, с точностью взвешивания до 0,01 г, с возможностью считывания до трех
десятичных знаков.
[3]
6.2 Мерные колбы с одной меткой, вместимостью 100 мл и 1 000 мл, ISO 1042 класс A.
6.3 Микропипетки, калиброванные на вытекание вместимостью 20 мкл, 50 мкл, 150 мкл и 250 мкл
[6]
соответственно, ISO 8655-2 .
[2]
6.4 Градуированная пипетка, вместимостью 2 мл, с ценой деления 0,1 мл, ISO 835 класс A или
класс AS.
[4]
6.5 Мерный цилиндр, вместимостью 500 мл, ISO 4788 класс A.
6.6 pH-метр, с комбинированным стеклянным электродом.
...

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 14378
IDF
167
Second edition
2009-10-01

Milk and dried milk — Determination of
iodide content — Method using high-
performance liquid chromatography
Lait et lait en poudre — Détermination de la teneur en iodure —
Méthode par chromatographie en phase liquide à haute performance




Reference numbers
ISO 14378:2009(E)
IDF 167:2009(E)
©
ISO and IDF 2009

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 14378:2009(E)
IDF 167:2009(E)
PDF disclaimer
This PDF file may contain embedded typefaces. In accordance with Adobe's licensing policy, this file may be printed or viewed but
shall not be edited unless the typefaces which are embedded are licensed to and installed on the computer performing the editing. In
downloading this file, parties accept therein the responsibility of not infringing Adobe's licensing policy. Neither the ISO Central
Secretariat nor the IDF accepts any liability in this area.
Adobe is a trademark of Adobe Systems Incorporated.
Details of the software products used to create this PDF file can be found in the General Info relative to the file; the PDF-creation
parameters were optimized for printing. Every care has been taken to ensure that the file is suitable for use by ISO member bodies
and IDF national committees. In the unlikely event that a problem relating to it is found, please inform the ISO Central Secretariat at the
address given below.


COPYRIGHT PROTECTED DOCUMENT


©  ISO and IDF 2009
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means,
electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without permission in writing from either ISO or IDF at the respective
address below.
ISO copyright office International Dairy Federation
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20 Diamant Building • Boulevard Auguste Reyers 80 • B-1030 Brussels
Tel. + 41 22 749 01 11 Tel. + 32 2 733 98 88
Fax + 41 22 749 09 47 Fax + 32 2 733 04 13
E-mail [e-mail] E-mail [e-mail]
Web www.iso.org Web www.fil-idf.org
Published in Switzerland

ii © ISO and IDF 2009 – All rights reserved

---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 14378:2009(E)
IDF 167:2009(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through
ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has
been established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental
and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 14378⎪IDF 167 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 5,
Milk and milk products, and the International Dairy Federation (IDF). It is being published jointly by ISO and
IDF.
This second edition of ISO 14378⎪IDF 167 cancels and replaces the first edition (ISO 14378:2000), of which it
constitutes a minor revision.
© ISO and IDF 2009 – All rights reserved iii

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 14378:2009(E)
IDF 167:2009(E)
Foreword
IDF (the International Dairy Federation) is a non-profit organization representing the dairy sector worldwide.
IDF membership comprises National Committees in every member country as well as regional dairy
associations having signed a formal agreement on cooperation with IDF. All members of IDF have the right to
be represented on the IDF Standing Committees carrying out the technical work. IDF collaborates with ISO in
the development of standard methods of analysis and sampling for milk and milk products.
The main task of Standing Committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the Action Teams and Standing Committees are circulated to the National Committees for voting.
Publication as an International Standard requires approval by at least 50 % of the IDF National Committees
casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. IDF shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 14378⎪IDF 167 was prepared by the International Dairy Federation (IDF) and Technical Committee
ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 5, Milk and milk products. It is being published jointly by IDF
and ISO.
All work was carried out by the former Joint ISO-IDF Group of Experts (E15 — Heavy metals and other
elements) which is now part of the Joint ISO-IDF Action Team on Minor compounds of the Standing
Committee on Minor components and characterization of physical properties.
This edition of ISO 14378⎪IDF 167 cancels and replaces IDF 167:1994, of which it constitutes a minor revision.

iv © ISO and IDF 2009 – All rights reserved

---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 14378:2009(E)
INTERNATIONAL STANDARD
IDF 167:2009(E)

