ISO 2293:1976

Meat and meat products — Aerobic count at 30 degrees C (Reference method)

Viandes et produits à base de viande — Dénombrement des germes aérobies à 30 degrés C (Méthode de référence)

General Information

• Status: Withdrawn
• Publication Date: 31-Mar-1976
• Withdrawal Date: 31-Mar-1976
• ICS: 07.100.30 - Food microbiology
• Technical Committee: ISO/TC 34/SC 6 - Meat, poultry, fish, eggs and their products
• Drafting Committee: ISO/TC 34/SC 6 - Meat, poultry, fish, eggs and their products
• Current Stage: 9599 - Withdrawal of International Standard
• Completion Date: 01-Aug-1988

Relations

• Revised: ISO 2293:1988 - Meat and meat products — Enumeration of micro-organisms — Colony count technique at 30 degrees C (Reference method)
• Effective Date: 15-Apr-2008

Standards Content (Sample)

I N T E R NAT I O N A 1 STAN DARD 2293
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION .MEX&YHAPOLlHAR OPrAHM3AUMI no CTAHiiAPTH3AUHH .ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
L
Meat and meat products - Aerobic count at 30 "C
(Reference method)
Viandes et produits à base de viande - Dénombrement des germes aérobies à 30 "C
(Méthode de référence)
First edition - 1976-04-01
-
w
1
UDC 637.512.7 Ref. No. IS0 2293-1976 (E)
CD
w
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Descriptors : meat, meat products, microbiological analysis, counting, aerobic bacteria
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Q,
N
N
Price based on 3 pages

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FOREWORD
IS0 (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation
of national standards institutes (IS0 Member Bodies). The work of developing
International Standards is carried out through IS0 Technical Committees. Every
Member Body interested in a subject for which a Technical Committee has been set
up has the right to be represented on that Committee. International organizations,
governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
Draft International Standards adopted by the Technical Committees are circulated
to the Member Bodies for approval before their acceptance as International
Standards by the IS0 Council.
International Standard IS0 2293 was drawn up by Technical Committee
ISO/TC 34, Agricultural food products, and circulated to the Member Bodies in
April 1971.
It has been approved by the Member Bodies of the following countries
Germany Portugal
Austral i a
Hungary South Africa, Rep. of
Austria
India Spain
Belgium
I ran Sweden
Brazil
Ireland Turkey
Bulgaria
Israel United Kingdom
Chile
Netherlands
Czechoslovakia
Egypt, Arab Rep. of Poland
The Member Bodies of the following countries expressed disapproval of the
document on technical grounds :
France
New Zealand
0 International Organization for Standardization, 1976
Printed in Switzerland

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I NTE RNATI ON AL STANDARD IS0 2293-1976 (E)
Meat and meat products - Aerobic count at 38 "C
(Reference method)
5 CULTURE MEDIUM AND DILUTION FLUID
L 1 SCOPE AND FIELD OF APPLICATION
This International Standard specifies a reference method
5.1 Basic materials
for the determination of the number of viable aerobic
micro-organisms in meat and meat products.
For uniformity of results, it is recommended that either
dehydrated culture medium components of uniform quality
The method can be applied to all kinds of meat and meat
and analytical grade chemicals, or a dehydrated complete
prod uc ts.
medium be used.
The basic materials, water, peptone, tryptone and yeast
extract powder, shall be of a quality recognized as suitable
2 REFERENCES
for microbiological testing.
IS0 31 00, Meat and meat products - Sampling.
5.2 Culture medium
The culture medium prescribed in this method is the
standard methods agar (American Public Health Association
3 DEFINITIONS
(19601, "Standard methods for the examination of dairy
3.1 aerobic micro-organisms : Micro-organisms which grow
products", 1 Ith edition, APHA Inc., New York, U.S.A.).
under aerobic conditions when the test is carried out in
accordance with the method described.
L
5.2.1 Composition
3.2 aerobic count : The determination of the number of
Agar 15.0 g
viable aerobic micro-organisms per gram of meat or meat
Yeast extract, powder 2,5 9
product that is found when the test is carried out in
Tryptone 50 g
accordance with the method described.
Glucose 1.0 9
Water 1000ml
5.2.2 Preparation of the culture medium
4 PRINCIPLE
Dissolve the dehydrated culture medium components or the
Mincing of the meat or meat product, followed by
dehydrated complete medium in the water, by boiling.
maceration in a mechanical blender with a sterile diluent.
Preparation from the macerate of decimal dilutions.
Adjust the pH so that after sterilization it is 7,O 2 0,l at
40 OC.
Spreading of 0,l ml portions of the dilutions on agar plates
of a non-selective medium and, concurrently, transfer of
Transfer the culture medium to tubes or flasks (6.2.1) of
1 ml portions of the undiluted macerate to empty Petri
not more than 500 ml capacity and sterilize them with their
dishes, into which a non-selective medium is poured.
contents by heating in an autoclave (6.1.3) for 20 min at
121 2 1 Oc.
Incubation at 30 OC under aerobic conditions for 3 days.
Calculation, from the number of colonies per Petri dish, of The sterility of the medium shall be checked by incubating
the number of viable aerobic micro-organisms per gram of one plate with medium only, for 3 days at 30 OC at the
sample. same time as the inoculated plates.
1

