ISO 11023:1999

Liquorice extracts (Glycyrrhiza glabra L.) — Determination of glycyrrhizic acid content — Method using high-performance liquid chromatography

Extraits de réglisse (Glycyrrhiza glabra L.) — Détermination de la teneur en acide glycyrrhizique — Méthode par chromatographie liquide à haute performance

La présente Norme internationale décrit une méthode de détermination de la teneur en acide glycyrrhizique des extraits de réglisse (Glycyrrhiza glabra L.) par chromatographie liquide à haute performance.La méthode n'est pas applicable aux racines de réglisse en l'état ou broyées.

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 20-Oct-1999
• ICS: 71.100.60 - Essential oils
• Technical Committee: ISO/TC 54 - Essential oils
• Drafting Committee: ISO/TC 54 - Essential oils
• Current Stage: 9093 - International Standard confirmed
• Completion Date: 15-Sep-2020

Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 11023
First edition
1999-10-15
Liquorice extracts (Glycyrrhiza glabra L.) —
Determination of glycyrrhizic acid
content — Method using high-performance
liquid chromatography
Extraits de réglisse (Glycyrrhiza glabra L.) — Détermination de la teneur en
acide glycyrrhizique — Méthode par chromatographie liquide à haute
performance
A
Reference number
ISO 11023:1999(E)

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ISO 11023:1999(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies (ISO
member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO technical
committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and non-governmental, in
liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical
Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 3.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting.
Publication as an International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
International Standard ISO 11023 was prepared by Technical Committee ISO/TC 54, Essential oils.
Annex A of this International Standard is for information only.
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International Organization for Standardization
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Printed in Switzerland
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INTERNATIONAL STANDARD  © ISO ISO 11023:1999(E)
Liquorice extracts (Glycyrrhiza glabra L.) — Determination of
glycyrrhizic acid content — Method using high-performance liquid
chromatography
1 Scope
This International Standard describes a method for determining the glycyrrhizic acid content of liquorice extract
(Glycyrrhiza glabra L.) by high-performance liquid chromatography.
The method is not applicable to raw or ground liquorice root.
2 Principle
The sample and standard solutions are prepared, then the glycyrrhizic acid content is determined by high-
performance liquid chromatography using the method described in this International Standard.
3 Reagents
Use only reagents of recognized analytical grade, unless otherwise specified.
3.1  Water, HPLC grade.
3.2  Reference substance, monoammoniacal glycyrrhizate (GMA).
If a reference material of guaranteed purity is not available, it is recommended that the users of this International
Standard come to an agreement between the interested parties on the purity of the reference substance.
3.3  Acetonitrile, HPLC grade.
3.4  Acetic acid, analytical grade.
3.5  Elution solvent (mobile phase), composed of the following:
 38 volumes acetonitrile (3.3),
 61 volumes water (3.1),
 1 volume acetic acid (3.4).
Using the measuring cylinder (4.3), prepare the elution solvent as follows.
Mix 1 volume of acetic acid with 61 volumes of water, then filter the mixture through a filter for aqueous solvents
(4.5).
Filter 38 volumes of acetonitrile through a filter for organic solvents (4.4).
Add the filtered acetonitrile to the filtered water/acetic acid mixture. Mix, then degas the elution solvent in the ultra-
sound cell (4.8.3) or any suitable system.
Do not keep this solvent more than 48 h at ambient temperature.
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ISO 11023:1999(E)
4 Apparatus
Usual laboratory apparatus and, in particular, the following.
4.1  Pipettes, of capacities 5 ml and 10 ml.
4.2  Volumetric flasks, of capacities 50 ml and 100 ml.
4.3  Measuring cylinder.
4.4  Filter for organic solvents, 0,5 mm pore size.
4.5  Filter for aqueous solvents, 0,45 mm pore size.
4.6  Oven, capable of being maintained at 105 °C + 2 °C.
4.7  Analytical balance, capable of weighing to the nearest 0,000 1 g.
4.8  Separation system, as follows.
4.8.1  Chromatograph, high-performance liquid phase.
4.8.2  Pumping system, for obtaining and maintaining a constant or programmed high pressure flow.
4.8.3  Solvent degassing system, such as an ultra-sound cell or any suitable system.
4.8.4  Ultraviolet detection system, adjustable to a wavelength of 254 nm.
4.9  Recorder or integrator, of compatible performance with all the apparatus.
4.10  Column, as follows:
 material: stainless steel or glass;
 length: 10 cm to 25 cm;
 internal diameter: 0,4 cm to 0,5 cm;
 stationary phase: bonded phase silica with octadecyl C18 derived functional group, maximum particle size
5 mm;
 column efficiency: the number recommended of theoretical plates is 7 000 to 10 000.
4.11  Pre-column, as follows:
 material: stainless steel;
 length: 10 mm or 25 mm;
 internal diameter: 2 mm or 4 mm;
 stationary phase: bonded phase silica with octadecyl C18 derived functional group
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5 Procedure
5.1 Preparation of standard solutions
5.1.1 Preparation of the 0,5 mg/ml solution
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In a 100 ml volumetric flask (4.2) weigh, to the nearest 10 g, 50 mg of monoammoniacal glycyrrhizate (3.2).
Add the elution solvent (3.5) and dissolve the monoammoniacal glycyrrhizate
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 11023
Première édition
1999-10-15
Extraits de réglisse (Glycyrrhiza
glabra L.) — Détermination de la teneur
en acide glycyrrhizique — Méthode par
chromatographie liquide à haute
performance
Liquorice extracts (Glycyrrhiza glabra L.) — Determination of glycyrrhizic
acid content — Method using high-performance liquid chromatography
A
Numéro de référence
ISO 11023:1999(F)