Milk and dried milk — Determination of iodide content —
Method using high-performance liquid chromatography
WARNING — The use of this International Standard may involve hazardous materials, operations and
equipment. Persons using this International Standard should be familiar with normal laboratory
practice. This standard does not purport to address all of the safety problems, if any, associated with
its use. It is the responsibility of the user to establish health and safety practices and determine the
applicability of regulatory limitations prior to use.
1 Scope
This International Standard specifies a high-performance liquid chromatographic (HPLC) method for the
determination of the iodide content of pasteurized whole milk and dried skimmed milk, when present at levels
from 0,03 µg/g to 1 µg/g and 0,3 µg/g to 10,0 µg/g, respectively.
NOTE 1 The method has been collaboratively studied with samples of liquid whole milk and dried skimmed milk. There
are no reasons to expect that the method does not apply to skimmed or partially skimmed milk as well as to dried whole
milk.
NOTE 2 The method measures free (ionic) iodide. However, the total iodide content of fresh milk and good quality milk
powder, in which no microbial growth has occurred, may contain a mass fraction of 5 % to 10 % of organically bound
iodide. More iodide can be bound organically in milk where microbiological deterioration has occurred.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced
document (including any amendments) applies.
ISO 3696, Water for analytical laboratory use — Specification and test methods
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
iodide content of pasteurized whole milk
iodide content of dried skimmed milk
mass fraction of substances determined by the procedure specified in this International Standard
NOTE The iodide content is conventionally expressed in micrograms per gram.
© ISO and IDF 2009 – All rights reserved 1

---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 14378:2009(E)
IDF 167:2009(E)
4 Principle
A test portion is diluted with water. Insoluble and high-molecular-mass material is removed by filtration through
a 25 000 D cut-off membrane. Iodide ions are separated by reverse-phase ion-pair HPLC with an
electrochemical detector and a silver working electrode at 0 mV to 50 mV. The iodide content is calculated by
means of a calibration graph.
5 Reagents
Use only reagents of recognized analytical grade or, if appropriate, of special HPLC grade.
5.1 Water, complying with ISO 3696, grade 2.
5.2 Iodide standard solutions.
WARNING — Protect aqueous solutions of iodides from light as they are unstable when exposed to
visible frequencies.
5.2.1 Iodide stock solution, corresponding to 100 mg of iodide per litre.
Dissolve 130,8 mg of potassium iodide (KI) in water in a 1 000 ml one-mark volumetric flask (6.2). Dilute to the
mark with water and mix.
The iodide stock solution may be kept for 1 month if stored in the dark at room temperature.
5.2.2 Iodide working standard solutions, corresponding to 20 µg, 50 µg, 150 µg and 250 µg of iodide per
litre, respectively.
Pipette 20 µl, 50 µl, 150 µl and 250 µl of the iodide stock solution (5.2.1) into four separate 100 ml one-mark
volumetric flasks (6.2). Dilute each solution to the mark with water and mix.
The iodide working standard solutions may be kept for 1 week if stored in the dark at room temperature.
5.3 Acetonitrile (CH CN), HPLC grade.
3
5.4 Hexadecyltrimethylammonium chloride solution [CH (CH ) N(CH ) Cl], 25 % (by mass) solution in
3 2 15 3 3
water, ion-pair chromatography grade.
5.5 HPLC eluent: mixture of disodium hydrogenphosphate and hexadecyltrimethylammonium chloride in a
mixture of acetonitrile and water (68 + 32 by volume), pH = 6,8.
Dissolve 1,42 g of disodium hydrogenphosphate (Na HPO ) in about 600 ml of water in a 1 000 ml one-mark
2 4
volumetric flask (6.2). Add 1,3 ml of hexadecyltrimethylammonium chloride solution (5.4) and mix well. Then
add 320 ml of acetonitrile (5.3) and mix again. Adjust the pH to 6,8 with concentrated orthophosphoric acid
(H PO ). Dilute to the mark with water and mix well.
3 4
Clarify the solution by filtering first through a 1,2 µm membrane filter and then through a 0,5 µm membrane
filter. Swirl the solution to mix it and simultaneously degas by means of a vacuum or sonification for 2 min
before initial use. The eluent can be modified by the addition of small amounts of water or acetonitrile to
achieve minor adjustments in the retention time of iodide. The eluent may be kept for 1 year, if stored in a
tightly closed container.
5.6 n-Pentanol.
2 © ISO and IDF 2009 – All rights reserved