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IS0 2293-1976 (E)
5.2.3 Preparation of the agar plates 6.2 Glassware
To sterile Petri dishes (6.2.3) add about 15 ml of the
The glassware shall be resistant to repeated sterilization.
melted culture medium (5.2) at a temperature of
approximately 45 OC, and allow to solidify. Plates prepared 6.2.1 Culture tubes and flasks for sterilization and storage
in advance shall not be kept longer than 4 h at room of the culture medium and dilution fluid, and for preparing
temperature or 1 day in a refrigerator.
dilutions.
Immediately before use, dry the plates, preferably with the
6.2.2 Graduated pipettes, with a nominal capacity of 1 ml,
lids off and the agar surface downwards, in an oven or
subdivided in 0,l ml and with an outflow opening of
incubator (6.1.4) at a temperature of 50 "C for 30 min.
diameter 2 to 3 mm.
5.3 Dilution fluid
6.2.3 Petri dishes, glass, with the following dimensions :
5.3.1 Composition Dish, internal diameter 90 I2 mm;
external height not less than 18 mm;
Peptone 1.0 9
the rim shall be ground in a plane parallel to the base;
Sodium chloride (NaCl) 8,s g
the bottom of the dish shall be flat and be parallel to
Water 1000ml
the base.
Lid, external diameter not more than 102 mm.
5.3.2 Preparation of the dilution fluid
Plastics Petri dishes, though of slightly different
Dissolve the components in the water, by boiling.
dimensions, may also be used.
Adjust the pH so that after sterilization it is 7.0 * 0.1 at
20 Oc.
6.2.4 Glass spreaders (hockey sticks), made from glass rod
approximately 3,5 mm in diameter and 200 mm long, bent
5.3.3 Preparation of dilution tubes and flasks
at right angles about 30mm from one end; the cut ends
shall be made smooth by heating.
Transfer a part of the dilution fluid into culture flasks
(6.2.1) in quantities of 100 to 300 ml, for maceration.
6.3
...

__
NORME INTERNATIONALE @ 2293
'*E&
-
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION .çltY.lYHAPULlHAR OPI AHM3AUMR il0 CTAHnAPTM3AUMM .ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Viandes et produits à base de viande - Dénombrement des
L
germes aérobies à 30 "C (Méthode de référence)
Meat and meat products - Aerobic count at 30 "C (Reference method)
Première edition - 1976-04-01
LL
-
CDU 637.512.7 Réf. no : IS0 2293-1976 (F)
Co
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Descripteurs : viande, produit à base de viande, analyse microbiologique, comptage, bactérie aerobie.
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Prix base sur 3 pages

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AVANT-PROPOS
L‘ISO (Organisation Internationale de Normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (Comités Membres ISO). L‘élaboration de
Normes Internationales est confiée aux Comités Techniques ISO. Chaque Comité
a le droit de faire partie du Comité Technique
Membre intéressé par une étude
correspondant. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO, participent égaiement aux travaux.
Les Projets de Normes Internationales adoptés par les Comités Techniques sont
soumis aux Comités Membres pour approbation, avant leur acceptation comme
Normes Internationales par le Conseil de I’ISO.
La Norme Internationale IS0 2293 a été établie par le Comité Technique
ISO/TC 34, Produits agricoles alimentaires, et soumise aux Comités Membres en
1971.
avril
Elle a été approuvée par les Comités Membres des pays suivants :
Afrique du Sud, Rép. d’
Égypte, Rép. arabe d‘ Pologne
Allemagne
Espagne Portugal
Australie Hongrie Roy au me-U n i
Autriche Inde Suède
Belgique Iran Tchécoslovaquie
Irlande Turquie
Brésil
Bulgarie Israël
Chili Pays-Bas
Les Comités Membres des pays suivants ont désapprouvé le document pour des
raisons techniques :
France
Nouvelle-Zélande
Organisation Internationale de Normalisation, 1976
Irnwirné en Suisse

