Milk and milk products -- Determination of milk fat purity by gas chromatographic analysis of triglycerides

This document specifies a reference method for the determination of milk fat purity using gas chromatographic analysis of triglycerides. The method utilizes the differences in triglyceride fingerprint of milk fat from the individual triglyceride fingerprints of other fats and oils to determine samples which are outside the range normally observed for milk fat. This is achieved by using the defined triglyceride formulae based on the normalized weighted sum of individual triglyceride peaks which are sensitive to the integrity of the milk[6][7]. The integrity of the milk fat can be determined by comparing the result of these formulae with those previously observed for a range of pure milk fat samples[12]. Both vegetable fats and animal fats such as beef tallow and lard can be detected. The method is applicable to bulk milk, or products made thereof, irrespective of the variation in common feeding practices, breed or lactation conditions. In particular, the method is applicable to fat extracted from milk products purporting to contain pure milk fat with unchanged composition, such as butter, cream, milk and milk powder. Because a false-positive result can occur, the method does not apply to milk fat related to these circumstances: a) obtained from bovine milk other than cow's milk; b) obtained from single cows; c) obtained from cows whose diet contained a particularly high proportion of vegetable oils such as rapeseed, cotton or palm oil, etc.; d) obtained from cows suffering from serious underfeeding (strong energy deficit); e) obtained from colostrum; f) subjected to technological treatment such as removal of cholesterol or fractionation; g) obtained from skim milk, buttermilk or whey; h) obtained from cheeses showing increased lipolysis; i) extracted using the Gerber, Weibull?Berntrop or Schmid?Bondzynski?Ratzlaff methods, or that has been isolated using detergents (e.g. the Bureau of Dairy Industries method). With the extraction methods specified in i), substantial quantities of partial glycerides or phospholipids can pass into the fat phase. NOTE 1 In nature, butyric (n-butanoic) acid (C4) occurs exclusively in milk fat and enables quantitative estimations of low to moderate amounts of milk fat in vegetable and animal fats to be made. Due to the large variation of C4, for which the approximate content ranges from 3,1 % fat mass fraction to 3,8 % fat mass fraction, it is difficult to provide qualitative and quantitative information for foreign fat to pure milk fat ratios of up to 20 % mass fraction[11]. NOTE 2 In practice, quantitative results cannot be derived from the sterol content of vegetable fats, because they depend on production and processing conditions. Furthermore, the qualitative determination of foreign fat using sterols is ambiguous. NOTE 3 Due to special feeding practices such as those related to c) and d), false-positive results have sometimes been reported for milk from certain Asian regions[15]. Moreover, grass-only diets such as mountain and, in particular, highland pasture feeding sometimes cause false-positive results, which can be substantiated by a content of conjugated linoleic acid (C18:2 c9t11) of ≥ 1,3 % fatty acid mass fraction[16][17]. Nevertheless, results conforming to the criteria of milk fat purity specified in this document are accepted, even if samples were undoubtedly produced under conditions reported in this note, including those described in h). NOTE 4 In cases where a positive result is suspected to be caused by circumstances related to c) or d), another analytical method, such as fatty acid or sterol analysis, can be applied to confirm the finding. Due to similar or increased limitations (e.g. as described in NOTE 1 and NOTE 2), a negative result obtained by another method is not appropriate to contrastingly confirm milk fat purity.

Lait et produits laitiers -- Détermination de la pureté des matières grasses laitières par analyse chromatographique en phase gazeuse des triglycérides

Le présent document spécifie une méthode de référence pour la détermination de la pureté des matičres grasses laitičres par analyse chromatographique en phase gazeuse des triglycérides. La méthode utilise les différences d'empreintes des triglycérides présents dans les matičres grasses laitičres par rapport aux empreintes des triglycérides individuels des autres matičres grasses et huiles pour déterminer des échantillons se situant en dehors de la plage normalement observée pour les matičres grasses laitičres. Cela est réalisé en utilisant les formules de triglycérides définies basées sur la somme pondérée normalisée des pics de triglycérides individuels, qui sont sensibles ŕ l'intégrité du lait[6][7]. L'intégrité des matičres grasses laitičres peut ętre déterminée en comparant les résultats de ces formules ŕ ceux précédemment observés pour une gamme d'échantillons de matičres grasses laitičres pures[12]. Il est possible de détecter des matičres grasses d'origines végétale et animale telles que la graisse de bœuf et le saindoux. La méthode s'applique au lait en vrac, ou aux produits laitiers dérivés, indépendamment de la variation des pratiques d'alimentation courantes et des conditions d'élevage ou de lactation. Elle s'applique en particulier aux matičres grasses extraites de produits laitiers supposés contenir des matičres grasses laitičres pures, présentant une composition non modifiée, comme le beurre, la crčme, le lait et le lait en poudre. Un résultat faux positif pouvant ętre obtenu, la méthode n'est pas applicable ŕ la matičre grasse laitičre liée aux circonstances listées ci-aprčs: a) issue de lait de bovin autre que le lait de vache; b) issue de vaches individuelles; c) issue de vaches dont l'alimentation contenait une proportion particuličrement élevée d'huiles végétales telles que l'huile de colza, l'huile de coton ou de palme, etc.; d) issue de vaches souffrant d'une grave sous-alimentation (puissant déficit énergétique); e) issue du colostrum; f) soumise ŕ un traitement technologique tel que l'élimination du cholestérol ou le fractionnement; g) issue du lait écrémé, du lait battu (babeurre) ou du lactosérum; h) issue de fromages présentant une lipolyse importante; i) extraite selon les méthodes Gerber, Weibull?Berntrop ou Schmid?Bondzynski?Ratzlaff, ou isolée au moyen de détergents [par exemple méthode BDI (Bureau of Dairy Industries)]. Avec les méthodes d'extraction spécifiées en i), d'importantes quantités de glycérides ou phospholipides partiels peuvent passer dans la phase grasse. NOTE 1 Dans la nature, l'acide butyrique (n-butanoďque) (C4) se trouve exclusivement dans les matičres grasses laitičres et permet d'effectuer des estimations quantitatives de petites et moyennes quantités de matičres grasses laitičres dans les graisses végétales et animales. En raison de la grande variation de C4, pour lequel la fraction massique est comprise approximativement entre 3,1 % et 3,8 % de la matičre grasse, des informations qualitatives et quantitatives peuvent difficilement ętre fournies lorsque le rapport des matičres grasses étrangčres aux matičres grasses laitičres pures atteint jusqu'ŕ 20 % en fraction massique[11]. NOTE 2 Dans la pratique, des résultats quantitatifs ne peuvent pas ętre déduits de la teneur en stérols des matičres grasses végétales, étant donné que celles-ci sont fonction des conditions de production et de traitement. En outre, la détermination qualitative de matičres grasses étrangčres au moyen de stérols est ambiguë. NOTE 3 En raison de pratiques d'alimentation spéciales telles que liées ŕ c) et d), des résultats faux positifs ont parfois été signalés pour le lait provenant de certaines régions d'Asie[15]. En outre, l'alimentation ŕ base d'herbe uniquement, comme c'est le cas dans les régions montagneuses et en particulier dans les pâturages d'altitude, peut parfois entraîner des résultats faux positifs, ce qui peut ętre justifié par une teneur en acide linoléique conjugué (C18:2 c