---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 14378:2009(E)
IDF 167:2009(E)
6 Apparatus
Usual laboratory equipment and, in particular, the following.
6.1 Analytical balance, capable of weighing to the nearest 0,01 g, with a readability of three decimal
places.
[3]
6.2 One-mark volumetric flasks, of capacities 100 ml and 1 000 ml, ISO 1042 class A.
[6]
6.3 Micropipettes, capable of delivering 20 µl, 50 µl, 150 µl and 250 µl respectively, ISO 8655-2 .
[2]
6.4 Graduated pipette, of capacity 2 ml, with 0,1 ml graduations, ISO 835 class A or class AS.
[4]
6.5 Measuring cylinder, of capacity 500 ml, ISO 4788 class A.
6.6 pH-meter, with combined glass electrode.
6.7 Membrane filters, 1,2 µm and 0,5 µm, nylon-6-6, or equivalent, with filter equipment to clarify HPLC
eluent.
6.8 Centrifuge, capable of holding 50 ml centrifuge tubes and capable of producing a radial acceleration of
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 14378
FIL
167
Deuxième édition
2009-10-01

Lait et lait en poudre — Détermination de
la teneur en iodure — Méthode par
chromatographie en phase liquide à
haute performance
Milk and dried milk — Determination of iodide content — Method using
high-performance liquid chromatography




Numéros de référence
ISO 14378:2009(F)
FIL 167:2009(F)
©
ISO et FIL 2009

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 14378:2009(F)
FIL 167:2009(F)
PDF – Exonération de responsabilité
Le présent fichier PDF peut contenir des polices de caractères intégrées. Conformément aux conditions de licence d'Adobe, ce fichier
peut être imprimé ou visualisé, mais ne doit pas être modifié à moins que l'ordinateur employé à cet effet ne bénéficie d'une licence
autorisant l'utilisation de ces polices et que celles-ci y soient installées. Lors du téléchargement de ce fichier, les parties concernées
acceptent de fait la responsabilité de ne pas enfreindre les conditions de licence d'Adobe. Le Secrétariat central de l'ISO et la FIL
déclinent toute responsabilité en la matière.
Adobe est une marque déposée d'Adobe Systems Incorporated.
Les détails relatifs aux produits logiciels utilisés pour la création du présent fichier PDF sont disponibles dans la rubrique General Info
du fichier; les paramètres de création PDF ont été optimisés pour l'impression. Toutes les mesures ont été prises pour garantir
l'exploitation de ce fichier par les comités membres de l'ISO et les comités nationaux de la FIL. Dans le cas peu probable où
surviendrait un problème d'utilisation, veuillez en informer le Secrétariat central de l'ISO à l'adresse donnée ci-dessous.


DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT


©  ISO et FIL 2009
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée sous
quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l'accord écrit
soit de l'ISO soit de la FIL, à l'une ou l'autre des adresses ci-après.
ISO copyright office Fédération Internationale de Laiterie
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20 Diamant Building • Boulevard Auguste Reyers 80 • B-1030 Bruxelles
Tel. + 41 22 749 01 11 Tel. + 32 2 733 98 88
Fax + 41 22 749 09 47 Fax + 32 2 733 04 13
E-mail [e-mail] E-mail [e-mail]
Web www.iso.org Web www.fil-idf.org
Publié en Suisse

ii © ISO et FIL 2009 – Tous droits réservés

---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 14378:2009(F)
FIL 167:2009(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux
de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire
partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 14378⎪FIL 167 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité
SC 5, Lait et produits laitiers, et la Fédération Internationale de Laiterie (FIL). Elle est publiée conjointement
par l'ISO et la FIL.
Cette deuxième édition de l'ISO 14378⎪FIL 167 annule et remplace la première édition (ISO 14378:2000),
dont elle constitue une révision mineure.
© ISO et FIL 2009 – Tous droits réservés iii