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ISO 11023:1999(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales, en
liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec la Commission
électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI, Partie 3.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour
vote. Leur publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités
membres votants.
La Norme internationale ISO 11023 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 54, Huiles essentielles.
L'annexe A de la présente Norme internationale est donnée uniquement à titre d’information.
©  ISO 1999
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forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l'accord écrit de l'éditeur.
Organisation internationale de normalisation
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Imprimé en Suisse
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NORME INTERNATIONALE  © ISO ISO 11023:1999(F)
Extraits de réglisse (Glycyrrhiza glabra L.) — Détermination de la
teneur en acide glycyrrhizique — Méthode par chromatographie
liquide à haute performance
1 Domaine d’application
La présente Norme internationale décrit une méthode de détermination de la teneur en acide glycyrrhizique des
extraits de réglisse (Glycyrrhiza glabra L.) par chromatographie liquide à haute performance.
La méthode n'est pas applicable aux racines de réglisse en l'état ou broyées.
2 Principe
Préparation de l'échantillon et des solutions étalons, puis détermination de la teneur en acide glycyrrhizique par
chromatographie liquide à haute performance, selon le mode opératoire décrit dans la présente Norme
internationale.
3 Réactifs
Sauf indication différente, utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique reconnue.
3.1  Eau, de pureté CLHP.
, glycyrrhizate monoammoniacal (GMA).
3.2  Substance de référence
Si une substance de référence à pureté garantie n'est pas disponible, il est recommandé aux utilisateurs de la
présente Norme internationale de trouver un accord entre les parties intéressées sur l'étalon à utiliser.
3.3  Acétonitrile, de pureté CLHP.
3.4  Acide acétique, de pureté analytique.
3.5  Solvant d'élution (phase mobile), composé comme suit:
 38 volumes d'acétonitrile (3.3)
 61 volumes d'eau (3.1)
 1 volume d'acide acétique (3.4)
À l'aide de l'éprouvette graduée (4.3) préparer le solvant d'élution comme suit.
Mélanger 1 volume d'acide acétique à 61 volumes d'eau, puis filtrer le mélange à travers un filtre pour solvants
aqueux (4.5).
Filtrer les 38 volumes d'acétonitrile à travers un filtre pour solvants organiques (4.4).
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ISO 11023:1999(F)
Ajouter l'acétonitrile filtré au mélange eau/acide acétique filtré. Mélanger, puis dégazer le solvant d'élution dans une
cuve à ultrasons (4.8.3) ou autre système approprié.
Ne pas conserver ce solvant plus de 48 h à la température ambiante.
4 Appareillage
Matériel courant de laboratoire et, en particulier, ce qui suit.
4.1  Pipettes, de 5 ml et 10 ml de capacité.
4.2  Fioles jaugées, de 50 ml et 100 ml de capacité.
4.3  Éprouvettes graduées.
4.4  Filtre pour solvants organiques, de 0,5 mm d'ouverture de pores.
4.5  Filtre pour solvants aqueux, de 0,45 mm d'ouverture de pores.
4.6  Étuve, capable d'être maintenue à une température de 105 °C – 2 °C.
4.7  Balance analytique, précise à 0,000 1 g près.
, composé des éléments suivants:
4.8  Système de séparation
4.8.1  Chromatographe, pour chromatographie en phase liquide à haute performance.
4.8.2  Système de pompage, permettant l'obtention et le maintien d'un débit à haute pression constant ou
programmé.
4.8.3  Système de dégazage des solvants, tel qu'une cuve à ultrasons ou autre système approprié.
4.8.4  Système de détection ultraviolette, pouvant être réglé à une longueur d'onde de 254 nm.
4.9  Enregistreur ou intégrateur, dont les performances sont compatibles avec l'ensemble de l'appareillage.
4.10  Colonne, aux caractéristiques suivantes:
 matériau: acier inoxydable ou verre;
 longueur: 10 cm à 25 cm;
 diamètre intérieur: 0,4 cm à 0,5 cm;
 phase stationnaire: silice en phase greffée avec groupe fonctionnel dérivé octadécyle C18, de granulométrie
maximale 5 mm.
 efficacité de la colonne: le nombre de plateaux théoriques recommandé est de 7 000 à 10 000.
4.11  Précolonne, aux caractéristiques suivantes:
 matériau: acier inoxydable;
 longueur: 10 mm ou 25 mm;
 diamètre intérieur: 2 mm ou 4 mm;
 phase stationnaire: silice en phase greffée avec groupe fonctionnel dérivé octadécyle C18.
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© ISO
ISO 11023:1999(F)
5 Mode opératoire
5.1 Préparation des solutions étalons
5.1.1 Préparation de la solution à 0,5 mg/ml
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Peser, à 10 g près, 50 mg de glycyrrhizate monoammoniacal (3.2), dans une fiole jaugée de 100 ml (4.2).
Ajouter le solvant d'élution (3.5) e
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