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Status
Published
Publication Date
27-May-2019
Current Stage
6060 - International Standard published
Start Date
26-Apr-2019
Completion Date
28-May-2019
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ISO 17678:2019 - Milk and milk products -- Determination of milk fat purity by gas chromatographic analysis of triglycerides
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ISO 17678:2019 - Lait et produits laitiers -- Détermination de la pureté des matieres grasses laitieres par analyse chromatographique en phase gazeuse des triglycérides
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Standards Content (sample)

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 17678
IDF 202
Second edition
2019-06
Milk and milk products —
Determination of milk fat purity
by gas chromatographic analysis of
triglycerides
Lait et produits laitiers — Détermination de la pureté des matières
grasses laitières par analyse chromatographique en phase gazeuse
des triglycérides
Reference numbers
ISO 17678:2019(E)
IDF 202:2019(E)
ISO and IDF 2019
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ISO 17678:2019(E)
IDF 202:2019(E)
COPYRIGHT PROTECTED DOCUMENT
© ISO and IDF 2019

All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may

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Published in Switzerland
ii © ISO and IDF 2019 – All rights reserved
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ISO 17678:2019(E)
IDF 202:2019(E)
Contents Page

Foreword ........................................................................................................................................................................................................................................iv

1 Scope ................................................................................................................................................................................................................................. 1

2 Normative references ...................................................................................................................................................................................... 2

3 Terms and definitions ..................................................................................................................................................................................... 2

4 Principle ........................................................................................................................................................................................................................ 2

5 Reagents ........................................................................................................................................................................................................................ 3

6 Apparatus ..................................................................................................................................................................................................................... 3

7 Sampling ........................................................................................................................................................................................................................ 4

8 Procedure..................................................................................................................................................................................................................... 5

8.1 Preparation of test samples ......................................................................................................................................................... 5

8.1.1 General...................................................................................................................................................................................... 5

8.1.2 Isolation from butter or butteroil...................................................................................................................... 5

8.1.3 Extraction according to the Röse–Gottlieb gravimetric method ............................................ 5

8.1.4 Extraction from milk using silica gel columns ....................................................................................... 5

8.1.5 Extraction from cheese ............................................................................................................................................... 6

8.2 Preparation of fat sample solution ........................................................................................................................................ 6

8.3 Chromatographic triglyceride determination .............................................................................................................. 6

8.3.1 Baseline drift ....................................................................................................................................................................... 6

8.3.2 Injection technique ........................................................................................................................................................ 6

8.3.3 Calibration ............................................................................................................................................................................. 6

8.3.4 Chromatographic conditions ................................................................................................................................. 7

9 Integration, evaluation and control of the analytical performance ................................................................8

10 Calculation and expression of results ..........................................................................................................................................10

10.1 Triglyceride composition ............................................................................................................................................................10

10.1.1 Calculation ..........................................................................................................................................................................10

10.1.2 Expression of test results ......................................................................................................................................10

10.2 S-values .......................................................................................................................................................................................................11

10.2.1 Calculation ..........................................................................................................................................................................11

10.2.2 Expression of test results ......................................................................................................................................11

10.3 Detection of foreign fat..................................................................................................................................................................11

11 Precision ....................................................................................................................................................................................................................12

11.1 Interlaboratory test..........................................................................................................................................................................12

11.2 Repeatability ..........................................................................................................................................................................................12

11.3 Reproducibility ....................................................................................................................................................................................12

12 Test report ................................................................................................................................................................................................................13

Annex A (normative) Preparation of the packed column ............................................................................................................14

Annex B (informative) Quantification of the foreign fat content .........................................................................................18

Annex C (informative) Uncertainty of measurement .......................................................................................................................20

Annex D (informative) Interlaboratory test ...............................................................................................................................................21

Bibliography .............................................................................................................................................................................................................................23

© ISO and IDF 2019 – All rights reserved iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 17678:2019(E)
IDF 202:2019(E)
Foreword

ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national

standards bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally

carried out through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which

a technical committee has been established has the right to be represented on that committee.

International organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part

in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all

matters of electrotechnical standardization.

The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are

described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the

different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the

editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/directives).

Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of

patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of

any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or

on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/patents).

Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not

constitute an endorsement.

For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and

expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the

World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see www .iso

.org/iso/foreword .html.

This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 5,

Milk and milk products, and the International Dairy Federation (IDF). It is being published jointly by ISO

and IDF.

This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 17678 | IDF 202:2010), which has been

technically revised. The following changes have been made:

— the Scope has been restricted to exclude milk fat obtained from special feeding practices and

from whey;

— the Scope has been extended to include milk fat obtained from cheese showing low lipolysis;

— the Normative references have been updated to reflect the modified scope;
— a method has been added for the fat extraction from cheese;
— the Bibliography has been expanded.

Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A

complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/members .html.
iv © ISO and IDF 2019 – All rights reserved
---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 17678:2019(E)
IDF 202:2019(E)

IDF (the International Dairy Federation) is a non-profit private sector organization representing the

interests of various stakeholders in dairying at the global level. IDF members are organized in National

Committees, which are national associations composed of representatives of dairy-related national

interest groups including dairy farmers, dairy processing industry, dairy suppliers, academics and

governments/food control authorities.

ISO and IDF collaborate closely on all matters of standardization relating to methods of analysis

and sampling for milk and milk products. Since 2001, ISO and IDF jointly publish their International

Standards using the logos and reference numbers of both organizations.

Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of

patent rights. IDF shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of

any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or

on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/patents).

Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not

constitute an endorsement.

This document was prepared by the IDF Standing Committee on Analytical Methods for Composition and

ISO Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 5, Milk and milk products. It is

being published jointly by ISO and IDF.

The work was carried out by the Joint ISO/IDF Action Team C23 of the Standing Committee on Analytical

Methods for Composition under the aegis of its project leader, Mr J. Molkentin (DE).

© ISO and IDF 2019 – All rights reserved v
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ISO 17678:2019(E)
INTERNATIONAL STANDARD
IDF 202:2019(E)
Milk and milk products — Determination of milk fat purity
by gas chromatographic analysis of triglycerides
1 Scope

This document specifies a reference method for the determination of milk fat purity using gas

chromatographic analysis of triglycerides. The method utilizes the differences in triglyceride

fingerprint of milk fat from the individual triglyceride fingerprints of other fats and oils to determine

samples which are outside the range normally observed for milk fat. This is achieved by using the

defined triglyceride formulae based on the normalized weighted sum of individual triglyceride peaks

[6][7]

which are sensitive to the integrity of the milk . The integrity of the milk fat can be determined

by comparing the result of these formulae with those previously observed for a range of pure milk fat

[12]

samples . Both vegetable fats and animal fats such as beef tallow and lard can be detected.

The method is applicable to bulk milk, or products made thereof, irrespective of the variation in

common feeding practices, breed or lactation conditions. In particular, the method is applicable to fat

extracted from milk products purporting to contain pure milk fat with unchanged composition, such as

butter, cream, milk and milk powder.

Because a false-positive result can occur, the method does not apply to milk fat related to these

circumstances:
a) obtained from bovine milk other than cow’s milk;
b) obtained from single cows;

c) obtained from cows whose diet contained a particularly high proportion of vegetable oils such as

rapeseed, cotton or palm oil, etc.;

d) obtained from cows suffering from serious underfeeding (strong energy deficit);

e) obtained from colostrum;

f) subjected to technological treatment such as removal of cholesterol or fractionation;

g) obtained from skim milk, buttermilk or whey;
h) obtained from cheeses showing increased lipolysis;

i) extracted using the Gerber, Weibull–Berntrop or Schmid–Bondzynski–Ratzlaff methods, or that

has been isolated using detergents (e.g. the Bureau of Dairy Industries method).

With the extraction methods specified in i), substantial quantities of partial glycerides or phospholipids

can pass into the fat phase.

NOTE 1 In nature, butyric (n-butanoic) acid (C4) occurs exclusively in milk fat and enables quantitative

estimations of low to moderate amounts of milk fat in vegetable and animal fats to be made. Due to the large

variation of C4, for which the approximate content ranges from 3,1 % fat mass fraction to 3,8 % fat mass fraction,

it is difficult to provide qualitative and quantitative information for foreign fat to pure milk fat ratios of up to

[11]
20 % mass fraction .

NOTE 2 In practice, quantitative results cannot be derived from the sterol content of vegetable fats, because

they depend on production and processing conditions. Furthermore, the qualitative determination of foreign fat

using sterols is ambiguous.
© ISO and IDF 2019 – All rights reserved 1
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ISO 17678:2019(E)
IDF 202:2019(E)

NOTE 3 Due to special feeding practices such as those related to c) and d), false-positive results have

[15]

sometimes been reported for milk from certain Asian regions . Moreover, grass-only diets such as mountain

and, in particular, highland pasture feeding sometimes cause false-positive results, which can be substantiated

[16][17]

by a content of conjugated linoleic acid (C18:2 c9t11) of ≥ 1,3 % fatty acid mass fraction . Nevertheless,

results conforming to the criteria of milk fat purity specified in this document are accepted, even if samples were

undoubtedly produced under conditions reported in this note, including those described in h).

NOTE 4 In cases where a positive result is suspected to be caused by circumstances related to c) or d), another

analytical method, such as fatty acid or sterol analysis, can be applied to confirm the finding. Due to similar or

increased limitations (e.g. as described in NOTE 1 and NOTE 2), a negative result obtained by another method is

not appropriate to contrastingly confirm milk fat purity.
2 Normative references

The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content

constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For

undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.

ISO 1211 | IDF 1, Milk — Determination of fat content — Gravimetric method (Reference method)

ISO 1740 | IDF 6, Milkfat products and butter — Determination of fat acidity (Reference method)

ISO 1736 | IDF 9, Dried milk and dried milk products — Determination of fat content — Gravimetric method

(Reference method)

ISO 2450 | IDF 16, Cream — Determination of fat content — Gravimetric method (Reference method)

ISO 3696, Water for analytical laboratory use — Specification and test methods

ISO 7328 | IDF 116, Milk-based edible ices and ice mixes — Determination of fat content — Gravimetric

method (Reference method)

ISO 14156 | IDF 172, Milk and milk products — Extraction methods for lipids and liposoluble compounds

3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.

ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:

— IEC Electropedia: available at http: //www .electropedia .org/
— ISO Online browsing platform: available at https: //www .iso .org/obp
3.1
milk fat purity

absence of vegetable and animal fats determined by the procedure specified in this document

Note 1 to entry: The purity is determined using S-values, which are calculated from the content of triglycerides.

Triglyceride mass fractions are expressed as percentages.
4 Principle

Fat extracted from milk or milk products is analysed by gas chromatography (GC) using a packed

or a short capillary column to determine triglycerides (TGs), separated by total carbon numbers. By

inserting the mass fraction, expressed as a percentage, of fat molecules of different sizes (C24 to C54,

using even C numbers only) into suitable TG formulae, S-values are calculated. If the S-values exceed the

limits established with pure milk fat, the presence of foreign fat is detected.