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 14378:2009(F)
FIL 167:2009(F)
Avant-propos
La FIL (Fédération Internationale de Laiterie) est une organisation sans but lucratif représentant le secteur
laitier mondial. Les membres de la FIL se composent des Comités Nationaux dans chaque pays membre et
des associations laitières régionales avec lesquelles la FIL a signé des accords de coopération. Tout membre
de la FIL a le droit de faire partie des Comités permanents de la FIL auxquels sont confiés les travaux
techniques. La FIL collabore avec l'ISO pour l'élaboration de méthodes normalisées d'analyse et
d'échantillonnage pour le lait et les produits laitiers.
La tâche principale des Comités permanents est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de
Normes internationales adoptés par les Équipes d'Action et les Comités permanents sont soumis aux Comités
Nationaux pour vote. Leur publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 50 % au moins
des Comités Nationaux de la FIL votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. La FIL ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 14378⎪FIL 167 a été élaborée par la Fédération Internationale de Laiterie (FIL) et le comité technique
ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 5, Lait et produits laitiers. Elle est publiée conjointement
par la FIL et l'ISO.
L'ensemble des travaux a été confié à l'ancien Groupe d'Experts mixte ISO-FIL (E15 — Métaux lourds et
autres éléments) qui fait maintenant partie de l'Équipe d'Action mixte ISO-FIL, Composants mineurs, du
Comité permanent chargé des Composants mineurs du lait et de la caractérisation des propriétés physiques.
Cette édition de l'ISO 14378⎪FIL 167 annule et remplace la FIL 167:1994, dont elle constitue une révision
mineure.

iv © ISO et FIL 2009 – Tous droits réservés

---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 14378:2009(F)
NORME INTERNATIONALE
FIL 167:2009(F)

Lait et lait en poudre — Détermination de la teneur en iodure —
Méthode par chromatographie en phase liquide à haute
performance
AVERTISSEMENT — L'utilisation de la présente Norme internationale peut impliquer l'utilisation de
produits et la mise en œuvre de modes opératoires et d'appareillages à caractère dangereux. Il
convient que l'utilisateur de la présente Norme internationale connaisse bien les pratiques courantes
de laboratoire. La présente Norme internationale ne prétend pas aborder tous les problèmes de
sécurité qui sont, le cas échéant, liés à son utilisation. Il incombe à l'utilisateur d'établir des pratiques
appropriées en matière d'hygiène et de sécurité et de déterminer l’applicabilité des restrictions
réglementaires avant de l'utiliser.
1 Domaine d'application
La présente Norme Internationale spécifie une méthode par chromatographie liquide à haute performance
(CLHP) pour déterminer la teneur en iodure du lait entier pasteurisé et du lait écrémé en poudre, lorsque ce
composé est présent à des niveaux compris entre 0,03 µg/g et 1 µg/g et entre 0,3 µg/g et 10,0 µg/g
respectivement.
NOTE 1 Cette méthode a fait l'objet d'une étude interlaboratoires effectuée avec des échantillons de lait entier liquide
et de lait écrémé en poudre. Il n'y a pas de raison de supposer que la méthode ne s'applique pas au lait écrémé ou
partiellement écrémé ainsi qu'au lait entier en poudre.
NOTE 2 Cette méthode mesure l'iodure libre (ionique). Toutefois, la teneur totale en iodure dans le lait frais et le lait en
poudre de bonne qualité, dans lesquels aucune culture microbienne n'a été décelée, peut comprendre une fraction
massique de 5 % à 10 % d'iodure organique lié. La proportion d'iodure organique lié peut être plus élevée dans le lait
dans lequel une détérioration microbiologique est observée.
2 Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l'application du présent document. Pour les
références datées, seule l'édition citée s'applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document de référence s'applique (y compris les éventuels amendements).
ISO 3696, Eau pour laboratoire à usage analytique — Spécification et méthodes d'essai
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s'appliquent.
3.1
teneur en iodure du lait entier pasteurisé
teneur en iodure du lait écrémé en poudre
fraction massique de substances déterminée par le mode opératoire spécifié dans la présente Norme
internationale
NOTE Par convention, la teneur en iodure s'exprime en microgrammes par gramme de produit.
© ISO et FIL 2009 – Tous droits réservés 1