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NORME INTERNATIONALE IS0 2293-1976 (F)
Viandes et produits à base de viande - Dénombrement des
à 30 "C (Méthode de référence)
germes aérobies
4 PRINCIPE
1 OBJET ET DOMAINE D'APPLICATION
Hachage de la viande ou du produit à base de viande suivi
La présente Norme Internationale spécifie une méthode de
avec un
de macératior! dans un homogénéisateur mécanique
référence pour le dénombrement des micro-organismes
et produits à base de diluant stérile. À partir de la suspension obtenue,
aérobies revivifiables dans les viandes
préparation de dilutions décimales, étalement de fractions
viande.
de 0,l ml de ces dilutions sur des plaques de gélose d'un
La méthode est applicable à toutes les catégories de viandes
milieu de culture non sélectif et, simultanément,
et de produits à base de viande.
transvasement de quantités de 1 ml de la suspension non
diluée dans des boîtes de Pétri vides, dans lesquelles est
versé un milieu non sélectif.
Incubation à 30 "C en milieu aérobie durant 3 jours.
2 RÉFÉRENCES
Calcul, à partir du nombre de colonies par boîte de Pétri,
IS0 3100, Viandes et produits 2 base de viande -
du nombre de micro-organismes aérobies revivifiables par
Échantillonnage.
gramme d'échantillon.
5 MILIEU DE CULTURE ET DILUANT
3 DÉFINITIONS
5.1 Composants de base
3.1 micro-organismes aérobies : Micro-organismes croissant
Pour améliorer l'uniformité des résultats, il est recommandé
est effectue
dans des conditions aérobies, lorsque l'essai
d'utiliser des composants de milieux de culture déshydratés
la méthode décrite.
suivant
de qualité canstante et des produits chimiques de pureté
analytique, ou d'utiliser un milieu complet déshydraté.
3.2 dénombrement des germes aérobies : Détermination
du nombre de micro-organismes aérobies revivifiables par Les composants de base, eau, peptone, tryptone et extrait
gramme de viande ou produits à base de viande, trouvés de levure en poudre, doivent être d'une qualité reconnue
lorsque l'essai est effectué suivant la méthode décrite. acceptable pour essais microbiologiques.
1

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IS0 2293-1976 (FI
5.3.3 Préparation des tubes et des fioles de dilution
5.2 Milieu de culture
Transvaser une partie du diluant dans des fioles de culture
Le milieu de culture recommandé dans cette méthode est le
#standard methods agar)) (American Public Health Associ- (6.2.1) en quantités de 100 à 300 ml, pour la macération.
ation (1960) : tStandard methods for the examination of Transvaser le reste dans des tubes ou fioles de culture en
dairy products)) - Ilème édition, APHA Inc, New York, quantités telles que chaque tube ou fiole de culture
U.S.A.). contienne 9,0 ml de diluant après stérilisation.
Stériliser le diluant par chauffage à l‘autoclave (6.1.3)
durant 20 min à 121 f 1 OC.
5.2.1 Composition
Gélose 15,O g
Extrait de levure en poudre 2,s g
Tryptone 5,O g
6 APPAREILLAGE
Glucose 1,o 9
Eau 1000ml
6.1 Appareils
6.1.1 Hachoir mécanique à viande, taille de laboratoire,
5.2.2 Préparation du milieu de culture
stérile, pourvu d’une plaque à trous de diamètre maximal
4 mm.
i.
Dissoudre les composants du milieu de culture déshydratés
le milieu complet déshydraté dans de l’eau à ébullition.
ou
6.1.2 Homogénéisateur mécanique, dont la vitesse de
Ajuster le pH de facon qu‘après stérilisation, il soit de
rotation est comprise entre 8 O00 tr/min et 45 O00 tr/min,
7,O f 0,l à 40 OC.
avec bols en verre ou en métal, d’une capacité appropriée,
munis de couvercles, et résistant aux conditions de
Transvaser le milieu de culture dans des tubes OU des fioles
stérilisation.
(6.2.1) de capacité ne dépassant pas 500 ml, et les stériliser
avec leur contenu par chauffage à l‘autoclave (6.1.3) à
6.1.3 Autoclave et, si nécessaire, étuve pour la stérilisation
121 f 1 “C durant 20 min.
de la verrerie, des bols de I’homogénéisateur, des milieux de
La stérilité du milieu doit être vérifiée en incubant, en
culture, du diluant, etc.
même temps que les boîtes inoculées, une boîte contenant
le milieu seul, durant 3 jours, à 30 OC.
6.1.4 Enceinte de séchage ou incubateur, pour sécher la
surface des géloses, maintenus de préférence à une
température de 50 OC.
5.2.3 Préparation des plaques de gélose
6.1.5 Étuve, pour maintenir les boîtes ensemencées à une
Dans des boîtes de Pétri (6.2.3) stériles, verser environ
15 ml du milieu de culture (5.2) liquéfié à une température température de 30 f 1 OC.
d’environ 45 OC, et laisser se solidifier. Les boîtes préparées
à l’avance ne doivent pas être conservées à la température
6.1.6 Bains d‘eau, pour le chauffage et le refroidissement
du laboratoire durant plus de 4 h à température ambiante
des solutions et des milieux de culture liquéfiés à la v
ou plus de 1 jour dans un réfrigérateur.
température appropriée.
Immédiatement avant l’emploi, faire sécher les boîtes, de
6.2 Verrerie
préférence ouvertes, avec la surface de la gélose orientée
vers le bas, dans une étuve ou un incubateur (6.1.4) à une
La verrerie doit résister à la stérilisation répétée.
température de 50 OC, durant 30 min.
6.2.1 Tubes et fioles de culture, pour la stérilisation et
l’entreposage des milieux de culture et du diluant, et pour
5.3 Diluant
préparer les dilutions.
5.3.1 Composition 6.2.2 Pipettes gr
...