NOTE 1 The suitability and equivalence of both packed and capillary columns have been demonstrated

[8][9][10]
previously .
2 © ISO and IDF 2019 – All rights reserved
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ISO 17678:2019(E)
IDF 202:2019(E)
NOTE 2 An S-value is the sum of weighted TG mass fractions.
5 Reagents

During the analysis, unless otherwise stated, use only reagents of recognized analytical grade.

5.1 Water, conforming to the requirements of ISO 3696, grade 2.

5.2 Carrier gas, nitrogen or, alternatively, helium or hydrogen, all with a purity of at least 99,995 %

volume fraction.
5.3 Fat standards, as described in 5.3.1 and 5.3.2.

5.3.1 Triglyceride standards, saturated, with a purity of at least 99 % mass fraction, for standardizing

the milk fat standard described in 8.3.3 (suitable products are available commercially).

5.3.2 Cholesterol standard, with a purity of at least 99 % mass fraction, for standardizing the milk fat

standard described in 8.3.3.
5.4 Methanol, with a water content of not more than 0,05 % mass fraction.
5.5 n-Hexane.
5.6 n-Heptane.

5.7 Other gases, hydrogen, purity at least 99,995 % volume fraction, free from organic impurities

(C H < 1 µl/l); synthetic air, free from organic impurities (C H < 1 µl/l).
n m n m
5.8 Anhydrous sodium sulfate.
6 Apparatus
Usual laboratory equipment and, in particular, the following.

6.1 High-temperature gas chromatograph, suitable for use at temperatures of at least 400 °C and

equipped with a flame ionization detector (FID). For capillary GC, an on-column or a programmed

temperature vaporization injector is indispensable while a split injector is unsuitable.

Septa used in the injector shall withstand high temperatures and exhibit a very low degree of “bleeding”.

Always use graphite seals to connect the column as well as injector and/or detector inserts (where

applicable).

6.2 Packed chromatography column, glass, of internal diameter 2 mm and length 500 mm, packed

with a stationary phase of 3 % OV-1 on 125 µm to 150 µm (100 to 120 mesh) Gas ChromQ .

The preparation, silanization, packing and conditioning of the packed column are described in Annex A.

Alternatively, a capillary column (6.3) may be used.

1) Example of a suitable product available commercially. This information is given for the convenience of users of

this document and does not constitute an endorsement by ISO or by IDF of this product.

© ISO and IDF 2019 – All rights reserved 3
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ISO 17678:2019(E)
IDF 202:2019(E)

6.3 Capillary chromatography column, short, e.g. of length 5 m, with a non-polar stationary phase

that can withstand temperatures up to 400 °C or more .

Condition the column by performing 20 analyses of a milk fat solution (see 8.2) within no more than

two days using the settings given in 8.3.4.3. After that, ensure that the response factors (see 8.3.3) are

close to 1 and not higher than 1,250 0.

Because of the variable overlap between C24 and cholesterol, a higher response factor may be accepted

for C24.

Columns with different dimensions and a different non-polar, highly temperature-resistant phase may

be used as long as their performance is consistent with this document. However, the column length is

restricted by the indispensable limitation in resolution as shown in Figure 1. See also 8.3.4.3.

6.4 Extrelut column , capacity 1 ml to 3 ml, filled with silica gel, for the extraction of milk fat in

accordance with 8.1.4 only.

6.5 Graphite seals, capable of withstanding temperatures of at least 400 °C; for the connection of the

GC column as well as for the injector and/or detector inserts.
6.6 Water bath, capable of being maintained at 50 °C ± 2 °C.
6.7 Oven, capable of operating at 50 °C ± 2 °C and 100 °C ± 2 °C.
6.8 Micropipette.
[2]
6.9 Graduated pipette, capacity 5 ml, in accordance with ISO 835 , class A.
6.10 Round-bottomed flask, capacity 50 ml.
6.11 Erlenmeyer flask, nominal capacity 250 ml.
6.12 Funnel.
6.13 Fine-pored filter paper.
6.14 Rotary evaporator.

6.15 Ampoules, nominal capacity 1 ml, fitted with a polytetrafluoroethylene-lined aluminium crimp

cap or screw cap.

6.16 Injection syringe, with syringe plunger not reaching into the tip of the needle (packed column GC).

NOTE With these syringes, better repeatability of the results is obtained.

6.17 Analytical balance, capable of weighing to the nearest 1 mg, with a readability of 0,1 mg.

7 Sampling

Sampling is not part of the method specified in this document. A recommended sampling method is

[1]
given in ISO 707 | IDF 50 .

2) CP-Ultimetal SimDist (5 m, 0,53 mm, 0,17 µm) is an example of a suitable product available commercially. This

information is given for the convenience of users of this document and does not constitute an endorsement by ISO

or by IDF of this product.
4 © ISO and IDF 2019 – All rights reserved
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ISO 17678:2019(E)
IDF 202:2019(E)

A representative sample should be sent to the laboratory. It should not be damaged or changed during

transport or storage.
8 Procedure
8.1 Preparation of test samples
8.1.1 General

For the preparation of test samples, use one of the milk fat isolation or extraction methods specified in

8.1.2 to 8.1.5.
8.1.2 Isolation from butter or butteroil

Melt 50 g to 100 g of test sample in the water bath (6.6) or the oven (6.7) at 50 °C.

Add 0,5 to 1,0 g of sodium sulfate (5.8) to a folded filter paper (6.13). Preheat a 250 ml Erlenmeyer flask

(6.11) and a funnel (6.12) with the filter paper inserted, containing the sodium sulfate, in the oven (6.7)

at 50 °C.

When a limited amount of test sample is available, use a smaller test sample and adapt the procedure

accordingly.

However, note that the handling of a smaller test portion involves a higher risk of obtaining a non-

representative sample.

While keeping the preheated flask, funnel and inserted filter device in the oven, filter the fat layer of the

molten sample without transferring any serum.

NOTE 1 Butter can be obtained from cream by churning and thorough washing of the resulting butter grains.

