ISO 6647-1:2015
(Main)Rice — Determination of amylose content — Part 1: Reference method
Rice — Determination of amylose content — Part 1: Reference method
ISO 6647-1:2015 specifies a reference method for determining calibration values for standards that will be used to make a standard curve for the quantification of amylose content in milled, non-parboiled rice in the range of amylose content from 0 % to 30 %.
Riz — Détermination de la teneur en amylose — Partie 1: Méthode de référence
L'ISO 6647-1:2015 spécifie une méthode de référence pour la détermination de valeurs de référence des étalons utilisés afin de tracer une courbe d'étalonnage, en vue de déterminer la teneur en amylose du riz usiné et non étuvé, dans une plage allant de 0 % à 30 %.
General Information
Relations
Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 6647-1
Second edition
2015-05-15
Rice — Determination of amylose
content —
Part 1:
Reference method
Riz — Détermination de la teneur en amylose —
Partie 1: Méthode de référence
Reference number
ISO 6647-1:2015(E)
©
ISO 2015
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ISO 6647-1:2015(E)
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Published in Switzerland
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ISO 6647-1:2015(E)
Contents Page
Foreword .iv
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 1
5 Reagents . 1
6 Apparatus . 2
7 Sampling . 2
8 Procedure. 3
8.1 Preparation of test samples . 3
8.2 Test portion and preparation of the solutions . 3
8.3 Debranching to obtain linear chains of starch . 3
8.4 Blank test . 3
8.5 Operating conditions of SEC . 3
8.6 Calculation of amylose values . 3
9 Expression of results . 4
10 Precision . 4
10.1 Interlaboratory test. 4
10.2 Repeatability . 4
10.3 Reproducibility . 4
11 Test report . 4
Annex A (informative) Results of an interlaboratory test . 5
Bibliography . 7
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ISO 6647-1:2015(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of any
patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or on
the ISO list of patent declarations received (see www.iso.org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation on the meaning of ISO specific terms and expressions related to conformity
assessment, as well as information about ISO’s adherence to the WTO principles in the Technical Barriers
to Trade (TBT) see the following URL: Foreword - Supplementary information
The committee responsible for this document is ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 4,
Cereals and pulses.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 6647-1:2007), of which it constitutes a
minor revision.
ISO 6647 consists of the following parts, under the general title Rice — Determination of amylose content:
— Part 1: Reference method
— Part 2: Routine methods
iv © ISO 2015 – All rights reserved
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 6647-1:2015(E)
Rice — Determination of amylose content —
Part 1:
Reference method
1 Scope
This part of ISO 6647 specifies a reference method for determining calibration values for standards that
will be used to make a standard curve for the quantification of amylose content in milled, non-parboiled
rice in the range of amylose content from 0 % to 30 %.
2 Normative references
No normative references cited in this document.
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
amylose
molecules consisting of linear chains containing more than 200 linked glucose units
3.2
amylopectin
molecules consisting of branched chains ranging from 6 to 100 linked glucose units
3.3
waxy rice
waxy rice contains no chains of length consistent with being amylose
4 Principle
The linear chains of starch are separated on the basis of hydrodynamic volume and molecular weight by
[2]
size exclusion chromatograph. Flour is gelatinised in a solution of sodium hydroxide and the molecules
[1][2]
of starch in the solution are debranched with isoamylase, The linear chains are separated by size
exclusion chromatography (SEC), and the proportion of amylose chains is calculated by the area under
the amylose peak relative to the full detector response.
5 Reagents
All the reagents used shall be of recognized analytical quality and the water used shall be distilled, or
demineralised water, or water of equivalent purity.
5.1 Ethanol, 95 % (v/v).
5.2 Sodium hydroxide, 0,25 mol/l solution.
5.3 Glacial acetic acid.
© ISO 2015 – All rights reserved 1
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ISO 6647-1:2015(E)
5.4 Sodium acetate buffer, 0,2 mol/l solution, brought to pH4 with glacial acetic acid. Mix 10 ml buffer
with additional 360 µl glacial acetic acid.
5.5 lsoamylase.
1)
5.6 Ion exchange mixed bed resin, for example, AG 501-X8 and Bio-Rex MSZ 501(D) .
5.7 Ammonium acetate eluant, 0,05 mol/l solution, pH 4,75.
6 Apparatus
The usual laboratory apparatus and, in particular, the following:
6.1 Stirrer and stirring magnets.
6.2 Hot plate.
6.3 Microcentrifuge.
6.4 Microcentrifuge tubes, 2,0 ml capacity.
6.5 Scintillation vials, 20 ml capacity.
6.6 Vortex mixer.
6.7 Water baths, capable of holding 50 °C and of reaching boiling point.
6.8 Analytical balance, capable of weighing to the nearest 0,000 1 g.
6.9 Pipettes an
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 6647-1
Deuxième édition
2015-05-15
Riz — Détermination de la teneur en
amylose —
Partie 1:
Méthode de référence
Rice — Determination of amylose content —
Part 1: Reference method
Numéro de référence
ISO 6647-1:2015(F)
©
ISO 2015
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ISO 6647-1:2015(F)
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sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie, l’affichage sur
l’internet ou sur un Intranet, sans autorisation écrite préalable. Les demandes d’autorisation peuvent être adressées à l’ISO à
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Publié en Suisse
ii © ISO 2015 – Tous droits réservés
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ISO 6647-1:2015(F)
Sommaire Page
Avant-propos .iv
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 1
5 Réactifs . 1
6 Appareillage . 2
7 Échantillonnage . 3
8 Mode opératoire. 3
8.1 Préparation des échantillons pour essai . 3
8.2 Prise d’essai et préparation des solutions . 3
8.3 Déramification visant à obtenir des chaînes linéaires d’amidon . 3
8.4 Essai à blanc . 3
8.5 Conditions de fonctionnement du chromatographe par exclusion stérique . 3
8.6 Calcul de la teneur en amylose . 4
9 Expression des résultats. 4
10 Fidélité . 4
10.1 Essai interlaboratoires . 4
10.2 Répétabilité . 4
10.3 Reproductibilité . 5
11 Rapport d’essai . 5
Annexe A (informative) Résultats de l’essai interlaboratoires . 6
Bibliographie . 8
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ISO 6647-1:2015(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui concerne
la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www.
iso.org/directives).