---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 14378:2009(F)
FIL 167:2009(F)
4 Principe
Dilution d'une prise d'essai avec de l'eau. Élimination des composés insolubles et de haut poids moléculaire
par filtration au travers d'une membrane dont le seuil de coupure est de 25 000 D. Séparation des ions iodure
par CLHP de paires d'ions en phase inverse avec un détecteur électrochimique muni d'une électrode en
argent fonctionnant de 0 mV à 50 mV. La teneur en iodure est calculée au moyen d'une courbe d'étalonnage.
5 Réactifs
Utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique reconnue ou, si nécessaire, de qualité spéciale pour
CLHP.
5.1 Eau, conforme à la qualité 2 de l'ISO 3696.
5.2 Solutions étalons d'iodure.
AVERTISSEMENT — Protéger les solutions aqueuses d'iodure de la lumière car celles-ci sont
instables lorsqu'elles sont exposées aux fréquences visibles.
5.2.1 Solution mère d'iodure, correspondant à 100 mg d'iodure par litre.
Dans une fiole jaugée de 1 000 ml (6.2), dissoudre 130,8 mg d'iodure de potassium (KI) dans de l'eau.
Compléter au trait de jauge avec de l'eau et mélanger.
Cette solution peut être conservée pendant 1 mois si elle est entreposée à température ambiante et à l'abri de
la lumière.
5.2.2 Solutions étalons de travail d'iodure, correspondant à 20 µg, 50 µg, 150 µg et 250 µg d'iodure par
litre respectivement.
Dans quatre fioles jaugées de 100 ml (6.2), pipetter respectivement 20 µl, 50 µl, 150 µl et 250 µl de la solution
mère d'iodure (5.2.1). Dans chaque fiole, ajuster au trait de jauge avec de l'eau et mélanger.
Ces solutions peuvent être conservées pendant 1 semaine si elles sont entreposées à température ambiante
et à l'abri de la lumière.
5.3 Acétonitrile (CH CN), de qualité CLHP.
3
5.4 Chlorure d'hexadécyltriméthylammonium [CH (CH ) N(CH ) Cl)], solution aqueuse à 25 % (en
3 2 15 3 3
masse) pour chromatographie de paires d'ions.
5.5 Éluant CLHP: mélange d'hydrogénophosphate disodique et de chlorure
d'hexadécyltriméthylammonium en solution dans un mélange d'acétonitrile et d'eau (68 + 32 en volume),
pH = 6,8.
Dans une fiole jaugée de 1 000 ml (6.2), dissoudre 1,42 g d'hydrogénophosphate disodique (Na HPO ) dans
2 4
environ 600 ml d'eau. Ajouter 1,3 ml de la solution de chlorure d'hexadécyltriméthylammonium (5.4) et bien
mélanger. Puis ajouter 320 ml d'acétonitrile (5.3) et mélanger à nouveau. Ajuster le pH à 6,8 avec de l'acide
phosphorique (H PO ) concentré. Compléter au trait de jauge avec de l'eau et bien mélanger.
3 4
Clarifier la solution en filtrant d'abord sur une membrane de filtration de 1,2 µm, puis sur une membrane de
filtration de 0,5 µm. Faire tourner la solution pour la mélanger et, simultanément, la dégazer par évacuation ou
sonification pendant 2 min avant la première utilisation. L'éluant peut être modifié par addition de petites
quantités d'eau ou d'acétonitrile pour effectuer de petits ajustements du temps de rétention de l'iodure. S'il est
entreposé dans un récipient hermétique, l'éluant peut se conserver pendant 1 an.
5.6 n-Pentanol.
2 © ISO et FIL 2009 – Tous droits réservés

---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 14378:2009(F)
FIL 167:2009(F)
6 Appareillage
Matériel courant de laboratoire et, en particulier, ce qui suit.
6.1 Balance analytique, permettant de peser à 0,01 g près, avec une lecture à trois décimales.
[3]
6.2 Fioles jaugées à un trait, de 100 ml et 1 000 ml de capacité, ISO 1042 , classe A.
[6]
6.3 Micropipettes, permettant de délivrer 20 µl, 50 µl, 150 µl et 250 µl respectivement, ISO 8655-2 .
[2]
6.4 Pipette graduée, de 2 ml de capacité, avec graduations de 0,1 ml, ISO 835 , classe A ou classe AS.
[4]
6.5 Éprouvette graduée, de 500 ml de capacité, ISO 4788 , classe A.
6.6 pH-mètre, avec électrode combinée en verre.
6.7 Membranes de filtration de 1,2 µm et 0,5 µm, nylon 6-6 ou équivalent, avec un équipement de
filtration pour clarifier l'éluant CLHP.
6.8 Centrifugeuse, pouvant contenir d
...