NOTE 2 The milk fat obtained using the procedure in this subclause is almost free of phospholipids.

8.1.3 Extraction according to the Röse–Gottlieb gravimetric method

Extract the fat fraction from the test sample using the gravimetric method specified in one of

ISO 1211 | IDF 1, ISO 1736 | IDF 9, ISO 2450 | IDF 16 or ISO 7328 | IDF 116.
8.1.4 Extraction from milk using silica gel columns

Temper the milk to 20 °C. Using a micropipette (6.8), add 0,7 ml of the sample thus prepared into a

1 ml to 3 ml Extrelut column (6.4). Allow the sample to distribute uniformly on the silica gel for

approximately 5 min.

To denature the protein–lipid complexes, using the graduated pipette (6.9), add 1,5 ml of methanol

(5.4) into the Extrelut column. Subsequently, extract the fat fraction from the test sample with 20 ml

of n-hexane (5.5). Add the n-hexane slowly in small amounts. Collect the solvent draining off in a 50 ml

round-bottomed flask (6.10) previously dried to a constant, known mass weighed to the nearest 1 mg

and record the mass to 0,1 mg.

Allow the column to drain until empty after the extraction. Distil off the solvents from the eluate on a

rotary evaporator (6.14) with its water bath maintained at between 40 °C and 50 °C.

After distilling off the solvents, dry and subsequently weigh the round-bottomed flask and its contents

to the nearest 1 mg, recording the mass to 0,1 mg. Determine the fat mass yield by subtracting the mass

of the dried empty round-bottomed flask from the mass obtained.
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ISO 17678:2019(E)
IDF 202:2019(E)

Depending on the fat content of the milk and the required concentration of the sample solution,

decide whether it is necessary to combine the yield of two or more extractions to obtain an adequate

amount of fat.
8.1.5 Extraction from cheese

Extract the cheese fat fraction from the test sample using the method specified in ISO 14156 | IDF 172.

With cheeses typically showing increased lipolysis, which often occurs with mould-ripened and long-

ripened cheeses, determine the fat acidity using the method specified in ISO 1740 | IDF 6. If the acidity

[18][19]
is higher than 8 mmol/100 g of fat, the standard is not applicable .
8.2 Preparation of fat sample solution

For gas chromatography with a packed column, prepare a 5 % volume fraction solution of the melted

fat obtained in 8.1.2, 8.1.3, 8.1.4 or 8.1.5 in n-hexane (5.5) or n-heptane (5.6). Depending on the column

dimensions, use a concentration of 1 % [0,53 mm internal diameter (ID), wide-bore] or lower for on-

column injection with a capillary column.

When using the fat sample prepared in 8.1.4, calculate the amount of solvent (5.5 or 5.6) to be added to

the test sample in the flask by equating the mass of fat obtained with its volume.

Completely dissolve the fat in the solvent used. Transfer approximately 0,5 ml to 1 ml of the obtained fat

sample solution into an ampoule (6.15).
8.3 Chromatographic triglyceride determination
8.3.1 Baseline drift

To minimize baseline rising, condition the column as specified in 6.3 (capillary column) or in A.5

(packed column).

NOTE Because of the high column temperature, the analysis of TGs is particularly susceptible to a rise of the

baseline in the high carbon-number range.
8.3.2 Injection technique
8.3.2.1
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 17678
FIL 202
Deuxième édition
2019-05
Lait et produits laitiers —
Détermination de la pureté des
matières grasses laitières par analyse
chromatographique en phase gazeuse
des triglycérides
Milk and milk products — Determination of milk fat purity by gas
chromatographic analysis of triglycerides
Numéros de référence
ISO 17678:2019(F)
FIL 202:2019(F)
ISO et FIL 2019
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FIL 202:2019(F)
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publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,

y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut

être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.

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Sommaire Page

Avant-propos ..............................................................................................................................................................................................................................iv

1 Domaine d’application ................................................................................................................................................................................... 1

2 Références normatives ................................................................................................................................................................................... 2

3 Termes et définitions ....................................................................................................................................................................................... 2

4 Principe .......................................................................................................................................................................................................................... 3

5 Réactifs ........................................................................................................................................................................................................................... 3

6 Appareillage .............................................................................................................................................................................................................. 4

7 Échantillonnage ..................................................................................................................................................................................................... 5

8 Mode opératoire.................................................................................................................................................................................................... 5

8.1 Préparation des échantillons pour essai .......................................................................................................................... 5

8.1.1 Généralités ............................................................................................................................................................................ 5

8.1.2 Séparation des matières grasses laitières du beurre ou de l’huile de beurre ............ 5

8.1.3 Extraction conformément à la méthode gravimétrique de Röse–Gottlieb .................... 6

8.1.4 Extraction du lait au moyen de colonnes de gel de silice .............................................................. 6

8.1.5 Extraction à partir de fromage............................................................................................................................. 6

8.2 Préparation de l’échantillon de matière grasse .......................................................................................................... 6

8.3 Analyse chromatographique des triglycérides ............................................................................................................ 7

8.3.1 Dérive de la ligne de base ......................................................................................................................................... 7

8.3.2 Technique d’injection ................................................................................................................................................... 7

8.3.3 Étalonnage ............................................................................................................................................................................. 7

8.3.4 Conditions chromatographiques ....................................................................................................................... 8

9 Intégration, évaluation et contrôle de la performance analytique ..................................................................9

10 Calcul et expression des résultats ...................................................................................................................................................11

10.1 Composition des triglycérides ................................................................................................................................................11

10.1.1 Calcul .......................................................................................................................................................................................11

10.1.2 Expression des résultats d’essai ......................................................................................................................11

10.2 Valeurs de S ............................................................................................................................................................................................. 12

10.2.1 Calcul .......................................................................................................................................................................................12

10.2.2 Expression des résultats d’essai ......................................................................................................................12

10.3 Détection des matières grasses étrangères .................................................................................................................12

11 Fidélité .........................................................................................................................................................................................................................13

11.1 Essai interlaboratoires ..................................................................................................................................................................13

11.2 Répétabilité .............................................................................................................................................................................................13

11.3 Reproductibilité ..................................................................................................................................................................................13

12 Rapport d’essai ....................................................................................................................................................................................................14

Annexe A (normative) Préparation de la colonne remplie ........................................................................................................15

Annexe B (informative) Quantification des matières grasses étrangères ..................................................................19

Annexe C (informative) Incertitude de mesure ......................................................................................................................................21

Annexe D (informative) Essai interlaboratoires ....................................................................................................................................22

Bibliographie ...........................................................................................................................................................................................................................25

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FIL 202:2019(F)
Avant-propos

L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes

nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est

en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude

a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,

gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.