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant les
références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de l’élaboration
du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de brevets reçues par
l’ISO (voir www.iso.org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données pour
information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un engagement.
Pour une explication de la signification des termes et expressions spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de
la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion de l’ISO aux principes de l’OMC concernant
les obstacles techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: Avant-propos — Informations
supplémentaires.
Le comité chargé de l’élaboration du présent document est l’ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité
SC 4, Céréales et légumineuses.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 6647-1:2007) dont elle constitue
une révision mineure.
L’ISO 6647 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Riz — Détermination de la
teneur en amylose:
— Partie 1: Méthode de référence
— Partie 2: Méthodes de routine
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NORME INTERNATIONALE ISO 6647-1:2015(F)
Riz — Détermination de la teneur en amylose —
Partie 1:
Méthode de référence
1 Domaine d’application
La présente partie de l’ISO 6647 spécifie une méthode de référence pour la détermination de valeurs de
référence des étalons utilisés afin de tracer une courbe d’étalonnage, en vue de déterminer la teneur en
amylose du riz usiné et non étuvé, dans une plage allant de 0 % à 30 %.
2 Références normatives
Aucune référence normative n’est citée dans ce document.
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
3.1
amylose
molécules constituées de chaînes linéaires, contenant plus de 200 unités de glucose reliées
3.2
amylopectine
molécules constituées de ramifications, contenant entre 6 et 100 unités de glucose reliées
3.3
riz gluant
riz gluant dont la longueur des chaînes présentes ne permet pas de considérer celles-ci comme
constituant de l’amylose
4 Principe
Les chaînes linéaires d’amidon sont séparées en fonction du volume hydrodynamique et de la masse
[2]
molaire, à l’aide d’un chromatographe par exclusion stérique. La farine est gélatinisée dans une solution
d’hydroxyde de sodium, puis les ramifications reliant les molécules d’amidon et l’isoamylose contenus
[1][2]
dans la solution sont rompues. Les chaînes linéaires sont ensuite rompues par chromatographie par
exclusion stérique et la proportion des chaînes d’amylose est calculée à partir de l’aire des pics d’amylose
issus de la réponse du détecteur.
5 Réactifs
Tous les réactifs utilisés doivent être de qualité analytique reconnue et l’eau utilisée doit être distillée,
déminéralisée ou de pureté équivalente.
5.1 Éthanol, d’une fraction volumique de 95 %.
5.2 Hydroxyde de sodium, solution à 0,25 mol/l.
© ISO 2015 – Tous droits réservés 1
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ISO 6647-1:2015(F)
5.3 Acide acétique glacial.
5.4 Solution tampon d’acétate de sodium, d’une concentration de 0,2 mol/l, amenée à pH4 en
utilisant de l’acide acétique glacial. Mélanger 10 ml de solution tampon avec 360 µl supplémentaires
d’acide acétique glacial.
5.5 lsoamylose.
1)
5.6 Lit mélangé de résines échangeuses d’ions, par exemple AG 501-X8 ou Bio-Rex MSZ 501(D) .
5.7 Éluant d’acétate d’ammonium, d’une concentration de 0,05 mol/l et ayant un pH de 4,75.
6 Appareillage
Matériel courant de laboratoire et, en particulier, ce qui suit.
6.1 Agitateur et agitateurs magnétiques.
6.2 Plaque chauffante.
6.3 Microcentrifugeuse.
6.4 Tubes pour microcentrifugeuse, d’une capacité de 2,0 ml.
6.5 Flacons à scintillation, d’une capacité de 20 ml.
6.6 Agitateur vortex.
6.7 Bains d’eau, permettant de maintenir une température de 50 °C et d’atteindre le point d’ébullition.
6.8 Balance analytique, pouvant peser à 0,000 1 g près.
6.9 Pipettes et micropipettes, ayant une contenance de 0,2 ml, 1 ml, 5 ml et 10 ml.
6.10 Seringue, d’une contenance de 25 µl.
6.11 Chromatographe par exclusion stérique équipé d’un détecteur d’indice de réfraction.
6.12 Colonne pour chromatographe par exclusion stérique, adaptée à la séparation des chaines
ayant un poids moléculaire inférieur à 1 620 000 unités.
6.13 Broyeur, permettant de réduire le riz usiné non cuit en farine qui passera à travers un tamis ayant
une ouverture de maille de 150 µm à 180 µm (80 à 100 Mesh). Il est recommandé d’utiliser un filtre
cyclone avec un tamis de 0,5 mm.
6.14 Tamis, ayant une ouverture de maille de 150 µm à 180 µm (80 à 100 Mesh).
1) AG 501-X8 et Bio-Rex MSZ 501 (D) sont des exemples de produits appropriés disponibles sur le marché.
Cette information est donnée à l’intention des utilisateurs du présent document et ne signifie nullement que l’ISO
approuve ou recommande l’emploi exclusif de ces produits ainsi
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.