L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui

concerne la normalisation électrotechnique.

Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont

décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents

critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été

rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www

.iso .org/directives).

L'attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de

droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable

de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant

les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de

l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de

brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/brevets).

Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données

pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un

engagement.

Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions

spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion

de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles

techniques au commerce (OTC), voir www .iso .org/avant -propos.

Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité

SC 5, Lait et produits laitiers et la Fédération internationale du lait (FIL). Il est publié conjointement par

l'ISO et la FIL.

Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 17678 | FIL 202:2010) qui a fait

l’objet d’une révision technique. Les principales modifications par rapport à l’édition précédente sont

les suivantes:

— le Domaine d’application a été réduit afin d’exclure les matières grasses laitières issues de pratiques

d’alimentation spéciales et de lactosérum;

— le Domaine d’application a été étendu afin d’inclure les matières grasses laitières issues de fromages

présentant une faible lipolyse;

— les Références normatives ont été actualisées afin de refléter le domaine d’application modifié;

— une méthode a été ajoutée pour l’extraction des matières grasses à partir de fromage;

— la Bibliographie a été étendue.

Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent

document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes

se trouve à l’adresse www .iso .org/fr/members .html.
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ISO 17678:2019(F)
FIL 202:2019(F)

La FIL (Fédération internationale du lait) est une organisation privée à but non lucratif qui représente

les intérêts des divers acteurs de la filière laitière au niveau international. Les membres de la FIL sont

organisés en comités nationaux, qui sont des associations nationales composées de représentants de

groupes d’intérêt nationaux dans le secteur des produits laitiers, incluant des producteurs laitiers, des

acteurs de l'industrie de transformation des produits laitiers, des fournisseurs de produits laitiers, des

universitaires et des représentants des gouvernements/autorités chargées du contrôle des aliments.

L’ISO et la FIL collaborent étroitement sur toutes les activités de normalisation concernant les méthodes

d'analyse et d'échantillonnage du lait et des produits laitiers. Depuis 2001, l’ISO et la FIL publient

conjointement leurs Normes internationales en utilisant les logos et les numéros de référence des deux

organisations.

L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire

l'objet de droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. La FIL ne saurait être tenue pour

responsable de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails

concernant les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés

lors de l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations

de brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/brevets).

Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données

pour information, par souci de commodité à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un

engagement.

Le présent document a été élaboré par le Comité permanent de la FIL chargé des Méthodes d’analyse de

la composition de la Fédération internationale du lait (FIL) et le comité technique ISO/TC 34, Produits

alimentaires, sous-comité SC 5, Lait et produits laitiers. Il est publié conjointement par l'ISO et la FIL.

Le travail a été confié à l’Équipe d’action conjointe ISO/FIL C23, du Comité permanent de la FIL chargé

des Méthodes d’analyse de la composition, sous la conduite de son chef de projet, M. J. Molkentin (DE).

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ISO 17678:2019(F)
NORME INTERNATIONALE
FIL 202:2019(F)
Lait et produits laitiers — Détermination de la pureté des
matières grasses laitières par analyse chromatographique
en phase gazeuse des triglycérides
1 Domaine d’application

Le présent document spécifie une méthode de référence pour la détermination de la pureté des matières

grasses laitières par analyse chromatographique en phase gazeuse des triglycérides. La méthode utilise

les différences d’empreintes des triglycérides présents dans les matières grasses laitières par rapport

aux empreintes des triglycérides individuels des autres matières grasses et huiles pour déterminer des

échantillons se situant en dehors de la plage normalement observée pour les matières grasses laitières.

Cela est réalisé en utilisant les formules de triglycérides définies basées sur la somme pondérée

[6][7]

normalisée des pics de triglycérides individuels, qui sont sensibles à l’intégrité du lait . L’intégrité

des matières grasses laitières peut être déterminée en comparant les résultats de ces formules à ceux

[12]

précédemment observés pour une gamme d’échantillons de matières grasses laitières pures . Il est

possible de détecter des matières grasses d’origines végétale et animale telles que la graisse de bœuf et

le saindoux.

La méthode s’applique au lait en vrac, ou aux produits laitiers dérivés, indépendamment de la variation

des pratiques d’alimentation courantes et des conditions d’élevage ou de lactation. Elle s’applique en

particulier aux matières grasses extraites de produits laitiers supposés contenir des matières grasses

laitières pures, présentant une composition non modifiée, comme le beurre, la crème, le lait et le lait

en poudre.

Un résultat faux positif pouvant être obtenu, la méthode n’est pas applicable à la matière grasse laitière

liée aux circonstances listées ci-après:
a) issue de lait de bovin autre que le lait de vache;
b) issue de vaches individuelles;

c) issue de vaches dont l’alimentation contenait une proportion particulièrement élevée d’huiles

végétales telles que l’huile de colza, l’huile de coton ou de palme, etc.;

d) issue de vaches souffrant d’une grave sous-alimentation (puissant déficit énergétique);

e) issue du colostrum;

f) soumise à un traitement technologique tel que l’élimination du cholestérol ou le fractionnement;

g) issue du lait écrémé, du lait battu (babeurre) ou du lactosérum;
h) issue de fromages présentant une lipolyse importante;

i) extraite selon les méthodes Gerber, Weibull–Berntrop ou Schmid–Bondzynski–Ratzlaff, ou isolée

au moyen de détergents [par exemple méthode BDI (Bureau of Dairy Industries)].

Avec les méthodes d’extraction spécifiées en i), d’importantes quantités de glycérides ou phospholipides

partiels peuvent passer dans la phase grasse.

NOTE 1 Dans la nature, l’acide butyrique (n-butanoïque) (C4) se trouve exclusivement dans les matières

grasses laitières et permet d’effectuer des estimations quantitatives de petites et moyennes quantités de

matières grasses laitières dans les graisses végétales et animales. En raison de la grande variation de C4, pour

lequel la fraction massique est comprise approximativement entre 3,1 % et 3,8 % de la matière grasse, des

informations qualitatives et quantitatives peuvent difficilement être fournies lorsque le rapport des matières

[11]

grasses étrangères aux matières grasses laitières pures atteint jusqu’à 20 % en fraction massique .

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ISO 17678:2019(F)
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NOTE 2 Dans la pratique, des résultats quantitatifs ne peuvent pas être déduits de la teneur en stérols des

matières grasses végétales, étant donné que celles-ci sont fonction des conditions de production et de traitement.

En outre, la détermination qualitative de matières grasses étrangères au moyen de stérols est ambiguë.

NOTE 3 En raison de pratiques d’alimentation spéciales telles que liées à c) et d), des résultats faux positifs ont

[15]

parfois été signalés pour le lait provenant de certaines régions d’Asie . En outre, l’alimentation à base d’herbe

uniquement, comme c’est le cas dans les régions montagneuses et en particulier dans les pâturages d’altitude,

peut parfois entraîner des résultats faux positifs, ce qui peut être justifié par une teneur en acide linoléique

[16][17]

conjugué (C18:2 c9t11) ≥ 1,3 % de la fraction massique . Néanmoins, les résultats conformes aux critères de

pureté des matières grasses laitières spécifiés dans la présente norme sont acceptés, même si les échantillons ont

sans aucun doute été produits dans les conditions indiquées dans cette note, y compris celles décrites en h).

NOTE 4 Dans les cas où il est suspecté qu’un résultat positif soit causé par des circonstances liées à c) ou

d), une autre méthode analytique, comme l’analyse des acides gras ou des stérols, peut être appliquée pour

confirmer le résultat. En raison de limites similaires ou accrues (par exemple, comme décrit dans NOTE 1 et

NOTE 2), un résultat négatif obtenu par une autre méthode n’est en revanche pas approprié pour confirmer la

pureté des matières grasses laitières.
2 Références normatives

Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur

contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique.

Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s'applique (y compris les

éventuels amendements).

ISO 1211 | FIL 1, Lait — Détermination de la teneur en matière grasse — Méthode gravimétrique (Méthode

de référence)

ISO 1740 | FIL 6, Produits à matière grasse laitière et beurre — Détermination de l'acidité de la matière

grasse (Méthode de référence)

ISO 1736 | FIL 9, Lait sec et produits à base de lait sec — Détermination de la teneur en matière grasse —

Méthode gravimétrique (Méthode de référence)

ISO 2450 | FIL 16, Crème — Détermination de la teneur en matière grasse — Méthode gravimétrique

(Méthode de référence)

ISO 3696, Eau pour laboratoire à usage analytique — Spécification et méthodes d'essai

ISO 7328 | FIL 116, Glaces de consommation et préparations pour glaces à base de lait — Détermination de

la teneur en matière grasse — Méthode gravimétrique (Méthode de référence)

ISO 14156 | FIL 172, Lait et produits laitiers — Méthodes d'extraction des lipides et des composés

liposolubles
3 Termes et définitions

Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.

L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en

normalisation, consultables aux adresses suivantes:

— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https: //www .iso .org/obp

— IEC Electropedia: disponible à l’adresse http: //www .electropedia .org/
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ISO 17678:2019(F)
FIL 202:2019(F)
3.1
pureté des matières grasses laitières

absence de graisses végétales et animales déterminée selon le mode opératoire spécifié dans le présent

document

Note 1 à l'article: La pureté est déterminée à l’aide de valeurs de S qui sont calculées à partir de la composition

des triglycérides. Les fractions massiques des triglycérides sont exprimées en pourcentages.

4 Principe

La matière grasse extraite du lait ou des produits laitiers est analysée par chromatographie en phase

gazeuse (CG) sur une colonne remplie ou une colonne capillaire courte pour doser les triglycérides

(TG), lesquels se distinguent en fonction de leur nombre total d’atomes de carbone. Les valeurs de S

sont calculées en insérant la fraction massique, exprimée en pourcentage, correspondant au poids des

molécules de matières grasses de différentes tailles (C24 à C54 en utilisant uniquement les nombres de

C pairs) dans des formules de TG appropriées. Si les valeurs de S dépassent les limites établies pour de

la matière grasse laitière pure, la présence de matières grasses étrangères est avérée.

NOTE 1 L’aptitude à l’emploi des colonnes remplie et capillaire a déjà été démontrée, tout comme les conditions

[8][9][10]
de leur équivalence .
NOTE 2 La valeur de S est la somme des fractions massiques pondérées des TG.
5 Réactifs

Au cours de l’analyse, sauf indication contraire, utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique

reconnue.
5.1 Eau, conforme aux exigences de l’ISO 3696, qualité 2.

5.2 Gaz vecteur, azote ou, en variante, hélium ou hydrogène, tous d’une pureté d’au moins 99,995 %

en fraction volumique.
5.3 Étalons de matière grasse, comme décrit en 5.3.1 et 5.3.2.

5.3.1 Étalons de triglycérides, saturés, d’une pureté d’au moins 99 % en fraction massique, pour

l’étalonnage de l’étalon de matière grasse laitière décrit en 8.3.3 (des produits adaptés sont disponibles

dans le commerce).

5.3.2 Étalon de cholestérol, d’une pureté d’au moins 99 % en fraction massique, pour l’étalonnage de

l’étalon de matière grasse laitière décrit en 8.3.3.
5.4 Méthanol, ayant une teneur maximale en eau de 0,05 % en fraction massique.
5.5 n-Hexane.
5.6 n-Heptane.

5.7 Autres gaz, hydrogène, d’une pureté d’au moins 99,995 % en fraction volumique, exempt

d’impuretés organiques (C H < 1 µl/l); air synthétique, exempt d’impuretés organiques (C H < 1 µl/l).

n m n m
5.8 Sulfate de sodium anhydre.
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ISO 17678:2019(F)
FIL 202:2019(F)
6 Appareillage
Matériel courant de laboratoire et, en particulier, ce qui suit.

6.1 Chromatographe en phase gazeuse à haute température, adapté pour une utilisation à des

températures de 400 °C au minimum et équipé d’un détecteur à ionisation de flamme (DIF). En cas de CG

sur colonne capillaire, il est essentiel d’utiliser un système d’injection sur colonne (à dépôt direct) ou un

injecteur à température programmée (PTV), tandis qu’un injecteur à division de flux ne convient pas.

Les septums utilisés dans l’injecteur doivent résister à des températures élevées et présenter un très

faible degré «d’écoulement». Utiliser uniquement des joints de graphite pour le raccordement de la

colonne ainsi que pour l’insert dans le détecteur et/ou l’injecteur (le cas échéant).

6.2 Colonne chromatographique «remplie», en verre ayant un diamètre intérieur de 2 mm et une

longueur de 500 mm, remplie d’une phase stationnaire OV-1 3 % sur 125 µm à 150 µm (100 mesh à

120 mesh) Gas ChromoQ .

La préparation, la silanisation, le garnissage et le conditionnement de la colonne remplie sont décrits

dans l’Annexe A.
En variante, une colonne capillaire (6.3) peut être utilisée.

6.3 Colonne chromatographique «capillaire», courte, par exemple de 5 m de long, avec une phase

stationnaire non polaire pouvant résister à des températures de l’ordre de 400 °C ou plus .

Conditionner la colonne en effectuant 20 analyses d’une solution de matières grasses laitières (voir 8.2)

dans un délai n’excédant pas plus de deux jours, avec les réglages indiqués en 8.3.4.3. Après cela, les

facteurs de réponse (voir 8.3.3) doivent se situer autour de 1 sans dépasser 1,250 0.

En raison du chevauchement variable entre le C24 et le cholestérol, un facteur de réponse supérieur

peut être admis pour le C24.

Il est permis d’utiliser des colonnes de dimensions différentes et avec une phase non polaire différente

résistant à des températures élevées à condition qu’elles présentent des performances compatibles avec

le présent document. Toutefois, la longueur de la colonne est restreinte par la limitation indispensable

de la résolution comme illustré à la Figure 1. Voir également 8.3.4.3.

6.4 Colonne Extrelut , d’une capacité de 1 ml à 3 ml, remplie de gel de silice, requise uniquement

pour l’extraction de la matière grasse laitière conformément à 8.1.4.

6.5 Joints de graphite, capables de résister à des températures de 400 °C au minimum; à utiliser pour

le raccordement de la colonne CG ainsi que pour l’insert dans le détecteur et/ou l’injecteur.

6.6 Bain d’eau, pouvant être maintenu à une température de (50 ± 2) °C.
6.7 Étuve, capable de fonctionner à (50 ± 2) °C et à 100 ± 2) °C.
6.8 Micropipette.
[2]
6.9 Pipette graduée, d’une capacité de 5 ml, conforme à l’ISO 835 , classe A.

1) Exemple de produit approprié disponible sur le marché. Cette information est donnée à l’intention des

utilisateurs du présent document et ne signifie nullement que l’ISO ou la FIL approuvent ou recommandent l’emploi

exclusif du produit ainsi désigné.

2) CP-Ultimetal SimDist (5 m, 0,53 mm, 0,17 µm) est un exemple de produit approprié disponible sur le marché.

Cette information est donnée à l’intention des utilisateurs du présent document et ne signifie nullement que l’ISO ou

la FIL approuvent ou recommandent l’emploi exclusif du produit ainsi désigné.
4 © ISO et FIL 2019 – Tous droits réservés
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ISO 17678:2019(F)
FIL 202:2019(F)
6.10 Fiole à fond rond, d’une capacité de 50 ml.
6.11 Fiole Erlenmeyer, d’une capacité nominale de 250 ml.
6.12 Entonnoir.
6.13 Papier-filtre à micropores.
6.14 Évaporateur rotatif.

6.15 Ampoules, d’une capacité nominale de 1 ml, munies d’un capuchon serti ou vissé en aluminium

revêtu de polytétrafluoroéthylène.

6.16 Seringue à injection, le piston de la seringue ne devant pas toucher le bout de l’aiguille (CG sur

colonne remplie).

NOTE Ces seringues permettent d’obtenir une meilleure répétabilité des résultats.

6.17 Balance analytique, capable de peser à 1 mg près, avec une lisibilité de 0,1 mg.

7 Échantillonnage

L’échantillonnage ne fait pas partie de la méthode spécifiée dans le présent document. Une méthode

[1]
d’échantillonnage recommandée est donnée dans l’ISO 707 | FIL 50 .

Il convient qu’un échantillon représentatif soit transmis au laboratoire. Il convient qu’il ne soit pas

endommagé ou modifié pendant le transport ou le stockage.
8 Mode opératoire
8.1 Préparation des échantillons pour essai
8.1.1 Généralités

Pour la préparation des échantillons pour essai, utiliser l’une des méthodes d’isolement ou d’extraction

des matières grasses laitières spécifiées en 8.1.2 à 8.1.5.

8.1.2 Séparation des matières grasses laitières du beurre ou de l’huile de beurre

Faire fondre de 50 g à 100 g de l’échantillon pour essai dans le bain d’eau (6.6) ou l’étuve (6.7) à 50 °C.

Placer de 0,5 g à 1,0 g de sulfate de sodium (5.8) sur un papier-filtre plié (6.13). Préchauffer, dans

l’armoire de dessiccation (6.7) réglée à 50 °C, une fiole Erlenmeyer de 250 ml (6.11) et un entonnoir

(6.12) dans lequel est inséré le papier-filtre contenant le sulfate de sodium.

Lorsque la quantité d’échantillon pour essai disponible est limitée, utiliser un échantillon pour essai

plus petit et adapter le mode opératoire en conséquence.
Noter toutefois que
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